Ocimum gratissimum essential oil improved the health, innate immunity and resistance to Aeromonas hydrophila infection in Pseudoplatystoma reticulatum / Óleo essencial de Ocimum gratissinum melhorou a saúde, imunidade inata e resistência à infecção por Aeromonas hydrophila em Pseudoplatystoma reticulatum

The essential oil of alfavaca (Ocimum gratissimum) contains important compounds, such as 1.8-cineol and eugenol. This study evaluated the effects of diets containing alfavaca essential oil on the zootechnical performance, plasma glucose, leukocyte respiratory activity, haematology, and intestinal histomorphometry in "cachara" (Pseudoplatystoma reticulatum) challenged with Aeromonas hydrophila. A total of 300 juvenile fish, with an average total length of 14.98 ± 0.28 cm and average weight of 18.84 ± 1.22 g, distributed in 20 tanks of 80 L, were fed twice a day with a diet containing essential oil at 0.5, 1.0, or 1.5% or without its inclusion in five replicates. After 45 days, blood collection and mid-intestinal bowel were sampled, before a challenge with Aeromonas hydrophila was performed. The fish supplemented with 1.0% of essential oil presented better weight gain, mean corpuscular volume, concentration of thrombotic and neutrophils, respiratory activity of leukocytes, and height of villi (p < 0.05) when compared to other groups. The cumulative mortality response was lower for fish fed 1.5% essential oil of alfavaca diets. Thus, the use of alfavaca essential oil is recommended in the diet of cachara catfish (P. reticulatum) at the level of up to 1.0% for 45 days for improvements in the zootechnical, haematological, and intestinal histomorphometric parameters.(AU)

O óleo essencial de alfavaca (Ocimum gratissimum) contém componentes importantes, como por exemplo o 1.8-cineol e o eugenol. Este estudo avaliou os efeitos de dietas contendo óleo essencial de alfavaca sobre o desempenho zootécnico, glicose plasmática, atividade respiratória leucocitária, hematologia e histomorfometria intestinal em cachara (Pseudoplatystoma reticulatum) desafiado com Aeromonas hydrophila. Um total de 300 peixes juvenis, com comprimento total médio de 14,98 ± 0,28 cm e peso médio de 18,84 ± 1,22 g, distribuídos em 20 tanques de 80 L, alimentados duas vezes ao dia com dieta contendo o óleo essencial a 0,5, 1,0 ou 1,5 % ou sem inclusão de óleo em cinco repetições. Após 45 dias, foi realizada a biometria final, coleta de sangue, amostra do intestino médio e desafio com Aeromonas hydrophila. Após o período experimental, a dieta suplementada com 1,0% do óleo essencial apresentou melhor ganho de peso, volume corpuscular médio, concentração de trombóticos e neutrófilos, atividade respiratória de leucócitos e altura de vilosidades (p < 0,05) quando comparada aos demais grupos. A resposta de mortalidade cumulativa foi menor para peixes alimentados com dietas com o óleo essencial de alfavaca a 1,5%. Assim, o uso de óleo essencial de alfavaca é recomendado na dieta do bagre cachara (P. reticulatum) no nível de até 1,0% por 45 dias para melhorias nos parâmetros zootécnicos, hematológicos e histomorfométricos intestinais.(AU)

Dietary mannan-oligosaccharide increases reactive oxigen species production but decreases serum lysozyme in high levels of inclusion for Nile tilapia / Inclusão de mananoligosacarídeo (MOS) na dieta aumenta produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) mas diminui a lisozima sérica de tilápias do Nilo

In the present experiment, the effects of mannan-oligosaccharide (MOS) on health and growth of Nile tilapia juveniles were investigated. In addition to the control treatment (without MOS),three levels of MOS were included in Nile tilapia diets (1, 8, and 15 g kg−1), and hematology, reactive oxygen species (ROS) production, lysozyme and productive parameters were analyzed. Fish blood was sampled at day zero (basal sample) and after 60 days of trial, and the productive parameters were evaluated at the end of the experiment. MOS feeding decreased the feed consumption (p = 0.0299) in fish fed with 1 and 8 g kg-1, but without any alteration in weight gain (WG) and feed conversion ratio (FCR). No changes were observed in the hematology due to MOS feeding after 60 days. However, the prebiotic caused changes in the innate immunity of fish, giving rise to ROS production in fish fed with 1 g kg-1 (p<0.0001) and decreasing the serum lysozyme activity of fish fed with 15 g kg-1 (p<0.0001). In conclusion, the authors recommend the inclusion of 1 g kg-1 for Nile tilapia juveniles feeding due to the positive effect in innate immune system.

No presente experimento, os efeitos do mananoligossacarídeo (MOS) na saúde e no crescimento de tilápias do Nilo foram investigados. Além do tratamento controle (sem adição de MOS), três níveis de MOS foram adicionados na dieta de tilápias do Nilo (1, 8 e 15 g kg-1). Foram analisadas a hematologia, a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), a lisozima e parâmetros produtivos. Os peixes tiveram o sangue colhido no dia zero (amostragem basal) e depois de 60 dias de experimento, juntamente com a avaliação dos parâmetros produtivos. A alimentação com MOS diminuiu de forma significativa o consumo (p = 0.0299) em peixes alimentados com 1 e 8 g kg-1, mas sem quaisquer alterações sobre o ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA). Não foram observadas mudanças nos parâmetros hematológicos devido à alimentação com MOS. No entanto, o prebiótico alterou sua resposta imune, aumentando a produção de EROs nos animais alimentados com 1 g kg-1 (p<0,0001) e diminuindo a atividade de lisozima sérica em peixes alimentados com 15 g kg-1 (p<0,0001). Em conclusão, os autores recomendam a inclusão de 1 g kg-1 de MOS na dieta para tilápias do Nilo juvenis devido ao efeito positivo sobre o sistema imune.

