Resumo
We analyzed 77 Salmonella spp. strains, from which 20 were isolated from broilers (cloacal swabs) and 57 from chickens from slaughterhouses under federal inspection. The following serotypes were identified: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) and Salmonella enterica (O: 9.12) (1). Fifteen strains (19.5%) were resistant to enrofloxacin, six (7.8%) to ciprofloxacin, and 26 (33.8%) to nalidixic acid in the Disk Diffusion Test. The fifteen enrofloxacin resistant strains were selected for the PCR to detect the genes gyrA, gyrB, parC, and parE, and genetic sequencing to identify mutations in these genes. Five strains (33.3%) had point mutations in the gyrA gene, and one (6.7%) presented a point mutation in the parC gene. None of the 15 strains had mutations in the gyrB and parE genes, and none had more than one mutation in the gyrA gene or the other genes. The presence of point mutations in the strains studied corroborates with the phenotypic resistance observed to nalidixic acid. However, it did not explain the resistance to fluoroquinolones found in the 15 strains. Other mechanisms may be related to the fluoroquinolones resistance, highlighting the need for additional mutation screening.(AU)
Foram analisadas neste estudo 77 estirpes de Salmonella spp., 20 isoladas de frangos vivos (suabes de cloaca) e 57 isoladas de carcaças, provenientes de abatedouros frigoríficos sob Inspeção Federal. Foram identificados os seguintes sorotipos: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) e Salmonella enterica (O: 9,12) (1). Do total de estirpes estudadas, 15 (19,5%) se mostraram resistentes à enrofloxacina, seis (7,8%) à ciprofloxacina e 26 (33,8%) ao ácido nalidíxico no Teste de Difusão em Disco. Foram selecionadas as 15 estirpes resistentes à enrofloxacina para a realização da PCR para detecção dos genes gyrA, gyrB, parC e parEe para sequenciamento genético do produto da PCR para identificação de mutações nesses genes. Cinco estirpes (33,3%) apresentaram mutações pontuais no gene gyrA e uma (6,7%) apresentou mutação pontual no gene parC. Nenhuma das 15 estirpes apresentou mutações nos genes gyrB e parE e nenhuma apresentou mais de uma mutação no gene gyrA ou nos outros genes. A existência apenas de mutações pontuais em alguns genes das estirpes analisadas está de acordo com a resistência fenotípica observada ao ácido nalidíxico, mas não explica a resistência às fluoroquinolonas encontrada nas 15 estirpes. Outros mecanismos de resistência podem estar relacionados à resistência encontrada às fluoroquinolonas e estudos adicionais são necessários para investigar sua presença.(AU)
Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Salmonella/efeitos dos fármacos , Galinhas/microbiologia , Quinolonas , Fluoroquinolonas , Farmacorresistência Bacteriana , Ciprofloxacina , Ácido Nalidíxico , Matadouros , EnrofloxacinaResumo
ABSTRACT: We analyzed 77 Salmonella spp. strains, from which 20 were isolated from broilers (cloacal swabs) and 57 from chickens from slaughterhouses under federal inspection. The following serotypes were identified: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) and Salmonella enterica (O: 9.12) (1). Fifteen strains (19.5%) were resistant to enrofloxacin, six (7.8%) to ciprofloxacin, and 26 (33.8%) to nalidixic acid in the Disk Diffusion Test. The fifteen enrofloxacin resistant strains were selected for the PCR to detect the genes gyrA, gyrB, parC, and parE, and genetic sequencing to identify mutations in these genes. Five strains (33.3%) had point mutations in the gyrA gene, and one (6.7%) presented a point mutation in the parC gene. None of the 15 strains had mutations in the gyrB and parE genes, and none had more than one mutation in the gyrA gene or the other genes. The presence of point mutations in the strains studied corroborates with the phenotypic resistance observed to nalidixic acid. However, it did not explain the resistance to fluoroquinolones found in the 15 strains. Other mechanisms may be related to the fluoroquinolones resistance, highlighting the need for additional mutation screening.
RESUMO: Foram analisadas neste estudo 77 estirpes de Salmonella spp., 20 isoladas de frangos vivos (suabes de cloaca) e 57 isoladas de carcaças, provenientes de abatedouros frigoríficos sob Inspeção Federal. Foram identificados os seguintes sorotipos: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) e Salmonella enterica (O: 9,12) (1). Do total de estirpes estudadas, 15 (19,5%) se mostraram resistentes à enrofloxacina, seis (7,8%) à ciprofloxacina e 26 (33,8%) ao ácido nalidíxico no Teste de Difusão em Disco. Foram selecionadas as 15 estirpes resistentes à enrofloxacina para a realização da PCR para detecção dos genes gyrA, gyrB, parC e parEe para sequenciamento genético do produto da PCR para identificação de mutações nesses genes. Cinco estirpes (33,3%) apresentaram mutações pontuais no gene gyrA e uma (6,7%) apresentou mutação pontual no gene parC. Nenhuma das 15 estirpes apresentou mutações nos genes gyrB e parE e nenhuma apresentou mais de uma mutação no gene gyrA ou nos outros genes. A existência apenas de mutações pontuais em alguns genes das estirpes analisadas está de acordo com a resistência fenotípica observada ao ácido nalidíxico, mas não explica a resistência às fluoroquinolonas encontrada nas 15 estirpes. Outros mecanismos de resistência podem estar relacionados à resistência encontrada às fluoroquinolonas e estudos adicionais são necessários para investigar sua presença.
