Use of cooled buffalo semen as a strategy to increase conception rates in fixed-time artificial insemination programs during unfavorable reproductive periods / [Uso de sêmen resfriado de búfalo como estratégia para aumentar as taxas de concepção em programas de inseminação artificial em tempo fixo, durante períodos reprodutivos desfavoráveis]

The objective of this study was to compare the reproductive efficiency of dairy buffaloes undergoing fixed-time artificial insemination (FTAI) protocols based on progesterone/estrogen (P4/E2) and eCG during unfavorable breeding season using cooled (CS) and frozen semen (FS). A total of 446 buffaloes (> 40 days postpartum) were randomly distributed into four blocks (years): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90), and B4-2017 (n = 179). Each block was subdivided into two (AI with CS and FS using the same ejaculate of each bull). Thus, the block subdivision was as follows: B1 (CS = 71 and FS = 72); B2 (CS = 18 and FS = 16); B3 (CS = 47 and FS = 43); and B4 (CS = 90 and FS = 89). The ejaculates of eight Murrah bulls collected using an artificial vagina were divided into two aliquots: one aliquot was diluted in Botu-Bov® commercial extender and cooled (BB-CS), and the other was diluted in the same extender and frozen (BB-FS). BB-CS aliquots were cooled at 5 °C/24 h using a refrigerator. BB-FS group aliquots were also cooled, and after equilibrating at 5 °C for 4 h, were placed in a 21-L Styrofoam box, 5 cm above the surface of liquid nitrogen. In the afternoon (A) on D0 (2:00 p.m.) the animals received EB 2.0 mg IM (Estrogin®) and an ear implant (CRESTAR® 3.0 mg P4). At D9 (A), the implant was removed, and the animals received eCG 400 IU IM (Folligon® 5000) + Cloprostenol PGF2α 0.530 mg IM (Sincrocio®). At D10 (A), the animals received EB 1.0 mg IM (Estrogin®), and at D12 (8:00 a.m.), AI was performed. At D42, pregnancy was diagnosed via ultrasonography. Total CRs were 48.2% CS and 34.6% FS for years 2014 to 2017, with a significant difference of 13.7% (P<0.05). In conclusion, cooled semen resulted in higher CR than frozen semen in dairy buffaloes under the P4/E2 and eCG FTAI during the unfavorable reproductive season.(AU)

O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência reprodutiva de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) à base de progesterona/estrogênio (P4/E2) e eCG, durante a estação reprodutiva desfavorável, usando-se sêmen resfriado (SR) e congelado (SC) Um total de 446 búfalas (> 40 dias após o parto) foi distribuído aleatoriamente em quatro blocos (anos): B1-2014 (n = 143), B2-2015 (n = 34), B3-2016 (n = 90) e B4-2017 (n = 179). Cada bloco foi subdividido em dois (IA com SR e SC utilizando-se a mesma ejaculação de cada touro). Assim, a subdivisão do bloco foi a seguinte: B1 (SR = 71 e SC = 72); B2 (SR = 18 e SC = 16); B3 (SR = 47 e SC = 43); e B4 (SR = 90 e SC = 89). Os ejaculados de oito touros Murrah coletados com vagina artificial foram divididos em duas alíquotas: uma alíquota diluída em diluente comercial Botu-Bov® e resfriada (BB-SR), e a outra diluída no mesmo diluente e congelada (BB-SC). As alíquotas de BB-SR foram resfriados a 5°C/24h usando-se um refrigerador. As alíquotas do grupo BB-SC também foram resfriadas e, após equilíbrio a 5°C por 4h, foram colocadas em uma caixa de isopor de 21L, 5 cm acima da superfície do nitrogênio líquido. À tarde (A), no D0 (14h), os animais receberam BE 2,0 mg IM (Estrogin®) e um implante auricular (Crestar® 3,0 mg P4). No D9 (A), o implante foi retirado e os animais receberam eCG 400 UI IM (Folligon® 5000) + cloprostenol PGF2α 0,530 mg IM (Sincrocio®). No D10 (A), os animais receberam BE 1,0mg IM (Estrogin®), e, no D12 (8h da manhã), foram realizadas as IAs. No D42, a gestação foi diagnosticada por ultrassonografia. As taxas de concepção (TC) totais foram 48,2% SR e 34,6% SC para os anos de 2014 a 2017, com uma diferença significativa de 13,7% (P<0,05). Em conclusão, o sêmen resfriado resultou em maior TC do que o sêmen congelado em bubalinos leiteiros sob P4/E2 e eCG FTAI durante a estação reprodutiva desfavorável.(AU)

Effectiveness of tes-tris or tris association with low density lipoprotein on in vitro longevity of refrigerated buffalo semen / Eficácia da associação TES-TRIS ou TRIS com lipoproteína de baixa densidade sobre a longevidade in vitro de sêmen refrigerado de búfalos

