Infecção congênita em cabritos por Mycoplasma agalactiae / Congenital infection by Mycoplasma agalactiae in goat kids

This study aimed to report three cases of contagious agalactia (CA) by Mycoplasma agalactiae in goat kids born with polyarthritis. The nanny goats belonging to two different herds presented clinical signs of CA during pregnancy and in parturition they were apparently healthy. The carpal articulations of the three goat kids, the tarsus articulation in one, and thigh-femoral articulation in another showed swelling, pain and impairment of the flexion-extension movements. The articular liquid was collected from two goat kids at birth and revealed a content which varied from transparent to fibrinopurulent, presenting a yellow coloring. The samples were plated on modified Hayflick. The colonies had the appearance of "fried egg" and were confirmed as being M. agalactiae by biochemical tests and 16S rRNA PCR. Blood was collected from three animals soon after birth and submitted to the indirect ELISA test for the determination of the titration of the anti- M. agalactiae antibodies. The results confirmed that the goat kids were infected during pregnancy by M. agalactiae and resulted in the birth of an offspring with clinical signs of CA being immune tolerant.(AU)

Pesquisa de anticorpos contra maedi visna em ovinos nas microregiões de Botucatu, Campinas, Piedade e São Paulo, Estado de São Paulo / Survey for antibodies against maedi-visna virus in sheep in the regions of Botucatu, Campinas, São Paulo and Piedade, State of São Paulo, Brazil

O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência da infecção pelo vírus Maedi-Visna em ovinos criados nas microrregiões de Botucatu, Campinas, Piedade e São Paulo do Estado de São Paulo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas de 226 ovinos e foi realizada a técnica de imunodifusão em gel de ágar para a detecção de anticorpos antivírus Maedi-Visna e verificou-se que nenhuma das amostras testadas foi sororeagente. Dessa forma, faz-se necessário um estudo mais amplo no estado, a fim de se confirmar a baixa ocorrência e importância da enfermidade no estado.

Survey for antibodies against maedi-visna virus in sheep in the regions of Botucatu, Campinas, São Paulo and Piedade, state of São Paulo, Brazil. The purpose of the study was to evaluate the occurrence of infection with maedi-visna virus in sheep raised in the regions of Botucatu, Campinas, Piedade and São Paulo, state of São Paulo, Brazil, that showed symptoms of the disease. Blood serum samples collected from 226 sheep were submitted to the agar gel immunodiffusion technique for detection of antibodies against maedi-visna virus, and none of the samples tested was serum reactive. In conclusion, the maedi-visna virus has low frequency in animals raised in the regions studied.

Efficiency of inactive vaccines against contagious agalactia in Brazil / Eficiência de vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa no Brasil

This paper aims to evaluate the efficiency of three inactive vaccines against contagious agalactia prepared with samples of Mycoplasma agalactiae isolated in Brazil and different adjuvants. Vaccine 1 adsorbed with aluminum hydroxide was administered in 23 goats (Gc1) and 13 sheep (Gov1); vaccine 2 containing Montanide IMS-2215-VG was administered in 22 goats (Gc2) and 12 sheep (Gov2) and vaccine 3, containing Montanide Gel-01 was administered in 22 goats (Gc3) and 12 sheep (Gov3). All animals were negative for Ma at indirect ELISA and received two doses of 2mL each, subcutaneously, within a 21 day interval. Five animals from each species were used as control. Seventy-five days after the booster, four animals from each vaccinated group and two from the control group were challenged with 5mL of Ma culture containing 10(7)cfu/mL, orally and through immersion of the female's udder in lactation. The serological response was analyzed during vaccination days (0 and 21) and at 51, 81, 111, 141 and 171 days after vaccination. The collection and analysis of the challenged animals were conducted at the day of the challenge (D0) and 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 and 56 days after the challenge. The three vaccines induced the production of antibodies, having no significant statistical difference (p<0.05). Animals from groups Gc1, Gc2 and Gov2 developed higher levels of antibodies, with significant statistical difference compared to the other vaccinated group and control group (p<0.05). After the challenge, the animals from the control presented an increase in regional lymph nodes and conjunctivitis, mastitis and arthritis. In four vaccinated animals, discrete conjunctivitis and congestion of the episcleral veins was observed. It is concluded that vaccines 1 and 2 induced levels of protective antibodies in goats and sheep, sufficient for clinical protection of the animals submitted to the experimental infection, indicating its use on the prevention of contagious agalactia.(AU)

