Transferrina como marcador de maturação pulmonar em cordeiros nascidos a termo ou prematuros / Transferrin as a marker of pulmonary maturation in lambs born at term or premature

O objetivo do estudo foi procurar proteínas de fase aguda que possam indicar sinais de maturação no neonato prematuro, por meio da quantificação sérica delas. Identificou-se a imunoglobulina A, a ceruloplasmina, a haptoglobina, a glicoproteína ácida, a transferrina, a albumina e as imunoglobulinas G de cadeias leve e pesada, pela comparação do perfil dos proteinogramas de cordeiros nascidos a termo com os prematuros submetidos a diferentes protocolos terapêuticos, a fim de estimular a atividade respiratória. Constituíram-se seis grupos: PN (n= 9): nascidos de parto normal; CN (n= 7): nascidos de cesariana em tempo normal de gestação; CP (n= 6): nascidos de cesariana prematura sem nenhum tipo de tratamento; DEX (n= 9): prematuros cujas mães receberam dexametasona pré-parto; SURF (n= 6): prematuros tratados com surfactante; e DEXSURF (n= 6): prematuros tratados com surfactante cujas mães receberam dexametasona pré-parto. As avaliações foram realizadas nos momentos imediatamente após o nascimento (M0), após 24 (M24) e após 48 horas (M48). As amostras foram processadas por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). A albumina, as imunoglobulinas e a proteína total dos cordeiros tiveram elevação após a ingestão de colostro. Maiores valores séricos de transferrina são referentes a maior período gestacional, podendo essa proteína ser utilizada como marcador de maturação neonatal.(AU)

The aim of this study was to search for acute phase proteins that could indicate signs of maturation in the premature neonate by quantifying them in serum. Immunoglobulin A, ceruloplasmin, haptoglobin, acid glycoprotein, tranferrin, albumin, light and heavy chain immunoglobulin G were quantified, comparing the profile of proteinograms from term to preterm lambs submitted to different protocols that stimulate respiratory activity. Six groups were used: PN (n= 9): born from normal birth; CN (n= 7): born from caesarean section at normal time of gestation; CP (n= 6): born from premature cesarean without any type of treatment; DEX (n= 9) preterm whose mothers received prepartum dexamethasone; SURF (n= 6) preterm treated with surfactant; DEXSURF (n= 6): preterm treated with surfactant whose mothers received prepartum dexamethasone. The evaluations were performed immediately after birth (M 0), after 24 and 48 hours (M 24 and M 48). Samples were processed with sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Albumin, immunoglobulins, and serum total protein of the lambs were elevated, after colostrum ingestion. Higher serum transferrin values refer to a longer gestational period, and this protein may be used as a marker of neonatal maturation.(AU)

Techniques to Minimize the Effects of Acute Heat Stress or Chronic in Broilers

High environmental temperature is limiting factor in broiler production. In order to minimize the undesirable consequences of acute or chronic heat stress, the techniques of fixed dietary electrolyte balance and early heat conditioning were evaluated. The objective of this study was to evaluate the possible interactions and effects of dietary electrolyte balance and early heat conditioning on feed intake, body weight, feed conversion ratio, mortality, energy bioeconomic index, fecal moisture, abdominal fat, and breast meat color (L*a*b*) of broilers submitted to chronic or acute heat stress. In total, 1280 chicks, were equally divided in experiment I (chronic heat stress, 6h/day at 32ºC from 35 to 39 d of age) and II (acute heat stress, 36 ºC for 6h at 38 days of age). The data of both experiments were combined and analyzed according to a 2x2x2 factorial arrangement (early heat conditioning (ETC) or not; fixed dietary electrolyte balance (EB) or not; and exposure to acute or chronic heat stress). ETC consisted of exposing 5-d-old birds to 36.0 °C for 24 hours. No interaction among the evaluated factors was detected. Birds exposed to acute heat stress presented significantly higher compared with chronic heat stress. Fixed dietary EB resulted in significantly higher fecal moisture. Lower abdominal fat percentage was obtained in birds exposed to chronic relative to acute heat stress. Higher breast meat L* and b* values were observed in birds exposed to acute heat stress than those submitted to chronic heat stress, indicating worse meat quality.(AU)

Transferrina como marcador de maturação pulmonar em cordeiros nascidos a termo ou prematuros / Transferrin as a marker of pulmonary maturation in lambs born at term or premature

O objetivo do estudo foi procurar proteínas de fase aguda que possam indicar sinais de maturação no neonato prematuro, por meio da quantificação sérica delas. Identificou-se a imunoglobulina A, a ceruloplasmina, a haptoglobina, a glicoproteína ácida, a transferrina, a albumina e as imunoglobulinas G de cadeias leve e pesada, pela comparação do perfil dos proteinogramas de cordeiros nascidos a termo com os prematuros submetidos a diferentes protocolos terapêuticos, a fim de estimular a atividade respiratória. Constituíram-se seis grupos: PN (n= 9): nascidos de parto normal; CN (n= 7): nascidos de cesariana em tempo normal de gestação; CP (n= 6): nascidos de cesariana prematura sem nenhum tipo de tratamento; DEX (n= 9): prematuros cujas mães receberam dexametasona pré-parto; SURF (n= 6): prematuros tratados com surfactante; e DEXSURF (n= 6): prematuros tratados com surfactante cujas mães receberam dexametasona pré-parto. As avaliações foram realizadas nos momentos imediatamente após o nascimento (M0), após 24 (M24) e após 48 horas (M48). As amostras foram processadas por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). A albumina, as imunoglobulinas e a proteína total dos cordeiros tiveram elevação após a ingestão de colostro. Maiores valores séricos de transferrina são referentes a maior período gestacional, podendo essa proteína ser utilizada como marcador de maturação neonatal.(AU)