Resumo
The aim was to determine the spread of genetically similar profiles of Campylobacter in chicken carcasses and evaluate their ability to produce transcripts for ciaB, dnaJ, p19 and sodB genes, before and after cultivation in Caco-2 cells. The strains used were isolated from 420 samples of chicken carcasses chilled and frozen ready for marketing. The species were identified by PCR-multiplex, the phylogeny was determined by RAPD-PCR and the presence of transcripts was performed by RT-PCR. We identified 74 (17.6%) of Campylobacter strains, being 55 (74.3%) C. jejuni and 19 (25.7%) C. coli. The phylogenetic relationship demonstrated heterogeneity between isolates of the same species, with absence of clones, indicating the high level of diversity of circulating genotypes. The gene transcription showed conflicting results before and after the culture in Caco-2 cell, so that before cultivation isolates showed greater capacity to transcribe genes related to survival and after the interaction with human cells, the strains showed higher potential to transcribe genes associated with virulence. The result of this study contributes to the understanding of how these seemingly fragile microorganisms are the most prevalent bacterial agents in human gastroenteritis.(AU)
O objetivo foi determinar a disseminação de perfis geneticamente semelhantes de Campylobacter em carcaças de frango e avaliar sua capacidade de produzir transcritos para os genes ciaB, dnaJ, p19 e sodB, antes e após o cultivo em células Caco-2. As cepas utilizadas foram isoladas de 420 amostras de carcaças de frango resfriadas e congeladas prontas para comercialização. As espécies foram identificadas por PCR-multiplex, a filogenia foi determinada por RAPD-PCR e a presença de transcritos foi realizada por RT-PCR. Identificamos 74 (17,6%) das cepas de Campylobacter, sendo 55 (74,3%) C. jejuni e 19 (25,7%) C. coli. A relação filogenética demonstrou heterogeneidade entre isolados da mesma espécie, com ausência de clones, indicando o alto nível de diversidade dos genótipos circulantes. A transcrição gênica mostrou resultados conflitantes antes e após a cultura em células Caco-2, de modo que, antes do cultivo, os isolados apresentaram maior capacidade de transcrever genes relacionados à sobrevivência e após a interação com células humanas, as linhagens apresentaram maior potencial para transcrever genes associados à virulência. O resultado deste estudo contribui para a compreensão de como esses microrganismos aparentemente frágeis são os agentes bacterianos mais prevalentes na gastroenterite humana.(AU)
Assuntos
Humanos , Animais , Zoonoses/etiologia , Campylobacter jejuni/isolamento & purificação , Campylobacter coli/isolamento & purificação , Galinhas/virologia , Fatores de Virulência , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterinária , TranscriptomaResumo
The aim was to determine the spread of genetically similar profiles of Campylobacter in chicken carcasses and evaluate their ability to produce transcripts for ciaB, dnaJ, p19 and sodB genes, before and after cultivation in Caco-2 cells. The strains used were isolated from 420 samples of chicken carcasses chilled and frozen ready for marketing. The species were identified by PCR-multiplex, the phylogeny was determined by RAPD-PCR and the presence of transcripts was performed by RT-PCR. We identified 74 (17.6%) of Campylobacter strains, being 55 (74.3%) C. jejuni and 19 (25.7%) C. coli. The phylogenetic relationship demonstrated heterogeneity between isolates of the same species, with absence of clones, indicating the high level of diversity of circulating genotypes. The gene transcription showed conflicting results before and after the culture in Caco-2 cell, so that before cultivation isolates showed greater capacity to transcribe genes related to survival and after the interaction with human cells, the strains showed higher potential to transcribe genes associated with virulence. The result of this study contributes to the understanding of how these seemingly fragile microorganisms are the most prevalent bacterial agents in human gastroenteritis.(AU)
O objetivo foi determinar a disseminação de perfis geneticamente semelhantes de Campylobacter em carcaças de frango e avaliar sua capacidade de produzir transcritos para os genes ciaB, dnaJ, p19 e sodB, antes e após o cultivo em células Caco-2. As cepas utilizadas foram isoladas de 420 amostras de carcaças de frango resfriadas e congeladas prontas para comercialização. As espécies foram identificadas por PCR-multiplex, a filogenia foi determinada por RAPD-PCR e a presença de transcritos foi realizada por RT-PCR. Identificamos 74 (17,6%) das cepas de Campylobacter, sendo 55 (74,3%) C. jejuni e 19 (25,7%) C. coli. A relação filogenética demonstrou heterogeneidade entre isolados da mesma espécie, com ausência de clones, indicando o alto nível de diversidade dos genótipos circulantes. A transcrição gênica mostrou resultados conflitantes antes e após a cultura em células Caco-2, de modo que, antes do cultivo, os isolados apresentaram maior capacidade de transcrever genes relacionados à sobrevivência e após a interação com células humanas, as linhagens apresentaram maior potencial para transcrever genes associados à virulência. O resultado deste estudo contribui para a compreensão de como esses microrganismos aparentemente frágeis são os agentes bacterianos mais prevalentes na gastroenterite humana.(AU)
Assuntos
Animais , Humanos , Zoonoses/etiologia , Campylobacter jejuni/isolamento & purificação , Campylobacter coli/isolamento & purificação , Galinhas/virologia , Fatores de Virulência , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real/veterinária , TranscriptomaResumo
ABSTRACT: The aim was to determine the spread of genetically similar profiles of Campylobacter in chicken carcasses and evaluate their ability to produce transcripts for ciaB, dnaJ, p19 and sodB genes, before and after cultivation in Caco-2 cells. The strains used were isolated from 420 samples of chicken carcasses chilled and frozen ready for marketing. The species were identified by PCR-multiplex, the phylogeny was determined by RAPD-PCR and the presence of transcripts was performed by RT-PCR. We identified 74 (17.6%) of Campylobacter strains, being 55 (74.3%) C. jejuni and 19 (25.7%) C. coli. The phylogenetic relationship demonstrated heterogeneity between isolates of the same species, with absence of clones, indicating the high level of diversity of circulating genotypes. The gene transcription showed conflicting results before and after the culture in Caco-2 cell, so that before cultivation isolates showed greater capacity to transcribe genes related to survival and after the interaction with human cells, the strains showed higher potential to transcribe genes associated with virulence. The result of this study contributes to the understanding of how these seemingly fragile microorganisms are the most prevalent bacterial agents in human gastroenteritis.
