The interference of ozone gas in kinects and mitochondrial potential of equine sperm submitted on cryopreservation

The objective of this study was to evaluate the effects of the addition of different concentrations of ozone to quarter horse semen submitted to cryopreservation. Six ejaculates from four stallions were collected and were divided in four experimental groups: a control group (BotuCRIO® extender) and three other groups with BotuCRIO® ozonized at concentrations of 6, 8 and 12 μg of O3/mL. The semen samples were diluted (200 x 106 spermatozoa/mL), filled in straws and frozen. After thawing (37 ºC, 30s), the samples were evaluated at 0, 30 and 60 minutes of incubation regarding sperm kinetics by a computer-assisted sperm analysis (CASA), and plasma membrane integrity (PMI), acrosome integrity (ACi) and mitochondrial membrane potential (MMP) by fluorescent probes. There was a reduction in the kinetic parameters total motility (TM), progressive motility (PM), curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL) and average path velocity (VAP) in all groups during the thermoresistance test (TT), a pattern also found in PMI and MMP analyses (p<0.05). There was no difference (p>0.05) between the control and treatment (6, 8, and 12 μg of O3/mL) groups, in any of the evaluated times for the kinetic parameters TM, linearity (LIN), straightness (STR), wobble index (WOB), amplitude of lateral head displacement (ALH) and beat cross frequency (BCF). Regarding the VCL, VSL and VAP parameters, the group treated with 6 μg did not differ from the control or from 8 μg, but was higher than 12 μg at 30 and 60 minutes. ACi and PMI did not differ between groups (p>0.05), but PMI was lower in groups 8 μg and 12 μg compared to the control and 6 μg (p<0.05). It was concluded that the addition of ozone does not present beneficial effects for cryopreservation of equine semen at the concentrations used and decreases important parameters of fertility.(AU)

The interference of ozone gas in kinects and mitochondrial potential of equine sperm submitted on cryopreservation

The objective of this study was to evaluate the effects of the addition of different concentrations of ozone to quarter horse semen submitted to cryopreservation. Six ejaculates from four stallions were collected and were divided in four experimental groups: a control group (BotuCRIO® extender) and three other groups with BotuCRIO® ozonized at concentrations of 6, 8 and 12 μg of O3/mL. The semen samples were diluted (200 x 106 spermatozoa/mL), filled in straws and frozen. After thawing (37 ºC, 30s), the samples were evaluated at 0, 30 and 60 minutes of incubation regarding sperm kinetics by a computer-assisted sperm analysis (CASA), and plasma membrane integrity (PMI), acrosome integrity (ACi) and mitochondrial membrane potential (MMP) by fluorescent probes. There was a reduction in the kinetic parameters total motility (TM), progressive motility (PM), curvilinear velocity (VCL), straight line velocity (VSL) and average path velocity (VAP) in all groups during the thermoresistance test (TT), a pattern also found in PMI and MMP analyses (p0.05) between the control and treatment (6, 8, and 12 μg of O3/mL) groups, in any of the evaluated times for the kinetic parameters TM, linearity (LIN), straightness (STR), wobble index (WOB), amplitude of lateral head displacement (ALH) and beat cross frequency (BCF). Regarding the VCL, VSL and VAP parameters, the group treated with 6 μg did not differ from the control or from 8 μg, but was higher than 12 μg at 30 and 60 minutes. ACi and PMI did not differ between groups (p>0.05), but PMI was lower in groups 8 μg and 12 μg compared to the control and 6 μg (p<0.05). It was concluded that the addition of ozone does not present beneficial effects for cryopreservation of equine semen at the concentrations used and decreases important parameters of fertility.

Estudo da eficácia da Aloe vera como crioprotetor vegetal na refrigeração de espermatozoides epididimários de bovinos / Study of Aloe vera efficacy as a plant origin extender in the cooling on bovine epididymal spermatozoa

Objetivou-se testar concentrações de Aloe vera para produção de diluidor vegetal na refrigeração espermática. Amostras obtidas de epidídimos bovinos foram recuperadas e homogeneizadas para formação do pool. Sete grupos experimentais foram formados: GC= Grupo TRIS-Gema; G5= AV5%+1,488g frutose; G10= AV10%+1,488g frutose; G20= AV20%+1,488g frutose; GF5= AV5%+2,976g frutose; GF10= AV10%+2,976g frutose; GF20= AV20%+2,976g frutose. Os grupos foram submetidos às avaliações de quantificação de açúcares redutores; reologia; potencial hidrogeniônico (pH) a 5 °C e 37 ºC; motilidade subjetiva, integridade e funcionalidade da membrana plasmática nos períodos T0 (momento diluição) e T2 (ao atingir 5 ºC); crescimento microbiológico após 48h e 72h de refrigeração. Os G20 e GF20 apresentaram maior (p0,05) na integridade e funcionalidade da membrana plasmática entre grupos e tempo de avaliação. No crescimento microbiológico, após 72h, o G20 apresentou efeito antimicrobiano. Conclui-se que concentrações de extrato de Aloe vera interferem negativamente na motilidade de espermatozoides epididimários bovino, porém preservam a integridade e funcionalidade da membrana plasmática e apresentam efeito antimicrobiano. Estudos para determinação da viscosidade ideal do extrato e aprimoramento da confecção deste possível diluidor vegetal devem ser encorajados.(AU)