The aim of this study was to search for acute phase proteins that could indicate signs of maturation in the premature neonate by quantifying them in serum. Immunoglobulin A, ceruloplasmin, haptoglobin, acid glycoprotein, tranferrin, albumin, light and heavy chain immunoglobulin G were quantified, comparing the profile of proteinograms from term to preterm lambs submitted to different protocols that stimulate respiratory activity. Six groups were used: PN (n= 9): born from normal birth; CN (n= 7): born from caesarean section at normal time of gestation; CP (n= 6): born from premature cesarean without any type of treatment; DEX (n= 9) preterm whose mothers received prepartum dexamethasone; SURF (n= 6) preterm treated with surfactant; DEXSURF (n= 6): preterm treated with surfactant whose mothers received prepartum dexamethasone. The evaluations were performed immediately after birth (M 0), after 24 and 48 hours (M 24 and M 48). Samples were processed with sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Albumin, immunoglobulins, and serum total protein of the lambs were elevated, after colostrum ingestion. Higher serum transferrin values refer to a longer gestational period, and this protein may be used as a marker of neonatal maturation.(AU)

Techniques to Minimize the Effects of Acute Heat Stress or Chronic in Broilers

High environmental temperature is limiting factor in broiler production. In order to minimize the undesirable consequences of acute or chronic heat stress, the techniques of fixed dietary electrolyte balance and early heat conditioning were evaluated. The objective of this study was to evaluate the possible interactions and effects of dietary electrolyte balance and early heat conditioning on feed intake, body weight, feed conversion ratio, mortality, energy bioeconomic index, fecal moisture, abdominal fat, and breast meat color (L*a*b*) of broilers submitted to chronic or acute heat stress. In total, 1280 chicks, were equally divided in experiment I (chronic heat stress, 6h/day at 32ºC from 35 to 39 d of age) and II (acute heat stress, 36 ºC for 6h at 38 days of age). The data of both experiments were combined and analyzed according to a 2x2x2 factorial arrangement (early heat conditioning (ETC) or not; fixed dietary electrolyte balance (EB) or not; and exposure to acute or chronic heat stress). ETC consisted of exposing 5-d-old birds to 36.0 °C for 24 hours. No interaction among the evaluated factors was detected. Birds exposed to acute heat stress presented significantly higher compared with chronic heat stress. Fixed dietary EB resulted in significantly higher fecal moisture. Lower abdominal fat percentage was obtained in birds exposed to chronic relative to acute heat stress. Higher breast meat L* and b* values were observed in birds exposed to acute heat stress than those submitted to chronic heat stress, indicating worse meat quality.

Parâmetros hematológicos e perfil bioquímico renal de cordeiros nascidos a termo e prematuros / Hematologic parameters and renal biochemical profile in full-term and premature lambs

O objetivo do presente estudo foi avaliar as variáveis hematológicas e o perfil bioquímico renal sérico de cordeiros nascidos a termo e prematuros do nascimento às 48 horas de vida, bem como verificar a influência da dexametasona sobre tais variáveis. Foram constituídos quatros grupos experimentais: PN (cordeiros nascidos de parto normal, n=15, média de 146 dias); PNDEX (cordeiros nascidos de parto normal cujas mães receberam 16mg de dexametasona aos 141 de gestação, n=8, média de 143 dias); PRE (cordeiros prematuros nascidos de cesarianas aos 138 dias de gestação, n=10) e PREDEX (cordeiros prematuros nascidos de cesarianas aos 138 dias de gestação cujas mães receberam 16mg de dexametasona dois dias antes, n=9). Os valores médios do volume globular e de hemoglobina diminuíram ao longo das 48 horas de observação, nos quatro grupos experimentais, porém dentro dos limites fisiológicos para a espécie. Houve variação da concentração plasmática de proteínas totais em todos os momentos, sendo os menores valores no grupo PRE. A contagem leucocitária foi mais alta no grupo PN apenas no M24h. Ao longo do período, apenas o grupo PN mostrou diferença entre o M24h e os demais momentos, e o grupo PRE apresentou os menores valores de neutrófilos no M0h, M15min e M60min. As concentrações séricas de creatinina foram mais altas no grupo PRE no M60min, M24h e M48h. Em todos os grupos, houve diminuição no M24h e M48h. Os parâmetros avaliados foram afetados pela prematuridade na espécie ovina e a dexametasona teve influência positiva sobre a taxa de sobrevivência dos animais prematuros.(AU)

The aim of the study was to evaluate hematologic parameters and renal biochemical profile of full-term and premature lambs from birth to 48 hours of life, and assess the effect of dexamethasone on such variables. Four experimental groups were formed: NDG (normal delivery group - lambs vaginally delivered, n=15, average of 146-day gestation); NDEXG (normal delivery with dexamethasone group - lambs vaginally delivered whose mothers received 16 mg of dexamethasone at 141 days of gestation, n=8, average of 143-day gestation); PRE (premature lambs born by cesarean section at 138 days of gestation, n=10) and PREDEX (premature lambs born by cesarean section at 138 days gestation, whose mothers received 16 mg of dexamethasone two days before, n=9). Mean values of cell volume and hemoglobin content decreased during the observation period of 48 hours in all groups, but within the physiologic limits for ovine species. There was significant variation in plasma concentration of total protein in all periods evaluated, with the lowest mean values in PRE group. The leukocyte count was significantly higher in PN group only in M24h. Throughout the observation period, only PN group showed differences between M24h and the other moments and PRE group showed the lowest values of neutrophils in M0h, M15min and M60min. Serum creatinine concentration was significantly higher in group PRE in M60min, M24h and M48h. In all groups, there was a decrease in M24 and M48. The evaluated parameters were affected by prematurity in sheep and dexamethasone had a positive effect on the survival rate of premature animals.(AU)

