Resumo
A relação hospedeiro-parasita é caracterizada como uma interação alelobiótica construída por meio de processos evolutivo-adaptativos com hospedeiros assintomáticos. No ambiente silvestre é notório o equilíbrio desta relação, porém quando há intervenção antropogênica um ciclo enzoótico pode se estabelecer proporcionando o surgimento de enfermidades emergentes ou reemergentes. Dentre estes agentes etiológicos, a Bartonella spp. é um bacilo gram-negativo da classe Proteobacteria que apresentam tropismo por eritrócitos e células endoteliais, com infecção já descrita em animais das Ordens: Rodentia, Lagomorpha, Carnivora, Artiodactyla, Eulipotyphla e Chiroptera. A infecção pela bactéria pode estar associada à linfadenite, endocardite, angiomatose bacilar e peliose hepática em humanos. Treze espécies de Bartonella spp. são tidas como zoonóticas. O objetivo desta revisão está em apontar para a comunidade científica a bartonelose como uma doença de notificação obrigatória, assim como, os possíveis hospedeiros em animais domésticos e silvestres e sua etiopatogenia.(AU)
The host-parasite relationship is characterized as an allelobiotic interaction built through evolutionary-adaptive processes with asymptomatic hosts. In the wild environment, the balance of this relationship is notorious, but when there is anthropogenic intervention, an enzootic cycle can be established, providing the emergence of emerging or reemerging diseases. Among these etiologic agents, Bartonella spp. is a gram-negative bacillus of the Proteobacteria class that presents tropism for erythrocytes and endothelial cells, with infection already described in animals of the Orders: Rodentia, Lagomorpha, Carnivora, Artiodactyla, Eulipotyphla and Chiroptera. Infection by the bacterium may be associated with lymphadenitis, endocarditis, bacillary angiomatosis and peliosis hepatica in humans. Thirteen species of Bartonella spp. are considered zoonotic. The objective of this review is to point out to the scientific community bartonellosis as a notifiable disease, as well as the possible hosts in domestic and wild animals and their etiopathogenesis.(AU)
La relación hospedador-parásito se caracteriza por ser una interacción alelobiótica construida mediante procesos evolutivo-adaptativos con hospedadores asintomáticos. En el medio silvestre, el equilibrio de esta relación es notorio, pero cuando hay intervención antropogénica, puede establecerse un ciclo enzoótico, propiciando la aparición de enfermedades emergentes o reemergentes. Entre estos agentes etiológicos, Bartonella spp. es un bacilo gramnegativo de la clase Proteobacteria que presenta tropismo por eritrocitos y células endoteliales, con infección ya descrita en animales de los Órdenes: Rodentia, Lagomorpha, Carnivora, Artiodactyla, Eulipotyphla y Chiroptera. La infección por la bacteria puede estar asociada a linfadenitis, endocarditis, angiomatosis bacilar y peliosis hepática en humanos. Trece especies de Bartonella spp. se consideran zoonóticas. El objetivo de esta revisión es señalar a la comunidad científica la bartonelosis como enfermedad de declaración obligatoria, así como los posibles hospedadores en animales domésticos y salvajes y su etiopatogenia.(AU)
Assuntos
Humanos , Infecções por Bartonella/epidemiologia , Interações Hospedeiro-Parasita , Bartonella/patogenicidade , Estudos EpidemiológicosResumo
Bactérias do gênero Bartonella são agentes zoonóticos, podendo causar danos autolimitantes ou fatais aos seus hospedeiros. Essas bactérias infectam diversos animais, e são transmitidas por vetores como pulgas, piolhos, moscas e carrapatos. Além da diversidade de hospedeiros ser um desafio epidemiológico, essas bactérias são fastidiosas e seu isolamento em meio de cultura é uma constante dificuldade. O objetivo do presente estudo foi padronizar a curva de crescimento de Bartonella spp. em meio TSB (Tryptic Soy Broth) suplementado e verificar a ocorrência de transmissão transovariana e perpetuação transestadial em carrapatos da espécie Amblyomma sculptum, com sangue infectado por Bartonella spp., através de alimentação artificial. Para avaliar o crescimento de Bartonella spp. foi utilizado o meio de cultura (TSB), suplementado com soro fetal bovino, sacarose e anfotericina. As contagens de UFC para a formação da curva de crescimento foram realizadas em placas pelo método de superfície. Uma vez estabelecida a fase ótima de crescimento da bactéria, chegando na concentração 107 a mesma foi utilizada