Seroprevalence of arboviruses in Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) of synanthropic habitats in the Iguaçu National Park, Brazilian Atlantic Forest / Soroprevalência de arbovirus em Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) de hábitos sinantrópicos no Parque Nacional do Iguaçu, Mata Atlântica brasileira

ABSTRACT: Arboviruses are agents transmitted by arthropods and represent a considerable threat to public health worldwide, causing diseases in humans and animals. A serological investigation was carried out to detect total antibodies against different types of arboviruses in free-living coatis (Nasua nasua) from the Iguaçu National Park (INP) through the Hemagglutination Inhibition test. Serum samples were tested using antigens from 33 arboviruses belonging to the genera Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus, and Phlebovirus. The data showed that 23.6% (17/72) of coatis were seropositive for at least one of the tested antigens, including monotypic and heterotypic reactions. Seropositivity was detected for Alphavirus (5.9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64.7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, WNV, DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4, and NJLV), Phlebovirus (88.2%, 15/17; ICOV and BUJV) and Orthobunyavirus (5.9%, 1/17; ORIV). The presence of antibodies to these viruses in coatis from INP indicated an apparent silent circulation of arbovirus, implying N. nasua to be a possible amplifying host of these arboviruses in the studied area. The data reported also serve as a warning about the possible risk of establishing an arbovirus transmission cycle involving vector arthropods and coatis, or even other wild animals, consequently, including humans in this transmission chain.

RESUMO: Os arbovírus são agentes transmitidos por artrópodes que representam considerável ameaça à saúde pública em todo o mundo, causando doenças em humanos e animais. Neste trabalho foi realizada investigação sorológica para detecção de anticorpos totais contra diferentes tipos de arbovírus em quatis (Nasua nasua) de vida livre do Parque Nacional do Iguaçu (PNI) através do teste de Inibição da Hemaglutinação. Amostras de soro foram testadas utilizando-se antígenos de 33 arbovírus pertencentes aos gêneros Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus. As análises evidenciaram que 23,6% (17/72) dos quatis apresentaram soropositividade para pelo menos um dos antígenos testados, incluindo reações monotípicas e heterotípicas. Foi detectada soropositividade para Alphavirus (5,9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64,7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, VNO, DEN1, DEN2, DEN3, DEN4, NJLV), Phlebovirus (88,2%, 15/17; ICOV, BUJV) e Orthobunyavirus (5,9%, 1/17; ORIV). A presença de anticorpos para esses vírus em quatis do PNI indica uma aparente transmissão silenciosa de arbovírus, incluindo N. nasua como um possível amplificador destes arbovírus na área estudada. Os dados encontrados servem de alerta quanto ao possível risco de estabelecimento de um ciclo de transmissão de arbovírus envolvendo insetos vetores e quatis, ou ainda, outros animais silvestres, consequentemente, podendo incluir o homem nessa cadeia de transmissão.

Seroprevalence of arboviruses in Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) of synanthropic habitats in the Iguaçu National Park, Brazilian Atlantic Forest / Soroprevalência de arbovirus em Nasua nasua (Mammalia, Carnivora, Procyonidae) de hábitos sinantrópicos no Parque Nacional do Iguaçu, Mata Atlântica brasileira

Os arbovírus são agentes transmitidos por artrópodes que representam considerável ameaça à saúde pública em todo o mundo, causando doenças em humanos e animais. Neste trabalho foi realizada investigação sorológica para detecção de anticorpos totais contra diferentes tipos de arbovírus em quatis (Nasua nasua) de vida livre do Parque Nacional do Iguaçu (PNI) através do teste de Inibição da Hemaglutinação. Amostras de soro foram testadas utilizando-se antígenos de 33 arbovírus pertencentes aos gêneros Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus e Phlebovirus. As análises evidenciaram que 23,6% (17/72) dos quatis apresentaram soropositividade para pelo menos um dos antígenos testados, incluindo reações monotípicas e heterotípicas. Foi detectada soropositividade para Alphavirus (5,9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64,7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, VNO, DEN1, DEN2, DEN3, DEN4, NJLV), Phlebovirus (88,2%, 15/17; ICOV, BUJV) e Orthobunyavirus (5,9%, 1/17; ORIV). A presença de anticorpos para esses vírus em quatis do PNI indica uma aparente transmissão silenciosa de arbovírus, incluindo N. nasua como um possível amplificador destes arbovírus na área estudada. Os dados encontrados servem de alerta quanto ao possível risco de estabelecimento de um ciclo de transmissão de arbovírus envolvendo insetos vetores e quatis, ou ainda, outros animais silvestres, consequentemente, podendo incluir o homem nessa cadeia de transmissão.

Arboviruses are agents transmitted by arthropods and represent a considerable threat to public health worldwide, causing diseases in humans and animals. A serological investigation was carried out to detect total antibodies against different types of arboviruses in free-living coatis (Nasua nasua) from the Iguaçu National Park (INP) through the Hemagglutination Inhibition test. Serum samples were tested using antigens from 33 arboviruses belonging to the genera Alphavirus, Flavivirus, Orthobunyavirus, and Phlebovirus. The data showed that 23.6% (17/72) of coatis were seropositive for at least one of the tested antigens, including monotypic and heterotypic reactions. Seropositivity was detected for Alphavirus (5.9%, 1/17; WEEV), Flavivirus (64.7%, 11/17; YFV, ILHV, SLEV, BSQV, ROCV, WNV, DENV-1, DENV-2, DENV-3, DENV-4, and NJLV), Phlebovirus (88.2%, 15/17; ICOV and BUJV) and Orthobunyavirus (5.9%, 1/17; ORIV). The presence of antibodies to these viruses in coatis from INP indicated an apparent silent circulation of arbovirus, implying N. nasua to be a possible amplifying host of these arboviruses in the studied area. The data reported also serve as a warning about the possible risk of establishing an arbovirus transmission cycle involving vector arthropods and coatis, or even other wild animals, consequently, including humans in this transmission chain.