Dietary mannan-oligosaccharide increases reactive oxigen species production but decreases serum lysozyme in high levels of inclusion for Nile tilapia / Inclusão de mananoligosacarídeo (MOS) na dieta aumenta produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) mas diminui a lisozima sérica de tilápias do Nilo

In the present experiment, the effects of mannan-oligosaccharide (MOS) on health and growth of Nile tilapia juveniles were investigated. In addition to the control treatment (without MOS),three levels of MOS were included in Nile tilapia diets (1, 8, and 15 g kg−1), and hematology, reactive oxygen species (ROS) production, lysozyme and productive parameters were analyzed. Fish blood was sampled at day zero (basal sample) and after 60 days of trial, and the productive parameters were evaluated at the end of the experiment. MOS feeding decreased the feed consumption (p = 0.0299) in fish fed with 1 and 8 g kg-1, but without any alteration in weight gain (WG) and feed conversion ratio (FCR). No changes were observed in the hematology due to MOS feeding after 60 days. However, the prebiotic caused changes in the innate immunity of fish, giving rise to ROS production in fish fed with 1 g kg-1 (p<0.0001) and decreasing the serum lysozyme activity of fish fed with 15 g kg-1 (p<0.0001). In conclusion, the authors recommend the inclusion of 1 g kg-1 for Nile tilapia juveniles feeding due to the positive effect in innate immune system.(AU)

No presente experimento, os efeitos do mananoligossacarídeo (MOS) na saúde e no crescimento de tilápias do Nilo foram investigados. Além do tratamento controle (sem adição de MOS), três níveis de MOS foram adicionados na dieta de tilápias do Nilo (1, 8 e 15 g kg-1). Foram analisadas a hematologia, a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), a lisozima e parâmetros produtivos. Os peixes tiveram o sangue colhido no dia zero (amostragem basal) e depois de 60 dias de experimento, juntamente com a avaliação dos parâmetros produtivos. A alimentação com MOS diminuiu de forma significativa o consumo (p = 0.0299) em peixes alimentados com 1 e 8 g kg-1, mas sem quaisquer alterações sobre o ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA). Não foram observadas mudanças nos parâmetros hematológicos devido à alimentação com MOS. No entanto, o prebiótico alterou sua resposta imune, aumentando a produção de EROs nos animais alimentados com 1 g kg-1 (p<0,0001) e diminuindo a atividade de lisozima sérica em peixes alimentados com 15 g kg-1 (p<0,0001). Em conclusão, os autores recomendam a inclusão de 1 g kg-1 de MOS na dieta para tilápias do Nilo juvenis devido ao efeito positivo sobre o sistema imune.(AU)

Association of Epistylis spp. (Ciliophora: Peritrichia) with parasitic crustaceans in farmed piava Megaleporinus obtusidens (Characiformes: Anostomidae) / Associação de Epistylis spp. (Ciliophora: Peritrichia) com crustáceos parasitas em piava Megaleporinus obtusidens de cultivo (Characiformes: Anostomidae)

Parasitic diseases have caused significant problems to global aquaculture production. These studies will further our knowledge of this complex problem and help implement adequate prevention measures and control strategies. The present study aimed to investigate the presence of parasites in Megaleporinus obtusidens and to describe the epidemiology and pathology of parasitic infections in these fish. Five moribund fish were sent for parasitological examination. The integument and gills were scrapped off with a glass slide, and samples were examined under a light microscope. Parasitic crustaceans found in these specimens were submitted for scanning electron microscopy and histological analyses. The crustaceans Dolops carvalhoi and Lernaea cyprinacea and the Epistylis spp. were present in all fish examined. Epistylis spp. were also seen on the entire surface of the crustacean integument. Microscopic lesions observed in the parasitized gills included hyperplasia and hypertrophy of the lamellar epithelium, an inflammatory infiltrate, telangiectasia, foci of hemorrhage and necrosis, fusion of the secondary lamellae, and detachment of the lamellar epithelium. Crustacean parasites are important mechanical vectors of Epistylis infection and disseminate the disease in fish farming operations. Epistylis spp. infection affects the health of fish and has significant ecological and economical impact on aquaculture.(AU)

Doenças parasitárias causam problemas significativos a produção mundial de peixes. Esse estudo aprofundará nosso conhecimento neste complexo problema e ajudará implementar estratégias de prevenção e controle. O objetivo deste trabalho foi analisar os parasitas encontrados em Megaleporinus obtusidens de piscicultura extensiva e descrever as relações epidemiológicas e patológicas entre eles. Cinco peixes moribundos foram enviados para análise parasitológica. O tegumento e as brânquias foram raspados com lâminas de vidro e examinados em microscópio óptico. Os crustáceos parasitas foram processados para análises histologicas e de microscopia eletrônica de varredura. Todos os peixes analisados foram infestados pelos crustáceos Dolops carvalhoi, Lernaea cyprinacea e pelo Epistylis spp. Epistylis spp. foram também encontrados na superfície de todo tegumento dos crustáceos parasitas. As brânquias parasitadas apresentaram hiperplasia e hipertrofia do epitélio lamelar, infiltrado inflamatório, telangectasia, focos hemorrágicos e necróticos, extensas áreas com fusão de lamelas secundárias e desprendimento de epitélio lamelar. Os crustáceos parasitas são vetores mecânicos importantes da epistilíase, disseminando o microorganismo nas criações de peixes. A infestação por Epistylis spp. afeta a saúde dos peixes e tem impacto ecológico e econômico significativo na aquacultura.(AU)

