Hemotropic mycoplasmas in bats from forest fragments, state of Paraná, southern Brazil / Detecção e caracterização de micoplasmas hemotrópicos em morcegos de fragmentos florestais, Paraná, Sul do Brasil

The order Chiroptera is the second largest group of mammals with bats being identified as reservoir of several viral zoonoses, although, little is known about their role in other groups of pathogens, including hemotropic Mycoplasma spp. To date, hemoplasma species have been found infecting several species of bats with high genetic diversity between 16S rRNA gene sequences. On this study, we aimed to identify the occurrence and characterize 16S and 23S rRNA genes of hemoplasma species in four bats species (Artibeus lituratus, Carollia perspicillata, Sturnira lilium and Sturnira tildae) from forest fragments in Paraná State, southern Brazil, using PCR-based assays. Spleen tissue samples were collected, DNA extracted and further screened by a pan hemoplasma PCR assay. All samples consistently amplified the mammal endogenous gapdh gene. One out of 15 (6.66%; 95% CI: 0.2-31%) bats tested positive for hemotropic Mycoplasma sp. by the PCR assay targeting the 16S rRNA gene. Sequencing of the 16S rRNA gene fragment from the hemoplasma-positive bat showed 99.14% identity with hemotropic Mycoplasma sp. detected in Sturnira parvidens from Belize. Sequencing of the 23S rRNA gene fragment from the hemoplasma-positive bat showed 86.17% identity with 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' detected in orange-spined hairy dwarf porcupines (Sphiggurus villosus) from Southern Brazil.(AU)

A ordem Chiroptera é considerada a segunda maior ordem de mamíferos do mundo, sendo os morcegos identificados como reservatórios de diversas zoonoses de origem viral, contudo, pouco se sabe sobre seu papel em outros grupos de patógenos, incluindo Mycoplasma spp. Até o momento, Mycoplasma sp., foi encontrado infectando várias espécies de morcegos ao redor do mundo, com alta diversidade genética entre sequências de genes 16S rRNA. O objetivo do presente estudo foi detectar a infecção por hemoplasmas em quinze morcegos insetívoros de quatro diferentes espécies (Artibeus lituratus, Carollia perspicillata, Sturnira lilium and Sturnira tildae) provenientes de fragmentos florestais dos municípios de Mandaguaçu, Maringá e Paiçandu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Amostras de tecido foram coletadas e o DNA extraído, para posterior análise por PCR para detecção de hemoplasmas. Todas as amostras amplificaram o gene gapdh. Um morcego, do total de 15 (6.66%; 95% CI: 0.2-31%), foi positivo para Mycoplasma sp. na análise do gene16S rRNA. O sequenciamento deste fragmento genético mostrou 99,14% de identidade com Mycoplasma sp. detectado em Sturnira parvidens em Belize. O sequenciamento do fragmento do gene 23S rRNA do morcego positivo mostrou 86,17% de identidade com 'Candidatus Mycoplasma haemosphiggurus' detectado em ouriço-cacheiro (Sphiggurus villosus) no sul do Brasil.(AU)

First report of Dipetalonema gracile in a captive Marcgrave's capuchin monkey (Sapajus flavius) in northeastern Brazil: Scientific communication / Primeira descrição de Dipetalonema gracile em macaco-prego-galego (Sapajus flavius) do nordeste do Brasil: Comunicação científica

Parasitic infections are important concern to the Wildlife Conservation Biology, particularly in endangered species. Herein, we report a parasitism by Dipetalonema gracile Rudolphi, 1809 (Spirurida, Filarioidea, Onchocercidae), in the peritoneal cavity of a captive Marcgrave's capuchin monkey (Sapajus flavius) that died at the Wild Animal Screening Center (CETAS) of the Brazilian Institute for the Environment and Renewable Natural Resources (IBAMA) in the municipality of Cabedelo, state of Paraíba, northeastern Brazil. The necropsy revealed two filarial worms D. gracile in the abdominal cavity. Exudates, thin fibrin layers and fibrous adhesions were also present in the mesentery and spleen capsule. The mesenteric, mandibular, and tracheobronchial lymph nodes were enlarged. Multiple small nodules were seen in the spleen parenchyma. Microscopic examination of the lymph nodes and spleen revealed markedly and diffuse inflammatory reaction, with edema, plasma cells, eosinophils, histiocytes, lymphocytes and rare multinuclear giant cells, with obliteration of the normal histological architecture of the organ. This is the first report of D. gracile parasitism in Marcgrave's capuchin monkeys, a critically endangered species. Studies of this nature significantly contribute to the knowledge of the parasitic fauna of endangered species, in addition to helping to formulate conservation strategies (in situ and ex situ) and records of new hosts and new areas of occurrence of parasites.(AU)

Infecções parasitárias são uma questão importante para a Medicina e Biologia da Conservação. É descrito o parasitismo por Dipetalonema gracile Rudolphi, 1809 (Spirurida, Filarioidea, Onchocercidae) na cavidade peritoneal de um macaco-prego-galego (Sapajus flavius) que morreu no Centro de Triagem de Animais Silvestres (CETAS) do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA), município de Cabedelo, Paraíba, Brasil. A necropsia revelou dois espécimes de parasitas na cavidade abdominal. Exsudatos, finas camadas de fibrina e aderências fibrosas também estavam presentes no mesentério e na cápsula do baço. Os linfonodos mesentéricos, mandibulares e traqueobrônquicos estavam aumentados. Vários pequenos nódulos foram vistos no parênquima do baço. O exame microscópico dos linfonodos e baço revelou reação inflamatória grave e difusa, com edema, células plasmáticas, eosinófilos, histiócitos, linfócitos e raras células gigantes multinucleares, com obliteração da arquitetura histológica normal do órgão. Este é o primeiro relato de parasitismo por esse nematódeo em macaco-prego-galego, uma espécie criticamente ameaçada da Mata Atlântica do Rio Grande do Norte, Paraíba e Pernambuco. Estudos dessa natureza contribuem significativamente para o conhecimento sobre a fauna parasitária de espécies ameaçadas de extinção, além de auxiliar na formulação de estratégias de conservação (in situ e ex situ) e registros de novos hospedeiros e novas áreas de ocorrência de parasitas.(AU)

