Lack of correlation between micro fungi species and chemical control method of Atta treated with toxic baits / Ausência de correlação entre espécies de microfungos e método de controle químico de Atta tratadas com iscas tóxicas

Atta sexdens rubropilosa (leaf-cutter ants) has a symbiotic association with a fungus and has a negative interaction with other fungi due to parasitism of the fungus cultivated by ants; also, there are several other fungi with no exact known role occurring in their cultivated fungus garden. In the present study, we use the ITS region (internal transcribed spacer) to identify fungi in colonies treated with toxic baits. Experiments using two toxic baits were carried out: 0.75g of sulfluramid [0.3%] and 0.75g fipronil [0.003%]. Samples of fungi were collected and cultured in Czapek medium for seven days to allow fungal growth and subsequent identification. Total DNA was isolated from 100-150 mg of mycelium using the CTAB method and using PCR, with the universal primers (ITS4 and ITS5), to amplify the ITS region. Sequencing was performed using the Sanger method. Sequences were subjected to BLAST, allowing the identification of nine different species of the orders Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales and Tremellales showing a variation in identity of 96-100%. Using "The Automatic Barcode Gap Discovery" analysis, nine groups were identified, corresponding to species described in NCBI. The K2P distances were used to generate a tree using Neighbour-joining, demonstrating that the species were grouped according to phylogenetic groups. We concluded that leaf-cutter ant colonies exhibited a wide variety of fungi and this study suggested that there is no correlation between the species of fungi isolated with the control method used on the ant nest.

Atta sexdens rubropilosa (cortadeira de folha) possui associação simbiótica com fungos e interação negativa com outros fungos devido ao parasitismo do fungo cultivado pelas formigas. Quando colônias da formiga cortadeira de folhas são submetidas ao tratamento com iscas tóxicas, diversas espécies de fungos surgem dentro da colônia, podendo contribuir com a morte ou sobrevivência da colônia. Para entender os relacionamentos ecológicos em colônias de formigas, a identificação de espécie de fungos se torna muito importante e, o uso de DNA barcoding tem sido um método rápido e eficiente para identificação de espécies usando métodos moleculares. No presente trabalho, usamos a região ITS (internal transcribed spacer) para identificar fungos em colônias tratadas com iscas tóxicas. Dois experimentos com iscas tóxicas foram aplicados: 0.75g de Fipronil [0.003%] e 0.75g de Sulfluramid [0.3%]. As amostras, contendo os possíveis fungos, foram coletadas e cultivadas em meio Czaped durante sete dias para o crescimento do fungo e posterior identificação. O DNA total foi isolado de 100-150mg de micélio usando o método CTAB, usado para amplificar a região ITS por PCR empregando primers universais (ITS5 e ITS4). O sequenciamento foi realizado utilizando o método de Sanger. As sequências foram submetidas ao BLAST, permitindo identificar nove diferentes espécies das ordens Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales e Tremellales, mostrando variação 96-100% de identidade. Empregando a análise "The Automatic Barcode Gap Discovery", identificou-se nove grupos, correspondendo as espécies descritas no NCBI. As distâncias K2P foram usadas para gerar uma árvore usando Neighbour-Joining, apresentando que as espécies foram agrupadas de acordo com as filogenias dos grupos. Conclui-se que as colônias de formigas cortadeira de folhas apresentam grande diversidade de fungos e que DNA barcoding é eficiente para identificação destes.

Lack of correlation between micro fungi species and chemical control method of Atta treated with toxic baits / Ausência de correlação entre espécies de microfungos e método de controle químico de Atta tratadas com iscas tóxicas

Atta sexdens rubropilosa (leaf-cutter ants) has a symbiotic association with a fungus and has a negative interaction with other fungi due to parasitism of the fungus cultivated by ants; also, there are several other fungi with no exact known role occurring in their cultivated fungus garden. In the present study, we use the ITS region (internal transcribed spacer) to identify fungi in colonies treated with toxic baits. Experiments using two toxic baits were carried out: 0.75g of sulfluramid [0.3%] and 0.75g fipronil [0.003%]. Samples of fungi were collected and cultured in Czapek medium for seven days to allow fungal growth and subsequent identification. Total DNA was isolated from 100-150 mg of mycelium using the CTAB method and using PCR, with the universal primers (ITS4 and ITS5), to amplify the ITS region. Sequencing was performed using the Sanger method. Sequences were subjected to BLAST, allowing the identification of nine different species of the orders Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales and Tremellales showing a variation in identity of 96-100%. Using "The Automatic Barcode Gap Discovery" analysis, nine groups were identified, corresponding to species described in NCBI. The K2P distances were used to generate a tree using Neighbour-joining, demonstrating that the species were grouped according to phylogenetic groups. We concluded that leaf-cutter ant colonies exhibited a wide variety of fungi and this study suggested that there is no correlation between the species of fungi isolated with the control method used on the ant nest.(AU)