Respostas fisiológicas da tilápia-do-nilo e variáveis limnológicas após decomposição de macrófitas utilizando herbicida / Physiological responses of nile tilapia and water parameters after decomposition of macrophyte using herbicide

As macrófitas são importantes na biocenose aquática, porém, em certas condições, sua população aumenta, tornando-se um problema, como é o caso de Egeria densa. Para controle dessas plantas, o CONAMA dispôs sobre critérios para autorização de uso de produtos químicos, porém estudos de viabilidade e segurança de uso devem ser realizados. Assim, o presente estudo avaliou o efeito da decomposição de Egeria densa morta pelo herbicida diquat sobre parâmetros limnológicos e respostas fisiológicas da tilápia-do-nilo. Para tanto, 176 exemplares de tilápia foram distribuídos em 16 tanques e submetidos a quatro tratamentos (tilápias sem macrófita; tilápias com macrófita; tilápias+macrófitas mortas por diquat; e tilápias+plantas mortas por congelamento). Os valores de pH, temperatura, oxigênio dissolvido, alcalinidade e condutividade não variaram entre os tratamentos (p<0,01). No entanto foi observado aumento dos valores de nitrogênio amoniacal e fósforo total e redução do nitrito nos tratamentos com macrófita morta pelo herbicida. Concentrações de clorofila-a não diferiram entre tratamentos, porém, o valor de feofitina-a aumentou na água com plantas mortas por congelamento. Após 21 dias de exposição ao herbicida, não se verificaram diferenças nos valores de glicemia, cortisol, leucócitos, eritrócitos, hemoglobina, índices hepato e esplenossomático nos peixes, concluindo-se assim que a exposição crônica a macrófitas em decomposição mortas pelo diquat não alterou o padrão fisiológico das tilápias.(AU)

Macrophytes are important for aquatic biocenosis, however under certain conditions it´s population can raise becoming a problem in reservoirs such as the Egeria densa. To control these plants CONAMA discuss for the use of chemicals, but feasibility and safety studies should be conducted to allow the use for such purpose. Thus the present study evaluated the effects of decomposition Egeria densa killed by the herbicide diquat on water quality variables and physiological responses of Nile tilapia. Thus, 176 tilapia was distributed in 16 tanks and submitted to four treatments (tilapia without macrophyte; tilapia and macrophyte; tilapia and macrophytes died by diquat and macrophytes died by freezing). The values of pH, temperature, dissolved oxygen, alkalinity and conductivity did not differ between treatments. However, it observed an increase in total ammonia and phosphorus and reduction of nitrite concentrations in treatment with macrophyte killed by the herbicide. Chlorophyll-a concentration did not differ between treatments, however, phaeophytin-a increased in water submitted to plants died by freezing. After 21 days of experiment, no differences were observed in blood glucose, cortisol, leukocytes, erythrocytes and hemoglobin. Thus, tilapia does not alter their physiological patterns after chronic exposure to decomposing macrophytes killed by diquat.(AU)

Respostas fisiológicas da tilápia-do-nilo e variáveis limnológicas após decomposição de macrófitas utilizando herbicida / Physiological responses of nile tilapia and water parameters after decomposition of macrophyte using herbicide

As macrófitas são importantes na biocenose aquática, porém, em certas condições, sua população aumenta, tornando-se um problema, como é o caso de Egeria densa. Para controle dessas plantas, o CONAMA dispôs sobre critérios para autorização de uso de produtos químicos, porém estudos de viabilidade e segurança de uso devem ser realizados. Assim, o presente estudo avaliou o efeito da decomposição de Egeria densa morta pelo herbicida diquat sobre parâmetros limnológicos e respostas fisiológicas da tilápia-do-nilo. Para tanto, 176 exemplares de tilápia foram distribuídos em 16 tanques e submetidos a quatro tratamentos (tilápias sem macrófita; tilápias com macrófita; tilápias+macrófitas mortas por diquat; e tilápias+plantas mortas por congelamento). Os valores de pH, temperatura, oxigênio dissolvido, alcalinidade e condutividade não variaram entre os tratamentos (p<0,01). No entanto foi observado aumento dos valores de nitrogênio amoniacal e fósforo total e redução do nitrito nos tratamentos com macrófita morta pelo herbicida. Concentrações de clorofila-a não diferiram entre tratamentos, porém, o valor de feofitina-a aumentou na água com plantas mortas por congelamento. Após 21 dias de exposição ao herbicida, não se verificaram diferenças nos valores de glicemia, cortisol, leucócitos, eritrócitos, hemoglobina, índices hepato e esplenossomático nos peixes, concluindo-se assim que a exposição crônica a macrófitas em decomposição mortas pelo diquat não alterou o padrão fisiológico das tilápias.