Este trabalho tem como objetivo avaliar a eficácia de três vacinas inativadas contra agalaxia contagiosa, preparadas com amostra de Mycoplasma agalactiae isolada no Brasil e diferentes adjuvantes. A vacina 1, adsorvida com hidróxido de alumínio, foi administrada em 23 caprinos (Gc1) e 13 ovinos (Gov1); a vacina 2, contendo Montanide IMS-2215-VG, foi administrada em 22 caprinos (Gc2) e 12 ovinos (Gov2); e a vacina 3, contendo Montanide Gel-01 foi administrada em 22 caprinos (Gc3) e 12 ovinos (Gov3). Todos os animais eram negativos para Ma no ELISA indireto e receberam duas doses de 2mL cada, por via subcutânea, com intervalo de 21 dias. Cinco animais de cada espécie foram utilizados como controle. Setenta e cinco dias após o reforço, quatro animais de cada grupo vacinado e dois do grupo controle foram desafiados com 5mL de cultura de Ma contendo 10(7)ufc/mL, por via oral e pela imersão dos tetos das fêmeas em lactação. A resposta sorológica foi analisada nos dias da vacinação (zero e 21) e aos 51, 81, 111, 141 e 171 dias pós-vacinação. As coletas e análises dos animais desafiados foram realizadas no dia do desafio (D0) e sete, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias pós-desafio. As três vacinas induziram produção de anticorpos, não havendo diferença estatisticamente significativa entre caprinos e ovinos (P>0,05). Animais dos grupos Gc1, Gc2 e Gov2 produziram níveis de anticorpos mais elevados, com diferença estatisticamente significativa em relação aos demais grupos vacinados e ao grupo controle (P<0,05). Após o desafio, os animais do grupo controle apresentaram aumento de linfonodos regionais e conjuntivite, mastite e artrite. Em quatro animais vacinados, foi observada discreta conjuntivite e congestão dos vasos episclerais. Conclui-se que as vacinas 1 e 2 induziram níveis de anticorpos protetores em caprinos e ovinos suficientes para proteção clínica dos animais submetidos à infecção experimental, podendo ser indicadas para prevenção da agalaxia contagiosa.(AU)

Pesquisa de anticorpos contra maedi visna em ovinos nas microregiões de Botucatu, Campinas, Piedade e São Paulo, Estado de São Paulo / Survey for antibodies against maedi-visna virus in sheep in the regions of Botucatu, Campinas, São Paulo and Piedade, State of São Paulo, Brazil

O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência da infecção pelo vírus Maedi-Visna em ovinos criados nas microrregiões de Botucatu, Campinas, Piedade e São Paulo do Estado de São Paulo. As amostras de soro sanguíneo foram colhidas de 226 ovinos e foi realizada a técnica de imunodifusão em gel de ágar para a detecção de anticorpos antivírus Maedi-Visna e verificou-se que nenhuma das amostras testadas foi sororeagente. Dessa forma, faz-se necessário um estudo mais amplo no estado, a fim de se confirmar a baixa ocorrência e importância da enfermidade no estado.(AU)

Survey for antibodies against maedi-visna virus in sheep in the regions of Botucatu, Campinas, São Paulo and Piedade, state of São Paulo, Brazil. The purpose of the study was to evaluate the occurrence of infection with maedi-visna virus in sheep raised in the regions of Botucatu, Campinas, Piedade and São Paulo, state of São Paulo, Brazil, that showed symptoms of the disease. Blood serum samples collected from 226 sheep were submitted to the agar gel immunodiffusion technique for detection of antibodies against maedi-visna virus, and none of the samples tested was serum reactive. In conclusion, the maedi-visna virus has low frequency in animals raised in the regions studied.(AU)

Detecção do vírus da artrite encefalite caprina no sêmen através das técnicas de PCR e nested-PCR / Caprine arthritis encephalitis virus detected by PCR and nested PCR in goat semen

A Artrite Encefalite Caprina é uma enfermidade de caráter multissistêmico afetando animais de qualquer idade e sexo; causado por um Lentivirus caprino pertencente ao grupo de Lentivirus de Pequenos Ruminantes. Os sintomas conhecidos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite intersticial endurativa. Foi descrito que machos soropositivos apresentavam sêmen infectado pelo Lentivirus e processo inflamatório gradual do testículo. A detecção em amostras de sêmen pelas técnicas de PCR e nested-PCR são caracterizadas como métodos de altas especificidade e sensibilidade provendo resultados rápidos. O objetivo do estudo foi detectar, por meio da técnica molecular de PCR e nested-PCR, a presença de DNA pró-viral do Lentivirus caprino em amostras de sêmen de reprodutores criados no Estado de São Paulo. Das 17 amostras, cinco (29,4%) apresentaram a detecção do vírus provando que há a presença de partículas virais no sêmen dos caprinos reprodutores soropositivos a Atrite Encefalite Caprina estudados.

Caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a lentivirus and may affect animals of any age or sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, chronic interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It has been reported that the testicles of infected animals present infected semen and a gradual inflammatory process. For the detection of the agent in semen samples, PCR and nested PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provide fast results. The objective of this study was to detect the presence of pro-lentiviral DNA in the semen of caprine males in São Paulo State, Brazil, by the PCR and nested PCR molecular techniques. Five (29.4%) of the 17 samples presented positivity for the detection of the virus, proving the presence of viral particles in the semen of male goats seropositive for caprine arthritis encephalitis in this study.

Frequência de anticorpos e fatores de risco associados à leucose enzoótica bovina em rebanhos da bacia leiteira do estado do Maranhão / Frequency of antibodies and risk factors associated to enzootic bovine leukosis in dairy herds of the state of Maranhão, Brazil

Este trabalho teve como objetivo determinar a frequência e os possíveis fatores de risco as-sociados à ocorrência da Leucose Enzoótica Bovina (LEB) na bacia leiteira do Estado do Maranhão. Amostras de soro de 920 animais da raça girolanda foram submetidas à técnica de imunodifusão em gel de ágar. O estudo foi realizado em 92 propriedades leiteiras, pertencentes a 23 municípios localizados nas regionais de Açailândia, Bacabal, Ilha de São Luís, Imperatriz e Pedreiras. Em cada propriedade avaliada, aplicou-se questionário epidemiológico para investigar os fatores de risco que poderiam estar associados a esta infecção. Das 920 amostras de soro analisadas, 53,80% foram reagentes. Nas regionais obtiveram-se frequências de 63,50%, 61,87%, 60,62%, 41,18% e 30,83%, para Bacabal, Ilha de São Luís, Pedreiras, Imperatriz e Açailândia, respectivamente. Nos 23 municípios amostrados foram encontrados animais reagentes, com detecção de bovinos sorologicamente positivos em 98,91% das propriedades. Dentre os fatores de risco avaliados, uso repetido da mesma agulha para colheita de sangue ou vacinação, uso repetido da mesma luva obstétrica, estabulação dos animais e ausência de assistência veterinária apresentaram significância estatística (P < 0,05) associada à LEB. Os resultados do estudo indicam que a frequência de anticorpos para a Leucose Enzoótica Bovina foi elevada na bacia leiteira do Estado do Maranhão e que os fatores relacionados ao manejo estiveram associados ao risco de infecção nos bovinos.

This study was performed in order to determine the frequency of antibodies to enzootic bovine leukosis (EBL), and the main factors related to the infection in dairy herds of Maranhão State, Brazil. Serum samples from 920 animals were submitted to the agar gel immunodifusion technique. The study was carried out on 92 dairy properties, in 23 districts located in the regions of Açailândia, Bacabal, São Luis Island, Imperatriz and Pedreiras. An epidemiological questionnaire was applied for each herd to investigate variables that could be associated with this infection. Of the 920 serum samples examined, 53.8% were reagent. The frequency breakdown by region was 63.50%, 61.87%, 60.62%, 41.18% and 30.83%, for Bacabal, São Luis Island, Pedreiras, Imperatriz and Açailândia, respectively. Reagents animals were found in the 23 districts studied, with detection of serologically positive bovines on 98.91% of the properties. Variables identified as risk factors included the repeated use of the same needle for blood sampling or vaccination, repeated use of the same obstetric glove, animal housing and absence of veterinary assistance. These risk factors presented a statistical significance (P < 0.05) associated to infection. These results indicate that enzootic bovine leukosis infection is high in dairy herds of the state of Maranhão and that factors related to livestock management were associated with the risk of EBL infection.

Anticorpos contra vírus do grupo da língua azul em caprinos e ovinos do sertão de Pernambuco e inferências sobre sua epidemiologia em regiões semiáridas / Antibodies against bluetongue-virus group in goats and sheep from Pernambuco state and inferences on bluetongue epidemiology under tropical conditions

The prevalence of antibodies against bluetongue virus was investigated in 41 dairy goats and 40 sheep herds in the semi-arid region of Pernambuco state and the conditions for insect Culicoides maintenance, considering climate dynamics and vector competence, were evaluated. The percents of seropositive herds in agar gel immunodiffusion test for bluetongue virus group were 24 for goats and 27.5 for sheep. The estimated prevalences of seropositive animals were 3.9 percent for goats (n = 410) and 4.3 percent for sheep (n = 400). The prevalences of seropositive animals were low in the mesoregion of Sertão Pernambucano (4.8 percent for goats and 4.1 percent for sheep) and São Francisco Pernambucano (1.0 percent for goats and 4.5 percent for sheep). There were no significant differences between species and regions. Considering the social and economic importance of goats and sheep raising in the semi-arid region, it is essential to establish preventive measures to control imports of ruminants from these areas.(AU)

DETECÇÃO DO VÍRUS DA ARTRITE ENCEFALITE CAPRINA NO SÊMEN ATRAVÉS DAS TÉCNICAS DE PCR E NESTED-PCR

ABSTRACT Caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a lentivirus and may affect animals of any age or sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, chronic interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It has been reported that the testicles of infected animals present infected semen and a gradual inflammatory process. For the detection of the agent in semen samples, PCR and nested PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provide fast results. The objective of this study was to detect the presence of pro-lentiviral DNA in the semen of caprine males in São Paulo State, Brazil, by the PCR and nested PCR molecular techniques. Five (29.4%) of the 17 samples presented positivity for the detection of the virus, proving the presence of viral particles in the semen of male goats seropositive for caprine arthritis encephalitis in this study.