para infectar sangue de coelho previamente testado negativo para Bartonella spp. Fêmeas (49) de A. sculptum foram alimentadas artificialmente durante duas horas com o sangue infectado, por meio de tubos de microhematócrito, sendo, em seguida, alimentadas naturalmente em coelhos até o completo ingurgitamento. Ninfas (98) também foram alimentadas artificialmente durante quatro dias, por meio de membrana natural feita de pele de camundongo, para a avaliação da perpetuação transestadial de Bartonella spp. Após oviposição das fêmeas adultas alimentadas e adultos mudados das ninfas alimentadas artificialmente foram testados molecularmente detecção do DNA do patógeno. Os resultados da curva de crescimento da bactéria mostraram que no meio TSB houve um crescimento lento, porém bem delimitado, com a fase de latência se estendendo por 21 horas, fase exponencial ou log de 40 a 100 horas e fase estacionária se mantendo de 100 a 160 horas, e iniciando seu declínio após esse período. Ensaio de qPCR para Bartonella spp., baseado no gene nuoG dos ovos das 30 fêmeas sobreviventes após alimentação artificial, mostraram-se negativos, evidenciando que não houve transmissão transovariana. Uma fêmea resultante de iii uma ninfa alimentada artificialmente foi positiva, no entanto, a possibilidade de perpetuação transestadial de Bartonella spp. por essa espécie de carrapato não pode ser confirmada, haja vista a presença de sangue residual no referido espécime de carrapato. Conclui-se que o meio TSB se mostrou adequado para a realização da curva de crescimento sendo que conseguiu demonstrar todas as fases necessárias na curva. A alimentação artificial dos adultos demonstrou que não há a transmissão transestadial, porém, a alimentação artificial das ninfas não foi conclusiva devido a uma fêmea positiva na qPCR.
Bacteria of the genus Bartonella are zoonotic agents, being able cause self-damage or fatal to their hosts. These bactéria infec many animals, and are transmitted by vectors like fleas, lice, flies and ticks. In addition to host diversity being na epidemiological challenge, these bactéria are fastidious and their isolation in a culture medium is a constant difficulty. The goal of this study was standardize the growth curve of Bartonella spp. in medium TSB (Tryptic Soy Broth) supplemented and verify the occurrence of transovarian transmission and transstate perpetuation in ticks of the species Amblyomma sculptum with blood infected by Bartonella spp., through artificial feeding. To evaluate the growth of Bartonella spp. Culture medium (TSB) was used, supplemented with fetal bovine serum, sucrose and amphotericin. ScoreS CFU for the formation of the growth curve were performed on plates by the surface method. Once the optimal bacterial growth phase is established, arriving at concentration 107 it was used to infected rabbit blood previously tested negative for Bartonella spp. Females (49) of A. sculptum were artificially fed for two hours with infected blood, through microhematocrit tubes, then being naturally fed to rabbits until complete engorgement. Nymphs (98) were also artificially fed for four days, through a natural membrane made of mouse skin, for the assessment of the transstate perpetuation of Bartonella spp. After oviposition of the fed adult females and changed adults from artifically fed nymphs were tested molecularly the DNA of the pathogen. The results of the bacterial growth curve showed that in the TSB medium there was a slow growth, however well delimited, with the latency phase extending over 21 hours, exponential or log phase iv from 40 to 100 hours and stationary phase remaining from 100 to 160 hours, and starting its decline after that period. qPCR assay for Bartonella spp., based on the nuoG gene in the eggs of 30 surviving females afte artificial feeding, were negative, showing that there was no transovarian transmission. A female resulting from na artificially fed nymph was positive, however, the possibility of transstate perpetuation of Bartonella spp. by this species of tick cannot be confirmed, have a view the presence of residual blood in the above tick specimen. It is concluded that the TSB medium proved to be adequate for the realization of the growth curve being able to demonstrate all the necessary phases in the curve. The artificial feeding of adults demonstrated that there is no transstate transmission, however, the artificial feeding of the nymphs was not conclusive due to a qPCR positive female.