Macrophytes are important for aquatic biocenosis, however under certain conditions it´s population can raise becoming a problem in reservoirs such as the Egeria densa. To control these plants CONAMA discuss for the use of chemicals, but feasibility and safety studies should be conducted to allow the use for such purpose. Thus the present study evaluated the effects of decomposition Egeria densa killed by the herbicide diquat on water quality variables and physiological responses of Nile tilapia. Thus, 176 tilapia was distributed in 16 tanks and submitted to four treatments (tilapia without macrophyte; tilapia and macrophyte; tilapia and macrophytes died by diquat and macrophytes died by freezing). The values of pH, temperature, dissolved oxygen, alkalinity and conductivity did not differ between treatments. However, it observed an increase in total ammonia and phosphorus and reduction of nitrite concentrations in treatment with macrophyte killed by the herbicide. Chlorophyll-a concentration did not differ between treatments, however, phaeophytin-a increased in water submitted to plants died by freezing. After 21 days of experiment, no differences were observed in blood glucose, cortisol, leukocytes, erythrocytes and hemoglobin. Thus, tilapia does not alter their physiological patterns after chronic exposure to decomposing macrophytes killed by diquat.

Na2EDTA anticoagulant impaired blood samples from the teleost Piaractus mesopotamicus / Anticoagulante Na2EDTA danifica amostras de sangue do teleósteo Piaractus mesopotamicus

The present study aimed to evaluate the effects of Na heparin and Na2EDTA on blood of Piaractus mesopotamicus (360.7±42.4g, 26.4±1.0cm). Twenty fishes were sampled in two experiment trials, ten for erythrocyte fragility analysis and ten for hematologic and plasma biochemical study. The blood collected by venous-caudal puncture was fractioned and stored in anticoagulants solution: Na2EDTA 10%, Na2EDTA 3%, Na heparin 5000 IU and Na heparin 100 IU. Plasmatic levels of calcium presented in the Na2EDTA stored samples were about 80% lower than both heparin groups. Blood samples of P. mesopotamicus stored with Na2EDTA demonstrated increase in the hematocrit and MCV, and decrease in MCHC. The dose-response effect was observed in this study. The results are reinforced by the higher levels of plasmatic protein and hemolysis presented in the Na2EDTA 10% stored blood, confirming the deleterious effect of this anticoagulant treatment on the quality of blood samples. Na2EDTA is not indicated to store P. mesopotamicus blood samples, but sodium heparin at 100 IU is the most recommended anticoagulant, since this treatment presented the lower rate of alterations in the stored blood.(AU)

O presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da heparina sódica e Na2EDTA no sangue de Piaractus mesopotamicus (360,7±42,4g, 26,4±1,0cm). Foram amostrados vinte peixes em dois ensaios experimentais, sendo dez peixes utilizados para análise da fragilidade dos eritrócitos e dez peixes para análise dos parâmetros hematológicos e estudo bioquímico do plasma. O sangue coletado por punção veno-caudal foi aliquotado e armazenado em diferentes soluções anticoagulantes: Na2EDTA 10%, Na2EDTA 3%, heparina sódica 5.000 UI e heparina sódica 100 UI. Níveis plasmáticos de cálcio apresentados nas amostras armazenados em Na2EDTA diminuíram cerca de 80% em relação aos dois grupos armazenados com heparina. Amostras de sangue de pacus armazenados com Na2EDTA demonstraram aumento do hematócrito e VCM, e diminuição na CHCM. O efeito dose-resposta foi observado neste estudo. Estes resultados são reforçados pelos níveis mais elevados de proteína plasmática e hemólise apresentado no sangue armazenado com Na2EDTA 10%, o que confirma o efeito deletério desse tratamento anticoagulante na qualidade de amostras de sangue. Na2EDTA não é indicada para armazenar amostras de sangue de P. mesopotamicus, e heparina sódica a 100 UI é o anticoagulante mais recomendado, uma vez que este tratamento apresentou a menor taxa de alterações no sangue armazenado.(AU)

Isolation, Characterization and Pathology of Citrobacter freundii Infection in Native Brazilian Catfish Pseudoplatystoma

Bacterial diseases are responsible for important economic losses in aquaculture over the world, and South American catfishes are susceptible to Gram negative bacteria causative of haemorrhagic septicemia. This study registers the biochemical characteristics, antimicrobial resistance and pathological effects of Citrobacter freundii infection in cachara Pseudoplatystoma reticulatum. Moribund juvenile fish with non-specific clinical signs were used for bacteriological and parasitological diagnosis. No parasitic infections were found in examined fish, but two isolate obtained from the kidney and encephalon was characterized by Gram negative bacilli, catalase positive and oxidase negative. Isolates were submitted to biochemical identification by a commercial API 20E. Susceptibility analysis to 15 drugs was performed by the diffusion method in Agar Muller Hinton discs. Experimental assay was also made to confirm the Kock postulate. The isolates showed biochemical profile corresponding to Citrobacter freundii. A multiresistance at 66.7% of the antibiotic molecules tested was observed. In experimental infection haemorrhagic septicaemia, severe enteritis and important lesions in kidney and gills are described.