Molecular screening of Bartonella in free-ranging capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) from Paraná State, Southern Brazil / Avaliação molecular de Bartonella em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) de vida livre do Estado do Paraná, Brasil

Bartonella is an emerging group of facultative intracellular bacteria causing circulatory and systemic disorders. Hosts for Bartonella are mostly mammals, specifically rodents, having a growing number of Bartonella species related to their infection. Capybaras (Hydrochoerus hydrochaeris) are abundant native rodents of Brazil, commonly found in urban parks. In the present study, we aimed to perform molecular screening of capybaras for Bartonella spp. Blood samples were collected from 17 free-ranging animals captured in Paraná State, Southern Brazil. None of the collected samples tested positive for the BartonellanuoG gene by quantitative polymerase chain reaction (qPCR), although all of them successfully amplified the mammal endogenous glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (gapdh) gene. Additionally, all animals were infested exclusively by Amblyomma dubitatum ticks at the time of sampling. This study was part of an active surveillance program, which is critical for monitoring animal health status, particularly in capybaras.(AU)

Bartonella é um grupo emergente de bactérias intracelulares facultativas que causam doenças circulatórias e sistêmicas. Mamíferos são os principais hospedeiros das bartonelas, especificamente roedores, com crescente número de espécies de Bartonella relacionadas a estes animais. Capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) são abundantes roedores do Brasil, comumente encontrados em parques urbanos. Nosso objetivo no presente estudo foi realizar uma triagem molecular das capivaras para Bartonella spp. Amostras de sangue foram coletadas de 17 animais de vida livre capturados no estado do Paraná, Sul do Brasil. Nenhuma das amostras coletadas apresentou resultado positivo para o gene nuoG de Bartonella pela reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR), apesar de todas elas amplificarem com sucesso o gene endógeno de mamíferos gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (gapdh). Adicionalmente, todos os animais estavam infestados exclusivamente por carrapatos Amblyomma dubitatum no momento da coleta. Este estudo foi parte do programa de vigilância ativa, que é importante para monitorar a condição de saúde dos animais, particularmente em capivaras.(AU)

Parasitological, epidemiological, and hematological findings in Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixiiWangler, 1831) in the state of Paraiba, northeastern Brazil / Achados parasitológicos, hematológicos e epidemiológicos em preás- (Galea spixii Wangler, 1831) do estado da Paraíba, nordeste do Brasil

Brazil is composed of large ecosystems with vast biodiversity in fauna and flora. Agriculture and livestock farming provides an interaction between humans and domestic and wild animals, which favors the dissemination of infectious and parasitic agents. Wild rodents present a wide ecological diversity; therefore, it is necessary to know which species may be carriers of pathogens. This study aims to identify endo and ectoparasites, and hemoparasites in Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii Wangler, 1831), and determine the hematological parameters of this species. The study was carried out with 16 adult specimens from both sexes, captured in the rural areas of Remigio and Areia, Paraiba State, northeastern Brazil. All Spix's yellow-toothed cavies presented ectoparasites, Gliricola quadrisetosa, Gyropus ovalis, Laelaps sp. and Chirodiscoides caviae, and endoparasites identified by the presence of Nematode eggs, Cestode eggs, and coccidian oocysts in the stool samples. To the best of our knowledge, this is the first report of parasitism by Gyropus ovalis, Laelaps sp. and Chirodiscoides cavia in Spix's yellow-toothed cavy. Animals tested negative by PCR for hemotropic Mycoplasma sp., Babesia sp., Ehrlichia sp., and Bartonella sp. For the first time, the hematological profile of these animals was determined. These results can be the basis for future research with the species, which can be used as a sample animal in experiments in clinical settings as an epidemiological guide since this species is routinely used by impoverished populations in the Northeastern region of Brazil as pets, as well as a source of protein.

O Brasil é composto por grandes ecossistemas com vasta biodiversidade na fauna e flora. O desenvolvimento da agricultura e pecuária proporciona uma interação entre a população humana e animais domésticos e silvestres, o que facilita a disseminação de agentes infecciosos e parasitos. Os roedores selvagens apresentam uma ampla diversidade ecológica; portanto, é necessário conhecer as espécies que podem ser portadoras de patógenos. O presente estudo tem como objetivo identificar endo e ectoparasitos, e hemoparasitos em preás (Galea spixii Wangler, 1831), e determinar os parâmetros hematológicos desta espécie. O trabalho foi realizado com 16 espécimes adultos de ambos os sexos capturados nas áreas rurais de Remígio e Areia, estado da Paraíba, nordeste do Brasil. Todos os animais apresentaram ectoparasitas, Gliricola quadrisetosa, Gyropus ovalis, Laelaps sp. e Chirodiscoides caviae, e endoparasitos identificados pela presença de ovos de nematódeos, ovos de cestódeos e oocistos de coccídeos na amostra de fezes. Este é o primeiro relato de parasitismo de Gyropus ovalis, Laelaps sp. e Chirodiscoides cavia em preás. Os animais testaram negativo na PCR para Mycoplasma sp., Babesia sp., Ehrlichia sp., e Bartonella sp. Pela primeira vez, foi determinado o perfil hematológico desses animais. Esses resultados podem servir de base para futuras pesquisas com a espécie, que pode ser utilizada para experimentação em ensaios clínicos como guia epidemiológico, uma vez que essa espécie é rotineiramente utilizada por populações empobrecidas da região Nordeste do Brasil como fonte proteica, além de seu uso como animais de estimação.

