Comparação entre três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado / Comparison of three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk

O objetivo deste experimento foi comparar três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado: cromatografia líquida de alta eficiência, ninidrina ácida e colorimétrico adaptado. Foram coletadas 100 amostras de leite cru refrigerado de tanques de expansão. Estas, quando submetidas à análise pelo método da ninidrina ácida, apresentaram 10 (14,7%) amostras negativas e 58 (85,3%) positivas. O teor médio de ácido siálico encontrado na técnica da ninidrina foi de 5,58(g/mL, com valor mais frequente de 2,70(g/mL. Das 68 amostras negativas pela cromatografia líquida de alta eficiência, duas foram positivas (2,94%) e 66 (97,06%) negativas, quando analisadas pelo método colorimétrico. A frequência relativa de amostras positivas foi de 32%, com a CLAE apresentando a maior média de soro (14,37%), seguida do método colorimétrico (5,28%) e o da ninidrina ácida (3,12%). A técnica de cromatografia líquida de alta eficiência diferiu dos métodos de ninidrina ácida e colorimétrico, enquanto os métodos da ninidrina e colorimétrico não diferiram entre si, podendo ambos serem utilizados como metodologias de triagem. Entre as três técnicas, a cromatografia líquida de alta eficiência foi a metodologia mais sensível na detecção e quantificação do soro em leite cru refrigerado.(AU)

The objective of this study was to compare three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk. High-performance liquid chromatography (HPLC), acidic and colorimetric ninhydrin methods were applied. A collection of 100 samples of raw milk from cooled expansion tanks took place. The results showed that 10 samples (14.7%) were negative and 58 (85.3%) were positive for the acidic ninhydrin method. The mean sialic acid content found in the ninhydrin technique was 5.58µg/mL, with a more frequent value of 2.70µg/mL. From all 68 HPLC negative samples, two were positive (2.94%) and 66 (97.06%) negative to the colorimetric method. The relative frequency of positive samples was 32%, HPLC had the highest mean serum levels (14.37%), followed by the colorimetric method (5.28%) and acid ninhydrin (3.12%). The high-performance liquid chromatography method was different from the acid and colorimetric ninhydrin methods. The ninhydrin and colorimetric methods were not different from each other, both of which could be used as screening methodologies. Among the three techniques, HPLC was the most sensitive methodology for the detection and quantification of serum in refrigerated raw milk.(AU)

Comparação entre três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado / Comparison of three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk

O objetivo deste experimento foi comparar três métodos analíticos para determinação de soro em leite cru refrigerado: cromatografia líquida de alta eficiência, ninidrina ácida e colorimétrico adaptado. Foram coletadas 100 amostras de leite cru refrigerado de tanques de expansão. Estas, quando submetidas à análise pelo método da ninidrina ácida, apresentaram 10 (14,7%) amostras negativas e 58 (85,3%) positivas. O teor médio de ácido siálico encontrado na técnica da ninidrina foi de 5,58(g/mL, com valor mais frequente de 2,70(g/mL. Das 68 amostras negativas pela cromatografia líquida de alta eficiência, duas foram positivas (2,94%) e 66 (97,06%) negativas, quando analisadas pelo método colorimétrico. A frequência relativa de amostras positivas foi de 32%, com a CLAE apresentando a maior média de soro (14,37%), seguida do método colorimétrico (5,28%) e o da ninidrina ácida (3,12%). A técnica de cromatografia líquida de alta eficiência diferiu dos métodos de ninidrina ácida e colorimétrico, enquanto os métodos da ninidrina e colorimétrico não diferiram entre si, podendo ambos serem utilizados como metodologias de triagem. Entre as três técnicas, a cromatografia líquida de alta eficiência foi a metodologia mais sensível na detecção e quantificação do soro em leite cru refrigerado.(AU)