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of IgY Anti-Borrelia anserina antibodies in Gallus gallus domesticus / Ensaio de imunoadsorção enzimático (ELISA) indireto para detecção de anticorpos IgY Anti-Borreliaanserina em Gallus gallus domesticus

This study aimed to promote the standardization of an indirect, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological detection of B. anserina in Gallus gallusdomesticus. An aliquoted sera from vaccinated chicken with B. anserina antigen (GI), experimental infected chickens with B. anserina (GII) and rustic poultry rearing of G. gallus (GIII) were tested with in-house ELISA developed to detect serum antibodies against B. anserina in G. gallus domesticus. On average, the experimentally infected chickens became positive at 9 DPI a mean ± standard deviation (SD) ODI value of 163.11 ± 70.65. The highest observed Optical Density Index (ODI) was 372.54 ± 132.39, at 26 DPI, and the highest overall ODI value was 626.51. The vaccinated chickens became positive between 8 and 10 DPV, with an ODI of 245.59 at 10 DPV, with an overall maximum ODI of 543.13. A total of 108 blood samples were collected from poultry raised on rustic farms. Of the total samples collected, 58.33% (63/108) were considered positive for B. anserina. The maximum ODI found among these rustic chickens was 283.24. This stardardization provided a sensitivity and specificity of 100%.

Este estudo teve como objetivo promover a padronização de um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para a detecção sorológica de Borrelia anserina em Gallus gallus domesticus. Um frango vacinado com antígeno de B. anserina (GI), frangos infectados experimentalmente com B. anserina (GII) e frangos criados de forma rústica (GIII) foram testados com ELISA indireto in house desenvolvido para a detecção sorológica contra B. anserina em G. gallus domesticus. Em média, os frangos infectados experimentalmente tornaram-se positivos aos 9º dia pós-inoculação (DPI), um valor do índice de densidade óptica (ODI) médio ± desvio padrão (SD) de 163,11 ± 70,65. O maior ODI observado foi 372,54 ± 132,39, em 26ºDPI, e o maior valor geral de ODI foi 626,51. Os frangos vacinados tornaram-se positivos entre 8º e 10° DPV, com um ODI de 245,59 a 10 DPV, com um ODI máximo geral de 543,13. Um total de 108 amostras de sangue foram coletadas de aves criadas em fazendas rústicas. Do total de amostras coletadas, 58,33% (63/108) foram consideradas positivas para B. anserina. O ODI máximo encontrado entre essas galinhas rústicas foi 283,24. Essa padronização proporcionou sensibilidade e especificidade de 100%.

Diversity of tick species (Acari: Ixodidae) in military training areas in Southeastern Brazil / Diversidade de espécies de carrapatos (Acari: Ixodidae) em áreas de instrução militar na região Sudeste do Brasil

Abstract Tick-borne pathogens belong to one of the two main groups of occupational biohazards, and occupational exposure to such agents puts soldiers at risk of zoonotic infections, such as those caused by rickettsiae. There are few studies on acarological fauna and occupational risk in military areas in Brazil. Thus, the present study aimed to analyze the diversity of ticks present in the military training areas of municipalities in the Southeast Region of Brazil. The ticks were collected from the selected areas using the dragging and flagging techniques as well as by visual detection on the operators' clothing, and environmental information was also recorded. A total of ten species were collected from the 66 surveyed areas, belonging to five genera and nine species: Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma longirostre, Amblyomma aureolatum, Dermacentor nitens, Rhipicephalus spp., Ixodes spp. and Haemaphysalis spp. The frequent presence of tick species in military training areas along with traces and sightings of wild animals, most commonly capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris), in most of the studied areas, indicates high levels of exposure of the military to tick vectors of spotted fever group rickettsiae and the possible occurrence of infections among the troops.

Resumo As doenças transmitidas por carrapatos estão entre os dois principais grupos de riscos biológicos ocupacionais. Tal exposição ocupacional de militares os colocam sob maior risco de adquirirem doenças zoonóticas, como infecções rickettsiais, entre outras. No Brasil, há raros estudos sobre fauna acarológica e o risco ocupacional em áreas militares. Neste sentido, o presente estudo teve por objetivo analisar a diversidade de carrapatos presentes em áreas de treinamento militar de municípios da região Sudeste do Brasil. Os carrapatos foram coletados nas áreas através de arrasto de flanela, bandeiramento e/ou coleta nas vestimentas do operador, sendo registradas também informações ambientais. Das 66 áreas pesquisadas, foram coletados 9.374 carrapatos, com uma diversidade de cinco gêneros, distribuídos em dez espécies: Amblyomma sculptum, Amblyomma dubitatum, Amblyomma brasiliense, Amblyomma longirostre, Amblyomma aureolatum, Amblyomma spp., Dermacentor nitens, Rhipicephalus spp., Ixodes spp. e Haemaphysalis spp. A presença frequente de espécies de carrapatos nas áreas de instrução militar, associada aos vestígios e à presença de animais silvestres, mais comumente de capivaras na maioria das áreas estudadas, evidencia uma grande exposição dos militares a carrapatos vetores de rickettsias do Grupo da Febre Maculosa e a possível ocorrência de casos humanos nas tropas.

Hemoparasites in Didelphis aurita from Seropédica, Rio de Janeiro state, Brazil / Hemoparasitos em Didelphis aurita capturados em Seropédica, estado do Rio de Janeiro, Brasi

The present study aimed to use polymerase chain reaction (PCR) to detect species of the order Piroplasmida, such as Anaplasma spp., Borrelia spp., and Ehrlichia spp., circulating in the blood of Didelphis aurita in a peridomiciliary environment. Blood samples collected from big-eared opossum (Didelphis aurita) were screened for hemoparasites using PCR. The extracted DNA was tested for tick-borne hemoparasites. We were unable to detect hemoparasites, such as Ehrlichia spp., Babesia spp., Anaplasma spp., and Borrelia spp. Theileria DNA was detected in only one sample screened using PCR for an approximately 650-base pair fragment of the 18S rRNA gene. Sequencing and BLAST analysis of a subset of the PCR amplicons revealed 97% (535/553 bp) identity with Theileria bicornis. The detection of Theileria sp. in D. aurita challenges us to pursue more in-depth studies of marsupial piroplasmosids and to evaluate the morphological aspects of the findings and their possible involvement in zoonoses.

