COLLECTION AND ANALYSIS OF SEMEN FROM THE COMMON MARMOSET (Callithrix jacchus) / COLHEITA E AVALIAÇÃO DO SÊMEN DE SAGUI-DE-TUFO-BRANCO (Callithrix jacchus)

y of different extenders on the semen from common marmoset to improve the quality of physical and morphological characteristics. Three adult specimens were used and nine ejaculates were collected from each one, using electroejaculation. To break up the seminal clot, nine variations of three different extenders were tested. TALP, Ca+2 free, with 0.5% tripsin, during 45 minutes at 37ºC, was the best extender, dissolving partially the semen clot. The electroejaculation is a viable semen collection method for common marmoset, obtaining success in all animals, but the semen quality was relatively poor.KEY WORDS: Callithrix jacchus, electroejaculation, primates, semen.

método de eletroejaculação na colheita de sêmen de saguis-de-tufo-branco (Callithrix jacchus) e realizar uma avaliação descritiva dos aspectos físicos e morfológicos do ejaculado. Foram utilizados três espécimes adultos e colhidas nove amostras de sêmen de cada animal, pela eletroejaculação. Para os testes de dissolução dos coágulos seminais, utilizaram-se nove variações de três tipos de meios. De todas as variações estudadas, o meio TALP, livre de íons Ca+2, acrescido de tripsina a 0,5%, durante 45 minutos, a 37º C, mostrou-se o mais eficiente na dissolução do coágulo, porém não foi capaz de dissolvê-lo completamente. O método de eletroejaculação para colheita de sêmen em C. jacchus mostrou-se viável, apresentando sucesso em todas as colheitas, porém a qualidade do sêmen apresentou-se baixa.PALAVRAS-CHAVES: Callithrix jacchus, eletroejaculação, primata, sêmen.

Clinical complications in nelore oocyte doners caused by vaginal ultrasound guided follicular aspiration / Complicações clínicas em vacas nelore doadoras de oócitos decorrentes da aspiração folicular transvaginal guiada por ultra-som

In the last few years the vaginal ultrasound guided follicular aspiration or OPU (ovum pick up) in bovine oocyte doners has become a very difunded technique. It has been used in females with highly zootechnical valuable. The complications of this technique, despite exceptional, assume great importance and might be of the veterinarian and owners knowledge. The purpose of this study is to describe the possible complications of the follicular aspiration considering the Veterinarian Hospital "Governador Laudo Natel" of the Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP-Jaboticabal 2003-2005 casuistic. In a total number of 16 animals was possible to observe peritonitis, absence of labor signals, offspring death and peritonitis, distocic delivery with premature fetus, genital lesions, presence of vaginal wall abnormal masses and ovarian adhesions.KEY WORDS: Clinical complications, follicular aspiratiorn, Nelore cow.

Nos últimos anos, a aspiração folicular transvaginal guiada pela ultra-sonografia ou OPU (ovum pick up), em fêmeas bovinas doadoras de oócitos, tem se tornado uma prática muito difundida e vem sendo utilizada na multiplicação de fêmeas de elevado valor zootécnico. As complicações dessa técnica, mesmo que de ocorrência excepcional, assumem grande importância e devem ser de conhecimento do veterinário e, também, do proprietário. O propósito deste trabalho é descrever as possíveis complicações da aspiração folicular, considerando a casuística do Hospital Veterinário Governador Laudo Natel, da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da UNESP, Jaboticabal, durante os anos de 2003 a 2005. Em um total de dezesseis animais recebidos, verificaram-se a presença de peritonite, a ausência de sinais de parto, morte fetal, parto distócico com feto prematuro, lesões de órgãos genitais, aumento de volume na parede da vagina e aderência ovariana.  PALAVRAS-CHAVES: Aspiração folicular, complicações clínicas, cava Nelore.

Isolation and ultrastructural characterization of preantral follicles in the Nelore breed cows (Bos taurus indicus) / Isolamento e caracterização ultraestrutural de folículos pré-antrais de vacas da raça Nelore (Bos taurus indicus)

