In vitro culture of parasitic stages of Haemonchus contortus / Cultivo in vitro de estádios parasitários de Haemonchus contortus

Haemonchus contortus is a constraint to sheep production. Seeking to reduce the use of hosts and produce parasitic stages in large-scale, a 42-day in vitro culture protocol of H. contortus third-stage larvae was optimized using Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM). In cell-free culture, larvae were maintained at 39.6°C, in acidic media (pH 6.1) for 3 or 6 days with Δ4-dafachronic acid followed by DMEM pH 7.4 supplemented or not with Fildes' reagent. In DMEM pH 7.4 at 37°C, supplementation with Caco-2 cells was compared to Fildes. On Day 14, fourth-stage larvae (L4) development rates in acidic media supplemented (86.8-88.4%) or not (74.4-77.8%) with Fildes and in Caco-2 cell co-culture (92.6%) were similar, and superior to DMEM pH 7.4 with Fildes (0.0%). On Day 21, Caco-2 cell co-culture resulted in higher larvae differentiation (25.0%) and lower degeneration (13.9%) compared to acidic media (1.5-8.1% and 48.6-69.9%, respectively). This is the first report of prolonged in vitro culture of H. contortus larvae using commercial media in co-culture with Caco-2 cells. Although no progression to the adult stage, Caco-2 cell co-culture resulted in morphological differentiation of H. contortus L4 and larval viability for up to 28 days.(AU)

Haemonchus contortus provoca grandes prejuízos à ovinocultura. Visando reduzir a utilização de ovinos hospedeiros e produzir estágios parasitários em larga escala, um protocolo para o cultivo in vitro por 42 dias de larvas de terceiro estádio de H. contortus foi realizado em meio Eagle, modificado por Dulbecco (DMEM). No cultivo sem células, as larvas foram mantidas a 39,6°C e incubadas em DMEM ácido (pH 6,1) por 3 ou 6 dias com 4Δ-ácido dafacrônico seguido por DMEM pH 7,4 suplementado ou não com reagente de Fildes. Em DMEM pH 7,4 a 37°C, a suplementação com células Caco-2 foi comparada à suplementação com Fildes. No Dia 14, as taxas de desenvolvimento até o quarto estádio larvar (L4) foram similares em meio ácido sem células suplementado (86,8-88,4%) ou não (74,4-77,8%) com Fildes e em co-cultura com células Caco-2 (92,6%), e superiores ao desenvolvimento em DMEM pH 7,4 com Fildes (0,0%). No Dia 21, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em maior diferenciação (25,0%) e menor degeneração (13,9%) das larvas em comparação ao meio ácido (1,5-8,1% e 48,6-69,9%, respectivamente). Este é o primeiro relato de cultivo in vitro prolongado de H. contortus em meio comercial em co-cultivo com células Caco-2. Apesar da ausência de progressão até o estágio adulto, o co-cultivo com células Caco-2 resultou em diferenciação de L4 e manutenção da viabilidade das larvas de H. contortus por até 28 dias in vitro.(AU)

Anthelmintic resistance of Haemonchus contortus from sheep flocks in Brazil: concordance of in vivo and in vitro (RESISTA-Test©) methods / Resistência anti-helmíntica de Haemonchus contortus em rebanhos ovinos noBrasil: concordância de métodos in vivo e in vitro (RESISTA-Test©)

This study evaluated the resistance status of Haemonchus contortus from sheep flocks in the state of São Paulo, Brazil, through comparison between the fecal egg count reduction test (FECRT) and the larval development test (LDT). For the FECRT, 35 sheep were selected in each of five flocks and divided into groups treated with: benzimidazole, levamisole, ivermectin, monepantel and control. Feces were collected for EPG and fecal cultures. The LDT was performed using thiabendazole (TBZ), levamisole (LEV), ivermectin aglycone (IVM-A) and Zolvix (ZLV). Resistance to all drugs was detected using FECRT in 100% of the flocks, except in relation to ZLV (40% resistant and 20% suspected of resistance). LDT indicated resistance to TBZ and IVM-A in all flocks, to LEV in 80% of flocks and to ZLV in 10%. Total agreement was obtained between the two tests for TBZ and IVM (k = 1.0), while for LEV (k = 0.8) and ZLV (k = 0.9), substantial and almost perfect agreement were obtained, respectively. The concordance between the tests was significant, thus showing that it is possible to use the outcome of the LDT to predict the FECRT, and hence validating the former as a fast diagnostic test for use by sheep farmers in Brazil.(AU)

