The use of Artificial Intelligence in predicting Respiratory Syncytial Virus-inhibiting flavonoids / O uso da Inteligência Artificial na predição de flavonoides inibidores do Vírus Sincicial Respiratório

Human Respiratory Syncytial Virus (hRSV) infection results in death and hospitalization of thousands of people worldwide each year. Unfortunately, there are no vaccines or specific treatments for hRSV infections. Screening hundreds or even thousands of promising molecules is a challenge for science. We integrated biological, structural, and physicochemical properties to train and to apply the concept of artificial intelligence (AI) able to predict flavonoids with potential anti-hRSV activity. During the training and simulation steps, the AI produced results with hit rates of more than 83%. The better AIs were able to predict active or inactive flavonoids against hRSV. In the future, in vitro and/or in vivo evaluations of these flavonoids may accelerate trials for new anti-RSV drugs, reduce hospitalizations, deaths, and morbidity caused by this infection worldwide, and be used as input in these networks to determine which parameter is more important for their decision.

A infecção pelo Vírus Sincicial Respiratório Humano (hRSV) resulta na morte e hospitalização de milhares de pessoas em todo o mundo a cada ano. Infelizmente, não existem vacinas ou tratamentos específicos para tais infecções. A testagem de centenas, ou mesmo milhares, de moléculas promissoras é um desafio para a ciência. Neste trabalho, nós integramos propriedades biológicas, estruturais e físico-químicas para treinar e aplicar o conceito de inteligência artificial (IA) capaz de prever flavonoides com potencial atividade anti-hRSV. Durante as etapas de treinamento e simulação, a IA produziu resultados com taxas de acerto superiores a 83%, sendo capaz de prever flavonoides ativos ou inativos contra o hRSV. No futuro, avaliações in vitro e/ou in vivo desses flavonoides poderão acelerar os testes de novas drogas anti-RSV, reduzir hospitalizações, mortes e morbidade causadas por essa infecção. Além disso, a validação futura destes dados poderá determinar qual parâmetro tem maior peso na decisão da inteligência.

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma / Diagnóstico e tratamento de células HEp-2 contaminadas por micoplasma

Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.(AU)

A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.(AU)

Effect of intrabronchial platelet rich plasma on the exercise-induced pulmonary hemorrhage endoscopic score in thoroughbred racehorses using furosemide: a preliminary study / [Efeito da instilação intrabronquial de plasma rico em plaquetas no escore endoscópico da hemorragia pulmonar induzida por exercício em cavalos Puro-Sangue Inglês de corrida e usuários de furosemida: um estudo preliminar]

The high prevalence of exercise-induced pulmonary hemorrhage (EIPH) in athletic horses constitutes to be a challenge to the racing industry and a source of major concern to animal welfare. Both experimental and clinical evidence indicate that the use of autologous platelet-rich plasma (PRP) is a promising effector of repair in a variety of pulmonary conditions. The present study evaluated the effect of intrabronchial instillation of PRP on EIPH endoscopic scores from 37 Thoroughbred racehorses. Inclusion criteria were for animals to be EIPH-positive in, at least, two consecutive post-exercise endoscopic exams and to receive 250mg of furosemide IV four hours before racing. Animals were randomly assigned into 3 groups: placebo, control, and PRP instillation. All 37 Thoroughbred racehorses included had EIPH endoscopic scores pre- and post- treatment compared by statistical analysis. The bleeding score from the group receiving PRP was significantly lower than in the control and placebo groups. No adverse effects were observed in any animal during or after the experiment. It was possible to conclude that the intrabronchial instillation of autologous PRP was effective in reducing EIPH scores in racehorses receiving furosemide and that this bioproduct can be considered as a promising coadjuvant in controlling EIPH in athletic horses.(AU)