Resumo
Estima-se que 75% das doenças emergentes compreendam zoonoses, cuja maioria tem como fontes de infecção animais selvagens; destas, cerca de 22,8% são veiculadas por vetores artrópodes. Desta forma, monitorar a presença de patógenos em animais selvagens em nichos compartilhados com seres humanos se torna um importante método preventivo de infecções zoonóticas. As famílias Bartonellaceae e Anaplasmataceae englobam Alphaproteobactérias Gram-negativas, intracelulares facultativas e obrigatórias, respectivamente, que vêm sendo identificadas em uma ampla variedade de mamíferos, incluindo seres humanos. Já os micoplasmas hemotróficos são bactérias Gram-negativas sem parede celular, de localização epieritrocitária, que podem causar desde infecções assintomáticas até anemia hemolítica severa, tanto em animais como em humanos. Coxiella burnetii é o principal representante da família Coxiellaceae (Gammaproteobactérias) e é conhecida por causar a Febre Q em humanos. Apesar de ser transmitido por aerossóis, esse agente vem sendo detectado em diversos ectoparasitos que talvez possam atuar em seu ciclo de vida. Já os piroplasmas são protozoários da ordem Piroplasmida e causam principalmente anemia hemolítica em animais de produção, domésticos e, eventualmente, em seres humanos. Embora esses agentes supracitados vêm sendo cada vez mais estudados em quirópteros, ainda pouco se sabe a respeito de sua ocorrência e diversidade genética em morcegos no Brasil. Os principais ectoparasitos encontrados nesses animais são representados por moscas das famílias Streblidae e Nycteribiidae, carrapatos, e ácaros das famílias Spinturnicidae e Macronyssidae. Considerando os patógenos de interesse em Saúde Pública supracitados e a expressiva representatividade de animais da ordem Chiroptera no Brasil, objetivou-se obter informações sobre a ocorrência e diversidade genética de agentes Anaplasmataceae, Bartonellaceae, Mycoplasmataceae, Coxiellaceae e protozoários da ordem Piroplasmida em quirópteros e seus respectivos ectoparasitos coletados em área periurbana da cidade de Campo Grande, estado do Mato Grosso do Sul, no centro-oeste brasileiro. Um total de 418 amostras (135 amostras de baço, 133 de sangue e 150 ectoparasitos) foram coletados de 135 animais das famílias Phyllostomidae, Vespertillionidae e Mollossidae. Por meio de técnicas moleculares verificou-se positividade de 18,13% (34/418) para Bartonella spp. dentre todas as amostras coletadas. Dessas, 17 amostras foram clonadas para o gene gltA a fim de obter 3 clones de cada uma para acessar a diversidade genotípica dentro da mesma amostra biológica. Com os 51 gltA-clones obtidos foi possível observar 13 genótipos diferentes, sendo que pelo menos dois ocorreram dentro de uma mesma amostra. Análises filogenéticas baseadas nos genes ftsZ, rpoB e nuoG confirmaram a alta diversidade de genótipos de Bartonella spp. em quirópteros e seus ectoparasitos. Para agentes Anaplasmataceae, foi observada positividade de 1,67% (7/418), 11,96% (50/418) e 13,63% (57/418) das amostras testadas para Anaplasma spp. (16S rRNA), Ehrlichia spp. (dsb) e Neorickettsia spp. (16S rRNA), respectivamente. As sequências obtidas mostraram-se similares a Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia minasensis, Neorickettsia risticii, e Neorickettsia findlayensis por análise iv pelo nBLAST, e filogeneticamente relacionado a Ehrlichia ruminantium baseado no gene gltA. Trata-se da primeira evidência molecular de agentes Anaplasmataceae em quirópteros e ectoparasitos associados no Brasil. Já para hemoplasmas, positividade de 13,6% (57/418) foi observada. Dentre as 24 sequências obtidas pelo gene 16S rRNA foi possível encontrar 12 genótipos diferentes que se distribuíram pelo macroclado do grupo haemofelis. As duas sequências 23S rRNA obtidas se posicionaram próximas a Candidatus Mycoplasma haematohydrochaerus, M. haemofelis e M. haemocanis. Todas as amostras de sangue e baço dos morcegos amostrados mostraram-se negativas na qPCR para C. burnetii baseada no gene IS1111. Para piroplasmídeos, 17 dos 135 (12,6%) morcegos amostrados mostraram-se positivos para agentes da ordem Piroplasmida (gene 18S rRNA). Trata-se do primeiro relato molecular de