RESUMO A Artrite Encefalite Caprina é uma enfermidade de caráter multissistêmico afetando animais de qualquer idade e sexo; causado por um Lentivirus caprino pertencente ao grupo de Lentivirus de Pequenos Ruminantes. Os sintomas conhecidos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite intersticial endurativa. Foi descrito que machos soropositivos apresentavam sêmen infectado pelo Lentivirus e processo inflamatório gradual do testículo. A detecção em amostras de sêmen pelas técnicas de PCR e nested-PCR são caracterizadas como métodos de altas especificidade e sensibilidade provendo resultados rápidos. O objetivo do estudo foi detectar, por meio da técnica molecular de PCR e nested-PCR, a presença de DNA pró-viral do Lentivirus caprino em amostras de sêmen de reprodutores criados no Estado de São Paulo. Das 17 amostras, cinco (29,4%) apresentaram a detecção do vírus provando que há a presença de partículas virais no sêmen dos caprinos reprodutores soropositivos a Atrite Encefalite Caprina estudados.

FREQUÊNCIA DE ANTICORPOS E FATORES DE RISCO ASSOCIADOS À LEUCOSE ENZOÓTICA BOVINA EM REBANHOS DA BACIA LEITEIRA DO ESTADO DO MARANHÃO

ABSTRACT This study was performed in order to determine the frequency of antibodies to enzootic bovine leukosis (EBL), and the main factors related to the infection in dairy herds of Maranhão State, Brazil. Serum samples from 920 animals were submitted to the agar gel immunodifusion technique. The study was carried out on 92 dairy properties, in 23 districts located in the regions of Açailândia, Bacabal, São Luis Island, Imperatriz and Pedreiras. An epidemiological questionnaire was applied for each herd to investigate variables that could be associated with this infection. Of the 920 serum samples examined, 53.8% were reagent. The frequency breakdown by region was 63.50%, 61.87%, 60.62%, 41.18% and 30.83%, for Bacabal, São Luis Island, Pedreiras, Imperatriz and Açailândia, respectively. Reagents animals were found in the 23 districts studied, with detection of serologically positive bovines on 98.91% of the properties. Variables identified as risk factors included the repeated use of the same needle for blood sampling or vaccination, repeated use of the same obstetric glove, animal housing and absence of veterinary assistance. These risk factors presented a statistical significance (P 0.05) associated to infection. These results indicate that enzootic bovine leukosis infection is high in dairy herds of the state of Maranhão and that factors related to livestock management were associated with the risk of EBL infection.

RESUMO Este trabalho teve como objetivo determinar a frequência e os possíveis fatores de risco as-sociados à ocorrência da Leucose Enzoótica Bovina (LEB) na bacia leiteira do Estado do Maranhão. Amostras de soro de 920 animais da raça girolanda foram submetidas à técnica de imunodifusão em gel de ágar. O estudo foi realizado em 92 propriedades leiteiras, pertencentes a 23 municípios localizados nas regionais de Açailândia, Bacabal, Ilha de São Luís, Imperatriz e Pedreiras. Em cada propriedade avaliada, aplicou-se questionário epidemiológico para investigar os fatores de risco que poderiam estar associados a esta infecção. Das 920 amostras de soro analisadas, 53,80% foram reagentes. Nas regionais obtiveram-se frequências de 63,50%, 61,87%, 60,62%, 41,18% e 30,83%, para Bacabal, Ilha de São Luís, Pedreiras, Imperatriz e Açailândia, respectivamente. Nos 23 municípios amostrados foram encontrados animais reagentes, com detecção de bovinos sorologicamente positivos em 98,91% das propriedades. Dentre os fatores de risco avaliados, uso repetido da mesma agulha para colheita de sangue ou vacinação, uso repetido da mesma luva obstétrica, estabulação dos animais e ausência de assistência veterinária apresentaram significância estatística (P 0,05) associada à LEB. Os resultados do estudo indicam que a frequência de anticorpos para a Leucose Enzoótica Bovina foi elevada na bacia leiteira do Estado do Maranhão e que os fatores relacionados ao manejo estiveram associados ao risco de infecção nos bovinos.

