Uso do extrato de Aloe vera na criopreservação do sêmen suíno / Use of Aloe vera extract in swine semen criopreservation

A gema de ovo é utilizada como agente crioprotetor em diluentes de congelação de sêmen visando à proteção contra o choque térmico, apesar de apresentar uma possibilidade de contaminação microbiológica. Autores buscam no Aloe vera, um meio alternativo para a conservação do sêmen. O objetivo foi avaliar o uso do crioprotetor Aloe vera na criopreservação do sêmen de suíno. Foram utilizados 25 ejaculados, coletados através da técnica da mão enluvada. As amostras foram diluídas no diluente de refrigeração (gema de ovo 10,0%, Aloe vera 10, 20 e 30%) a 17 °C, diluente de congelação (diluente de refrigeração + glicerol 6,0%) 5 °C e armazenados em palhetas. As palhetas foram avaliadas quanto ao vigor, motilidade, funcionalidade da membrana, vitalidade, integridade de acrossoma e na análise de sêmen assistida (CASA). Os dados foram avaliados quanto à normalidade, em seguida analisados utilizando ANOVA e comparações múltiplas, as análises foram realizadas com nível significância de 5,0%, utilizando o programa R3.4.0. Utilizou-se estatística descritiva para dados de vigor, motilidade e CASA. Na avaliação do sêmen descongelado para a funcionalidade da membrana, vitalidade e integridade de acrossoma, os maiores valores foram encontrados para as amostras com a gema de ovo (p0,05). Os dados de vigor, motilidade e CASA, das amostras utilizando o Aloe vera, apresentaram valores de 0,0. Os resultados mostraram que as diferentes concentrações de Aloe vera não exerceram o efeito crioprotetor desejado sobre a célula espermática, sendo assim, entende-se que são necessários maiores estudos sobre a sua ação na conservação de sêmen, bem como uma possível interação com os espermatozoides suínos...

Egg yolk is used as a cryoprotective agent in semen freezing diluents for protection against thermal shock, despite the possibility of microbiological contamination. Authors search for Aloe vera, an alternative medium for the conservation of semen. The objective was to evaluate the use of the cryoprotectant Aloe vera in the cryopreservation of swine semen. We used 25 ejaculates, collected through the gloved hand technique. The samples were diluted in the coolant diluent (10.0% egg yolk, Aloe vera 10, 20 and 30%) at 17 °C, freezing diluent (refrigerant diluent + glycerol 6.0%) at 5 °C and stored in vales. The vanes were evaluated for vigor, motility, membrane functionality, vitality, acrosome integrity and assisted semen analysis (CASA). The data were evaluated for normality, then analyzed using ANOVA and multiple comparisons, the analyzes were performed with a significance level of 5.0%, using the program R3.4.0. Descriptive statistics were used for data on vigor, motility and CASA. In the evaluation of thawed semen for membrane functionality, acrosome integrity and vitality, the highest values were found for the egg yolk samples (p0.05). The data of vigor, motility and CASA, of the samples using Aloe vera presented values of 0.0. The results showed that the different concentrations of Aloe vera did not exert the desired cryoprotective effect on the sperm cell, so it is understood that further studies are needed on its action on semen conservation, as well as a possible interaction with swine spermatozoa. On the other hand, it is believed that additional studies on the cooling curve of the porcine semen are still necessary, aiming at its cryopreservation.

Uso do extrato de Aloe vera na criopreservação do sêmen suíno / Use of Aloe vera extract in swine semen criopreservation