piroplasmídeos em quirópteros no Brasil. A análise filogenética mostrou a possível ocorrência de duas novas espécies: Piroplasmid n. sp. Artibeus spp., posicionado filogeneticamente próximo a Babesia canis e B. vogeli, e Piroplasmid n. sp. P. discolor, que formou um clado monofilético. Infelizmente, as amostras de ectoparasitos não puderam ser utilizadas na detecção de piroplasmídeos e C. burnetii. Enquanto moscas Streblidae mostraram positividade nos ensaios moleculares para Bartonella spp. (11/64), Ehrlichia spp. (7/64) e Mycoplasma spp. (1/64), carrapatos Ornithodoros hasei mostraram-se positivos para Ehrlichia spp. (3/19), Anaplasma spp. (1/19) e Neorickettsia spp. (1/19); por fim, ácaros Spinturniciidae e Macronyssidae apresentaram positividade para Bartonella spp. (4/21 Macronyssidae) e Ehrlichia spp. (18/21 Macronyssidae e 6/46 Spinturnicidae). Ainda, co-positividade para os diversos agentes pesquisados foi observada no presente estudo. Como conclusão, morcegos não-hematófagos de área periurbana do centro-oeste brasileiro atuam como hospedeiros para diversos genótipos de Bartonella spp. e hemoplasmas, para Ehrlichia spp. filogeneticamente associadas a E. ruminantium e para duas possíveis novas espécies de piroplasmídeos.
It is estimated that 75% of emerging diseases comprise zoonoses, most of which have wild animals as sources of infection; of these, about 22.8% are carried by arthropod vectors. Thus, monitoring the presence of pathogens in wild animals in niches shared with humans becomes an important preventive method for zoonotic infections. Bartonellaceae and Anaplasmataceae families comprise Gram-negative, facultative and obligate intracellular Alphaproteobacteria, respectively, that have been identified in a wide variety of mammals, including humans. On the other hand, hemotrophic mycoplasmas are epierythrocytic Gram-negative bacteria lacking cell wall, which can cause from asymptomatic infections to severe hemolytic anemia, both in animals and in humans. Coxiella burnetii is the main representative of the Coxiellaceae family (Gammaproteobacteria) and is known to cause Q fever in humans. Despite being transmitted by aerosols, this agent has been detected in several ectoparasites that may act in its life cycle. Piroplasmids, on the other hand, are protozoa of the order Piroplasmida, which can cause hemolytic anemia in farm and domestic animals and, occasionally, in humans. Although the abovementioned agents have been increasingly studied in bats, little is known about their occurrence and genetic diversity in bats from Brazil. The main ectoparasites found in these animals are Streblidae and Nycteribiidae flies, soft ticks, and Spinturnicidae and Macronyssidae mites. Considering the abovementioned pathogens of interest in Public Health and the expressive representation of animals of the order Chiroptera in Brazil, this study aimed to investigate the occurrence and genetic diversity of Anaplasmataceae, Bartonellaceae, Mycoplasmataceae, Coxiellaceae agents and protozoa of the order Piroplasmida in chiropterans and their respective ectoparasites collected in a periurban area of the city of Campo Grande, state of Mato Grosso do Sul, in central-western Brazil. A total of 418 samples (135 spleen, 133 blood and 150 ectoparasites) were collected from 135 animals of the Phyllostomidae, Vespertillionidae and Mollossidae families. Based on molecular assays, positivity of 18.13% (34/418) for Bartonella spp. was found among all collected samples. Out of these, 17 samples had their amplified Bartonella gltA amplicons cloned in order to obtain 3 clones of each one aiming at assessing the genotypic diversity within the same sample. Among the 51 Bartonella gltA-clones obtained, 13 different genotypes were found, with at least two occurring within individual samples. Phylogenetic analyses based on the ftsZ, rpoB and nuoG genes confirmed the high genotype diversity of Bartonella spp. in bats and their ectoparasites. For Anaplasmataceae agents, positivity of 1.67% (7/418), 11.96% (50/418) and 13.63% (57/418) was observed for Anaplasma spp. (16S rRNA), Ehrlichia spp. (dsb) and Neorickettsia spp. (16S rRNA), respectively. The sequences obtained were closely related