The objective of this study was to compare three analytical methods to determine serum in refrigerated raw milk. High-performance liquid chromatography (HPLC), acidic and colorimetric ninhydrin methods were applied. A collection of 100 samples of raw milk from cooled expansion tanks took place. The results showed that 10 samples (14.7%) were negative and 58 (85.3%) were positive for the acidic ninhydrin method. The mean sialic acid content found in the ninhydrin technique was 5.58µg/mL, with a more frequent value of 2.70µg/mL. From all 68 HPLC negative samples, two were positive (2.94%) and 66 (97.06%) negative to the colorimetric method. The relative frequency of positive samples was 32%, HPLC had the highest mean serum levels (14.37%), followed by the colorimetric method (5.28%) and acid ninhydrin (3.12%). The high-performance liquid chromatography method was different from the acid and colorimetric ninhydrin methods. The ninhydrin and colorimetric methods were not different from each other, both of which could be used as screening methodologies. Among the three techniques, HPLC was the most sensitive methodology for the detection and quantification of serum in refrigerated raw milk.(AU)

Avaliação da forma de inclusão de zeólita e do nível de consumo sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais de cães / Evaluation of zeolite inclusion and level of food intake on diet digestibility and faecal characteristics of dogs

Objetivou-se avaliar a forma de inclusão da zeólita e de níveis de consumo sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais de cães. O experimento 1 avaliou o efeito do nível de consumo (normal e 50% a mais do que as necessidades) e da inclusão de zeólita (0 e 15g/kg) sobre a digestibilidade e as características fecais de 12 cães. No experimento 2, foi avaliada a inclusão de 5, 15 e 25g/kg de zeólita adicionada na massa ou por cobertura, em seis cães, sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais. O experimento 3 avaliou o odor fecal de nove cães consumindo dietas contendo 0 e 15g/kg de zeólita incluída na massa ou por cobertura. A quantidade consumida e a inclusão de zeólita não afetaram a digestibilidade das dietas. O escore e a matéria seca fecal aumentaram com a inclusão de zeólita. A inclusão de zeólita na massa propiciou aumento na digestibilidade das dietas, independentemente do nível de inclusão. A inclusão de 15g/kg de zeólita, adicionada na massa e por cobertura reduziu o odor fecal dos cães. A inclusão de zeólita na massa aumenta a digestibilidade da dieta, a consistência fecal e reduz o odor fecal de cães.(AU)

This study aimed to evaluate the form of inclusion of zeolite and consumption levels on diet digestibility and fecal characteristics of dogs. The first experiment examined the effect of consumption level (normal and 50% higher than the requirements) and zeolite level (0 and 15g/kg) on diet digestibility and fecal characteristics of 12 dogs. In experiment 2 the inclusion of 5, 15 and 25g/kg of added zeolite in dough or coating in six dogs on diet digestibility and fecal characteristics was evaluated. The third experiment assessed the fecal odor of nine dogs fed diets containing 0 and 15g/kg of zeolite included in the dough or coating. The amount consumed, as well as the inclusion of zeolite, did not affect diet digestibility. Fecal score and dry matter increased with the inclusion of zeolite. The inclusion of zeolite in the dough provided an increase in diet digestibility, regardless of the level of inclusion. The inclusion of 15g/kg zeolite added to the dough and by coating reduced fecal odor of dogs. The inclusion of zeolite in dough increases diet digestibility, fecal consistency, and reduces the fecal odor of dogs.(AU)

Avaliação da forma de inclusão de zeólita e do nível de consumo sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais de cães / Evaluation of zeolite inclusion and level of food intake on diet digestibility and faecal characteristics of dogs

Objetivou-se avaliar a forma de inclusão da zeólita e de níveis de consumo sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais de cães. O experimento 1 avaliou o efeito do nível de consumo (normal e 50% a mais do que as necessidades) e da inclusão de zeólita (0 e 15g/kg) sobre a digestibilidade e as características fecais de 12 cães. No experimento 2, foi avaliada a inclusão de 5, 15 e 25g/kg de zeólita adicionada na massa ou por cobertura, em seis cães, sobre a digestibilidade da dieta e as características fecais. O experimento 3 avaliou o odor fecal de nove cães consumindo dietas contendo 0 e 15g/kg de zeólita incluída na massa ou por cobertura. A quantidade consumida e a inclusão de zeólita não afetaram a digestibilidade das dietas. O escore e a matéria seca fecal aumentaram com a inclusão de zeólita. A inclusão de zeólita na massa propiciou aumento na digestibilidade das dietas, independentemente do nível de inclusão. A inclusão de 15g/kg de zeólita, adicionada na massa e por cobertura reduziu o odor fecal dos cães. A inclusão de zeólita na massa aumenta a digestibilidade da dieta, a consistência fecal e reduz o odor fecal de cães.(AU)