The current study aimed to test concentrations of Aloe vera for production of plant origin extender to sperm cooling. Samples obtained from bovine epididyms were recovered and homogenized for pool formation. Seven groups were performed: GC= TRIS-egg yolk Group; G5= AV5%+1.488g fructose; G10= AV10%+1.488g fructose; G20= AV20%+1.488g fructose; GF5= AV5%+2.976g fructose; GF10= AV10%+2.976g fructose; GF20= AV20%+2.976g fructose. The groups they were submitted to the quantification of sugar reduction; rheology; hydrogenation potential (pH) at 5 °C and 37 °C; subjective motility, integrity and functionality of the plasma membrane at T0 (dilution moment) and T2 (reaching 5 ºC) periods; microbiological growth after 48h and 72h by refrigeration. The G20 and GF20 presented higher (p0.05) were observed in the integrity and functionality of the plasma membrane among groups and times of evaluation. In the microbiological growth, after 72h, the G20 presented antimicrobial effect. Therefore, concentrations of Aloe vera extract negatively interfere with bovine epididymal sperm motility, but preserve integrity and functionality of spermatozoa plasma membrane and present antimicrobial effect. Studies to determine the ideal viscosity of the extract and improvement of the preparation of this possible plant origin extender should be encouraged.(AU)

Estudo da eficácia da Aloe vera como crioprotetor vegetal na refrigeração de espermatozoides epididimários de bovinos / Study of Aloe vera efficacy as a plant origin extender in the cooling on bovine epididymal spermatozoa

Objetivou-se testar concentrações de Aloe vera para produção de diluidor vegetal na refrigeração espermática. Amostras obtidas de epidídimos bovinos foram recuperadas e homogeneizadas para formação do pool. Sete grupos experimentais foram formados: GC= Grupo TRIS-Gema; G5= AV5%+1,488g frutose; G10= AV10%+1,488g frutose; G20= AV20%+1,488g frutose; GF5= AV5%+2,976g frutose; GF10= AV10%+2,976g frutose; GF20= AV20%+2,976g frutose. Os grupos foram submetidos às avaliações de quantificação de açúcares redutores; reologia; potencial hidrogeniônico (pH) a 5 °C e 37 ºC; motilidade subjetiva, integridade e funcionalidade da membrana plasmática nos períodos T0 (momento diluição) e T2 (ao atingir 5 ºC); crescimento microbiológico após 48h e 72h de refrigeração. Os G20 e GF20 apresentaram maior (p0,05) na integridade e funcionalidade da membrana plasmática entre grupos e tempo de avaliação. No crescimento microbiológico, após 72h, o G20 apresentou efeito antimicrobiano. Conclui-se que concentrações de extrato de Aloe vera interferem negativamente na motilidade de espermatozoides epididimários bovino, porém preservam a integridade e funcionalidade da membrana plasmática e apresentam efeito antimicrobiano. Estudos para determinação da viscosidade ideal do extrato e aprimoramento da confecção deste possível diluidor vegetal devem ser encorajados.

The current study aimed to test concentrations of Aloe vera for production of plant origin extender to sperm cooling. Samples obtained from bovine epididyms were recovered and homogenized for pool formation. Seven groups were performed: GC= TRIS-egg yolk Group; G5= AV5%+1.488g fructose; G10= AV10%+1.488g fructose; G20= AV20%+1.488g fructose; GF5= AV5%+2.976g fructose; GF10= AV10%+2.976g fructose; GF20= AV20%+2.976g fructose. The groups they were submitted to the quantification of sugar reduction; rheology; hydrogenation potential (pH) at 5 °C and 37 °C; subjective motility, integrity and functionality of the plasma membrane at T0 (dilution moment) and T2 (reaching 5 ºC) periods; microbiological growth after 48h and 72h by refrigeration. The G20 and GF20 presented higher (p0.05) were observed in the integrity and functionality of the plasma membrane among groups and times of evaluation. In the microbiological growth, after 72h, the G20 presented antimicrobial effect. Therefore, concentrations of Aloe vera extract negatively interfere with bovine epididymal sperm motility, but preserve integrity and functionality of spermatozoa plasma membrane and present antimicrobial effect. Studies to determine the ideal viscosity of the extract and improvement of the preparation of this possible plant origin extender should be encouraged.