to Anaplasma phagocytophilum, Ehrlichia minasensis, Neorickettsia risticii, and Neorickettsia findlayensis by BLASTn analyses, and phylogenetically related to Ehrlichia ruminantium based on gltA gene. This is the first molecular evidence of Anaplasmataceae agents in bats and associated ectoparasites from Brazil. Positivity of 13.6% (57/418) for hemoplasmas was found. Among the 24 sequences obtained by the 16S rRNA gene, it was possible to find 12 different vi hemoplasma genotypes that were distributed into Haemofelis group. The two obtained 23S rRNA hemoplasma sequences were closely related to Candidatus Mycoplasma haematohydrochaerus, M. haemofelis and M. haemocanis. All bats blood and spleen samples were negative in the qPCR for C. burnetii based on the IS1111 gene. Seventeen of the 135 (12.6%) bats were positive for Piroplasmida (18S rRNA gene). This is the first molecular report of piroplasmids in bats from Brazil. Phylogenetic analysis showed the possible occurrence of two new species: Piroplasmid n. sp. Artibeus spp., which was closely related to Babesia canis and B. vogeli, and Piroplasmid n. sp. P. discolor, which formed a monophyletic clade. Unfortunately, the ectoparasite samples could not be used in the PCR assays for piroplasmids and C. burnetii. While Streblidae flies showed positivity in molecular assays for Bartonella spp. (11/64), Ehrlichia spp. (7/64) and Mycoplasma spp. (1/64), Ornithodoros hasei ticks were positive for Ehrlichia spp. (3/19), Anaplasma spp. (1/19) and Neorickettsia spp. (1/19). Spinturnicidae and Macronyssidae mites were positive for Bartonella spp. (4/21 Macronyssidae) and Ehrlichia spp. (18/21 Macronyssidae and 6/46 Spinturnicidae). Also, co-positivity for the different agents studied was observed. In conclusion, non-hematophagous bats from a periurban area of central-western Brazil act as hosts for several genotypes of Bartonella spp. and hemoplasms, Ehrlichia spp. closely related to E. ruminantium, and for two possible new species of piroplasmids.
Resumo
O gênero Bartonella é composto por bacilos gram-negativos que apresentam tropismo por eritrócitos e células endoteliais. Descritas em ordens: Rodentia, Lagomorpha, Carnivora, Artiodactyla, Eulipotyphla e Chiroptera. Em seres humanos, 13 espécies zoonóticas, estando associadas a distúrbios, como: doença da arranhadura do gato, linfadenite, febre, endocardite, angiomatose bacilar e peliose hepática. O ciclo deste microorganismo permanece indeterminado. Deste modo, estudos relacionados à avaliação de microbiota de fígado apresentam crescente importância dentro da hepatologia. E à escassez de pesquisas sobre o tema e a exponencial relevância da Bartonella como causador de enfermidades vem estimulando avaliações moleculares desta infecção em reservatórios em quirópteros. Assim, objetivou analisar em morcegos a ocorrência de Bartonela spp., a fim de que pudesse melhor caracteriza-la em sua distribuição geográfica, variabilidade genética e em seus hospedeiros. Assim, até o presente momento, foram analisadas 116 amostras de fígados de quirópteros do Estado de São Paulo dos 374 mamíferos, com a extração de DNA total realizada com a utilização de kit comercial. Os ensaios de PCR foram desenvolvidos para amplificação parcial do gene gltA do gênero Bartonella spp (350 bp). Os amplicons das amostras positivas foram purificados e sequenciados nos sentidos forward e reverse, as sequências consenso foram obtidas no software BioEdit (v7.2.6) e submetidas na plataforma BLAST. Em seguida, alinhadas com um banco de dados contendo sequências representativas das 45 espécies do gênero disponíveis no banco de dados do Genbank. Para análise filogenética, empregou-se o método de Maximum-Likelihood e o modelo Kimura 2-parâmetros no software MEGA v7.0, para identificação taxonômica dos isolados. A distância nucleotídica e de aminoácidos foi calculada utilizando-se o software Geneious v8.1.3. Para resultados parciais foi encontrado 5 amostras positivas para Bartonella spp. Nas seguintes espécies de morcegos: Platyrrhinus lineatus (n=1), Glossophaga soricina (n=2) e Sturnira lilium (n=1). Ainda falta realizar a análise das amostras sequenciadas, assim como, a extração dos demais fígados.