O objetivo do presente estudo foi utilizar a reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar espécies da ordem Piroplasmida, como Anaplasma spp., Borrelia spp. e Ehrlichia spp., circulando no sangue de Didelphis aurita em ambiente peridomiciliar. Amostras de sangue coletadas de gambá da orelha preta (Didelphis aurita) foram triadas para hemoparasitas por meio da PCR. O DNA extraído foi testado para alguns hemoparasitas transmitidos por carrapatos. Não conseguimos detectar hemoparasitos, como Ehrlichia spp., Babesia spp., Anaplasma spp. e Borrelia spp. O DNA de Theileria foi detectado apenas em uma amostra. Um fragmento de ~650 pares de bases do gene 18S rRNA foi sequenciado. e a análise pelo BLAST (um subconjunto de amplicons de PCR) revelou uma identidade de 97% (535/553 pb) com Theileria bicornis. A detecção de Theileria sp. in D. aurita nos desafia a aprofundar estudos sobre piroplasmosídeos marsupiais e avaliar os aspectos morfológicos dos achados e seu possível envolvimento com zoonoses.

Questing ticks in Atlantic rainforest (Mata Atlantica) fragments in the municipality of Divino, Minas Gerais state, Brazil / Carrapatos na fase de vida livre em fragmentos de Mata Atlântica do município de Divino, Minas Gerais, Brasil

The tick species and tick-borne pathogens present in a group of questing ticks collected from forest fragments in a rural area in the municipality of Divino, Minas Gerais state, Brazil were evaluated. The collected ticks were divided into two groups those collected from around the edges of the fragments and those collected from the interior of the forest. In all the fragments, the ticks were collected using a dragging and flagging technique and by harvesting them from white fabric gaiters. The larvae, nymphs, and adults were all morphologically identified using specific taxonomic keys. The larvae were identified to the genus level. DNA was extracted from the ticks and tested for the presence of Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., and Theileria spp. using a conventional polymerase chain reaction (PCR). In total, 1,122 questing ticks (750 larvae, 367 nymphs, and five adults) and 18 larval clusters were evaluated. The main species found in the collected tick population were Amblyomma sculptum, A. auricularium, A. aureolatum, and A. pseudoconcolor, along with the larvae of Amblyomma spp. and Dermacentor spp. None of the tick samples gave a positive result when tested by PCR for the presence of DNA from Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., or Theileria spp.(AU)

Neste estudo avaliou-se a presença de espécies de carrapatos e a detecção de agentes patogênicos a eles associados. Os carrapatos de vida livre foram coletados em fragmentos florestais da área rural do Município de Divino, Minas Gerais, Brasil. Os carrapatos coletados foram divididos em dois grupos, aqueles que foram coletados na área da margem do fragmento (Borda) e os coletados no interior da floresta (Mata). Em todos os fragmentos, os carrapatos foram coletados de acordo com a técnica de arraste aéreo ou no chão e com o uso de perneiras e de flanela. Tanto, as larvas, quanto as ninfas e os adultos foram morfologicamente identificados usando chaves taxonômicas específicas. No caso das larvas, estas foram identificadas até o nível de gênero. Foi realizada extração de DNA dos carrapatos e o DNA extraído foi testado para a presença de Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., e Theileria spp. por meio de uma estratégia de reação em cadeia da polimerase convencional. No total, 1.122 carrapatos em fase de vida livre (750 larvas, 367 ninfas e 5 adultos) e 18 clusters de larvas foram usados no estudo. As principais espécies identificadas na população de carrapatos coletada foram: Amblyomma sculptum, Amblyomma auricularium, Amblyomma aureolatum e Amblyomma pseudoconcolor e larvas de Amblyomma spp. e Dermacentor spp. Como resultado da detecção de patógenos não foi possível achar DNA de nenhum dos agentes analisados, assim todas as amostras de DNA dos carrapatos testados foram negativas tanto para Rickettsia spp. quanto para Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp. e Theileria spp.(AU)

Experimental infection by Borrelia anserina strain PL in Gallus gallus / Infecção experimental de Borrelia anserina cepa PL em Gallus gallus

Avian borreliosis is a tick-borne acute septicemic disease that affects a variety of avian species and is caused by the bacterium Borrelia anserina. The present study aimed to establish the infection dynamics of B. anserina in experimentally infected Gallus gallus to determine its impact on the health and weight gain of the animals. Forty G. gallus were divided into four groups. Group 1 (G1) included 10 animals inoculated intramuscularly (IM) with 250µL of blood serum containing 3.7x106 spirochetes per milliliter. Group 2 (G2) included 10 animals inoculated IM with 250µL of saline 0.9%. Group 3 (G3) included 10 animals infested with four Argas miniatus nymphs (3rd instar) infected with B. anserina strain PL. Group 4 (G4) included 10 animals infested with four A. miniatus nymphs (3rd instar) free of infection by B. anserina. The number of spirochetes in the blood was directly proportional to the appearance of clinical signs and symptoms. This is the first study showing the experimental clinical evolution of the B. anserina PL strain in G. gallus. Additionally, the first assessments of spirochetaemia are presented, based on the direct count of bacteria in the serum by a Neubauer chamber, during the infection.(AU)

Borreliose aviária é uma doença septicêmica aguda transmitida por carrapatos que afeta uma variedade de espécies aviárias e é causada pela bactéria Borrelia anserina. O presente estudo teve como objetivo estabelecer a dinâmica da infecção de B. anserina em Gallus gallus experimentalmente infectados e determinar seu impacto na saúde e no ganho de peso dos animais. Quarenta G. gallus foram divididos em quatro grupos. O Grupo 1 (G1) incluiu 10 animais inoculados por via intramuscular (IM) com 250µL de soro sanguíneo contendo 3,7x106 espiroquetas por mL; Grupo 2 (G2) incluiu 10 animais inoculados IM com 250µL de soro fisiológico 0,9%; Grupo 3 (G3) incluiu 10 animais infestados com quatro ninfas de Argas miniatus (3º instar) infectadas com B. anserina cepa PL. O Grupo 4 (G4) incluiu 10 animais infestados com quatro ninfas de A. miniatus (3º instar) livres de infecção por B. anserina. O número de espiroquetas no sangue foi diretamente proporcional ao aparecimento de sinais e sintomas clínicos. Este é o primeiro estudo que mostra a evolução clínica experimental da cepa B. anserina PL em G. gallus. Além disso, são apresentadas as primeiras avaliações da espiroquetemia, baseadas na contagem direta da bactéria no soro por uma câmara de Neubauer, durante a infecção.(AU)