Atta sexdens rubropilosa (cortadeira de folha) possui associação simbiótica com fungos e interação negativa com outros fungos devido ao parasitismo do fungo cultivado pelas formigas. Quando colônias da formiga cortadeira de folhas são submetidas ao tratamento com iscas tóxicas, diversas espécies de fungos surgem dentro da colônia, podendo contribuir com a morte ou sobrevivência da colônia. Para entender os relacionamentos ecológicos em colônias de formigas, a identificação de espécie de fungos se torna muito importante e, o uso de DNA barcoding tem sido um método rápido e eficiente para identificação de espécies usando métodos moleculares. No presente trabalho, usamos a região ITS (internal transcribed spacer) para identificar fungos em colônias tratadas com iscas tóxicas. Dois experimentos com iscas tóxicas foram aplicados: 0.75g de Fipronil [0.003%] e 0.75g de Sulfluramid [0.3%]. As amostras, contendo os possíveis fungos, foram coletadas e cultivadas em meio Czaped durante sete dias para o crescimento do fungo e posterior identificação. O DNA total foi isolado de 100-150mg de micélio usando o método CTAB, usado para amplificar a região ITS por PCR empregando primers universais (ITS5 e ITS4). O sequenciamento foi realizado utilizando o método de Sanger. As sequências foram submetidas ao BLAST, permitindo identificar nove diferentes espécies das ordens Agaricales, Eurotiales, Hypocreales, Pleosporales, Saccharomycetales e Tremellales, mostrando variação 96-100% de identidade. Empregando a análise "The Automatic Barcode Gap Discovery", identificou-se nove grupos, correspondendo as espécies descritas no NCBI. As distâncias K2P foram usadas para gerar uma árvore usando Neighbour-Joining, apresentando que as espécies foram agrupadas de acordo com as filogenias dos grupos. Conclui-se que as colônias de formigas cortadeira de folhas apresentam grande diversidade de fungos e que DNA barcoding é eficiente para identificação destes.(AU)

Controle da lagarta do cartucho (Spodoptera frugiperda) via ingestão de samambaia (Pteridium aquilinum) / Fall armyworm control (Spodoptera frugiperda) through ingestion of bracken (Pteridium aquilinum)

Considerando a ação tóxica da samambaia de P. aquilinum para vertebrados, verificou-se sua atividade inseticida e uso potencial no controle de pragas agrícolas, testando seus efeitos sobre S. frugiperda. Extrato etanólico bruto foi feito com a parte aérea de P. aquilinum, sendo incorporado à dieta artificial (controle ou livre de extrato, 1% e 2%) com 50 repetições (lagartas). Houve mortalidade significativa (34% e 86%) nas concentrações de 1% e 2%, respectivamente, em comparação ao controle (10%). Nos tratamentos a 1% (20,03 dias) e 2% (20,42 dias), observou-se prolongamento do estágio larval (13,51 dias) no tratamento controle. Nos dias 3, 6, 9 e 12 após o tratamento, houve redução de peso, e o tratamento com 2% resultou em larvas 73% mais leves que o controle no dia 12. As pupas do tratamento a 2% foram mais leves que as demais. Em conclusão, 1% e 2% do extrato etanólico de P. aquilinum prolongaram o ciclo larval, diminuiu o peso das larvas e das pupas e, na concentração de 2%, causaram mortalidade efetiva de S. frugiperda.

Considering the toxic action of P. aquilinum bracken for vertebrates, its insecticidal activity and potential use in agricultural pest control was verified, testing its effects on S. frugiperda. Crude ethanolic extract was made with the aerial part of P. aquilinum, being incorporated into artificial diet (control or extract-free, 1% and 2%) with 50 replicates (caterpillars). There was significant mortality (34% and 86%) at concentrations of 1% and 2%, respectively, compared to control (10%). In treatments at 1% (20.03 days) and 2% (20.42 days), larval stage prolongation (13.51 days) was observed in the control treatment. On the 3rd, 6th, 9th and 12th days after treatment, there was weight reduction, and the 2% treatment resulted in larvae 73% lighter than the control did at day 12. The pupae of the 2%treatment were lighter than the others. In conclusion, 1% and 2% of P. aquilinum ethanolic extract extended the larval cycle, decreased the larvae’s and pupae’s weight, and, at a concentration of 2%, caused effective mortality of S. frugiperda.

