A utilização do laser de baixa intensidade na cicatrização de ferida em cão / The use of low intensity laser in wound healing in dog

Background: Low-intensity laser is effective in cellular metabolism, analgesia, and tissue repair. The bioelectric, bioenergetic, and biochemical effects of laser therapy stimulate local circulation, collagen formation, and epithelization. The objective of this study was to report the use of gallium-aluminum arsenide (GaAlAs) laser (830 nm) in healing two woundscaused by necrosis in a dog. Case: An 8-year-old bitch, a rescued victim of animal abuse, had tibiotarsal dislocation in the left posterior limb. Orthopedic surgery was performed with the placement of an external fixation device with six pins in the distal third of the left posterior limb. A radiographic examination performed 42 days after the surgery revealed the loss of the tibiotarsal ratio, decreased radiopacity of the carpal bones, edema, inflammation, muscle atrophy, and the rotation of the anatomical axis of the metatarsals and phalanges. It was then decided to perform a second orthopedic surgery, in which a bone graft and arthrodesis with an 8-screw titanium plate were performed. Four of the plate screws were placed proximally to the tibia and four distally to the tarsus in addition to a screw and a pin transfixed through the distal metaphyseal region of the tibia and calcaneus. Traction was felt during suturing in the dermis and epidermis of the limb, suggesting the possibility of dehiscence of the stitches. After 3 h of surgery, the limb was cold and edematous. After 5 days, the tissue of the medial region of the tarsus developed necrosis, exposing a wound 6 cm long, 1.5 cm wide, and 2 mm deep (wound 1). Another necrotic lesion was observed in the dorsal region of the tarsos - 6.5 cm long, 2 cm wide, 3 mm deep, and exposing 5 cm of the titanium plate (wound 2). Therapy with GaAlAs laser was then performed over the entire length of the wounds. In each therapeutic session, the laser was first used in punctual mode at 10 J/cm², 830 nm, 20 s at each point of the length of the lesion and then in scan mode at 10 J/cm², 830 nm, 1000 Hz, and 40 s continuously. Laser therapy sessions were conducted at 2-4 day intervals, with a 12-day interval between the eighth and ninth sessions. During the entire treatment, cleansing and debridement of the wounds were performed every 48 h with saline and chlorhexidine digluconate, using a compression bandage, as described earlier. Wound 1 healed completely after two laser therapy sessions. In wound 2, tissue repair stagnated after the ninth and last laser session, leaving 4 cm of the titanium plate still exposed. The limb could not support the body weight of the patient, and radiographic examination revealed that the anatomical axis of the metatarsals and the phalanges was rotated and bone conformation was poor. Given the anatomical conditions associated with the patient's clinical picture, it was decided to amputate the limb between the femur and tibia. Discussion: Therapeutic lasers act on mitochondrial respiration, increasing respiratory metabolism and stimulating DNA synthesis and tissue proliferation. In the present case, there was a decrease in inflammatory cells, edema, and the size of the wounds. The pathological conditions of the affected site, influence of trauma, and degree of tissue damage affected the results of the laser therapy. Despite the size difference between wounds 1 and 2, the exposed titanium plate was a determining factor for the partial healing of wound 2.

Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia / Skin graft epithelialization in rabbit fresh wounds treated with amniotic membrane and/or laser therapy

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente aquelas onde existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com presença de tecido de granulação exuberante. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Foram utilizados 42 coelhos, divididos em quatro grupos: grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas. Na avaliação macroscópica, foi possível notar que os pacientes dos grupos nos quais a membrana amniótica foi utilizada (GM e GML) apresentaram evidências associadas à acentuada reação inflamatória, à falha de integração do enxerto e à consequente necrose dele. Já os pacientes do GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto no GL. O contrário foi observado nos pacientes do GM e GML, nos quais aparentemente houve rejeição da membrana. A formação de colágeno não se correlacionou com outros fatores, como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Dessa forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e a integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para esse fim, pois provoca intensa reação inflamatória, além de impedir a nutrição do enxerto.(AU)

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for graft survival a healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue are necessary. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential healing stimulants in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination showed that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. LG patients apparently had the best graph aspect in the last valuation date. Microscopic examination showed intense integration of the graft to the dermis, high re-epithelialization level, and scarce inflammatory cells in the graft site of LG patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where a rejection of the membrane was observed. Finally, collagen formation was not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides avoiding graft nutrition.(AU)

Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia / Skin graft epithelialization in rabbit fresh wounds treated with amniotic membrane and/or laser therapy

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente aquelas onde existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com presença de tecido de granulação exuberante. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Foram utilizados 42 coelhos, divididos em quatro grupos: grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas. Na avaliação macroscópica, foi possível notar que os pacientes dos grupos nos quais a membrana amniótica foi utilizada (GM e GML) apresentaram evidências associadas à acentuada reação inflamatória, à falha de integração do enxerto e à consequente necrose dele. Já os pacientes do GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto no GL. O contrário foi observado nos pacientes do GM e GML, nos quais aparentemente houve rejeição da membrana. A formação de colágeno não se correlacionou com outros fatores, como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Dessa forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e a integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para esse fim, pois provoca intensa reação inflamatória, além de impedir a nutrição do enxerto.(AU)