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.(AU)

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.(AU)

Serological and molecular detection of Theileria equi in horses from Sinop, Mato Grosso state, Brazil / Detecção sorológica e molecular de Theileria equi em equinos oriundos de Sinop, Mato Grosso, Brasil

Equine piroplasmosis is the most important tick-borne disease to affect horses in Brazil. Theileria equi is one of the causative agents of equine piroplasmosis. Chronic cases are expected, in which the animals show no apparent signs of infection and remain asymptomatic but constitute a source of the infectious agent that ticks can spread. This study was conducted across 81 ranches located in the municipality of Sinop, State of Mato Grosso, Brazil. A sample calculation was performed to estimate the apparent prevalence of T. equi among horses. A total of 1,853 animals were included in the sampling analysis based on the information available from the Institute of Agricultural and Livestock Defense of Mato Grosso State. The serological analysis of 367 serum samples using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) to detect anti-T. equi antibodies revealed that 337 animals were positive, representing a frequency of 90.70%. The molecular analysis to amplify the EMA-1 gene showed positivity in 20 of 89 tested samples. The fragments of four samples were sequenced and analyzed to determine their similarities to sequences from other species, based on sequences deposited at GenBank. All showed 100% similarity with T. equi. Our study represents the first report of T. equi antibodies among the equids in north-central region of Mato Grosso, revealing the widespread distribution of seropositive animals.

A piroplasmose equina é a doença transmitida por carrapatos mais importante em cavalos no Brasil. Theileria equi é um dos agentes causadores da piroplasmose equina. São esperados casos crônicos, nos quais os animais não apresentam sinais aparentes de infecção e permanecem assintomáticos, mas constituem uma fonte de infecção e disseminação por carrapatos. Este estudo foi realizado em 81 fazendas localizadas no município de Sinop, Estado de Mato Grosso, Brasil. Um cálculo amostral foi realizado para estimar a prevalência aparente de T. equi entre cavalos. No total, 1.853 animais foram incluídos na análise amostral com base nas informações disponíveis no Instituto de Defesa Agropecuária do Estado de Mato Grosso. A análise sorológica de 367 amostras de soro por meio de ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para detecção de anticorpos anti-T. equi revelou que 337 animais eram positivos, representando uma frequência de 90,70%. A análise molecular para o gene EMA-1 mostrou positividade em 20 das 89 amostras testadas. Os fragmentos de quatro amostras foram sequenciados e analisados para determinar suas semelhanças com sequências de outras espécies, a partir das sequências depositadas no GenBank. Todos mostraram 100% de similaridade com T. equi. Nosso estudo representa o primeiro relato de anticorpos contra T. equi entre os equídeos na região centro norte de Mato Grosso, revelando a ampla distribuição de animais soropositivos.

First serological detection of Borrelia spp. in dogs in western Cuba / Primeira detecção sorológica de Borrelia spp. em cães na região oeste de Cuba

This study aimed to verify the presence of IgG antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) in domestic dogs in western Cuba. Serum samples were analyzed by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), using crude antigens of a B. burgdorferi strain of North American origin. To verify the presence of Borrelia spp., deoxyribonucleic acid (DNA) extracted from individual blood samples was analyzed by nested-PCR, with markers targeted for amplification of portions of the flagellin B gene (flaB) present in Borrelia spirochetes. Ticks were also collected through inspection of the animals. Sera from 93 of 176 (52.84%) dogs were reactive to the indirect ELISA. Geographic prevalence varied from 54.35% (25/46) in Boyeros, 44.44% (20/45) in Cotorro, 66.67% (22/33) in Habana del Este, and 50% (26/52) in San José de las Lajas. There was no statistical difference between these tested variables. No blood samples analyzed were positive for the Borrelia flaB gene.(AU)

Este estudo teve como objetivo confirmar a presença de anticorpos IgG contra Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) em cães na região oeste de Cuba. As amostras de soro foram analisadas por ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) indireto, usando-se antígenos brutos de uma cepa de B. burgdorferi de origem norte-americana. Para confirmar a presença de Borrelia spp., o ácido desoxirribonucleico (DNA), extraído de amostras individuais de sangue, foi analisado por PCR, utilizando-se marcadores direcionados para a amplificação de porções do gene da flagelina B (flaB) presente nas espiroquetas de Borrelia. Os carrapatos também foram coletados através da inspeção dos animais. Os soros de 93 de 176 (52,84%) cães foram reativos ao ELISA indireto. A prevalência geográfica variou de 54,35% (25/46) em Boyeros, 44,44% (20/45) em Cotorro, 66,67% (22/33) em Habana del Este e 50% (26/52) em San José de las Lajas. Não houve diferença estatística entre essas variáveis testadas. Nenhuma amostra de sangue analisada foi positiva para o gene Borrelia flaB.(AU)

Detection of Treponema spp. in bovine digital dermatitis in the Amazon biome, Brazil / Detecção de Treponema spp. em dermatite digital bovina no bioma amazônico, Brasil

Bovine digital dermatitis (BDD) is a polybacterial claw disease that is endemic to dairy cattle kept in loose house systems, and treponemas are the main bacteria implicated in this disease. The objective of this study was to report the occurrence of Treponema spp. in BDD from crossbred dairy cattle (Holstein x Zebu) kept in a pasture in the Brazilian Amazon biome. The diagnostic of BDD was performed by inspecting the distal extremities of cattle during milking in one or more visits comprising 15 farms. In total, it could be inspected 1,847 cows from August 2016 to July 2017, and 25 lesions of BDD were diagnosed. The feet were scored (System M: M0 = no lesion, M1 = ulcer stage <2cm, M2 = ulcer stage >2cm, M3 = healing stage, M4 = chronic stage, M4.1 = chronic stage with ulcer area). Twenty four biopsy samples were taken from feet with BDD and five biopsy samples from feet with no lesions. The histopathology of stained tissues was performed by hematoxylin and eosin and Warthin-Starry method. The samples were also tested by nested PCR for the three previously isolated BDD Treponema phylogroups (T. medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like and T. putidum/T. denticola-like). Spirochetes were observed in 54.2% (13/24) of the lesions, and in 91.7% (22/24) of the samples were detected the DNA of this spirochete belonging to the treponema phylogroups implicated in BDD. In 25% (6/24) of the lesions were detected all the phylogroups. Forty percent (40%, 2/5) of the M0 samples were also positive for the nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR), as 8.3% (2/24) of the lesions were negative in both techniques employed. Treponema putidum/T. denticola-like was the most detected bacterial in all the stages, and active lesions (M2 and M4.1) presented a greater proportion of T. medium/T. vincentii-like and T. phagedenis-like, but no statistical differences were observed (p>0.05). It could be concluded that BDD lesions in crossbred dairy cattle kept to pasture in the Amazon biome were classified as "polytreponemal" infections and the phylogroup T. putidum/T. denticola-like was the most frequent in the lesions.(AU)

