Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.

Identificação de Neospora caninum por PCR em cordão umbilical de bezerros recém nascido no Brasil / PCR-based identification of Neospora caninum in the umbilical cord of a newborn calf in Brazil

This study was conducted at a beef cattle breeding farm in the far southern region of Brazil. The birth of a calf with unilateral corneal opacity was immediately reported to the Laboratory of Parasitology, in the Universidade Federal de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil; blood was collected from the cow and calf before colostrum intake. The umbilical cords from this calf and from six other healthy animals were collected. Serological examination, utilizing an indirect fluorescent antibody test, was done using a cut-off point of 1:100. Polymerase chain reaction (PCR) was also performed using the umbilical cord samples. Serological tests showed that the calf was positive for Neospora caninum at birth, with a titer of 1:1600; a titer of 1:3200 was reported in the dam. PCR, using umbilical cord tissue from the affected animal, was positive for the presence of this parasite, and the molecular identity of the amplified product was confirmed by sequencing. Therefore, the detection of N. caninum DNA in the umbilical cord represents a novel alternative test for the diagnosis of this parasitic infection in newborn calves that are clinically suspected to have neosporosis.(AU)

O estudo foi realizado em uma fazenda de criação de gado de corte na região do extremo sul do Brasil. O nascimento de um bezerro com opacidade unilateral da córnea foi imediatamente relatado ao Laboratório de Parasitologia da Universidade Federal de Pelotas (RS) e coletou-se sangue da vaca e do bezerro antes da ingestão do colostro. Foram coletados sangue e cordão umbilical do bezerro com opacidade na córnea bem como de outros seis bezerros aparentemente saudáveis antes da ingestão de colostro. Foram realizados exames sorológicos utilizando o teste indireto de anticorpos fluorescentes (IFAT) com ponto de corte de 1: 100 e reação em cadeia da polimerase (PCR). O resultado dos exames sorológicos mostraram que o bezerro foi positivo para N. caninum ao nascer com titulação de 1:1600 e o de sua mãe foi de 1:3200 na IFAT. A PCR do cordão umbilical foi positiva para o agente no animal com opacidade córnea unilateral e a identidade molecular do produto amplificado foi confirmada por sequenciamento. A detecção de DNA de N. caninum no cordão umbilical é uma nova alternativa para o diagnóstico deste agente em bezerros recém-nascidos com suspeita clínica de neosporose.(AU)

The incidence and productive significance of ovine toxoplasmosis in southern Brazil / Incidência e significância econômica da toxoplasmose ovina no sul do Brasil

This research aimed to determine incidence of Toxoplama gondii infection in Corriedale sheep in southern Brazil during pregnancy and the extent of associated losses. Blood samples were collected from 411 Corriedale sheep in two flocks at different locations in the state of Rio Grande do Sul (Brazil). Presence of T. gondii was diagnosed by the Indirect Fluorescent Antibody Technique (IFAT). Seroprevalence of T. gondii during pre-mating was 20.2%, with no significant difference between the two flocks studied. Infection by T. gondii was influenced by ewes'age (P0.05). The pre-mating seroprevalence did not influence either returning to estrus or pregnancy rates. Weaning rate was significantly higher in pre-positive dams compared to negative ones (87.9 and 74.1%, respectively - P 0.05). The incidence of seroconversion was 16.5% (54/328). In seroconverted ewes, a high rate of return to estrus was observed (P0.05). The incidence of toxoplasmosis suggests production losses equivalent to 1.87% per year, in this system production. In addition, toxoplasmosis decreased the number of lambs per ewe. Therefore, to improve livestock performance, T. gondii infection should be monitored and controlled in the studied area.(AU)

Este trabalho tem como objetivo determinar a incidência da infecção pelo T. gondii em ovinos, durante o período gestacional e a extensão das perdas associadas. Amostras de sangue foram coletadas de 411 ovelhas Corriedale em dois rebanhos, em diferentes locais do Rio Grande do Sul, Brasil. Presença de T. gondii foi diagnosticada pela técnica de imunofluorescência indireta (RIFI). A soroprevalência no pré-acasalamento foi de 20,2%, sem diferença significativa entre os dois rebanhos estudados. A infecção por T. gondii foi influenciada pela idade (P 0,05). A soroprevalência no pré-acasalamento não influenciou a taxa de retorno ao estro e a taxa de prenhez. Taxa de desmame foi significativamente maior nas ovelhas positivas na pré-cobertura em comparação com as negativas (87,9 e 74,1%, respectivamente - P 0,05). A incidência de soroconversão foi de 16,5% (54/328). Em ovelhas que soroconverteram, uma alta taxa de retorno ao estro foi observada (P0,05). A incidência da toxoplasmose sugere perdas de produção equivalentes a 1,87% ao ano nestes sistemas. Além disso, a toxoplasmose diminuiu o número de cordeiros por ovelha. Portanto, para melhorar o desempenho produtivo nos rebanhos ovinos, a infecção por T. gondii deve ser monitorada e controlada na área estudada.(AU)

Transplacental transmission of Anaplasma marginale in beef cattle chronically infected in southern Brazil / Transmissão transplacentária de Anaplasma marginale em bovinos de corte cronicamente infectados no sul do Brasil