Babesia vogeli in dogs from Rio Branco, South-west Amazonia, Brazil / Babesia vogeli em cães de Rio Branco, sudoeste da Amazônia, Brasil

This is the first report of Babesia vogeli molecular detection in dogs from the state of Acre, northern Brazil. This study aimed to perform the molecular detection of Babesia vogeli in dogs in the municipality of Rio Branco, Acre. Blood samples were collected from 47 dogs presenting with clinical signs comparable to hemoparasitosis. These were dogs which were attended in veterinary clinics from Rio Branco municipality, Acre. Physical examinations, packed cell volume (PCV) determination, platelet number estimation, hemoparasite investigation in the blood (collected from the pinna and peripheral blood), and polymerase chain reaction (PCR) for piroplasm based on the 18S rRNA gene, were performed. One dog (1/47, 2.1%; CI 95%: 0.1-11.3%) tested positive to Babesia vogeli in the polymerase chain reaction (PCR) assay for piroplasms and the resulting sequence showed 100% identity with Babesia vogeli isolates deposited in GenBank®. Co-infection with Ehrlichia spp. was also observed by direct examination (via blood smear). The clinical and hematological alterations observed in the positive animal were anorexia, dehydration, white mucous membranes, anemia and thrombocytopenia.(AU)

Este é o primeiro relato de detecção molecular de Babesia vogeli em cães do estado do Acre, norte do Brasil. Este estudo teve como objetivo realizar a detecção molecular de B. vogeli em amostras de sangue de 47 cães com sinais clínicos compatíveis com hemoparasitoses no município de Rio Branco, Acre. Tratavam-se de animais atendidos em clínicas veterinárias do município, sendo realizados exames físicos, determinação do volume globular (VG), estimativa do número de plaquetas, investigação de hemoparasitos no sangue (coletado da ponta da orelha e sangue periférico). Além disso, amostras de sangue foram submetidas a extração de DNA e reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificação de fragmentos do gene 18S rRNA de piroplasmas. Um cão (1/47, 2,1%; IC 95%: 0,1-11,3%) apresentou resultado positivo para B. vogeli na PCR para piroplasmas e a sequência resultante mostrou 100% de identidade com os isolados de B. vogeli depositados no GenBank®. Co-infecção com Ehrlichia spp. também foi observado por exame direto (esfregaço de sangue). As alterações clínicas e hematológicas observadas no animal positivo foram anorexia, desidratação, mucosas pálidas, anemia e trombocitopenia.(AU)

‘Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris and tick-borne pathogens screening in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Curitiba and Foz do Iguaçu Cities, Paraná State, southern Brazil / ‘Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris e triagem para patógenos transmitidos por carrapatos em gambás de orelha branca (Didelphis albiventris) das cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, Estado do Paraná, sul do Brasil

Hemoplasmas are epierythrocytic bacteria that infect mammals. ‘Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris was detected in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from southern and central-western Brazil. The present study aimed at: i) screening opossums for tick-borne (TBP) pathogens (Piroplasmida and Anaplasmataceae) and ii) detecting and characterizing hemoplasma species infecting opossums from Curitiba and Foz do Iguaçu cities in the Paraná State, southern Brazil. Thirty blood samples from white-eared opossums were evaluated by PCR assays. Animals were not infested by ectoparasites. The mammalian endogenous gapdh gene was consistently amplified in all samples. All opossums tested negative for Theileria/Babesia spp. and Ehrlichia/Anaplasma spp. by PCR based on 18S rRNA and 16S rRNA genes, respectively. A genus-specific PCR assay based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas showed that three/13 (23.08%; CI 95%: 8.18-50.26%) opossums from Foz do Iguaçu were positive for hemotropic Mycoplasma sp. All opossums from Curitiba tested negative for hemoplasmas. Sequencing of both the 16S and 23S rRNA genes revealed that the animals were infected by ‘Ca. M. haemoalbiventris. Although ‘Ca. M. haemoalbiventris is prevalent in opossums in Brazil, clinical signs associated with its infection and its putative vectors remain unknown.(AU)

Hemoplasmas são bactérias epieritrocíticas que infectam mamíferos. ‘Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris foi detectado previamente em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) das regiões sul e centro-oeste do Brasil. O presente estudo objetivou: i) triar os gambás para as doenças transmitidas por carrapatos (Piroplasmida e Anaplasmataceae); e ii) detectar e caracterizar as espécies de hemoplasma que infectam gambás nas cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Trinta amostras de sangue de gambás-de-orelha-branca foram analisadas por PCR. Os animais não estavam infestados por ectoparasitos. O gene endógeno de mamífero gapdh foi amplificado em todas as amostras. Todos os gambás testaram negativos para Theileria/Babesia spp. e Ehrlichia/Anaplasma spp. por PCR, respectivamente, para os genes 18S rRNA e 16S rRNA. Uma PCR gene-específica, baseada no gene 16S rRNA de hemoplasmas, mostrou que três/13 (23,08%; CI 95%: 8,18-50,26%) gambás de Foz do Iguaçu foram positivos para Mycoplasma sp. hemotrópico. Todos os gambás de Curitiba testaram negativos para hemoplasmas. O sequenciamento de fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA revelou que os animais estavam infectados pelo ‘Ca. M. haemoalbiventris. Embora ‘Ca. M. haemoalbiventris seja prevalente em gambás no Brasil, os sinais clínicos associados à infecção e os prováveis vetores permanecem desconhecidos.(AU)

'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' and tick-borne pathogens screening in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Curitiba and Foz do Iguaçu Cities, Paraná State, southern Brazil / 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' e triagem para patógenos transmitidos por carrapatos em gambás de orelha branca (Didelphis albiventris) das cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, Estado do Paraná, sul do Brasil

Abstract Hemoplasmas are epierythrocytic bacteria that infect mammals. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' was detected in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from southern and central-western Brazil. The present study aimed at: i) screening opossums for tick-borne (TBP) pathogens (Piroplasmida and Anaplasmataceae) and ii) detecting and characterizing hemoplasma species infecting opossums from Curitiba and Foz do Iguaçu cities in the Paraná State, southern Brazil. Thirty blood samples from white-eared opossums were evaluated by PCR assays. Animals were not infested by ectoparasites. The mammalian endogenous gapdh gene was consistently amplified in all samples. All opossums tested negative for Theileria/Babesia spp. and Ehrlichia/Anaplasma spp. by PCR based on 18S rRNA and 16S rRNA genes, respectively. A genus-specific PCR assay based on the 16S rRNA gene of hemoplasmas showed that three/13 (23.08%; CI 95%: 8.18-50.26%) opossums from Foz do Iguaçu were positive for hemotropic Mycoplasma sp. All opossums from Curitiba tested negative for hemoplasmas. Sequencing of both the 16S and 23S rRNA genes revealed that the animals were infected by 'Ca. M. haemoalbiventris'. Although 'Ca. M. haemoalbiventris' is prevalent in opossums in Brazil, clinical signs associated with its infection and its putative vectors remain unknown.