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for graft survival a healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue are necessary. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential healing stimulants in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination showed that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. LG patients apparently had the best graph aspect in the last valuation date. Microscopic examination showed intense integration of the graft to the dermis, high re-epithelialization level, and scarce inflammatory cells in the graft site of LG patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where a rejection of the membrane was observed. Finally, collagen formation was not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides avoiding graft nutrition.(AU)

Efeito da irradiação com laser de baixa intensidade na qualidade de membrana induzida pela técnica de Masquelet em coelhos

O estudo avaliou a influência da irradiação laser de baixa intensidade no desenvolvimento e características da membrana de Masquelet, induzida de forma ortotópica em coelhos. Foram utilizados 12 coelhos Norfolk com idade média de três meses. Em ambos os membros torácicos, foi induzida uma falha óssea segmentar de 1,0 cm de comprimento no rádio, a qual foi preenchida com um cilindro de cimento ortopédico. No período pós-operatório, em um dos membros a falha recebeu terapia laser de baixa intensidade (2J de energia) a cada 48 horas, durante 15 dias. As regiões das falhas segmentares foram avaliadas por exames ultrassonográficos e radiográficos. Seis animais foram submetidos à eutanásia com três semanas e seis com seis semanas de pós-operatório, para se proceder os exames histológicos e imuno-histoquímico das membranas de Masquelet. Em ambos os membros, radiograficamente notou-se na terceira semana de pós-operatório a presença de proliferação óssea ativa partindo das extremidades ósseas, sendo que na sexta semana o processo evolutivo mostrou-se em estágio mais avançado. O exame ultrassonográfico visibilizou, em ambos os membros, a presença da membrana induzida com uma semana de pós-operatório. Histologicamente não ocorreram diferenças estatísticas relativas ao escore semiquantitativo da intensidade de inflamação, número total de vasos sanguíneos, metaplasia óssea e colágeno. As espessuras médias das membranas induzidas foram 2050,17 µm e 1451,96 µm no membro controle e 2724,26 µm e 2081,03 µm no membro irradiado com laser, respectivamente na terceira e sexta semanas de pós-operatório. A expressão de VEGF e de PDGF foi presente nas membranas do membro controle e naquelas irradiadas, sem diferenças estatísticas. Foi possível concluir que pelos métodos de avaliação utilizados não foi possível comprovar estatisticamente a influência da irradiação laser de baixa intensidade sobre a membrana de Masquelet.

This study aimed to evaluate the influence of low-intensity laser irradiation on the development and characteristics of the Masquelet membrane induced in orthotopic site in rabbits. Twelve Norfolk rabbits, mean age of 3 months were used. In both forelimbs, a segmental bone defect of 1.0 cm length was induced in the radius, which was filled with a cylinder of polymethylmethacrylate bone cement. Low-level laser therapy was used postoperatively in the bone defect of one of the forelimbs by point technique (2J energy) every 48 hours for 15 days. The bone defect were evaluated by ultrasound and radiographic examinations. Six rabbits were submitted to euthanasia at three weeks postoperatively and six rabbits at six weeks postoperatively to perform the histological and immunohistochemical examinations of the Masquelets membranes. In both forelimbs, radiographs showed new bone growth from the cut ends of the radius on third postoperative week, and more advanced stage on sixth postoperative week. Sonographic examination identified in both forelimbs the presence of the induced membrane one week after the surgery. Histologically, there were no statistically significant differences in semi-quantitative score of inflammation intensity, total number of blood vessels, bone metaplasia and collagen. The average thickness of the induced membranes was 2050.17 µm and 1451.96 µm in the control forelimb and 2724.26 µm and 2081.03 µm in the laser irradiated limb, respectively on third and sixth postoperative weeks. VEGF and PDGF expression were present in the induced membranes of the control and irradiated forelimbs, but showed no significant difference. In conclusion, based on assessment methods was not possible to demonstrate statistically the influence of low-intensity laser irradiation in the Masquelet membrane.

COMPARAÇÃO ENTRE DIFERENTES ONDAS DE LASER E ÓLEO DE GIRASSOL OZONIZADO NA EPITELIZAÇÃO DE ENXERTOS CUTÂNEOS APLICADO EM FERIDAS RECÉM CRIADAS DE COELHOS (ORYCTOLAGUS CUNICULUS)

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente nas quais existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com a presença de um tecido de granulação saudável. Objetivou-se com este trabalho foi comparar diferentes ondas do laser de baixa intensidade e do óleo de girassol ozonizado como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação em coelhos. Para isso, foram elaborados dois experimentos onde o primeiro comparou a laser de baixa intensidade (LBI) de onda contínua com a LBI pulsada (Capítulo 2), no qual 31 coelhos foram distribuídos em três grupos, grupo controle (GC), grupo laser onda contínua (GLC) e grupo laser onda pulsada (GLP). O segundo experimento comparou a LBI de onda contínua com a aplicação tópica de óleo de girassol ozonizado (OGO) (Capítulo 3) e 32 coelhos também foram distribuídos em três grupos, sendo grupo controle (GC), grupo laser (GL) e grupo ozônio (GO3). No primeiro experimento, os grupos GLC e GLP apresentaram evolução semelhante, com processo cicatricial satisfatório do enxerto em ambos, ao contrário do grupo GC. Tais resultados se mantiveram na avaliação microscópica, pois o GC apresentou correlação significativa com critérios ligadas à falha do enxerto. Já no segundo experimento, novamente ficou comprovado a ineficácia do leito doador sem tecido de granulação em proporcionar ambiente ideal para cicatrização dos enxertos. Os grupos GL e GO3 apresentaram evolução superior comparado ao GC, embora tenha ocorrido maceração nos enxertos dos animais do que receberam OGO, interferindo negativamente no processo de revascularização.