Detecção do vírus da artrite encefalite caprina em amostras de leite de cabras pela reação em cadeia da polimerase (PCR) e nested-PCR / Caprine arthritis encephalitis virus detected by PCR and nested-PCR in milk

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma doença infecciosa multissistêmica causada por um Lentivirus, que pode infectar animais de idade e sexo variados. Os principais sinais clínicos são leucoencefalomielite, pneumonia intersticial crônica, artrite e mastite indurativa intersticial. Foi descrito que cabras infectadas apresentavam endurecimento gradativo e difuso do parênquima glandular e com a presença de vários nódulos de consistência dura, além de apresentarem diminuição na produção leiteira e alterações físico-químicas no leite. O exame de amostras de leite pelas técnicas de PCR e nested-PCR para detecção da CAE é caracterizada como métodos com alta especificidade e sensibilidade, oferecendo resultados rápidos. A técnica possibilita identificar vírus em amostras com virus não viável. Nesse estudo, 72 amostras de leite de cabras sororreagentes ao teste de imunodifusão em ágar gel (IDGA) foram avaliadas. Utilizou-se para a produção de DNA primers específicos o gene Pol. As técnicas de PCR e nested-PCR foram conduzidas para amplificar fragmentos genômicos correspondentes ao gene Pol. Catorze amostras (19,4%) apresentaram formação de banda positiva na altura de 600 pb para PCR, e 16 amostras (22,2%) para nested-PCR na altura de 278 pb. Os resultados mostraram que a técnica foi adequada para detectar o DNA pró-viral em amostras de leite e pode ser utilizado como uma ferramenta complementar no estudo da transmissão natural do vírus pela ingestão do leite de cabras sororreagentes a CAE.

The caprine arthritis encephalitis is a multisystemic infectious disease caused by a Lentivirus may affect animals at all ages and sex. The major symptoms are leukoencephalomyelitis, cronical interstitial pneumonia, arthritis and hardening interstitial mastitis. It was described that mammary glands from infected goats had a gradual non inflammatory diffuse nodular hardening, and also decreased milk production and abnormal physical-chemical milk parameters. The detection on milk samples by PCR and nested-PCR techniques are characterized as methods with high specificity and sensibility that provides fast results. The techniques are able to identify nucleic acids on samples with no living virus. In this study, 72 milk samples from infected and seroreagent to IDAG test animals were evaluated. DNA generation with specifics primers Pol gene, PCR and nested-PCR was conducted for individual amplification from a genomic fragment corresponding to the Pol gene. Fourteen samples (19, 4%) presented positive by PCR at 600 bp length bands and 16 samples (22, 2%) by nested-PCR at 278 bp length bands. The results show that PCR and nested-PCR tecniques were able to detect pro-viral DNA in goat milk samples and may be used as a complementary means of Caprine Arthritis and Encephalitis diagnosis.

Soroprevalência de Maedi-Visna em ovinos na região de Araçatuba, SP / Occurrence of Maedi-visna in sheep from Araçatuba region - SP - Brazil

The seroprevalence of Maedi-Visna in sheep from Araçatuba region - SP, was determined and correlated to age, gender, breed, or sheep production systems. Blood samples were collected from 444 sheep, aging from two to 12 year-old. Both sexes and different breeds were sampled in 20 farms of this region. Physical examination was performed in all animals. Agar gel immunodiffusion test kit was used to diagnose in serum samples. Twelve animals, from five different farms, were AGID positive, yielding a seroprevalence of 2.7%, with no correlation among breed, gender, or sheep production systems and the detection of the disease. No animal considered positive for Maedi-Visna showed clinical signs compatible with Maedi-Visna.(AU)

Infection by Mycoplasma agalactiae in dairy goat herds in the microregions of Cariri in Paraíba State, Brazil / Infecção por Mycoplasma agalactiae em rebanhos caprinos leiteiros nas microrregiões do Cariri na Paraíba

O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae, com o uso da reação em cadeia da polimerase (PCR), em 30 rebanhos caprinos leiteiros nas microrregiões do Cariri Ocidental e Oriental do estado da Paraíba. Das 120 amostras de leite testadas, nove (7,5 por cento) apresentaram amplificação de apenas um fragmento com 360pb. As amostras que amplificaram este fragmento estavam presentes em 6/30 (20 por cento) fazendas localizadas nos municípios de Amparo, Santo André e Gurjão.(AU)

Western blot para o diagnóstico das infecções pelos lentivírus de pequenos ruminantes em caprinos: um método simples para a produção de antígeno