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Resumo
As enfermidades transmitidas por artrópodes vêm sendo recentemente estudadas em animais selvagens brasileiros, os quais podem atuar como hospedeiros tanto para os vetores quanto para os patógenos, muitos dos quais apresentam potencial zoonótico. O presente estudo tem como objetivo investigar a ocorrência de agentes transmitidos por artrópodes (agentes Anaplasmataceae, Bartonella spp., mycoplasmas hemotróficos, Rickettsia spp., Hepatozoon spp. e piroplasmideos) em animais selvagens, cães domésticos e seus respectivos ectoparasitos, amostrados na região do Pantanal sul matogrossense, por meio de métodos sorológicos e moleculares. Para tal, 31 Nasua nasua, 78 Cerdocyon thous, sete L. pardalis, 42 cães, 110 roedores e 30 marsupiais foram capturados. Os carrapatos recolhidos (1582) dos animais pertenciam às espécies Amblyomma sculptum, Amblyomma parvum, Amblyomma ovale, Amblyomma tigrinum, Rhipicephalus microplus, Rhipicephalus sanguineus sensu lato e Amblyomma auricularium. Adicionalmente, 80 pulgas Polygenis (Polygenis) bohlsi bohlsi foram recolhidas. Quatorze (17,9%) C. thous, sete (16,6%) cães e um (3,2%) N. nasua mostraram-se soropositivos (títulos80) para Ehrlichia canis, com títulos de anticorpos variando de 80 a 1280. Nenhum animal mostrou-se soropositivo Anaplasma phagocytophilum. Nove cães, dois C. thous, um N. nasua, oito roedores, cinco marsupiais e um pool de pulgas P. (P.) b. bohlsi mostram-se positivos para Ehrlichia spp. Todos os cães e o pool de pulgas P. (P.) b. bohlsi positivos para Ehrlichia spp. foram também positivos em para o ensaio em tempo real quantitativo (qPCR) para E. canis, baseado no gene dsb. Sete N. nasua, dois C. thous, um L. pardalis, quatro roedores, três marsupiais, 15 carrapatos A. sculptum, dois A. ovale, dois A. parvum e um pool de larvas de Amblyomma spp. foram positivos para Anaplasma spp. Co-positividade ou co-soropositividade para Ehrlichia spp. e Anaplasma spp. foi observada em dois cães, um N. nasua, um C. thous e dois marsupiais. Trinta e cinco roedores selvagens e três pools de pulgas P. (P.) b. bohlsi, mostraram-se positivos nos ensaios moleculares para Bartonella spp. A análise filogética revelou que pelo menos dois genótipos diferentes estão circulando entre os roedores amostrados no bioma Pantanal. Os resultados parciais sugerem que a pulga P. (P.) b. bohlsi possa estar atuando como um possível vetor de Bartonella nesta região. Vinte e quatro N. nasua, três C. thous, dois cães e um roedor mostraram-se positivos para Mycoplasma spp. A análise filogenética apontou que os cães, C. thous e N. nasua aparentam estar sendo parasitados pela mesma espécie de Mycoplasma spp., filogenéticamente relacionada a M. haemocanis/M. haemofelis e que provavelmente um novo genótipo de Mycoplasma spp. está circulando entre os N. nasua e C. thous amostrados no bioma Pantanal. Vinte e sete (64,2%) cães, 59 (7,6%) C. thous e seis (85,7%) L. pardalis mostraram-se soropositivas para pelo menos uma espécie de Rickettsia. Para 17 (40,4%) cães, 33 (42,3%) C. thous e dois (33,3%) L. pardalis, foram observadas reações homólogas para Rickettsia amblyommatis. Cento e dezesseis carrapatos (93 A. parvum, 14 A. sculptum, três A. auricularim e seis pools de larvas de Amblyomma) e uma amostra de sangue obtida de C. thous, mostraram-se postivas nos ensaios para as espécies de Rickettsia do grupo da febre maculosa. As amostras seqüenciadas obtidas dos carrapatos A. parvum, mostraram-se filogenéticamente relacionadas com 'Candidatus Rickettsia andeanae'. Uma alta ocorrência de Hepatozoon foi encontrada nos carnívoros amostrados (C. thous [91,02%], cães [45,23%], N. nasua [41,9%] e L. pardalis [71,4%]), porém nenhum artrópode mostrou-se positivo. Adicionalmente, 24 roedores e um marsupial também mostraram-se positivos para Hepatozoon spp. Com base na análise filogenética, os C. thous, L. pardalis, N. nasua, cães, roedores e