Preantral follicles from 41 Nelore breed cows were described quantitative and ultrastructurally in the study. In the average, 35,539.20 preantral follicles were mechanically isolated (Tissue Copper) per animal. Follicles were processed for transmission electron microscopy. Primordial follicles presented an oocyte surrounded by a flattened granulosa cell layer, with some granulosa cells showing cuboidal shape. Other development stages were classified as primary follicles, with a granulosa cell layer around the oocyte and secondary stages, with oocyte surrounded by two or more cuboidal granulosa cell layer. Primordial follicles showed an evident oocyte, with the nucleus located at an eccentric cytoplasm position and a well-defined nucleolus, with condensed chromatin areas. Organelles were centered at the peri-nuclear area, showing mostly round shaped mitochondria. Follicles under development showed an increasing number of organelles and elongated mitochondria. Adherence zones, coated pits and endocitose vesicles maintained the oocyte-granulosa cell interfaces. The zona pellucida (ZP) appeared in primary follicles, showed small microvilos and many vesicles, which permeated into the ZP. Secondary follicles presented clusters of cortical granules associated to Golgi complexes. In conclusion, the mechanical method provide a sufficient amount of preantral follicles from Nelore breed c

Folículos pré-antrais de 41 vacas da raça Nelore foram quantitativa e ultraestruturalmente descritos neste estudo. Uma média de 35.539,20 folículos pré-antrais foram isolados mecanicamente ("Tissue Chopper") por animal. Os folículos foram processados para microscopia eletrônica de transmissão. Os folículos primordiais apresentaram um oócito rodeado por uma camada de células granulosas (CGs) achatadas, com algumas tendendo à forma cuboidal. As demais fases de desenvolvimento foram classificadas como folículos primários, com uma camada de CGs cuboidais, e secundários, com mais de duas camadas de CGs cuboidais. Os folículos primordiais apresentaram oócito evidente, com núcleo excêntrico e nucléolo bem definido, cercado por regiões de cromatina condensada. As organelas ao redor do núcleo eram, predominantemente, mitocôndrias arredondadas. Folículos em desenvolvimento apresentavam organelas mais dispersas e numerosas, com mitocôndrias alongadas. As comunicações entre o oócito e as CGs mantinham-se por zonas de aderência, "coated pits" e vesículas de endocitose. A zona pelúcida (ZP) começava a aparecer em folículos primários, mostrando microvilos pequenos e vesículas penetrando na ZP. Os folículos secundários apresentavam aglomerados de grânulos corticais em associação a complexos de Golgi. Concluímos que o método mecânico de isolamento fornece quantidades suficientes de folículos pr

Evaluation of flank strap effects on professional rodeo cattle / Avaliação técnico-científica da utilização do sedém em bovinos de rodeio

Twelve crossbred Zebu bulls that had used the flank strap for four years were studied in order to evaluated the effect of its use on the following aspects: (1) injuries in areas touched by the flank strap as evaluated by histopathology; (2) alterations in spermatogenesis; (3) sexual behavior related to courting and libido; (4) feeding behavior concerning food ingestion and rumination. Material was obtained from six animals: semen collected for andrological examination and skin samples obtained by biopsy. The other six animals were evaluated as to cardiac and respiratory rates before and after jumping, food intake, rumination and sexual behavior while still using the flank strap. Histopathological and andrological did not show any alteration that could be attributed to the flank strap use. Cardiac and respiratory rates were within the normal range for this species. No alterations were recorded for food intake, rumination or sexual willingness. Results suggest absence of restrictive discomfort when flank strap is being used.

o presente trabalho objetivou estudar os efeitos do sedém nos seguintes aspectos: l-possíveis lesões nas áreas contactadas pelo sedém, por meio de biópsias; 2-possíveis alterações na espermatogênese, mediante exame andrológico; 3- comportamento sexual relacionado ao cortejo e à libido;4- comportamento alimentar referente à ingestão de alimentos e ruminação. Foram utilizados 12bovinos mestiços zebu que já eram submetidos ao uso do sedém há pelo menos quatro anos. Em seis deles, procedeu-se a coleta de pele por meio de biópsia e de sêmen para o exame andrológico. Nos outros seis, foram registradas as frequências cardíaca e respiratória, antes e após os saltos, disposição para ingestão de alimentos, ruminação e comportamento sexual, ainda com a presença de sedém. Os resultados dos exames histopatológicos e andrológicos não revelaram qualquer alteração atribuível ao uso do sedém. As frequências cardíaca e respiratória foram consideradas normais para esta espécie. Não foram observados qualquer tipo de alteração de comportamento com relação à ingestão de alimentos, à ruminação e à disposição sexual. Os resultados sugerem a ausência de desconforto restritivo diante do uso do sedém.

Technical and biological aspects on recovery of oocytes from cattle donors: bibliographical review / Aspectos técnicos e biológicos da obtençãode oócitos bovinos: revisão de literatura

Since the first work about embryo collection, a great amount of research and development has founded on enhancing genetic contribution of cows. The aim of this publication is to give an account of the current knowledge, new findings and techniques on recovery of oocytes from cattle donors.