RESUMO: O objetivo foi determinar a disseminação de perfis geneticamente semelhantes de Campylobacter em carcaças de frango e avaliar sua capacidade de produzir transcritos para os genes ciaB, dnaJ, p19 e sodB, antes e após o cultivo em células Caco-2. As cepas utilizadas foram isoladas de 420 amostras de carcaças de frango resfriadas e congeladas prontas para comercialização. As espécies foram identificadas por PCR-multiplex, a filogenia foi determinada por RAPD-PCR e a presença de transcritos foi realizada por RT-PCR. Identificamos 74 (17,6%) das cepas de Campylobacter, sendo 55 (74,3%) C. jejuni e 19 (25,7%) C. coli. A relação filogenética demonstrou heterogeneidade entre isolados da mesma espécie, com ausência de clones, indicando o alto nível de diversidade dos genótipos circulantes. A transcrição gênica mostrou resultados conflitantes antes e após a cultura em células Caco-2, de modo que, antes do cultivo, os isolados apresentaram maior capacidade de transcrever genes relacionados à sobrevivência e após a interação com células humanas, as linhagens apresentaram maior potencial para transcrever genes associados à virulência. O resultado deste estudo contribui para a compreensão de como esses microrganismos aparentemente frágeis são os agentes bacterianos mais prevalentes na gastroenterite humana.
Resumo
Salmonella spp. é freqüentemente isolada em alimentos de origem avícola, sendo uma das principais causas de Doenças Transmitidas por Alimentos, e representa risco à segurança alimentar no âmbito mundial. O presente estudo investigou a ocorrência de Salmonella spp. em carcaças de frangos resfriadas provenientes de abatedouros do Estado de São Paulo-SP, Brasil. Foram analisadas 609 amostras no período 2000 a 2010. Empregou-se a análise bacteriológica por metodologia convencional, recomendada pela Legislação Brasileira. A presença de Salmonella spp. foi isolada em 89 (14,6%) carcaças. S. Enteritidis ((49,4%) foi o sorovar prevalente, seguida pelos sorovares S. Albany (15,7%), S. Infantis (11,2%), S. Agona (5,6%), S. Tennessee (4,5%), S. Heidelberg (3,4%), Salmonella spp. (3,4%), S. Kentucky (2,3%), S. enterica O:4,5 (2,3%), S. Montevideo (1,1%) e S. Newport (1,1%). (AU)
The occurrence of Salmonella spp. in food has been a crucial topic of worldwide concern. The present study was undertaken to investigate the presence of Salmonella spp. in broiler carcasses slaughterhouse and commercialized in the State of São Paulo, Brazil. From 2000 to 2010, 609 broiler carcasses samples were collected from slaughterhouse. The samples were assayed by conventional bacteriological analysis methodology recommended by Brazilian legislation. The presence of Salmonella spp. was isolated in 89 (14.6%) carcasses. S. Enteritidis ((49.4%) was the most prevalent serovar, followed by serovars S. Albany (15.7%), S. Infantis (11.2%), S. Agona (5.6%), S. Tennessee (4.5%), S. Heidelberg (3.4%), Salmonella spp. (3.4%), S. Kentucky (2.3%), S. enterica O:4.5 (2,3 %), S. Montevideo (1.1%) and S. Newport (1.1%). (AU)
Assuntos
Animais , Galinhas , Matadouros , Salmonella/isolamento & purificação , Aves , Inocuidade dos AlimentosResumo
Salmonella spp. é freqüentemente isolada em alimentos de origem avícola, sendo uma das principais causas de Doenças Transmitidas por Alimentos, e representa risco à segurança alimentar no âmbito mundial. O presente estudo investigou a ocorrência de Salmonella spp. em carcaças de frangos resfriadas provenientes de abatedouros do Estado de São Paulo-SP, Brasil. Foram analisadas 609 amostras no período 2000 a 2010. Empregou-se a análise bacteriológica por metodologia convencional, recomendada pela Legislação Brasileira. A presença de Salmonella spp. foi isolada em 89 (14,6%) carcaças. S. Enteritidis ((49,4%) foi o sorovar prevalente, seguida pelos sorovares S. Albany (15,7%), S. Infantis (11,2%), S. Agona (5,6%), S. Tennessee (4,5%), S. Heidelberg (3,4%), Salmonella spp. (3,4%), S. Kentucky (2,3%), S. enterica O:4,5 (2,3%), S. Montevideo (1,1%) e S. Newport (1,1%).