Dermatite digital bovina (DDB) é uma enfermidade polibacteriana dos dígitos endêmica em vacas leiteiras criadas em estábulos e as treponemas são as principais bactérias envolvidas. Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de Treponema spp. em DDB em bovinos leiteiros mestiços (Holandês x Zebu) criados a pasto no bioma amazônico brasileiro. O diagnóstico da DDB foi realizado pela inspeção, em uma ou mais visitas, das extremidades distais das vacas durante a ordenha em 15 propriedades. No total, foram inspecionadas 1.847 vacas de agosto de 2016 a julho de 2017 e diagnosticou-se 25 lesões de DDB. As extremidades distais inspecionadas foram classificadas em escores (M0 = sem lesão, M1 = estágio ulcerado <2cm, M2 = estágio ulcerado >2cm, M3 = estágio em cicatrização, M4 = estágio crônico, M4.1 = estágio crônico com área ulcerada) e realizada 24 biópsias de dígitos com DDB e cinco biópsias de dígitos em estágio M0. Foram realizadas a histopatologia pelas colorações de hematoxilina e eosina e pelo método de Warthin-Starry, e a nested de reação em cadeia de polimerase (nested-PCR) para os três filogrupos de treponemas previamente isolados de DDB (Treponema medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like e T. putidum/T. denticola-like). Espiroquetas foram observadas em 54,2% (13/24) das lesões e em 91,7% (22/24) detectou-se o DNA de, pelo menos, um dos filogrupos de treponemas pesquisados. Em 25% (6/24) das lesões foram detectados o DNA dos três filogrupos. Em 40% (2/5) das amostras em estágio M0 também foram positivas na nested-PCR, assim como 8,3% (2/24) das lesões foram negativas em ambas as técnicas empregadas. T. putidum/T. denticola-like foi o filogrupo mais detectado em todos os estágios e lesões ativas (M2 e M4.1) apresentaram uma maior proporção para Treponema medium/T. vincentii-like e T. phagedenis-like, mas não se obteve diferença estatística na ocorrência dos filogrupos entre os estágios das lesões (P>0,05). Conclui-se que lesões de DDB em rebanhos leiteiros mestiços criados a pasto no bioma amazônico brasileiro são "politreponemais" e o filogrupo T. putidum/T. denticola-like é o mais frequente nas lesões.(AU)

Detection of Treponema spp. in bovine digital dermatitis in the Amazon biome, Brazil / Detecção de Treponema spp. em dermatite digital bovina no bioma amazônico, Brasil

Bovine digital dermatitis (BDD) is a polybacterial claw disease that is endemic to dairy cattle kept in loose house systems, and treponemas are the main bacteria implicated in this disease. The objective of this study was to report the occurrence of Treponema spp. in BDD from crossbred dairy cattle (Holstein x Zebu) kept in a pasture in the Brazilian Amazon biome. The diagnostic of BDD was performed by inspecting the distal extremities of cattle during milking in one or more visits comprising 15 farms. In total, it could be inspected 1,847 cows from August 2016 to July 2017, and 25 lesions of BDD were diagnosed. The feet were scored (System M: M0 = no lesion, M1 = ulcer stage <2cm, M2 = ulcer stage >2cm, M3 = healing stage, M4 = chronic stage, M4.1 = chronic stage with ulcer area). Twenty four biopsy samples were taken from feet with BDD and five biopsy samples from feet with no lesions. The histopathology of stained tissues was performed by hematoxylin and eosin and Warthin-Starry method. The samples were also tested by nested PCR for the three previously isolated BDD Treponema phylogroups (T. medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like and T. putidum/T. denticola-like). Spirochetes were observed in 54.2% (13/24) of the lesions, and in 91.7% (22/24) of the samples were detected the DNA of this spirochete belonging to the treponema phylogroups implicated in BDD. In 25% (6/24) of the lesions were detected all the phylogroups. Forty percent (40%, 2/5) of the M0 samples were also positive for the nested Polymerase Chain Reaction (nested-PCR), as 8.3% (2/24) of the lesions were negative in both techniques employed. Treponema putidum/T. denticola-like was the most detected bacterial in all the stages, and active lesions (M2 and M4.1) presented a greater proportion of T. medium/T. vincentii-like and T. phagedenis-like, but no statistical differences were observed (p>0.05). It could be concluded that BDD lesions in crossbred dairy cattle kept to pasture in the Amazon biome were classified as "polytreponemal" infections and the phylogroup T. putidum/T. denticola-like was the most frequent in the lesions.(AU)