Desde o primeiro relato de colheita de embriões, um grande número de trabalhos tem apresentado os esforços para melhorar a contribuição genética de fêmeas bovinas. O objetivo desta revisão consiste em relacionar os primeiros trabalhos, novas descobertas e inovações técnicas da obtenção de oócitos em vacas.

Análise ultra-estrutural de oócitos bovinos provenientes de folículos ovarianos com diferentes diâmetros / Ultrastructural analysis of bovine oocytes from ovarian follicles with different diameters

A produção in vitro de embriões é uma técnica importante para facilitar a reprodução de animais com elevado mérito genético. O maior desafio para a reprodutibilidade desta técnica é a qualidade do oócito destinado à maturação in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar as características ultra-estruturais de oócitos provenientes de folículos com diferentes diâmetros por microscopia eletrônica de transmissão. Os animais foram divididos em dois grupos e receberam uma única injeção im de 250 UI de FSH (Pluset, Serono, Itália). Para sincronizar o crescimento folicular, todos os folículos > 2 mm foram aspirados durante o ciclo estral, que foi considerado o dia zero (D0). O Grupo 1 (G1, n = 4) recebeu FSH no dia 1 (D1), e os folículos de 2 a 5 mm foram aspirados no dia 2 (D2). Os animais do grupo 2 (G2, n= 5) receberam FSH no dia 2 (D2), e os folículos de 10 a 15 mm foram aspirados no dia 5 (D5). Após a aspiração, os oócitos de ambos os grupos foram fixados e preparados para análise ultra-estrutural. Os oócitos analisados de ambos os grupos apresentaram características ultra-estruturais semelhantes. A presença e distribuição de organelas no citoplasma dos oócitos não diferiram entre os grupos, sugerindo que, em relação às características ultra-estruturais, oócitos oriundos de folículos de 2-5 mm e 10-15 mm são similares.

In vitro embryo production is an important technique for facilitating the reproduction of animals with high genetic merit. The greatest challenge for the reproducibility of this technique is the quality of the oocyte that is submitted for in vitro maturation. The aim of this work was to evaluate the ultrastructural characteristics of oocytes from follicles of different diameters using transmission electron microscopy. The animals were divided into 2 groups and were given a single i.m. injection of 250 IU FSH (Pluset, Serono, Italy). To synchronize the follicular growth, all follicles > 2 mm were aspirated during the estrous cycle, which was considered day zero (D0). Group 1 (G1; n = 4) received FSH on day 1 (D1), and the 2- to 5-mm follicles were aspirated on day 2 (D2). The animals in group 2 (G2; n = 5) received FSH on day 2 (D2), and their 10- to 15-mm follicles were aspirated on day 5 (D5). After aspiration, the oocytes from both groups were fixed and prepared for ultrastructural analysis. The oocytes analyzed from both groups had similar ultrastructural characteristics. The presence and distribution of organelles in the cytoplasm of the oocytes did not differ between groups, suggesting that, in relation to the ultrastructural characteristics, oocytes from 2 to 5 mm and 10 to 15 mm follicles are similar.

Evaluation of flank strap effects on professional rodeo cattle. / Avaliação técnico-científica da utilização do sedém em bovinos de rodeio

Twelve crossbred Zebu bulls that had used the flank strap for four years were studied in order to evaluated the effect of its use on the following aspects: (1) injuries in areas touched by the flank strap as evaluated by histopathology; (2) alterations in spermatogenesis; (3) sexual behavior related to courting and libido; (4) feeding behavior concerning food ingestion and rumination. Material was obtained from six animals: semen collected for andrological examination and skin samples obtained by biopsy. The other six animals were evaluated as to cardiac and respiratory rates before and after jumping, food intake, rumination and sexual behavior while still using the flank strap. Histopathological and andrological did not show any alteration that could be attributed to the flank strap use. Cardiac and respiratory rates were within the normal range for this species. No alterations were recorded for food intake, rumination or sexual willingness. Results suggest absence of restrictive discomfort when flank strap is being used.