Este estudo avaliou o status de resistência de Haemonchus contortus em rebanhos ovinos do estado de São Paulo, Brasil, através de um estudo comparativo entre o teste de redução da contagem de ovos nas fezes (TRCOF) e o teste de desenvolvimento larvar (TDL). Para o TRCOF, 35 ovinos foram selecionados em cada um dos cinco rebanhos e divididos em grupos tratados com: benzimidazol, levamisol, ivermectina, monepantel e controle. Fezes foram coletadas para OPG e coproculturas. O TDL foi realizado com tiabendazol-TBZ, levamisol-LEV, ivermectina aglicona-IVM-A e Zolvix-ZLV. Resistência a todos os fármacos foi detectada por meio do TRCOF em 100% dos rebanhos, exceto para ZLV (40% resistentes e 20% suspeitos de resistência). O LDT indicou resistência ao TBZ e IVM-A em todos os rebanhos; em 80% dos rebanhos ao LEV e 10% ao ZLV. Foi obtida concordância total entre os dois testes para TBZ e IVM (k = 1,0), enquanto para LEV (k = 0,8) e ZLV (k = 0,9) foram obtidas concordância substancial e quase perfeita, respectivamente. A concordância entre os testes foi significante, sendo possível usar o resultado do LDT para prever o do TRCOF, validando-se o primeiro como um teste diagnóstico rápido para criadores de ovinos no Brasil.(AU)

Anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state, South Brazil: prevalence and associated factors / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em ovinos do estado do Paraná, sul do Brasil: prevalência e fatores associados

The aim of this study was to evaluate the seroprevalence and factors associated with the presence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state. The detection of antibodies for T. gondii and N. caninum was performed by homemade and commercial indirect ELISA, respectively. Multiple logistic regression analysis was used to verify the factors associated with the seroprevalence. Antibodies anti-T. gondii and anti-N. caninum were observed in 42.7% and in 17.6% of the animals, respectively. The protective factors associated to seropositive were some level of confinement (full or semi-extensive confinement) (OR=0.53) for T. gondii and use of skilled labor (OR=0.64) for N. caninum. The risk factors were presence of cats (OR=1.75) for T. gondii and feeding of dogs with sheep placental remains (OR=1.79) for N. caninum. In addition, to presenting a significant and simultaneous seroprevalence for both agents (9.9% of the animals), the results also indicate that deficiencies in management and environmental sanitation, the presence of reservoirs, and types of exploitation enhance the seropositivity. Thus, studies like this might support sanitary programs and public policies for the prevention of T. gondii and N. caninum in the sheep herds of Paraná state.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a soroprevalência e os fatores de risco associados à presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos do Paraná. A detecção dos anticorpos para T. gondii e N. caninum foi realizada, usando-se testes de ELISA indireto caseiro e comercial, respectivamente. A análise de regressão logística múltipla foi usada para verificar os fatores de risco associados à soroprevalência. Anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum foram observados em 42,7% e em 17,6% dos animais, respectivamente. Os fatores de proteção associados à soropositividade foram algum nível de confinamento (confinamento ou semiextensivo) (OR=0,53) para T. gondii e presença de mão de obra especializada para N. caminum (OR=0,64). Os fatores de risco foram presença de gatos para T. gondii (OR=1,75) e alimentação de cães com resíduos placentários (OR=1,79) para N. caninum. Além de apresentar uma significante e simultânea soroprevalência para ambos os agentes (9,9% dos animais), os resultados também indicam que as deficiências em gestão e saneamento ambiental, a presença de reservatórios e os tipos de exploração favorecem a soropositividade. Dessa forma, estudos como estes podem auxiliar em programas sanitários e políticas públicas para a prevenção de T. gondii e N. caninum nos rebanhos ovinos do Paraná.(AU)

Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections and factors associated in goats in the Parana state, Southern Brazil / Infecções por Toxoplasma gondii e Neospora caninum e fatores associados em caprinos no estado do Paraná, Sul do Brasil

The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies and their associated factors among goats in farms from the Paraná state, South Brazil. The serological analysis was performed by indirect ELISA on 629 goat serum samples collected from 32 farms distributed in five mesorregions from the state. Seropositivity was observed in 30.7% of the animals for T. gondii, 6.3% for N. caninum, and 3.0% for both agents. Final multiple regression models showed that the use of assisted reproduction decreased the chance of seropositivity for T. gondii (PR=0.70) and the slaughtering site on the farm (PR=2.03) increased it. To N. caninum, the supplying concentrated feed to animals (OR=4.80) and animal pre-weaning death (OR=9.96) increased the chance of seropositivity. The variables associated with these seropositivities suggest deficiencies in sanitation and reproductive management. In addition, it recognizes critical points of infection for animal production management.(AU)

O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum e seus fatores associados em caprinos de propriedades do Estado do Paraná, Sul do Brasil. A análise sorológica foi realizada, utilizando-se ELISA indireto em 629 amostras de soro caprino, coletadas em 32 propriedades distribuídas em cinco mesorregiões do Estado. A soropositividade foi observada em 30,7% dos animais para T. gondii, 6,3% para N. caninum e 3,0% para ambos. Os modelos finais de regressão múltipla mostraram que o uso de reprodução assistida reduziu a chance de soropositividade para T. gondii (PR=0,70), enquanto a presença no local de abate na fazenda (PR=2,03) aumentou. Para N. caninum, o fornecimento de ração concentrada (OR=4,80) e a morte dos animais no pré-desmame (OR=9,96) aumentaram a chance de soropositividade. O estudo das variáveis associadas às soropositividades sugere deficiências no saneamento e no manejo reprodutivo dos Animais. Além disso, reconhece pontos críticos para a infecção no manejo da produção animal.(AU)

Comparison of three Larval Immersion Tests in Syringe to evaluate acaricidal activity of chemical solutions / Comparação entre três técnicas de Imersão de Larvas em Seringas para avaliar atividade acaricida de soluções químicas

The aim of this study was to compare Larval Immersion Test in syringes, originally proposed by Souza et al. (2008), with two modified bioassays proposed by Silva et al. (2011) and Sindhu et al. (2012). Rhipicephalus (Boophilus) microplus larvae were exposed to nine dilutions of commercial acaricide. After 24 hours, the number of dead larvae was counted. The LC50 for the three methods were 0.186%, 0.125% and 0.153%, respectively. Mortality of larvae exposed to chemical dilutions on Silva et al. (2011) were significantly higher than other methods at lower concentrations, probably in consequence of longer exposure time of larvae to solutions. However, modifications proposed by Sindhu et al. (2012) make technic execution more practical and safer.

O objetivo deste trabalho foi comparar a técnica de imersão de larvas em seringas proposta originalmente por Souza et al. (2008), com duas modificações propostas por Silva et al. (2011) e Sindhu et al. (2012). Larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus foram expostas a nove diluições de acaricida comercial. Após 24 horas, contabilizou-se o número de larvas mortas. A CL50 nos três métodos foi de 0,186%, 0,125% e 0,153%, respectivamente. Houve maior mortalidade de larvas no método de Silva et al. (2011), nas menores concentrações, quando comparado aos demais métodos, provavelmente devido ao maior tempo de exposição das larvas ao composto químico. Entretanto, as modificações propostas por Sindhu et al. (2012) proporcionam maior praticidade e segurança na execução da técnica.