This study aimed to evaluate the form of inclusion of zeolite and consumption levels on diet digestibility and fecal characteristics of dogs. The first experiment examined the effect of consumption level (normal and 50% higher than the requirements) and zeolite level (0 and 15g/kg) on diet digestibility and fecal characteristics of 12 dogs. In experiment 2 the inclusion of 5, 15 and 25g/kg of added zeolite in dough or coating in six dogs on diet digestibility and fecal characteristics was evaluated. The third experiment assessed the fecal odor of nine dogs fed diets containing 0 and 15g/kg of zeolite included in the dough or coating. The amount consumed, as well as the inclusion of zeolite, did not affect diet digestibility. Fecal score and dry matter increased with the inclusion of zeolite. The inclusion of zeolite in the dough provided an increase in diet digestibility, regardless of the level of inclusion. The inclusion of 15g/kg zeolite added to the dough and by coating reduced fecal odor of dogs. The inclusion of zeolite in dough increases diet digestibility, fecal consistency, and reduces the fecal odor of dogs.(AU)

Subcutaneous administration of ketoprofen delays Ehrlich solid tumor growth in mice / Administração subcutânea de cetoprofeno reduz o crescimento do tumor sólido de Ehrlich em camundongos

Ketoprofen, a nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) has proven to exert anti-inflammatory, anti-proliferative and anti-angiogenic activities in both neoplastic and non-neoplastic conditions. We investigated the effects of this compound on tumor development in Swiss mice previously inoculated with Ehrlich tumor cells. To carry out this study the solid tumor was obtained from cells of the ascites fluid of Ehrlich tumor re-suspended in physiological saline to give 2.5x106 cells in 0.05mL. After tumor inoculation, the animals were separated into two groups (n = 10). The animals treated with ketoprofen 0.1µg/100µL/animal were injected intraperitoneally at intervals of 24h for 10 consecutive days. Animals from the control group received saline. At the end of the experiment the mice were killed and the tumor removed. We analyzed tumor growth, histomorphological and immunohistochemical characteristics for CDC47 (cellular proliferation marker) and for CD31 (blood vessel marker). Animals treated with the ketoprofen 0.1µg/100µL/animal showed lower tumor growth. The treatment did not significantly influence the size of the areas of cancer, inflammation, necrosis and hemorrhage. Moreover, lower rates of tumor cell proliferation were observed in animals treated with ketoprofen compared with the untreated control group. The participation of ketoprofen in controlling tumor malignant cell proliferation would open prospects for its use in clinical and antineoplasic therapy.(AU)

O cetoprofeno é uma droga anti-inflamatória não esteroidal (NSAID), que exerce efeito anti-inflamatório, antiproliferativo e antitumoral em condições neoplásicas e não neoplásicas. Foram investigados os efeitos desse composto sobre o desenvolvimento tumoral de camundongos Swiss previamente inoculados com células do tumor de Ehrlich. Para realização deste estudo, o tumor sólido foi obtido a partir de células do fluido ascítico do tumor de Ehrlich suspendido em solução salina fisiológica para se obter 2,5x106 de células em 0,05mL. Após a inoculação do tumor, os animais foram separados em dois grupos (n = 10). Os animais do grupo tratado receberam cetoprofeno 0,1μg/100μL/animal por via intraperitoneal, em intervalos de 24 horas durante 10 dias consecutivos, e o controle 100µL de solução salina. No final do experimento, os animais foram sacrificados, e o tumor removido. Foram analisados o crescimento do tumor e as características histomorfológicas e imunoistoquímicas para CDC47 (marcador de proliferação celular) e para CD31 (marcador de vasos sanguíneos). Os animais tratados com o cetoprofeno 0,1μg/100μL/animal apresentaram menor crescimento do tumor. O tratamento não influenciou significativamente o tamanho das áreas de neoplasia, inflamação, necrose e hemorragia. Em contraste, uma menor taxa de proliferação das células neoplásicas foi observada nos animais tratados com cetoprofeno em comparação com o grupo controle. A participação do cetoprofeno em controlar a proliferação de células neoplásicas abre perspectivas para sua utilização em terapia clínica antineoplásica.(AU)

