The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved one’s (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaramentre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana

Abstract Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved ones ( 0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

Resumo A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaram entre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente ( 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Abstract Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved one's (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.

Resumo A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaram entre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.

The dynamics of genome size and GC contents evolution in genus Nicotiana / A dinâmica do tamanho do genoma e a evolução dos conteúdos de GC no gênero Nicotiana

Hybridization and Polyploidization are most common of the phenomenon observed in plants, especially in the genus Nicotiana leading to the duplication of genome. Although genomic changes associated with these events has been studied at various levels but the genome size and GC content variation is less understood because of absence of sufficient genomic data. In this study the flow cytometry technique was used to uncover the genome size and GC contents of 46 Nicotiana species and we compared the genomic changes associated with the hybridization events along evolutionary time scale. The genome size among Nicotiana species varied between 3.28 pg and 11.88 pg whereas GC contents varied between 37.22% and 51.25%. The tetraploid species in genus Nicotiana including section Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica and Sauveolentes revealed both up and downsizing in their genome sizes when compared to the sum of genomes of their ancestral species. The genome sizes of three homoploid hybrids were found near their ancestral species. Loss of large genome sequence was observed in the evolutionary more aged species (>10 Myr) as compared to the recently evolved ones (<0.2 Myr). The GC contents were found homogenous with a mean difference of 2.46% among the Nicotiana species. It is concluded that genome size change appeared in either direction whereas the GC contents were found more homogenous in genus Nicotiana.(AU)

A hibridização e a poliploidização são os fenômenos mais comuns observados em plantas, principalmente no gênero Nicotiana, levando à duplicação do genoma. Embora as mudanças genômicas associadas a esses eventos tenham sido estudadas em vários níveis, o tamanho do genoma e a variação do conteúdo de GC são menos compreendidos devido à ausência de dados genômicos suficientes. Neste estudo, a técnica de citometria de fluxo foi usada para descobrir o tamanho do genoma e o conteúdo de GC de 46 espécies de Nicotiana, e comparamos as mudanças genômicas associadas aos eventos de hibridização ao longo da escala de tempo evolutiva. O tamanho do genoma entre as espécies de Nicotiana variou entre 3,28 pg e 11,88 pg, enquanto os conteúdos de GC variaramentre 37,22% e 51,25%. As espécies tetraploides do gênero Nicotiana, incluindo as seções Polydiclae, Repandae, Nicotiana, Rustica e Sauveolentes, revelaram aumento e redução do tamanho do genoma quando comparados à soma dos genomas de suas espécies ancestrais. Os tamanhos do genoma de três híbridos homoploides foram encontrados perto de suas espécies ancestrais. A perda da grande sequência do genoma foi observada nas espécies evolutivas mais velhas (> 10 Myr) em comparação com as que evoluíram recentemente (< 0,2 Myr). Os teores de GC foram homogêneos com diferença média de 2,46% entre as espécies de Nicotiana. Conclui-se que a mudança no tamanho do genoma apareceu em ambas as direções, enquanto os conteúdos de GC foram encontrados mais homogêneos no gênero Nicotiana.(AU)

Traditional knowledge about medicinal plant in the remote areas of Wari Tehsil, Dir Upper, Pakistan

Abstract Traditional medicine is cheaper and easily available to local people, to care for most frequent diseases in the Northern parts of Pakistan. Our study aimed at inventorying medicine from local plants, documenting their uses, and assessing their market value in 2015-2018 during spring, summer, and winter seasons. A total of 15 trips were made, 5 in each season. Semi-structured interviews with 165 inhabitants age range between 20-80 years were conducted, analyzed the data is analyzed using Relative frequency of citation(RFC), Use Value(UV), Fidelity Level(FL), Informants consensus factor(ICF), and Jaccard index(JI) to find the most frequent and well-known used species in the area. A total of 86 species belonging to 39 vascular plant families, 33 genera were documented as medicinally important. Family Asteraceae was observed as the dominant family among all the families with 10 species, the leaf was the most used parts and decoction 36% was the most preferred preparation type. Herb was the predominant life form (67%). The maximum UV (0.92) was demonstrated by J. adhatoda L. species, while A. sativum L. shows maximum RFC (0.58), the highest ICF value represented by diarrhea and dermatitis 0.92, and high FL value is recorded 100%. According to our collections, wild species were 45%, invasive species were 38% and cultivated 17% recorded, dicots species were recorded more 81%. Seven 7 medicinal species is being economically important and export to the local and international market of the world, whereas P. integrima L. species were the most exported species according to the local dealers. The investigated area is rural and the local people depend on the area's plants for their health needs, and other uses like a vegetable, fuelwood, fodder, etc. The current result of RFC, UV, ICF, FL, and JI shows that medicinal flora needs to be pharmacologically and phytochemically investigated to prove their efficacy. The documentation of medicinal knowledge is important to preserve this precious old knowledge before it is lost forever, due to technological and environmental changes in the world.

Resumo A medicina tradicional é mais barata e facilmente disponível à população local para cuidar das doenças mais frequentes nas áreas do norte do Paquistão. Nosso estudo teve como objetivo inventariar medicamentos de plantas locais, documentar seus usos e avaliar seu valor de mercado em 2015-2018 durante as temporadas de primavera, verão e inverno. Foram feitas 15 viagens, 5 em cada temporada. Foram realizadas entrevistas semiestruturadas com 165 moradores na faixa etária de 20 a 80 anos, com dados analisados por meio de frequência relativa de citação (RFC), valor de uso (UV), nível de fidelidade (FL), fator de consenso de informantes (CIF), e o índice de Jaccard (JI) para encontrar as espécies utilizadas mais frequentes e conhecidas na área. Um total de 86 espécies pertencentes a 39 famílias de plantas vasculares, 33 gêneros foram documentados como medicamente importantes. A família Asteraceae foi observada como a família dominante entre todas as famílias com 10 espécies, a folha foi a parte mais utilizada e a decocção 36% foi o tipo de preparação mais preferido. A erva foi a forma de vida predominante (67%). O UV máximo (0,92) foi demonstrado pelas espécies de J. adhatoda L., enquanto A. sativum L. mostra RFC máximo (0,58), o maior valor de ICF representado por diarreia e dermatite 0,92, e alto valor de FL é registrado 100%. De acordo com nossas coleções, as espécies selvagens foram 45%, as espécies invasoras 38% e as cultivadas 17% registradas, as espécies dicotiledôneas foram registradas mais 81%. Sete espécies medicinais estão sendo economicamente importantes e exportadas para o mercado local e internacional do mundo, enquanto as espécies de P. integrima L. foram as espécies mais exportadas de acordo com os comerciantes locais. A área investigada é rural e a população local depende das plantas da área para suas necessidades de saúde e outros usos como vegetal, lenha, forragem etc. O resultado atual de RFC, UV, ICF, FL e JI mostra que a flora medicinal precisa ser investigada farmacológica e fitoquimicamente para comprovar sua eficácia. A documentação do conhecimento medicinal é importante para preservar esse precioso conhecimento antigo antes que se perca para sempre, devido às mudanças tecnológicas e ambientais do mundo.