Cutaneous grafting is a simple and useful surgical technique for the repair of wounds, especially in which there is a difficulty in applying the primary closure, or other reconstructive technique. However, for graft survival, it is necessary a healthy granulation tissue in the wound bed. The aim of this study was to compare differents waves of low level laser therapy (LLLT) and ozonated sunflower oil as potential healing stimulators in grafts applied rabbits in fresh wounds. Two trials were carried out in which the first one compared LLLT continuous wave with LLLT pulsed (Chapter 2) in 31 rabbits divided into three groups: control group (CG), continuous wave laser group (GLC) and pulsed wave laser group (GLP). The second trial compared LLLT continuous with ozonized sunflower oil (OGO) (Chapter 3), and 32 rabbits were also divided into three groups, being control group (GC), laser group (GL) and ozone group (GO3). In the first trial, the GLC and GLP groups showed similar evolution, with a satisfactory healing process in both, unlike the CG group. These results were maintained in the microscopic evaluation since the GC showed a significant correlation with criteria related to graft failure. In the second trial, the ineffectiveness of the donor bed without granulation tissue to provide an ideal environment for healing of the grafts was again demonstrated. The GL and GO3 groups presented superior evolution compared to the CG, although maceration occurred in the grafts of the animals that received OGO, have a negative effect on the revascularization process.

AVALIAÇÃO DA ANGIOGÊNESE E RESPOSTA INFLAMATÓRIA EM ENXERTOS CUTÂNEOS SUBMETIDOS À LASERTERAPIA EM RATOS (Rattusnovergicusalbinuswistar)

As técnicas reconstrutivas têm sido amplamente utilizadas na Medicina Veterinária. Com a intenção de reduzir complicações inerentes às técnicas reconstrutivas, são utilizadas terapias adjuvantes pós-operatórias como a laserterapia de baixa intensidade (LBI). Objetivou-se definir os efeitos da laserterapia de baixa intensidade sobre a cicatrização, inflamação e vascularização de enxertos cutâneos em intervalos de tempo aplicáveis à rotina cirúrgica veterinária. Foram utilizados 40 ratos (Rattusnovergicusalbinuswistar), sendo cada animal submetido à enxertia cutânea autógena em região interescapular, sendo distribuídos de forma aleatória em cinco grupos (G1, G2, G3, G4 e G5) de acordo com a dose de 6 J/cm² ou 10 J/cm² a cada 3 ou 5 dias, aplicada sobre o enxerto cutâneo durante 15 dias. Avaliação macroscópica aos dias três, sete e 15 não demonstrou alteração com a aplicação de LBI sobre os enxertos. Avaliação histoquímica com picrosirius apresentou maior expressão de colágeno tipo I vermelho em enxertos de G5 (p<0,05), enquanto não houve expressão do mesmo em G1; a expressão de colágeno tipo III verde não foi influenciada pela LBI. A avaliação histoquímica com hematoxilina-eosina evidenciou maior número de fibroblastos em enxertos de G4 (p<0,05) e menor hemorragia em enxertos de G5 (p<0,05). Houve modulação da resposta inflamatória em enxertos cutâneos irradiados, enquanto a LBI não teve efeito sobre a angiogênese. Conclui-se que a exposição de enxertos cutâneos à dose de energia de 6 J/cm² ou 10 J/cm² a cada 5 dias beneficiaram a cicatrização e a modulação da inflamação local.

The reconstructivetechniqueshasbeenwidelyused in Veterinary Medicine. Toreduceinherentcomplicationstothereconstructivetechniques, thepostoperativeadjuvantstherapies are used, such as low-level laser therapy (LLLT). The aimofthiswork is to determine the low-level laser therapyseffectsonthe healing, inflammationandvascularizationofthefree skin graftsgrafts in applicable time intervalstothe veterinary surgeryroutine. Forty rats (Rattus novergicusalbinuswistar) wereused, andeachonewassubmittedtotheautogenousfree skin graftontheinterescapular region. Theywereallocatedrandomly in fivegroups (G1, G2, G3, G4 and G5) accordingtothe 6 J/cm² or 10 J/cm² doses every 3 or 5 days for 15 days. The macroscopicevaluationonthethird, seventhandfifteenthdaydidnot show alterationsofthe LLLT onthegrafts. The histochemicalevaluation with picrosirius had more expressionofthetype I collagenous red in thegraftsof G5 (p<0,05), while in the G1 didnot; theexpressionofthetype III collagenous greenwasnotinfluencedby LPLT. The histochemicalevaluation with hematoxylin-eosinshowed more numbersoffibroblasts in thegraftsof G4 (p<0,05) andlesshemorrhage in graftsof G5 p<0,05). It hadmodulationofthe inflammatory response in theirradiatedcutaneousgrafts, whilethe LPLT had no effectontheangiogenesis. Then, it observedthattheexposureofthecutaneousgraftstothe 6 J/cm² or 10 J/cm² doses every 5 daysimprovedthe healing andthemodulationofthe local inflammation.