o presente trabalho objetivou estudar os efeitos do sedém nos seguintes aspectos: l-possíveis lesões nas áreas contactadas pelo sedém, por meio de biópsias; 2-possíveis alterações na espermatogênese, mediante exame andrológico; 3- comportamento sexual relacionado ao cortejo e à libido;4- comportamento alimentar referente à ingestão de alimentos e ruminação. Foram utilizados 12bovinos mestiços zebu que já eram submetidos ao uso do sedém há pelo menos quatro anos. Em seis deles, procedeu-se a coleta de pele por meio de biópsia e de sêmen para o exame andrológico. Nos outros seis, foram registradas as frequências cardíaca e respiratória, antes e após os saltos, disposição para ingestão de alimentos, ruminação e comportamento sexual, ainda com a presença de sedém. Os resultados dos exames histopatológicos e andrológicos não revelaram qualquer alteração atribuível ao uso do sedém. As frequências cardíaca e respiratória foram consideradas normais para esta espécie. Não foram observados qualquer tipo de alteração de comportamento com relação à ingestão de alimentos, à ruminação e à disposição sexual. Os resultados sugerem a ausência de desconforto restritivo diante do uso do sedém. 

Insulin-like growth factor-binding proteins and follicular dominance in Bos taurus indicus pure and crossed cows / Proteínas ligantes do insulin-like growth factor (IGFBPs) e dominância folicular em vacas Bos taurus indicus puras e cruzadas

The objective of this study was to identify a possible biochemical marker from bovine follicles with a diameter of more than 10 mm, which could be useful to identify dominant follicles in this species. Follicular liquid (FL) was aspirated from follicles with diameters less than 5 mm, between 5 and 10 mm and more than 10 mm, from both ovaries of 37 slaughtered bovine females. After aspiration, FL was conditioned in identified eppendorfs and frozen. The eletrophoretic patterns in SDS PAGE from FL proteins were determined and it was verified that, the follicles with more than 10 mm presented a polipeptide with a molecular weight between 39 and 43 KDa identified like the IGF-binding protein-3 (IGFBP-3), which wasn"t observed in follicles less than 5 mm and between 5 and 10 mm. This study suggests that this polipeptide may be utilized like a biochemical marker from follicles of more than 10 mm.

O objetivo deste estudo foi identificar um marcador bioquímico de folículos bovinos com diâmetro maior do que 10 mm, o qual poderia ser utilizado para identificar folículos dominantes nesta espécie. Líquido folicular era aspirado de folículos com diâmetros menores do que 5 mm, entre 5 e 10 mm e maiores do que 10 mm, provenientes de ovários de 37 fêmeas bovinas abatidas. Após aspiração, o líquido folicular (LF) era acondicionado em ependorfs etiquetados e congelados. Os padrões eletroforéticos em SDS-PAGE das proteínas do LF foram determinados e verificou-se que os folículos com diâmetro maior do que 10 mm apresentaram um polipeptídeo com PM entre 39 e 43 KDa identificado como a proteína ligante de IGF-3 (IGFBP-3), o qual não foi observado em folículos com diâmetro menor do que 5 mm e entre 5 e 10 mm. Este estudo sugere que este polipeptídeo possa ser utilizado como marcador bioquímico de folículos maiores do que 10 mm.

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Selection of Nelore bulls on in vitro production of embryos / Seleção de reprodutores bovinos da raça nelore na produção in vitro de embriões

This study evaluated the bull effect on the cleavage (CR) and blastocyst rate (BLR) by verifying which of these parameters can be used for selection of semen from Nelore bulls by in vitro production (IVP) of embryos. The immature oocytes from slaughterhouse cows ovaries were matured in vitro in TCM 199 medium with 10% estrous cow serum (ECS), 5µg/ml FSH and 5µg/ml LH. After 24 h of culture, the mature oocytes were incubated with frozenthawed semen from 4 Nelore bulls (A, B, C and D), which were submitted to the washing procedure and the sperm concentration adjusted to 5 x 106 cells/ml. The oocytes-sperm incubation lasted 18-21 h and the TALP-IVF supplemented with 30µg/ml heparin was the culture medium used. After this, the oocytes were transferred into microdroplets of Ménezo medium with 10% ECS and bovine oviduct epithelial cells in suspension and were further cultured by 9 days. All the cultures were performed at 38.5C with 5% CO2 in air and the data were analysed by chi-square test. There was no difference (P>0.05) among the bulls regarding to CR (A= 61.2%; B= 61.3%; C= 66.1%; D= 64.1%). In terms off BLR, bull C (4.1%) was significantly different from bulls A (10.6%), B (12.1%) and C (18.8%), which were not different to each other. The results indicated that the selection of bulls for IVP of bovine embryos should be done by using the blastocyst rate as tile goal.