Traditional knowledge about medicinal plant in the remote areas of Wari Tehsil, Dir Upper, Pakistan / Conhecimento tradicional sobre plantas medicinais nas áreas remotas de Wari Tehsil, Dir Upper, Paquistão

Abstract Traditional medicine is cheaper and easily available to local people, to care for most frequent diseases in the Northern parts of Pakistan. Our study aimed at inventorying medicine from local plants, documenting their uses, and assessing their market value in 2015-2018 during spring, summer, and winter seasons. A total of 15 trips were made, 5 in each season. Semi-structured interviews with 165 inhabitant's age range between 20-80 years were conducted, analyzed the data is analyzed using Relative frequency of citation(RFC), Use Value(UV), Fidelity Level(FL), Informants consensus factor(ICF), and Jaccard index(JI) to find the most frequent and well-known used species in the area. A total of 86 species belonging to 39 vascular plant families, 33 genera were documented as medicinally important. Family Asteraceae was observed as the dominant family among all the families with 10 species, the leaf was the most used parts and decoction 36% was the most preferred preparation type. Herb was the predominant life form (67%). The maximum UV (0.92) was demonstrated by J. adhatoda L. species, while A. sativum L. shows maximum RFC (0.58), the highest ICF value represented by diarrhea and dermatitis 0.92, and high FL value is recorded 100%. According to our collections, wild species were 45%, invasive species were 38% and cultivated 17% recorded, dicots species were recorded more 81%. Seven 7 medicinal species is being economically important and export to the local and international market of the world, whereas P. integrima L. species were the most exported species according to the local dealers. The investigated area is rural and the local people depend on the area's plants for their health needs, and other uses like a vegetable, fuelwood, fodder, etc. The current result of RFC, UV, ICF, FL, and JI shows that medicinal flora needs to be pharmacologically and phytochemically investigated to prove their efficacy. The documentation of medicinal knowledge is important to preserve this precious old knowledge before it is lost forever, due to technological and environmental changes in the world.

Resumo A medicina tradicional é mais barata e facilmente disponível à população local para cuidar das doenças mais frequentes nas áreas do norte do Paquistão. Nosso estudo teve como objetivo inventariar medicamentos de plantas locais, documentar seus usos e avaliar seu valor de mercado em 2015-2018 durante as temporadas de primavera, verão e inverno. Foram feitas 15 viagens, 5 em cada temporada. Foram realizadas entrevistas semiestruturadas com 165 moradores na faixa etária de 20 a 80 anos, com dados analisados ​​por meio de frequência relativa de citação (RFC), valor de uso (UV), nível de fidelidade (FL), fator de consenso de informantes (CIF), e o índice de Jaccard (JI) para encontrar as espécies utilizadas mais frequentes e conhecidas na área. Um total de 86 espécies pertencentes a 39 famílias de plantas vasculares, 33 gêneros foram documentados como medicamente importantes. A família Asteraceae foi observada como a família dominante entre todas as famílias com 10 espécies, a folha foi a parte mais utilizada e a decocção 36% foi o tipo de preparação mais preferido. A erva foi a forma de vida predominante (67%). O UV máximo (0,92) foi demonstrado pelas espécies de J. adhatoda L., enquanto A. sativum L. mostra RFC máximo (0,58), o maior valor de ICF representado por diarreia e dermatite 0,92, e alto valor de FL é registrado 100%. De acordo com nossas coleções, as espécies selvagens foram 45%, as espécies invasoras 38% e as cultivadas 17% registradas, as espécies dicotiledôneas foram registradas mais 81%. Sete espécies medicinais estão sendo economicamente importantes e exportadas para o mercado local e internacional do mundo, enquanto as espécies de P. integrima L. foram as espécies mais exportadas de acordo com os comerciantes locais. A área investigada é rural e a população local depende das plantas da área para suas necessidades de saúde e outros usos como vegetal, lenha, forragem etc. O resultado atual de RFC, UV, ICF, FL e JI mostra que a flora medicinal precisa ser investigada farmacológica e fitoquimicamente para comprovar sua eficácia. A documentação do conhecimento medicinal é importante para preservar esse precioso conhecimento antigo antes que se perca para sempre, devido às mudanças tecnológicas e ambientais do mundo.

Feeding habit of Brown trout (Salmo trutta fario) in upper parts of river Swat, Pakistan / Hábito de alimentação da truta marrom (Salmo trutta fario) nas partes superiores do rio Swat, Paquistão

Salmo trutta fario is the most important fish species of family Salmonidae inhibited in cool waters all over the world including the nortern parts of Pakistan. This study was aimed to find out the prey selection and feeding habits of the species. One hundred and eighty five Salmo trutta fario were captured from March 2016 to April 2017. Feeding intensity as represented by a fullness index (FI), changing with various length groups and season. Out of 185 Brown trout 24 fish stomaches were found empty. The most important and common food items of brown trout were Brachycentridae, Blepharocera, Hydropsychidae, ephemerella spp. Kruskal Wallis H-test were applied on feeding intensity groups consisting of three month group. The test statistic for K.W-H-test were (H=8.13 with df =3) had a p-value of 0.043 < (alpha=0.05 indicates favor of the alternative hypothesis of at least one difference among the feeding intensity groups. The linear relationship of N with index of relative importance and %IRI denoted by least square regression line (N = 35.2 + 22.1%IRI), shows that for 22 prey there is 1% change in IRI. The relationship between total length (mm) and fish body weight (gm) is expressed by Pearson correlation coefficient (r = 0.976), showed that total length (mm) and fish body weight (gm.) is highly correlated. Descriptive statistics are used for the stomach fullness, which shows that feeding intensity was recorded higher from March to May. A total of 2289 preys was recorded including the most common were; Trichoptera, Hydropsychidae, Brachycentridae, diptera, blepharocera, ephemerala, chironomida, honey bees, grass hopper, locust, trout egg, trochanter, plant tissue, stones were retrieved from the gut contents of brown trout. According to index of relative importance IRI% four preys represents major components of the diet. The highest IRI% was recorded in Brachycentridae (39.38%), followed by blepharocera (13.23%), [...].