Controle da lagarta do cartucho (Spodoptera frugiperda) via ingestão de samambaia (Pteridium aquilinum) / Fall armyworm control (Spodoptera frugiperda) through ingestion of bracken (Pteridium aquilinum)

Considerando a ação tóxica da samambaia de P. aquilinum para vertebrados, verificou-se sua atividade inseticida e uso potencial no controle de pragas agrícolas, testando seus efeitos sobre S. frugiperda. Extrato etanólico bruto foi feito com a parte aérea de P. aquilinum, sendo incorporado à dieta artificial (controle ou livre de extrato, 1% e 2%) com 50 repetições (lagartas). Houve mortalidade significativa (34% e 86%) nas concentrações de 1% e 2%, respectivamente, em comparação ao controle (10%). Nos tratamentos a 1% (20,03 dias) e 2% (20,42 dias), observou-se prolongamento do estágio larval (13,51 dias) no tratamento controle. Nos dias 3, 6, 9 e 12 após o tratamento, houve redução de peso, e o tratamento com 2% resultou em larvas 73% mais leves que o controle no dia 12. As pupas do tratamento a 2% foram mais leves que as demais. Em conclusão, 1% e 2% do extrato etanólico de P. aquilinum prolongaram o ciclo larval, diminuiu o peso das larvas e das pupas e, na concentração de 2%, causaram mortalidade efetiva de S. frugiperda.(AU)

Considering the toxic action of P. aquilinum bracken for vertebrates, its insecticidal activity and potential use in agricultural pest control was verified, testing its effects on S. frugiperda. Crude ethanolic extract was made with the aerial part of P. aquilinum, being incorporated into artificial diet (control or extract-free, 1% and 2%) with 50 replicates (caterpillars). There was significant mortality (34% and 86%) at concentrations of 1% and 2%, respectively, compared to control (10%). In treatments at 1% (20.03 days) and 2% (20.42 days), larval stage prolongation (13.51 days) was observed in the control treatment. On the 3rd, 6th, 9th and 12th days after treatment, there was weight reduction, and the 2% treatment resulted in larvae 73% lighter than the control did at day 12. The pupae of the 2%treatment were lighter than the others. In conclusion, 1% and 2% of P. aquilinum ethanolic extract extended the larval cycle, decreased the larvaes and pupaes weight, and, at a concentration of 2%, caused effective mortality of S. frugiperda.(AU)

Seletividade de inseticidas a alguns dos inimigos naturais na cultura do algodão / Selectivity of insecticides to some natural enemies in the culture of cotton

O objetivo foi estudar a seletividade de inseticidas aos inimigos naturais na cultura do algodão (Gossypium hirsutum L.r. latifolium Hurtch), cultivar DeltaOpal, no município de Malhada (BA) e conhecer a fauna benéfica associada. O trabalho foi conduzido na safra 2010/2011, com delineamento experimental em blocos ao acaso, com seis tratamentos e quatro repetições, sendo os tratamentos: (1) Fipronil 200 SC (0,38 L.ha-1); (2) Alfacipermetrina 100 SC (0,30 L.ha-1); (3) Lufenuron 50 CE (0,30 L.ha-1); (4) Imidacloprid 200 SC (0,30 L.ha-1); (5) Paration Metil 600 CE (1,00 L.ha-1); e (6) Testemunha (água). A aplicação dos produtos foi feita 80 dias após a emergência, com avaliações um dia antes da aplicação e 1, 7 e 14 dias após a aplicação (DAA) por meio do pano de batida e armadilha Moericke. Em laboratório, os insetos foram triados, contados e identificados em famílias. A toxicidade dos produtos varia em função do grupo do inimigo natural. A Imidacloprida é seletiva às aranhas, sendo os demais inseticidas medianamente tóxicos (Alfacipermetrina e Paration Metil: 1º e 14º DAA; Lufenuron: 14º DAA) ou tóxicos (Fipronil e Alfacipermetrina: 7º DAA). Fipronil (1º DAA), Alfacipermetrina (7º DAA) e Paration Metil (14º DAA) são medianamente tóxicos aos adultos de joaninhas. Os inseticidas estudados são tóxicos às larvas de joaninhas, com mais impacto até os sete dias após a aplicação, com exceção do Paration Metil, classificado como inócuo até esse período. Registra-se a ocorrência de 13 famílias de aranhas e 18 famílias de hymenópteros parasitoides em agroecossistema de algodão na região de Malhada (BA).(AU)

