Genotypic evaluation of antimicrobial resistance in Staphylococcus spp. isolated from bovine clinical mastitis / [Avaliação genotípica da resistência antimicrobiana em Staphylococcus spp. isolados de mastite clínica bovina]

Bovine clinical mastitis caused by Staphylococcus spp. is a serious and widespread disease in the world of dairy farming. Antimicrobial therapy is of fundamental importance in the prevention and treatment of infectious mastitis, but the indiscriminate use of antimicrobials acts as a determining factor for the spread of the disease. The present study evaluated the resistance profiles of 57 Staphylococcus spp. isolated from bovine clinical mastitis to beta-lactams and gentamicin, relating characteristics of phenotype (in vitro susceptibility tests) and genotype (detection and expression of genes encoding resistance - mecA, mecALGA251, blaZ, femA, femB, and aacA-aphD - using PCR and RT-PCR, respectively). One or more genes coding for resistance to different antimicrobials were detected in 50 Staphylococcus spp. isolates. The femA and femB genes were the most frequent (75.4% for both). The observed expression of the genes was as follows: blaZ (60%), femA (39.5%), aacA-aphD (50%), femB (32.6%), mecA (8.3%), and mecALGA251 (0%). Considering the relevance of the genus Staphylococcus to bovine mastitis, this study aimed to elucidate aspects regarding the genotypic and phenotypic profiles of these microorganisms so as to contribute to the development of effective strategies for mastitis control.(AU)

A mastite clínica bovina causada por Staphylococcus spp. é uma doença grave e generalizada no mundo da pecuária leiteira. A terapia antimicrobiana é de fundamental importância na prevenção e no tratamento da mastite infecciosa, mas o uso indiscriminado de antimicrobianos atua como fator determinante para a disseminação da doença. O presente estudo avaliou os perfis de resistência de 57 Staphylococcus spp. isolados de mastite clínica bovina em relação ao uso de betalactâmicos e gentamicina, relacionando características do fenótipo (testes de suscetibilidade in vitro) e genótipo (detecção e expressão de genes que codificam resistência - mecA, mecALGA251, blaZ, femA, femB, e aacA-aphD - usando PCR e RT-PCR, respectivamente). Um ou mais genes que codificam resistência a diferentes antimicrobianos foram detectados em 50 Staphylococcus spp. isolados. Os genes femA e femB foram os mais frequentes (75,4% para ambos). A expressão observada dos genes foi a seguinte: blaZ (60%), femA (39,5%), aacA-aphD (50%), femB (32,6%), mecA (8,3%) e mecALGA251 (0%). Considerando-se a relevância do gênero Staphylococcus para a mastite bovina, este estudo teve como objetivo elucidar aspectos referentes aos perfis genotípico e fenotípico desses microrganismos, a fim de contribuir para o desenvolvimento de estratégias eficazes para o controle da mastite.(AU)

Microbiological analysis and sensitivity profile of Staphylococcus spp. in subclinical mastitis of dairy goats / Análise microbiológica e perfil de sensibilidade do Staphylococcus spp. em mastite subclínica de caprinos leiteiros

Subclinical mastitis in goats causes economic losses and risks to public health. Given the need for research that shows the most isolated staphylococci species and sensibility tests comparing the resistance between coagulase-negative (CNS) and positive Staphylococcus (CPS) goats with subclinical mastitis, the aim of this study was to identify the microorganisms isolated from milk samples of goats with subclinical mastitis, as well as define the staphylococci species and determine the sensitivity profile of Staphylococcus spp. to antimicrobials. To collect samples, tests were performed for mug of black background and California mastitis test (CMT), collecting milk from CMT positive animals. A total of 226 samples from seven herds of dairy goats was collected and forwarded to the laboratory, where they were seeded for the isolation of the microorganism and implementing the antibiotic sensibility test. Of these, 122 samples had bacterial growth and the most isolated staphylococci species were: S. epidermidis (24.55%), S. lugdunensis (15.40%) and S. intermedius (13.64%). Samples showed increased resistance to antimicrobials: penicillin (81.8%), oxacillin (60.0%) and ampicillin (55.5%). Greater sensitivity to: enrofloxacin (99.1%), erythromycin (98.2%), gentamicin (98.2%) and vancomycin (98.2%) were observed. The S. epidermidis showed higher antimicrobial resistance to amoxicillin and penicillin than S. lugdunensis and S. intermedius. Similar resistance in vitro between CNS and CPS was observed to most antimicrobials. It is important to control the overuse of antibiotics to prevent the emergence of resistant strains.(AU)