A gema de ovo é utilizada como agente crioprotetor em diluentes de congelação de sêmen visando à proteção contra o choque térmico, apesar de apresentar uma possibilidade de contaminação microbiológica. Autores buscam no Aloe vera, um meio alternativo para a conservação do sêmen. O objetivo foi avaliar o uso do crioprotetor Aloe vera na criopreservação do sêmen de suíno. Foram utilizados 25 ejaculados, coletados através da técnica da mão enluvada. As amostras foram diluídas no diluente de refrigeração (gema de ovo 10,0%, Aloe vera 10, 20 e 30%) a 17 °C, diluente de congelação (diluente de refrigeração + glicerol 6,0%) 5 °C e armazenados em palhetas. As palhetas foram avaliadas quanto ao vigor, motilidade, funcionalidade da membrana, vitalidade, integridade de acrossoma e na análise de sêmen assistida (CASA). Os dados foram avaliados quanto à normalidade, em seguida analisados utilizando ANOVA e comparações múltiplas, as análises foram realizadas com nível significância de 5,0%, utilizando o programa R3.4.0. Utilizou-se estatística descritiva para dados de vigor, motilidade e CASA. Na avaliação do sêmen descongelado para a funcionalidade da membrana, vitalidade e integridade de acrossoma, os maiores valores foram encontrados para as amostras com a gema de ovo (p<0,05), e entre as amostras que utilizaram o Aloe vera, não foram encontradas diferenças significativas entre as diferentes concentrações testadas (p>0,05). Os dados de vigor, motilidade e CASA, das amostras utilizando o Aloe vera, apresentaram valores de 0,0. Os resultados mostraram que as diferentes concentrações de Aloe vera não exerceram o efeito crioprotetor desejado sobre a célula espermática, sendo assim, entende-se que são necessários maiores estudos sobre a sua ação na conservação de sêmen, bem como uma possível interação com os espermatozoides suínos...(AU)

Egg yolk is used as a cryoprotective agent in semen freezing diluents for protection against thermal shock, despite the possibility of microbiological contamination. Authors search for Aloe vera, an alternative medium for the conservation of semen. The objective was to evaluate the use of the cryoprotectant Aloe vera in the cryopreservation of swine semen. We used 25 ejaculates, collected through the gloved hand technique. The samples were diluted in the coolant diluent (10.0% egg yolk, Aloe vera 10, 20 and 30%) at 17 °C, freezing diluent (refrigerant diluent + glycerol 6.0%) at 5 °C and stored in vales. The vanes were evaluated for vigor, motility, membrane functionality, vitality, acrosome integrity and assisted semen analysis (CASA). The data were evaluated for normality, then analyzed using ANOVA and multiple comparisons, the analyzes were performed with a significance level of 5.0%, using the program R3.4.0. Descriptive statistics were used for data on vigor, motility and CASA. In the evaluation of thawed semen for membrane functionality, acrosome integrity and vitality, the highest values were found for the egg yolk samples (p<0.05), and among the samples that used Aloe vera, found significant differences between the different concentrations tested (p>0.05). The data of vigor, motility and CASA, of the samples using Aloe vera presented values of 0.0. The results showed that the different concentrations of Aloe vera did not exert the desired cryoprotective effect on the sperm cell, so it is understood that further studies are needed on its action on semen conservation, as well as a possible interaction with swine spermatozoa. On the other hand, it is believed that additional studies on the cooling curve of the porcine semen are still necessary, aiming at its cryopreservation.(AU)

Maturação in vitro de oócitos ovinos submetidos à congelação lenta / In vitro maturation of cryopreserved ovine oocytes subjected to slow freezing

A maturação in vitro de oócitos submetidos ao processo de criopreservação, ainda compreende um desafio para o sucesso da reprodução assistida na medicina veterinária. Devido a isso, estudos são desenvolvidos a fim de identificar, amenizar e superar as limitações encontradas. Nesse sentido, objetivou-se realizar a avaliação da maturação in vitro de oócitos ovinos após criopreservação pelo método de congelação lenta. Para tanto, foram colhidos 204 ovários oriundos de 102 ovelhas púberes (SPRD) pertencentes a abatedouros localizados no município de Teresina, Piauí. Os ovários foram transportados para o laboratório e, posteriormente, foram aspirados por meio de um aspirador cirúrgicoadaptado. Um total de 180 oócitos foram desnudados e, então, submetidos à congelação lenta em sistema automatizado (TK 3000®). Posteriormente foram descongelados, e submetidos à maturação in vitro(MIV). Em seguida, procedeu-se a avaliação da maturação nuclear. Os resultados foram avaliados por meio do teste de Qui-quadrado de Pearson (P ≤ 0,05). Após descongelação, 22,8% dos oócitos na avaliação em estereomicroscópio (45x) apresentavam lesões de zona pelúcida e de oolema. Dos 139 oócitos submetidos a MIV, oito maturaram (5,75%). Conclui-se que a congelação lenta de oócitos ovinos pode influenciar a maturação in vitro, devido a lesões de membrana plasmática e zona pelúcida.(AU)