Concentration of soybean lecithin affects short-term storage success of goat semen related with seminal plasma removal

The objective of this study was to investigate the need of seminal plasma removal for short-term cooling of buck semen in soybean lecithin (SL) based extender. Each pool was divided equally, and one half was subjected to centrifugation to remove seminal plasma (SP-), while the other half remained with seminal plasma (SP+). Then, both SP+ and SP- samples were diluted in two SL extenders (extender A = 1% SL; extender B = 2% SL), cooled to 5ºC and stored for 48 hours. The sperm kinetics, evaluated by CASA, and plasma membrane integrity (PMI), acrosomal integrity (ACI) and high mitochondrial membrane potential (HMMP), evaluated by epifluorescence microscopy, were determined within five minutes after reaching 5°C (T0), as well as after 24 (T24) and 48 (T48) hours of storage. Interactions (seminal plasma vs. extender vs. time;) were observed for all variables assessed. Total and progressive motility and other variables of sperm kinetics decreased after 24 hours of cooling in the SP+ group, and after 48 hours of storage, these same variables were lower in SP+/B compared to SP-/B groups. Furthermore, SP+ reduced PMI (extender B, T48), HMMP (A and B extenders, T48) and ACI (extender A, T0) compared to SP- samples. The interactions between seminal plasma and soybean lecithin phospholipids seemed to occur in a time-dependent manner. It was concluded that the removal of seminal plasma improves the quality of goat semen that was cooled in a soybean lecithin-based extender, especially when using 2% soybean lecithin.(AU)

Concentration of soybean lecithin affects short-term storage success of goat semen related with seminal plasma removal

The objective of this study was to investigate the need of seminal plasma removal for short-term cooling of buck semen in soybean lecithin (SL) based extender. Each pool was divided equally, and one half was subjected to centrifugation to remove seminal plasma (SP-), while the other half remained with seminal plasma (SP+). Then, both SP+ and SP- samples were diluted in two SL extenders (extender A = 1% SL; extender B = 2% SL), cooled to 5ºC and stored for 48 hours. The sperm kinetics, evaluated by CASA, and plasma membrane integrity (PMI), acrosomal integrity (ACI) and high mitochondrial membrane potential (HMMP), evaluated by epifluorescence microscopy, were determined within five minutes after reaching 5°C (T0), as well as after 24 (T24) and 48 (T48) hours of storage. Interactions (seminal plasma vs. extender vs. time;) were observed for all variables assessed. Total and progressive motility and other variables of sperm kinetics decreased after 24 hours of cooling in the SP+ group, and after 48 hours of storage, these same variables were lower in SP+/B compared to SP-/B groups. Furthermore, SP+ reduced PMI (extender B, T48), HMMP (A and B extenders, T48) and ACI (extender A, T0) compared to SP- samples. The interactions between seminal plasma and soybean lecithin phospholipids seemed to occur in a time-dependent manner. It was concluded that the removal of seminal plasma improves the quality of goat semen that was cooled in a soybean lecithin-based extender, especially when using 2% soybean lecithin.

Agalaxia contagiosa. Um novo problema para caprinos e ovinos do Brasil / Contagious agalactia. A “new” problem to goats and sheep of the Brazil

The article presents a review of the main clinical and epidemiological characteristics and contagious agalactia control measures. The disease is characterized by agalactia, mastitis, polyarthritis and keratoconjunctivitis and has been diagnosed in small ruminants from States of Northeast and Southeast of the Brazil. The use of homeopathic medicine presents good clinical results although not fully resolve joint damage. Prevention of the disease can be achieved by induction of birth, followed by immediate separation of kids to new group formation, vaccination of young animals and animal input control in the herd.

O artigo apresenta uma revisão das características clínico-epidemiológicas e medidas de controle da agalaxia contagiosa. A doença se caracteriza por mastite seguida de agalaxia, poliartrite e ceratoconjuntivite e tem sido diagnosticada em rebanhos dos estados do Nordeste e Sudeste brasileiro. O uso de medicamento homeopático apresenta bons resultados clínicos, embora não resolvam totalmente as lesões articulares. A prevenção da enfermidade pode ser obtida pela indução do parto, seguida de separação imediata das crias com formação de novo plantel, vacinação dos animais jovens e controle de entrada de animais no plantel.

Seleção de reprodutores e matrizes como estratégia para melhoria do desempenho produtivo da caprino-ovinocultura

Small ruminant productive systems professionalization is related to many steps, such as the correct sire and dams selection. Considering the large impact of reproduction on profitability, technicians and farmers must be able to identify animals with desirable phenotypic, adaptive, and sanity characteristics suitable to the production system. The objective of this study is briefly describe some aspects to be considered during reproductive animal selection, as well as the common causes of reproductive losses in small ruminants, primarily in the Northeast of Brazil.

A profissionalização dos sistemas produtivos para pequenos ruminantes envolve diversas etapas, como a adequada seleção de reprodutores e matrizes. Considerando o grande impacto da reprodução sobre a rentabilidade da criação, técnicos e criadores devem ser capazes de identificar nos animais características fenotípicas, adaptativas e de sanidade adequadas para o tipo de criação. Objetiva-se com esse trabalho descrever sucintamente alguns aspectos a serem considerados na seleção de animais para reprodução, bem como as causas mais comuns de perdas reprodutivas em pequenos ruminantes, principalmente na região Nordeste do Brasil.