Resumo Hemoplasmas são bactérias epieritrocíticas que infectam mamíferos. 'Candidatus Mycoplasma haemoalbiventris' foi detectado previamente em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) das regiões sul e centro-oeste do Brasil. O presente estudo objetivou: i) triar os gambás para as doenças transmitidas por carrapatos (Piroplasmida e Anaplasmataceae); e ii) detectar e caracterizar as espécies de hemoplasma que infectam gambás nas cidades de Curitiba e Foz do Iguaçu, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Trinta amostras de sangue de gambás-de-orelha-branca foram analisadas por PCR. Os animais não estavam infestados por ectoparasitos. O gene endógeno de mamífero gapdh foi amplificado em todas as amostras. Todos os gambás testaram negativos para Theileria/Babesia spp. e Ehrlichia/Anaplasma spp. por PCR, respectivamente, para os genes 18S rRNA e 16S rRNA. Uma PCR gene-específica, baseada no gene 16S rRNA de hemoplasmas, mostrou que três/13 (23,08%; CI 95%: 8,18-50,26%) gambás de Foz do Iguaçu foram positivos para Mycoplasma sp. hemotrópico. Todos os gambás de Curitiba testaram negativos para hemoplasmas. O sequenciamento de fragmentos dos genes 16S e 23S rRNA revelou que os animais estavam infectados pelo 'Ca. M. haemoalbiventris'. Embora 'Ca. M. haemoalbiventris' seja prevalente em gambás no Brasil, os sinais clínicos associados à infecção e os prováveis vetores permanecem desconhecidos.

Survey of vector-borne and nematode parasites involved in the etiology of anemic syndrome in sheep from Southern Brazil / Pesquisa de hemoparasitos transmitidos por vetores e nematódeos envolvidos na etiologia de síndrome anêmica em ovinos no Sul do Brasil

Although anemia has been historically linked to Haemonchus contortus infection, other infectious agents, such as hemotropic mycoplasmas and tick-borne disease pathogens, may also lead to anemic crisis in sheep. This study has aimed to investigate infections related to anemia in a sheep herd from Bandeirantes City, Paraná State, southern Brazil. Seven out of forty-two (16.6%; 95% CI: 8.3230.6%) sheep were positive for hemoplasmas by a PCR targeting the 16S rRNA gene and all tested negative for A. marginale/A. ovis and Babesia/Theileria spp. by PCR based on msp4 and 18S rRNA genes, respectively. Two (4.7%; 95% CI: 1.3215.79%) animals were infested with Rhipicephalus microplus ticks. Fecal egg counting was performed in 38 sheep and 24 (63.15%; 95% CI: 47.276.6%) presented > 500 eggs per gram. Phylogenetic analysis of partial sequences of the detected hemotropic Mycoplasma sp. 16S and 23S rRNA genes confirmed that the animals were infected with Mycoplasma ovis. Polymorphism analysis of partial 16S rRNA sequences showed three different genotypes of M. ovis infecting sheep assessed in the present study. Mycoplasma ovis and gastrointestinal nematodes occurs in sheep from the northern region of Paraná State.(AU)

Embora a principal causa de anemia seja historicamente relacionada à infecção por Haemonchus contortus, outros agentes infecciosos, como micoplasmas hemotrópicos e patógenos transmitidos por carrapatos, também podem causar quadros anêmicos em ovinos. O presente estudo objetivou investigar infecções relacionadas à anemia em um rebanho de ovinos, na cidade de Bandeirantes, Estado do Paraná, sul do Brasil. Sete (16,6%; 95% CI: 8,3230,6%) de 42 ovinos foram positivos para hemoplasmas pela PCR do gene 16S rRNA, enquanto todos foram negativos para A. marginale/A. ovis e Babesia/Theileria spp. por ensaios da PCR baseados nos genes msp4 e 18S rRNA, respectivamente. Dois (4,7%; 95% CI: 1,3215,79%) animais estavam infestados por carrapatos Rhipicephalus microplus. Dos 38 animais nos quais foi realizada a contagem de ovos por grama de fezes (OPG), 24 (63,15%; 95% CI: 47,276,6%) apresentaram valores >500 para OPG. A análise filogenética das sequências parciais dos genes 16S rRNA e 23S rRNA de hemoplasmas confirmou a infecção por Mycoplasma ovis. A análise de polimorfismos de um fragmento do gene 16S rRNA mostrou a ocorrência de três genótipos diferentes de M. ovis nos animais. Mycoplasma ovis e nematódeos gastrointestinais ocorrem em ovinos da região nordeste do Estado do Paraná.(AU)

Comparison of three protocols to preserve Leptospira spp. in cat urine for efficient DNA extraction and PCR amplification

Background: The pathogenic leptospira infection in mammalian species can cause a range of acute or chronic manifestations and may result in a carrier state. Previous studies have suggested that cats were resistant to acute leptospirosis however, the description of some clinical cases suggests that Leptospira spp. may also be pathogenic to this species. Recentstudies have shown that leptospires may be shed in the urine of infected cats. Endogenous substances present in urine mayinhibit PCR and allow leptospires to evade detection. This study aims to compare three protocols for sample processingto optimize the detection of pathogenic leptospires in cat urine.Materials, Methods & Results: Three protocols to optimize the detection of pathogenic leptospires in cat urine were tested.Aliquots of standard concentration of L. interrogans serovar Canicola culture were added to urine samples to achieveconcentrations of 1×105 to 1×102 leptospires/mL for each protocol. In protocols A and B the urine was neutralized by theaddition of phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4, in a proportion of 1 PBS: 2.5 urine (v/v). In protocol A, PBS wasadded to neutralize the urine pH for the leptospiral organisms immediately after addition of leptospires. In protocol B,PBS was added just before DNA extraction. In protocol C, no PBS was added. DNA extraction was performed at 4, 24and 48 h after addition of the leptospires using a modified protocol. Samples were incubated at 37ºC for 10 min. Sampleswere then centrifuged (850 g) for 15 min, at 25ºC. The supernatants were transferred to another tube, and the pellets werediscarded. The supernatants were centrifuged (16060 g) for 20 min at 4ºC. The supernatants were then discarded, and thepellets resuspended and washed with 1000 µL of PBS. All the samples were centrifuged at 16060 g for an additional 20min at 25ºC. The supernatants were discarded and the pellets were resuspended in 100 µL of PBS and incubated at 94ºCfor...(AU)