marsupiais aparentam não estar sendo parasitados pela mesma espécie de Hepatozoon spp. Sete cães, um C. thous, cinco L. pardalis, três N. nasua, seis roedores, oito carrapatos A. parvum, dois A. sculptum e um A. ovale mostraram-se positivos para os ensaios PCR de piroplasmídeos. Genótipos filogeneticamente relacionados com Babesia canis vogeli foram detectados em seis cães e cinco roedores. Genótipos filogeneticamente relacionados com Babesia caballi foram detectados em um C. thous, um cão, um carrapato A. ovale e um A. sculptum e genótipos relacionados com Babesia bigemina e Babesia bovis foram detectados em quatro carrapatos A. parvum. Quatro sequências obtidas de A. parvum, três N. nasua e um roedor mostraram-se filogeneticamente relacionadas com Theileria equi. Por fim, Cytauxzoon spp. foi detectado em quatro L. pardalis .O presente trabalho mostra, portanto, a ocorrência de agentes transmitidos por artrópodes vetores em animais selvagens e domésticos no Panatanal sul matogrossense.
The diseases transmitted by arthropods have been recently studied in Brazilian wildlife, which can act as hosts for vectors and pathogens, many of which have zoonotic potential. The present work aimed to investigate the occurrence of tick-borne agents (Anaplasmataceae agents, Bartonella spp., hemotropic mycoplasmas, Rickettsia spp., Hepatozoon spp. and piroplasms) in wild animals, domestic dogs and their respective ectoparasites, in southern Pantanal region, central-western Brazil, by serological and molecular assays. For this reason, 31 Nasua nasua, 78 Cerdocyon thous, seven L. pardalis, 42 dogs, 110 rodents and 30 marsupials were captured. The ticks collected (1582) from animals belonged to the species Amblyomma sculptum, Amblyomma parvum, Amblyomma ovale, Amblyomma tigrinum, Rhipicephalus microplus, Rhipicephalus sanguineus sensu lato and Amblyomma auricularium. Additionally, 80 Polygenis (Polygenis) bohlsi bohlsi fleas were collected. Overall, 14 (17.9%) C. thous, seven (16.6%) dogs and one (3.2%) N. nasua were seroreactive (titer80) to Ehrlichia canis, with titers ranging from 80 to 1280. No animal showed to be seroreactive for A. phagocytophilum antigen. Nine dogs, two C. thous, one N. nasua, eight rodents, five marsupials and one P. (P.) b. bohlsi pool were positive for Ehrlichia spp. All positive dogs and the only P. (P.) b. bohlsi pool positive for Ehrlichia spp. were also positive in specific E. canis-qPCR based on dsb gene. Seven N. nasua, two dogs, one C. thous, one L. pardalis, four rodents, three marsupials, 15 A. sculptum, two A. ovale, two A. parvum and one Amblyomma larvae pool were positive for Anaplasma spp. Co-positivity or co-seropositivity for Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. was observed in two dogs, one N. nasua, one C. thous and two marsupials. Thirty-five rodents and three P. (P.) b. bohlsi flea pools, showed to be positive to Bartonella spp. in the molecular assays. The phylogenetic analysis revealed that at least two different genotypes are circulating among the rodents sampled in the Pantanal biome. Partial results suggest that the flea P. (P.) b. bohlsi may be acting as a possible Bartonella vector in this region. Twenty-four N. nasua, three C. thous, two dogs and one rodent, were positive for Mycoplasma spp. Phylogenetic analysis indicated that dogs, C. thous and N. nasua appear to share the same Mycoplasma spp. species, closely related to M. haemocanis / M. haemofelis and probably a new genotype of Mycoplasma spp. is circulating among the N. nasua and C. thous sampled in the Pantanal biome. Overall, 27 (64.2%) dogs, 59 (75.6%) C. thous and six (85.7%) L. pardalis were seroreactive to at least one Rickettsia species. For 17 (40.4%) dogs, 33 (42.3%) C. thous, and two (33.3%) L. pardalis, homologous reactions to Rickettsia amblyommatis were suggested. One hundred and sixteen ticks (93 A. parvum, 14 A. sculptum, three A. auricularim and six Amblyomma larvae pools) and