The occurrence of Salmonella spp. in food has been a crucial topic of worldwide concern. The present study was undertaken to investigate the presence of Salmonella spp. in broiler carcasses slaughterhouse and commercialized in the State of São Paulo, Brazil. From 2000 to 2010, 609 broiler carcasses samples were collected from slaughterhouse. The samples were assayed by conventional bacteriological analysis methodology recommended by Brazilian legislation. The presence of Salmonella spp. was isolated in 89 (14.6%) carcasses. S. Enteritidis ((49.4%) was the most prevalent serovar, followed by serovars S. Albany (15.7%), S. Infantis (11.2%), S. Agona (5.6%), S. Tennessee (4.5%), S. Heidelberg (3.4%), Salmonella spp. (3.4%), S. Kentucky (2.3%), S. enterica O:4.5 (2,3 %), S. Montevideo (1.1%) and S. Newport (1.1%).
Assuntos
Animais , Galinhas , Matadouros , Salmonella/isolamento & purificação , Aves , Inocuidade dos AlimentosResumo
O objetivo deste estudo foi verificar a eficiência de duas metodologias de pré-enriquecimento para a detecção de Salmonella spp. e de microrganismos aeróbios mesófilos em 94 amostras de carcaças de frango resfriadas. As técnicas avaliadas foram a de pesagem de 25 g da carcaça (metodologia tradicional) e a de enxaguadura. A primeira técnica consistiu em colher 25 g da carcaça e diluir em 225 mL de água peptonada tamponada e a segunda técnica em fazer uma enxaguadura na carcaça com 300 mL de água peptonada tamponada. Os resultados demostraram que 12 (12,8%) e 22 (23,4%) das amostras foram positivas para Salmonella spp. através da técnica de 25 g e pela técnica de enxaguadura, respectivamente. Salmonella Enteritidis foi o sorovar predominante em ambos os métodos. A contagem de microorganismos aeróbios mesófilos variou entre 1,1 x 101 a 4,5 x 105 UFC/g. (AU)
The aim of this study was verify the efficiency of two methodologies of pre-enrichment for the detection of Salmonella spp. and mesophilic aerobic microorganism in 94 samples of frozen broiler chickens. The techniques evaluated were weighing 25 g of carcass (tradicional method) and whole carcass rinse tecnique. The one method consists to collect 25 g of carcass and diluted in 225 mL buffered peptone water and the second techique consists to rinse the carcass with 300 mL of buffered peptone water. The results showed that 12 (12.8%) and 22 (23.4%) of the samples were positive to Salmonella spp. by the weighing and rinsing tecniques, respectively. Salmonella Enteritidis was the predominant serovar in both methods. The count for the aerobic meshophilic microorganisms ranged betwen 1.1 x 101 to 4.5 x 105 UFC/g. (AU)
Assuntos
Animais , Técnicas Microbiológicas/métodos , Técnicas Microbiológicas/veterinária , Salmonella enteritidis , Carne/microbiologia , Carga Bacteriana , Galinhas , Contaminação de AlimentosResumo
O objetivo deste estudo foi verificar a eficiência de duas metodologias de pré-enriquecimento para a detecção de Salmonella spp. e de microrganismos aeróbios mesófilos em 94 amostras de carcaças de frango resfriadas. As técnicas avaliadas foram a de pesagem de 25 g da carcaça (metodologia tradicional) e a de enxaguadura. A primeira técnica consistiu em colher 25 g da carcaça e diluir em 225 mL de água peptonada tamponada e a segunda técnica em fazer uma enxaguadura na carcaça com 300 mL de água peptonada tamponada. Os resultados demostraram que 12 (12,8%) e 22 (23,4%) das amostras foram positivas para Salmonella spp. através da técnica de 25 g e pela técnica de enxaguadura, respectivamente. Salmonella Enteritidis foi o sorovar predominante em ambos os métodos. A contagem de microorganismos aeróbios mesófilos variou entre 1,1 x 101 a 4,5 x 105 UFC/g.
The aim of this study was verify the efficiency of two methodologies of pre-enrichment for the detection of Salmonella spp. and mesophilic aerobic microorganism in 94 samples of frozen broiler chickens. The techniques evaluated were weighing 25 g of carcass (tradicional method) and whole carcass rinse tecnique. The one method consists to collect 25 g of carcass and diluted in 225 mL buffered peptone water and the second techique consists to rinse the carcass with 300 mL of buffered peptone water. The results showed that 12 (12.8%) and 22 (23.4%) of the samples were positive to Salmonella spp. by the weighing and rinsing tecniques, respectively. Salmonella Enteritidis was the predominant serovar in both methods. The count for the aerobic meshophilic microorganisms ranged betwen 1.1 x 101 to 4.5 x 105 UFC/g.