Comparison of three protocols to preserve Leptospira spp. in cat urine for efficient DNA extraction and PCR amplification

Background: The pathogenic leptospira infection in mammalian species can cause a range of acute or chronic manifestations and may result in a carrier state. Previous studies have suggested that cats were resistant to acute leptospirosis however, the description of some clinical cases suggests that Leptospira spp. may also be pathogenic to this species. Recentstudies have shown that leptospires may be shed in the urine of infected cats. Endogenous substances present in urine mayinhibit PCR and allow leptospires to evade detection. This study aims to compare three protocols for sample processingto optimize the detection of pathogenic leptospires in cat urine.Materials, Methods & Results: Three protocols to optimize the detection of pathogenic leptospires in cat urine were tested.Aliquots of standard concentration of L. interrogans serovar Canicola culture were added to urine samples to achieveconcentrations of 1×105 to 1×102 leptospires/mL for each protocol. In protocols A and B the urine was neutralized by theaddition of phosphate-buffered saline (PBS), pH 7.4, in a proportion of 1 PBS: 2.5 urine (v/v). In protocol A, PBS wasadded to neutralize the urine pH for the leptospiral organisms immediately after addition of leptospires. In protocol B,PBS was added just before DNA extraction. In protocol C, no PBS was added. DNA extraction was performed at 4, 24and 48 h after addition of the leptospires using a modified protocol. Samples were incubated at 37ºC for 10 min. Sampleswere then centrifuged (850 g) for 15 min, at 25ºC. The supernatants were transferred to another tube, and the pellets werediscarded. The supernatants were centrifuged (16060 g) for 20 min at 4ºC. The supernatants were then discarded, and thepellets resuspended and washed with 1000 µL of PBS. All the samples were centrifuged at 16060 g for an additional 20min at 25ºC. The supernatants were discarded and the pellets were resuspended in 100 µL of PBS and incubated at 94ºCfor...

Detection of Hemotropic Mycoplasma sp. in white-eared opossums (Didelphis albiventris) from Southern Brazil / Detecção de Mycoplasma sp. hemotrópico em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) no Sul do Brasil

Opossums are marsupials from the New World of the genus Didelphis and known as synanthropic animals due to their proximity with human beings. To date, Candidatus Mycoplasma haemodidelphis has been solely found infecting the North American opossum (Didelphis virginiana). Accordingly, the aim of this study was to screen eight white-eared opossums (Didelphis albiventris) from a public park in Maringa city, Paraná State, southern Brazil, for hemoplasma infection. Blood samples were taken from caudal venipuncture, and DNA was extracted and further screened by a pan-hemoplasma PCR assay. Seven out of eight (87.50%; CI 95%: 47.35-99.68%) white-eared opossums were positive for Mycoplasma spp. Sequencing of the 16S rRNA fragment showed 98,97% identity with Ca. M. haemodidelphis detected in the USA. Three out of eight (37.50%; CI 95%: 8.52-75.51%) white-eared opossums were infested by Amblyomma dubitatum ticks. This is the first report on detection of a potentially novel hemotropic Mycoplasma sp. infecting opossums from South America.(AU)

Gambás são marsupiais do Novo Mundo, pertencentes ao gênero Didelphis, e considerados animais sinantrópicos devido à sua proximidade com seres humanos. Atualmente, a espécie Candidatus Mycoplasma haemodidelphis só foi encontrada infectando gambá norte americano (Didelphis virginiana). O objetivo do presente estudo foi detectar a infecção por hemoplasmas em oito gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) capturados em um parque público da cidade de Maringá, no Estado do Paraná, sul do Brasil. Amostras de sangue foram coletadas por venopunção caudal para a extração do DNA e posterior análise pela PCR para espécies de hemoplasmas. Sete de oito animais (87,50%; CI 95%: 47,35-99,68%) foram considerados positivos para Mycoplasma spp. O sequenciamento do fragmento do gene 16S rRNA obtido apresentou 98.97% de similaridade com sequências de Ca. M. haemodidelphis detectadas nos Estados Unidos. Três gambás (37,50%; CI 95%: 8,52-75,51%) estavam infestados por carrapatos da espécie Amblyomma dubitatum. Esse é o primeiro relato de detecção de uma potencial nova espécie de Mycoplasma hemotrópico infectando gambás na América do Sul.(AU)

Theileria sp. in water buffaloes from Maranhão State, northeastern Brazil / Theileria sp. em búfalos do Estado do Maranhão, nordeste do Brasil

Anaplasma marginale and piroplasm species are widespread among Brazilian cattle herds. Both of these tick-borne pathogens hamper livestock production and cause a significant economic impact. Although buffaloes have demonstrated a high level of adaptability, data on tick-borne pathogens are scarcely reported in Brazil. Thus, the aim of this study was to screen water buffaloes from the state of Maranhão for piroplasm and A. marginale occurrence using PCR assays. All samples were negative for A. marginale. One of the 287 (0.35%) water buffaloes tested was positive for Theileria sp. Sequencing of the 18S rDNA fragment (356 bp) showed that the Theileria sp. identified was closely related to the T. buffeli /orientalis group. Future studies on the clinical signs of infection and the main vector in this country are needed.(AU)