Dermatite digital bovina (DDB) é uma enfermidade polibacteriana dos dígitos endêmica em vacas leiteiras criadas em estábulos e as treponemas são as principais bactérias envolvidas. Este estudo teve como objetivo relatar a ocorrência de Treponema spp. em DDB em bovinos leiteiros mestiços (Holandês x Zebu) criados a pasto no bioma amazônico brasileiro. O diagnóstico da DDB foi realizado pela inspeção, em uma ou mais visitas, das extremidades distais das vacas durante a ordenha em 15 propriedades. No total, foram inspecionadas 1.847 vacas de agosto de 2016 a julho de 2017 e diagnosticou-se 25 lesões de DDB. As extremidades distais inspecionadas foram classificadas em escores (M0 = sem lesão, M1 = estágio ulcerado <2cm, M2 = estágio ulcerado >2cm, M3 = estágio em cicatrização, M4 = estágio crônico, M4.1 = estágio crônico com área ulcerada) e realizada 24 biópsias de dígitos com DDB e cinco biópsias de dígitos em estágio M0. Foram realizadas a histopatologia pelas colorações de hematoxilina e eosina e pelo método de Warthin-Starry, e a nested de reação em cadeia de polimerase (nested-PCR) para os três filogrupos de treponemas previamente isolados de DDB (Treponema medium/T. vincentii-like, T. phagedenis-like e T. putidum/T. denticola-like). Espiroquetas foram observadas em 54,2% (13/24) das lesões e em 91,7% (22/24) detectou-se o DNA de, pelo menos, um dos filogrupos de treponemas pesquisados. Em 25% (6/24) das lesões foram detectados o DNA dos três filogrupos. Em 40% (2/5) das amostras em estágio M0 também foram positivas na nested-PCR, assim como 8,3% (2/24) das lesões foram negativas em ambas as técnicas empregadas. T. putidum/T. denticola-like foi o filogrupo mais detectado em todos os estágios e lesões ativas (M2 e M4.1) apresentaram uma maior proporção para Treponema medium/T. vincentii-like e T. phagedenis-like, mas não se obteve diferença estatística na ocorrência dos filogrupos entre os estágios das lesões (P>0,05). Conclui-se que lesões de DDB em rebanhos leiteiros mestiços criados a pasto no bioma amazônico brasileiro são "politreponemais" e o filogrupo T. putidum/T. denticola-like é o mais frequente nas lesões.(AU)

Characterization of cattle tick fever in calves from the northwestern region of Minas Gerais, Brazil / Caracterização do complexo da Tristeza Parasitária Bovina em bezerros da região noroeste de Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to characterize the importance of the Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in the genesis of cattle tick fever (CTF) among dairy calves in the northwest of Minas Gerais, Brazil. Blood samples from 300 calves were collected, followed by DNA extraction and nested PCR using oligonucleotide primers to amplify fragments of the semi-nested for the msp5 gene (A. marginale), sbp-4 (B. bovis) and rap-1a (B. bigemina) Among the examined calves, the prevalence of A. marginale was 55.6% (n=167/300), B. bovis was 4.0% (n=12/300) and B. bigemina was 15.3% (n=46/300), by PCR techniques. Parasitic forms of A. marginale and B. bigemina were found in 36,3% and 2,6% of the blood smears while B. bovis was not detected. There was a statistical difference between the positivity of infected animals in the age groups 1 (10-70 days) and (>70-300 days) for A. marginale and B. bigemina. A total of 15 calves with the classic symptoms of disease were examined, and the samples obtained were confirmed as a simple infection by A. marginale through semi-nested PCR. These results confirm bovine anaplasmosis as the primary cause of CTF among the calves of dairy cattle within the studied area.(AU)

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a importância de Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis na gênese da tristeza parasitária bovina em bezerros leiteiros do noroeste de Minas Gerais. Foram coletadas 300 amostras sanguíneas de bezerros, seguidas por extração de DNA e Nested- PCR utilizando oligonucleotídeos iniciadores que amplificam fragmentos dos genes sbp-4 (B. bovis) e rap-1a (B. bigemina) e a Semi-Nested para o gene msp5 (A. marginale). A prevalência de A. marginale foi 55,66% (167/300), B. bigemina, 15,33% (46/300) e B. bovis 4,0% (12/300) dos bezerros examinados. Formas parasitárias de A. marginale and B. bigemina foram encontradas em 36,33% e 2,66% dos esfregaços sanguíneos, enquanto B. bovis não foi detectado. Houve diferença estatística entre as prevalências de animais infectados nas faixas etárias 1 (10-70 dias) e 2 (>70-300 dias). Um total de 15 animais com sintomas clássicos da doença foram examinados, e as amostras foram confirmadas como uma infecção simples por A. marginale através da Nested-PCR. Esses resultados confirmam a anaplasmose bovina como a principal agente da tristeza parasitária bovina nos bezerros do rebanho estudado.(AU)

Rickettsial pathogens circulating in urban districts of Rio de Janeiro, without report of human Brazilian Spotted Fever / Circulação de patógenos riquetsiais em bairros urbanos do Rio de Janeiro sem relatos humanos da Febre Maculosa Brasileira

Spotted fever group rickettsioses are emerging diseases. In some of these diseases, domestic dogs act as sentinels. Canine serological studies have demonstrated that rickettsial dispersion is concentrated in rural areas, seroprevalence being higher where human rickettsioses are endemic. In Rio de Janeiro, the Atlantic forest vegetation has been devastated by urbanization. In this context, we aimed to detect Rickettsia spp. in urban areas of the West Zone of Rio de Janeiro. Sera from 130 dogs were tested by Indirect Immunofluorescence Assay, and ticks collected from these dogs were tested by polymerase chain reaction. We found the rate of serological reactions against R. rickettsii and R. parkeri in our study area to exceed those of rural and non-endemic areas, highlighting the importance of dogs as urban sentinels. The possibility of contact with opossums and capybaras increased the chances of exposure to Rickettsia spp., reinforcing the hypothetical link between the landscape and the rickettsial wild cycle. Rhipicephalus sanguineus sensu lato was the tick most frequently observed. PCR-positive samples showed similarity with R. rickettsii and R. felis, an emerging pathogen rarely reported from ticks. We observed that rickettsiae circulate in urban places and ticks from indoor environments, which may be involved in bacterial epidemiology.(AU)

Riquetsioses do Grupo da Febre Maculosa são doenças emergentes. Em algumas destas doenças, os cães domésticos agem como sentinelas. Estudos sorológicos caninos têm demonstrado que a dispersão de patógenos rickettsiais está concentrada em áreas rurais, sendo a soroprevalência maior onde as rickettsioses humanas são endêmicas. Na cidade do Rio de Janeiro, a vegetação de Mata Atlântica vem sendo devastada pela urbanização. Nesse contexto, objetivou-se detectar a presença de Rickettsia spp. em áreas urbanas da Zona Oeste do Rio de Janeiro. Amostras de soro obtidas de 130 cães foram testadas, utilizando-se a Imunofluorescência Indireta. Carrapatos coletados desses cães foram testados, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase. Observou-se que as taxas de reações sorológicas contra R. rickettsii e R. parkeri nessa área de estudo excederam a prevalência das áreas rurais e não endêmicas, destacando-se a importância dos cães como sentinelas urbanos das rickettsioses. A possibilidade de contato com capivaras e gambás favoreceu a exposição à Rickettsia spp., reforçando a hipótese de ligação entre a paisagem local e o ciclo silvestre de transmissão riquetsial. O carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato foi encontrado com maior frequência. Amostras com positividade pela PCR mostraram similaridade com R. rickettsii e R. felis, um patógeno emergente raramente descrito em carrapatos. Observou-se circulação riquetsial em áreas urbanas e em carrapatos obtidos do ambiente doméstico, os quais podem estar envolvidos na epidemiologia dessas bactérias.(AU)