O presente trabalho avaliou o efeito do reprodutor nas taxas de clivagem (TC) e de blastocistos (TBL) com a finalidade de verificar qual desses parâmetros serviria para selecionar o sêmen de reprodutores da raça Nelore para produção in vitro (PIV) de embriões. Oócitos imaturos provenientes de ovários de vacas de abatedouro foram submetidos a maturação in vitro utilizando o meio TCM 199, acrescido de 10% de soro de vaca em estro (SVE),  5µg/ml de FSH e 5µg/ml de LH. Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram incubados com sêmen descongelado de 4 reprodutores da raça Nelore (A, B, C e D), previamente submetidos ao procedimento de lavagem e a concentração espermática ajustada para 5 x 106 células/ml. A incubação dos oócitos-sêmen teve a duração de 18 a 21 h e o meio de cultura utilizado foi o TALP-FIV suplementado com 30µg/ml de heparina. Após este período, os oócitos foram transferidos para placas contendo microgotas de meio Ménezo suplementado com 10% de SVE e células epiteliais do oviduto bovino em suspensão, cobertas com óleo de silicone, permanecendo em cultura por mais 9 dias. Todas as culturas foram realizadas a 38,5ºC em atmosfera com 5% de CO2 e os dados foram analisados pelo Teste do Quíquadrado. Não houve diferença (P>0,05) entre os reprodutores com relação a TC (A= 61,2%; B= 61,3 %; C= 66,1%; D= 64,1%). Com relação a TBL, o reprodutor C (4,1%) foi inferior (P<

Influence of the dominant follicle on the ovarian follicular dynamics in Nelore cows treated with FSH / Influência do folículo dominante sobre a dinâmica folicular ovariana em vacas Nelore tratadas com FSH

The objectives of this study were: (1) to determine the maximum diameter and the growth rate of the dominant follicle (DF) in Nelore cows; (2) to determine the interval between PGF2;µ; administration and the manifestation of estrus; (3) to investigate the influence of the DF removal on the number of corpora lutea (CL) and non-ovulated follicles (NOF) determined by ultrasonography (CLus and NOFus); and (4) to determine the progesterone (P4; ng/ml) and estradiol-17beta (E2; pg/ml) concentrations in Nelore cows submitted to superovulation with FSH. After ultrasonographic examinations on D0 (48 hours before the beginning of the superovulatory treatment), 42 Nelore donors were divided into three experimental groups: GI (without a DF, n = 15), GII (with a DF, n = 15), and GIII (with an aspirated DF, n = 12). Seven days after the first artificial insemination (D6) the number of CL and NOF was determined and the embryos collected (D13). Blood samples were collected on D0; D2; D4 (PGF2;µ; injection), D6 and D13. The results permit to conclude that although the maximum diameter and the growth rate of the DF were similar to those previously observed in European donors, in the Nelore breed it acts in a different manner on the ovarian follicular dynamic.

Os objetivos deste estudo foram: 1) determinar o diâmetro máximo e a taxa de crescimento do folículo dominante (FD) em vacas Nelore; 2) determinar o intervalo entre a administração de PGF2;µ; e as manifestações de estro; 3) investigar a influência da remoção do FD sobre o número de corpos lúteos (CL) e folículos não ovulados (FNO) determinados por ultra-sonografia (CLus e FNOus); e 4) determinar as concentrações de progesterona (P4, ng/ml) e estradiol-17beta (E2, pg/ml) em vacas Nelore submetidas a superovulação com FSH. Após os exames ultra-sonográficos no D0 (48 horas antes do início da superovulação), 42 vacas Nelore foram divididas em 3 grupos experimentais: GI (sem FD, n = 15), GII (com FD, n = 15), e GIII (com FD aspirado, n = 12). Sete dias após a primeira inseminação artificial (D6), foi determinado o número de CL e FNO e colhidos os embriões (D13). Amostras de sangue foram colhidas em D0, D2, D4 (injeção de PGF2;µ; ), D6 e D13. Os resultados permitem concluir que, embora o diâmetro máximo e a taxa de crescimento apresentados pelos FD tenham sido semelhantes aos descritos previamente em doadoras européias, na raça Nelore a ação do FD sobre a dinâmica folicular ovariana ocorre de maneira diferente.