Parâmetros hematológicos e perfil bioquímico renal de cordeiros nascidos a termo e prematuros / Hematologic parameters and renal biochemical profile in full-term and premature lambs

O objetivo do presente estudo foi avaliar as variáveis hematológicas e o perfil bioquímico renal sérico de cordeiros nascidos a termo e prematuros do nascimento às 48 horas de vida, bem como verificar a influência da dexametasona sobre tais variáveis. Foram constituídos quatros grupos experimentais: PN (cordeiros nascidos de parto normal, n=15, média de 146 dias); PNDEX (cordeiros nascidos de parto normal cujas mães receberam 16mg de dexametasona aos 141 de gestação, n=8, média de 143 dias); PRE (cordeiros prematuros nascidos de cesarianas aos 138 dias de gestação, n=10) e PREDEX (cordeiros prematuros nascidos de cesarianas aos 138 dias de gestação cujas mães receberam 16mg de dexametasona dois dias antes, n=9). Os valores médios do volume globular e de hemoglobina diminuíram ao longo das 48 horas de observação, nos quatro grupos experimentais, porém dentro dos limites fisiológicos para a espécie. Houve variação da concentração plasmática de proteínas totais em todos os momentos, sendo os menores valores no grupo PRE. A contagem leucocitária foi mais alta no grupo PN apenas no M24h. Ao longo do período, apenas o grupo PN mostrou diferença entre o M24h e os demais momentos, e o grupo PRE apresentou os menores valores de neutrófilos no M0h, M15min e M60min. As concentrações séricas de creatinina foram mais altas no grupo PRE no M60min, M24h e M48h. Em todos os grupos, houve diminuição no M24h e M48h. Os parâmetros avaliados foram afetados pela prematuridade na espécie ovina e a dexametasona teve influência positiva sobre a taxa de sobrevivência dos animais prematuros.(AU)

The aim of the study was to evaluate hematologic parameters and renal biochemical profile of full-term and premature lambs from birth to 48 hours of life, and assess the effect of dexamethasone on such variables. Four experimental groups were formed: NDG (normal delivery group - lambs vaginally delivered, n=15, average of 146-day gestation); NDEXG (normal delivery with dexamethasone group - lambs vaginally delivered whose mothers received 16 mg of dexamethasone at 141 days of gestation, n=8, average of 143-day gestation); PRE (premature lambs born by cesarean section at 138 days of gestation, n=10) and PREDEX (premature lambs born by cesarean section at 138 days gestation, whose mothers received 16 mg of dexamethasone two days before, n=9). Mean values of cell volume and hemoglobin content decreased during the observation period of 48 hours in all groups, but within the physiologic limits for ovine species. There was significant variation in plasma concentration of total protein in all periods evaluated, with the lowest mean values in PRE group. The leukocyte count was significantly higher in PN group only in M24h. Throughout the observation period, only PN group showed differences between M24h and the other moments and PRE group showed the lowest values of neutrophils in M0h, M15min and M60min. Serum creatinine concentration was significantly higher in group PRE in M60min, M24h and M48h. In all groups, there was a decrease in M24 and M48. The evaluated parameters were affected by prematurity in sheep and dexamethasone had a positive effect on the survival rate of premature animals.(AU)

Exposure to carbonic gas enriched atmosphere or electrical water bath to stun or kill chickens

The objective of this study was to compare the effects of two methods (electrical water bath or carbonic gas atmosphere) for stunning or killing broiler chickens prior to bleeding on weight loss due to bleeding and meat traits. A completely randomized design with 2 x 2 factorial arrangement (electrical or gas system x stunning or killing) was applied. The time required for stunning and killing and the birds' behavior were evaluated for the gas exposure method. The birds killed by the electrical method retained more blood than those killed by the exposure to gas and, therefore, presented redder meat. The exposure to 10 to 15% CO2 atmosphere caused discomfort reactions in 100% of birds, and the intensity of reaction presented a wide variation: 35% for weak reaction, 40% for intermediate reaction, and 25% for strong reaction. The time required to stun or kill the birds by CO2 exposure varied from 28 to 97 seconds and from 42 to 158 seconds, respectively. It was concluded that the time required to stun or to kill the birds by CO2 exposure widely varied and caused discomfort reactions; however, meat traits were not influenced by the methods used in this experiment.(AU)

Exposure to carbonic gas enriched atmosphere or electrical water bath to stun or kill chickens

The objective of this study was to compare the effects of two methods (electrical water bath or carbonic gas atmosphere) for stunning or killing broiler chickens prior to bleeding on weight loss due to bleeding and meat traits. A completely randomized design with 2 x 2 factorial arrangement (electrical or gas system x stunning or killing) was applied. The time required for stunning and killing and the birds' behavior were evaluated for the gas exposure method. The birds killed by the electrical method retained more blood than those killed by the exposure to gas and, therefore, presented redder meat. The exposure to 10 to 15% CO2 atmosphere caused discomfort reactions in 100% of birds, and the intensity of reaction presented a wide variation: 35% for weak reaction, 40% for intermediate reaction, and 25% for strong reaction. The time required to stun or kill the birds by CO2 exposure varied from 28 to 97 seconds and from 42 to 158 seconds, respectively. It was concluded that the time required to stun or to kill the birds by CO2 exposure widely varied and caused discomfort reactions; however, meat traits were not influenced by the methods used in this experiment.