Salmo trutta fario é a espécie de peixe mais importante da família dos salmonídeos, inibida em águas frias em todo o mundo, incluindo as partes do noroeste do Paquistão. Este estudo teve como objetivo conhecer a seleção de presas e os hábitos alimentares da espécie. Cento e oitenta e cinco Salmo trutta fario foram capturados de março de 2016 a abril de 2017. Intensidade de alimentação representada por um índice de plenitude (FI), mudando com vários grupos de comprimento e estação. De 185 trutas, 24 estômagos de peixes foram encontrados vazios. Os itens alimentares mais importantes e comuns da truta marrom foram brachycentridae, blepharocera, hydropsychidae, ephemerellaspp. O teste H de Kruskal Wallis foi aplicado em grupos de intensidade de alimentação consistindo de um grupo de três meses. A estatística de teste para o teste KW-H foi (H = 8,13 com df = 3) teve um valor de p de 0,043 <(alfa = 0,05 indica favor da hipótese alternativa de pelo menos uma diferença entre os grupos de intensidade de alimentação. relação de N com o índice de importância relativa e% IRI denotado pela linha de regressão do mínimo quadrado (N = 35,2 + 22,1% IRI), mostra que para 22 presas há 1% de mudança no IRI. A relação entre comprimento total (mm) e peixes o peso corporal (gm) é expresso pelo coeficiente de correlação de Pearson (r = 0,976), mostrou que o comprimento total (mm) e o peso corporal dos peixes (gm.) são altamente correlacionados. Estatísticas descritivas são usadas para a plenitude do estômago, o que mostra que a intensidade da alimentação foi registrado mais alto de março a maio. Um total de 2.289 presas foi registrado, incluindo os mais comuns foram; trichoptera, hydropsychidae, brachycentridae, diptera, blepharocera, efemérala, chironomida, abelhas, funil de grama, gafanhoto, ovo de truta, trocânter, tecido vegetal, pedras foram retiradas do intestino conteúdo de truta marrom. De acordo com o índice de importância relativa [...].

Feeding habit of Brown trout (Salmo trutta fario) in upper parts of river Swat, Pakistan

Abstract Salmo trutta fario is the most important fish species of family Salmonidae inhibited in cool waters all over the world including the nortern parts of Pakistan. This study was aimed to find out the prey selection and feeding habits of the species. One hundred and eighty five Salmo trutta fario were captured from March 2016 to April 2017. Feeding intensity as represented by a fullness index (FI), changing with various length groups and season. Out of 185 Brown trout 24 fish stomaches were found empty. The most important and common food items of brown trout were Brachycentridae, Blepharocera, Hydropsychidae, ephemerella spp. Kruskal Wallis H-test were applied on feeding intensity groups consisting of three month group. The test statistic for K.W-H-test were (H=8.13 with df =3) had a p-value of 0.043 (alpha=0.05 indicates favor of the alternative hypothesis of at least one difference among the feeding intensity groups. The linear relationship of N with index of relative importance and %IRI denoted by least square regression line (N = 35.2 + 22.1%IRI), shows that for 22 prey there is 1% change in IRI. The relationship between total length (mm) and fish body weight (gm) is expressed by Pearson correlation coefficient (r = 0.976), showed that total length (mm) and fish body weight (gm.) is highly correlated. Descriptive statistics are used for the stomach fullness, which shows that feeding intensity was recorded higher from March to May. A total of 2289 preys was recorded including the most common were; Trichoptera, Hydropsychidae, Brachycentridae, diptera, blepharocera, ephemerala, chironomida, honey bees, grass hopper, locust, trout egg, trochanter, plant tissue, stones were retrieved from the gut contents of brown trout. According to index of relative importance IRI% four preys represents major components of the diet. The highest IRI% was recorded in Brachycentridae (39.38%), followed by blepharocera (13.23%), Hydropsychidae (10.76%) and ephemerella spp (8.28%). The relationship between IRI and FO is (r =0.556) is moderately correlated with coefficient of determination (r2=0.31). This study will help in the development of an artificial diet for the species for better growth performance in captivity.

Resumo Salmo trutta fario é a espécie de peixe mais importante da família dos salmonídeos, inibida em águas frias em todo o mundo, incluindo as partes do noroeste do Paquistão. Este estudo teve como objetivo conhecer a seleção de presas e os hábitos alimentares da espécie. Cento e oitenta e cinco Salmo trutta fario foram capturados de março de 2016 a abril de 2017. Intensidade de alimentação representada por um índice de plenitude (FI), mudando com vários grupos de comprimento e estação. De 185 trutas, 24 estômagos de peixes foram encontrados vazios. Os itens alimentares mais importantes e comuns da truta marrom foram brachycentridae, blepharocera, hydropsychidae, ephemerellaspp. O teste H de Kruskal Wallis foi aplicado em grupos de intensidade de alimentação consistindo de um grupo de três meses. A estatística de teste para o teste KW-H foi (H = 8,13 com df = 3) teve um valor de p de 0,043 (alfa = 0,05 indica favor da hipótese alternativa de pelo menos uma diferença entre os grupos de intensidade de alimentação. relação de N com o índice de importância relativa e% IRI denotado pela linha de regressão do mínimo quadrado (N = 35,2 + 22,1% IRI), mostra que para 22 presas há 1% de mudança no IRI. A relação entre comprimento total (mm) e peixes o peso corporal (gm) é expresso pelo coeficiente de correlação de Pearson (r = 0,976), mostrou que o comprimento total (mm) e o peso corporal dos peixes (gm.) são altamente correlacionados. Estatísticas descritivas são usadas para a plenitude do estômago, o que mostra que a intensidade da alimentação foi registrado mais alto de março a maio. Um total de 2.289 presas foi registrado, incluindo os mais comuns foram; trichoptera, hydropsychidae, brachycentridae, diptera, blepharocera, efemérala, chironomida, abelhas, funil de grama, gafanhoto, ovo de truta, trocânter, tecido vegetal, pedras foram retiradas do intestino conteúdo de truta marrom. De acordo com o índice de importância relativa IRI%, quatro presas representam os principais componentes da dieta. O maior IRI% foi registrado em brachycentridae (39,38%), seguido por blepharocera (13,23%), hydropsychidae (10,76%) e ephemerellaspp (8,28%). A relação entre IRI e FO é (r = 0,556) está moderadamente correlacionada com o coeficiente de determinação (r2 = 0,31). Este estudo auxiliará no desenvolvimento de uma dieta artificial para a espécie para melhor desempenho de crescimento em cativeiro.