Agalaxia contagiosa. Um novo problema para caprinos e ovinos do Brasil / Contagious agalactia. A “new” problem to goats and sheep of the Brazil

The article presents a review of the main clinical and epidemiological characteristics and contagious agalactia control measures. The disease is characterized by agalactia, mastitis, polyarthritis and keratoconjunctivitis and has been diagnosed in small ruminants from States of Northeast and Southeast of the Brazil. The use of homeopathic medicine presents good clinical results although not fully resolve joint damage. Prevention of the disease can be achieved by induction of birth, followed by immediate separation of kids to new group formation, vaccination of young animals and animal input control in the herd.(AU)

O artigo apresenta uma revisão das características clínico-epidemiológicas e medidas de controle da agalaxia contagiosa. A doença se caracteriza por mastite seguida de agalaxia, poliartrite e ceratoconjuntivite e tem sido diagnosticada em rebanhos dos estados do Nordeste e Sudeste brasileiro. O uso de medicamento homeopático apresenta bons resultados clínicos, embora não resolvam totalmente as lesões articulares. A prevenção da enfermidade pode ser obtida pela indução do parto, seguida de separação imediata das crias com formação de novo plantel, vacinação dos animais jovens e controle de entrada de animais no plantel.(AU)

Seleção de reprodutores e matrizes como estratégia para melhoria do desempenho produtivo da caprino-ovinocultura

Small ruminant productive systems professionalization is related to many steps, such as the correct sire and dams selection. Considering the large impact of reproduction on profitability, technicians and farmers must be able to identify animals with desirable phenotypic, adaptive, and sanity characteristics suitable to the production system. The objective of this study is briefly describe some aspects to be considered during reproductive animal selection, as well as the common causes of reproductive losses in small ruminants, primarily in the Northeast of Brazil.(AU)

A profissionalização dos sistemas produtivos para pequenos ruminantes envolve diversas etapas, como a adequada seleção de reprodutores e matrizes. Considerando o grande impacto da reprodução sobre a rentabilidade da criação, técnicos e criadores devem ser capazes de identificar nos animais características fenotípicas, adaptativas e de sanidade adequadas para o tipo de criação. Objetiva-se com esse trabalho descrever sucintamente alguns aspectos a serem considerados na seleção de animais para reprodução, bem como as causas mais comuns de perdas reprodutivas em pequenos ruminantes, principalmente na região Nordeste do Brasil.(AU)

Effect on supplementation of three taurine's concentration in cryopreserved goat sperm / Efeito da suplementação de três concentrações de taurina ao sêmen caprino criopreservado

This study aimed to evaluate the effect of different concentrations of taurine to post-thaw goat semen. It was used goat cryopreserved semen Boer (n=3); two pallets of each breeding animal were thawed (37oC/30 s) and samples were homogenized. Four experimental groups were formed: CG= control group (semen with minimal essential medium); G1= semen + 5 mM taurine; G2= semen + 25 mM taurine; G3= semen + 50 mM taurine; assessed for sperm kinetics, plasma membrane and acrosome integrity, and mitochondrial function after the sample groups formation: at thawing moment (T0), one (T1) and three (T3) hours post-thaw. Six replicates were performed. Data were subjected to variance analysis (ANOVA, One way) and Tukeys test at 5% significance level. The CG decreased (p<0.05) values for total motility, progressive motility, rapid sperm and beat cross frequency after T3, which was not observed in the groups treated with taurine. No observed differences (p>0.05) to other kinematic parameters and integrity of sperm membranes among the treated groups and the CG. Thus, in conclusion, the taurine at concentrations 5, 25 and 50 mM preserves total motility, progressive motility, rapid sperm and beat cross frequency of goat sperm after three hours post-thaw.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações de taurina ao sêmen caprino pós-descongelação. Utilizou-se sêmen criopreservado de caprinos Boer (n=3), onde foram descongeladas duas palhetas de cada reprodutor (37 ºC/30 s) e as amostras foram homogeneizadas. Quatro grupos experimentais foram formados: GC= grupo controle (sêmen com adição de meio essencial mínimo); G1= sêmen + 5 mM de taurina; G2= sêmen + 25 mM de taurina; G3= sêmen + 50 mM de taurina; submetidos à avaliação de cinética espermática e integridade de membrana plasmática, acrossoma e função mitocondrial nos momentos após formação dos grupos amostrais (T0), uma (T1) e três (T3) horas pós-descongelação. Foram realizadas seis repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA, One way) e teste de Tukey, com nível de significância de 5%. O GC apresentou redução (p<0,05) para os valores de motilidade total, motilidade progressiva, percentual de espermatozoides rápidos e frequência de batimento cruzado no T3, resultado não observado para os grupos tratados com taurina. Não foram observadas diferenças (p>0,05) para os demais parâmetros cinéticos e de integridade das membranas espermáticas entre os grupos tratados e o grupo controle. Mediante o exposto, conclui-se que a taurina, nas concentrações de 5, 25 e 50 mM mantem a motilidade total, motilidade progressiva, percentual de espermatozoides rápidos e frequência de batimento cruzado de espermatozoide caprino após três horas pós-descongelação.(AU)

