Diminuição do índice de necrose em enxertos cutâneos em coelhos mediante a aplicação de células tronco mesenquimais xenógenas / Reducing of the necrosis index in skin grafts in rabbits through application of xenogenous mesenchymal stem cells

O presente estudo teve como objetivo avaliar a inflamação em auto-enxertos cutâneos obtidos no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório, além disso, buscou-se determinar diferenças no processo de cicatrização no grupo tratado com células tronco mesenquimais xenógenas em relação ao grupo controle utilizando a avaliação microscópica e imuno-histoquímico. A avaliação microscópica foi realizada utilizando cortes histológicos corados pela técnica de histoquímica com hematoxilina-eosina (HE), e a imuno-histoquímica, com cortes submetidos a anticorpos específicos. As variáveis analisadas foram quantidade de vasos, células inflamatórias, COX-2, Macrófagos e presença de necrose. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software R. A quantidade de vasos foi maior (p<0,0001) no grupo tratamento (GT) durante o dia 3, enquanto no grupo controle (GC) foi maior no dia 7. No dia 3 houve menor porcentagem de necrose no grupo tratamento (GT) (p = 0,038). Nos demais dias avaliados não houve diferença entre a porcentagem de necrose observada nos dois tratamentos (p = 0,98), sendo de 53% para o grupo controle (GC) e 47% para o grupo tratamento (GT). Em relação ao número de macrófagos não houve diferença entre os grupos (p = 0,5637). Entretanto, entre os dias houve diferença significativa (p = 0,0223), sendo menor número de macrófagos no terceiro dia. A imunomarcação de COX-2 foi similar entre os grupos (p = 0,5637) e entre os dias (p = 0,9843). Portanto, o emprego das células tronco mesenquimais xenógenas em enxertos cutâneos promoveu menor ocorrência de necrose, favorecendo sua cicatrização, e não induziu o processo inflamatório, sendo assim factível seu uso em cirurgias reconstrutivas.

The present study aimed to assess inflammation in skin autografts obtained on the third, seventh and fourteenth postoperative day, in addition, it sought to determine differences in the healing process in the group treated with xenogenous mesenchymal stem cells in relation to to the control group using microscopic and immunohistochemical evaluation. Microscopic evaluation was performed using histological sections, stained by the hematoxylin-eosin (HE) histochemistry technique, and immunohistochemistry with sections were subjected to specific antibodies. The variables analyzed were the number of vessels, inflammatory cells (COX-2 and Macrophages) and the presence of necrosis. The data were analyzed statistically by software R. The number of vessels was higher (p< 0.0001) ) in the treatment group (GT) during day 3, while in the control group (CG) it was higher on day 7. On day 3 there was a lower percentage of necrosis in the treatment group (GT) (p = 0.038). On the other evaluated days, there was no difference between the percentage of necrosis observed in the two treatments (p = 0.98), being 53% for the control group (CG) and 47% for the treatment group (GT). Regarding the number of macrophages, there was no difference between groups (p = 0.5637). However, between days there was a significant difference (p = 0.0223), with a lower number of macrophages on the third day. The immunostaining of COX-2 was similar between groups (p = 0.5637) and between days (p = 0.9843). Therefore, the use of xenogenous mesenchymal stem cells in skin grafts promoted a lower occurrence of necrosis, favoring its healing, and did not induce the inflammatory process, thus making its use in reconstructive surgery feasible.

Diminuição do índice de necrose em enxertos cutâneos em coelhos mediante a aplicação de células tronco mesenquimais xenógenas / Reducing of the necrosis index in skin grafts in rabbits through application of xenogenous mesenchymal stem cells

O presente estudo teve como objetivo avaliar a inflamação em auto-enxertos cutâneos obtidos no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório, além disso, buscou-se determinar diferenças no processo de cicatrização no grupo tratado com células tronco mesenquimais xenógenas em relação ao grupo controle utilizando a avaliação microscópica e imuno-histoquímico. A avaliação microscópica foi realizada utilizando cortes histológicos corados pela técnica de histoquímica com hematoxilina-eosina (HE), e a imuno-histoquímica, com cortes submetidos a anticorpos específicos. As variáveis analisadas foram quantidade de vasos, células inflamatórias, COX-2, Macrófagos e presença de necrose. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software R. A quantidade de vasos foi maior (p<0,0001) no grupo tratamento (GT) durante o dia 3, enquanto no grupo controle (GC) foi maior no dia 7. No dia 3 houve menor porcentagem de necrose no grupo tratamento (GT) (p = 0,038). Nos demais dias avaliados não houve diferença entre a porcentagem de necrose observada nos dois tratamentos (p = 0,98), sendo de 53% para o grupo controle (GC) e 47% para o grupo tratamento (GT). Em relação ao número de macrófagos não houve diferença entre os grupos (p = 0,5637). Entretanto, entre os dias houve diferença significativa (p = 0,0223), sendo menor número de macrófagos no terceiro dia. A imunomarcação de COX-2 foi similar entre os grupos (p = 0,5637) e entre os dias (p = 0,9843). Portanto, o emprego das células tronco mesenquimais xenógenas em enxertos cutâneos promoveu menor ocorrência de necrose, favorecendo sua cicatrização, e não induziu o processo inflamatório, sendo assim factível seu uso em cirurgias reconstrutivas.(AU)