Evaluation of oocyte maturation conditions and bull effect on the in vitro bovine embryo production / Avaliação das condições de maturação oocitária e do efeito do reprodutor na produção in vitro de embriões bovinos

The conditions of in vitro maturation of bovine oocytes (Exp. I) and bull effect (Exp. II) on cleavage (CR) and the in vitro morulae and blastocysts (MO/BL) rates were evaluated. Imatured oocytes were matured in vitro under different conditions: B-199 medium with 5% estrous cow serum (ECS), 5% fetal calf serum (FCS) and granulosa cells (T1/Exp. I) or B-199 medium with 10% FCS, 14 IU/ml PMSG and 7 IU/ml hCG (T2/Exp I). After 24 h culture, the mature oocytes were inseminated with frozen-thawed semen from two bulls (R1 and R2/Exp. II). In the Exp. I, the T1 and T2 oocytes were inseminated with semen from R1/Exp. II and in the exp. II the semen from both bulls inseminated T1/Exp. I oocytes. After 48 h, the 2-4 cells embryos were transferred into embryo culture droplets and were further cultured for 9 days. The CR of T2/Exp I was higher (p 0.01) than T1/Exp. I. There was a significant difference (p 0.05) between bulls on CR and Mo/Bl production. The use of hormones in a maturation medium has no effect on embryo production, however the procedure seems to be simpler than with granulosa cells. The use of semen from different bulls for in vitro fertilization has affected the subsequent in vitro production of embryos.

Avaliaram-se as condições de cultura para maturação dos oócitos (Exp. I) e o efeito do reprodutor (Exp. II) sobre as taxas de clivagem (TC) e de mórulas e blastocistos (MO/BL) produzidos in vitro. Oócitos imaturos foram submetidos a maturação in vitro sob diferentes condições: meio B-199, acrescido de 5% de soro de vaca em estro (SVE), 5% de soro fetal bovino (SFB) e células da granulosa (T1/Exp. I) ou meio B-199, acrescido de 10% de SFB, 14 UI/ml de PMSG e 7 UI/ml de hCG (T2/Exp I). Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram inseminados com sêmen descongelado de dois reprodutores (R1 e R2 /Exp. II) e, após 48 h de incubação, os embriões de 2 e 4 células foram transferidos para placas de cultivo in vitro, onde permaneceram em cultura por mais 9 dias. No Exp. I, os oócitos de T1 e T2 foram inseminados com sêmen do R1/Exp. II. No Exp. II, os oócitos do T1/Exp. I foram inseminados com sêmen de R1 e R2/Exp. II. No Exp. I, a TC foi superior (p 0,01) para T2, quando comparado com T1. A produção de MO/BL não foi diferente (p>;0,05) entre tratamentos. No Exp. II, a TC e a taxa de MO/BL diferiram (p 0,05) para cada reprodutor. A adição de hormônios no meio de maturação, embora não tenha interferido na produção de embriões, parece ser um procedimento mais prático que o uso de células da granulosa. A utilização de sêmen de diferentes reprodutores afetou o subseqüente desenvol

COLLECTION AND ANALYSIS OF SEMEN FROM THE COMMON MARMOSET (Callithrix jacchus) / COLHEITA E AVALIAÇÃO DO SÊMEN DE SAGUI-DE-TUFO-BRANCO (Callithrix jacchus)

y of different extenders on the semen from common marmoset to improve the quality of physical and morphological characteristics. Three adult specimens were used and nine ejaculates were collected from each one, using electroejaculation. To break up the seminal clot, nine variations of three different extenders were tested. TALP, Ca+2 free, with 0.5% tripsin, during 45 minutes at 37ºC, was the best extender, dissolving partially the semen clot. The electroejaculation is a viable semen collection method for common marmoset, obtaining success in all animals, but the semen quality was relatively poor.KEY WORDS: Callithrix jacchus, electroejaculation, primates, semen.

método de eletroejaculação na colheita de sêmen de saguis-de-tufo-branco (Callithrix jacchus) e realizar uma avaliação descritiva dos aspectos físicos e morfológicos do ejaculado. Foram utilizados três espécimes adultos e colhidas nove amostras de sêmen de cada animal, pela eletroejaculação. Para os testes de dissolução dos coágulos seminais, utilizaram-se nove variações de três tipos de meios. De todas as variações estudadas, o meio TALP, livre de íons Ca+2, acrescido de tripsina a 0,5%, durante 45 minutos, a 37º C, mostrou-se o mais eficiente na dissolução do coágulo, porém não foi capaz de dissolvê-lo completamente. O método de eletroejaculação para colheita de sêmen em C. jacchus mostrou-se viável, apresentando sucesso em todas as colheitas, porém a qualidade do sêmen apresentou-se baixa.PALAVRAS-CHAVES: Callithrix jacchus, eletroejaculação, primata, sêmen.