The aim of this work was study the selectivity of insecticides in favor of natural enemies in cotton (Gossypium hirsutum latifolium Hurtch Lr), DeltaOpal cultivar, in the city of Malhada (BA), and to know the associated beneficial fauna. The study was conducted at the agricultural year of 2010/2011. The design was conducted in randomized blocks with six treatments and four replications. The treatments were: (1) Fipronil 200 SC (0.38 L.ha-1); (2) Alphacypermethrin 100 SC (0.30 L.ha-1), (3) Lufenuron 50 EC (0.30 L.ha-1), (4) Imidacloprid 200 SC (0.30 L.ha-1), (5) Methyl parathion 600 EC (1.00 L.ha-1), and (6) control (water). The product was applied 80 days after emergence, and the evaluations were performed one day before application and 1, 7 and 14 days after application (DAA). The samples were taken using the sampling method beating cloth and Moericke traps. Natural enemies were brought to the laboratory for sorting, counting and identification by family. The toxicity of the products ranged according to the group of natural enemies. Imidacloprid is selective to the spiders and insecticides are moderately toxic (Methyl Parathion and Alphacypermethrin: 1 and 14th DAA; Lufenuron: 14th DAA) or toxic (Fipronil and Alphacypermethrin: 7thDAA). Fipronil (1 DAA), Alphacypermethrin (7th DAA) and Methyl Parathion (14th DAA) are moderately toxic to adult ladybirds. The analyzed insecticides are toxic to the larvae of ladybirds, with more impact until seven days after the application, with the exception of Methyl Parathion classified, as innocuous until this period. The occurrence of 13 families of spiders and 18 families of parasitic Hymenoptera is registered in cotton agroecosystems in the region of Malhada, in the state of Bahia.(AU)

Seletividade de inseticidas a alguns dos inimigos naturais na cultura do algodão / Selectivity of insecticides to some natural enemies in the culture of cotton

O objetivo foi estudar a seletividade de inseticidas aos inimigos naturais na cultura do algodão (Gossypium hirsutum L.r. latifolium Hurtch), cultivar DeltaOpal, no município de Malhada (BA) e conhecer a fauna benéfica associada. O trabalho foi conduzido na safra 2010/2011, com delineamento experimental em blocos ao acaso, com seis tratamentos e quatro repetições, sendo os tratamentos: (1) Fipronil 200 SC (0,38 L.ha-1); (2) Alfacipermetrina 100 SC (0,30 L.ha-1); (3) Lufenuron 50 CE (0,30 L.ha-1); (4) Imidacloprid 200 SC (0,30 L.ha-1); (5) Paration Metil 600 CE (1,00 L.ha-1); e (6) Testemunha (água). A aplicação dos produtos foi feita 80 dias após a emergência, com avaliações um dia antes da aplicação e 1, 7 e 14 dias após a aplicação (DAA) por meio do pano de batida e armadilha Moericke. Em laboratório, os insetos foram triados, contados e identificados em famílias. A toxicidade dos produtos varia em função do grupo do inimigo natural. A Imidacloprida é seletiva às aranhas, sendo os demais inseticidas medianamente tóxicos (Alfacipermetrina e Paration Metil: 1º e 14º DAA; Lufenuron: 14º DAA) ou tóxicos (Fipronil e Alfacipermetrina: 7º DAA). Fipronil (1º DAA), Alfacipermetrina (7º DAA) e Paration Metil (14º DAA) são medianamente tóxicos aos adultos de joaninhas. Os inseticidas estudados são tóxicos às larvas de joaninhas, com mais impacto até os sete dias após a aplicação, com exceção do Paration Metil, classificado como inócuo até esse período. Registra-se a ocorrência de 13 famílias de aranhas e 18 famílias de hymenópteros parasitoides em agroecossistema de algodão na região de Malhada (BA).(AU)

The aim of this work was study the selectivity of insecticides in favor of natural enemies in cotton (Gossypium hirsutum latifolium Hurtch Lr), DeltaOpal cultivar, in the city of Malhada (BA), and to know the associated beneficial fauna. The study was conducted at the agricultural year of 2010/2011. The design was conducted in randomized blocks with six treatments and four replications. The treatments were: (1) Fipronil 200 SC (0.38 L.ha-1); (2) Alphacypermethrin 100 SC (0.30 L.ha-1), (3) Lufenuron 50 EC (0.30 L.ha-1), (4) Imidacloprid 200 SC (0.30 L.ha-1), (5) Methyl parathion 600 EC (1.00 L.ha-1), and (6) control (water). The product was applied 80 days after emergence, and the evaluations were performed one day before application and 1, 7 and 14 days after application (DAA). The samples were taken using the sampling method beating cloth and Moericke traps. Natural enemies were brought to the laboratory for sorting, counting and identification by family. The toxicity of the products ranged according to the group of natural enemies. Imidacloprid is selective to the spiders and insecticides are moderately toxic (Methyl Parathion and Alphacypermethrin: 1 and 14th DAA; Lufenuron: 14th DAA) or toxic (Fipronil and Alphacypermethrin: 7thDAA). Fipronil (1 DAA), Alphacypermethrin (7th DAA) and Methyl Parathion (14th DAA) are moderately toxic to adult ladybirds. The analyzed insecticides are toxic to the larvae of ladybirds, with more impact until seven days after the application, with the exception of Methyl Parathion classified, as innocuous until this period. The occurrence of 13 families of spiders and 18 families of parasitic Hymenoptera is registered in cotton agroecosystems in the region of Malhada, in the state of Bahia.(AU)