A alta prevalência de hemorragia pulmonar induzida por exercício (HPIE) em cavalos atletas é um desafio de longa data para a indústria de corridas, além de figurar como grande preocupação sobre o bem-estar animal. As evidências experimentais e clínicas indicam que o uso do plasma rico em plaquetas (PRP) de fonte autógena é promissor na terapêutica de diversas lesões pulmonares. O presente estudo objetivou avaliar as mudanças após corrida no escore endoscópico de HPIE de 37 cavalos Puro-Sangue Inglês que receberam instilação intrabronquial de PRP autólogo. Os animais selecionados eram HPIE-positivos em, ao menos, dois exames endoscópicos consecutivos e recebiam 250mg de furosemida IV administrado quatro horas antes de cada corrida. Na comparação dos escores endoscópicos pré e pós-tratamento, verificou-se que o escore de HPIE do grupo tratado com PRP foi significantemente menor que o dos grupos controle e placebo. Nenhum efeito adverso foi observado nos animais durante ou após o experimento. Concluiu-se que a instilação intrabronquial de PRP autólogo foi efetiva na redução do escore de HPIE de cavalos de corrida usuários de furosemida e que este bioproduto pode ser considerado uma alternativa promissora no controle de HPIE em cavalos atletas.(AU)

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.

Increased leishmanicidal activity of alveolar macrophages from mature horses with mild equine asthma / Aumento da atividade leishmanicida de macrófagos alveolares de equinos adultos com asma equina leve

Alveolar macrophages (AMs) are an essential part of defense mechanisms within the lungs and their phagocytic activity is important for organ homeostasis. The phagocytic ability of AMs obtained from bronchoalveolar lavage from 17 mature mixed-breed pleasure horses (8 healthy and 9 diagnosed with mild equine asthma) was studied through assays with Leishmania (Viannia) braziliensis promastigotes, which enabled the calculation of a phagocytic index (PI) and a survival index (SI). Results indicate that phagocytic activity of AMs in asthma affected horses is similar to healthy horses, while leishmanicidal activity is significantly increased in horses with asthma.(AU)

Os macrófagos alveolares (MAs) são uma parte essencial dos mecanismos de defesa dentro dos pulmões e sua atividade fagocítica é importante para a homeostase desse órgão. A capacidade fagocitária dos MAs obtidos do lavado broncoalveolar de 17 equinos adultos, sem raça definida (oito saudáveis e nove com diagnóstico de asma equina leve), foi estudada por meio de ensaios com promastigotas de Leishmania (Viannia) braziliensis. Foi calculado o índice fagocítico e o índice de sobrevivência. Os resultados indicam que a atividade fagocítica de MAs em cavalos com asma é semelhante a cavalos saudáveis, enquanto a atividade leishmanicida está significativamente aumentada em cavalos com essa enfermidade.(AU)

Increased leishmanicidal activity of alveolar macrophages from mature horses with mild equine asthma / Aumento da atividade leishmanicida de macrófagos alveolares de equinos adultos com asma equina leve

Alveolar macrophages (AMs) are an essential part of defense mechanisms within the lungs and their phagocytic activity is important for organ homeostasis. The phagocytic ability of AMs obtained from bronchoalveolar lavage from 17 mature mixed-breed pleasure horses (8 healthy and 9 diagnosed with mild equine asthma) was studied through assays with Leishmania (Viannia) braziliensis promastigotes, which enabled the calculation of a phagocytic index (PI) and a survival index (SI). Results indicate that phagocytic activity of AMs in asthma affected horses is similar to healthy horses, while leishmanicidal activity is significantly increased in horses with asthma.(AU)

Os macrófagos alveolares (MAs) são uma parte essencial dos mecanismos de defesa dentro dos pulmões e sua atividade fagocítica é importante para a homeostase desse órgão. A capacidade fagocitária dos MAs obtidos do lavado broncoalveolar de 17 equinos adultos, sem raça definida (oito saudáveis e nove com diagnóstico de asma equina leve), foi estudada por meio de ensaios com promastigotas de Leishmania (Viannia) braziliensis. Foi calculado o índice fagocítico e o índice de sobrevivência. Os resultados indicam que a atividade fagocítica de MAs em cavalos com asma é semelhante a cavalos saudáveis, enquanto a atividade leishmanicida está significativamente aumentada em cavalos com essa enfermidade.(AU)

Extended-Spectrum Beta-Lactamase Producing Strains of Escherichia Coli Isolated from Avian Cellulitis Lesions