This study investigated in vitro the efficacy of four different extenders (TES-TRIS and TRIS with LDL low-density lipoprotein at concentrations of 10 or 5%) on the longevity of buffalo sperm in the refrigeration process at 5ºC. Sperm motility was assessed every 24 hours up to 72 hours of incubation using computer assisted sperm analysis and sperm membrane integrity was examined by the hypoosmotic test (HOST) at T1, T24, T48 and T72 hours. Eleven buffaloes (1 ejaculate per buffalo) of the Murrah breed were used, ranging in age from 4 to 5 years. Immediately after collection, each ejaculate was fractionated into 4 aliquots, and each aliquot was diluted in one of four diluents to obtain 50x106SPTZ/mL. The samples were packed in 0.5mL straws and refrigerated (-0.25°C/min) to 5°C and maintained at this temperature until evaluation. Prior to evaluation the samples were heated at 37°C for 30 seconds. The statistical package used for analysis was STATA 12.0 "Statistical Analysis Software" and means were compared by the Friedman test (P<0.05). The results of sperm kinetics and HOST indicate that the TRIS diluent with 10% LDL could be a promising alternative for semen refrigeration at 5ºC, to be used in conventional and fixed time artificial insemination.(AU)

Este estudo investigou in vitro a eficácia de quatro diferentes extensores (TES-TRIS e TRIS com lipoproteína de baixa densidade - LDL, nas concentrações de 10 ou 5%) sobre a longevidade espermática de búfalos no processo de refrigeração a 5ºC. A motilidade espermática foi avaliada a cada 24 horas até 72 horas de incubação, por sistema computadorizado "CASA", e a integridade de membrana espermática foi examinada pelo teste hiposmótico (HOST) em T1, T24, T48 e T72 horas. Foram utilizados 11 búfalos (um ejaculado por búfalo) da raça Murrah, com idade variando de quatro a cinco anos. Imediatamente após a coleta, cada ejaculado foi fracionado em quatro alíquotas, e cada alíquota foi diluída em um dos quatro diluidores para a obtenção de 50x106 SPTZ/mL. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL, refrigeradas (-0,25oC/minuto) até 5oC e mantidas nessa temperatura até a avaliação. Previamente à avaliação, as amostras foram aquecidas a 37oC por 30 segundos. O pacote estatístico utilizado para as análises foi o STATA 12.0 "Statistical Analysis Software", e as médias foram comparadas pelo teste de Friedman (P<0,05). Os resultados de cinética e HOST até o tempo de 48 horas indicam que o diluidor TRIS com 10% LDL seria uma alternativa promissora para a refrigeração do sêmen a 5ºC, a ser utilizado na inseminação artificial e na inseminação artificial em tempo fixo.(AU)

Effectiveness of tes-tris or tris association with low density lipoprotein on in vitro longevity of refrigerated buffalo semen / Eficácia da associação TES-TRIS ou TRIS com lipoproteína de baixa densidade sobre a longevidade in vitro de sêmen refrigerado de búfalos

This study investigated in vitro the efficacy of four different extenders (TES-TRIS and TRIS with LDL low-density lipoprotein at concentrations of 10 or 5%) on the longevity of buffalo sperm in the refrigeration process at 5ºC. Sperm motility was assessed every 24 hours up to 72 hours of incubation using computer assisted sperm analysis and sperm membrane integrity was examined by the hypoosmotic test (HOST) at T1, T24, T48 and T72 hours. Eleven buffaloes (1 ejaculate per buffalo) of the Murrah breed were used, ranging in age from 4 to 5 years. Immediately after collection, each ejaculate was fractionated into 4 aliquots, and each aliquot was diluted in one of four diluents to obtain 50x106SPTZ/mL. The samples were packed in 0.5mL straws and refrigerated (-0.25°C/min) to 5°C and maintained at this temperature until evaluation. Prior to evaluation the samples were heated at 37°C for 30 seconds. The statistical package used for analysis was STATA 12.0 "Statistical Analysis Software" and means were compared by the Friedman test (P<0.05). The results of sperm kinetics and HOST indicate that the TRIS diluent with 10% LDL could be a promising alternative for semen refrigeration at 5ºC, to be used in conventional and fixed time artificial insemination.(AU)

Este estudo investigou in vitro a eficácia de quatro diferentes extensores (TES-TRIS e TRIS com lipoproteína de baixa densidade - LDL, nas concentrações de 10 ou 5%) sobre a longevidade espermática de búfalos no processo de refrigeração a 5ºC. A motilidade espermática foi avaliada a cada 24 horas até 72 horas de incubação, por sistema computadorizado "CASA", e a integridade de membrana espermática foi examinada pelo teste hiposmótico (HOST) em T1, T24, T48 e T72 horas. Foram utilizados 11 búfalos (um ejaculado por búfalo) da raça Murrah, com idade variando de quatro a cinco anos. Imediatamente após a coleta, cada ejaculado foi fracionado em quatro alíquotas, e cada alíquota foi diluída em um dos quatro diluidores para a obtenção de 50x106 SPTZ/mL. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL, refrigeradas (-0,25oC/minuto) até 5oC e mantidas nessa temperatura até a avaliação. Previamente à avaliação, as amostras foram aquecidas a 37oC por 30 segundos. O pacote estatístico utilizado para as análises foi o STATA 12.0 "Statistical Analysis Software", e as médias foram comparadas pelo teste de Friedman (P<0,05). Os resultados de cinética e HOST até o tempo de 48 horas indicam que o diluidor TRIS com 10% LDL seria uma alternativa promissora para a refrigeração do sêmen a 5ºC, a ser utilizado na inseminação artificial e na inseminação artificial em tempo fixo.(AU)

Efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre o sêmen canino criopreservado / Effect of low intensity red light on the canine semen cryopreservation

O objetivo geral deste trabalho foi analisar o efeito da radiação vermelha de baixa intensidade sobre alguns parâmetros cinéticos do espermatozoide canino criopreservado. Ejaculados de oito cães adultos foram centrifugados, rediluídos em meio tris-gema de ovo com 6% de glicerol, e, posteriormente, fracionados em: T1: incidência de radiação vermelha (660 NM) (Fisioled - Mmoptics - 100mW) por 60 segundos, antes do resfriamento e após a descongelação, T2: incidência somente antes do resfriamento, T3: incidência somente após a descongelação, e T4: sem incidência. Após a descongelação, as amostras foram submetidas ao TTR utilizando-se Sperm Class Analyzer(r). No TTR0, TTR60 e TTR90, não houve diferença entre as variáveis analisadas pelo CASA. Somente no TTR30 os efeitos da incidência da radiação vermelha foram evidentes e significativos em T1 e T2, T1 resultou em baixa MT (12,5 + 10,6%) e T2 determinou o melhor resultado de MT 40,3 + 26,1%. De forma similar T1 apresentou maior número de espermatozoides estáticos (77,5±28,9%) em relação ao T2 (50,6±28%). Concluiu-se que a dupla incidência de radiação vermelha de baixa intensidade antes do resfriamento e após a descongelação teve efeito deletério sobre a motilidade do espermatozoide canino, expressa principalmente aos 30 minutos após descongelação.(AU)

The aim of this study was to analyze the effect of low intensity red light on some kinetic parameters of cryopreserved canine sperm. Ejaculates from 08 adult dogs were centrifuged, diluted in Tris-egg yolk with 6% glycerol, and subsequently separated into: T1: incidence of red light (660 nm) (Fisioled -MMOptics - 100mW) for 60 seconds before the cooling and after thawing, T2: just before cooling, T3: only after thawing, and T4: no incidence. After thawing the samples were subjected to TTR using Sperm analyzer(r). In TTR0, TTR60 and TTR90 there were no differences between the variables analyzed by CASA. Only in TTR30 the effects of the incidence of red light were visible and significant in T1 and T2. T1 resulted in low MT (12.5 ±10.6%) and T2 determined the best result of MT 26.1%±40.3. Similarly T1 showed a higher number of static spermatozoa (77.5±28.9%) compared to T2 (50.6±28%). We concluded that the double incidence of low intensity red light, before cooling and after thawing, had a deleterious effect on canine sperm motility expressed at 30 minutes after thawing.(AU)

Impacto da degradação sobre o estoque total de carbono de florestas ripárias na Amazônia Oriental, Brasil / Impact of degradation on carbon stock of riparian forests in the eastern Amazon, Brazil

Riparian forests provide essential ecosystem services to humanity, but are being degraded at an accelerated rate in the Amazon. This study aimed to quantify carbon stocks above and below ground in riparian forests with four levels of degradation (very high, high, medium and low) in two watersheds (Pepital Rio and Rio Grande) in Alcântara, Eastern Amazon. Twenty-four permanent plots of 1,000 m2 were installed, and vegetation (trees, shrubs, herbs, lianas and palms), necromass (litter, dead trees, branches) and soil (0-20 cm and roots) were sampled. The biomass was estimated using allometric models (vegetation with dbh> 1 cm and dead trees) and destructively (herbaceous, litterfall, branches, roots). The total carbon stock in the most conserved riparian forests ranged between 88 and 202 Mg(C) ha-1. Degradation significantly reduced carbon stock in all compartments (up to 97% in above-ground biomass, up to 91% of necromass, and up to 47% in soils). In conserved areas, the aboveground biomass is the largest compartment of the total carbon stock (> 70%), mainly due to large trees. The carbon stock in the different compartments are strongly correlated with each other and with the canopy opening. The incorporation of these results in regional carbon models can assist in the implementation and review of the Brazilian Forest Act, particularly in the restoration of riparian forests where agriculture is consolidated.(AU)

As florestas ripárias provêem serviços ecossistêmicos essenciais à humanidade, mas estão sendo degradadas em um ritmo acelerado na Amazônia. Esse estudo teve como objetivo quantificar os estoques de carbono acima e abaixo do solo de florestas ripárias com quatro níveis de degradação (muito alta, alta, média e baixa) em duas microbacias (Rio Pepital e Rio Grande) em Alcântara (Maranhão), na Amazônia Oriental. Foram instaladas 24 parcelas permanentes de 1.000 m2, onde a vegetação (árvores, arbustos, herbáceas, lianas e palmeiras), a necromasa (serapilheira, árvores mortas, galhos) e o solo (0-20 cm e raízes) foram amostrados. A biomassa foi estimada mediante modelos alométricos (vegetação com DAP > 1 cm e árvores mortas) e de forma destrutiva (herbáceas, serapilheira, galhos finos, raízes). O estoque total de carbono nas florestas ripárias mais conservadas variou entre 88 e 202 Mg(C) ha-1. A degradação reduziu significativamente o estoque de carbono em todos os compartimentos (até 97% na biomassa viva acima do solo, até 91% de necromassa e até 47% no solo). Nas áreas conservadas, a biomassa viva acima do solo tem a maior participação no estoque total de carbono (> 70%), principalmente devido às árvores de grande porte. O estoque de carbono nos diferentes compartimentos estão fortemente relacionados entre si e também com a abertura do dossel. A incorporação desses resultados em modelos regionais de carbono pode auxiliar na implementação e revisão do Código Florestal Brasileiro, em particular na restauração das florestas ripárias onde a agricultura está consolidada.(AU)