ABSTRACT The serodiagnosis of small ruminant lentivirus (SRLV) infections in goats and sheep is usually performed by the agar-gel immunodiffusion technique (AGID) and by ELISA. Therefore, the western blot (WB) is the choice for the definition of antigen recognition patterns during the disease progression, being potentially useful for the diagnosis itself. In the present study, the antigen used for WB was obtained by a novel simple purification procedure: the dialysis of the supernatant of infected cultured cells, followed by centrifugation in sucrose gradient. Proteins in the pellet were separated by SDS-PAGE at 10% density and transferred to nitrocellulose membranes in a semi-dry blotting device. After development, five viral proteins were recognized by the standard positive serum sample, with molecular weights of 14-16, 25, 40, 50 and 70 kDa respectively. All 8 AGID positive goat serum samples recognized at least one band in the immunoblot, with different intensities. The total number of bands recognized by each serum sample varied considerably. A positive reaction to gp40 was observed with 4 sera, although rather weak in 3 cases. Two samples were reactive to p16 and two others to gp50, although weakly. Curiously, no serum was reactive to the 70 kDa antigen, recognized by the standard positive serum sample. These results suggest that the WB can be effectively used for the routine serodiagnosis of viral caprine arthritis encephalitis infection (CAEV). It can also support further studies on antigen recognition patterns with the new antigen provided by the novel simplified purification system of viral components described here.

RESUMO O sorodiagnóstico das lentiviroses de caprinos e ovinos é realizado principalmente pela imunodifusão em gel de agar (AGID) e/ou ELISA. Embora relativamente simples, esses métodos não identificam os antígenos virais reconhecidos na resposta imune do animal examinado, por isso o western blot (WB) vem ganhando maior relevância como ferramenta de diagnóstico dessas enfermidades. Neste trabalho, o antígeno utilizado no WB foi obtido através de um sistema simplificado de purificação: concentração por diálise do sobrenadante de culturas celulares infectadas, seguido de centrifugação em gradiente contínuo de sacarose. A separação das proteínas virais foi obtida por SDS-PAGE a 10% e a transferência para membranas de nitrocelulose realizada pelo sistema semi-úmido. A revelação das membranas mostrou reconhecimento pelo soro padrão positivo de cinco proteínas, com pesos moleculares de 14-16, 25, 40, 50 e 70 kDa. Todas as 8 amostras de soro caprino, positivas na ADIG, reconheceram pelo menos uma banda proteíca no immunoblot, variando contudo o número de bandas reconhecidas. Reação positiva à glícoproteína 40 (gp 40) foi observada em quatro animais, com intensidade de reação discreta em três deles. Dois animais apresentaram reação positiva à proteína 16 (p16), e dois à gp 50, de pouca intensidade. Quanto à gp 70, proteína que, embora reagisse com o soro padrão positivo, não foi reconhecida por nenhum dos soros testados. Estes resultados sugerem que o WB pode ser empregado para o sorodiagnóstico rotineiro das lentiviroses, ensejando estudos mais amplos do padrão de reconhecimento dos antígenos apresentados por este novo sistema de purificação parcial de componentes virais.

Perfil sanitário e zootécnico de rebanhos caprinos nas microrregiões do Cariri paraibano / Sanitary profile of goat flocks in Cariri micro regions, Paraiba State, Brazil

This work was performed in 60 goat farms located in 15 counties of the micro regions of Western and Eastern Cariri, in Paraiba, to describe and analyze the sanitary profile of the flocks. Visits were done and the answers, obtained from questionnaires that were applied to the farmers, were used. It was observed a mortality of 20 percent in young animals in 80 percent of the farms. The presence of technical assistance in 93.3 percent in the studied farms, adoption of prophylactic calendar in 85 percent and parasitic control in 83.3 percent of the flocks were also observed(AU)

Lentivírus de pequenos ruminantes em ovinos santa inês: isolamento, identificação pela pcr e inquérito sorológico no estado de pernambuco

ABSTRACT Small ruminants can be infected by a group generically denominated as small ruminant lentiviruses (SRLV), which comprehend several isolates, distributed into four phylogenetic groups. The Maedi-Visna (MVV) and caprine arthritis encephalitis (CAEV) viruses, originally isolated from ovine and caprine, respectively, are the prototypes of both groups. The objective of this work was to isolate and identify an SRLV strain and carry out a serological survey in ovines of the Santa Inês breed. Through co-cultivation of ovine sinovial cells and leucocytes of a seropositive ewe, LVSR was isolated (BrPe2-01 strain), and identified by the appearance of syncitium on the monolayers and by polymerase chain reaction (PCR). The serology was done through the agar gel immunodiffusion test (AGID) in 558 sheep of 25 flocks from the state of Pernambuco, Brazil. The results demonstrated positive serology in 6 (1.07%) sheep of 3 (12%) studied flocks. It was concluded that the ovine of the Santa Inês breed are being infected by SRLV, with low prevalence.