Isolation, Characterization and Pathology of Citrobacter freundii Infection in Native Brazilian Catfish Pseudoplatystoma

Bacterial diseases are responsible for important economic losses in aquaculture over the world, and South American catfishes are susceptible to Gram negative bacteria causative of haemorrhagic septicemia. This study registers the biochemical characteristics, antimicrobial resistance and pathological effects of Citrobacter freundii infection in cachara Pseudoplatystoma reticulatum. Moribund juvenile fish with non-specific clinical signs were used for bacteriological and parasitological diagnosis. No parasitic infections were found in examined fish, but two isolate obtained from the kidney and encephalon was characterized by Gram negative bacilli, catalase positive and oxidase negative. Isolates were submitted to biochemical identification by a commercial API 20E. Susceptibility analysis to 15 drugs was performed by the diffusion method in Agar Muller Hinton discs. Experimental assay was also made to confirm the Kock postulate. The isolates showed biochemical profile corresponding to Citrobacter freundii. A multiresistance at 66.7% of the antibiotic molecules tested was observed. In experimental infection haemorrhagic septicaemia, severe enteritis and important lesions in kidney and gills are described.(AU)

Composition of Extracellular Polymeric Substances (EPS) produced by Flavobacterium columnare isolated from tropical fish in Brazil

Thirty nine isolates of Flavobacterium columnare from Brazilian fish farms had their carbohydrate composition of EPS evaluated by high efficiency liquid chromatography, using the phenol-sulfuric acid method of EPS. The occurrence of capsules on F. columnare cells was not directly related to biofilm formation, and the predominant monosaccharide is glucose.(AU)

Heparina e K3EDTA como anticoagulantes para tambaqui (Colossoma macropomum Cuvier, 1816) / Heparin and K3EDTA as anticoagulants for tambaqui (Colossoma macropomum Cuvier, 1816)

Este estudo avaliou a eficácia da heparina sódica e do EDTA tripotássico como anticoagulantes e seus efeitos sobre os parâmetros hematológicos de tambaqui (Colossoma macropomum). Foram utilizados dez indivíduos de tambaqui com médias de 384,9 ± 85,71 g de peso e 27,90 ± 2,10 cm de comprimento total para avaliação da heparina 5.000 UI e 100 UI, bem como do K3EDTA 10 por cento. Foram analisados a inibição da coagulação por 10 h, eritrograma e teste de fragilidade osmótica dos eritrócitos. Os resultados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P < 0,05). Heparina 5000 UI, heparina 100 UI e K3EDTA 10 por cento foram eficazes na prevenção da coagulação por mais de 10 h, no entanto o EDTA tripotássico causou hemólise desde os primeiros momentos. No eritrograma não foi observada diferença (P > 0,05) na contagem de eritrócitos, hematócrito, taxa de hemoglobina e CHCM, no entanto, houve aumento do VCM (P < 0,05) nas amostras acondicionados com K3EDTA 10 por cento. Este anticoagulante causou incremento (P < 0,01) na fragilidade osmótica dos eritrócitos quando comparado com a heparina pura, heparina diluída, e grupo controle. A utilização da heparina como anticoagulante é mais apropriada para tambaqui (Colossoma macropomum), visto que foi eficiente na prevenção da coagulação por mais de 10 h, sem ocasionar hemólise, ou alterações nos parâmetros hematológicos e na fragilidade osmótica dos eritrócitos.(AU)

The efficacy of sodium heparin and tripotassium EDTA as anticoagulant and their effect on the hematological parameters of tambaqui (Colossoma macropomum) were evaluated in this study. Ten fish weighing 384.9 ± 85.71 g and measuring 27.90 ± 2.10 cm were used for heparin 5.000 IU, heparin 100 IU and K3EDTA 10 percent evaluation. Clotting inhibition after 10 h, erythrogram and osmotic fragility of erythrocytes were observed. The results were submitted to variance analysis and means compared by Tukey test (P < 0.05). Heparin 5.000 IU, heparin 100 IU and K3EDTA 10 percent were effective in preventing coagulation for more than 10 h. However, tripotassium EDTA caused hemolysis since first moments. In erythrogram there was no difference (P > 0.05) in erythrocyte count, hematocrit, hemoglobin and MCHC. On the other hand, an increase in MCV (P < 0.05) in samples kept with K3EDTA10 percent was observed. This anticoagulant provoked a significant increase (P < 0.01) in the osmotic fragility of erythrocytes when compared to pure heparin, diluted heparin and the control group. Heparin as an anticoagulant is more appropriate for tambaqui since it was effective in preventing coagulation for more than 10 h, without causing hemolysis, changes on hematological parameters or osmotic fragility of erythrocytes.(AU)

Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): new parasite records for two freshwater fish species farmed in Brazil / Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): novo registro de parasito para duas espécies de peixes de água doce cultivadas no Brasil

Family Trichodinidae comprises ciliate protozoa distributed worldwide; they are considered some of the main parasitological agents infecting cultivated fish. However, the trichodinidae parasitizing important fish species cultured in Brazil are unknown, and more taxonomic studies on this group of parasites are required. This research morphologically characterizes Trichodina colisae Asmat & Sultana, (2005) of pacu (Piaractus mesopotamicus) and patinga hybrid (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivated in the central and southeast regions of the country. Fresh assemblies were made from mucus scraped from the skin, fins and gills, fixed with methanol and, subsequently, impregnated with silver nitrate and stained with Giemsa for assessment under light microscopy. This research reports not only the second occurrence of T. colisae in the world, but also its first occurrence in South America.(AU)

Tricodinídeos são protozoários ciliados móveis com ampla distribuição mundial; são considerados um dos agentes parasitários que mais acometem peixes cultivados. No Brasil, a maioria dos tricodinídeos que parasitam importantes espécies de peixes cultivados são desconhecidos, o que requer mais estudos taxonômicos com esse grupo de parasitos. Este estudo caracteriza morfologicamente Trichodina colisae Asmat & Sultana, 2005 de pacu (Piaractus mesopotamicus) e do híbrido patinga (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivados, respectivamente, no Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Foram feitas montagens a fresco do raspado de muco da pele, nadadeiras e brânquias, fixados com metanol e, posteriormente, impregnados com nitrato de prata e coradas com Giemsa para avaliação em microscopia óptica. O presente estudo relata não só a segunda ocorrência de T. colisae no mundo, mas também a primeira ocorrência na América do Sul.(AU)

Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): new parasite records for two freshwater fish species farmed in Brazil

Family Trichodinidae comprises ciliate protozoa distributed worldwide; they are considered some of the main parasitological agents infecting cultivated fish. However, the trichodinidae parasitizing important fish species cultured in Brazil are unknown, and more taxonomic studies on this group of parasites are required. This research morphologically characterizes Trichodina colisae Asmat & Sultana, (2005) of pacu (Piaractus mesopotamicus) and patinga hybrid (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivated in the central and southeast regions of the country. Fresh assemblies were made from mucus scraped from the skin, fins and gills, fixed with methanol and, subsequently, impregnated with silver nitrate and stained with Giemsa for assessment under light microscopy. This research reports not only the second occurrence of T. colisae in the world, but also its first occurrence in South America.

Tricodinídeos são protozoários ciliados móveis com ampla distribuição mundial; são considerados um dos agentes parasitários que mais acometem peixes cultivados. No Brasil, a maioria dos tricodinídeos que parasitam importantes espécies de peixes cultivados são desconhecidos, o que requer mais estudos taxonômicos com esse grupo de parasitos. Este estudo caracteriza morfologicamente Trichodina colisae Asmat & Sultana, 2005 de pacu (Piaractus mesopotamicus) e do híbrido patinga (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivados, respectivamente, no Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Foram feitas montagens a fresco do raspado de muco da pele, nadadeiras e brânquias, fixados com metanol e, posteriormente, impregnados com nitrato de prata e coradas com Giemsa para avaliação em microscopia óptica. O presente estudo relata não só a segunda ocorrência de T. colisae no mundo, mas também a primeira ocorrência na América do Sul.

Trichodina colisae (Ciliophora: Trichodinidae): new parasite records for two freshwater fish species farmed in Brazil

Family Trichodinidae comprises ciliate protozoa distributed worldwide; they are considered some of the main parasitological agents infecting cultivated fish. However, the trichodinidae parasitizing important fish species cultured in Brazil are unknown, and more taxonomic studies on this group of parasites are required. This research morphologically characterizes Trichodina colisae Asmat & Sultana, (2005) of pacu (Piaractus mesopotamicus) and patinga hybrid (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivated in the central and southeast regions of the country. Fresh assemblies were made from mucus scraped from the skin, fins and gills, fixed with methanol and, subsequently, impregnated with silver nitrate and stained with Giemsa for assessment under light microscopy. This research reports not only the second occurrence of T. colisae in the world, but also its first occurrence in South America.

Tricodinídeos são protozoários ciliados móveis com ampla distribuição mundial; são considerados um dos agentes parasitários que mais acometem peixes cultivados. No Brasil, a maioria dos tricodinídeos que parasitam importantes espécies de peixes cultivados são desconhecidos, o que requer mais estudos taxonômicos com esse grupo de parasitos. Este estudo caracteriza morfologicamente Trichodina colisae Asmat & Sultana, 2005 de pacu (Piaractus mesopotamicus) e do híbrido patinga (P. mesopotamicus × P. brachypomus) cultivados, respectivamente, no Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Foram feitas montagens a fresco do raspado de muco da pele, nadadeiras e brânquias, fixados com metanol e, posteriormente, impregnados com nitrato de prata e coradas com Giemsa para avaliação em microscopia óptica. O presente estudo relata não só a segunda ocorrência de T. colisae no mundo, mas também a primeira ocorrência na América do Sul.

Performance and hematology of pacu fed diets supplemented with vitamins C and/or E

Pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887) is a valued Brazilian fish species for aquaculture. This is highly susceptible to disease, and feed supplementations for pacu can be a very important strategy to prevent disease incidence in fish farms. The aim of this study was to evaluate a strategic supplementation for pacu. Juvenile pacu (10.5 ± 1.2 g) were fed diets containing three levels of vitamins C and/or E (0, 250, and 500 mg vitamin kg-1 diet). Fish were fed diets without supplementation for two months prior to the experiment. After that period, experimental feeding was initiated for two months. Growth and hematological evaluations were made on the thirtieth and sixtieth days of feeding. Pacu fed diet without supplementation of vitamins C and E during 120 days did not show clear typical signs of deficiency. Fish fed diet vitamins C and E free increased feed intake, but no improvement on growth performance was detected. Vitamin E proved essential for erythrocyte protection, so that the higher the level of this vitamin in diet, the smaller the number of erythroblasts. Supplementation with 500 mg of vitamin C and 250 mg of vitamin E for 60 days increased the production of monocytes, thrombocytes and special granulocytic cells in pacu.

O pacu (Piaractus mesomotamicus Holmberg 1887) é uma espécie altamente valiosa para a aqüicultura brasileira. Entretanto, trata-se de uma das espécies mais susceptíveis a doenças. Por isso, a suplementação alimentar para o pacu pode representar importante estratégia de prevenção da incidência das enfermidades em pisciculturas. Pacus (10,5 ± 1,2 g) foram alimentados com dietas contendo três níveis de vitamina C e/ou E (0, 250 e 500 mg vitamina kg-1 de dieta). Os peixes foram alimentados com dieta não purificada sem suplementação durante os primeiros 60 dias para reduzir as reservas teciduais das vitaminas. Após este período, os peixes foram alimentados com as dietas testadas durante 60 dias. As avaliações de crescimento e hematologia foram realizadas no 30º e 60º dias. Pacus alimentados com dieta sem suplementação com as vitaminas C e E durante 120 dias não apresentaram sinais claros típicos de deficiência. Os peixes que receberam a dieta deficiente em vitamina C e E apresentaram maior consumo de ração, porém sem melhora no desempenho produtivo. A vitamina E mostrou-se essencial para a proteção dos eritrócitos, sendo que quanto maior o nível desta vitamina na dieta, menor o número de eritroblastos. A suplementação com 500 mg de vitamina C e 250 mg de vitamina E durante 60 dias aumentou a produção de monócitos, trombócitos e células granulocíticas especiais em pacu.