Impacto da degradação sobre o estoque total de carbono de florestas ripárias na Amazônia Oriental, Brasil / Impact of degradation on carbon stock of riparian forests in the eastern Amazon, Brazil

Riparian forests provide essential ecosystem services to humanity, but are being degraded at an accelerated rate in the Amazon. This study aimed to quantify carbon stocks above and below ground in riparian forests with four levels of degradation (very high, high, medium and low) in two watersheds (Pepital Rio and Rio Grande) in Alcântara, Eastern Amazon. Twenty-four permanent plots of 1,000 m2 were installed, and vegetation (trees, shrubs, herbs, lianas and palms), necromass (litter, dead trees, branches) and soil (0-20 cm and roots) were sampled. The biomass was estimated using allometric models (vegetation with dbh> 1 cm and dead trees) and destructively (herbaceous, litterfall, branches, roots). The total carbon stock in the most conserved riparian forests ranged between 88 and 202 Mg(C) ha-1. Degradation significantly reduced carbon stock in all compartments (up to 97% in above-ground biomass, up to 91% of necromass, and up to 47% in soils). In conserved areas, the aboveground biomass is the largest compartment of the total carbon stock (> 70%), mainly due to large trees. The carbon stock in the different compartments are strongly correlated with each other and with the canopy opening. The incorporation of these results in regional carbon models can assist in the implementation and review of the Brazilian Forest Act, particularly in the restoration of riparian forests where agriculture is consolidated.

As florestas ripárias provêem serviços ecossistêmicos essenciais à humanidade, mas estão sendo degradadas em um ritmo acelerado na Amazônia. Esse estudo teve como objetivo quantificar os estoques de carbono acima e abaixo do solo de florestas ripárias com quatro níveis de degradação (muito alta, alta, média e baixa) em duas microbacias (Rio Pepital e Rio Grande) em Alcântara (Maranhão), na Amazônia Oriental. Foram instaladas 24 parcelas permanentes de 1.000 m2, onde a vegetação (árvores, arbustos, herbáceas, lianas e palmeiras), a necromasa (serapilheira, árvores mortas, galhos) e o solo (0-20 cm e raízes) foram amostrados. A biomassa foi estimada mediante modelos alométricos (vegetação com DAP > 1 cm e árvores mortas) e de forma destrutiva (herbáceas, serapilheira, galhos finos, raízes). O estoque total de carbono nas florestas ripárias mais conservadas variou entre 88 e 202 Mg(C) ha-1. A degradação reduziu significativamente o estoque de carbono em todos os compartimentos (até 97% na biomassa viva acima do solo, até 91% de necromassa e até 47% no solo). Nas áreas conservadas, a biomassa viva acima do solo tem a maior participação no estoque total de carbono (> 70%), principalmente devido às árvores de grande porte. O estoque de carbono nos diferentes compartimentos estão fortemente relacionados entre si e também com a abertura do dossel. A incorporação desses resultados em modelos regionais de carbono pode auxiliar na implementação e revisão do Código Florestal Brasileiro, em particular na restauração das florestas ripárias onde a agricultura está consolidada.

Cryoprotection effectiveness of low concentrations of natural and lyophilized LDL (low density lipoproteins) on canine spermatozoa / Eficiência de baixas concentrações de lipoproteínas de baixa densidade natural e liofilizada na crioproteto de espermatozoides caninos