RESUMO Os pequenos ruminantes podem ser infectados por um grupo de vírus genericamente denominado de Lentivírus de Pequenos Ruminantes (LVPR), que compreende vários isolados, distribuídos em quatro grupos filogenéticos. Os vírus Maedi-Visna (MVV) e da Artrite Encefalite Caprina (CAEV), originalmente, isolados de ovinos e caprinos, respectivamente, são os protótipos dos dois grupos. O objetivo desse trabalho foi isolar, identificar amostra de LVPR e realizar levantamento sorológico, em ovinos da raça Santa Inês. Através do co-cultivo de células de membrana sinovial ovina e sangue periférico de um ovino soropositivo ao teste de IDGA foi isolado LVPR, amostra BrPe2-01, identificada pelo aparecimento de sincícios nas monocamadas e pela reação em cadeia da polimerase (PCR). A sorologia foi feita através do teste de Imunodifusão em Gel de Agar (IDGA) em animais de 25 propriedades procedentes das regiões Agreste, Sertão, Mata Meridional e Metropolitana do Estado de Pernambuco, totalizando 558 amostras. Os resultados demonstraram sorologia positiva em 6 (1,07%) ovinos de 3 (12%) rebanhos estudados. Concluiu-se que os ovinos da raça Santa Inês estão sendo infectados pelos LVPR, porém com baixa prevalência.

Avaliação clínica de caprinos acometidos por artrite. diferencial entre artrite viral (cae) e bacteriana (mycoplasma spp.) em dois casos atendidos no hospital veterinário da fmvz-usp

ABSTRACT This work was undertaken with the aim of studying the clinical evaluation of arthritis in 2 goats at the Hospital of Bovines and Small Ruminants at FMVZ-USP, Brazil. The differential between viral arthritis caused by the virus of the CAE and the bacterial arthritis by Mycoplasma spp. was made by using clinical exam, laparoscopy of the affected region, PCR, serum diagnose, techniques of culture isolation and PCR of the sinovial fluid.

RESUMO Foi realizada a avaliação clínica de 2 caprinos acometidos por artrite atendidos junto a Clínica de Bovinos e Pequenos Ruminantes da FMVZ-USP. O diferencial entre artrite viral causada pelo vírus da CAE e a artrite bacteriana pelo Mycoplasma spp. foi feito baseado no exame específico, sorodiagnóstico, nas técnicas de isolamento, detecção do vírus pela PCR do líquido sinovial e laparoscopia.

Anticorpos contra lentivírus de pequenos ruminantes em caprinos e ovinos em abatedouros do estado de Pernambuco / Small ruminant lentivirus infection in goats and sheep from two abattoirs in Pernambuco State, Brazil

The prevalence of small ruminant lentivirus (SRL) infection was evaluated in goats and sheep in two counties of Pernambuco State, Brasil. Seriological examinations were performed from a total of 672 goats and 325 sheep, one year of age and older, at two abattoirs. Sera were analyzed by agar gel immunodiffusion using Maedi-Visna K-1514 antigens. There were 42 reactive samples (95% confidence interval 3.6% to 4.9%) in both slaughter houses. In São Lourenço da Mata county, 3.2% and 4.0% of goat and sheep sera were responsive, whereas in Paulista county, 5.1% of goat samples and 8.2% of sheep were reactive. Thus, the prevalence of small ruminant lentivirus was low in goats and sheep sampled from the region.(AU)

Infecção pelo vírus da artrite encefalite caprina no Rio Grande do Norte / Infection by caprine arthritis-encephalitis virus in Rio Grande do Norte State

Estudaram-se a ocorrência e os fatores predisponentes à artrite encefalite caprina (CAEV) no Rio Grande do Norte. O questionário epidemiológico aplicado a 42 proprietários de 11 municípios produtores de leite avaliou o grau de instrução escolar do proprietário, a origem dos animais, o tipo de criação, as enfermidades mais freqüentes e o manejo sanitário, em geral, bem como as taxas de morbidade e mortalidade. Prevalência de 11% de infecção pelo CAEV foi observada nos rebanhos, com animais soropositivos em todos os municípios pesquisados. As condições de criação mostraram que há fatores que predispõem à introdução ou disseminação da doença na região estudada.(AU)

The prevalence of caprine arthritis-encephalitis (CAE) infection in dairy goat herds from Rio Grande do Norte State, Brazil, was estimated, and the predisposing factors to the infection were identified. An epidemiologic survey was held to collect information on educational level of the owner and origin of the animals, and on sanitation and vaccination practices, diseases, morbidity and mortality rates in the herds. The prevalence of CAE virus infection was 11%, and CAE was always observed in some goats in all studied municipalities.(AU)

Isolamento e identificação pela imunofluorescência direta e reação em cadeia de polimerase do vírus da artrite-encefalite caprina