Characterization of cattle tick fever in calves from the northwestern region of Minas Gerais, Brazil / Caracterização do complexo da Tristeza Parasitária Bovina em bezerros da região noroeste de Minas Gerais, Brasil

The present study aimed to characterize the importance of the Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in the genesis of cattle tick fever (CTF) among dairy calves in the northwest of Minas Gerais, Brazil. Blood samples from 300 calves were collected, followed by DNA extraction and nested PCR using oligonucleotide primers to amplify fragments of the semi-nested for the msp5 gene (A. marginale), sbp-4 (B. bovis) and rap-1a (B. bigemina) Among the examined calves, the prevalence of A. marginale was 55.6% (n=167/300), B. bovis was 4.0% (n=12/300) and B. bigemina was 15.3% (n=46/300), by PCR techniques. Parasitic forms of A. marginale and B. bigemina were found in 36,3% and 2,6% of the blood smears while B. bovis was not detected. There was a statistical difference between the positivity of infected animals in the age groups 1 (10-70 days) and (>70-300 days) for A. marginale and B. bigemina. A total of 15 calves with the classic symptoms of disease were examined, and the samples obtained were confirmed as a simple infection by A. marginale through semi-nested PCR. These results confirm bovine anaplasmosis as the primary cause of CTF among the calves of dairy cattle within the studied area.(AU)

O presente estudo teve como objetivo caracterizar a importância de Anaplasma marginale, Babesia bigemina e Babesia bovis na gênese da tristeza parasitária bovina em bezerros leiteiros do noroeste de Minas Gerais. Foram coletadas 300 amostras sanguíneas de bezerros, seguidas por extração de DNA e Nested- PCR utilizando oligonucleotídeos iniciadores que amplificam fragmentos dos genes sbp-4 (B. bovis) e rap-1a (B. bigemina) e a Semi-Nested para o gene msp5 (A. marginale). A prevalência de A. marginale foi 55,66% (167/300), B. bigemina, 15,33% (46/300) e B. bovis 4,0% (12/300) dos bezerros examinados. Formas parasitárias de A. marginale and B. bigemina foram encontradas em 36,33% e 2,66% dos esfregaços sanguíneos, enquanto B. bovis não foi detectado. Houve diferença estatística entre as prevalências de animais infectados nas faixas etárias 1 (10-70 dias) e 2 (>70-300 dias). Um total de 15 animais com sintomas clássicos da doença foram examinados, e as amostras foram confirmadas como uma infecção simples por A. marginale através da Nested-PCR. Esses resultados confirmam a anaplasmose bovina como a principal agente da tristeza parasitária bovina nos bezerros do rebanho estudado.(AU)

Ticks in wild animals at a resort and the first documentation of Amblyomma sculptum infesting Emu (Dromaius novaehollandiae) / Carrapatos em animais selvagens em um resort e o primeiro registro de Amblyomma sculptum infestando Emu (Dromaius novaehollandiae)

The study aimed to identify species of ticks present in the environment and among captive animals, in Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brazil. Ticks were isolated from captive animals by manual examination and free-living ticks in the environment were captured using the flannel drag technique. A total of 91 ticks were obtained (51 adults, 25 nymphs and 15 larvae). The specimens were identified morphologically as Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale and Amblyomma sculptum , and were distributed among five species of native mammals and an exotic bird. This study also reports the first case of infestation of the Australian emu (Dromaius novaehollandiae) by A. sculptum(AU)

O estudo teve como objetivo identificar espécies de carrapatos presentes no ambiente e entre animais de cativeiro em Mangaratiba, Rio de Janeiro, Brasil. Os carrapatos foram removidos manualmente de animais de cativeiro e no ambiente usando a técnica de arrasto em flanela. Um total de 91 carrapatos foram capturados (51 adultos, 25 ninfas e 15 larvas). Os espécimes foram identificados morfologicamente como Amblyomma sp., Amblyomma dubitatum, Amblyomma ovale e Amblyomma sculptum, e foram distribuídos entre cinco espécies de mamíferos nativos e uma ave exótica. Este estudo também relata o primeiro caso de infestação do emu australiano (Dromaius novaehollandiae) por A. sculptum(AU)

Hemoparasites in ticks of wild birds of Serra dos Órgãos National Park, state of Rio de Janeiro, Brazil / Hemoparasitos em carrapatos de aves silvestres do Parque Nacional da Serra dos Órgãos, estado do Rio de Janeiro, Brasil

The aim of this study is to detect the presence of tick-borne agents of genera Rickettsia, Borrelia, Babesia, Ehrlichia and Anaplasma in ticks collected from native wild birds in the state of Rio de Janeiro. Birds were captured and observed carefully to find the ectoparasites. DNA detection of hemoparasites was performed by means of the polymerase chain reaction (PCR). The sequences obtained were analyzed and their homologies were compared to the available isolates in the GenBank platform database. A total of 33 birds were captured from 20 different species, of which 14 were parasitized by Amblyomma longirostre (n = 22). There was absence of DNA from agents of the genera Babesia, Anaplasma and Ehrlichia in the evaluated samples. The phylogenetic analysis indicated that one sample had 100% identity with Rickettsia bellii (KJ534309), the other two samples showed 100% identity with Rickettsia sp. Aranha strain and strain AL (EU274654 and AY360216). The positive sample for R. bellii was also demonstrated to be positive for Borrelia sp., which presented a similarity of 91% with Borrelia turcica (KF422815). This is the first description of Borrelia sp. in ticks of the genus Amblyomma in South America.(AU)