Assuntos
Animais , Carga Bacteriana , Carne/microbiologia , Salmonella enteritidis , Técnicas Microbiológicas/métodos , Técnicas Microbiológicas/veterinária , Contaminação de Alimentos , GalinhasResumo
O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento e analisar o perfil de resistência antimicrobiana de Enterococcus de carcaças de frango resfriadas e congeladas comercializadas no Distrito Federal, detectando genes de resistência antimicrobiana e identificando as espécies Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium por reação polimerase em cadeia. Foram analisadas 100 carcaças de frangos, das quais foram isoladas 50 cepas de Enterococcus spp., sendo 42% de E. faecalis e 2% de E. faecium. O teste de susceptibilidade antimicrobiana demonstrou que todas as cepas isoladas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, dos quais 90,47% das cepas de E. faecalis, 100% das cepas de E. Faecium e 82,14% dos Enterococcus spp. apresentaram resistência à Tetraciclina; 80,95% das cepas de E. faecalis e 35,71% das cepas de Enterococcus spp. foram resistentes à Eritromicina; 39,28% dos Enterococcus spp. e 23,80% dos E. faecalis à Ciprofloxacina e 28,57% dos E. faecalis apresentaram resistência ao Cloranfenicol. Foram detectados os genes de resistência antimicrobiana erm(B), vanC-1, aph(3')-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6')-le-aph(2'')-la, erm(A) e tet(M) - este último mais frequente. Estes resultados sugerem sérios problemas para a Saúde Pública, uma vez que esses microrganismos podem possuir a capacidade de transmitir genes de resistência antimicrobiana para outros microrganismos presentes na microbiota intestinal de humanos e animais, podendo inviabilizar o uso destas drogas para tratamentos clínicos.(AU)
The aim of this study was to isolate and analyze the antimicrobial profile resistance of Enterococcus from cooled and frozen poultry carcasses commercialized at the Federal District area, detecting the antimicrobial resistance genes and identifying Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium by polymerase chain reaction. One hundred poultry carcasses were analyzed and 50 strains of Enterococcus spp. were isolated, of which 42% were E. faecalis and 2% E. faecium. The antimicrobial susceptibility test showed that all isolates were resistant to at least one antibiotic; 90,47% of E. faecalis, 100% of E. faecium and 82,14% of Enterococcus spp. were resistant to Tetracycline; 80,95% of E. faecalis and 35,71% of Enterococcus spp. strains were resistant to Erythromycin; 39,28% of Enterococcus spp. and 23,80% of E. faecalis to Ciprofloxacin, and 28,57% of E. faecalis were resistant to Chloramphenicol. There were detected erm(B), vanC-1, aph(3')-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6')-le-aph(2'')-la, erm(A) and tet(M) resistance genes, the last one most often verified. The results might suggest problems for public health due the high resistance, since these microorganisms have ability to transmit genes for antimicrobial resistance to others in the intestinal tract of humans and animals. Thus, the use of these drugs for clinical treatment could be hindered.(AU)
Assuntos
Animais , Galinhas/microbiologia , Alimentos Congelados/microbiologia , Enterococcus faecium/isolamento & purificação , Enterococcus faecalis/isolamento & purificação , Resistência Microbiana a Medicamentos , Resistência a Tetraciclina , Resistência ao CloranfenicolResumo
Prevalence and antimicrobial susceptibility of Enterococcus spp. were evaluated in 360 frozen unse asoned chicken carcasses samples collected from September 2004 to June 2006 from the retail stores in São Paulo State, Brazil. Enterococcus spp. was isolated from all analyzed samples, and 1,332 strains were identified from them. Among the ten identified species, the predominance of E. faecalis, E. gallinarum, E.casseliflavus and E. faecium was occurred. All of the Enterococci strains showed some degree of resistanceto the nine antimicrobials utilized in the study. The percentages of antimicrobial resistance were: 89.2% for tetracycline, 91.4% for quinupristin-dalfopristin, 83.5% for erythromycin, 65% for ciprofloxacin, 55.4% for chloramphenicol, 6.5% for linezolid, 2.3% for vancomycin, 2.3% for teicoplanin and 0.2% for ampicillin. The occurrence of the high level resistance to amyno glicosides (HLR-A) was detected in 57.4% of the isolates. E. faecalis and E. faecium species, which are considered as important agents in nosocomial infections, showed resistance to eight and seven antibiotics, respectively. (AU)
Assuntos
Enterococcus/isolamento & purificação , Galinhas , Anti-InfecciososResumo
Estabelecimentos de abate de aves utilizam grandes volumes de água para o abate e processamento de carcaças de frangos. Uma dessas etapas é a lavagem final das carcaças com água pressurizada. Etapa que ocorre após a evisceração. Para atender a legislação vigente são usados no mínimo 1,5 litros de água por carcaça abatida diariamente, a fim de remover a contaminação superficial. Essa lavagem demanda volume significativo de água ao se considerar o consumo total de um abatedouro em um dia de trabalho. A partir destas constatações, o objetivo deste estudo foi avaliar a possível redução do volume de água a ser utilizado neste ponto da linha de abate, bem como comparar a contaminação microbiana das carcaças antes e após a lavagem e também após o pré-resfriamento das carcaças por imersão em chillers. As coletas de amostras foram realizadas em um abatedouro de aves de grande porte, em três pontos diferentes da linha de abate, antes e após a lavagem das carcaças e após o chiller. Foram realizadas analises de contagens para os grupos de micro-organismos indicadores de higiene mais comumente utilizados: aeróbios mesófilos, enterobactérias, coliformes cotais e Escherichia coli. Neste estudo, a influência do estágio de lavagem sobre a contaminação superficial das carcaças de frango é mostrada em relação a quantidade de água utilizada. Nos resultados obtidos pode-se observar que a redução da contagem Log UFC/cm2 não foi significativamente diferente entre volume preconizado pela legislação (1,5 L) em relação a redução do volume para 1/3 (1L). Bem como as contagens realizadas após o chiller, para os três tratamentos avaliados (0L, 1L, 1,5L) também não demostraram diferença significativa das contagens realizadas antes da lavagem. A quantidade de água usada para lavagem influenciou coliformes totais e Escherichia coli. Não afetou aeróbios mesófilos e enterobactérias, nas contagens antes e após a lavagem. Assim, é possível rever o volume de água preconizado atualmente, reduzindo a captação de água, formação de efluentes e despejo em rios e, consequentemente custos, fazendo melhor uso da água e mantendo a qualidade microbiológica das carcaças.