Feeding habit of Brown trout (Salmo trutta fario) in upper parts of river Swat, Pakistan / Hábito de alimentação da truta marrom (Salmo trutta fario) nas partes superiores do rio Swat, Paquistão

Salmo trutta fario is the most important fish species of family Salmonidae inhibited in cool waters all over the world including the nortern parts of Pakistan. This study was aimed to find out the prey selection and feeding habits of the species. One hundred and eighty five Salmo trutta fario were captured from March 2016 to April 2017. Feeding intensity as represented by a fullness index (FI), changing with various length groups and season. Out of 185 Brown trout 24 fish stomaches were found empty. The most important and common food items of brown trout were Brachycentridae, Blepharocera, Hydropsychidae, ephemerella spp. Kruskal Wallis H-test were applied on feeding intensity groups consisting of three month group. The test statistic for K.W-H-test were (H=8.13 with df =3) had a p-value of 0.043 < (alpha=0.05 indicates favor of the alternative hypothesis of at least one difference among the feeding intensity groups. The linear relationship of N with index of relative importance and %IRI denoted by least square regression line (N = 35.2 + 22.1%IRI), shows that for 22 prey there is 1% change in IRI. The relationship between total length (mm) and fish body weight (gm) is expressed by Pearson correlation coefficient (r = 0.976), showed that total length (mm) and fish body weight (gm.) is highly correlated. Descriptive statistics are used for the stomach fullness, which shows that feeding intensity was recorded higher from March to May. A total of 2289 preys was recorded including the most common were; Trichoptera, Hydropsychidae, Brachycentridae, diptera, blepharocera, ephemerala, chironomida, honey bees, grass hopper, locust, trout egg, trochanter, plant tissue, stones were retrieved from the gut contents of brown trout. According to index of relative importance IRI% four preys represents major components of the diet. The highest IRI% was recorded in Brachycentridae (39.38%), followed by blepharocera (13.23%), Hydropsychidae (10.76%) and ephemerella spp (8.28%). The relationship between IRI and FO is (r =0.556) is moderately correlated with coefficient of determination (r2=0.31). This study will help in the development of an artificial diet for the species for better growth performance in captivity.

Salmo trutta fario é a espécie de peixe mais importante da família dos salmonídeos, inibida em águas frias em todo o mundo, incluindo as partes do noroeste do Paquistão. Este estudo teve como objetivo conhecer a seleção de presas e os hábitos alimentares da espécie. Cento e oitenta e cinco Salmo trutta fario foram capturados de março de 2016 a abril de 2017. Intensidade de alimentação representada por um índice de plenitude (FI), mudando com vários grupos de comprimento e estação. De 185 trutas, 24 estômagos de peixes foram encontrados vazios. Os itens alimentares mais importantes e comuns da truta marrom foram brachycentridae, blepharocera, hydropsychidae, ephemerellaspp. O teste H de Kruskal Wallis foi aplicado em grupos de intensidade de alimentação consistindo de um grupo de três meses. A estatística de teste para o teste KW-H foi (H = 8,13 com df = 3) teve um valor de p de 0,043 <(alfa = 0,05 indica favor da hipótese alternativa de pelo menos uma diferença entre os grupos de intensidade de alimentação. relação de N com o índice de importância relativa e% IRI denotado pela linha de regressão do mínimo quadrado (N = 35,2 + 22,1% IRI), mostra que para 22 presas há 1% de mudança no IRI. A relação entre comprimento total (mm) e peixes o peso corporal (gm) é expresso pelo coeficiente de correlação de Pearson (r = 0,976), mostrou que o comprimento total (mm) e o peso corporal dos peixes (gm.) são altamente correlacionados. Estatísticas descritivas são usadas para a plenitude do estômago, o que mostra que a intensidade da alimentação foi registrado mais alto de março a maio. Um total de 2.289 presas foi registrado, incluindo os mais comuns foram; trichoptera, hydropsychidae, brachycentridae, diptera, blepharocera, efemérala, chironomida, abelhas, funil de grama, gafanhoto, ovo de truta, trocânter, tecido vegetal, pedras foram retiradas do intestino conteúdo de truta marrom. De acordo com o índice de importância relativa IRI%, quatro presas representam os principais componentes da dieta. O maior IRI% foi registrado em brachycentridae (39,38%), seguido por blepharocera (13,23%), hydropsychidae (10,76%) e ephemerellaspp (8,28%). A relação entre IRI e FO é (r = 0,556) está moderadamente correlacionada com o coeficiente de determinação (r2 = 0,31). Este estudo auxiliará no desenvolvimento de uma dieta artificial para a espécie para melhor desempenho de crescimento em cativeiro.

Investigation of roost composition of passerine birds in different environmental conditions / Investigação da composição de poleiros de passeriformes em diferentes condições ambientais

The majority of the birds in different habitats are stressed due to alteration in multiple climate factors contributing to their loss. The present study has been planned to find the roosts composition of passerine birds in different major and sub-habitats of Punjab, Pakistan. In Faisalabad, of the four species, the higher number of exits was almost comparable, while Passer domesticus and Pastor roseus were more abundant than Tachycinet bicolor and Lanius cristatus. For the three remaining birds, total exits and returns were 180 for P. roseus, 181 for T. bicolor, and 179 for L. cristatus, respectively. Considering the exits in morning hours, a total of 314, 256, 246 and 210, were recorded from Sheikhupura. In Khanewal, of the four species, the highest exits and returns were that of P. domesticus (407; 451), followed by that of the P. roseus (273; 336), T. bicolor (242; 319) and L. cristatus (220; 397). The temperature imposed serious effects on roost exits for the four birds. The varied P-values which were higher (< 0.001***, < 0.001***, 0.002 **, <0.001***) appeared to limit the roost exits for them. Nonetheless, the impact of relative humidity exerted a strong influence on the T. bicolor (0.003**). In roosts return, it was seen that roost returns were even likely in warm temperatures and precipitation did not impose seriously on returns, and even in light rainfall. Nonetheless, relative humidity (RH) strongly impacted the sparrow. The T. bicolor and L. cristatus were adversely affected with the slopes (1.37) and (2.06), indicated with each percentage increase of relative humidity, and slope variations became least.