Comparison of three Larval Immersion Tests in Syringe to evaluate acaricidal activity of chemical solutions / Comparação entre três técnicas de Imersão de Larvas em Seringas para avaliar atividade acaricida de soluções químicas

The aim of this study was to compare Larval Immersion Test in syringes, originally proposed by Souza et al. (2008), with two modified bioassays proposed by Silva et al. (2011) and Sindhu et al. (2012). Rhipicephalus (Boophilus) microplus larvae were exposed to nine dilutions of commercial acaricide. After 24 hours, the number of dead larvae was counted. The LC50 for the three methods were 0.186%, 0.125% and 0.153%, respectively. Mortality of larvae exposed to chemical dilutions on Silva et al. (2011) were significantly higher than other methods at lower concentrations, probably in consequence of longer exposure time of larvae to solutions. However, modifications proposed by Sindhu et al. (2012) make technic execution more practical and safer.(AU)

O objetivo deste trabalho foi comparar a técnica de imersão de larvas em seringas proposta originalmente por Souza et al. (2008), com duas modificações propostas por Silva et al. (2011) e Sindhu et al. (2012). Larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus foram expostas a nove diluições de acaricida comercial. Após 24 horas, contabilizou-se o número de larvas mortas. A CL50 nos três métodos foi de 0,186%, 0,125% e 0,153%, respectivamente. Houve maior mortalidade de larvas no método de Silva et al. (2011), nas menores concentrações, quando comparado aos demais métodos, provavelmente devido ao maior tempo de exposição das larvas ao composto químico. Entretanto, as modificações propostas por Sindhu et al. (2012) proporcionam maior praticidade e segurança na execução da técnica.(AU)

Ultrastructural changes in the Haemonchus contortus cuticle exposed to Acacia mearnsii extract / Alterações ultraestruturais da cutícula de Haemonchus contortus expostos ao extrato de Acacia mearnsii

The parasite Haemonchus contortus is one of the most pathogenic for small ruminants in tropical and subtropical regions worldwide, including Brazil. The objective of this study was to evaluate the structural changes induced in adult H. contortus after in vitro contact with Acacia mearnsii extract (AE), using scanning electron microscopy. Adult nematodes were collected from a naturally infected lamb. In the in vitro assay the parasites were placed in contact with AE (100 mg ml-1), for two hours at 37oC. The nematodes used in the assays (exposed to AE and the negative controls) were analyzed using an electron scanning microscope (quadruplicate per treatment). In all replicates, similar morphological alterations were observed on the entire extension of the cuticle of the specimens that remained in contact with the EA in vitro assays, none significant lesion was observed in the negative control (not exposed to AE). These results indicate the direct action of EA on the cuticle of H. contortus in in vitro trials.(AU)

Haemonchus contortus é um dos parasitos mais patogênicos para pequenos ruminantes em regiões tropicais e subtropicais em todo o mundo, inclusive no Brasil. O objetivo do trabalho foi analisar alterações ultraestruturais na cutícula de H. contortus após contato com extrato de Acacia mearnsii. Os parasitos expostos ao extrato de Acacia mearnsii (EA) e os controles negativos foram analisados ao microscópio eletrônico de varredura. No teste in vitro, adultos de H. contortus foram coletados de um ovino naturalmente infectado, e os parasitos foram colocados em contato com o EA (100 mg mL-1), durante duas horas à 37oC. Os nematódeos expostos ao EA apresentaram alterações morfológicas em toda a extensão da cutícula. As alterações morfológicas não foram observadas no controle negativo. Estes resultados indicam a ação direta do EA na cutícula de H. contortus.(AU)

In vitro ovicidal and larvicidal activity of condensed tannins on gastrointestinal nematode infestations in sheep (Ovis aries) / Atividade ovicida e larvicida in vitro de taninos condensados em nematódeos gastrintestinais de ovinos (Ovis aries)