EFEITO DO DIODO EMISSOR DE LUZ (LED) E LASER COM BAIXA INTENSIDADE NA CICATRIZAÇÃO DE FERIDAS DE RATOS SAUDÁVEIS E DIABÉTICOS

A disfunção dos leucócitos, macrófagos e fibroblastos em pessoas acometidas por Diabetes Mellitus, acarreta uma fase inflamatória prolongada e consequentemente um processo cicatricial mais lento. A terapia com laser e diodo emissor de luz Light Emitting Diode (LED) tem efeitos essenciais na reparação cutânea, aceleração do processo inflamatório, reabsorção do edema, aumento da proliferação de fibroblastos e maior síntese de colágeno. Objetivo avaliar o processo de cicatrização nas feridas cutâneas em ratos saudáveis e diabéticos tratadas com LED (620-630nm) e laser (660nm). Foram selecionados aleatoriamente 36 ratos Wistar machos sendo 18 ratos com diabetes e 18 ratos sem diabetes, adultos com 8 semanas de idade, com peso variando entre 210 a 260 gramas, distribuídos em dois grupos: Grupo Saudáveis foi subdividido em três sub-grupos: Grupo Saudável Controle (GSC). Grupo Saudável Laser (SLaser). Grupo Saudável Led (SLED) e O 2º Grupo Diabéticos foi subdividido em três sub-grupos: Grupo Controle diabético (DC). Grupo Diabético Laser (DLaser); Grupo Diabético LED (DLED). Foram considerados diabéticos os ratos que após cinco dias da administração estreptozotocina (STZ) (47 mg / kg), apresentaram níveis de glicemia maiores ou iguais a 250 mg/dL. Iniciou aplicação do LED e Laser após 6 horas do procedimento cirúrgico. Para análise dos resultados foi realizado o teste estatístico de Kruskal-Wallis. Houve diferença significativa na comparação estatística entre os tratamentos (GDc vs GDLaser vs GDLED), em relação as variáveis: tecido conjuntivo fibroso e neovascularização. Nos grupos saudáveis e diabéticos foi encontrada moderada quantidade de tecido conjuntivo fibroso e neovascularização. Conclui-se que aplicação do LED e laser nas feridas cirúrgicas em ratos potencializa a cicatrização cutânea e a utilização do LED em ratos diabéticos promovem formação de maior quantidade de tecido conjuntivo fibroso e neovascularização.

The dysfunction of the leukocytes, macrophages and fibroblasts in people affected by Diabetes Mellitus, entails a prolonged inflammatory phase and consequently a slower cicatricial process. Laser and light emitting diode (LED) therapy has essential effects on skin repair, inflammatory process acceleration, edema reabsorption, increased fibroblast proliferation and increased collagen synthesis. Objective: To evaluate the healing process in cutaneous wounds in healthy and diabetic rats treated with LED (620-630nm) and laser (660nm). Thirty-six male Wistar rats were selected: 18 rats with diabetes and 18 rats without diabetes, 8 weeks old adults, weighing between 210 and 260 grams, divided into two groups: Healthy group was subdivided into three subgroups: Healthy Group Control (GSC). Healthy Laser Group (SLaser). Healthy Group Led (SLED) and the 2nd Diabetic Group was subdivided into three subgroups: Diabetic Control Group (DC). Diabetic Laser Group (DLaser); LED Diabetic Group (DLED). Rats greater than or equal to 250 mg / dL were found to be diabetic after five days after administration of streptozotocin (STZ) (47 mg / kg). Started LED and Laser application after 6 hours of surgical procedure. The Kruskal-Wallis statistical test was used to analyze the results. There was a significant difference in the statistical comparison between treatments (GDc vs GDLaser vs GDLED), in relation to the variables: fibrous connective tissue and neovascularization. In the healthy and diabetic groups we found a moderate amount of fibrous connective tissue and neovascularization. It is concluded that LED and laser application in surgical wounds in rats potentiates cutaneous healing and the use of LED in diabetic rats promote the formation of a greater amount of fibrous connective tissue and neovascularization.