Effect on supplementation of three taurine's concentration in cryopreserved goat sperm / Efeito da suplementação de três concentrações de taurina ao sêmen caprino criopreservado

This study aimed to evaluate the effect of different concentrations of taurine to post-thaw goat semen. It was used goat cryopreserved semen Boer (n=3); two pallets of each breeding animal were thawed (37oC/30 s) and samples were homogenized. Four experimental groups were formed: CG= control group (semen with minimal essential medium); G1= semen + 5 mM taurine; G2= semen + 25 mM taurine; G3= semen + 50 mM taurine; assessed for sperm kinetics, plasma membrane and acrosome integrity, and mitochondrial function after the sample groups formation: at thawing moment (T0), one (T1) and three (T3) hours post-thaw. Six replicates were performed. Data were subjected to variance analysis (ANOVA, One way) and Tukeys test at 5% significance level. The CG decreased (p0.05) to other kinematic parameters and integrity of sperm membranes among the treated groups and the CG. Thus, in conclusion, the taurine at concentrations 5, 25 and 50 mM preserves total motility, progressive motility, rapid sperm and beat cross frequency of goat sperm after three hours post-thaw.

Objetivou-se avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações de taurina ao sêmen caprino pós-descongelação. Utilizou-se sêmen criopreservado de caprinos Boer (n=3), onde foram descongeladas duas palhetas de cada reprodutor (37 ºC/30 s) e as amostras foram homogeneizadas. Quatro grupos experimentais foram formados: GC= grupo controle (sêmen com adição de meio essencial mínimo); G1= sêmen + 5 mM de taurina; G2= sêmen + 25 mM de taurina; G3= sêmen + 50 mM de taurina; submetidos à avaliação de cinética espermática e integridade de membrana plasmática, acrossoma e função mitocondrial nos momentos após formação dos grupos amostrais (T0), uma (T1) e três (T3) horas pós-descongelação. Foram realizadas seis repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA, One way) e teste de Tukey, com nível de significância de 5%. O GC apresentou redução (p0,05) para os demais parâmetros cinéticos e de integridade das membranas espermáticas entre os grupos tratados e o grupo controle. Mediante o exposto, conclui-se que a taurina, nas concentrações de 5, 25 e 50 mM mantem a motilidade total, motilidade progressiva, percentual de espermatozoides rápidos e frequência de batimento cruzado de espermatozoide caprino após três horas pós-descongelação.

Use of glutathione peroxidase and cysteine in Botu-Sêmen® and ACP-105® diluents on integrity of chilled equine spermatozoa / Uso de glutationa peroxidase e cisteína aos diluentes botusêmen® e ACP-105® na integridade de espermatozoides equinos refrigerados

Aiming to study the effect of glutathione peroxidase (GPx) and cysteine (Cis) addition in Botu-Sêmen® and ACP-105® diluents on integrity of equine spermatozoa, semen samples were cooling (14 C) and analyzed for total motility (TM), vigor, membrane integrity (iM) and acrosome (iAC), and mitochondrial membrane potential (MMP), after 0 (T0), 12 (T12) and 24 (T24) hours of cooling. Analysis of TM in T12 demonstrated that semen samples diluted in Botu-sêmen® (G1) and Botu-sêmen®+GPx+ Cis (G7) had higher (P 0.05) percentage than those diluted in ACP-105®+ Cis (G6). At T24, samples diluted in G7 had higher MT (P 0.05) than those in G2 and G6. Sperm vigor in T12 was higher (P<0.05) in samples diluted at G7 than in G2 and G6. At T24, the vigor of samples diluted G4 and G7 was higher (P<0.05) than inG2 and G6. No significant difference were observed to iM and MMP among groups, except to MMP at T0 was higher (P<0.05) in G1 than G7 and G8. At T24 the iAC parameter was higher (P<0.05) in the G6 than in G1. It can be concluded that GPx (5U) and Cis (5mM) in association preserves equine spermatozoa diluted in Botu-sêmen® at 14C during 24 hours.(AU)