CLINICAL COMPLICATIONS IN NELORE OOCYTE DONERS CAUSED BY VAGINAL ULTRASOUND GUIDED FOLLICULAR ASPIRATION / COMPLICAÇÕES CLÍNICAS EM VACAS NELORE DOADORAS DE OÓCITOS DECORRENTES DA ASPIRAÇÃO FOLICULAR TRANSVAGINAL GUIADA POR ULTRA-SOM

In the last few years the vaginal ultrasound guided follicular aspiration or OPU (ovum pick up) in bovine oocyte doners has become a very difunded technique. It has been used in females with highly zootechnical valuable. The complications of this technique, despite exceptional, assume great importance and might be of the veterinarian and owners knowledge. The purpose of this study is to describe the possible complications of the follicular aspiration considering the Veterinarian Hospital "Governador Laudo Natel" of the Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias UNESP-Jaboticabal 2003-2005 casuistic. In a total number of 16 animals was possible to observe peritonitis, absence of labor signals, offspring death and peritonitis, distocic delivery with premature fetus, genital lesions, presence of vaginal wall abnormal masses and ovarian adhesions.KEY WORDS: Clinical complications, follicular aspiratiorn, Nelore cow.

Nos últimos anos, a aspiração folicular transvaginal guiada pela ultra-sonografia ou OPU (ovum pick up), em fêmeas bovinas doadoras de oócitos, tem se tornado uma prática muito difundida e vem sendo utilizada na multiplicação de fêmeas de elevado valor zootécnico. As complicações dessa técnica, mesmo que de ocorrência excepcional, assumem grande importância e devem ser de conhecimento do veterinário e, também, do proprietário. O propósito deste trabalho é descrever as possíveis complicações da aspiração folicular, considerando a casuística do Hospital Veterinário Governador Laudo Natel, da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias da UNESP, Jaboticabal, durante os anos de 2003 a 2005. Em um total de dezesseis animais recebidos, verificaram-se a presença de peritonite, a ausência de sinais de parto, morte fetal, parto distócico com feto prematuro, lesões de órgãos genitais, aumento de volume na parede da vagina e aderência ovariana.  PALAVRAS-CHAVES: Aspiração folicular, complicações clínicas, cava Nelore.

Controlled exercise influence on reproductive performance of stallions / Influência do exercício controlado na eficiência reprodutiva de garanhões

A completely randomized design with 2 treatments and 2 experimental units per treatment was utilized. Treatments: A - 2 hours per day in paddock and riden exercise once a week; B- 6 hours par day in paddock and riden exercise every day. It was a 6 months experiment: 3 months before and 3 months during the breeding season. During the first 3 months, semen was collected twice a week and, every 14 days, the ejaculate was analysed and blood serum collected. Within the breeding season, the analyses of semen and serum collection were performed every 14 days, but if the stallion did not serve at least 2 mares per week, the semen was collected to provide a similar situation as the first period. The ejaculate average volume was different between treatments (69.90 ± 3.30 ml - A and 59.04 ± 3.16 ml - B); the stallion 1 average was higher than the average of the other 3 stallions. The number of ejaculated spermatozoa did not vary between treatments, consequently the concentration showed a lower on A. There was season effect on concentration; it was higher on the first period (266.63 ± 17.80 X 106 spermfml vs 162.57 ± 17.04 X 106 sperm/ml). Principal piece pathology was different between the two season, but probably due to animal variability. Excitation time was not affected by treatments but it was shorter during the second period (breeding season). The semen pH and glucose, calcium and ph

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com dois tratamentos com níveis de exercício diferenciados: A - menos exercício e B mais exercício. A duração do experimento foi de 6 meses, divididos em 2 períodos: fora da estação de monta e durante a mesma. A cada 14 dias foi coletado o sêmen e soro sanguíneo para exame e análise. A média de volume do ejaculado foi diferente entre os tratamentos (A = 69,90 ± 3,30 ml e B = 59,04 ± 3,16 ml). O número de espermatozóides ejaculados não variou entre os tratamentos; consequentemente, a concentração no tratamento A foi menor. A concentração sofreu efeito sazonal, sendo nos três primeiros meses (266,63 ± 17,80 X 106 esperm/ml) maior que nos três meses seguintes (162,57 ± 17,04 X 106esperm/ ml). Os tratamentos e estações não afetaram o vigor, patologia de cabeça e peça interme diária. A patologia de cauda mostrou-se diferente nas duas estações, provalvemente devido à variabilidade individual, O tempo de excitação não foi afetado pelos tratamentos, porém foi menor durante o segundo trimestre do experimento. O pH seminal e os níveis de glicose, cálcio e fósforo no soro sanguíneo não variaram. Cada garanhão cobriu um mínimo de 10 éguas e as taxas de prenhez não foram afetadas pelos tratamentos e estações.