EFEITO DO LASER NO REPARO EM FALHA ÓSSEA COM E SEM ENXERTO DE BIOMATERIAL EM RATOS

O uso da terapia a laser de baixa potencia (TLBP) e Biomateriais tem demonstrado resultados promissores quanto à cicatrização ossea, no entanto são escassas as comparações. Foram utilizados quarenta ratos machos da linhagem Wistar com peso entre 250 a 300 gramas, divididos em quatro grupos: Grupo Controle (GC); Grupo laser (GL); Grupo enxerto (GE) e Grupo Laser e Enxerto (GLE) nos quais foram realizados tratamentos propostos e avaliados com 15 dias e 30 dias. As fraturas foram padronizadas com o acesso cirúrgico por meio de uma incisão com uso da broca 0,44mm acoplado a um motor de alta rotação para produção do defeito na tíbia esquerda antero-superior e após 24 horas das lesões por meio de intervenção cirurgica, um grupo serviu de controle, sendo submetido à mesma incisão, mas o GE recebeu apenas tratamento com enxertia e o GC não recebeu qualquer tratamento. Já os GL e GLE receberam as irradiações aplicadas em dias alternados transcutaneamente em tres pontos em torno da ferida. Cada ponto recebeu uma dose de 6J/cm² dose total diaria foi de 18J/cm². Eutanásia foi realizada após 15 e 30 dias, os animais foram radiografados e o material foi coletado para posterior inclusão em parafina. Depois de corados pelas tecnicas de HE e lâmina corada por tricrômico de Masson, foram analisados em Microscopia de Luz. O presente estudo teve por objetivo analisar e comparar a consolidação ósseo em tíbias de ratos com terapia à laser associado ao biomaterial ou não e ao controle submetidos ou não à enxertia com biomateriais de origem bovina (enxerto composto de matriz orgânica).Onde conclui-se maior eficiencia do reparo ósseo no grupo laser e enxerto (GLE) no primeiro periodo de 15 dias de tratamento.

The use of low potency laser therapy (TLBP) and Biomaterials has shown promising results regarding bone healing, however comparisons are scarce. Forty male Wistar rats weighing 250-300 grams were divided into four groups: Control Group (GC); Laser group (GL); Group graft (GE) and Laser and Graft Group (GLE) in which treatments were proposed and evaluated at 15 days and 30 days. The fractures were standardized with surgical access through an incision using the 0.44mm drill bit coupled to a high rotation motor to produce the defect in the left anterior superior tibia and after 24 hours of the lesions by means of surgical intervention, one group underwent control, being submitted to the same incision, but the SG received only graft treatment and the GC received no treatment. The GL and GLE received the irradiations applied on alternate days transcutaneously at three points around the wound. Each point received a dose of 6J / cm² total daily dose was 18J / cm². Euthanasia was performed after 15 and 30 days, the animals were radiographed and the material was collected for later inclusion in paraffin. After staining with HE techniques and Masson's trichrome stained lamina, they were analyzed in Light Microscopy. The present study had the objective of analyzing and comparing the bone healing in tibiae of rats with laser therapy associated to biomaterial or not and control (graft composed of organic matrix). Where greater bone repair efficiency in the laser and graft group (GLE) was concluded in the first 15 days of treatment.

USO DO LASER DE BAIXA INTENSIDADE COMO POTENCIALIZADOR DA CICATRIZAÇÃO DE RETALHOS CUTÂNEOS TUBULARES DE PADRÃO SUBDÉRMICO DIRETOS EMPREGADOS EM COELHOS (Oryctolagus cuniculus).

Atualmente o retalho tubular de padrão subdérmico destinado à reconstrução da extremidade de membros é realizado de forma indireta, implicando em um processo de reconstrução composto por múltiplas fases de cirurgia. Além dos riscos inerentes a sucessivos procedimentos anestésicos, este processo pode levar ao aumento da morbidade do paciente e elevar o custo do tratamento, sendo que consequentemente, observa-se a subutilização da técnica na rotina em Medicina Veterinária. O presente estudo teve o objetivo de avaliar a ação do laser de baixa intensidade na preservação da vitalidade tecidual de retalhos de padrão subdérmico aplicados de forma direta para a reconstrução de defeitos na extremidade do membro torácico em coelhos. Quarenta coelhos foram divididos aleatoriamente em dois grupos com 20 animais cada, assim especificados: Grupo A submetidos à técnica de retalho tubular de padrão subdérmico tratados com laser a cada 48 horas (GT) e Grupo B submetidos ao mesmo procedimento cirúrgico, porém não receberam o tratamento com laser (GC). Os dois grupos foram subdivididos em quatro grupos com cinco animais cada, sendo nesses subgrupos realizado avaliações macroscópicas e eutanásia em diferentes dias no pós-operatório (4, 8, 16, e 22 dias de pós-operatório). Após a obtenção do retalho tubular, o material foi clivado na região de interface distal entre o retalho e leito receptor para avaliação microscópica. A análise dos dados evidenciou que tanto os animais do grupo GL quanto os animais do grupo GC apresentaram a maior parte do retalho tubular viável, mas a presença de necrose foi visualizada de forma frequente nos animais do GC aos 4 (p=0,0384) e 8 (p=0,0384) dias de pós-operatório. Houve também associação significativa (p<0,0001) entre neovascularização discreta e ausência de necrose nos animais do GL aos 4 dias. Aos 22 dias de pós-operatório a ausência de neovascularização estava associada (p<0,0001) a necrose discreta nos animais do GC. Dessa forma, é possível afirmar que o retalho tubular de padrão subdérmico direto pode ser empregado em coelhos, mesmo com um ângulo de rotação maior que 90 graus. Entretanto, há a necessidade de busca por estudos que comprovem a viabilidade da técnica empregada em outras espécies. O laser de baixa intensidade na dose e frequência empregadas neste estudo se mostrou eficaz em promover neovascularização e evitar complicações relacionadas a hipóxia e inflamação tecidual.