A mastite subclínica em caprinos acarreta prejuízos econômicos e riscos à saúde pública. Tendo em vista a necessidade de pesquisas que demonstrem as espécies de estafilococos mais isoladas e os testes de sensibilidade que comparem a resistência entre Staphylococcus coagulase negativa (SCN) e positiva (SCP) de cabras com mastite subclínica, os objetivos do presente estudo foram identificar os microrganismos isolados de amostras de leite de cabras com mastite subclínica, bem como definir as espécies de estafilococos e determinar o perfil de sensibilidade de Staphylococcus spp. aos antimicrobianos. Para realizar a coleta das amostras, foram executados os testes da caneca de fundo preto e California mastitis test (CMT) com o leite dos animais reagentes ao CMT. Coletaram-se 226 amostras provenientes de sete rebanhos de caprinos leiteiros, as quais foram encaminhadas para o laboratório, onde foram semeadas para o isolamento do microrganismo e a realização do teste de antibiograma. Dessas amostras, 122 tiveram crescimento bacteriano e as espécies mais isoladas de estafilococos foram: S. epidermidis (24,55%), S. lugdunensis (15,40%) e S. intermedius (13,64%). As amostras apresentaram maior resistência aos antimicrobianos penicilina (81,8%), oxacilina (60,0%) e ampicilina (55,5%). Observou-se maior sensibilidade para enrofloxacina (99,1%), eritromicina (98,2%), gentamicina (98,2%) e vancomicina (98,2%). O S. epidermidis apresentou maior resistência antimicrobiana para a amoxicilina e a penicilina do que o S. lugdunensis e o S. intermedius. Foi verificada uma resistência in vitro semelhante entre os estafilococos coagulase negativa e positiva para a maioria dos antimicrobianos testados. É importante o controle do uso abusivo de antimicrobianos para evitar o surgimento de cepas resistentes.(AU)

Lactation stage and udder health status of Santa Ines ewes / Estágio da lactação e saúde da glândula mamária em ovelhas da raça Santa Inês

Avaliou-se o risco de infecção em diferentes fases da lactação em 33 ovelhas da raça Santa Inês. Inicialmente a glândula foi submetida ao exame físico e à prova de fundo escuro. Posteriormente, amostras de leite foram coletadas assepticamente para a realização de exame bacteriológico - California Mastitis teste -, e contagens microscópica e automática de células somáticas. Nenhuma diferença foi observada entre as distintas fases de lactação. Observou-se alta persistência de infecções intramamárias, e tendência a maior contagem de células somáticas no último período de lactação, que pode ser oriunda da maior resistência a infecções neste período.(AU)

Lactation stage and udder health status of Santa Ines ewes

Avaliou-se o risco de infecção em diferentes fases da lactação em 33 ovelhas da raça Santa Inês. Inicialmente a glândula foi submetida ao exame físico e à prova de fundo escuro. Posteriormente, amostras de leite foram coletadas assepticamente para a realização de exame bacteriológico - California Mastitis teste -, e contagens microscópica e automática de células somáticas. Nenhuma diferença foi observada entre as distintas fases de lactação. Observou-se alta persistência de infecções intramamárias, e tendência a maior contagem de células somáticas no último período de lactação, que pode ser oriunda da maior resistência a infecções neste período.