This paper describes the isolation of caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) in Minas Gerais and Pernambuco States, Brazil, using goat synovial membrane (GSM) explants (isolates: BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) or co-culture of blood mononuclear cells with GSM (BrMg 1-02). The isolates were identified by cytopathic effect (CPE), direct immunofluorescence (DIF) and an improved polimerase chain reaction (PRC) specific to CAEV (strain Cork) genome. It was found isolates of low (BrMg 1-01 and BrMg 1-02) and of high lytic (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 and BrPe 1-01) phenotypes. The DIF revealed positive results in cells infected by all isolates tested and the reference strains of CAEV (Cork) and visna-maedi (K1514). The used PCR amplified a 286 pb fragment of DNA from cells infected with all isolates and CAEV Cork but not with visna-maedi K1514.

Amostras do vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) de animais dos estados de Minas Gerais e Pernambuco foram isoladas a partir de explantes de membrana sinovial (MS) (amostras BrMg 1-01, BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01) ou de co-cultivo de leucócitos com MS (BrMg 1-02). As amostras foram identificadas pelo efeito citopático-ECP (formação de sincícios), imunofluorescência direta (IFD) e reação em cadeia de polimerase (PCR) aperfeiçoada para amplificação de parte do gene gag da amostra CAEV Cork. O estudo do ECP revelou a presença de amostras pouco (BrMg 1-01 e BrMg 1-02) ou fortemente indutoras de ECP (BrMg 2-01, BrMg 2-02, BrMg 2-03 e BrPe 1-01). A IFD mostrou resultado positivo em células de todas as monocamadas infectadas pelas amostras isoladas e em células de referência (CAEV Cork e visna/maedi K 1514). A PCR do DNA de células infectadas resultou na amplificação específica de um fragmento de DNA de 286pb da amostras testadas, exceto do visna/maedi K 1514.

DETECTION OF HETEROLOGOUS ANTI BOVINE LEUKEMIA VIRUS ANTIBODIES IN GOATS. / DETECÇÃO DE ANTICORPOS HETERÓLOGOS CONTRA O VÍRUS DA LEUCOSE ENZOÓTICA BOVINA EM CAPRINOS.

In this study, we investigated the possibility of the transmission of bovine leukemia virus (BLV) to newborn goat kids fed with colostrum obtained from enzootic bovine leukosis (EBL) seropositive cows. Thirty-one kids were separated from their dams at birth and they were fed with colostrum obtained from 11 cows serologically tested for EBL. Serum samples were collected from kids at 3, 45, 80, 120 and 160 days of age and, afterwards, at approximately 4 years of age to detect anti-BLV antibodies by agar gel immunodiffusion test (AGID). The BLV glycoprotein gp51 was used as antigen in the AGID test. It was found that serum antibodies were detected in most of kids fed with colostrum from seropositive cows and they were detected only at the age of 3 days. However, all kids that were fed with colostrum from EBL seronegative cows, were seronegative for all evaluated ages. Results indicated that the detected anti-BLV antibodies were antibodies from colostrum. Even after the decline of passive immunity until adult life, no goat seroconverted. Therefore, colostrum from EBL seropositive cows was not considered an efficient transmission route for BLV to newborn goat kids. KEY WORDS: Bovine leukemia virus. Enzootic bovine leukosis. Heterologous antibodies. Goats.

O presente estudo foi idealizado com o intuito de investigar a possibilidade da transmissão do vírus da leucose enzoótica bovina (VLB) para cabritos recém-nascidos amamentados com colostro de vacas soropositivas para leucose enzoótica bovina (LEB). Para tanto, foram utilizados 31 caprinos que foram separados das mães logo após o nascimento, para em seguida receber colostro proveniente de 11 vacas testadas sorologicamente para LEB. Amostras de soro sangüíneo dos caprinos foram colhidas ao 3, 45, 80, 120 e 160 dias de idade e, depois, quando tinham aproximadamente 4 anos. Então, foram feitas as análises laboratoriais por meio do teste da imunodifusão em gel de ágar (IDGA) utilizando o antígeno gp51 para diagnóstico da LEB. Desse modo, constatou-se que uma parte dos cabritos que receberam colostro de vacas soropositivas para LEB estavam reagentes aos 3 dias de idade e negativos nas outras idades. Entretanto, todos os outros que receberam colostro de vacas soronegativas não reagiram nos testes sorológicos. Esses resultados permitiriam supor então que os anticorpos detectados eram de origem colostral. Após o declínio da imunidade passiva e na vida adulta, nenhum caprino soroconverteu. Portanto, pôde-se concluir que o colostro de vacas soropositivas para LEB não foi considerado um meio eficiente para a transmissão do VLB. PALAVRAS-CHAVE: Vírus da leucose enzoótica bovina. Leucose enz