Infestations of gastrointestinal parasitic nematodes in sheep result in significant costs to farmers. These infestations are controlled using synthetic anthelmintic treatments, which can result in the development of anthelmintic resistance in nematodes. The use of plants rich in condensed tannins (CTs) is a promising alternative for controlling infestations of harmful parasites in sheep, and could allow reduction of the chemical products used. This study investigated the in vitro effect of CTs from Acacia mearnsii extract (AE) on egg hatching and motility of third-stage larvae. Egg-hatching rate was measured after incubation with extracts for 48 h at 27 °C. The egg hatch test was performed with dilutions of 0.09, 0.19, 0.39, 0.78, 1.56, 3.12, 6.25, 12.5, 25, 50, and 100 mg mL-1. Distilled water was used as the negative control. The corresponding egg hatching inhibition percentages were 22.3, 32.3, 39.2, 49.1, 56.7, 59.0, 62.3, 77.3, 92.7, 98.3, and 100%. The concentration required to inhibit egg hatching in 50% of eggs (LC50) was 2.85 mg mL-1. The inhibition achieved with the negative control was 7.06%. A larval migration inhibition test was carried out after incubation with the extracts for 48 h at 27 oC, with AE and distilled water used in dilutions of 3.12, 6.25, 12.5, 25, 50, and 100 mg mL-1. The corresponding percentages of migration inhibition were 16.5, 37.0, 56.3, 79.4, 91.8, and 97.1%. The concentration required to inhibit migration of 50% of larvae (LC50) was 12.45 mg mL-1. The inhibition achieved with the negative control was 8.53%. The in vitro ovicidal and larvicidal activity of CTs from AE indicate the anthelmintic effect of AE, suggesting the potential of CT extracts to be used as alternatives for controlling gastrointestinal nematode infestations in small ruminants.(AU)

O parasitismo gastrintestinal em ovinos acarreta inúmeros prejuízos aos produtores rurais. O controle é realizado basicamente através da administração de anti-helmínticos sintéticos o que estimula a seleção de parasitas resistentes. O uso de plantas ricas em taninos condensados (TC) apresenta-se como uma alternativa promissora no controle de helmintos em ovinos, reduzindo o uso de produtos químicos. Esse estudo avaliou o efeito in vitro dos TC provenientes da acácia (Acacia mearnsii) sobre a eclosão de ovos e a motilidade de larvas de terceiro estágio de nematódeos gastrintestinais de ovinos. A taxa de eclosão foi avaliada após incubação com o extrato por um período de 48 h a 27 °C. A eclodibilidade foi avaliada nas concentrações de 0,09; 0,19; 0,39; 0,78; 1,56; 3,12; 6,25; 12,5; 25; 50 e 100 mg mL-1. No controle negativo utilizou-se água destilada. As inibições das eclosões foram 22,3; 32,3; 39,3; 49,1; 56,7; 59; 62,3; 77,3; 92,7; 98,3 e 100%, respectivamente. Para a inibição de 50% da eclosão de ovos (CL50) o valor foi de 2,85 mg mL-1. No controle negativo a inibição foi de 7,1%. A inibição da migração larval foi avaliada após incubação com o extrato por um período de 3 h a 27 °C, nas concentrações de 3,12; 6,25; 12,5; 25; 50 e 100 mg mL-1. As porcentagens de inibição foram: 16,5; 37; 56,3; 79,4; 91,8 e 97,1% respectivamente. Para a inibição de 50% da migração larval (CL50), o valor da concentração foi de 12,45 mg mL-1. No controle negativo a inibição foi de 8,5%. A ação ovicida e larvicida in vitro do tanino condensado do extrato de Acacia mearnsii encontrada no presente trabalho indica uma ação anti-helmíntica, apresentando potencial para sua aplicação no controle alternativo de nematódeos gastrintestinais de pequenos ruminantes.(AU)

Anthelmintic effect of condensed tannins in gastrointestinal nematodes of sheep (Ovis aries) / Efeito anti-helmíntico de taninos condensados em nematódeos gastrintestinais de ovinos (Ovis aries)