The tubular flap of the subdermal pattern applied for limb reconstruction is performed indirectly, implying in multiple steps reconstruction process. Beyond the risks inherent to several anesthetic procedures, the whole process can lead to an increase in patients morbidity and in total cost of treatment. Consequently, it could lead to the underutilization of the technique in the Veterinary Medicine routine. The aim of the present study was evaluate the action of low intensity laser in the preservation of the tissue vitality of subdermal patches applied directly to the reconstruction of defects at the extremity of the thoracic limb of rabbits. Forty rabbits were randomly divided into two groups with 20 animals each. Group A - submitted to the technique of tubular flap of subdermal pattern treated with laser every 48 hours (LG) and Group B - submitted to the same surgical procedure, but didnt undergo to the laser treatment (CG). The two groups were further subdivided into four groups with five animals each, and in each subgroups, the patients were submmited to macroscopic evaluations and euthanasia procedure were performed on different postoperative days (4, 8, 16, and 22 postoperative days). After obtaining the tubular flap, the material was cleaved at the distal interface region between the flap and recipient bed for microscopic evaluation. Data analysis showed that both TG and CG presented viability on the tubular flap, but the presence of necrosis was frequently seen in CG animals at 4 (p = 0.0384) and 8 (p = 0.0384) postoperative days. There was also a significant association (p <0.0001) between mild neovascularization and absence of necrosis in TG animals at 4 postoperative days. At 22 postoperative days the absence of neovascularization was associated (p <0.0001) with the mild necrosis in CG. In conclusion, it is possible to state that the tubular flap of direct subdermal pattern can be used in rabbits. However, it is necessary more studies to prove the viability of this technique in other species. The low intensity dose and frequency laser used in this study was shown to be effective in promoting neovascularization and avoid complications related to hypoxia and tissue inflammation.

EFEITO DO LASER DE BAIXA POTÊNCIA NA REPARAÇÃO DE DEFEITO OSTEOCONDRAL EM COELHOS

laser de baixa potência tem sido estudado como meio adjuvante no processo de cicatrização de diversos tipos de tecido. Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar histologicamente os efeitos da aplicação do laser de baixa potência na cicatrização osteocondral em coelhos. Foi avaliado o processo de reparação de defeito osteocondral experimental no joelho de 60 coelhos da raça Nova Zelândia, divididos em grupos tratado (G1) e controle (G2). Os animais do grupo tratado receberam aplicação do laser de baixa potência em intervalos pré determinados até o 56º dia de pós operatório. Observou-se que o laser de baixa potência otimizou o processo de reparação estimulando a vascularização, a proliferação de células mesenquimais, a osteogênese e condrogênese. Concluiu-se que a aplicação do laser de baixa potência, no modelo proposto, contribuiu para a celeridade do processo de reparação do defeito osteocondral, modulando a resposta inflamatória, estimulando a vascularização e a migração de células mesenquimais para a área da lesão e, consequentemente, potencializando o crescimento cartilaginoso e ósseo em todos os momentos de observação, quando comparado com o grupo não tratado.

The low-power laser has been studied as an adjuvant in the healing process of various types of tissue. This work was developed with the objective of histologically evaluating the effects of low power laser application on osteochondral healing in rabbits. The process of repair ofexperimental osteochondral defect in the knee of 60 New Zealand rabbits, divided into treated (G1) and control (G2) groups. The animals in the treated group received low power laser at predetermined intervals up to the 56th postoperative day. It was observed that the low-power laser optimized the repair process by stimulating vascularization, proliferation of mesenchymal cells, osteogenesis and chondrogenesis. The application of low power laser in the proposed model, contributed to the speed of the repair process of osteochondral defect, modulating the inflammatory response, stimulating the vascularization and migration of mesenchymal cells to the lesion area and, consequently, potentiating cartilage and bone growth at all moments of observation when compared to the untreated group.

Uso da técnica dos “Três L’s” no tratamento de ferida cutânea / “Three-L” technique on the treatment of skin injuries in horses / Tecnica de “los tres L” en el tratamiento de heridas cutáneas en caballos

Os ferimentos de pele são frequentes no atendimento clínico de equinos e, com isso, encontram- se na literatura vários protocolos terapêuticos referentes ao seu tratamento. No entanto, em busca de técnicas que acelerem o reparo celular e que ainda promovam uma cicatrização de qualidade, a fisioterapia aliada ao manejo clínico tem apresentado grandes vantagens. O caso descrito neste trabalho relata a utilização da técnica dos “Três L's”, que representa a associação de um curativo de baixa fricção à aplicação da pomada à base de Leptospermum scoparium, seguida da laserterapia, em uma ferida de grande extensão na face de uma potra Quarto de Milha. O metilglioxal, componente da pomada, tem potente propriedade anti-inflamatória e antibacteriaria, além de promover um ambiente adequado para a cicatrização. Já a fotobioestimulação promovida pelo LASER tem relação direta com a síntese de ATP celular, na redução da fase inflamatória e estimulação da fase proliferativa. A associação destes métodos apresentou bom resultado no caso relatado.