The aim of this study was to evaluate the use of low concentrations of natural and lyophilized low density lipoprotein (LDL) from hen's egg yolk for cryopreservation of canine semen. Different ammonium sulphate concentrations were tested to extract LDL from egg yolk. The yolk was centrifuged, and LDL was isolated using 10, 20, 40, 45, or 50 percent ammonium sulphate solution (ASS). The LDL-rich floating fraction was collected for chemical characterization. Dry matter content was lowest (P<0.05) in the LDL extracted with the 50 percent ASS. The purification of LDL increased in association with increasing ammonium sulphate concentrations. SDS-PAGE showed that the 50 percent ASS solution yielded a purer fraction of LDL from egg yolk. For semen cryopreservation, TRIS extender was used replacing 20 percent egg yolk (control) by natural or lyophilized LDL using 1, 2, and 3 percent (w/v). Semen was centrifuged (755Xg for 7 min), diluted with one of the extenders, packed into 0.5mL straws (100x106 sperm/mL), and placed in a programmable cryopreservation machine. Thawed semen (37°C/ 30s) was analyzed for sperm motility, morphology, and by the hypoosmotic and epifluorescence tests (CFDA/ PI). Natural LDL extracted with 50 percent ASS was as effective as whole egg yolk to preserve canine frozen sperm when using low concentrations. The lyophilized LDL, mainly in the two higher concentrations tested (2 and 3 percent), was unsuitable to maintain the effectiveness of the LDL cryoprotective effect on dog sperm.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o uso de baixas concentrações da lipoproteína de baixa densidade (LBD) extraída da gema do ovo de galinha, nas formas natural e liofilizada, na criopreservado do sêmen canino. Diferentes concentrações de sulfato de amônio também foram testadas na extrato da LBD da gema do ovo. A gema foi centrifugada, sendo a LBD isolada usando-se soluto saturada de sulfato de amônio (SSA) nas concentrações de 10, 20, 40, 45 e 50 por cento. A frado rica em LBD foi coletada para caracterizado química. O conteœdo de matéria seca foi menor (P<0,05) na LBD extraída com SSA 50 por cento. A pureza da LBD melhorou medida que se aumentou a concentrado de SSA utilizada. SDS-PAGE mostrou que a SSA 50 por cento produziu uma frado mais pura de LBD oriunda da gema do ovo. Para o congelamento de sêmen, o meio diluidor TRIS teve a gema do ovo a 20 por cento (controle) substituída pela LBD a 1, 2 e 3 por cento (p/v), nas formas natural e liofilizada. O sêmen foi centrifugado (755xg por 7min), diluído em um dos meios diluidores em teste e envasado em palhetas de 0,5mL (100x106 sptz/mL), sendo congelado em máquina de congelamento programável. O sêmen descongelado (37°C/30s) foi analisado quanto motilidade e morfologia espermática e nos testes hiposm-tico e de epifluorescência (DACF/IP). A LBD natural extraída com SSA 50 por cento foi tão eficiente quanto a gema do ovo na preservado do espermatozoide canino congelado nas baixas concentrações testadas. A LBD liofilizada, principalmente as duas maiores concentrações (2 e 3 por cento), não foi adequada para manter o efeito crioprotetor da LBD sobre o espermatozoide canino.(AU)

Fatores que interferem na transferência de embriões em ovinos / Factors that influence ewes embryo transfer

Vários fatores podem influenciar o sucesso na transferência de embriões em ovinos. Alguns estãorelacionados à maximização do número de embriões produzidos por ovelha, principalmente relacionados àresposta superovulatória, tais como responsividade folicular ao FSH, falhas ligadas ao corpo lúteo e ordem decoletas, outras simplesmente associadas ao manejo, como estresse térmico, condição corporal e dieta. Natentativa de aumentar o sucesso da técnica, tratamentos superovulatórios utilizando diferentes fontes de FSHestão sendo testados, bem como a utilização de agentes antiprostaglandínicos ou agentes luteotróficos. Alémdisso, parece também ser irrefutável a utilização da ultrassonografia para acompanhamento da dinâmica folicularantes do início do tratamento para superovulação. O ambiente no qual se encontram as ovelhas, tanto a doadoracomo a receptora, pode influenciar diretamente todo o processo, podendo provocar inatividade ovariana, falhasna dinâmica folicular, diminuição do número e da qualidade dos embriões produzidos, além de um desfavorávelambiente uterino à gestação.(AU)

Several factors can influence the success of the transference of sheep embryos. Some are related to themaximization of the number of embryos produced per ewe, mainly the ones related to the superovulatoryresponse in ewes, such as follicular responsiveness to FSH, failures linked to the corpus luteum and the order ofsampling, other simply associated to handling, such as thermal stress, body condition and diet. In an attempt toincrease the success of the technique, superovulatory treatments using different sources of FSH are being tested,as well as the use of antiprostaglandin agents or luteotropic agents. The use of ultrasound to monitor folliculargrowth prior to initiating treatment for superovulation also seems compelling. The environment in which thedonor and receiving ewes are located can directly influence the entire process, being able to provoke ovarianinactivity, failures on the follicular dynamics, decrease in the number and quality of the embryos produced, andalso one uterine environment unfavorable for pregnancy.(AU)

Fatores que interferem na transferência de embriões em ovinos / Factors that influence ewes embryo transfer

Vários fatores podem influenciar o sucesso na transferência de embriões em ovinos. Alguns estãorelacionados à maximização do número de embriões produzidos por ovelha, principalmente relacionados àresposta superovulatória, tais como responsividade folicular ao FSH, falhas ligadas ao corpo lúteo e ordem decoletas, outras simplesmente associadas ao manejo, como estresse térmico, condição corporal e dieta. Natentativa de aumentar o sucesso da técnica, tratamentos superovulatórios utilizando diferentes fontes de FSHestão sendo testados, bem como a utilização de agentes antiprostaglandínicos ou agentes luteotróficos. Alémdisso, parece também ser irrefutável a utilização da ultrassonografia para acompanhamento da dinâmica folicularantes do início do tratamento para superovulação. O ambiente no qual se encontram as ovelhas, tanto a doadoracomo a receptora, pode influenciar diretamente todo o processo, podendo provocar inatividade ovariana, falhasna dinâmica folicular, diminuição do número e da qualidade dos embriões produzidos, além de um desfavorávelambiente uterino à gestação.