Seletividade de inseticidas a alguns dos inimigos naturais na cultura do algodão

The aim of this work was study the selectivity of insecticides in favor of natural enemies in cotton (Gossypium hirsutum latifolium Hurtch Lr), DeltaOpal cultivar, in the city of Malhada (BA), and to know the associated beneficial fauna. The study was conducted at the agricultural year of 2010/2011. The design was conducted in randomized blocks with six treatments and four replications. The treatments were: (1) Fipronil 200 SC (0.38 L.ha-1); (2) Alphacypermethrin 100 SC (0.30 L.ha-1), (3) Lufenuron 50 EC (0.30 L.ha-1), (4) Imidacloprid 200 SC (0.30 L.ha-1), (5) Methyl parathion 600 EC (1.00 L.ha-1), and (6) control (water). The product was applied 80 days after emergence, and the evaluations were performed one day before application and 1, 7 and 14 days after application (DAA). The samples were taken using the sampling method beating cloth and Moericke traps. Natural enemies were brought to the laboratory for sorting, counting and identification by family. The toxicity of the products ranged according to the group of natural enemies. Imidacloprid is selective to the spiders and insecticides are moderately toxic (Methyl Parathion and Alphacypermethrin: 1 and 14th DAA; Lufenuron: 14th DAA) or toxic (Fipronil and Alphacypermethrin: 7thDAA). Fipronil (1 DAA), Alphacypermethrin (7th DAA) and Methyl Parathion (14th DAA) are moderately toxic to adult ladybirds. The analyzed insecticides are toxic to the larvae of ladybirds, with more impact until seven days after the application, with the exception of Methyl Parathion classified, as innocuous until this period. The occurrence of 13 families of spiders and 18 families of parasitic Hymenoptera is registered in cotton agroecosystems in the region of Malhada, in the state of Bahia.

O objetivo foi estudar a seletividade de inseticidas aos inimigos naturais na cultura do algodão (Gossypium hirsutum L.r. latifoliumHurtch), cultivar DeltaOpal, no município de Malhada (BA) e conhecer a fauna benéfica associada. O trabalho foi conduzido na safra 2010/2011, com delineamento experimental em blocos ao acaso, com seis tratamentos e quatro repetições, sendo os tratamentos: (1) Fipronil 200 SC (0,38 L.ha-1); (2) Alfacipermetrina 100 SC (0,30 L.ha-1); (3) Lufenuron 50 CE (0,30 L.ha-1); (4) Imidacloprid 200 SC (0,30 L.ha-1); (5) Paration Metil 600 CE (1,00 L.ha-1); e (6) Testemunha (água). A aplicação dos produtos foi feita 80 dias após a emergência, com avaliações um dia antes da aplicação e 1, 7 e 14 dias após a aplicação (DAA) por meio do pano de batida e armadilha Moericke. Em laboratório, os insetos foram triados, contados e identificados em famílias. A toxicidade dos produtos varia em função do grupo do inimigo natural. A Imidacloprida é seletiva às aranhas, sendo os demais inseticidas medianamente tóxicos (Alfacipermetrina e Paration Metil: 1º e 14º DAA; Lufenuron: 14º DAA) ou tóxicos (Fipronil e Alfacipermetrina: 7º DAA). Fipronil (1º DAA), Alfacipermetrina (7º DAA) e Paration Metil (14º DAA) são medianamente tóxicos aos adultos de joaninhas. Os inseticidas estudados são tóxicos às larvas de joaninhas, com mais impacto até os sete dias após a aplicação, com exceção do Paration Metil, classificado como inócuo até esse período. Registra-se a ocorrência de 13 famílias de aranhas e 18 famílias de hymenópteros parasitoides em agroecossistema de algodão na região de Malhada (BA).