Skin injuries are often present on the equine medicine routine, and several therapeutic protocols aiming their treatment are described in literature. However, new techniques able to accelerate tissue repair and improve healing quality are under constant investigation. Thus, physical therapy has been proven as an ally on multiple clinical approaches, resulting in many advantageous outcomes. This case report describes the use of the "three-L technique" on an extensive face wound of a Quarter Horse filly. This technique consists on associating, within a daily wound-dressing protocol, a low frequency ointment friction (with Leptospermum scoparium in its composition), followed by laser therapy. Methylglyoxal, one of the main components of the ointment used, has potent anti-inflammatory and antibacterial properties, added to its capability in promoting a proper healing environment. Photobiostimulation provided by LASER directly affects cellular ATP synthesis, also reducing the inflammatory phase and aiding in the proliferative phase stimulation. Association of the aforementioned methods presented positive outcomes on the present case report.

Heridas cutáneas son constantes en la rutina clínica en la medicina equina y diversos tratamientos son descritos en la literatura. Sin embargo, nuevas técnicas que puedan acelerar la reparación de tejidos y mejorar la cualidad de cicatrización son constantemente investigadas. De esta forma, la fisioterapia es un poderoso aliado en el enfoque clínico, con resultados provechosos. Este informe de caso describe el uso de la técnica de “los tres L” en el tratamiento de una herida muy grande en la cara de una potra Cuarto de Milla. La técnica consiste en la asociación de una fricción de baja frecuencia con pomada a base de Leptospermum scoparium, con consecutiva aplicación de laserterapia. El metilglioxal, componente de la pomada, ejerce un potente efecto anti-inflamatorio e anti-bacteriano, además de promocionar un entorno favorable por la cicatrización. La fotobioestimulación fomentada por elLASER afecta directamente la síntesis de ATp, con la reducción de la fase inflamatoria y la estimulación de la fase proliferativa. La asociación de los métodos supra mencionados tuviera resultados positivos en el presente informe de caso.

Uso da técnica dos “Três Ls” no tratamento de ferida cutânea / “Three-L” technique on the treatment of skin injuries in horses / Tecnica de “los tres L” en el tratamiento de heridas cutáneas en caballos

Os ferimentos de pele são frequentes no atendimento clínico de equinos e, com isso, encontram- se na literatura vários protocolos terapêuticos referentes ao seu tratamento. No entanto, em busca de técnicas que acelerem o reparo celular e que ainda promovam uma cicatrização de qualidade, a fisioterapia aliada ao manejo clínico tem apresentado grandes vantagens. O caso descrito neste trabalho relata a utilização da técnica dos “Três L's”, que representa a associação de um curativo de baixa fricção à aplicação da pomada à base de Leptospermum scoparium, seguida da laserterapia, em uma ferida de grande extensão na face de uma potra Quarto de Milha. O metilglioxal, componente da pomada, tem potente propriedade anti-inflamatória e antibacteriaria, além de promover um ambiente adequado para a cicatrização. Já a fotobioestimulação promovida pelo LASER tem relação direta com a síntese de ATP celular, na redução da fase inflamatória e estimulação da fase proliferativa. A associação destes métodos apresentou bom resultado no caso relatado.(AU)

Skin injuries are often present on the equine medicine routine, and several therapeutic protocols aiming their treatment are described in literature. However, new techniques able to accelerate tissue repair and improve healing quality are under constant investigation. Thus, physical therapy has been proven as an ally on multiple clinical approaches, resulting in many advantageous outcomes. This case report describes the use of the "three-L technique" on an extensive face wound of a Quarter Horse filly. This technique consists on associating, within a daily wound-dressing protocol, a low frequency ointment friction (with Leptospermum scoparium in its composition), followed by laser therapy. Methylglyoxal, one of the main components of the ointment used, has potent anti-inflammatory and antibacterial properties, added to its capability in promoting a proper healing environment. Photobiostimulation provided by LASER directly affects cellular ATP synthesis, also reducing the inflammatory phase and aiding in the proliferative phase stimulation. Association of the aforementioned methods presented positive outcomes on the present case report.(AU)

Heridas cutáneas son constantes en la rutina clínica en la medicina equina y diversos tratamientos son descritos en la literatura. Sin embargo, nuevas técnicas que puedan acelerar la reparación de tejidos y mejorar la cualidad de cicatrización son constantemente investigadas. De esta forma, la fisioterapia es un poderoso aliado en el enfoque clínico, con resultados provechosos. Este informe de caso describe el uso de la técnica de “los tres L” en el tratamiento de una herida muy grande en la cara de una potra Cuarto de Milla. La técnica consiste en la asociación de una fricción de baja frecuencia con pomada a base de Leptospermum scoparium, con consecutiva aplicación de laserterapia. El metilglioxal, componente de la pomada, ejerce un potente efecto anti-inflamatorio e anti-bacteriano, además de promocionar un entorno favorable por la cicatrización. La fotobioestimulación fomentada por elLASER afecta directamente la síntesis de ATp, con la reducción de la fase inflamatoria y la estimulación de la fase proliferativa. La asociación de los métodos supra mencionados tuviera resultados positivos en el presente informe de caso.(AU)

COPAÍBA (Copaifera langsdorfii DESF.; CAESALPINIACEAE) EM ASSOCIAÇÃO AO LASER TERAPÊUTICO NO TRATAMENTO DE FERIDAS CUTÂNEAS EM RATOS WISTAR