Several factors can influence the success of the transference of sheep embryos. Some are related to themaximization of the number of embryos produced per ewe, mainly the ones related to the superovulatoryresponse in ewes, such as follicular responsiveness to FSH, failures linked to the corpus luteum and the order ofsampling, other simply associated to handling, such as thermal stress, body condition and diet. In an attempt toincrease the success of the technique, superovulatory treatments using different sources of FSH are being tested,as well as the use of antiprostaglandin agents or luteotropic agents. The use of ultrasound to monitor folliculargrowth prior to initiating treatment for superovulation also seems compelling. The environment in which thedonor and receiving ewes are located can directly influence the entire process, being able to provoke ovarianinactivity, failures on the follicular dynamics, decrease in the number and quality of the embryos produced, andalso one uterine environment unfavorable for pregnancy.

Pontos críticos na metodologia de extração das lipoproteínas de baixa densidade e suas perspectivas de uso no congelamento de sêmen / Critical stepsin the extraction methodology of low density lipoproteins and their prospects for use on semen cryopreservation

As lipoproteínas de baixa densidade são consideradas as principais responsáveis pelo papel protetor da gema do ovo de galinha na criopreservação de espermatozoides em mamíferos. A extração dessas lipoproteínas éum método fácil, rápido e eficiente, porém é importante enfatizar seus pontos críticos, a fim de se evitarem falhas durante o processo e uma possível contaminação da fração lipoproteica. Vários experimentos têm testado o uso de lipoproteínas de baixa densidade adicionadas aos meios diluidores em substituição à gema do ovo total. Os resultados mostram que meios contendo as lipoproteínas de baixa densidade são capazes de preservar parâmetrosespermáticos como motilidade, integridade estrutural e funcional das membranas e fertilidade. O objetivo desta revisão é discutir os pontos críticos da metodologia de extração das lipoproteínas de baixa densidade, bem como aspesquisas existentes sobre o uso de meios diluidores contendo essas lipoproteínas no congelamento de sêmen.(AU)

Low density lipoproteins (LDL) are considered largely responsible for the protective action of hens egg yolk in cryopreservation of mammalian spermatozoa. The LDL extraction is an easy, fast, and efficient method, but it is important to emphasize its critical points, in order to prevent failures during the process and possible contamination of purified LDL fraction. Many studies have been evaluating the use of LDL added in seminal extenders replacing whole egg yolk. Results have shown that LDL extenders are capable to preserve spermatic parameters such as motility, structural and functional membranes integrity, and fertility. The aim of this review is to discuss critical steps of the extraction methodology of low density lipoproteins, as well as researches developed for testing its use in frozen-thawed semen. (AU)

Pontos críticos na metodologia de extração das lipoproteínas de baixa densidade e suas perspectivas de uso no congelamento de sêmen / Critical stepsin the extraction methodology of low density lipoproteins and their prospects for use on semen cryopreservation

As lipoproteínas de baixa densidade são consideradas as principais responsáveis pelo papel protetor da gema do ovo de galinha na criopreservação de espermatozoides em mamíferos. A extração dessas lipoproteínas éum método fácil, rápido e eficiente, porém é importante enfatizar seus pontos críticos, a fim de se evitarem falhas durante o processo e uma possível contaminação da fração lipoproteica. Vários experimentos têm testado o uso de lipoproteínas de baixa densidade adicionadas aos meios diluidores em substituição à gema do ovo total. Os resultados mostram que meios contendo as lipoproteínas de baixa densidade são capazes de preservar parâmetrosespermáticos como motilidade, integridade estrutural e funcional das membranas e fertilidade. O objetivo desta revisão é discutir os pontos críticos da metodologia de extração das lipoproteínas de baixa densidade, bem como aspesquisas existentes sobre o uso de meios diluidores contendo essas lipoproteínas no congelamento de sêmen.

Low density lipoproteins (LDL) are considered largely responsible for the protective action of hen’s egg yolk in cryopreservation of mammalian spermatozoa. The LDL extraction is an easy, fast, and efficient method, but it is important to emphasize its critical points, in order to prevent failures during the process and possible contamination of purified LDL fraction. Many studies have been evaluating the use of LDL added in seminal extenders replacing whole egg yolk. Results have shown that LDL extenders are capable to preserve spermatic parameters such as motility, structural and functional membranes integrity, and fertility. The aim of this review is to discuss critical steps of the extraction methodology of low density lipoproteins, as well as researches developed for testing its use in frozen-thawed semen.

Comparação dos índices de eficiência reprodutiva por diferentes métodos em rebanhos bovinos leiteiros / Comparison of reproductive efficiency indexes by different methods in dairy cattle herds

O presente estudo teve como objetivo promover o levantamento de índices zootécnicos para calcular e comparar a eficiência reprodutiva de rebanhos bovinos leiteiros por diferentes métodos. O intervalo de partos dos rebanhos estudados apresentou uma variação de 13,3 a 15,2 meses por meio dos diferentes métodos utilizados para sua obtenção, não se observando diferença significativa (P>0,05) entre eles. As avaliações pelos métodos de Johnson et al. (1964) e Butendieck et al. (1972) mostraram, respectivamente, eficiência reprodutiva de 79,5 e 77,8%. Embora considerados métodos mais eficientes que o de Willcox et al. (1957), cuja média encontrada para os mesmos rebanhos foi de 90,2%, não se observou diferença significativa entre os resultados obtidos pelos três métodos.(AU)