Visando estudar o efeito da adição de glutationa peroxidase (GPx) e cisteína (Cis) aos diluentes Botu-Sêmen® e ACP-105® na viabilidade de espermatozoides equinos, amostras de sêmen foram refrigeradas (14 ºC) e analisadas quanto à motilidade total (MT), vigor, integridade de membrana (iM) e de acrossoma (iAc), e potencial da membrana mitocondrial (PMM), após0 (T0), 12 (T12) e 24 (T24) horas de refrigeração. A análise da MT evidenciou no T12 que as amostras de sêmen dos grupos Botu-sêmen® (G1) e Botu-sêmen®+GPx+Cist (G7) apresentaram maiores (P<0,05) percentuais do que no grupo ACP-105®+Cist (G6). No T24, as amostras do G7 apresentaram maior (P 0,05) MT do que as diluídas em ACP-105® (G2) e ACP-105®+- Cist (G6). O vigor espermático no T12 foi maior (P<0,05) no G7 do que no G2 e G6. No T24, o vigor das amostras do G4 e G7 foi maior (P<0,05) do que nas do G2 e G6. A iM e o PMM não diferiram (P>0,05) entre grupos, com exceção do PMM que no T0 foi maior (P<0,05) no G1 do que no G7 e no G8. A iAc no T24 foi maior (P<0,05) no G6 do que no G1. Conclui-se que a associação de GPx (5 U) e Cist (5 mM) preserva espermatozoides equinos diluídos em Botu-sêmen® refrigerados (14 oC) durante 24 horas.(AU)

Use of glutathione peroxidase and cysteine in Botu-Sêmen® and ACP-105® diluents on integrity of chilled equine spermatozoa / Uso de glutationa peroxidase e cisteína aos diluentes botusêmen® e ACP-105® na integridade de espermatozoides equinos refrigerados

Aiming to study the effect of glutathione peroxidase (GPx) and cysteine (Cis) addition in Botu-Sêmen® and ACP-105® diluents on integrity of equine spermatozoa, semen samples were cooling (14 C) and analyzed for total motility (TM), vigor, membrane integrity (iM) and acrosome (iAC), and mitochondrial membrane potential (MMP), after 0 (T0), 12 (T12) and 24 (T24) hours of cooling. Analysis of TM in T12 demonstrated that semen samples diluted in Botu-sêmen® (G1) and Botu-sêmen®+GPx+ Cis (G7) had higher (P 0.05) percentage than those diluted in ACP-105®+ Cis (G6). At T24, samples diluted in G7 had higher MT (P 0.05) than those in G2 and G6. Sperm vigor in T12 was higher (P<0.05) in samples diluted at G7 than in G2 and G6. At T24, the vigor of samples diluted G4 and G7 was higher (P<0.05) than inG2 and G6. No significant difference were observed to iM and MMP among groups, except to MMP at T0 was higher (P<0.05) in G1 than G7 and G8. At T24 the iAC parameter was higher (P<0.05) in the G6 than in G1. It can be concluded that GPx (5U) and Cis (5mM) in association preserves equine spermatozoa diluted in Botu-sêmen® at 14C during 24 hours.

Visando estudar o efeito da adição de glutationa peroxidase (GPx) e cisteína (Cis) aos diluentes Botu-Sêmen® e ACP-105® na viabilidade de espermatozoides equinos, amostras de sêmen foram refrigeradas (14 ºC) e analisadas quanto à motilidade total (MT), vigor, integridade de membrana (iM) e de acrossoma (iAc), e potencial da membrana mitocondrial (PMM), após0 (T0), 12 (T12) e 24 (T24) horas de refrigeração. A análise da MT evidenciou no T12 que as amostras de sêmen dos grupos Botu-sêmen® (G1) e Botu-sêmen®+GPx+Cist (G7) apresentaram maiores (P0,05) entre grupos, com exceção do PMM que no T0 foi maior (P<0,05) no G1 do que no G7 e no G8. A iAc no T24 foi maior (P<0,05) no G6 do que no G1. Conclui-se que a associação de GPx (5 U) e Cist (5 mM) preserva espermatozoides equinos diluídos em Botu-sêmen® refrigerados (14 oC) durante 24 horas.

Efeito da adição de Trolox e Glutationa reduzida na viabilidade in vitro de espermatozoides de cães / Effect of Trolox and Glutathione reduced (GSH) addition on the in vitro viability of dog cryopreserved sperm

Com o objetivo de avaliar o efeito da adição dos antioxidantes Trolox e Glutationa reduzida (GSH) na viabilidade in vitro de espermatozoides criopreservados de cães, amostras de sêmen foram colhidas de animais das raças Buldogue Francês (n=1), Basset Hound (n=2) e Rottweiler (n=1), por meio de manipulação digital. A seguir, procedeu-se à avaliação macroscópica e microscópica e divisão do volume de sêmen em alíquotas, de acordo com os experimentos e grupos experimentais, utilizando-se diferentes concentrações de Trolox (200 e 300 µM/L) ou GSH (2 e 5 µM/L). As amostras foram envasadas em palhetas (0,25 mL), criopreservadas em máquina de congelação e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelação a 37 ºC (60 seg) e incubação durante 60 minutos, constatou-se que os resultados de motilidade, vigor e espermatozoides com acrossomas íntegros evidenciaram diferença significativa (P<0,05) apenas entre os tempos de incubação, nos três experimentos. No Exp. 2, a adição de 2 e 5 µM/L de GSH (G2 e G3) determinou maior (P<0,05) porcentual de células sem estresse oxidativo. Concluiu-se que GSH, nas concentrações de 2 e 5 µM/L, pode ser adicionada ao diluente de criopreservação do sêmen de cães.