A maioria das aves em diferentes habitats está estressada devido à alteração em vários fatores climáticos que contribuem para sua perda. O presente estudo foi planejado para encontrar a composição dos poleiros de aves passeriformes em diferentes, grandes e sub-habitats de Punjab, no Paquistão. Em Faisalabad, das quatro espécies, tem-se que o maior número de saídas foi quase comparável, enquanto que as espécies Passer domesticus e Pastor roseus foram mais abundantes que Tachycinet bicolor e Lanius cristatus. Para as três aves restantes, o total de saídas e retornos foi de 180 para P. roseus, 181 para T. bicolor e 179 para L. cristatus, respectivamente. Considerando as saídas nas horas da manhã, um total de 314, 256, 246 e 210 foi registrado de Sheikhupura. Em Khanewal, das quatro espécies, as maiores saídas e retornos foram de P. domesticus (407; 451), seguidas de P. roseus (273; 336), T. bicolor (242; 319) e L. cristatus (220; 397). A temperatura impôs sérios efeitos nas saídas dos poleiros para as quatro aves. Os maiores valores de p variados (< 0,001***, < 0,001***, 0,002 **, <0,001***) pareceram limitar as saídas de poleiro para os pássaros. No entanto, o impacto da Umidade Relativa (UR) exerceu forte influência sobre o T. bicolor (0,003**). Com relação ao retorno dos poleiros, verificou-se que esses retornos eram até prováveis ​​em temperaturas quentes, visto que a precipitação não foi um fator extremamente determinante para os retornos, mesmo em chuvas fracas. No entanto, a UR impactou fortemente o pardal. O T. bicolor e L. cristatus foram prejudicados com as declividades (1,37) e (2,06), que foram indicadas a cada percentual de aumento de UR, ao passo que as variações de declividade tornaram-se menores.

Feeding habit of Brown trout (Salmo trutta fario) in upper parts of river Swat, Pakistan / Hábito de alimentação da truta marrom (Salmo trutta fario) nas partes superiores do rio Swat, Paquistão

Salmo trutta fario is the most important fish species of family Salmonidae inhibited in cool waters all over the world including the nortern parts of Pakistan. This study was aimed to find out the prey selection and feeding habits of the species. One hundred and eighty five Salmo trutta fario were captured from March 2016 to April 2017. Feeding intensity as represented by a fullness index (FI), changing with various length groups and season. Out of 185 Brown trout 24 fish stomaches were found empty. The most important and common food items of brown trout were Brachycentridae, Blepharocera, Hydropsychidae, ephemerella spp. Kruskal Wallis H-test were applied on feeding intensity groups consisting of three month group. The test statistic for K.W-H-test were (H=8.13 with df =3) had a p-value of 0.043 < (alpha=0.05 indicates favor of the alternative hypothesis of at least one difference among the feeding intensity groups. The linear relationship of N with index of relative importance and %IRI denoted by least square regression line (N = 35.2 + 22.1%IRI), shows that for 22 prey there is 1% change in IRI. The relationship between total length (mm) and fish body weight (gm) is expressed by Pearson correlation coefficient (r = 0.976), showed that total length (mm) and fish body weight (gm.) is highly correlated. Descriptive statistics are used for the stomach fullness, which shows that feeding intensity was recorded higher from March to May. A total of 2289 preys was recorded including the most common were; Trichoptera, Hydropsychidae, Brachycentridae, diptera, blepharocera, ephemerala, chironomida, honey bees, grass hopper, locust, trout egg, trochanter, plant tissue, stones were retrieved from the gut contents of brown trout. According to index of relative importance IRI% four preys represents major components of the diet. The highest IRI% was recorded in Brachycentridae (39.38%), followed by blepharocera (13.23%), [...].(AU)

Salmo trutta fario é a espécie de peixe mais importante da família dos salmonídeos, inibida em águas frias em todo o mundo, incluindo as partes do noroeste do Paquistão. Este estudo teve como objetivo conhecer a seleção de presas e os hábitos alimentares da espécie. Cento e oitenta e cinco Salmo trutta fario foram capturados de março de 2016 a abril de 2017. Intensidade de alimentação representada por um índice de plenitude (FI), mudando com vários grupos de comprimento e estação. De 185 trutas, 24 estômagos de peixes foram encontrados vazios. Os itens alimentares mais importantes e comuns da truta marrom foram brachycentridae, blepharocera, hydropsychidae, ephemerellaspp. O teste H de Kruskal Wallis foi aplicado em grupos de intensidade de alimentação consistindo de um grupo de três meses. A estatística de teste para o teste KW-H foi (H = 8,13 com df = 3) teve um valor de p de 0,043 <(alfa = 0,05 indica favor da hipótese alternativa de pelo menos uma diferença entre os grupos de intensidade de alimentação. relação de N com o índice de importância relativa e% IRI denotado pela linha de regressão do mínimo quadrado (N = 35,2 + 22,1% IRI), mostra que para 22 presas há 1% de mudança no IRI. A relação entre comprimento total (mm) e peixes o peso corporal (gm) é expresso pelo coeficiente de correlação de Pearson (r = 0,976), mostrou que o comprimento total (mm) e o peso corporal dos peixes (gm.) são altamente correlacionados. Estatísticas descritivas são usadas para a plenitude do estômago, o que mostra que a intensidade da alimentação foi registrado mais alto de março a maio. Um total de 2.289 presas foi registrado, incluindo os mais comuns foram; trichoptera, hydropsychidae, brachycentridae, diptera, blepharocera, efemérala, chironomida, abelhas, funil de grama, gafanhoto, ovo de truta, trocânter, tecido vegetal, pedras foram retiradas do intestino conteúdo de truta marrom. De acordo com o índice de importância relativa [...].(AU)

Feeding ecology of blue rock pigeon (Columba livia) in the three districts of Punjab, Pakistan / Ecologia de alimentação do pombo-da-rocha-azul (Columba livia) nos três distritos de Punjab, Paquistão