First record of Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida) in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) in the Pantanal wetland, Mato Grosso do Sul State, Brazil / Primeiro registro de Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida) em tuvira(Gymnotus aff. inaequilabiatus) no Pantanal, Mato Grosso do Sul, Brasil

The blood infection by Trypanosoma sp. in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) from the Pantanal wetland was reported in this study. Ten fish from the Paraguay River in the Pantanal were evaluated for the presence of hemoflagellates. Trypomastigotes of Trypanosoma sp. were observed in blood smears from three fish (30% prevalence) and some forms were seen to be undergoing division. Using the diagnostic methods of fresh examination and blood centrifugation in hematocrit capillary tubes, the prevalence rate was 80%. This is the first report of Trypanosoma sp. in tuvira in Brazil. (AU)

O objetivo do presente estudo foi reportar a infecção por Trypanosoma sp. em tuviras (Gymnotus aff. inaequilabiatus) oriundas do Pantanal Sul-mato-grossense, Brasil. Dez peixes provenientes do rio Paraguai, Pantanal Sul-mato-grossense, foram avaliados quanto à presença de hemoflagelados. Tripomastigotas de Trypanosoma sp. foram observados nas extensões sanguíneas de três peixes (30% de prevalência), e algumas formas encontravam-se em divisão. Por meio do exame a fresco e da centrifugação do sangue em capilar de hematócrito como métodos para diagnóstico, a taxa de prevalência foi de 80%. Esse é o primeiro relato de Trypanosoma sp. em tuviras no Brasil. (AU)

First record of Trypanosoma sp. (Protozoa: Kinetoplastida) in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) in the Pantanal wetland, Mato Grosso do Sul State, Brazil

The blood infection by Trypanosoma sp. in tuvira (Gymnotus aff. inaequilabiatus) from the Pantanal wetland was reported in this study. Ten fish from the Paraguay River in the Pantanal were evaluated for the presence of hemoflagellates. Trypomastigotes of Trypanosoma sp. were observed in blood smears from three fish (30% prevalence) and some forms were seen to be undergoing division. Using the diagnostic methods of fresh examination and blood centrifugation in hematocrit capillary tubes, the prevalence rate was 80%. This is the first report of Trypanosoma sp. in tuvira in Brazil.

O objetivo do presente estudo foi reportar a infecção por Trypanosoma sp. em tuviras (Gymnotus aff. inaequilabiatus) oriundas do Pantanal Sul-mato-grossense, Brasil. Dez peixes provenientes do rio Paraguai, Pantanal Sul-mato-grossense, foram avaliados quanto à presença de hemoflagelados. Tripomastigotas de Trypanosoma sp. foram observados nas extensões sanguíneas de três peixes (30% de prevalência), e algumas formas encontravam-se em divisão. Por meio do exame a fresco e da centrifugação do sangue em capilar de hematócrito como métodos para diagnóstico, a taxa de prevalência foi de 80%. Esse é o primeiro relato de Trypanosoma sp. em tuviras no Brasil.

Performance and hematology of pacu fed diets supplemented with vitamins C and/or E

Pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887) is a valued Brazilian fish species for aquaculture. This is highly susceptible to disease, and feed supplementations for pacu can be a very important strategy to prevent disease incidence in fish farms. The aim of this study was to evaluate a strategic supplementation for pacu. Juvenile pacu (10.5 ± 1.2 g) were fed diets containing three levels of vitamins C and/or E (0, 250, and 500 mg vitamin kg-1 diet). Fish were fed diets without supplementation for two months prior to the experiment. After that period, experimental feeding was initiated for two months. Growth and hematological evaluations were made on the thirtieth and sixtieth days of feeding. Pacu fed diet without supplementation of vitamins C and E during 120 days did not show clear typical signs of deficiency. Fish fed diet vitamins C and E free increased feed intake, but no improvement on growth performance was detected. Vitamin E proved essential for erythrocyte protection, so that the higher the level of this vitamin in diet, the smaller the number of erythroblasts. Supplementation with 500 mg of vitamin C and 250 mg of vitamin E for 60 days increased the production of monocytes, thrombocytes and special granulocytic cells in pacu.