In order to evaluate the effect of adding Trolox and Glutathione reduced antioxidants on the in vitro viability of dog cryopreserved sperm, semen samples were harvested from animals of French Bulldog (n=1), Basset Hound (n=2) and Rottweiler (n=1) breeds, through digital manipulation. After macroscopic and microscopic evaluation, the volume of semen was divided in aliquots, according to the experiments and experimental groups, using different concentrations of Trolox (200 and 300 µM/L) or GSH (2 and 5 µM/L). The samples were packaged in straws (0.25 mL), cryopreserved in freezing machine and stored in liquid nitrogen. After thawing at 37ºC (60 sec) and incubation during 60 minutes, we verified that motility, vigor and sperm with intact acrosomes showed significant difference (P<0.05) only among incubation times, on the three experiments. In Exp. 2, the addition of 2 and 5 µM/L of GSH (G2 and G3) determined higher (P<0.05) percentage of sperm without oxidative stress. Therefore, we could conclude that GSH, on the concentration of 2 and 5 µM/L, can be added to diluent of dog semen cryopreservation.

Efeito da adição de Trolox e Glutationa reduzida na viabilidade in vitro de espermatozoides de cães / Effect of Trolox and Glutathione reduced (GSH) addition on the in vitro viability of dog cryopreserved sperm

Com o objetivo de avaliar o efeito da adição dos antioxidantes Trolox e Glutationa reduzida (GSH) na viabilidade in vitro de espermatozoides criopreservados de cães, amostras de sêmen foram colhidas de animais das raças Buldogue Francês (n=1), Basset Hound (n=2) e Rottweiler (n=1), por meio de manipulação digital. A seguir, procedeu-se à avaliação macroscópica e microscópica e divisão do volume de sêmen em alíquotas, de acordo com os experimentos e grupos experimentais, utilizando-se diferentes concentrações de Trolox (200 e 300 µM/L) ou GSH (2 e 5 µM/L). As amostras foram envasadas em palhetas (0,25 mL), criopreservadas em máquina de congelação e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelação a 37 ºC (60 seg) e incubação durante 60 minutos, constatou-se que os resultados de motilidade, vigor e espermatozoides com acrossomas íntegros evidenciaram diferença significativa (P<0,05) apenas entre os tempos de incubação, nos três experimentos. No Exp. 2, a adição de 2 e 5 µM/L de GSH (G2 e G3) determinou maior (P<0,05) porcentual de células sem estresse oxidativo. Concluiu-se que GSH, nas concentrações de 2 e 5 µM/L, pode ser adicionada ao diluente de criopreservação do sêmen de cães.(AU)

In order to evaluate the effect of adding Trolox and Glutathione reduced antioxidants on the in vitro viability of dog cryopreserved sperm, semen samples were harvested from animals of French Bulldog (n=1), Basset Hound (n=2) and Rottweiler (n=1) breeds, through digital manipulation. After macroscopic and microscopic evaluation, the volume of semen was divided in aliquots, according to the experiments and experimental groups, using different concentrations of Trolox (200 and 300 µM/L) or GSH (2 and 5 µM/L). The samples were packaged in straws (0.25 mL), cryopreserved in freezing machine and stored in liquid nitrogen. After thawing at 37ºC (60 sec) and incubation during 60 minutes, we verified that motility, vigor and sperm with intact acrosomes showed significant difference (P<0.05) only among incubation times, on the three experiments. In Exp. 2, the addition of 2 and 5 µM/L of GSH (G2 and G3) determined higher (P<0.05) percentage of sperm without oxidative stress. Therefore, we could conclude that GSH, on the concentration of 2 and 5 µM/L, can be added to diluent of dog semen cryopreservation.(AU)

Uso de antioxidantes no sêmen ovino / Use of antioxidants on ram semen

Diversos estudos têm relatado o papel dos oxidantes na fisiologia espermática, assim como a possibilidade de preservar a integridade destes gametas ao se adicionar substâncias antioxidantes aos diluentes de criopreservação. Na espécie ovina, o uso de antioxidantes enzimáticos e não enzimáticos tem a possibilidade de aumentar o conhecimento da fisiologia espermática e as taxas de prenhez após inseminação artificial com o sêmen criopreservado com antioxidantes. Este trabalho teve como objetivo sumarizar a ação de substâncias antioxidantes na criopreservação do sêmen ovino.

Many studies has related the oxidant paper on the sperm physiology, as well as the possibility to preserve the integrity of these gametes when is added antioxidant substances to freezing diluents. On the ovine specie, the use of enzymatic and non enzymatic antioxidants has the possibility to increase the knowledge of sperm physiology and the pregnant taxes after artificial insemination with frozen semen. This paper had the objective to summary the action of antioxidant substances on the cryopreservation of ovine semen.