Present paper provides information on the feeding regimens of the two genders of the blue-rock pigeon (Columba livia Linn.) in the sampled habitats of the three districts viz. Rawalpindi, Faisalabad and Bahawalpur of the Punjab province, Pakistan. This feral pigeon, considered ubiquitous species, inhabits both the grasslands and clumped environments to establish their roosts and nests. The study explored about comparable feeding proportions from three major habitats of the pigeons which were captured with medium sized mist-nets. For Rawalpindi in the winter season, the Zea mays was one of the predominant food item (30.6%) for males, and other ranked major food contents were (26.7%, 22.4% and 20.2%), and fairly similar feeding proportions were also recorded for the females (50.4%, 33.3%, 36.4% and 23.9%) for Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum and Zea mays respectively. Evidently, no significant deviations in the existing food crops for the three sites for the feral pigeon were detected, which strongly suggested that the, modes of feeding habits among the sustainable roosts and nests which were closely located to food crops, exerted negligible impacts during intermittent pigeon foraging movements in the diurnal conditions.(AU)

O presente artigo fornece informações sobre os regimes de alimentação dos dois sexos do pombo-da-rocha-azul (Columba livia Linn.) nos habitats amostrados dos três distritos, a saber: Rawalpindi, Faisalabad e Bahawalpur, da província de Punjab, Paquistão. Este pombo-doméstico, considerado espécie onipresente, habita tanto as pastagens quanto os ambientes agrupados para estabelecer seus poleiros e ninhos. O estudo explorou proporções comparáveis de alimentação de três grandes habitats dos pombos que foram capturados com redes de neblina de tamanho médio. Para Rawalpindi no inverno, Zea mays foi um dos itens alimentares predominantes (30,6%) para os machos, e outros alimentos classificados como principais foram (26,7%; 22,4% e 20,2%), e proporções bastante semelhantes foram registradas para as fêmeas (50,4%, 33,3%, 36,4% e 23,9%) para Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum e Zea mays, respectivamente. Evidentemente, não foram detectados desvios significativos nas culturas alimentares existentes nos três locais para o pombo-doméstico, sugerindo fortemente que os modos de alimentação entre os poleiros e ninhos sustentáveis, que estavam estreitamente localizados em culturas alimentares, exerceram impactos não significativos durante os períodos intermitentes dos movimentos de forrageamento dos pombos-domésticos nas condições diurnas.(AU)

Feeding ecology of blue rock pigeon (Columba livia) in the three districts of Punjab, Pakistan

Abstract Present paper provides information on the feeding regimens of the two genders of the blue-rock pigeon (Columba livia Linn.) in the sampled habitats of the three districts viz. Rawalpindi, Faisalabad and Bahawalpur of the Punjab province, Pakistan. This feral pigeon, considered ubiquitous species, inhabits both the grasslands and clumped environments to establish their roosts and nests. The study explored about comparable feeding proportions from three major habitats of the pigeons which were captured with medium sized mist-nets. For Rawalpindi in the winter season, the Zea mays was one of the predominant food item (30.6%) for males, and other ranked major food contents were (26.7%, 22.4% and 20.2%), and fairly similar feeding proportions were also recorded for the females (50.4%, 33.3%, 36.4% and 23.9%) for Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum and Zea mays respectively. Evidently, no significant deviations in the existing food crops for the three sites for the feral pigeon were detected, which strongly suggested that the, modes of feeding habits among the sustainable roosts and nests which were closely located to food crops, exerted negligible impacts during intermittent pigeon foraging movements in the diurnal conditions.

Resumo O presente artigo fornece informações sobre os regimes de alimentação dos dois sexos do pombo-da-rocha-azul (Columba livia Linn.) nos habitats amostrados dos três distritos, a saber: Rawalpindi, Faisalabad e Bahawalpur, da província de Punjab, Paquistão. Este pombo-doméstico, considerado espécie onipresente, habita tanto as pastagens quanto os ambientes agrupados para estabelecer seus poleiros e ninhos. O estudo explorou proporções comparáveis de alimentação de três grandes habitats dos pombos que foram capturados com redes de neblina de tamanho médio. Para Rawalpindi no inverno, Zea mays foi um dos itens alimentares predominantes (30,6%) para os machos, e outros alimentos classificados como principais foram (26,7%; 22,4% e 20,2%), e proporções bastante semelhantes foram registradas para as fêmeas (50,4%, 33,3%, 36,4% e 23,9%) para Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum e Zea mays, respectivamente. Evidentemente, não foram detectados desvios significativos nas culturas alimentares existentes nos três locais para o pombo-doméstico, sugerindo fortemente que os modos de alimentação entre os poleiros e ninhos sustentáveis, que estavam estreitamente localizados em culturas alimentares, exerceram impactos não significativos durante os períodos intermitentes dos movimentos de forrageamento dos pombos-domésticos nas condições diurnas.

Feeding ecology of blue rock pigeon (Columba livia) in the three districts of Punjab, Pakistan

Abstract Present paper provides information on the feeding regimens of the two genders of the blue-rock pigeon (Columba livia Linn.) in the sampled habitats of the three districts viz. Rawalpindi, Faisalabad and Bahawalpur of the Punjab province, Pakistan. This feral pigeon, considered ubiquitous species, inhabits both the grasslands and clumped environments to establish their roosts and nests. The study explored about comparable feeding proportions from three major habitats of the pigeons which were captured with medium sized mist-nets. For Rawalpindi in the winter season, the Zea mays was one of the predominant food item (30.6%) for males, and other ranked major food contents were (26.7%, 22.4% and 20.2%), and fairly similar feeding proportions were also recorded for the females (50.4%, 33.3%, 36.4% and 23.9%) for Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum and Zea mays respectively. Evidently, no significant deviations in the existing food crops for the three sites for the feral pigeon were detected, which strongly suggested that the, modes of feeding habits among the sustainable roosts and nests which were closely located to food crops, exerted negligible impacts during intermittent pigeon foraging movements in the diurnal conditions.

Resumo O presente artigo fornece informações sobre os regimes de alimentação dos dois sexos do pombo-da-rocha-azul (Columba livia Linn.) nos habitats amostrados dos três distritos, a saber: Rawalpindi, Faisalabad e Bahawalpur, da província de Punjab, Paquistão. Este pombo-doméstico, considerado espécie onipresente, habita tanto as pastagens quanto os ambientes agrupados para estabelecer seus poleiros e ninhos. O estudo explorou proporções comparáveis de alimentação de três grandes habitats dos pombos que foram capturados com redes de neblina de tamanho médio. Para Rawalpindi no inverno, Zea mays foi um dos itens alimentares predominantes (30,6%) para os machos, e outros alimentos classificados como principais foram (26,7%; 22,4% e 20,2%), e proporções bastante semelhantes foram registradas para as fêmeas (50,4%, 33,3%, 36,4% e 23,9%) para Carthamus oxyacantha, Hordeum vulgare, Triticum aestivum e Zea mays, respectivamente. Evidentemente, não foram detectados desvios significativos nas culturas alimentares existentes nos três locais para o pombo-doméstico, sugerindo fortemente que os modos de alimentação entre os poleiros e ninhos sustentáveis, que estavam estreitamente localizados em culturas alimentares, exerceram impactos não significativos durante os períodos intermitentes dos movimentos de forrageamento dos pombos-domésticos nas condições diurnas.