In poultry slaughterhouse establishments use large volumes of water to the slaughter and processing of chicken carcasses. One of those stages is the final washing of carcasses with pressurized water. Stage the is after the gutting. To comply current legislation are used at least 1.5 litres of water per carcass slaughtered daily, in order to remove the surface contamination. The washing stage demand a significant amount of water when considering the total consumption of a slaughterhouse in a day's work. From these observation, the aim of this study was to evaluate the possible reduction of the amount of water to be used at this in the slaughter line, as well as compare the microbial contamination of carcasses before and after washing and also after pre-cooling of the carcasses by immersion in chiller. The samples were collected at a large poultry slaughterhouse in three different points of the slaughter line, before and after the washing of carcasses and after the chiller. Analyses were undertaken of counts for the groups of microorganisms most commonly used hygiene indicators: mesophilic aerobic, Enterobacteriaceae, total coliform and Escherichia coli. In this study, the influence of the wash stage on the surface contamination of carcasses of chicken is shown in relation to the amount of water used. The results obtained can be noted that reducing the count Log CFU/cm2 was not significantly different between volume recommended by legislation (1.5 L) regarding the reduction of the volume to 1/3 (1L). As well as the counts carried out after the chiller for the three evaluated treatments (0 L, 1 L, 1.5L) is also not demonstrated significant difference of the counts carried out before washing. The amount of water used for washing influenced total coliforms and E. coli. Aerobic mesophilic and Enterobacteriaceae did not affect, in the counts before and after washing. Thus, it is possible to review the currently recommended water flow, reducing the water capture, training and dumping effluents into rivers and consequently costs, making better use of water and maintaining the microbiological quality of the carcasses.
Resumo
O presente trabalho teve como objetivo avaliar o tempo necessário para que carcaças de frango de diferentes pesos (1.200g e 2.100g), que, ao sair do tanque de resfriamento, se encontravam com a temperatura acima de 7ºC, alcançassem 4C e traçar o perfil microbiológico destas, realizado através do estudo de presença e multiplicação dos indicadores: microorganismos mesófilos aeróbios, coliformes totais, coliformes termotolerantes, Escherichia coli, Staphylococcus coagulase positivo, Clostridium perfringens, Salmonella spp. e Listeria spp., a fim de auxiliar as medidas e os limites críticos de um plano APPCC, para a indústria de carne de ave. A pesquisa foi realizada em um matadouro localizado no Estado do Rio Grande do Sul. No total, foram coletadas aleatoriamente 100 carcaças de frangos, 50 amostras para cada peso, com temperatura acima de 7ºC, na esteira na saída dos tanques de resfriamento. Todas as carcaças foram colocadas em caixa plásticas e encaminhadas à câmara de resfriamento (tempo zero). De hora em hora, foi realizada a aferição de temperatura no músculo peitoral profundo de 15 unidades amostrais de cada peso. As carcaças com peso de 1.200g levaram de 2 a 4 horas para alcançarem a temperatura de 4ºC na musculatura profunda e as carcaças com peso médio de 2.100g, chegaram a temperatura de 4ºC entre 5 e 8 horas de resfriamento. No momento da coleta das amostras e a cada
Resumo
The present study was carried out to evaluate the occurrence of Salmonellae in broiler chicken carcasses and to determine the antimicrobial resistance profile of the isolated strains. Twenty-five out of the 260 broiler chicken carcasses samples (9.6%) were positive for Salmonella. S. Enteritidis was the most frequent serovar. Nineteen Salmonella isolates were tested for antimicrobial resistance, and the results indicated that 94.7% were resistant to at least one antimicrobial agent. Resistance to streptomycin (73.7%), nitrofurantoin (52.3%), tetracycline (31.6%), and nalidixic acid (21%) were the prevalent amongst Salmonella strains tested.
O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência de Salmonellae em amostras de carcaças de frango e a suscetibilidade dos isolados a agentes antimicrobianos. Das 260 carcaças analisadas, 25 (9,6%) foram positivas para Salmonella. Salmonella Enteritidis foi o sorovar predominante. Com relação à suscetibilidade a agentes antimicrobianos, 94,7% das cepas de Salmonella testadas, apresentaram resistência a um ou mais agentes antimicrobianos. Os perfís de resistência mais comumente observados entre os isolados foram a resistência à estreptomicina (73,7%), nitrofurantoína (52,3%), tetraciclina (31,6%) e ácido nalidíxico (21%).