O pacu (Piaractus mesomotamicus Holmberg 1887) é uma espécie altamente valiosa para a aqüicultura brasileira. Entretanto, trata-se de uma das espécies mais susceptíveis a doenças. Por isso, a suplementação alimentar para o pacu pode representar importante estratégia de prevenção da incidência das enfermidades em pisciculturas. Pacus (10,5 ± 1,2 g) foram alimentados com dietas contendo três níveis de vitamina C e/ou E (0, 250 e 500 mg vitamina kg-1 de dieta). Os peixes foram alimentados com dieta não purificada sem suplementação durante os primeiros 60 dias para reduzir as reservas teciduais das vitaminas. Após este período, os peixes foram alimentados com as dietas testadas durante 60 dias. As avaliações de crescimento e hematologia foram realizadas no 30º e 60º dias. Pacus alimentados com dieta sem suplementação com as vitaminas C e E durante 120 dias não apresentaram sinais claros típicos de deficiência. Os peixes que receberam a dieta deficiente em vitamina C e E apresentaram maior consumo de ração, porém sem melhora no desempenho produtivo. A vitamina E mostrou-se essencial para a proteção dos eritrócitos, sendo que quanto maior o nível desta vitamina na dieta, menor o número de eritroblastos. A suplementação com 500 mg de vitamina C e 250 mg de vitamina E durante 60 dias aumentou a produção de monócitos, trombócitos e células granulocíticas especiais em pacu.

Molecular characterization of Flavobacterium columnare isolates from nile tilapia and piracanjuba by RAPD-PCR / Caracterização molecular de isolados de Flavobacterium columnare de tilapia do nilo e piracanjuba por meio de RAPD-PCR

Flavobacterium columnare is a cosmopolite bacteria and it is one of the main problem in Brazilian aquaculture, causing high mortalities index and economic damage. The main factors that contribute to columnaris disease are inadequate water quality, excess handling, high density of fish and temperature variations. For a successful epidemiological study and disease control, it is essential to differentiate F. columnare from other yellow pigmentation bacteria. The present study used molecular techniques to characterize, by RAPD-PCR, two strains of F. columnare isolated from Oreochromis niloticus and Brycon orbignyanus. Data were analyzed as binary (0 and 1) and a genetic similarity matrix was generated by Jaccard's coefficient. Cluster analysis was performed by the neighbor joining method. The RAPD-PCR technique confirmed to be a usefull tool to obtain genetic profiles from F. columnare isolates based on the oligonucleotides used and to verify genetic similarity.

Flavobacterium columnare é uma bactéria cosmopolita, agente etiológico da columnariose, considerada um dos maiores problemas na aquicultura brasileira, provocando elevadas taxas de mortalidade e grande prejuízo econômico. Qualidade de água inadequada, manejo zootécnico excessivo, alta densidade de estocagem e variações da temperatura da água são os principais fatores que contribuem para a ocorrência da columnariose. Para a realização de um estudo epidemiológico de sucesso e controle desta enfermidade, é essencial a distinção da F. columnare das demais bactérias de pigmentação amarelada. Para tanto, o objetivo do presente trabalho foi caracterizar molecularmente, por meio da técnica de RAPD-PCR, duas cepas de F. columnare isoladas de Oreochromis niloticus e Brycon orbignyanus. Os dados foram analisados como binários (0 e 1) e uma matriz de similaridade genética foi gerada pelo coeficiente de Jaccard. A análise de agrupamento foi realizada pelo método neighbor joining. A técnica de RAPD-PCR confirmou ser uma ferramenta importante para obtenção do perfil genético dos isolados de F. columnare a partir dos oligonucleotídeos utilizados e para verificação da similaridade genética.

Distúrbios morfológicos em leucócitos de exemplar de kinguio (Carassius auratus auratus Linnaeus, 1758) com septicemia hemorrágica bacteriana: relato de caso / Morphologic disorders in leukocytes of goldfish sample (Carassius auratus auratus Linnaeus, 1758) with bacterial hemorrhagic septicemia: case report

O presente estudo teve por objetivo relatar um caso sobre as alterações morfológicas em leucócitos de kinguio comsepticemia hemorrágica bacteriana. Um exemplar foi atendido no Laboratório de Patologia de Organismos Aquáticos doCAUNESP, Unesp de Jaboticabal, apresentando apatia, natação errática, anorexia e discreta perda de equilíbrio, buscandoconstantemente a superfície da água. Através de análise visual da superfície corpórea, foram observadas áreas de hemorragiapetequial na base das nadadeiras peitoral, pélvica e caudal, além da órbita bucal, periocular e anal e efusão celomática. Naextensão sanguínea foram observadas a presença de monócitos ativados, hiperativados, e fagócitos mononuclearesrealizando eritrofagocitose e leucofagocitose, neutrófilos com basofilia citoplasmática e com vacuolização citoplasmática,além de imunócitos e leucócitos imaturos com anisocitose e anisocariose. As alterações morfológicas descritas no presenteestudo revelaram parte da patogenia e resposta orgânica de kinguio com septicemia hemorrágica bacteriana. Dessa forma,as análises qualitativas das células sanguíneas devem ser também utilizadas como ferramenta complementar aos estudosdo estado geral da saúde de peixes em cultivo.

The morphological changes in leukocytes of goldfish with bacterial hemorrhagic septicemia were reported. One sample was served at the Laboratory of Pathology of Aquatic Organisms of CAUNESP, Unesp in Jaboticabal. The fish showed lethargy, erratic swimming and without force, slight loss of balance, trying constantly to the water surface. In the body inspection, areas of petechial hemorrhage at the base of the pectoral fins, pelvic fins and caudal fin were observed, beyond the periocular and oral orbitand anal. Blood smears presented hiperactivated monocytes, performing erythrophagocytosis and leukophagocytosis, the cytoplasm of neutrophils presented basophilia and vacuolization, beyond immunocytes, immature leukocytes with anisocytosis and anisokaryosis. The morphological changes described in this study revealed part of the pathogenesis and organic response of Kinguio with bacterial hemorrhagic septicemia. Then, the qualitative analysis of blood cells should also be used as a complementary tool to study the general health status of fish farmed(AU)