In this study, we have investigated the incidence of transplacental transmission of Anaplasma marginale in chronically infected cows with no history of acute anaplasmosis during gestation. In addition, we evaluated various techniques for detection of transplacental transmission of A. marginale. Blood samples were collected from 30 cows at three different periods: at the time of artificial insemination, at gestational diagnosis, and after calving. Also, blood was collected from the newborn calves, including one sample before colostrum intake, and another three days after birth. A. marginale-specific antibodies were detected in 100% of the cows with an indirect fluorescent antibody test (IFAT), and in 97% of them, using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Also, we observed that all of the three-day-old newborn calves were seropositive by IFAT. According to polymerase chain reaction, 63.3% of the cows were carriers of A. marginale, as well as 6.7% of the newborn calves. This represented a transplacental transmission rate of 10.5%. Furthermore, a correlation of 93.3% was observed between the two serodiagnostic techniques, demonstrating that both ELISA and IFAT can be used in epidemiological surveys of A. marginale. These results confirm the occurrence of transplacental transmission of A. marginale in chronically infected cows and suggest the importance of this transmission route in areas of enzootic instability.

O objetivo do estudo foi avaliar a transmissão transplacentária de A. marginale em bovinos de corte cronicamente infectados utilizando diferentes testes de diagnóstico. Amostras de sangue foram colhidas de trinta matrizes durante o período de inseminação artificial, no diagnóstico de gestação e após o parto. Foi colhido sangue dos bezerros antes da ingestão do colostro e três dias após o nascimento. Anticorpos foram detectados em 100% das matrizes pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e 97% pelo Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (ELISA). Aos três dias de idade 100% dos bezerros estavam soropositivos na RIFI. Conforme os resultados da PCR, 63.3% das matrizes e 6.7% dos bezerros eram portadores do agente, representando taxa de transmissão transplacentária de 10.5%. Correlação de 93.3% foi observada entre os resultados das técnicas sorológicas, demonstrando que tanto ELISA quanto RIFI podem ser utilizadas em levantamentos epidemiológicos do agente. Os resultados confirmaram a transmissão transplacentária do agente em vacas cronicamente infectadas. Isto demonstra a importãncia desta via de transmissão do A. marginale em áreas de instabilidade enzoótica.

Parâmetros da fase de vida livre de Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae): adaptado ao clima subtropical / Parameters of free-living phase of Rhipicephalus sanguineus (Latreille, 1806) (Acari: Ixodidae): adapted to the subtropical climate

Rhipicephalus sanguineus é considerada a espécie de ixodídeo mais prevalente no mundo e foi introduzida no meio urbano pelo cão doméstico, seu principal hospedeiro. O presente estudo teve por objetivo conhecer o desempenho biológico da fase de vida livre de R. sanguineus, adaptado à região Sul do Rio Grande do Sul, por meio da estimativa de parâmetros biológicos, sob condições controladas de temperatura (27 ± 1°C) e umidade relativa (> 70,0%). Foram coletadas teleóginas pré e pós-desprendimento dos cães hospedeiros, sendo cada grupo experimental constituído de 200 teleóginas. Verificou-se que a massa média de cada teleógina foi de 170 mg, o período de pré-postura de quatro dias, a massa total de ovos de 100 mg, a massa da quenógina de 30 mg e a longevidade larval de 31 dias, com índices de eficácia reprodutiva e nutricional de 61,0 e 74,0%, respectivamente. Quanto à dinâmica de postura, 98,5% foram ovipostos na primeira semana de incubação e a eclodibilidade foi de 94,5%. A análise dos parâmetros biológicos de R. sanguineus revelou que não houve diferença estatística (p > 0,05) entre as fêmeas coletadas diretamente do corpo do hospedeiro e aquelas provenientes do ambiente. Os dados biológicos observados em R. sanguineus adaptados às condições climáticas do Sul do Rio Grande do Sul são similares aos de outras regiões do Brasil. Além disso, as coletas de R. sanguineus para estudos epidemiológicos podem ser realizadas tanto do ambiente quanto do corpo do hospedeiro, devido à similaridade que ambos os grupos apresentam em seus parâmetros biológicos.

Rhipicephalus sanguineus is considered the most widespread ixodid species in the world. It was introduced in the urban area by the domestic dog, which is its primary host. The present study had as its aim to know the biological performance of the freeliving phase of R. sanguineus, adapted to the Southern of Rio Grande do Sul, through estimation of biological parameters under controlled temperature conditions (27 ± 1°C) and relative humidity (> 70.0%). Engorged females ticks were collected from the environment and attached to the body of dogs and each group consisted of 200 ticks. The obtained results demonstrated that the mean mass of each engorged female was 170 mg, the pre-oviposition period was four days, the total eggs mass weight was of 100 mg, the mass of female tick after laying was 30 mg, larval longevity has 31 days, and reproductive and nutrition efficacy index corresponded to 61 and 74% respectively. Regarding posture dynamic, 98.5% of eggs were positioned in the first week of incubation and the larval hatching rate was 94.5%. The biological parameter analysis of R. sanguineus showed that there was no statistical difference (p > 0.05) between females collected directly from the host body and those from the environment. Biological data seen in R. sanguineus adapted to climate conditions of South Rio Grande do Sul are similar to other Brazilian areas. Furthermore, R. sanguineus collects for epidemiological studies can be carried out both from dogs and from the environment, due to the similarity that both groups present in their biological parameters.