Avian cellulitis causes significant losses to the poultry industry. Avian-pathogenic Escherichia coli (APEC) is the etiological agent of that disease. This microorganism has zoonotic potential and may act as reservoir of antimicrobial-resistance genes. In this context, the production of extended-spectrum B-lactamase (ESBL) is one of the main antimicrobial resistance mechanisms. The objective of this study was to determine the production of ESBL in an Escherichia coli (E. coli) strain isolated from avian cellulitis lesions. Twenty-two E. Coli isolates were harvested from cellulitis lesions in chicken carcasses in a commercial processing plant. Isolates were then submitted to virulence genotypic profile (iutA, hlyF, iss, ironN, ompT) analysis, antimicrobial susceptibility test, and detection of ESBL production. The results showed that 22.7% of the isolates presented five virulence genes, 9.1% four genes, 36.4% three genes, 13.6% two genes, and 18.2% one gene. The tested isolates showed resistance to ampicillin (90.9%), ceftiofur (54.5%), gentamicin (45.5%), tetracycline (72.1%), sulfamethoxazole/trimethoprim (54.5%), and enrofloxacin (54.5%). Furthermore, 77.3% of the isolates presented multidrug resistance (MDR) profile and 72.7% were positive for ESBL production. This study is the first description of ESBL-producing APEC isolated from avian cellulitis lesions, which suggests the need to establish efficient APEC control measures and programs to prevent flock productivity losses due to colibacillosis and public health risks.(AU)

Extended-Spectrum Beta-Lactamase Producing Strains of Escherichia Coli Isolated from Avian Cellulitis Lesions

Avian cellulitis causes significant losses to the poultry industry. Avian-pathogenic Escherichia coli (APEC) is the etiological agent of that disease. This microorganism has zoonotic potential and may act as reservoir of antimicrobial-resistance genes. In this context, the production of extended-spectrum B-lactamase (ESBL) is one of the main antimicrobial resistance mechanisms. The objective of this study was to determine the production of ESBL in an Escherichia coli (E. coli) strain isolated from avian cellulitis lesions. Twenty-two E. Coli isolates were harvested from cellulitis lesions in chicken carcasses in a commercial processing plant. Isolates were then submitted to virulence genotypic profile (iutA, hlyF, iss, ironN, ompT) analysis, antimicrobial susceptibility test, and detection of ESBL production. The results showed that 22.7% of the isolates presented five virulence genes, 9.1% four genes, 36.4% three genes, 13.6% two genes, and 18.2% one gene. The tested isolates showed resistance to ampicillin (90.9%), ceftiofur (54.5%), gentamicin (45.5%), tetracycline (72.1%), sulfamethoxazole/trimethoprim (54.5%), and enrofloxacin (54.5%). Furthermore, 77.3% of the isolates presented multidrug resistance (MDR) profile and 72.7% were positive for ESBL production. This study is the first description of ESBL-producing APEC isolated from avian cellulitis lesions, which suggests the need to establish efficient APEC control measures and programs to prevent flock productivity losses due to colibacillosis and public health risks.

Diagnosis and treatment of HEp-2 cells contaminated with mycoplasma

Abstract Contamination of primary and cell cultures by mycoplasmas is one of the main economic and biological pitfalls in basic research, diagnosis and manufacture of biotechnological products. It is a common issue which may be difficult to conduct surveillance on. Mycoplasma presence may affect several physiological parameters of the cell, besides being considered an important source of inaccurate and/or non-reproducible scientific results. Each cell type presents characteristical symptoms, mainly morphological, that indicate a contamination by mycoplasma. HEp-2 cells originate from carcinoma of the larynx and are, therefore, part of the respiratory tract, which is one of mycoplasma habitats. Despite the importance these cells in several biological research (evaluation of cell proliferation and migration, apoptosis, antiviral and antitumor compounds), the alterations induced by mycoplasma contamination in HEp-2 cells have not yet been described. Here, we describe the progressive morphological alterations in culture of HEp-2 cells infected with mycoplasma, as well as the-diagnosis of the infection and its treatment. Mycoplasma contamination described within this work led to cytoplasm elongation, cell-to-cell spacing, thin plasma membrane projections, cytoplasmic vacuoles, fusion with neighboring cells, and, finally, cell death. Contamination was detected by fluorescence imaging (DAPI) and PCR reactions. The cultures were treated with BM-Cyclin antibiotic to eliminate contamination. The data presented here will be of relevance to researchers whose investigations involve cell culture, especially respiratory and HEp-2 cells.