Anaplasma marginale e espécies de piroplasma são amplamente distribuídas no rebanho bovino brasileiro. Ambos os patógenos transmitidos por carrapatos dificultam a produção pecuária e causam um impacto econômico significativo. Embora os búfalos tenham demonstrado um alto nível de adaptabilidade, dados sobre patógenos transmitidos por carrapatos são raramente relatados no Brasil. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar búfalos do estado do Maranhão para piroplasmas e A. marginale utilizando-se a técnica da PCR. Todas as amostras foram negativas para A. marginale . Um dos 287 (0,35%) búfalos testados foi positivo para Theileria sp. O sequenciamento de um fragmento do gene 18S rDNA (356 pb) demonstrou que Theileria sp. identificado estava relacionada ao grupo T. buffeli/orientalis . Estudos futuros sobre os sinais clínicos de infecção e o principal vetor neste país são necessários.(AU)

Serosurvey for Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi and Neospora caninum in neighborhood dogs in Curitiba-Paraná, Brazil / Inquérito sorológico para Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi e Neospora caninum em cães comunitários em Curitiba-Paraná, Brasil

Neighborhood dogs may act as reservoirs for several zoonotic protozoan infections, particularly in urban areas, thus constituting a potential public health threat. Accordingly, the aim of the present study was to evaluate the exposure of neighborhood dogs to four protozoan pathogens in public areas with high levels of human movement in Curitiba, southern Brazil. Blood samples from 26 neighborhood dogs were screened by means of the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) for Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi and Neospora caninum, and a questionnaire was answered by the respective keeper. A total of 8/26 dogs (30.7%) seroreactive to T. gondii, 3/26 (11.5%) to N. caninum and 2/26 (7.7%) to both were identified. All the samples were seronegative for T. cruzi and Leishmania spp. Pathogen seroreactivity was not associated with the daily human movements or other epidemiological variables investigated (p > 0.05). In conclusion, the low seroprevalence for T. gondii and N. caninum indicated low environmental and food risk for animal infection and the seronegativity for Leishmania spp. and T. cruzi may reflect the absence of these pathogens in urban areas of Curitiba. Moreover, neighborhood dogs may be used as environmental sentinels for the presence of protozoan pathogens and their vectors.(AU)

Cães comunitários podem atuar como reservatórios para algumas zoonoses causadas por protozoários, principalmente em áreas urbanas, constituindo potencial ameaça à saúde pública. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a exposição de cães comunitários a quatro protozoários em áreas públicas com alta circulação de pessoas, em Curitiba, Sul do Brasil. Amostras de sangue de 26 cães comunitários foram testadas pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) para Leishmania spp., Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi e Neospora caninum, e um questionário foi respondido pelo respectivo mantenedor. Um total de 8/26 (30,7%) foram sororreagentes para T. gondii, 3/26 (11,5%) para N. caninum e 2/26 (7,7%) para ambos. Todas as amostras foram soronegativas para T. cruzi e Leishmania spp. Não houve associação entre sororreatividade para os patógenos pesquisados e o tráfego diário de pessoas e outras variáveis epidemiológicas analisadas (p > 0.05). Conclui-se a baixa soroprevalência para T. gondii e T. cruzi indica baixo risco ambiental e alimentar para a infecção dos animais, e a soronegatividade para Leishmania spp. e T. cruzi pode refletir a ausência desses patógenos em áreas urbanas de Curitiba. Além disso, os cães comunitários podem atuar como sentinelas ambientais quanto à presença de protozoários e seus vetores.(AU)

Risk factors for Toxoplasma gondii infection in sheep and cattle from Fernando de Noronha Island, Brazil / Fatores de risco para infecção por Toxoplasma gondii em ovinos e bovinos na Ilha de Fernando de Noronha, Brasil

Abstract Toxoplasmosis is a zoonotic disease of global distribution that affects all warm-blooded animals. The purpose of this investigation was to determine the prevalence of T. gondii infection and identify the risk factors associated with its occurrence in domestic ruminants raised on the island of Fernando de Noronha, Brazil, and to confirm that cattle and sheep raised in Fernando de Noronha Island present statistically different T. gondii prevalence rates. Serum samples were collected from sheep (n=240) and cattle (n=140) for the detection of antibodies by indirect immunofluorescence. Samples were collected from all the animals on all the farms. Risk factors were analyzed by univariate analysis and logistic regression. The prevalence rate of positive sheep was 85.0% while that of cattle was 10.7%. A multivariate analysis revealed that the site of contact of sheep with felines was a risk factor. For cattle, the risk factors identified in this study were: extensive farming system, water source, more than three cats per farm, and the presence of rats in feed storage locations. The findings revealed a significant difference in the prevalence rates in sheep and cattle raised in this insular environment.(AU)

Resumo A toxoplasmose é uma zoonose cosmopolita que acomete animais de sangue quente. Objetivou-se nessa investigação determinar a prevalência e identificar os fatores de risco associados à ocorrência da infecção por T. gondii em ruminantes domésticos criados na Ilha de Fernando de Noronha e demonstrar que bovinos e ovinos criados na ilha de Fernando de Noronha, Brasil, apresentam prevalências estatisticamente distintas. Foram obtidas amostras de soro sanguíneo de todos os ovinos (n=240) e bovinos (n=140) de todas as propriedades da ilha para a pesquisa de anticorpos na Reação de Imunofluorescência Indireta. Os fatores de risco foram analisados por meio da análise univariada e regressão logística. A prevalência de ovinos reagentes foi de 85,0% e 10,7% para bovinos, que foram significativamente diferentes. Na análise multivariada, local de contato de ovinos com outras espécies foi identificado como fator de risco. Para os bovinos, os fatores de risco foram: sistema extensivo, fonte de água, número de gatos nas propriedades e a presença de rato. Os resultados obtidos demonstram diferença significativa nas prevalências em ovinos e bovinos criados neste ambiente insular.(AU)

Serosurvey of Borrelia in dogs, horses, and humans exposed to ticks in a rural settlement of southern Brazil / Soroprevalência e fatores associados a Borrelia em cães, equinos e humanos expostos a carrapatos em um assentamento rural do sul do Brasil