Antimicrobial susceptibility of coagulase-negative staphylococci isolated from meat-producing ewes with mastitis / Susceptibilidade antimicrobiana de cepas de estafilococcos coagulase-negativa isolados de ovinos de corte com mastite

Avaliou-se a sensibilidade antimicrobiana in vitro de 121 cepas de estafilococos coagulase-negativa isolada de leite de ovelhas Santa Inês, aos fármacos: penicilina, amoxicilina, ampicilina, estreptomicina, oxaciclina, neomicina, cefalotina, gentamicina e sulfonamida. A resistência à sulfonamida foi a mais frequente (27,3 por cento), seguida pela estreptomicina (14,0 por cento) e pela oxaciclina (14,0 por cento), enquanto da gentamicina (1,6 por cento) foi a menos frequente. Todas as cepas foram sensíveis a pelo menos um antimicrobiano, e 20,3 por cento das cepas apresentaram resistência múltipla. Os resultados mostram a importância de Staphylococci coagulase-negativas como agentes causadores de mastite em ovinos, e o perfil de resistência múltipla indica a importância da determinação da resistência à oxaciclina como indicador da presença de ilhas de patogenicidade que contêm fatores de virulência e resistência a outros antimicrobianos que contribuem para a sobrevivência da bactéria ao tratamento.(AU)

Ocorrência de fungos em leite cru proveniente de tanques de refrigeração e latões de propriedades leiteiras, bem como de leite comercializado diretamente ao consumidor

ABSTRACT Filamentous fungi and yeasts can be associated to various pathologies in man and animals. It must be considered that milk and dairy products when contaminated with these microorganisms can represent a potential means of zoonosis transmission. In the present study, 70 samples of raw milk were analysed, 50 from bulk tanks, 10 from milk cans from dairy farms, and 10 from cans of distributors that store and sell milk sold on the informal (unregulated) market, comparing the quality of these products as to the presence and quantity of fungi. Moulds and yeasts were isolated in different percentages from all of the samples of the different sources: Candida spp. (C. krusei, C. guilliermondii, C. tropicalis, C. kefyr etc.), Geotrichum spp., Rhodotorula spp., Trichosporon spp., Aureobasidium spp., Penicillium spp., Acremonium spp., Chrysosporium spp., Mucor spp. and Aspergillus spp. No statistically significant difference was observed between medians of the quantity of colonies forming units of fungi/mL of milk from the different sources, indicating that the level of contamination by fungi was similar when the three sources were compared. The presence of fungi was observed in all samples of raw milk, all these microorganisms able to cause opportunistic mycoses.

RESUMO Os fungos filamentosos e leveduras podem estar associados a diferentes patologias no homem e animais. O leite e seus derivados contaminados com estes microrganismos podem constituir potenciais vias de transmissão de zoonoses a eles relacionadas. Foram analisadas 70 amostras de leite, sendo 50 de tanques de refrigeração, 10 de latões de propriedades de exploração leiteira e 10 de latões de distribuidores que comercializam leite informal, visando a comparação da qualidade destes produtos quanto à presença e quantidade de fungos. Foram isolados, em diferentes percentagens, fungos filamentosos e leveduras a partir de todas as amostras de leite das diferentes procedências: Candida spp. (C. krusei, C. guilliermondii, C. tropicalis, C. kefyr, dentreoutras), Geotrichum spp., Rhodotorula spp., Trichosporon spp., Aureobasidium spp., Penicillium spp., Acremonium spp., Chrysosporium spp., Mucor spp. e Aspergillus spp. Não houve diferença estatisticamente significante entre as medianas das quantidades de unidades formadoras de colônias de fungos/ mL de leite das diferentes procedências, indicando que o nível de contaminação por fungos nas amostras destas três origens foi similar. Pode-se verificar que em todas as amostras de leite cru havia a presença de fungos, todos passíveis agentes de micoses oportunísticas.