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Campylobacter são microorganismos patogênicos associados com aves ou alimentos de origem avícola e sua importância está relacionada à alta prevalência de Campylobacter nos frangos de corte e suas carcaças, correlacionados com gastroenterite em humanos. Neste estudo, monitorou-se 22 lotes de frango de corte com idades entre 3 a 5 semanas na granja e 35 dias no abate e avaliou-se os métodos de pré-enriquecimento (PE) e isolamento direto (ID) para identificação de Campylobacter em swabs cloacais e carcaças de frango. Realizaram-se 22 análises de swabs cloacais pelo PE e pelo ID, 96 análises de carcaças pelo ID e, destas, 95 pelo PE. Para o isolamento direto a partir de swabs utilizou-se o ágar mCCDA acrescido de suplemento seletivo, acondicionado em embalagem não permeável e microaerofilia com mistura de gases (5% O2, 10% CO2 e 85% N2). Para o PE, os swabs foram inoculados em pool no caldo Bolton suplementado com antibióticos e 200 mg/L de TTC, seguido de inoculação em ágar mCCDA, também em microaerofilia. As carcaças também foram analisadas para ambos os métodos, utilizando-se caldo Bolton no pré-enriquecimento, seguido de inoculação em mCCDA ou isolamento direto em ágar Bolton com TTC, sempre em microaerofilia. Não houve diferença significativa (p=1,00) entre os métodos de pré-enriquecimento e isolamento direto nas amostras de swabs e carcaças. Identificou-se 81,8% lotes posit
Resumo
A ingestão de alimentos manipulados sem higiene adequada, mal cozidos ou consumidos crus podem levar a gastroenterites causadas por Salmonella sp. A Salmonella pertence à família Enterobacteriaceae e são bacilos Gram-negativos não produtores de esporos. O trabalho teve como objetivo avaliar a incidência de Salmonella sp em carcaças de frangos resfriadas com o método rápido imunoenzimático VIDAS® - SLM e confirmar com a metodologia convencional a detecção de Salmonella sp. Neste estudo, foi realizada uma análise comparativa entre métodos de detecção para Salmonella sp em 599 amostras de carcaças de frango refrigeradas, destinadas ao mercado externo e regional, provenientes de três abatedouros localizados em três municípios do estado de São Paulo, comparando os resultados positivos obtidos das análises qualitativas, através da metodologia imunoenzimática automatizada (VIDAS® Salmonella) e metodologia convencional. A ocorrência de Salmonella sp em carcaças de frango refrigeradas foi de 10%, sendo que, este resultado corresponde às amostras que apresentaram-sepositivas para ambos os métodos analisados. Em avaliação comparativa entre a metodologia imunoenzimática VIDAS® e a convencional, observou- -se que o método imunoenzimático produziu uma sensibilidade de 100% e uma especificidade de 91,1%. A análise efetuada neste trabalho evidencia quea metodologia VIDAS®é indicada para detecção de Salmonella sp na rotina laboratorial, pois desenvolve resposta em menor tempo quando comparado ao método convencional e confiabilidade dos resultados. (AU)
Eating food handled without proper hygiene, undercooked or eaten raw can lead to gastroenteritis causedby Salmonella sp. Salmonella belongs to the family Enterobacteriaceae and are Gram-negative bacteria do not produce spores. The study aimed to assess the incidence of Salmonella in chicken carcasses cooled with the fast method immunoassay VIDAS ® - SLM and confirm with the conventional method for detection of Salmonella sp. In this study, we performed a comparative analysis of methods for detection of Salmonella in 599 samples of chicken carcasses chilled, for the foreign market and regional, from three slaughterhouses located in three municipalities in the state of Sao Paulo, comparing thepositive results obtained of qualitative analyses through the automated immunoenzymatic method (V/DAS® Salmonella) and standard methodology. The occurrence of Salmonella in chicken carcasses were chilled 10%, and this result corresponds to the samples that showed up had a positive for both methods analyzed. Ln comparative evaluation between the methodology and conventional imunoenzymatic VIDA~, it was observed that the enzyme immunoassay method produced a sensitivity of 100% and a specificity of 91.1%. The analysis made in this paper shows that the methodology VIDAS® is indicated for detection of Salmonella in routine laboratory tests, since response develops in less time when compared to the conventional method and reliability of results. (AU)
Assuntos
Animais , Aves Domésticas/microbiologia , Alimentos Resfriados , Microbiologia de Alimentos , Amostras de Alimentos , Técnicas Imunoenzimáticas/métodos , Salmonella/isolamento & purificaçãoResumo
ABSTRACT Antimicrobial resistance is a widely studied issue in all bacterial genera, but in the case of those responsible for zoonotic illnesses, like Salmonella, they merit special attention, because it can be transmitted via foodstuffs to human beings. The present study was carried out to verify the occurrence of antimicrobial resistance in 22 samples of Salmonella Hadar isolated from broiler chicken carcasses in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, from May 1995 to April 1996. In the present study, the results indicated that 100% of the Salmonella Hadar isolates were resistant to tetracycline, streptomycin and sulfazotrim, while intermediate resistance was observed at different levels, to nalidixic acid (86.36%), nitrofurantoin (18.18%) and chloramphenicol (4.54%). All isolates were resistant to three or more antimicorbials agents, with five different patterns of resistance. These levels of resistance highlight the need for responsible use of antimicrobial agents in animal production.