The Strategic Application of Electrolyte Balance to Minimize Heat Stress in Broilers

Several physiological and metabolic changes are triggered in broilers submitted to high environmental temperatures, resulting in performance losses. Feed formulation manipulation of the dietary electrolyte balance may be applied to reduce the negative impact of heat stress on broiler performance. This experiment was carried out to evaluate the effect of the manipulations of dietary electrolytes by combining changes in the electrolyte (Na++K+-Cl-) balance (EB) and in the [(K++Cl-)/Na+] ratio (ER) in broiler feeds. In total, 1575 male broilers between 21 and 46 days old were allotted to 15 treatments in a 5x3 factorial arrangement, consisting of five diets with different EB/ER combinations (150/3, 250/2, 250/3, 250/4, and 350/3). Birds were submitted to heat stress at 25 or 35 days old. Live performance, mortality rate, and carcass traits were evaluated. The strategic formulation of diets with different EB and ER improves live performance and minimize the effect of heat stress on broilers. Under thermoneutral conditions, an EB of 250 mEq/kg and an ER of 3 are recommended, whereas under heat stress, and EB of 350 mEq/kg and an ER of 3 should be applied.(AU)

The Strategic Application of Electrolyte Balance to Minimize Heat Stress in Broilers

Several physiological and metabolic changes are triggered in broilers submitted to high environmental temperatures, resulting in performance losses. Feed formulation manipulation of the dietary electrolyte balance may be applied to reduce the negative impact of heat stress on broiler performance. This experiment was carried out to evaluate the effect of the manipulations of dietary electrolytes by combining changes in the electrolyte (Na++K+-Cl-) balance (EB) and in the [(K++Cl-)/Na+] ratio (ER) in broiler feeds. In total, 1575 male broilers between 21 and 46 days old were allotted to 15 treatments in a 5x3 factorial arrangement, consisting of five diets with different EB/ER combinations (150/3, 250/2, 250/3, 250/4, and 350/3). Birds were submitted to heat stress at 25 or 35 days old. Live performance, mortality rate, and carcass traits were evaluated. The strategic formulation of diets with different EB and ER improves live performance and minimize the effect of heat stress on broilers. Under thermoneutral conditions, an EB of 250 mEq/kg and an ER of 3 are recommended, whereas under heat stress, and EB of 350 mEq/kg and an ER of 3 should be applied.

Impaired protamination and sperm DNA damage in a Nellore bull with high percentages of morphological sperm defects in comparison to normospermic bulls / Deficiências de protaminação e danos de DNA no sêmen de um touro Nelore com elevada porcentagem de patologias espermáticas em comparação a touros normospérmicos

The routine semen evaluation assessing sperm concentration, motility and morphology, does not identify subtle defects in sperm chromatin architecture. Bulls appear to have stable chromatin, with low levels of DNA fragmentation. However, the nature of fragmentation and its impact on fertility remain unclear and there are no detailed reports characterizing the DNA organization and damage in this species. The intensive genetic selection, the use of artificial insemination and in vitro embryo production associated to the cryopreservation process can contribute to the chromatin damage and highlights the importance of sperm DNA integrity for the success of these technologies. Frozen-thawed semen samples from three ejaculates from a Nellore bull showed high levels of morphological sperm abnormalities (55.8±5.1%), and were selected for complementary tests. Damage of acrosomal (76.9±8.9%) and plasma membranes (75.7±9.3%) as well as sperm DNA strand breaks (13.8±9.5%) and protamination deficiency (3.7±0.6%) were significantly higher compared to the values measured in the semen of five Nellore bulls with normospermia (24.3±3.3%; 24.5±6.1%; 0.6±0.5%; 0.4±0.6% for acrosome, plasma membrane, DNA breaks and protamine deficiency, respectively) (P<0.05). Motility and percentage of spermatozoa with low mitochondrial potential showed no differences between groups. This study shows how routine semen analyses (in this case morphology) may point to the length and complexity of sperm cell damage emphasizing the importance of sperm function testing.(AU)

O exame de rotina de sêmen, o qual avalia a concentração de espermatozoides, a motilidade e a morfologia, pode não identificar defeitos sutis na arquitetura da cromatina de espermatozoides. Os touros parecem ter cromatina estável com baixos níveis de fragmentação do DNA. No entanto, a natureza da fragmentação e o seu impacto sobre a fertilidade ainda não estão claros e não há relatos que caracterizam a organização do DNA e os danos nessa espécie com mais detalhes. A seleção genética intensiva e o uso da inseminação artificial e da produção in vitro de embriões, além do processo de criopreservação, podem contribuir para o dano da cromatina, e sabe-se a importância da integridade do DNA espermático para o sucesso dessas tecnologias. Amostras de sêmen de três ejaculados de um touro Nelore com altos níveis de alterações morfológicas (55,8±5,1%) foram selecionadas para realização de exames complementares. Os danos de acrossoma (76,9±8,9%) e das membranas plasmáticas (75,7±9,3%), bem como quebras de fita de DNA de espermatozoides (13,8±9,5) e deficiência de protamina (3,7±0,6) foram significativamente maiores em comparação aos valores avaliados no sêmen de cinco touros Nelore com normospermia (24,3±3,3%; 24,5±6,1%; 0,6±0,5%; 0,4±0,6% para acrossoma, membrana plasmática, quebras de DNA e deficiência de protamina, respectivamente) (p<0,05). Motilidade e porcentagem de espermatozoides com baixo potencial mitocondrial não diferiram estatisticamente. Essas avaliações mostram que análises de sêmen de rotina (neste caso, morfologia) podem apontar para a extensão e a complexidade dos danos na célula espermática, o que indica que a deficiência de protamina e os danos no DNA podem ocorrer simultaneamente a defeitos morfológicos. Tal ocorrência enfatiza a importância das análises de sêmen clássicas e dos testes complementares.(AU)