Production of monoclonal antibodies against conserved components of infectious bronchitis virus

Murine hybridomas producing IgG1 monoclonal antibodies (Mabs) against N and S2 proteins (53KDa and 82KDa, respectively) from avian infection bronchitis virus (IBV) strain M41 were generated by the fusion of a myeloma cell line (Sp2/0-Ag14) with spleen cells from Balb/c mice previously immunized with whole virus IBV M41. Post-fusion screening criterion was by ELISA and 36 positive hybrids were generated after fusions. Two hybrids specific to N (N3F10) and S2 (S12B2) proteins from M41 (serotype Massachusetts) were selected by western blotting. These Mabs recognized the Ark-99 (serotype Arkansas) and A5968 (serotype Connecticut) IBV strains in addition to M41. By ELISA, the Mab against the S2 (S12B2) recognized all reference and Brazilian strains (M41, SE-17, H52, 297, 283, PM-1, PM-2, PM-3, 351, 29-78 E 327) studied, while the Mab against N recognized only six (M41, SE-17, H52, 283, 327 e 297) strains. The Mab against S2 may become a useful tool for IBV detection on the routine diagnosis of infectious bronchitis, especially for helping the differential diagnosis of clinically and pathologically confusing diseases, while the Mab against N (N3F10) recognized a probably less conserved region among the strains and may be interesting to comparing IBV isolates.

Foram produzidos anticorpos monoclonais (AcM) da subclasse IgG1 contra as proteínas N (53KDa) e S2 (82KDa) do vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBIG) amostra M41. Os híbridos secretores originaram-se da fusão entre células de mielomas da linhagem Sp2/0-Ag14 e linfócitos B de camundongos Balb/c previamente imunizados com o vírus completo. O primeiro critério de seleção foi por ELISA, no qual 36 híbridos originados de duas fusões reagiram positivamente; destes, foram selecionados dois AcM que reagiram contra as proteínas N (N3D4) e S2 (S12B2) do VBIG da amostra M41 (sorotipo Massachusetts) no western blotting. Os mesmos AcM foram também capazes de reconhecer as estirpes Ark-99 (sorotipo Arkansas) e A5968 (sorotipo Connecticut) do VBIG no western blotting. No ELISA, o AcM contra S2 (S12b2) reconheceu 11 estirpes das 11 estudadas (M41, SE-17, H52, 297, 283, PM-1, PM-2, PM-3, 351, 29-78 E 327), enquanto o AcM contra a proteína N reconheceu apenas seis estirpes (M41, SE-17, H52, 283, 327 e 297). O anticorpo monoclonal contra S2 comportou-se como uma boa ferramenta de diagnóstico do VBIG, independentemente do sorotipo que pode ser aplicado em ensaios de rotina laboratorial, especialmente no diagnóstico das doenças que se confundem com a BIG nas galinhas, enquanto o AcM contra N (N3F10) demonstrou reconhecer uma região menos conservada entre as estirpes de VBIG e pode ser útil em estudos comparativos entre isolados de VBIG.

Mortality by filarial nematodes in passeriformes of species Oryzoborus maximiliani in Brazil

Descreve-se a ocorrência de filariose em passeriformes da espécie Oryzoborus maximiliani (bicudo) mantidos em cativeiro. Os sinais clínicos incluiram insuficiência respiratória e prostração, evoluindo para decúbito lateral e morte. Todos os indivíduos capturados adoeceram e morreram em poucos dias. As lesões mais significativas foram encontradas nos pulmões, que estavam acinzentados na região adjacente ao saco aéreo abdominal. Impressões do pulmão observadas ao microscópio em 100 aumentos permitiram a visualização de grande número de formas alongadas típicas de nematódeo. Considerando suas dimensões e os relatos da literatura consultada, especulou-se a possibilidade de filariose. As condições de estresse de captura e cativeiro podem ser determinantes do quadro agudo observado, o que permite sugerir esta suspeita em casos semelhantes. Considera-se importante, entretanto, a possibilidade de a manifestação clínica na forma crônica ou assintomática poder ser mais comum que a aguda.