Análise Ultra-Estrutural de Embriões Bovinos da Raça Nelore

O conhecimento da ultra-estrutura de embriões bovinos, dentro das diferentes sub-espécies permite estabelecer características inerentes a cada uma delas, possibilitando o desenvolvimento de métodos eficientes para estocagem e conservação desses embriões. Diante disso, 17 embriões bovinos, da raça Nelore, foram preparados para análise ultra-estrutural, sob microscopia eletrônica. O processamento dos embriões foi realizado no Departamento de Reprodução Animal da UNESP Jaboticabal. Para tanto, os embriões foram lavados, sucessivas vezes para remoção do SFB, utilizado no meio de transporte, fixados em solução de glutaraldeído a 1% em tampão cacodilato de sódio 0,15M e pH 7,6, desidratados em soluções com concentrações crescentes de álcool etílico, pré-incluídos, incluídos em cápsulas BEEM (Better equipment for electron microscopy), contendo resina EPON-812, submetidos em estufa à temperatura de 60oC por 72 horas, para polimerização, e seccionados. Devido às pequenas dimensões, os embriões inicialmente foram submetidos a secções semifinas (0,5 mm), para que a linha de corte propiciasse visualização do trofoblasto (TF) e massa celular interna (MCI). Após a triagem dos cortes, realizaram-se secções ultrafinas (60-70 nm), que foram colhidas em grades de cobre, coradas com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas ao microscópio eletrônico. Dos embriões processados 64,71 % f

Controlled exercise influence on reproductive performance of stallions / Influência do exercício controlado na eficiência reprodutiva de garanhões

A completely randomized design with 2 treatments and 2 experimental units per treatment was utilized. Treatments: A - 2 hours per day in paddock and riden exercise once a week; B- 6 hours par day in paddock and riden exercise every day. It was a 6 months experiment: 3 months before and 3 months during the breeding season. During the first 3 months, semen was collected twice a week and, every 14 days, the ejaculate was analysed and blood serum collected. Within the breeding season, the analyses of semen and serum collection were performed every 14 days, but if the stallion did not serve at least 2 mares per week, the semen was collected to provide a similar situation as the first period. The ejaculate average volume was different between treatments (69.90 ± 3.30 ml - A and 59.04 ± 3.16 ml - B); the stallion 1 average was higher than the average of the other 3 stallions. The number of ejaculated spermatozoa did not vary between treatments, consequently the concentration showed a lower on A. There was season effect on concentration; it was higher on the first period (266.63 ± 17.80 X 106 spermfml vs 162.57 ± 17.04 X 106 sperm/ml). Principal piece pathology was different between the two season, but probably due to animal variability. Excitation time was not affected by treatments but it was shorter during the second period (breeding season). The semen pH and glucose, calcium and ph

O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com dois tratamentos com níveis de exercício diferenciados: A - menos exercício e B mais exercício. A duração do experimento foi de 6 meses, divididos em 2 períodos: fora da estação de monta e durante a mesma. A cada 14 dias foi coletado o sêmen e soro sanguíneo para exame e análise. A média de volume do ejaculado foi diferente entre os tratamentos (A = 69,90 ± 3,30 ml e B = 59,04 ± 3,16 ml). O número de espermatozóides ejaculados não variou entre os tratamentos; consequentemente, a concentração no tratamento A foi menor. A concentração sofreu efeito sazonal, sendo nos três primeiros meses (266,63 ± 17,80 X 106 esperm/ml) maior que nos três meses seguintes (162,57 ± 17,04 X 106esperm/ ml). Os tratamentos e estações não afetaram o vigor, patologia de cabeça e peça interme diária. A patologia de cauda mostrou-se diferente nas duas estações, provalvemente devido à variabilidade individual, O tempo de excitação não foi afetado pelos tratamentos, porém foi menor durante o segundo trimestre do experimento. O pH seminal e os níveis de glicose, cálcio e fósforo no soro sanguíneo não variaram. Cada garanhão cobriu um mínimo de 10 éguas e as taxas de prenhez não foram afetadas pelos tratamentos e estações.