The in vitro maturation of oocytes submitted to the cryopreservation process, still comprises a challenge for the success of assisted reproduction in veterinary medicine. Due to this, studies are developed in order to identify, ameliorate and overcome the limitations found. The objective of this study was to evaluate the in vitro maturation of ovine oocytes after cryopreservation by the slow freezing method. For that, 204 ovaries from 102 pubertal sheep (SPRD) belonging to slaughterhouses located in the city of Teresina, Piauí, were collected. The ovaries were transported to the laboratory and subsequently aspirated by means of an adapted surgical aspirator. A total of 180 CCO's were obtained, which were stripped and then subjected to slow freezing in an automated system (TK 3000®). Later they were thawed and submitted to in vitro maturation (IVM). Next, the nuclear maturation was evaluated. Results were evaluated using Pearson's chi-square test (P ≤ 0.05). After thawing, 22.8% of the oocytes in the stereomicroscope (45x) evaluation presented lesions of the zona pellucida and oolema. Of the 139 oocytes submitted to IVM, eight maturated (5.75%). It is concluded that slow freezing of sheep oocytesmay influence in vitro maturation due to plasma membrane and zona pellucida lesions.(AU)

Maturação in vitro de oócitos ovinos submetidos à congelação lenta / In vitro maturation of cryopreserved ovine oocytes subjected to slow freezing

A maturação in vitro de oócitos submetidos ao processo de criopreservação, ainda compreende um desafio para o sucesso da reprodução assistida na medicina veterinária. Devido a isso, estudos são desenvolvidos a fim de identificar, amenizar e superar as limitações encontradas. Nesse sentido, objetivou-se realizar a avaliação da maturação in vitro de oócitos ovinos após criopreservação pelo método de congelação lenta. Para tanto, foram colhidos 204 ovários oriundos de 102 ovelhas púberes (SPRD) pertencentes a abatedouros localizados no município de Teresina, Piauí. Os ovários foram transportados para o laboratório e, posteriormente, foram aspirados por meio de um aspirador cirúrgicoadaptado. Um total de 180 oócitos foram desnudados e, então, submetidos à congelação lenta em sistema automatizado (TK 3000®). Posteriormente foram descongelados, e submetidos à maturação in vitro(MIV). Em seguida, procedeu-se a avaliação da maturação nuclear. Os resultados foram avaliados por meio do teste de Qui-quadrado de Pearson (P ≤ 0,05). Após descongelação, 22,8% dos oócitos na avaliação em estereomicroscópio (45x) apresentavam lesões de zona pelúcida e de oolema. Dos 139 oócitos submetidos a MIV, oito maturaram (5,75%). Conclui-se que a congelação lenta de oócitos ovinos pode influenciar a maturação in vitro, devido a lesões de membrana plasmática e zona pelúcida.

The in vitro maturation of oocytes submitted to the cryopreservation process, still comprises a challenge for the success of assisted reproduction in veterinary medicine. Due to this, studies are developed in order to identify, ameliorate and overcome the limitations found. The objective of this study was to evaluate the in vitro maturation of ovine oocytes after cryopreservation by the slow freezing method. For that, 204 ovaries from 102 pubertal sheep (SPRD) belonging to slaughterhouses located in the city of Teresina, Piauí, were collected. The ovaries were transported to the laboratory and subsequently aspirated by means of an adapted surgical aspirator. A total of 180 CCO's were obtained, which were stripped and then subjected to slow freezing in an automated system (TK 3000®). Later they were thawed and submitted to in vitro maturation (IVM). Next, the nuclear maturation was evaluated. Results were evaluated using Pearson's chi-square test (P ≤ 0.05). After thawing, 22.8% of the oocytes in the stereomicroscope (45x) evaluation presented lesions of the zona pellucida and oolema. Of the 139 oocytes submitted to IVM, eight maturated (5.75%). It is concluded that slow freezing of sheep oocytesmay influence in vitro maturation due to plasma membrane and zona pellucida lesions.