The present study aimed to assess inflammation in skin autografts obtained on the third, seventh and fourteenth postoperative day, in addition, it sought to determine differences in the healing process in the group treated with xenogenous mesenchymal stem cells in relation to to the control group using microscopic and immunohistochemical evaluation. Microscopic evaluation was performed using histological sections, stained by the hematoxylin-eosin (HE) histochemistry technique, and immunohistochemistry with sections were subjected to specific antibodies. The variables analyzed were the number of vessels, inflammatory cells (COX-2 and Macrophages) and the presence of necrosis. The data were analyzed statistically by software R. The number of vessels was higher (p< 0.0001) ) in the treatment group (GT) during day 3, while in the control group (CG) it was higher on day 7. On day 3 there was a lower percentage of necrosis in the treatment group (GT) (p = 0.038). On the other evaluated days, there was no difference between the percentage of necrosis observed in the two treatments (p = 0.98), being 53% for the control group (CG) and 47% for the treatment group (GT). Regarding the number of macrophages, there was no difference between groups (p = 0.5637). However, between days there was a significant difference (p = 0.0223), with a lower number of macrophages on the third day. The immunostaining of COX-2 was similar between groups (p = 0.5637) and between days (p = 0.9843). Therefore, the use of xenogenous mesenchymal stem cells in skin grafts promoted a lower occurrence of necrosis, favoring its healing, and did not induce the inflammatory process, thus making its use in reconstructive surgery feasible.(AU)

Metástase hepática de tumor gastrointestinal estromal (gist) em cão: relato de caso / Hepatic metastasis of gastrointestinal stromal tumors (gist) in dog: case report

Os tumores mesenquimais originados a partir de células intersticiais de Cajal, denominados tumores gastrointestinais estromais (GIST) são raros em humanos e com incidência ainda desconhecida em cães. A diferenciação de GIST, leiomiossarcoma e leiomioma com base apenas em exames de imagem, morfológicos e colorações simples por meio da histologia é muitas vezes difícil, sendo indicada realização de imuno-histoquímica. Foi atendida uma cadela, sem padrão racial definido, oito anos, 17kg de peso corporal, com discreto aumento de volume abdominal, sendo evidenciada por ultrassom abdominal neoformação intra-abdominal em região mesogástrica, sem demais alterações clínicas. Durante celiotomia exploratória, identificou-se que a neoformação intestinal localizava-se em jejuno, optando pela realização de enterectomia, sendo posteriormente diagnosticada como leiomiossarcoma pela análise histopatológica. Preconizou-se a instituição de quimioterapia adjuvante com o uso de doxorrubicina (30 mg/m²), a cada 21 dias, totalizando seis sessões. Após dez meses do tratamento cirúrgico, a paciente foi submetida a novo estadiamento clínico, sendo visibilizado, mediante ultrassom abdominal neoformações sólidas em fígado. A partir de biópsia hepática guiada por ultrassom com agulha “tru-cut” e análise histológica e imuno-histoquímica, definiu-se que as neoformações hepáticas eram metástases de GIST, instituindo o tratamento com fosfato de toceranib (Palladia®). Desde o momento da enterectomia ao óbito da paciente, contabilizou-se 20,4 meses de sobrevida global.

Mesenchymal tumors originating from interstitial cells of Cajal, called stromal gastrointestinal tumors (GIST) are rare in humans and their incidence is still unknown in dogs. The differentiation of GIST, leiomyosarcoma and leiomyoma based only on imaging, morphological and simple staining through histology is often difficult, and immunohistochemistry is indicated. A female dog, mixed breed, eight years old, 17kg of body weight, with a slight increase in abdominal volume, and ultrasound evidence of an intra-abdominal neoformation in the mesogastric region, without other clinical changes was seen. During exploratory celiotomy, it was identified that the intestinal neoformation in jejunum, opting for enterectomy, being identified as leiomyosarcoma according to histopathological analysis. Adjuvant chemotherapy was instituted using doxorubicin (30mg / m²) every 21 days, totaling six sessions. The patient underwent a new clinical staging, 10 months after enterectomy, where were visualized, by abdominal ultrasound, neoformations in the liver. Based on ultrasound guided liver biopsy with “tru-cut” needle and histological and immunohistochemical analysis, the neoformation was defined as GIST liver metastasis, being instituted treatment with toceranib phosphate (Palladia®). From the time of enterectomy to the death of the patient, 20,4 months of overall survival were counted.