Gastrointestinal helminthiasis infections are considerate one of the main limiting factors in sheep production worldwide. The development of parasite resistance to anthelmintics has caused significant losses of small ruminant production. In the search for new alternatives for effective control of gastrointestinal nematodes in small ruminants, phytotherapy is a promising field of research in an attempt to reduce the usage of chemical treatments, aimed at ecological production. Many plants play a crucial role in maintaining animal and human life. During human evolution many interactions with other organisms were established and they have affected each other in many ways. Plants have developed biochemical mechanisms to defend themselves from biological antagonists that act as their natural enemies. This principle has led scientists to search for bio-active compounds produced by plants against pathogens. Since these discovers their metabolites are evaluated against diseases of importance not only in public health, but also in animal production. This article presents a review of studies with tanniniferous plants scientifically tested worldwide for the control of gastrointestinal parasites in ruminants.

As helmintoses gastrintestinais constituem um dos principais fatores limitantes na produção de ovinos em todo o mundo. O desenvolvimento da resistência dos parasitos aos anti-helmínticos tem gerado grandes perdas na produção de pequenos ruminantes. Na busca por novas alternativas de controle efetivo de nematódeos gastrintestinais em pequenos ruminantes, a fitoterapia constitui um campo promissor de pesquisas na tentativa de reduzir a utilização de tratamentos químicos, visando uma produção agroecológica. Muitas plantas desempenham um papel crucial na manutenção da vida animal e humana. Durante a evolução humana muitas interações com outros organismos foram estabelecidas com consequências para ambas as partes de diversas maneiras. Plantas desenvolveram mecanismos bioquímicos para se defender de antagonistas biológicos que atuam como seus inimigos naturais. Este princípio tem levado os cientistas a procurar compostos bioativos produzidos pelas plantas contra os agentes patogénicos. Uma vez identificados, estes metabólitos são avaliados em relação a seu efeito sobre doenças de importância não só para a saúde pública, mas também na produção animal. O presente artigo apresenta uma revisão dos estudos realizados com plantas taniníferas cientificamente testadas em todo o mundo para o controle das parasitoses gastrintestinais em ruminantes.

In vitro ovicidal and larvicidal activity of condensed tannins on gastrointestinal nematode infestations in sheep (Ovis aries) / Atividade ovicida e larvicida in vitro de taninos condensados em nematódeos gastrintestinais de ovinos (Ovis aries)

Infestations of gastrointestinal parasitic nematodes in sheep result in significant costs to farmers. These infestations are controlled using synthetic anthelmintic treatments, which can result in the development of anthelmintic resistance in nematodes. The use of plants rich in condensed tannins (CTs) is a promising alternative for controlling infestations of harmful parasites in sheep, and could allow reduction of the chemical products used. This study investigated the in vitro effect of CTs from Acacia mearnsii extract (AE) on egg hatching and motility of third-stage larvae. Egg-hatching rate was measured after incubation with extracts for 48 h at 27 °C. The egg hatch test was performed with dilutions of 0.09, 0.19, 0.39, 0.78, 1.56, 3.12, 6.25, 12.5, 25, 50, and 100 mg mL-1. Distilled water was used as the negative control. The corresponding egg hatching inhibition percentages were 22.3, 32.3, 39.2, 49.1, 56.7, 59.0, 62.3, 77.3, 92.7, 98.3, and 100%. The concentration required to inhibit egg hatching in 50% of eggs (LC50) was 2.85 mg mL-1. The inhibition achieved with the negative control was 7.06%. A larval migration inhibition test was carried out after incubation with the extracts for 48 h at 27 oC, with AE and distilled water used in dilutions of 3.12, 6.25, 12.5, 25, 50, and 100 mg mL-1. The corresponding percentages of migration inhibition were 16.5, 37.0, 56.3, 79.4, 91.8, and 97.1%. The concentration required to inhibit migration of 50% of larvae (LC50) was 12.45 mg mL-1. The inhibition achieved with the negative control was 8.53%. The in vitro ovicidal and larvicidal activity of CTs from AE indicate the anthelmintic effect of AE, suggesting the potential of CT extracts to be used as alternatives for controlling gastrointestinal nematode infestations in small ruminants.