Resumo A contaminação de culturas primárias e celulares por micoplasmas é uma das principais armadilhas econômicas e biológicas da pesquisa básica, diagnóstico e fabricação de produtos biotecnológicos. Trata-se de uma contaminação rotineira, mas de difícil acompanhamento. A presença de micoplasma pode afetar vários parâmetros fisiológicos da célula, além de ser considerada uma importante fonte de resultados científicos imprecisos e/ou não reprodutíveis. Cada tipo de célula apresenta sintomas característicos, principalmente morfológicos, que indicam uma contaminação por micoplasma. As células HEp-2 são originárias do carcinoma da laringe e, portanto, fazem parte do trato respiratório, um dos habitats do micoplasma. Apesar da importância destas células em diversas pesquisas biológicas (avaliação da proliferação e migração celular, apoptose, compostos antivirais e antitumorais), as alterações decorrentes da contaminação por micoplasma nestas células ainda não foi descrita. Aqui, descrevemos as alterações morfológicas progressivas na cultura de células HEp-2 infectadas por micoplasma, bem como o diagnóstico da infecção e seu tratamento. A contaminação por micoplasma descrita neste trabalho resultou em alongamento citoplasmático, espaçamento entre células, projeções delgadas da membrana plasmática, vacúolos citoplasmáticos, fusão de células vizinhas e, finalmente, morte celular. A contaminação foi detectada por imagens de fluorescência (DAPI) e reações de PCR. As culturas foram tratadas com antibiótico BM-Cyclin para eliminar a contaminação. Os dados aqui apresentados serão de relevância para pesquisadores cujas investigações envolvem cultura celular, principalmente células respiratórias e HEp-2.

Análise da expressão de receptores para progesterona e estrógeno α em placentas caninas provenientes de eutocia e distocia / Analysis of the expression of receptors for progesterone and estrogen α in canine placentas from eutocia and dystocia

Para a espécie canina, pouco se conhece a respeito da interação hormônio-receptor nos tecidosreprodutivos. Assim, a administração de hormônios durante a gestação e o parto é aplicada de forma empíricanessa espécie. Objetiva-se com o presente estudo a análise da expressão RP e do estrógeno α em placentas decadelas e a possível correlação com os casos de distocia. Foram coletadas 25 placentas, provenientes de 25cadelas, com e sem raça definida. Conforme o tipo de parto, as placentas foram divididas em três gruposexperimentais: GN (n = 13), placentas obtidas de parto normal; GC (n = 9), placentas obtidas de cesariana; eGAUP (n = 3), placentas oriundas de cadelas em atonia uterina primária. Os fragmentos placentários foramparafinizados e seccionados em cortes de 3μm, e a análise imuno-histoquímica foi realizada com incubação doanticorpo primário na diluição de 1:50 para progesterona e estrógeno α. A expressão dos RP foi evidente nascélulas deciduais do labirinto placentário no GN e no GC. Nas placentas GAUP, não houve marcação ou esta seapresentou fraca e escassa para RP. Não foi possível a detecção de REα nas placentas dos três gruposexperimentais. Conclui-se que a expressão de RP em placentas provenientes de atonia uterina é fraca ou ausentequando comparada à intensa expressão encontrada nas placentas provenientes de parto normal e cesárea.Placentas caninas a termo podem não expressar REα.(AU)

For the canine species almost nothing we know regarding to the intereaction hormone-receptor in thereproductive tissues. Thus the administration of hormones during pregnancy and whelping is applied empiricallyin this species. The aim of this study is the expression RB analysis and estrogen α in the bitch placentas and thepossible correlation with the dystocia cases. Were collected 25 placentas from 25 bitch, with and without definedrace. According to the kind of whelping the placentas were divided into three experimental groups, GN (n = 13)placentas obtained from normal whelping, GC (n = 9) placentas obtained from cesarian section and GAUP (n =3) placentas from bitch in primary uterine atony. The placenta fragments were paraffin embedded and sectionedin 3 μm cuts, a immunohistochemical analysis was performed with incubation of the primary antibody at adilution of 1:50 for progesterone and estrogen α. The expression of RP was evident in the decidual cells in theplacental labyrinth in GN and GC. In the GAUP placentas there was no mark or it performed weak and scarcefor RP. It wasnt possible to detect REα in the placentas of three experimental groups. We got the conclusionthat the RP expression in placentas from uterine atony is weak or absent when compared to intense expressionfound in the placentas from normal whelping and cesarian section. Canine placentas themselves dont expressREα.(AU)