Ocorrência de fatores de virulência em estirpes de escherichia coli isoladas de fezes de cães errantes

ABSTRACT Escherichia coli may cause diseases in humans and animals, such as urinary infections, septicemia, meningitis and gastroenteritis. Asymptomatic dogs can participate in the epidemiologic chain as a reservoir of human pathogenic E. coli. The objective of the present study was to evaluate the occurrence of pathogenic E. coli in humans, on faeces of stray dogs without colibacillosis symptoms, and thus verify the participation of dogs as a source of human colibacillosis infection. Two hundred and twenty samples of faeces from animals captured by different Zoonotic Control Centers in São Paulo state, Brazil, were collected. These faeces, when submitted to microbiological exams, resulted in the isolation of 196 (80.09%) strains of E. coli, whose virulence genes were detected by PCR. At least one of the virulence factors studied was present in 123 (62.75%) strains. Sixteen (8.16%) were afa positive, 54 (27.55%) were positive to sta, 38 (19.38%) to pap, 66 (33.67%) to aer, 31 (15.81%) to cnf, 13 (6.63%) to hly, 1 (0.51%) to VT2, and none of the strains were positive for LT, STa or STb. Stray dogs which were apparently healthy could be participating in the epidemiologic chain as an E. coli reservoir uropathogenic to man, as the genes found in a higher frequency are present in extraintestinal infections, or more specifically, urinary infections.

RESUMO Escherichia coli pode causar doenças em humanos e animais, tais como infecções do trato urinário, septicemia, meningites e gastroenterites. Cães assintomáticos podem participar da cadeia epidemiológica como reservatório de E. coli patogênica ao homem. Este estudo objetivou avaliar a ocorrência de E. coli patogênica ao homem em fezes de cães errantes sem sintomas de colibacilose e assim averiguar a participação do cão como fonte de infecção de colibacilose humana. Foram coletadas 220 amostras de fezes de animais capturados por diferentes Centros de Controle de Zoonoses do Estado de São Paulo. As amostras foram submetidas a exames microbiológicos sendo isoladas 196 (89,09%) estirpes de E. coli, cujos genes de fatores de virulência foram detectados por PCR. Cento e vinte e três (62,75%) estirpes apresentaram um ou mais dos fatores de virulência estudados. Dezesseis (8,16%) foram positivas para afa, 54 (27,55%) para sfa, 38 (19,38%) para pap, 66 (33,67%) para aer, 31 (15,81%) para cnf, 13 (6,63%) para hly, 1 (0,51%) para VT2 e nenhuma das linhagens foi positiva para LT, STa e STb. Cães errantes aparentemente sadios podem participar da cadeia epidemiológica como reservatórios de E. coli uropatogênica ao homem, pois os genes encontrados com maior freqüência estão presentes em infecções extraintestinais urinárias.

Ocorrência da dermatofilose (dermatophilus congolensis) em suínos criados no estado de são paulo, brasil

ABSTRACT We describe the occurrence of dermatophilosis in adult pigs admitted at the Clinic for Cattle in the Center for Research and Diagnostics of Ruminant Diseases in the School of Veterinary Medicine at University of São Paulo, Brazil. The sick animals had an exudative epidermitis, characterized by the presence of easily removable scabs with an underlying purulent exsudate. The lesions were observed mainly on the animals backs and ears. The smear of the scabs and secretions revealed the presence of structures that were similar to coccus which were displayed in filaments and were morphologically similar to the Dermatophilus congolensis zoospore. The diagnosis was confirmed by skin biopsy and by the isolation of the etiologic agent from samples collected from the sick animals.

RESUMO Descreveu-se a ocorrência da Dermatofilose em suínos adultos atendidos pela Clínica de Bovinos do Centro de Pesquisa e Diagnóstico de Enfermidades de Ruminantes da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo. Os animais enfermos apresentaram uma epidermite exsudativa caracterizada pela formação de crostas que se destacavam com facilidade e que apresentavam uma secreção com aspecto purulento, principalmente nas regiões do dorso e nas orelhas dos animais. Os esfregaços das crostas e secreções revelaram a presença de estruturas similares a cocos que se arranjavam em filamentos, morfologicamente semelhantes ao zoósporo do Dermatophilus congolensis, sendo a confirmação do diagnóstico realizada por biopsia de pele e isolamento do agente etiológico da doença em amostras colhidas dos dois animais enfermos.