Molecular characterisation of Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the State of São Paulo / Caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em cordeiros na região centro sul do Estado de São Paulo

Considering the proximity of sheep farmers to animals that are possibly diseased or releasing fecal oocysts into the environment and the marked pathogenicity in lambs, the aim of this study was to determine the occurrence and to molecularly characterize the infection by Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the state of São Paulo, Brazil. A total of 193 fecal samples were collected from sheep of several breeds, males and females, aged up to one year. Polymerase chain reaction (nested-PCR) was used to amplify DNA fragments from the subunit 18S rRNA gene and indicated 15% positivity; sequencing of amplified fragments was possible for 19 samples. Analysis of the obtained sequences showed that the identified species were Cryptosporidium xiaoi for 15 samples, constituting thus the first molecular characterization study of this Cryptosporidium species in Brazil. Cryptosporidium ubiquitum was identified for three samples and Cryptosporidium meleagridis for one sample; the latter two are considered zoonotic species.(AU)

Devido à proximidade de criadores de ovinos com animais possivelmente doentes e/ou eliminando oocistos fecais no ambiente e pela acentuada patogenicidade em cordeiros o objetivo foi, determinar a ocorrência e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em cordeiros na região Centro Sul do Estado de São Paulo, Brasil. Num total de 193 amostras de fezes foram coletadas de ovinos de diversas raças, machos e fêmeas, com idade de até um ano. Por meio da reação em cadeia da polimerase (nested PCR) para a amplificação de fragmentos de DNA a partir do gene da subunidade 18S do rRNA houve positividade de 15% e o sequenciamento dos fragmentos amplificados foi possível em 19 amostras. A análise das sequências obtidas mostraram que as espécies identificadas nesses animais foram Cryptosporidium xiaoi em 15 amostras, sendo o primeiro estudo de caracterização molecular desta espécie de Cryptosporidium no Brasil. Cryptosporidium ubiquitum em três amostras, e Cryptosporidium meleagridis em uma amostra, sendo estas duas últimas consideradas espécies zoonóticas.(AU)

Impaired protamination and sperm DNA damage in a Nellore bull with high percentages of morphological sperm defects in comparison to normospermic bulls / Deficiências de protaminação e danos de DNA no sêmen de um touro Nelore com elevada porcentagem de patologias espermáticas em comparação a touros normospérmicos

The routine semen evaluation assessing sperm concentration, motility and morphology, does not identify subtle defects in sperm chromatin architecture. Bulls appear to have stable chromatin, with low levels of DNA fragmentation. However, the nature of fragmentation and its impact on fertility remain unclear and there are no detailed reports characterizing the DNA organization and damage in this species. The intensive genetic selection, the use of artificial insemination and in vitro embryo production associated to the cryopreservation process can contribute to the chromatin damage and highlights the importance of sperm DNA integrity for the success of these technologies. Frozen-thawed semen samples from three ejaculates from a Nellore bull showed high levels of morphological sperm abnormalities (55.8±5.1%), and were selected for complementary tests. Damage of acrosomal (76.9±8.9%) and plasma membranes (75.7±9.3%) as well as sperm DNA strand breaks (13.8±9.5%) and protamination deficiency (3.7±0.6%) were significantly higher compared to the values measured in the semen of five Nellore bulls with normospermia (24.3±3.3%; 24.5±6.1%; 0.6±0.5%; 0.4±0.6% for acrosome, plasma membrane, DNA breaks and protamine deficiency, respectively) (P<0.05). Motility and percentage of spermatozoa with low mitochondrial potential showed no differences between groups. This study shows how routine semen analyses (in this case morphology) may point to the length and complexity of sperm cell damage emphasizing the importance of sperm function testing.(AU)

O exame de rotina de sêmen, o qual avalia a concentração de espermatozoides, a motilidade e a morfologia, pode não identificar defeitos sutis na arquitetura da cromatina de espermatozoides. Os touros parecem ter cromatina estável com baixos níveis de fragmentação do DNA. No entanto, a natureza da fragmentação e o seu impacto sobre a fertilidade ainda não estão claros e não há relatos que caracterizam a organização do DNA e os danos nessa espécie com mais detalhes. A seleção genética intensiva e o uso da inseminação artificial e da produção in vitro de embriões, além do processo de criopreservação, podem contribuir para o dano da cromatina, e sabe-se a importância da integridade do DNA espermático para o sucesso dessas tecnologias. Amostras de sêmen de três ejaculados de um touro Nelore com altos níveis de alterações morfológicas (55,8±5,1%) foram selecionadas para realização de exames complementares. Os danos de acrossoma (76,9±8,9%) e das membranas plasmáticas (75,7±9,3%), bem como quebras de fita de DNA de espermatozoides (13,8±9,5) e deficiência de protamina (3,7±0,6) foram significativamente maiores em comparação aos valores avaliados no sêmen de cinco touros Nelore com normospermia (24,3±3,3%; 24,5±6,1%; 0,6±0,5%; 0,4±0,6% para acrossoma, membrana plasmática, quebras de DNA e deficiência de protamina, respectivamente) (p<0,05). Motilidade e porcentagem de espermatozoides com baixo potencial mitocondrial não diferiram estatisticamente. Essas avaliações mostram que análises de sêmen de rotina (neste caso, morfologia) podem apontar para a extensão e a complexidade dos danos na célula espermática, o que indica que a deficiência de protamina e os danos no DNA podem ocorrer simultaneamente a defeitos morfológicos. Tal ocorrência enfatiza a importância das análises de sêmen clássicas e dos testes complementares.(AU)