Abstract The aims of the present study were to serosurvey dogs, horses, and humans highly exposed to tick bites for anti-Borrelia burgdorferi s.l. antibodies, identify tick species present, and determine risk factors associated with seropositivity in a rural settlement of Paraná State, southern Brazil. Eighty-seven residents were sampled, along with their 83 dogs and 18 horses, and individual questionnaires were administered. Immunofluorescence antibody test (IFAT) was performed on serum samples and positive samples were subjected to western blot (WB) analysis. Anti-B. burgdorferi antibodies were found in 4/87 (4.6%) humans, 26/83 (31.3%) dogs, and 7/18 (38.9%) horses by IFAT, with 4/4 humans also positive by WB. Ticks identified were mostly from dogs and included 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale, and 1/67 A. cajennense sensu lato. All (34/34) horse ticks were identified as A. cajennense s.l.. No significant association was found when age, gender, or presence of ticks was correlated to seropositivity to Borrelia sp. In conclusion, although anti-Borrelia antibodies have been found in dogs, horses and their owners from the rural settlement, the lack of isolation, molecular characterization, absence of competent vectors and the low specificity of the commercial WB kit used herein may have impaired risk factor analysis.(AU)

Resumo Os objetivos do presente estudo foram realizar um levantamento sorológico de cães, cavalos e humanos altamente expostos a picadas de carrapatos para anticorpos anti-B. burgdorferi s.l., identificar as espécies de carrapatos presentes, e determinar os fatores de risco associados a soropositividade em um assentamento rural do Estado do Paraná, sul do Brasil. Oitenta e sete residentes foram amostrados junto com seus respectivos 83 cães e 118 cavalos e questionários individuais foram aplicados. O teste de imunofluorescência indireta (IFI) foi realizado nas amostras sorológicas e as positivas foram submetidas a análise por western blot (WB). Anticorpos anti-B. burgdorferi foram detectados em 4/87 (4,6%) humanos, 26/83 (31,3%) cães e 7/18 (38,9%) cavalos pela IFI, com 4/4 humanos também positivos pelo WB. Os carrapatos identificados foram em sua maioria de cães e incluíram 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale e 1/67 A. cajennense sensu lato. Todos (34/34) carrapatos dos cavalos foram identificados como A. cajennense s.l.. Não foram observadas diferenças estatísticas entre idade, sexo ou presença de carrapatos e soropositividade para Borrelia sp. Em conclusão, embora anticorpos anti-Borrelia tenham sido encontrados em cães, equinos e seus proprietários do assentamento rural, a ausência de isolamento, caracterização molecular, ausência de vetores competentes e baixa especificidade do kit comercial de WB utilizado podem ter limitado a análise de fatores de risco.(AU)

PCR and qPCR for detection of Porcine Circovirus type 2 (PCV2) in captive white-lipped (Tayassu pecari) and collared (Tayassu tajacu) peccaries from Southern Brazil / PCR e qPCR para detecção de Circovírus Suíno tipo 2 (PCV2) em catetos (Pecari tajacu) e queixadas (Tayassu pecari) de cativeiro do Sul do Brasil

Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an emergent virus found in commercial pig farms and may cause clinical or subclinical infection. The collared peccary (Pecari tajacu) and white-lipped peccary (Tayassu pecari) may also be infected by PCV2. Accordingly, the aim of this study was to identify PCV2 in whole blood samples of captive peccaries (16 collared and 6 white-lipped) by conventional and quantitative PCR (qPCR). Although the housekeeping gene (c-myc) DNA was successfully amplified, all 22 peccaries tested were negative for PCV2 by both molecular methods. In conclusion, although PCV2 may be endemic in free ranging wild pigs of Central and Northern Brazil, lack of serological and molecular PCV2 evidence (in whole blood) of both captive and free-range wild pigs may indicate low risk of disease in Southern Brazil.

O circovírus suíno tipo 2 (PCV2) é um vírus emergente encontrado em granjas comerciais de suínos que pode causar infecção clínica ou subclínica. Os catetos (Pecari tajacu) e as queixadas (Tayassu pecari) também podem se infectar com PCV2. Deste modo, o objetivo deste estudo foi identificar o PCV2 em amostras de sangue total de pecaris de cativeiro (16 catetos e seis queixadas) por PCR convencional e quantitativo (qPCR). Embora o gene constitutivo (c-myc) tenha sido amplificado com sucesso, todas as 22 amostras de pecaris avaliadas foram negativas para PCV2 em ambos os métodos moleculares. Em conclusão, embora o PCV2 seja endêmico em suínos selvagens de vida livre do Centro e Norte do Brasil, a ausência de evidência sorológica e molecular de PCV2 (em sangue total) de ambos pecaris de cativeiro e de vida livre no Sul do Brasil podem indicar baixo risco de doença no Sul do Brasil.

PCR and qPCR for detection of Porcine Circovirus type 2 (PCV2) in captive white-lipped (Tayassu pecari) and collared (Tayassu tajacu) peccaries from Southern Brazil / PCR e qPCR para detecção de Circovírus Suíno tipo 2 (PCV2) em catetos (Pecari tajacu) e queixadas (Tayassu pecari) de cativeiro do Sul do Brasil

Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an emergent virus found in commercial pig farms and may cause clinical or subclinical infection. The collared peccary (Pecari tajacu) and white-lipped peccary (Tayassu pecari) may also be infected by PCV2. Accordingly, the aim of this study was to identify PCV2 in whole blood samples of captive peccaries (16 collared and 6 white-lipped) by conventional and quantitative PCR (qPCR). Although the housekeeping gene (c-myc) DNA was successfully amplified, all 22 peccaries tested were negative for PCV2 by both molecular methods. In conclusion, although PCV2 may be endemic in free ranging wild pigs of Central and Northern Brazil, lack of serological and molecular PCV2 evidence (in whole blood) of both captive and free-range wild pigs may indicate low risk of disease in Southern Brazil.(AU)

O circovírus suíno tipo 2 (PCV2) é um vírus emergente encontrado em granjas comerciais de suínos que pode causar infecção clínica ou subclínica. Os catetos (Pecari tajacu) e as queixadas (Tayassu pecari) também podem se infectar com PCV2. Deste modo, o objetivo deste estudo foi identificar o PCV2 em amostras de sangue total de pecaris de cativeiro (16 catetos e seis queixadas) por PCR convencional e quantitativo (qPCR). Embora o gene constitutivo (c-myc) tenha sido amplificado com sucesso, todas as 22 amostras de pecaris avaliadas foram negativas para PCV2 em ambos os métodos moleculares. Em conclusão, embora o PCV2 seja endêmico em suínos selvagens de vida livre do Centro e Norte do Brasil, a ausência de evidência sorológica e molecular de PCV2 (em sangue total) de ambos pecaris de cativeiro e de vida livre no Sul do Brasil podem indicar baixo risco de doença no Sul do Brasil.(AU)