GCMS characterization and biological potential of the seeds and aerial part of Galium tricorne Stokes / Caracterização GCMS e potencial biológico das sementes e parte aérea de Galium tricorne Stokes

Natural products have long been proven very effective against various challenging diseases including cancer and bacterial infections. Galium tricorne is one of the important source of natural products, which has not been explored till date in spite of its profound ethnomedicinal prominence. The current study has been designed to explore the biological potential of G. tricorne and to extract and isolate chemical constituents from its aerial part and seeds respectively along with identification of their chemical constituents. Phytochemical screening was performed to figure out the presence of secondary metabolite in G. tricorne. Crude Methanolic extract (Gt.Crd), which was obtained from the aerial part while the fatty acids were extracted from the seeds, which were later on analyzed by GCMS. Similarly, Well Diffusion and MTT method were used for antibacterial activity and cancer cell line assay respectively. To evaluate the cytotoxic potential, brine shrimps were used. Likewise, in Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS) analysis a total number of 23 compounds were identified in Gt.Crd extract out of which 7 compounds were sorted out to have some sort of toxicity profile. In the same fashion, 5 fatty acids were identified in the seeds of G. tricorne. Moreover, among the fractions, chloroform fraction (Gt.Chf) exhibited greater zone of inhibition (ZOI) 20.37 mm followed by Gt.Crd 18.40 mm against S. aureus and S. pyogenes respectively. In cytotoxicity Gt.Chf was more active followed by ethyl acetate fraction (Gt.Eta) by exhibiting 88.32±0.62% (LC50=60 µg/mL) and 73.95±2.25% (LC50=80 µg/mL) respectively at 1000 µg/mL concentration of the tested sample. Gt.Chf exhibited greater cell line inhibitory activity (IC50=61 µg/mL) against HeLa cell line. Similarly, Gt.Crd displayed IC50 values of 167.84 µg/mL and 175.46 µg/mL against HeLa and NIH/3T3 cell line respectively. Based on the literature review and screenings, it may be concluded that the aerial part and seeds of G. tricorne are the rich sources of bioactive compounds. The results of the current study also authenticate the scientific background for the ethnomedicinal uses of G. tricorne.

Os produtos naturais têm se mostrado muito eficazes contra várias doenças desafiadoras, incluindo câncer e infecções bacterianas. O gálio tricorne é uma importante fonte de produtos naturais, ainda pouco explorada, apesar de sua profunda proeminência etnomedicinal. O presente estudo foi desenvolvido para explorar o potencial biológico de G. tricorne e extrair e isolar constituintes químicos de sua parte aérea e sementes, respectivamente, juntamente com a identificação de seus constituintes químicos. A triagem fitoquímica foi realizada para descobrir a presença de metabólito secundário em G. tricorne, extrato metanólico bruto (Gt.Crd) que foi obtido da parte aérea enquanto os ácidos graxos foram extraídos das sementes, que posteriormente foram analisadas por GCMS. Da mesma forma, os métodos Well Diffusion e MTT foram usados ​​para atividade antibacteriana e ensaio de linha de células cancerígenas, respectivamente. Para avaliar o potencial citotóxico, foram utilizadas artémias. Da mesma forma, na análise de cromatografia gasosa-espectroscopia de massa (GC-MS) um número total de 23 compostos foi identificado no extrato de Gt.Crd, dos quais 7 compostos foram selecionados para ter algum tipo de perfil de toxicidade. Da mesma forma, 5 ácidos graxos foram identificados nas sementes de G. tricorne. Além disso, entre as frações, a fração clorofórmio (Gt.Chf) apresentou maior zona de inibição (ZOI), 20,37 mm, seguida de Gt.Crd 18,40 mm contra S. aureus e S. pyogenes, respectivamente. Na citotoxicidade Gt.Chf foi mais ativo seguido pela fração acetato de etila (Gt.Eta), exibindo 88,32±0,62% (LC50=60 µg/mL) e 73,95±2,25% (LC50=80 µg/mL) respectivamente a 1000 µg/ concentração de mL da amostra testada. Gt.Chf exibiu maior atividade inibitória da linha celular (IC50 = 61 µg/mL) contra a linha celular HeLa. Da mesma forma, Gt.Crd apresentou valores de IC50 de 167,84 µg/mL e 175,46 µg/mL contra linha celular HeLa e NIH/3T3, respectivamente. Com base na revisão de literatura e triagens, pode-se concluir que a parte aérea e as sementes de G. tricorne são as ricas fontes de compostos bioativos. Os resultados do presente estudo também autenticam a base científica para os usos etnomedicinais de G. tricorne.

Therapeutic potential of stem cell and melatonin on the reduction of CCl4-induced liver fibrosis in experimental mice model

Abstract Liver fibrosis is initial stage of any chronic liver disease and its end stage is develops into cirrhosis. Chronic liver diseases are a crucial global health issue and the cause of approximately 2 million deaths per year worldwide. Cirrhosis is currently the 11th most common cause of death globally. Mesenchymal stem cell (MSCs) treatment is the best way to treat acute and chronic liver disease. The aim of this study is to improve the therapeutic potential of MSCs combined with melatonin (MLT) to overcome CCl4-induced liver fibrosis and also investigate the individual impact of melatonin and MSCs against CCl4-induced liver impairment in animal model. Female BALB/c mice were used as CCL4-induced liver fibrotic animal model. Five groups of animal model were made; negative control, Positive control, CCl4+MSCs treated group, CCl4+MLT treated group and CCl4+MSCs+MLT treated group. Cultured MSCs from mice bone marrow were transplanted to CCl4-induced liver injured mice model, individually as well as together with melatonin. Two weeks after MSCs and MLT administration, all groups of mice were sacrificed for examination. Morphological and Histopathological results showed that combined therapy of MSCs+MLT showed substantial beneficial impact on CCl4-induced liver injured model, compared with MSCs and MLT individually. Biochemically, considerable reduction was observed in serum bilirubin and ALT levels of MLT+MSC treated mice, compared to other groups. PCR results shown down-regulation of Bax and up-regulation of Bcl-xl and Albumin, confirm a significant therapeutic effect of MSCs+MLT on CCI4-induced liver fibrosis. From the results, it is concluded that combined therapy of MSCs and MLT show strong therapeutic effect on CCL4-induced liver fibrosis, compared with MSCs and MLT individually.