Molecular characterisation of Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the State of São Paulo / Caracterização molecular de Cryptosporidium spp. em cordeiros na região centro sul do Estado de São Paulo

Considering the proximity of sheep farmers to animals that are possibly diseased or releasing fecal oocysts into the environment and the marked pathogenicity in lambs, the aim of this study was to determine the occurrence and to molecularly characterize the infection by Cryptosporidium spp. in lambs in the South Central region of the state of São Paulo, Brazil. A total of 193 fecal samples were collected from sheep of several breeds, males and females, aged up to one year. Polymerase chain reaction (nested-PCR) was used to amplify DNA fragments from the subunit 18S rRNA gene and indicated 15% positivity; sequencing of amplified fragments was possible for 19 samples. Analysis of the obtained sequences showed that the identified species were Cryptosporidium xiaoi for 15 samples, constituting thus the first molecular characterization study of this Cryptosporidium species in Brazil. Cryptosporidium ubiquitum was identified for three samples and Cryptosporidium meleagridis for one sample; the latter two are considered zoonotic species.(AU)

Devido à proximidade de criadores de ovinos com animais possivelmente doentes e/ou eliminando oocistos fecais no ambiente e pela acentuada patogenicidade em cordeiros o objetivo foi, determinar a ocorrência e caracterizar molecularmente a infecção por Cryptosporidium spp. em cordeiros na região Centro Sul do Estado de São Paulo, Brasil. Num total de 193 amostras de fezes foram coletadas de ovinos de diversas raças, machos e fêmeas, com idade de até um ano. Por meio da reação em cadeia da polimerase (nested PCR) para a amplificação de fragmentos de DNA a partir do gene da subunidade 18S do rRNA houve positividade de 15% e o sequenciamento dos fragmentos amplificados foi possível em 19 amostras. A análise das sequências obtidas mostraram que as espécies identificadas nesses animais foram Cryptosporidium xiaoi em 15 amostras, sendo o primeiro estudo de caracterização molecular desta espécie de Cryptosporidium no Brasil. Cryptosporidium ubiquitum em três amostras, e Cryptosporidium meleagridis em uma amostra, sendo estas duas últimas consideradas espécies zoonóticas.(AU)

Avaliação do efeito trombogênico da perfusão regional intravenosa com gentamicina em equinos / Evaluation of intravenous regional perfusion thrombogenic effect with gentamicin in equine

A extremidade distal dos equinos é frequentemente afetada por processos sépticos de difícil tratamento. A perfusão regional intravenosa de antimicrobianos é uma opção de tratamento para esses processos, pois aumenta a concentração do fármaco no local mediante pequenas doses. Entretanto, apesar de ser muito utilizada recentemente, ainda apresenta várias questões. O objetivo deste trabalho foi avaliar as possíveis complicações da técnica, com o uso da gentamicina na dose de 2,2mg/kg na veia cefálica de equinos. Utilizaram-se 15 equinos hígidos divididos aleatoriamente em três grupos de cinco animais: grupo somente com torniquete (GT), grupo que recebeu 40mL de solução fisiológica (GSF) e grupo que recebeu gentamicina na dose de 2,2mg/kg, acrescida de solução fisiológica até completar o volume de 40mL (GSG). O membro perfundido foi avaliado por termografia e ultrassonografia duplex em cores ao longo do tempo. Os dados foram submetidos à análise pelos testes de Tukey e de Dunnett, e o nível de significância adotado foi de P<0,05. Todos os grupos apresentaram escore trombótico zero, e não houve diferença significativa entre os grupos quanto ao diâmetro médio da veia e da temperatura dos membros. A antibiose intravenosa regional com 2,2mg/kg de gentamicina, em dose única, não acarretou o desenvolvimento de trombose na veia cefálica.(AU)

The distal end of the horse is often affected by septic processes that are difficult to treat. The intravenous regional perfusion of antimicrobials is a treatment option for these processes, increasing the local concentration of the drug using small doses, and is currently widely used, but still presenting various issues. The aim of this study was to evaluate the possible complications of the technique, using gentamicin at a dose of 2.2mg/kg in the cephalic vein of horses. Fifteen healthy horses were assigned to three groups of 5 animals. Group 1, tourniquet group (TG), group 2, tourniquet and 40mL of physiologic saline solution (SPG) and group 3, tourniquet and 2.2mg/kg gentamicin completed to 40mL by the addition of physiologic saline solution (ASG). The perfused limb was evaluated by thermography and ultrasound Duplex color over time. The data were analyzed by Tukey's and Dunnett's method, and the accepted significance level was P<0.05. All groups showed thrombotic score zero and there was no significant difference between groups in the average diameter of the vein and member temperatures. The intravenous regional antibiosis with 2.2mg/kg of gentamicin as a single dose did not affect the development of thrombosis in the cephalic vein.(AU)

AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA DE MEDICAMENTOS ANTI-HELMÍNTICOS EM OVINOS NATURALMENTE INFECTADOS: UMA ABORADEGEM ESTATÍSTICA / EVALUATION tOF THE EFFICACY OF ANTHELMINTIC DRUGS IN NATURALLY INFECTED SHEEP: A STATISTICAL APPROACH