Análise da expressão de receptores para progesterona e estrógeno α em placentas caninas provenientes de eutocia e distocia / Analysis of the expression of receptors for progesterone and estrogen α in canine placentas from eutocia and dystocia

Para a espécie canina, pouco se conhece a respeito da interação hormônio-receptor nos tecidosreprodutivos. Assim, a administração de hormônios durante a gestação e o parto é aplicada de forma empíricanessa espécie. Objetiva-se com o presente estudo a análise da expressão RP e do estrógeno α em placentas decadelas e a possível correlação com os casos de distocia. Foram coletadas 25 placentas, provenientes de 25cadelas, com e sem raça definida. Conforme o tipo de parto, as placentas foram divididas em três gruposexperimentais: GN (n = 13), placentas obtidas de parto normal; GC (n = 9), placentas obtidas de cesariana; eGAUP (n = 3), placentas oriundas de cadelas em atonia uterina primária. Os fragmentos placentários foramparafinizados e seccionados em cortes de 3μm, e a análise imuno-histoquímica foi realizada com incubação doanticorpo primário na diluição de 1:50 para progesterona e estrógeno α. A expressão dos RP foi evidente nascélulas deciduais do labirinto placentário no GN e no GC. Nas placentas GAUP, não houve marcação ou esta seapresentou fraca e escassa para RP. Não foi possível a detecção de REα nas placentas dos três gruposexperimentais. Conclui-se que a expressão de RP em placentas provenientes de atonia uterina é fraca ou ausentequando comparada à intensa expressão encontrada nas placentas provenientes de parto normal e cesárea.Placentas caninas a termo podem não expressar REα.

For the canine species almost nothing we know regarding to the intereaction hormone-receptor in thereproductive tissues. Thus the administration of hormones during pregnancy and whelping is applied empiricallyin this species. The aim of this study is the expression RB analysis and estrogen α in the bitch placentas and thepossible correlation with the dystocia cases. Were collected 25 placentas from 25 bitch, with and without definedrace. According to the kind of whelping the placentas were divided into three experimental groups, GN (n = 13)placentas obtained from normal whelping, GC (n = 9) placentas obtained from cesarian section and GAUP (n =3) placentas from bitch in primary uterine atony. The placenta fragments were paraffin embedded and sectionedin 3 μm cuts, a immunohistochemical analysis was performed with incubation of the primary antibody at adilution of 1:50 for progesterone and estrogen α. The expression of RP was evident in the decidual cells in theplacental labyrinth in GN and GC. In the GAUP placentas there was no mark or it performed weak and scarcefor RP. It wasn’t possible to detect REα in the placentas of three experimental groups. We got the conclusionthat the RP expression in placentas from uterine atony is weak or absent when compared to intense expressionfound in the placentas from normal whelping and cesarian section. Canine placentas themselves don’t expressREα.

Variação sazonal de eletrólitos no sangue de vacas aneloradas sob pastejo contínuo de Brachiaria decumbens

The seasonal changes of blood electrolytes concentration (calcium, phosphates, magnesium, potassium, chlorine, copper, and zinc) were evaluated using 20 graded Nelore cows on continuous grazing of Brachiaria decumbens. The cows were hypocalcemic and hypophosphatemic throughout the year. In the spring, during the pasture sprouting (November and December), cows grazing on clay soil were more predisposed to metabolic alkalosis, compared to cows kept on pastures located in sandy soil. Metabolic alkalosis was characterized by low blood levels of potassium and chlorine. Normal serum levels of copper, 0.79 and 9.81mu g/ml, and zinc, 1.42 and 1.33mu g/ml were observed in cows grazing on sandy and clay soils, respectively. However, these minerals were found in low concentrations on the pasture. The type of soil affected the mineral composition of the brachiaria pasture, and the blood serum levels of phosphates, potassium, magnesium, chlorine, copper, and zinc. Higher serum levels of phosphates, magnesium, potassium and chlorine were observed on animals grazing on sandy than on clay soil.