Este trabalho teve como objetivo detectar evidências moleculares da presença de agentes dos gêneros Rickettsia, Borrelia, Babesia, Anaplasma e Ehrlichia transmitidos por carrapatos coletados de aves silvestres no estado do Rio de Janeiro. Aves foram capturadas e observadas cuidadosamente a procura de ectoparasitos. A detecção de DNA de hemoparasitos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências obtidas foram analisadas e sua homologia comparada aos isolados disponíveis na base de dados da plataforma GenBank. Foram capturadas 33 aves, de 20 espécies diferentes das quais 14 estavam parasitadas por Amblyomma longirostre (n = 22). Houve ausência de DNA de agentes dos gêneros Babesia, Anaplasma e Ehrlichia nas amostras avaliadas. A análise filogenética indicou que uma amostra apresentou 100% de identidade com Rickettsia bellii (KJ534309), as outras duas amostras apresentaram 100% de identidade com Rickettsia sp. cepa Aranha e Cepa AL (EU274654 e AY360216.). A amostra positiva para R. bellii também apresentou positividade para Borrelia sp. que apresentou similaridade de 91% com Borrelia turcica (KF422815). Esta é a primeira descrição de Borrelia sp. em carrapatos do gênero Amblyomma na América do Sul.(AU)

Molecular detection of Rickettsia spp. in ticks collected from dogs from the Department of Piura, Peru / Detecção molecular de Rickettsia spp. em carrapatos coletados de cães provenientes do Departamento de Piura-Peru

The aim of this study was to determine the frequency of ticks positive for genus Rickettsia bacteriaamong ticks collected from domestic dogs in the Department of Piura, Peru, using polymerase chainreaction (PCR) analysis. Ticks were collected from dogs in urban areas of the metropolitan region ofPiura, Peru. Only three species of ticks were identified; 977 Rhipicephalus sanguineus (180 nymphs,417 females, and 380 males), Six Amblyomma triste females, and one Amblyomma tigrinum male.After classifying the specimens morphologically by stage, species, and sex, their total DNA was testedby PCR using primers that amplify fragments of the gltA, ompA, ompB, and htrA genes. The resultingpositive sample was sequenced, compared to the GenBank database, and analyzed phylogenetically.The Rickettsia spp. infection rate in the tick pools was 0.2% (1/484); the positive specimen was an R.sanguineus tick. GenBank analysis of the positive sequence revealed 100% identify with Rickettsiafelis; however, no products of the htrA, ompA and ompB genes were amplified from this sample. To thebest of our knowledge, this is the first report of R. felis in R. sanguineus in Peru.

O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de carrapatos coletados de caninos domésticospositivos para bactérias do gênero Rickettsia por meio da Reação em cadeia da polimerase (PCR) noDepartamento de Piura, Peru. Desta forma, carrapatos foram coletados de caninos de zonas urbanasda região Metropolitana de Piura, Peru. Apenas três espécies de carrapatos foram identificadas, sendo977 R. sanguineus (180 ninfas, 417 fêmeas e 380 machos), 6 fêmeas da espécie Amblyomma triste eum macho Amblyomma tigrinum. Após classificados morfologicamente por estádio, espécie e sexo,o DNA total dos espécimes foi testado pela PCR utilizando iniciadores que amplificam fragmentosdos genes gltA, ompA, ompB e htrA. A amostra positiva foi sequenciada, comparada com o banco dedados depositados no GenBank e analisada filogeneticamente. Verificou-se, mediante PCR, uma taxa de infecção de 0,2% (1/484) “pools” de carrapatos positivos para Rickettsia spp. O espécime positivo foium carrapato Rhipicephalus sanguineus. A análise no GenBank da sequência positiva apresentou umasimilaridade de 100% com a espécie R. felis. Essa amostra não amplificou produtos para os genes htrA,ompA e ompB. Este é o primeiro relato de R. felis em R. sanguineus no Peru.

Molecular detection of Rickettsia spp. in ticks collected from dogs from the Department of Piura, Peru / Detecção molecular de Rickettsia spp. em carrapatos coletados de cães provenientes do Departamento de Piura-Peru

The aim of this study was to determine the frequency of ticks positive for genus Rickettsia bacteriaamong ticks collected from domestic dogs in the Department of Piura, Peru, using polymerase chainreaction (PCR) analysis. Ticks were collected from dogs in urban areas of the metropolitan region ofPiura, Peru. Only three species of ticks were identified; 977 Rhipicephalus sanguineus (180 nymphs,417 females, and 380 males), Six Amblyomma triste females, and one Amblyomma tigrinum male.After classifying the specimens morphologically by stage, species, and sex, their total DNA was testedby PCR using primers that amplify fragments of the gltA, ompA, ompB, and htrA genes. The resultingpositive sample was sequenced, compared to the GenBank database, and analyzed phylogenetically.The Rickettsia spp. infection rate in the tick pools was 0.2% (1/484); the positive specimen was an R.sanguineus tick. GenBank analysis of the positive sequence revealed 100% identify with Rickettsiafelis; however, no products of the htrA, ompA and ompB genes were amplified from this sample. To thebest of our knowledge, this is the first report of R. felis in R. sanguineus in Peru.(AU)

O objetivo do presente estudo foi determinar a frequência de carrapatos coletados de caninos domésticospositivos para bactérias do gênero Rickettsia por meio da Reação em cadeia da polimerase (PCR) noDepartamento de Piura, Peru. Desta forma, carrapatos foram coletados de caninos de zonas urbanasda região Metropolitana de Piura, Peru. Apenas três espécies de carrapatos foram identificadas, sendo977 R. sanguineus (180 ninfas, 417 fêmeas e 380 machos), 6 fêmeas da espécie Amblyomma triste eum macho Amblyomma tigrinum. Após classificados morfologicamente por estádio, espécie e sexo,o DNA total dos espécimes foi testado pela PCR utilizando iniciadores que amplificam fragmentosdos genes gltA, ompA, ompB e htrA. A amostra positiva foi sequenciada, comparada com o banco dedados depositados no GenBank e analisada filogeneticamente. Verificou-se, mediante PCR, uma taxa de infecção de 0,2% (1/484) “pools” de carrapatos positivos para Rickettsia spp. O espécime positivo foium carrapato Rhipicephalus sanguineus. A análise no GenBank da sequência positiva apresentou umasimilaridade de 100% com a espécie R. felis. Essa amostra não amplificou produtos para os genes htrA,ompA e ompB. Este é o primeiro relato de R. felis em R. sanguineus no Peru.(AU)