Os testes estatísticos, paramétricos e não paramétricos, são importantes ferramentas de estudos para avaliar hipóteses formuladas. É de extrema importância selecionar o teste estatístico mais adequado para fazer uma análise correta dos dados experimentais. Na ovinocultura, a utilização destes métodos estatísticos pode proporcionar a análise comparativa da eficácia de medicamentos. O objetivo desta pesquisa científica foi avaliar a eficácia de medicamentos anti-helmínticos atualmente disponíveis comercialmente, utilizando testes estatísticos adequados, dependendo da natureza dos dados e das pressuposições dos testes, na avaliação do OPG. Foram utilizados 350 animais selecionados de cinco criatórios comerciais de ovinos. De cada criatório, 70 animais foram divididos em sete grupos contendo 10 animais cada um: Grupo 1 – controle, Grupo 2 – Albendazole 10% (oral-1 ml/ 20 kg PV); Grupo 3 – Cloridrato de levamisol 5% (oral-1 ml/ 10 kg PV); Grupo 4 – Ivermectina 0,08% (oral-1 ml/ 4 kg PV); Grupo 5 – Moxidectina 0,2% (oral-1 ml/ 10 kg PV); e Grup

Avaliação comparativa de exames parasitológicos diretos de linfonodos e de medulas ósseas na eficácia diagnóstica da leishmaniose canina / comparative evaluation of direct parasitological tests of lymph nodes and bone marrow on the efficacy of canine ..

A Leishmaniose é uma enfermidade zoonótica de grande importância na saúde pública. Seu diagnóstico pode ser feito por métodos imunológicos, moleculares e parasitológicos. Estes últimos permitem identificar as formas amastigotas do parasito a partir de esfregaços de órgãos linfóides. Comparar a eficácia diagnóstica de  exames citológicos de linfonodos e de medula óssea de caninos quanto à detecção de Leishmania spp. foi o objetivo do presente estudo. Um total de 33 cães foram utilizados, sendo que 51,52% (17/33) eram fêmeas e 48,48% (16/33) machos, 24,24% (8/33) de padrão racial determinado (PRD), e 75,76% (25/33) sem raça definida (SRD). Lâminas de punções aspirativas foram confeccionadas e coradas pelo corante Panótico Rápido. Estas foram analisadas em microscópio óptico, utilizando óleo de imersão em um aumento de 100X. Formas amastigotas de Leishmania spp. foram observadas em 93,94% (31/33) das amostras de linfonodos e em  72,73% (24/33) das  de medula óssea. Na an&aacu

Anestesia local por tumescência com lidocaína em cadelas submetidas a mastectomia / Tumescent local anesthesia with lidocaine in dogs undergoing mastectomy

O presente estudo investigou os benefícios da anestesia por tumescência com lidocaína em cadelas submetidas à mastectomia, visando ao conforto do paciente e à sua recuperação pós-operatória. Foram utilizados sete animais, de peso e raças variadas, que apresentavam neoplasia em região de cadeia mamária e que foram submetidos à cirurgia de mastectomia. Todos os animais receberam o mesmo protocolo anestésico, sendo utilizado como MPA a associação entre acepromazina e morfina, nas doses de 0,04mg/kg e 0,4mg/kg (IM), respectivamente. Após 15 minutos, foi alocado um cateter em veia cefálica e realizou-se a indução com propofol 4mg/kg e midazolam 0,2mg/kg, seguida de manutenção anestésica com isofluorano. Posteriormente à instrumentação, procedeu-se à técnica de anestesia por tumescência com solução gelada composta por ringer lactato, lidocaína 2% sem vasoconstritor e adrenalina, em um volume total de 15mL/kg. Em média, o tempo de duração do procedimento foi de 74±18 minutos. O pico plasmático de lidocaína deu-se entre 30 e 60 minutos após a infiltração da solução. O resgate analgésico foi realizado após sete horas, aproximadamente, da infiltração. Pode-se concluir que a anestesia por tumescência com lidocaína deve ser considerada como constituinte do protocolo anestésico e analgésico de cadelas a serem submetidas à cirurgia de mastectomia, proporcionando estabilidade de parâmetros, segurança e recuperação pós-operatória de boa qualidade.(AU)

The present study investigated the benefits of tumescent anesthesia with lidocaine in dogs undergoing mastectomy, seeking the patients' comfort and their postoperative recovery. Seven animals, with different weight and breed, who had cancer in the region of mammary chain underwent mastectomy surgery. All animals received the same anesthetic protocol being used as the association between acepromazine and morphine doses of 0.04mg.kg-1 and 0.4mg.kg-1 (IM), respectively. After 15 minutes a catheter was placed in the cephalic vein and induction with propofol 4mg.kg-1 and 0.2mg.kg-1 followed by maintenance with isoflurane anesthesia was done. After instrumentation, we proceeded to the tumescent anesthesia technique with ice-cold solution consisting of Ringer's lactate, lidocaine 2% without epinephrine and adrenaline in a total volume of 15mL.kg-1. The average duration of the procedure was 74±18 minutes. The plasmatic peak of lidocaine was between 30 and 60 minutes after infiltration. The rescue analgesic was performed after approximately seven hours of infiltration. It can be concluded that the tumescent anesthesia with lidocaine should be considered as a constituent of anesthetic and analgesic protocol in dogs undergoing mastectomy surgery providing parameter stability, safety and good quality postoperative recovery.(AU)