The study aimed to promote the lifting of indexes to calculate and compare the reproductive efficiency of dairy cattle herds by different methods. The parturition interval studied showed a variation from 13.3 to 15.2 months by means of different methods for obtaining it are not observing a significant difference (P> 0.05) between them. Evaluations by the methods of Johnson et al (1964) and Butendieck et al. (1972) showed, respectively, reproductive efficiency of 79.5 and 77.8%. Although regarded as the most efficient methods of Willcox et al. (1957), whose average found in the same herd was 90.2%, there was no significant difference between the results obtained by three methods.(AU)

Three-dimensional modeling of color Doppler images: a new approach to study follicular vascularization in cattle

Ovarian blood supply is directly related to follicle developmental potential and to oocyte quality, and color Doppler ultrasonography might be a valuable tool to predict in vitro fertilization outcomes. In most studies in large domestic animals, however, the evaluation of follicle blood flow is qualitative (presence or absence of color signal) or dependent on the analysis of a single image. The objective of the present study was to first describe the use of a three-dimensional (3D) modeling of color Doppler images for a quantitative assessment of vascularization in bovine ovarian follicles. Follicular wave emergence was synchronized in Holstein and Gir heifers (n = 20), and follicular dynamics were assessed every 12 h using a color Doppler ultrasound device. The recorded cine-loop of the dominant follicle was decomposed into frames and medical image processing software was used to isolate the Doppler signal, generate the 3D model and calculate the volume of vascularization. In experiment 1, the model was validated by comparing the expected and calculated volumes and was used to predict possible variations in the results of the 2D approach. In experiment 2, vascularization was analyzed during follicular development. In both breeds, the volume of vascularization increased after follicle deviation and was positively correlated (P < 0.05) to follicular diameter (r = 0.65 and 0.54 for Holstein and Gir heifers, respectively). Spatial analysis of the three-dimensional model showed an uneven distribution of vascularization in the follicular wall, with a more intense blood flow being detected in the basal (nearest the ovarian hilus) and lateral regions of the dominant follicles. These results demonstrate the potential of this technique as a new tool for in vivo studies of ovarian physiology in large animals.

Three-dimensional modeling of color Doppler images: a new approach to study follicular vascularization in cattle

Ovarian blood supply is directly related to follicle developmental potential and to oocyte quality, and color Doppler ultrasonography might be a valuable tool to predict in vitro fertilization outcomes. In most studies in large domestic animals, however, the evaluation of follicle blood flow is qualitative (presence or absence of color signal) or dependent on the analysis of a single image. The objective of the present study was to first describe the use of a three-dimensional (3D) modeling of color Doppler images for a quantitative assessment of vascularization in bovine ovarian follicles. Follicular wave emergence was synchronized in Holstein and Gir heifers (n = 20), and follicular dynamics were assessed every 12 h using a color Doppler ultrasound device. The recorded cine-loop of the dominant follicle was decomposed into frames and medical image processing software was used to isolate the Doppler signal, generate the 3D model and calculate the volume of vascularization. In experiment 1, the model was validated by comparing the expected and calculated volumes and was used to predict possible variations in the results of the 2D approach. In experiment 2, vascularization was analyzed during follicular development. In both breeds, the volume of vascularization increased after follicle deviation and was positively correlated (P < 0.05) to follicular diameter (r = 0.65 and 0.54 for Holstein and Gir heifers, respectively). Spatial analysis of the three-dimensional model showed an uneven distribution of vascularization in the follicular wall, with a more intense blood flow being detected in the basal (nearest the ovarian hilus) and lateral regions of the dominant follicles. These results demonstrate the potential of this technique as a new tool for in vivo studies of ovarian physiology in large animals.(AU)

Gema do ovo de galinha e a ação protetora de suas lipoproteínas de baixa densidade na criopreservação do sêmen: uma revisão / Hens egg yolk and the protective action of its low density lipoproteins on semen cryopreservation: a review

Desde 1939, a gema do ovo tem sido utilizada na biotecnologia da reprodução como ingrediente essencial nos meios diluidores para resfriamento e congelamento de espermatozoides em várias espécies domésticas. A gema é formada por lipoproteínas, livetinas e fosvitinas, encontradas em duas frações facilmente separáveis pelo método de centrifugação: o grânulo e o plasma. Acredita-se que as lipoproteínas de baixa densidade, presentes no plasma, sejam as responsáveis por sua ação crioprotetora. Esta revisão enfoca a composição química do ovo de galinha e de sua gema, mostrando, cronologicamente, como foram desenvolvidas as hipóteses existentes sobre seu mecanismo de ação no congelamento de sêmen.(AU)

Since 1939, the hens egg yolk has been used as an essential ingredient in extenders for cooling and freezing sperm of several domestic species, in reproductive biotechnology protocols. The egg yolk is composed of lipoproteins, livetins, and lipovitins. These components can be easily separated by centrifugation in the granular and the plasmatic fractions. It has been acknowledged that the low density lipoproteins present in the plasma are responsible for the protective effects of the egg yolk. This review focuses on the chemical compound of the egg yolk and historical aspects of the hypotheses that try to explain the mechanism of action of the egg yolk on sperm cryopreservation. (AU)

Gema do ovo de galinha e a ação protetora de suas lipoproteínas de baixa densidade na criopreservação do sêmen: uma revisão / Hen’s egg yolk and the protective action of its low density lipoproteins on semen cryopreservation: a review

Desde 1939, a gema do ovo tem sido utilizada na biotecnologia da reprodução como ingrediente essencial nos meios diluidores para resfriamento e congelamento de espermatozoides em várias espécies domésticas. A gema é formada por lipoproteínas, livetinas e fosvitinas, encontradas em duas frações facilmente separáveis pelo método de centrifugação: o grânulo e o plasma. Acredita-se que as lipoproteínas de baixa densidade, presentes no plasma, sejam as responsáveis por sua ação crioprotetora. Esta revisão enfoca a composição química do ovo de galinha e de sua gema, mostrando, cronologicamente, como foram desenvolvidas as hipóteses existentes sobre seu mecanismo de ação no congelamento de sêmen.