Uso de antioxidantes no sêmen ovino / Use of antioxidants on ram semen

Diversos estudos têm relatado o papel dos oxidantes na fisiologia espermática, assim como a possibilidade de preservar a integridade destes gametas ao se adicionar substâncias antioxidantes aos diluentes de criopreservação. Na espécie ovina, o uso de antioxidantes enzimáticos e não enzimáticos tem a possibilidade de aumentar o conhecimento da fisiologia espermática e as taxas de prenhez após inseminação artificial com o sêmen criopreservado com antioxidantes. Este trabalho teve como objetivo sumarizar a ação de substâncias antioxidantes na criopreservação do sêmen ovino.(AU)

Many studies has related the oxidant paper on the sperm physiology, as well as the possibility to preserve the integrity of these gametes when is added antioxidant substances to freezing diluents. On the ovine specie, the use of enzymatic and non enzymatic antioxidants has the possibility to increase the knowledge of sperm physiology and the pregnant taxes after artificial insemination with frozen semen. This paper had the objective to summary the action of antioxidant substances on the cryopreservation of ovine semen.(AU)

Produção in vivo de embriões bovinos a partir de sêmen sexado / In vivo production of bovine embryos from sorted semen

A Transferência de Embrião e Múltipla Ovulação (MOET) possibilitam a produção de mais de uma cria por fêmea por ano e pode ser impulsionada com o uso de sêmen sexado, já que a tolerância a criopreservação dos embriões produzidos in vitro ainda é baixa, limitando o uso desta biotécnica. Todavia, pesquisas têm procurado estabelecer protocolos de sincronização/superovulação para elevar a taxa de fertilização na MOET com sêmen sexado. No entanto, os resultados com sêmen sexado, quando utilizado em animais superovulados, ainda são inferiores àqueles obtidos com o sêmen convencional. Desta forma, nesta revisão objetivou- -se abordar alguns aspectos da produção in vivo de embriões bovinos e o processo de sexagem espermática, bem como os resultados relatados com a utilização de sêmen sexado em programas de MOET.(AU)

The Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOET) enable the production of more than one calf per female per year and may be stimulated with the use of sorted semen, as the tolerance of the in vitro produced embryo is still low, limiting the use of this biotechnique. However, researches have aimed to establish synchronization/ superovulation protocols to increase the fertilization rate in MOET with sorted semen. Still, the results with sexed semen, when utilized in superovulated cows still are inferior than unsorted semen. Thus, the objective of this review is to approach some aspects of the in vivo embryo production from cow and the process of sorting of semen, as well as the results reported with use of sorted semen in MOET programs. (AU)

Efeitos das condições reprodutivas e climáticas na produção de embriões de cabras boer superovuladas / Effect of reproductive and climatic conditions on the production of embryos of superovulated boer does

Desenvolveu-se este estudo para avaliar os efeitos das condições reprodutivas (multíparas ou nulíparas) e climáticas (período seco ou chuvoso) sobre o número e qualidade de embriões colhidos de cabras da raça Boer superovuladas. Cinquenta fêmeas caprinas, sendo 33 multíparas e 17 nulíparas, foram submetidas à sincronização do estro com o auxílio de CIDR®, durante onze dias, e superovuladas com 250UI de FSH-p. Observaram-se as fêmeas quanto ao estro e realização de cobertura a intervalos de doze horas, após a remoção dos CIDR®. Os embriões foram colhidos seis dias após a última cobertura, por via transcervical. Não houve diferença significativa (P>0,05) entre o número médio de estruturas e embriões viáveis recuperados das multíparas ou nulíparas. O número médio de estruturas e embriões viáveis recuperados de doadoras multíparas não diferiu significativamente (P>0,05) entre os períodos seco e chuvoso. O número médio de estruturas e de embriões viáveis, classificados como G1, recuperados de doadoras nulíparas foi maior (P<0,05) no período chuvoso que no período seco. Conclui-se que a condição climática, neste experimento, não teve efeito sobre a produção embrionária de fêmeas multíparas, entretanto as nulíparas foram mais sensíveis ao período seco, apresentando redução no número e qualidade dos embriões recuperados.

This study was conducted to evaluate the effect of the reproductive (multiparous or nulliparous) and climatic (dry or rainy period) conditions on the number and quality of embryos collected from Boer does. Fifty does, being 33 multiparous and 17 nulliparous, were synchronized for oestrus with CIDR® devices for a period of 11 days and superovulated with 250UI of FSH-p. The animals were observed for oestrous behaviour at 12 h intervals, after CIDR® withdrawal. Does were mated and six days later flushed transcervically to recover the embryos. There was no significant difference (P>0.05) among the average number of structures and viable embryos recovered from the multiparous and nulliparous females. The average number of structures and viable embryos recovered from multiparous does had no significant difference (P>0.05) between dry and rainy periods. The average number of structures and viable embryos classified as G1 recovered from nulliparous was lower (P<0.05) in the dry period than in the rainy period. It could be concluded that the climatic condition did not affect the embryonic production of multiparous females, however the nulliparous were more sensitive to the dry period, presenting reduction in the number and quality of the collected embryos.