Efeito das células do cumulus e cisteamina durante o cultivo de maturação in vitro de oócitos bovinos sobre a maturação nuclear e aquisição da competência para desenvolvimento embrionário / Effects of cumulus cells and cysteamine during bovine oocyte in vitro maturation on meiosis progression and acquisition of developmental competence

Complexos cumulus-oócito (COC), oócitos desnudos (DO) e DO cocultivados com células do cumulus em suspensão (DO+CC) foram maturados in vitro (MIV) na presença ou ausência de cisteamina (50mM). Observou-se efeito benéfico da cisteamina durante o cultivo de MIV, pois a maturação nuclear no grupo COC cisteamina foi maior do que a do COC controle (P<0,05). No grupo sem a adição de cisteamina, foi observado que a ausência de CC durante o cultivo de MIV prejudicou a maturação nuclear em DO, em relação ao COC (P<0,05), todavia a cisteamina restaurou a capacidade de progressão da meiose em DO, tornando-os semelhantes aos COC (P>0,05). O acoplamento entre oócitos e CC durante MIV demonstrou ser essencial para aquisição da competência do oócito para suportar o desenvolvimento embrionário inicial, pois COC apresentaram maior porcentagem de blastocistos e eclosão quando comparados a DO e DO+CC (P<0,05). A inclusão de cisteamina no cultivo de MIV não restaurou a aquisição da competência em DO e DO+CC, que permaneceram semelhantes aos do grupo-controle (P>0,05). Conclui-se que a cisteamina no meio de MIV melhora as taxas de maturação nuclear em COC e restaura a capacidade de progressão da meiose em DO. Todavia, na concentração utilizada neste estudo, não promove efeito benéfico no desenvolvimento embrionário.(AU)

Cumulus-oocyte complexes (COC), denuded oocytes (DO) and DO co-cultured with cumulus cells in suspension (DO+CC) were in vitro matured (IVM) in the presence or absence of cysteamine (50mM). A beneficial effect of cysteamine was observed during IVM, because the nuclear maturation in the COC cysteamine group was higher than in COC control (P<0.05). In the control group, the absence of CC during IVM impaired nuclear maturation in DO when compared to COC (P<0.05), but cysteamine restored the ability of meiosis progression in DO, making them similar to COC (P>0.05). The coupling between oocytes and CC during IVM proved to be essential for the acquisition of oocyte competence to support early embryonic development, as COC had higher percentages of blastocyst and hatching when compared to DO and DO+DC (P<0.05). However, the inclusion of cysteamine in the IVM culture did not restore the acquisition of competence in DO and DO+DC, which remained similar to the control group (P>0.05). It is concluded that cysteamine in the IVM culture improves the nuclear maturation in COC and restores the progression ability of meiosis in DO. However, in the concentration used in this study, cysteamine does not promote a beneficial effect on embryo development.(AU)

Avaliação sorológica de vacinas comerciais polivalentes contra a enterotoxemia em caprinos / Serological evaluation of polyvalent commercial vaccines against enterotoxemia in goats

Foram avaliadas as respostas sorológicas a cinco vacinas comerciais polivalentes que continham o toxóide épsilon do Clostridium perfringens tipo D na sua formulação. Para isso, foram utilizados 84 caprinos jovens, divididos aleatoriamente em seis grupos experimentais com 14 animais em cada grupo. Os caprinos do Grupo Controle não receberam nenhuma dose de vacina e os dos Grupos 1 ao 5 receberam duas doses de vacina com intervalo de quatro semanas entre elas. A primeira dose de vacina foi aplicada aos 45 (± 3) dias de vida dos animais (início do experimento - dia zero) e a segunda aos 75 (± 3 – dia 30). As amostras de sangue para a realização dos testes sorológicos foram colhidas antes (dia zero), e nos dias 30, 60, 90, 120 e 150 após o início do experimento. Utilizou-se a técnica de ELISA Indireto para quantificação dos anticorpos antitoxina épsilon do C. perfringens tipo D. De maneira geral ocorreu um aumento nos valores médios do título de anticorpos séricos dos caprinos no dia 60 em resposta às duas doses de vacina recebidas nos dias zero e 30, sendo que o maior número de animais considerados protegidos também foi detectado neste dia. Apenas cinco caprinos jovens do Grupo 1 e um do Grupo 3 permaneceram com títulos de anticorpos considerados protetores até o dia 150. Diante dos resultados obtidos, concluiu-se que as vacinas avaliadas apresentaram baixa capacidade de estimular uma resposta imune protetora nos caprinos avaliados.

We evaluated the serological response of five commercial polyvalent vaccines containing epsilon toxoid of Clostridium perfringens type D. For this, 84 young goats were randomly divided into six groups, with 14 animals in each group. The goats in the Control Group were not vaccinated, while goats of Groups 1 to 5 received two vaccine shots four weeks apart. The first shot was administered when the goats were 45 (± 3) days old and the second at 75 (± 3). Blood samples for serological tests were collected on days zero, and 30, 60, 90, 120 and 150 after the start of the experiment. The Indirect ELISA technique was used to quantify the epsilon antitoxin antibodies for Clostridium perfringens type D. In general, the mean serum antibody titers of goats on day 60 increased as a response to the two vaccine shots received on days zero and 30. The largest number of animals considered protected was also detected on day 60, in response to the two vaccine shots. Only five animals from Group 1 and one goat from Group 3 displayed antibody titers that are considered protective up to 150 days after vaccination. Based on these results, we concluded that the evaluated vaccines showed poor ability of stimulate a protective immune response in the assessed goats.