O parasitismo gastrintestinal em ovinos acarreta inúmeros prejuízos aos produtores rurais. O controle é realizado basicamente através da administração de anti-helmínticos sintéticos o que estimula a seleção de parasitas resistentes. O uso de plantas ricas em taninos condensados (TC) apresenta-se como uma alternativa promissora no controle de helmintos em ovinos, reduzindo o uso de produtos químicos. Esse estudo avaliou o efeito in vitro dos TC provenientes da acácia (Acacia mearnsii) sobre a eclosão de ovos e a motilidade de larvas de terceiro estágio de nematódeos gastrintestinais de ovinos. A taxa de eclosão foi avaliada após incubação com o extrato por um período de 48 h a 27 °C. A eclodibilidade foi avaliada nas concentrações de 0,09; 0,19; 0,39; 0,78; 1,56; 3,12; 6,25; 12,5; 25; 50 e 100 mg mL-1. No controle negativo utilizou-se água destilada. As inibições das eclosões foram 22,3; 32,3; 39,3; 49,1; 56,7; 59; 62,3; 77,3; 92,7; 98,3 e 100%, respectivamente. Para a inibição de 50% da eclosão de ovos (CL50) o valor foi de 2,85 mg mL-1. No controle negativo a inibição foi de 7,1%. A inibição da migração larval foi avaliada após incubação com o extrato por um período de 3 h a 27 °C, nas concentrações de 3,12; 6,25; 12,5; 25; 50 e 100 mg mL-1. As porcentagens de inibição foram: 16,5; 37; 56,3; 79,4; 91,8 e 97,1% respectivamente. Para a inibição de 50% da migração larval (CL50), o valor da concentração foi de 12,45 mg mL-1. No controle negativo a inibição foi de 8,5%. A ação ovicida e larvicida in vitro do tanino condensado do extrato de Acacia mearnsii encontrada no presente trabalho indica uma ação anti-helmíntica, apresentando potencial para sua aplicação no controle alternativo de nematódeos gastrintestinais de pequenos ruminantes.

Ultrastructural changes in the Haemonchus contortus cuticle exposed to Acacia mearnsii extract / Alterações ultraestruturais da cutícula de Haemonchus contortus expostos ao extrato de Acacia mearnsii

The parasite Haemonchus contortus is one of the most pathogenic for small ruminants in tropical and subtropical regions worldwide, including Brazil. The objective of this study was to evaluate the structural changes induced in adult H. contortus after in vitro contact with Acacia mearnsii extract (AE), using scanning electron microscopy. Adult nematodes were collected from a naturally infected lamb. In the in vitro assay the parasites were placed in contact with AE (100 mg ml-1), for two hours at 37oC. The nematodes used in the assays (exposed to AE and the negative controls) were analyzed using an electron scanning microscope (quadruplicate per treatment). In all replicates, similar morphological alterations were observed on the entire extension of the cuticle of the specimens that remained in contact with the EA in vitro assays, none significant lesion was observed in the negative control (not exposed to AE). These results indicate the direct action of EA on the cuticle of H. contortus in in vitro trials.

Haemonchus contortus é um dos parasitos mais patogênicos para pequenos ruminantes em regiões tropicais e subtropicais em todo o mundo, inclusive no Brasil. O objetivo do trabalho foi analisar alterações ultraestruturais na cutícula de H. contortus após contato com extrato de Acacia mearnsii. Os parasitos expostos ao extrato de Acacia mearnsii (EA) e os controles negativos foram analisados ao microscópio eletrônico de varredura. No teste in vitro, adultos de H. contortus foram coletados de um ovino naturalmente infectado, e os parasitos foram colocados em contato com o EA (100 mg mL-1), durante duas horas à 37oC. Os nematódeos expostos ao EA apresentaram alterações morfológicas em toda a extensão da cutícula. As alterações morfológicas não foram observadas no controle negativo. Estes resultados indicam a ação direta do EA na cutícula de H. contortus.