Seleção de receptoras em um programa de transferência de embriões (pive) em bovinos no nordeste do Brasil / Selection procedure in embryo transfer program in cattle at northeastern Brazil

A seleção de receptoras constitui-se em uma das principais etapas de um programa de transferência de embriões (TE), influenciando substancialmente os resultados econômicos da aplicação dessa biotécnica. Considerando os desafios enfrentados para obtenção deum número de receptoras suficiente para atender à demanda de um programa de TE em bovinos, o presente estudo foi realizado com o objetivo de ampliar os elementos utilizados como critérios de pré-seleção dessas matrizes, visando incrementar o número de fêmeas disponíveis para a etapa de sincronização de ciclo estral. Para tanto, 1017 fêmeas das raças Girolando, Gir Leiteiro e Nelore,oriundas de propriedades localizadas no Nordeste brasileiro, foram avaliadas por meio de exames ginecológicos, desde as etapas preliminares de seleção, até ocorrência de parto a termo; identificando-se dois grupos experimentais,representados pelos animais que apresentavam folículos maduros ou corpos lúteos por ocasião da pré-seleção. Os resultados obtidos revelaram que as matrizes que apresentam folículos maduros por ocasião do exame ginecológico preliminar, de admissão no programa de transferência de embriões na condição dereceptoras, apresentaram rendimentos finais equivalentes aos daquelas admitidas pela presença de corpo lúteo no mesmo momento, independentemente do ovário (direito ou esquerdo). O estudo demonstrou, ainda, que e mbriões em estádios de blastocisto (inicial, tipicamente caracterizado ou expandido) devem ser prioritariamente selecionados para transferência.

Recipent selection comprises an important step for embryo transfer (ET) programs, affecting significantly the economic results of that biotechnology. Considering the challenges for obtaining recipient cows in a number big enough to attend the demand of an ET program, this research was carried out with the aim of to expand criteria of recipient pre-selection, in order to increase the number of females disposable for estrum cycle synchronization. Then, 1017 cows of different breeds (Girolando, GirLeiteiro and Nelore) from farms located in Brazilian Northeast, where evaluated by gynecological exams since preliminary phases of selection up to calving birth, divided into experimental groups represented by females presenting mature follicles or corpus luteal at pre-selection. Results obtained have shown similar final yields for the two experimental groups, revealing that both ovarian structures should be used as criteria for including matrices in ET programs. In addition, embryos in stage of blastocyst (Initial, completely characterized or expanded) must be preferred for ET.

Seleção de receptoras em um programa de transferência de embriões (pive) em bovinos no nordeste do Brasil / Selection procedure in embryo transfer program in cattle at northeastern Brazil

A seleção de receptoras constitui-se em uma das principais etapas de um programa de transferência de embriões (TE), influenciando substancialmente os resultados econômicos da aplicação dessa biotécnica. Considerando os desafios enfrentados para obtenção deum número de receptoras suficiente para atender à demanda de um programa de TE em bovinos, o presente estudo foi realizado com o objetivo de ampliar os elementos utilizados como critérios de pré-seleção dessas matrizes, visando incrementar o número de fêmeas disponíveis para a etapa de sincronização de ciclo estral. Para tanto, 1017 fêmeas das raças Girolando, Gir Leiteiro e Nelore,oriundas de propriedades localizadas no Nordeste brasileiro, foram avaliadas por meio de exames ginecológicos, desde as etapas preliminares de seleção, até ocorrência de parto a termo; identificando-se dois grupos experimentais,representados pelos animais que apresentavam folículos maduros ou corpos lúteos por ocasião da pré-seleção. Os resultados obtidos revelaram que as matrizes que apresentam folículos maduros por ocasião do exame ginecológico preliminar, de admissão no programa de transferência de embriões na condição dereceptoras, apresentaram rendimentos finais equivalentes aos daquelas admitidas pela presença de corpo lúteo no mesmo momento, independentemente do ovário (direito ou esquerdo). O estudo demonstrou, ainda, que e mbriões em estádios de blastocisto (inicial, tipicamente caracterizado ou expandido) devem ser prioritariamente selecionados para transferência.(AU)

Recipent selection comprises an important step for embryo transfer (ET) programs, affecting significantly the economic results of that biotechnology. Considering the challenges for obtaining recipient cows in a number big enough to attend the demand of an ET program, this research was carried out with the aim of to expand criteria of recipient pre-selection, in order to increase the number of females disposable for estrum cycle synchronization. Then, 1017 cows of different breeds (Girolando, GirLeiteiro and Nelore) from farms located in Brazilian Northeast, where evaluated by gynecological exams since preliminary phases of selection up to calving birth, divided into experimental groups represented by females presenting mature follicles or corpus luteal at pre-selection. Results obtained have shown similar final yields for the two experimental groups, revealing that both ovarian structures should be used as criteria for including matrices in ET programs. In addition, embryos in stage of blastocyst (Initial, completely characterized or expanded) must be preferred for ET.(AU)