Metástase hepática de tumor gastrointestinal estromal (gist) em cão: relato de caso / Hepatic metastasis of gastrointestinal stromal tumors (gist) in dog: case report

Os tumores mesenquimais originados a partir de células intersticiais de Cajal, denominados tumores gastrointestinais estromais (GIST) são raros em humanos e com incidência ainda desconhecida em cães. A diferenciação de GIST, leiomiossarcoma e leiomioma com base apenas em exames de imagem, morfológicos e colorações simples por meio da histologia é muitas vezes difícil, sendo indicada realização de imuno-histoquímica. Foi atendida uma cadela, sem padrão racial definido, oito anos, 17kg de peso corporal, com discreto aumento de volume abdominal, sendo evidenciada por ultrassom abdominal neoformação intra-abdominal em região mesogástrica, sem demais alterações clínicas. Durante celiotomia exploratória, identificou-se que a neoformação intestinal localizava-se em jejuno, optando pela realização de enterectomia, sendo posteriormente diagnosticada como leiomiossarcoma pela análise histopatológica. Preconizou-se a instituição de quimioterapia adjuvante com o uso de doxorrubicina (30 mg/m²), a cada 21 dias, totalizando seis sessões. Após dez meses do tratamento cirúrgico, a paciente foi submetida a novo estadiamento clínico, sendo visibilizado, mediante ultrassom abdominal neoformações sólidas em fígado. A partir de biópsia hepática guiada por ultrassom com agulha “tru-cut” e análise histológica e imuno-histoquímica, definiu-se que as neoformações hepáticas eram metástases de GIST, instituindo o tratamento com fosfato de toceranib (Palladia®). Desde o momento da enterectomia ao óbito da paciente, contabilizou-se 20,4 meses de sobrevida global.(AU)

Mesenchymal tumors originating from interstitial cells of Cajal, called stromal gastrointestinal tumors (GIST) are rare in humans and their incidence is still unknown in dogs. The differentiation of GIST, leiomyosarcoma and leiomyoma based only on imaging, morphological and simple staining through histology is often difficult, and immunohistochemistry is indicated. A female dog, mixed breed, eight years old, 17kg of body weight, with a slight increase in abdominal volume, and ultrasound evidence of an intra-abdominal neoformation in the mesogastric region, without other clinical changes was seen. During exploratory celiotomy, it was identified that the intestinal neoformation in jejunum, opting for enterectomy, being identified as leiomyosarcoma according to histopathological analysis. Adjuvant chemotherapy was instituted using doxorubicin (30mg / m²) every 21 days, totaling six sessions. The patient underwent a new clinical staging, 10 months after enterectomy, where were visualized, by abdominal ultrasound, neoformations in the liver. Based on ultrasound guided liver biopsy with “tru-cut” needle and histological and immunohistochemical analysis, the neoformation was defined as GIST liver metastasis, being instituted treatment with toceranib phosphate (Palladia®). From the time of enterectomy to the death of the patient, 20,4 months of overall survival were counted.(AU)

DIMINUIÇÃO DO ÍNDICE DE NECROSE EM ENXERTOS CUTÂNEOS EM COELHOS MEDIANTE A APLICAÇÃO DE CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS XENÓGENAS

O presente estudo teve como objetivo avaliar a inflamação em auto-enxertos cutâneos obtidos no terceiro, sétimo e décimo quarto dia de pós-operatório, além disso, buscou-se determinar diferenças no processo de cicatrização no grupo tratado com células tronco mesenquimais xenógenas em relação ao grupo controle utilizando a avaliação microscópica e imuno-histoquímico. A avaliação microscópica foi realizada utilizando cortes histológicos corados pela técnica de histoquímica com hematoxilina-eosina (HE), e a imuno-histoquímica, com cortes submetidos a anticorpos específicos. As variáveis analisadas foram quantidade de vasos, células inflamatórias, COX-2, Macrófagos e presença de necrose. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software R. A quantidade de vasos foi maior (p<0,0001) no grupo tratamento (GT) durante o dia 3, enquanto no grupo controle (GC) foi maior no dia 7. No dia 3 houve menor porcentagem de necrose no grupo tratamento (GT) (p = 0,038). Nos demais dias avaliados não houve diferença entre a porcentagem de necrose observada nos dois tratamentos (p = 0,98), sendo de 53% para o grupo controle (GC) e 47% para o grupo tratamento (GT). Em relação ao número de macrófagos não houve diferença entre os grupos (p = 0,5637). Entretanto, entre os dias houve diferença significativa (p = 0,0223), sendo menor número de macrófagos no terceiro dia. A imunomarcação de C