Durante 13 meses foram acompanhadas as mudanças sazonais dos eletrólitos cálcio (Ca), fosfatos (PO4), potássio (K), cloretos (Cl), cobre (Cu) e zinco (Zn) no sangue de 20 de vacas "aneloradas" mantidas sob pastejo contínuo de Brachiaria decumbens com alta taxa de lotação. As vacas apresentaram-se hipocalcêmicas e hipofosfatêmicas durante praticamente todo o ano. Na primavera, com a brotação dos pastos (novembro e dezembro), vacas mantidas em pastos de solo argiloso foram mais propensas à alcalose metabólica, caracterizada por hipocalemia e hipocloremia, do que vacas mantidas em pastos de solo arenoso. Os animais apresentaram-se com níveis séricos normais de Cu, 0,79 e 0,81mi g/ml e Zn, 1,43 e 1,33mi g/ml, quando mantidas em solos arenoso e argiloso, respectivamente, apesar de os pastos estarem deficientes nesses minerais. O tipo de solo alterou a composição de minerais na braquiária e influiu significativamente nos níveis séricos de P, Mg, K, Cl e Zn. Solos arenosos mostraram teores séricos significativamente mais elevados de P, Mg, K e Cl do que os solos argilosos.

Quercetin inhibits neutrophil extracellular traps release and their cytotoxic effects on A549 cells, as well the release and enzymatic activity of elastase and myeloperoxidase / Quercetina inibe a liberação das armadilhas extracelulares dos neutrófilos e a atividade tóxica delas sobre células A549

Neutrophil extracellular traps (NETs) were first reported as a microbicidal strategy for activated neutrophils. Through an immunologic response against several stimuli, neutrophils release their DNA together with proteins from granules, nucleus, and cytoplasm (e.g., elastase and myeloperoxidase). To date, NETs have been implicated in tissue damage during intense inflammatory processes, mainly when their release is dependent on oxygen radical generation. Flavonoids are antioxidant and anti-inflammatory agents; of these, quercetin is commonly found in our daily diet. Therefore, quercetin could exert some protective activity against tissue damage induced by NETs. In our in vitro assays, quercetin reduced NETs, myeloperoxidase (MPO), and elastase release from neutrophils stimulated with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). The activity of these enzymes also decreased in the presence of quercetin. Quercetin also reduced the cytotoxic effect of NETs on alveolar cells (A549 cell line). Further, in silico assays indicated favorable interactions between quercetin and NET proteins (MPO and elastase). Overall, our results demonstrate that quercetin decreases deleterious cellular effects of NETs by reducing their release from activated neutrophils, and diminishing the enzymatic activity of MPO and elastase, possibly through direct interaction.

As armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) foram relatadas pela primeira vez como uma estratégia microbicida para neutrófilos ativados. Por meio de uma resposta imunológica contra vários estímulos, os neutrófilos liberam seu DNA ligado a proteínas de grânulos, núcleo e citoplasma (por exemplo, elastase e mieloperoxidase). Até o momento, os NETs têm sido implicadas em danos aos tecidos durante processos inflamatórios intensos, principalmente quando sua liberação depende da geração de radicais de oxigênio. Os flavonóides são agentes antioxidantes e anti-inflamatórios, e destes, a quercetina é comumente encontrada em nossa dieta diária. Portanto, a quercetina pode exercer alguma atividade protetora contra o dano tecidual induzido por NETs. Em nossos ensaios in vitro, a quercetina reduziu a liberação das NETs, mieloperoxidase (MPO) e elastase a partir de neutrófilos estimulados com forbol 12-miristato 13-acetato (PMA). A atividade dessas enzimas também foi diminuída na presença de quercetina. A quercetina também reduziu o efeito citotóxico dos NETs sobre células alveolares (linha celular A549). Além disso, os ensaios in silico indicaram interações favoráveis entre a quercetina e as proteínas da NET (MPO e elastase). No geral, nossos resultados demonstram que a quercetina diminui os efeitos deletérios das NETs, reduzindo sua liberação à partir de neutrófilos ativados e diminuindo a atividade enzimática de MPO e elastase, possivelmente por meio de interação direta.