Comparative study of two serological tests for detection of anti-Theileria equi antibodies in horses / Estudo comparativo de dois testes sorológicos para detecção de anticorpos anti-Theileria equi em equinos

Theileria equi is the causative agent of worldwide piroplasmosis, an important tick-borne disease of equids associated to a lifetime carrier state of infected horses. Since rapid, accessible and reliable tests have been posted as a challenge for clinicians, the aim of the present study was to verify the agreement between an in-house immunofluorescence antibody assay (IFA) and a commercial competitive inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) in a population of 198 carthorses from Southern Brazil. The horse seroreactivity for T. equi revealed 152/198 (76.8%) positive samples by IFA and 155/198 (78.3%) by cELISA. Using cELISA as gold standard, IFA has shown a sensitivity of 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) and specificity of 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), with a substantial degree of agreement (k = 0.8445). In conclusion, the in-house IFA may be used as a screening test for diagnosis of equine piroplasmosis.(AU)

Theileria equi é o agente causador da piroplasmose no mundo, é uma importante doença transmitida por carrapatos nos equídeos em todo o mundo, e está associada ao estado de portador nos equinos infectados. Uma vez que testes rápidos, acessíveis e confiáveis são considerados um desafio para os clínicos, o objetivo do presente estudo foi avaliar a concordância entre os testes de imunofluorescência indireta (RIFI) e um ensaio imunoenzimático por competição comercial (cELISA) em uma população de 198 equinos de tração na região Sul do Brasil. A sororreatividade dos cavalos para T. equi mostrou 152/198 (76.8%) amostras positivas para RIFI e 155/198 (78.3%) amostras positivas para cELISA. Utilizando o cELISA como padrão ouro, a RIFI demonstrou sensibilidade de 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) e especificidade de 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), com uma concordância de grau substancial (k = 0.8445). Em conclusão, a RIFI pode ser utilizada como um teste de triagem para o diagnóstico de piroplasmose equina.(AU)

Comparative study of two serological tests for detection of anti-Theileria equi antibodies in horses / Estudo comparativo de dois testes sorológicos para detecção de anticorpos anti-Theileria equi em equinos

Theileria equi is the causative agent of worldwide piroplasmosis, an important tick-borne disease of equids associated to a lifetime carrier state of infected horses. Since rapid, accessible and reliable tests have been posted as a challenge for clinicians, the aim of the present study was to verify the agreement between an in-house immunofluorescence antibody assay (IFA) and a commercial competitive inhibition enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) in a population of 198 carthorses from Southern Brazil. The horse seroreactivity for T. equi revealed 152/198 (76.8%) positive samples by IFA and 155/198 (78.3%) by cELISA. Using cELISA as gold standard, IFA has shown a sensitivity of 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) and specificity of 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), with a substantial degree of agreement (k = 0.8445). In conclusion, the in-house IFA may be used as a screening test for diagnosis of equine piroplasmosis.

Theileria equi é o agente causador da piroplasmose no mundo, é uma importante doença transmitida por carrapatos nos equídeos em todo o mundo, e está associada ao estado de portador nos equinos infectados. Uma vez que testes rápidos, acessíveis e confiáveis são considerados um desafio para os clínicos, o objetivo do presente estudo foi avaliar a concordância entre os testes de imunofluorescência indireta (RIFI) e um ensaio imunoenzimático por competição comercial (cELISA) em uma população de 198 equinos de tração na região Sul do Brasil. A sororreatividade dos cavalos para T. equi mostrou 152/198 (76.8%) amostras positivas para RIFI e 155/198 (78.3%) amostras positivas para cELISA. Utilizando o cELISA como padrão ouro, a RIFI demonstrou sensibilidade de 91.6% (95% CI = 86.18-95.03%) e especificidade de 76.7% (95% CI = 62.26-86.85%), com uma concordância de grau substancial (k = 0.8445). Em conclusão, a RIFI pode ser utilizada como um teste de triagem para o diagnóstico de piroplasmose equina.

Equine infectious anemia in carthorses from urban areas of southern Brazil / Anemia infecciosa equina em cavalos carroceiros de áreas urbanas do sul do Brasil

Equine infectious anemia (EIA) is an infectious viral disease caused by a Lentivirus, which affects equids worldwide. The disease has no currently treatment and euthanasia of infected animals is mandatory by the Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA) as basis for disease control. Carthorses are used to move daily throughout the cities with their owners to collect recycling materials. Considering the socio-economic importance of this group of horses, the aim of this study was to determine the infection rate of EIA virus in carthorses from urban areas of Curitiba and surroundings. The detection of anti-EIA virus antibodies was performed by the agar gel immunodiffusion test (AGID). One out of 97 (1.03%) horse was positive for EIA. Active surveillance programs are crucial for monitoring, prevention and control of infectious diseases, particularly in carthorses, which may act as disseminators of pathogens.(AU)

A anemia infecciosa equina (AIE) é uma doença infecciosa causada por um Lentivírus, acometendo equídeos em todo o mundo. Esta doença não possui tratamento e a eutanásia dos animais infectados é obrigatória pelo Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) como base para o controle da doença. Os cavalos carroceiros são utilizados diariamente pelos seus proprietários na coleta de materiais recicláveis nas cidades. Considerando a importância socioeconômica deste grupo de cavalos, o objetivo deste estudo foi determinar a taxa de infecção pelo vírus da AIE em cavalos carroceiros de áreas urbanas de Curitiba e região metropolitana. A detecção de anticorpos anti-AIE foi realizada pelo teste de imunodifusão em ágar gel (IDGA). Apenas 1 de um total de 97 (1,03%) cavalos foi positivo para AIE. Programas de vigilância ativa são cruciais para o monitoramento, prevenção e controle de doenças infecciosas, particularmente em cavalos carroceiros que podem atuar como disseminadores de patógenos.(AU)