Resumo A fibrose hepática é a fase inicial de qualquer doença hepática crônica, e em sua fase final desenvolve-se para cirrose. As doenças hepáticas crônicas são uma questão de saúde global crucial e a causa de aproximadamente 2 milhões de mortes por ano em todo o mundo. A cirrose, hoje em dia, é a 11ª causa mais comum de morte globalmente. O tratamento da célula-tronco mesenquimal (MSCs) é uma maneira eletiva de tratar a doença hepática aguda e crônica. O objetivo deste estudo é melhorar o potencial terapêutico dos MSCs combinados com a melatonina (MLT) para superar a fibrose hepática induzida por CCl4 e também investigar o impacto individual da melatonina e MSCs contra o comprometimento do fígado induzido por CCl4 no modelo animal. Os ratos BALB / C fêmeas foram usados como modelo de animal fibrótico de fígado induzido por CCl4. Cinco grupos de modelo animal foram feitos: Controle Negativo, Controle Positivo, CCl4 + MSCs Tratados Grupo, Grupo Tratado CCl4 + MLT e Grupo Tratado CCl4 + MSCs + MLT. MSCs cultivados da medula óssea dos ratos foram transplantados para o modelo de camundongos de fígado induzido por CCl4, individualmente, bem como em conjunto com a melatonina. Duas semanas após a administração MSCs e MLT, todos os grupos de camundongos foram sacrificados para o exame. Os resultados morfológicos e histopatológicos mostraram que a terapia combinada do MSCs + MLT mostrou impacto benéfico substancial no modelo ferido no fígado induzido pelo CCl4, em comparação com o MSCs e o MLT individualmente. A redução bioquimicamente considerável foi observada em bilirrubina sérica e níveis ALT de ratinhos tratados com MLT + MSCs, em comparação com outros grupos. Os resultados de PCR mostraram regulação negativa do BAX e regulação positiva do BCL-XL e da albumina, confirmando um efeito terapêutico significativo do MSCs + MLT na fibrose hepática induzida por CCl4. Dos resultados, conclui-se que a terapia combinada de MSCs e MLT mostram um forte efeito terapêutico na fibrose hepática induzida por CCl4, em comparação com MSCs e MLT individualmente.

Therapeutic potential of stem cell and melatonin on the reduction of CCl4-induced liver fibrosis in experimental mice model / Potencial terapêutico de células-tronco e melatonina na redução da fibrose hepática induzida por CCl4 no modelo de ratos experimentais

Liver fibrosis is initial stage of any chronic liver disease and its end stage is develops into cirrhosis. Chronic liver diseases are a crucial global health issue and the cause of approximately 2 million deaths per year worldwide. Cirrhosis is currently the 11th most common cause of death globally. Mesenchymal stem cell (MSCs) treatment is the best way to treat acute and chronic liver disease. The aim of this study is to improve the therapeutic potential of MSCs combined with melatonin (MLT) to overcome CCl4-induced liver fibrosis and also investigate the individual impact of melatonin and MSCs against CCl4-induced liver impairment in animal model. Female BALB/c mice were used as CCL4-induced liver fibrotic animal model. Five groups of animal model were made; negative control, Positive control, CCl4+MSCs treated group, CCl4+MLT treated group and CCl4+MSCs+MLT treated group. Cultured MSCs from mice bone marrow were transplanted to CCl4-induced liver injured mice model, individually as well as together with melatonin. Two weeks after MSCs and MLT administration, all groups of mice were sacrificed for examination. Morphological and Histopathological results showed that combined therapy of MSCs+MLT showed substantial beneficial impact on CCl4-induced liver injured model, compared with MSCs and MLT individually. Biochemically, considerable reduction was observed in serum bilirubin and ALT levels of MLT+MSC treated mice, compared to other groups. PCR results shown down-regulation of Bax and up-regulation of Bcl-xl and Albumin, confirm a significant therapeutic effect of MSCs+MLT on CCI4-induced liver fibrosis. From the results, it is concluded that combined therapy of MSCs and MLT show strong therapeutic effect on CCL4-induced liver fibrosis, compared with MSCs and MLT individually.

A fibrose hepática é a fase inicial de qualquer doença hepática crônica, e em sua fase final desenvolve-se para cirrose. As doenças hepáticas crônicas são uma questão de saúde global crucial e a causa de aproximadamente 2 milhões de mortes por ano em todo o mundo. A cirrose, hoje em dia, é a 11ª causa mais comum de morte globalmente. O tratamento da célula-tronco mesenquimal (MSCs) é uma maneira eletiva de tratar a doença hepática aguda e crônica. O objetivo deste estudo é melhorar o potencial terapêutico dos MSCs combinados com a melatonina (MLT) para superar a fibrose hepática induzida por CCl4 e também investigar o impacto individual da melatonina e MSCs contra o comprometimento do fígado induzido por CCl4 no modelo animal. Os ratos BALB / C fêmeas foram usados ​​como modelo de animal fibrótico de fígado induzido por CCl4. Cinco grupos de modelo animal foram feitos: Controle Negativo, Controle Positivo, CCl4 + MSCs Tratados Grupo, Grupo Tratado CCl4 + MLT e Grupo Tratado CCl4 + MSCs + MLT. MSCs cultivados da medula óssea dos ratos foram transplantados para o modelo de camundongos de fígado induzido por CCl4, individualmente, bem como em conjunto com a melatonina. Duas semanas após a administração MSCs e MLT, todos os grupos de camundongos foram sacrificados para o exame. Os resultados morfológicos e histopatológicos mostraram que a terapia combinada do MSCs + MLT mostrou impacto benéfico substancial no modelo ferido no fígado induzido pelo CCl4, em comparação com o MSCs e o MLT individualmente. A redução bioquimicamente considerável foi observada em bilirrubina sérica e níveis ALT de ratinhos tratados com MLT + MSCs, em comparação com outros grupos. Os resultados de PCR mostraram regulação negativa do BAX e regulação positiva do BCL-XL e da albumina, confirmando um efeito terapêutico significativo do MSCs + MLT na fibrose hepática induzida por CCl4. Dos resultados, conclui-se que a terapia combinada de MSCs e MLT mostram um forte efeito terapêutico na fibrose hepática induzida por CCl4, em comparação com MSCs e MLT individualmente.