RESUMO A resistência antimicrobiana é um assunto amplamente estudado em todos os gêneros bacterianos, sobretudo em relação aos responsáveis por zoonoses, como o caso da Salmonella, a qual merece especial atenção, já que pode ser transmitida para os seres humanos. O presente estudo foi conduzido para verificar a ocorrência de resistência a agentes antimicrobianos em 22 cepas de Salmonella Hadar isoladas de carcaças congeladas de frango no Estado do Rio Grande do Sul, no período de maio de 1995 a abril de 1996. No presente estudo, os resultados indicaram que 100% das cepas de Salmonella Hadar apresentaram resistência a tetraciclina, estreptomicina e sulfazotrim, tendo também apresentado resistência em diferentes níveis ao ácido nalidíxico (86,36%), nitrofurantoína (18,18%) e cloranfenicol (4,54%). Todas as cepas de Salmonella Hadar apresentaram resistência a três ou mais agentes antimicrobianos, com cinco diferentes padrões de resistência. Os níveis de resistência observados enfatizam a necessidade do uso responsável dos agentes antimicrobianos na produção animal.
Resumo
Eighty Salmonella Enteritidis strains isolated from broiler carcasses between May 1995 and April 1996 in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, were tested for antibiotic susceptibility using the disk diffusion method. Resistance to colistin, novobiocin, erythromycin and tetracycline was observed in 100% of the isolates. The strains showed intermediate resistance at different levels to kanamycin (1.25%), enrofloxacin (3.75%), neomycin (3.75%), fosfomycin (20%), sulphonamides (86.25%) and nitrofurantoin (90%). Resistance to ciprofloxacin, norfloxacin, gentamicin, polymyxin B, sulphametrim and sulphazotrim was not found. Since resistance to antibiotics especially those introduced in the last decades, was detected, it is recommended that their use must be based on the results of resistance tests or minimum inhibitory concentration tests.
Oitenta amostras de Salmonella Enteritidis isoladas de carcaças de frango no período entre maio de 1995 a abril de 1996 no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil foram testados para susceptibilidade antimicrobiana pelo método de antibiograma. O antibiograma das amostras apresentou 100% de resistência a colistina, novobiocina, eritromicina e tetraciclina. Tiveram resistência em diferentes níveis a canamicina (1,25%), enrofloxacina (3,75%), neomicina (3,75%), fosfomicina (20%), sulfonamida (86,25%) e nitrofurantoína (90%) e por outro lado não apresentaram resistência a ciprofloxacina, norfloxacina, gentamicina, polimixina B, sulfametrim e sulfazotrim. A constatação de resistência a antibióticos, inclusive àqueles introduzidos na última década, enfatiza a necessidade de uso responsável de antibióticos, e com base em antibiograma ou concentração inibitória mínima.
Resumo
O presente estudo teve como objetivo realizar uma análise comparativa das técnicas de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e Ensaio Imunoenzimático (ELISA - SALVIA ®) com o método microbiológico convencional para detecção de Salmonella Enteritidis (SE), S. Typhimurium (ST), S. Gallinarum(SG) e S. Pullorum (SP) em carne de frango. As amostras foram contaminadas artificialmente com diluições de 10-7, 10-8 e 10-9 para SE e ST e de 10-4, 10-5 e 10-6 para SG e SP, com cinco repetições de cada diluição, totalizando 300 análises. Os testes foram realizados em cinco diferentes laboratórios para a validação das técnicas. Na avaliação geral dos dados obtidos, a microbiológica convencional obteve 56,67% (170/300) de recuperação das amostras contaminadas por Salmonella artificialmente, enquanto que as técnicas de ELISA e PCR representaram 71% (213/300) e 75% (225/300), respectivamente. A análise dos resultados de detecção de Salmonella através dos testes ELISA e PCR, em relação ao microbiológico convencional, apresentaram diferença estatística (p=0,0001, teste de MacNemar). Não houve diferença significativa entre os resultados da PCR e do ELISA. Após essa etapa do trabalho, as três técnicas também foram testadas a campo, na qual foram utilizadas três categorias de matadouros: um com abate totalmente automatizado (ATA) e dois com abate semi automatizado, sendo um de grande porte (ASAGP) e
Resumo
O presente estudo teve como objetivo realizar uma análise comparativa das técnicas de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) e Ensaio Imunoenzimático (ELISA - SALVIA ®) com o método microbiológico convencional para detecção de Salmonella Enteritidis (SE), S. Typhimurium (ST), S. Gallinarum(SG) e S. Pullorum (SP) em carne de frango. As amostras foram contaminadas artificialmente com diluições de 10-7, 10-8 e 10-9 para SE e ST e de 10-4, 10-5 e 10-6 para SG e SP, com cinco repetições de cada diluição, totalizando 300 análises. Os testes foram realizados em cinco diferentes laboratórios para a validação das técnicas. Na avaliação geral dos dados obtidos, a microbiológica convencional obteve 56,67% (170/300) de recuperação das amostras contaminadas por Salmonella artificialmente, enquanto que as técnicas de ELISA e PCR representaram 71% (213/300) e 75% (225/300), respectivamente. A análise dos resultados de detecção de Salmonella através dos testes ELISA e PCR, em relação ao microbiológico convencional, apresentaram diferença estatística (p=0,0001, teste de MacNemar). Não houve diferença significativa entre os resultados da PCR e do ELISA. Após essa etapa do trabalho, as três técnicas também foram testadas a campo, na qual foram utilizadas três categorias de matadouros: um com abate totalmente automatizado (ATA) e dois com abate semi automatizado, sendo um de grande porte (ASAGP) e