one blood sample obtained from C. thous showed positive results for Rickettsia spotted fever group species. The sequenced samples obtained from A. parvum ticks showed to be closely related to 'Candidatus Rickettsia andeanae'. A high occurrence of Hepatozoon was found in carnivores (C. thous [91.02%], dogs [45.23%], N. nasua [41.9%] and L. pardalis [71.4%]), however no arthropod showed positive results. Additionally, twenty-four rodents and a marsupial also showed positivity to Hepatozoon spp. Based on phylogenetic analysis, C. thous, L. pardalis, N . nasua, dogs, rodents and marsupials appear not to share the same of Hepatozoon species. Seven dogs, one C. thous, five L. pardalis, three N. nasua, six rodents, eight A. parvum, two A. sculptum and one A. ovale were positive for piroplasmids-PCR assays. Genotypes closely related to Babesia vogeli were detected in six dogs and five rodents. While genotypes closely related to Babesia caballi were detected in one C. thous, one dog, one A. ovale and one A. sculptum, genotypes closely related to Babesia bigemina and Babesia bovis were detected in four A. parvum ticks. Four sequences obtained from A. parvum, three N. nasua and one wild rodent were closely related to Theileria equi. Lastly, Cytauxzoon spp. was detected in four L. pardalis. The present work shows the occurrence of vector-borne agents in wild and domestic animals in southern mato grosso Pantanal.
Resumo
Hemoparasitoses transmitidas por artrópodes que infectam felinos domésticos têm sido consideradas emergentes na medicina veterinária e humana. A erliquiose felina tem sido descrita em diversas regiões do mundo, porém pouco se sabe sobre as espécies envolvidas, transmissão e patogenia da mesma. Outra hemoparasitose importante é a bartonelose, que se destaca por ser de caráter zoonótico. Os felinos domésticos são considerados os principais reservatórios e portadores de Bartonella henselae, B. clarridgeiae e B. koehlerae, sendo o principal vetor, a pulga Ctenocephalides felis. Alguns protozoários transmitidos por artrópodes como, Hepatozoon spp., Cytauxzoon spp., Babesia spp. também têm sido descritos circulando em felinos domésticos em diversos países. O objetivo deste é fornecer dados sobre os aspectos etiológicos e epidemiológicos de determinadas hemoparasitoses em felinos domésticos dos municípios de Cuiabá e Várzea Grande do estado de Mato Grosso, dando subsídios para a melhor compreensão destas enfermidades em felinos. Sendo assim, técnicas moleculares e sorológicas foram aplicadas em amostras de sangue e soro de felinos oriundos de distintas localidades de ambos os municípios, com o intuito de descrever as espécies de parasitas circulantes na região.
Arthropod-borne hemoparasites infecting domestic felines have been considered emerging in veterinary and human medicine. Feline ehrlichiosis has been described in several regions of the world, but little is known about the species involved, transmission and pathogenesis of it. Another important hemoparasitosis is bartonellosis, which stands out because of its zoonotic nature. Domestic felids are considered the main reservoirs and carriers of Bartonella henselae, B. clarridgeiae and B. koehlerae, being the main vector, the flea Ctenocephalides felis. Some protozoa transmitted by arthropods such as Hepatozoon spp., Cytauxzoon spp., Babesia spp. Have also been described circulating in domestic felines in several countries. The objective of this study is to provide data on the etiological and epidemiological aspects of certain hemoparasitoses in domestic felines in the municipalities of Cuiabá and Várzea Grande in the state of Mato Grosso, providing subsidies for a better understanding of these diseases in felines. Thus, molecular and serological techniques were applied in blood and serum samples from felines from different localities of both municipalities, with the purpose of describing the species of circulating parasites in the region.