Protocolos alternativos para o tratamento de feridas cutâneas vêm sendo desenvolvidos, com o uso de técnicas como a laserterapia de baixa potência e a fitoterapia, que objetivam otimizar esse processo. Nesse estudo avaliouse a eficácia da associação entre óleo-resina de Copaíba (Copaifera langsdorffii) e laserterapia de baixa potência, na cicatrização de feridas cutâneas, em comparação ao uso desses métodos separadamente. Foram utilizados 15 ratos Wistar (Rattus novergicus), nos quais confeccionaram-se cinco feridas de 8mm, através de punch de biopsia, sendo tratadas individualmente com os seguintes protocolos: grupo controle negativo, com solução fisiológica a 0,9% (T1); grupo controle positivo, com vaselina sólida (T2); grupo da laserterapia com AsGa (904nm), modo contínuo, focal, durante dez segundos, na dose de 4J/cm² (T3); grupo do óleo-resina de Copaíba, no qual aplicou-se uma gota do fitoterápico nas feridas (T4); e grupo de associação de óleoresina de Copaíba com a aplicação de laser de baixa potência (T5). A análise da eficácia de cada técnica se deu através da avaliação da taxa de cicatrização, análise histopatológica do infiltrado inflamatório das feridas, com coloração de Hematoxilina- Eosina, e expressão do colágeno, com o uso da coloração Picrosirius Red. Sendo os dados submetidos teste Kruskal-Wallis, dado que os resultados não se apresentaram paramétricos (P>0,05). A copaíba gerou vantagem na expressão de colágeno tipo III no tecido, dado que ambos os tratamentos com esse fitoterápico apresentaram os melhores resultados nesse parâmetro, enquanto a laserterapia demonstrou melhor capacidade de renovação tecidual, pois ambos os tratamentos com o uso da mesma tiveram os melhores resultados para fibroplasia no sétimo dia da cicatrização. Apesar de poucas vantagens da associação dessas duas técnicas, conclui-se que esse protocolo melhora o aspecto macroscópico das feridas, com menor formação de crostas.

Alternative protocols for the treatment of skin wounds have been developed, with the use of techniques such as low-level laser therapy and phytotherapy, aiming to optimize this process. This study evaluated the effectiveness of the association between Copaiba (Copaifera langsdorffii) oil-resin and low-power laser therapy, in the healing of cutaneous wounds, in comparison of these methods separately. Fifteen Wistar rats (Rattus novergicus) were used, in which five 8-mm wounds were made through a biopsy punch. They were treated individually with the following protocols: negative control group (T1); positive control group (T2); laser therapy with AsGa (904nm), continuous, focal mode, for ten seconds, dosage of 4J/cm² (T3); Copaiba oil-resin (T4); And group of associations between Copaiba and low-level laser (T5). The efficacy of each technique was evaluated with: wound healing rate, histopathological analysis of the inflammatory infiltrate of the wounds, with Hematoxylin-Eosin staining, and collagen expression, using Picrosirius Red staining. Statistical test used to analyze the data was Kruskal-Wallis (P> 0.05). Copaiba generated an advantage in the expression of type III collagen, because both treatments showed the best results in this parameter, whereas the laser therapy demonstrated a better ability of tissue renewal, since both treatments with this technique had the best results for fibroplasia in the middle of healing process. Although there are few advantages from the association of the two techniques, it is concluded that this protocol improves the macroscopic aspect of the wounds, with less crust formation.

EPITELIZAÇÃO DE ENXERTOS CUTÂNEOS EM FERIDAS RECENTES DE COELHOS TRATADOS COM MEMBRANA AMNIÓTICA CANINA E/OU LASERTERAPIA

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente nas quais existe dificuldade da aplicação do fechamento primário, ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com a presença de um tecido de granulação exuberante. O objetivo deste trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Para isso, foram utilizados 42 coelhos divididos em quatro grupos de tratamento, grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas dos enxertos. Na avaliação macroscópica foi possível notar que os pacientes dos grupos onde a membrana amniótica foi utilizada com o intuito de estimular a reepitelização (GM e GML) apresentaram acentuada reação inflamatória, falha de integração do enxerto e consequente necrose do mesmo. Já os pacientes do grupo GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto nos pacientes do grupo GL. O oposto foi observado nos pacientes dos grupos GM e GML, onde aparentemente a presença da membrana amniótica induziu resposta inflamatória bastante consistente na região adjacente à membrana e ao enxerto, resultando em rejeição da membrana. Por último, a formação de colágeno não se correlaciona com outros fatores como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Desta forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para este fim, pois provoca intensa reação inflamatória além de impedir a nutrição do enxerto.

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for the graft survival it is necessary that the healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential stimulating healing in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination was possible to note that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. In LG patients apparently had the best aspect of the graft in the last valuation date. On the microscopic examination, there was intense integration of the graft to the dermis, high reepithelialization level and scarce inflammatory cells in the graft site of LG group patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where apparently the presence of amniotic membrane seems to have induced very consistent inflammatory response in the region adjacent to the membrane and the graft, evincing that there was a rejection of the membrane. Finally, the collagen formation does not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, the canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides to avoid graft nutrition.