Since 1939, the hen’s egg yolk has been used as an essential ingredient in extenders for cooling and freezing sperm of several domestic species, in reproductive biotechnology protocols. The egg yolk is composed of lipoproteins, livetins, and lipovitins. These components can be easily separated by centrifugation in the granular and the plasmatic fractions. It has been acknowledged that the low density lipoproteins present in the plasma are responsible for the protective effects of the egg yolk. This review focuses on the chemical compound of the egg yolk and historical aspects of the hypotheses that try to explain the mechanism of action of the egg yolk on sperm cryopreservation.

Viability and fertility of stallion semen frozen with ethylene glycol and acetamide as a cryogenic agent

This study was designed to determine the effect of cooling at a rate of - 0.13 o C/min or any slow cooling prior to freezing on stallion sperm and to determine th e effect of two thawing temperatures on the viability of sperm frozen using a lactose - EDTA - egg yolk extender (LAC) with 3.5% ethylene glycol (LAC 3.5% EG) or a LAC with the additional incorporation of methyl cellulose, trehalose and acetamide (LAC+5% AC). No differences were observed in the post - thaw parameters of sperm frozen using either one of the cryogenic agents or frozen with or without previous slow cooling. Thawing at 75 o C was better than at 37 o C (P < 0.05). An interaction was observed between the c ryoprotectant and the freezing protocol (P < 0.05). A conception rate of 23.3% was obtained after AI using equine semen frozen with LAC+5% AC.

Viability and fertility of stallion semen frozen with ethylene glycol and acetamide as a cryogenic agent

This study was designed to determine the effect of cooling at a rate of - 0.13 o C/min or any slow cooling prior to freezing on stallion sperm and to determine th e effect of two thawing temperatures on the viability of sperm frozen using a lactose - EDTA - egg yolk extender (LAC) with 3.5% ethylene glycol (LAC 3.5% EG) or a LAC with the additional incorporation of methyl cellulose, trehalose and acetamide (LAC+5% AC). No differences were observed in the post - thaw parameters of sperm frozen using either one of the cryogenic agents or frozen with or without previous slow cooling. Thawing at 75 o C was better than at 37 o C (P < 0.05). An interaction was observed between the c ryoprotectant and the freezing protocol (P < 0.05). A conception rate of 23.3% was obtained after AI using equine semen frozen with LAC+5% AC.(AU)

Asininos: animais com características sociais e reprodutivas próprias / Donkeys: a specie with own social and reproductive characteristics

Esta revisão tem como objetivo compilar dados provenientes de várias pesquisas que enfocaram a análise do comportamento sexual de asininos. São abordados aspectos do comportamento sexual tanto do macho quanto da fêmea, incluindo dados obtidos em avaliações feitas em regime de monta controlada, monta a campo, bem como durante extenso período de coleta de sêmen pelo método da vagina artificial. São também abordados alguns aspectos do comportamento sexual de jumentos cobrindo éguas a campo. Procurou-se analisar e discutir os achados, levando em consideração a organização social da espécie asinina.(AU)

This review is a compilation of data from several studies that focused on the analysis of sexual behavior of donkeys. This review addresses aspects of sexual behavior of male and female including data obtained in evaluations under field and controlled breeding management systems as during extensive collection period of semen by the method of artificial vagina. Are also addressed some aspects of sexual behavior of asses breeding mares at field. The analysis and discussion of the findings have taken into account the social organization of the donkey specie.(AU)

Asininos: animais com características sociais e reprodutivas próprias / Donkeys: a specie with own social and reproductive characteristics

Esta revisão tem como objetivo compilar dados provenientes de várias pesquisas que enfocaram a análise do comportamento sexual de asininos. São abordados aspectos do comportamento sexual tanto do macho quanto da fêmea, incluindo dados obtidos em avaliações feitas em regime de monta controlada, monta a campo, bem como durante extenso período de coleta de sêmen pelo método da vagina artificial. São também abordados alguns aspectos do comportamento sexual de jumentos cobrindo éguas a campo. Procurou-se analisar e discutir os achados, levando em consideração a organização social da espécie asinina.

This review is a compilation of data from several studies that focused on the analysis of sexual behavior of donkeys. This review addresses aspects of sexual behavior of male and female including data obtained in evaluations under field and controlled breeding management systems as during extensive collection period of semen by the method of artificial vagina. Are also addressed some aspects of sexual behavior of asses breeding mares at field. The analysis and discussion of the findings have taken into account the social organization of the donkey specie.