Hygienic and sanitary characteristics of dry salted fish marketed in Porto Velho city, Rondônia ­ Brazil / Características higiênico-sanitárias de pescado salgado seco comercializado em Porto Velho, Rondônia ­ Brasil

Handcrafted salted fish is marketed weekly in retail markets and public fairs in the Porto Velho city, Rondônia sate, Brazil. Knowing the microbiological quality of these products is essential for public health, given that such products are not subject to any quality control. The aimed of the study was to evaluate the hygienic-sanitary characteristics and the moisture content of pirarucu and salted and dried shrimp marketed in the Porto Velho city. Twenty samples were collected, 10 pirarucu and 10 shrimp, in February and June 2019. For microbiological analysis, surface plating was performed using acidified potato agar, for molds and yeasts, and PCA agar for halophilic bacterias. Moisture was determined by gravimetry, using an oven at 105° C. Results for molds and yeasts on pirarucu ranged <10 log CFU/g (absent) to 3 log CFU/g. For shrimp, values ranged <10 log CFU/g to 3.57 log CFU/g. For halophilic bacterias, contents ranged <10 log CFU/g to 6.30 log CFU/g in pirarucu samples and <10 log CFU/g to 6.97 log CFU/g in shrimp samples. The variation in moisture content ranged 36.99 to 54.31% for pirarucu, and 40.6 to 56.82% for shrimp. The results obtained may be related to poor hygienic conditions in processing, the lack of hygiene of utensils and places for handling, or even the quality of the raw material used.(AU)

Pescado salgado preparado artesanalmente é semanalmente comercializado em mercados varejistas e feiras públicas na cidade de Porto Velho, Rondônia. Conhecer a qualidade microbiológica desses produtos é essencial para a saúde pública, haja visto, que tais produtos não estão sujeitos a nenhum controle de qualidade. O objetivo do estudo foi avaliar as caracterís-ticas higiênico-sanitárias e o teor de umidade de pirarucus e camarões salgados e secos comercializados em Porto Velho. Foram coletadas 20 amostras, 10 de pirarucu e 10 de camarão, em fevereiro e junho de 2019. Para as análises microbiológicas foi realizado o plaqueamento em superfície usando-se ágar batata acidificado, para bolores e leveduras, e ágar PCA para as bacté-rias halofílicas. A umidade foi determinada por gravimetria, com uso de estufa a 105°C. Os resultados para bolores e leveduras em pirarucu variaram de <10 log UFC/g (ausente) a 3 log UFC/g. Para os camarões os valores variaram de <10 log UFC/g a 3,57 log UFC/g. Para as bactérias halofílicas os teores variaram de <10 log UFC/g a 6,30 log UFC/g nas amostras de pirarucu e de <10 log UFC/g a 6,97 log UFC/g nas amostras de camarão. A variação nos teores de umidade foi de 36,99 a 54,31% para o pirarucu, e de 40,6 a 56,82% para o camarão. Os resultados obtidos podem estar relacionados às más condições higiênicas no processamento, à falta de higiene dos utensílios e dos locais de manipulação, ou ainda, à qualidade da matéria-prima empregada.(AU)

Yeast microbiota of free-ranging amphibians and reptiles from Caatinga biome in Ceará State, Northeast Brazil: High pathogenic potential of Candida famata / Leveduras da microbiota de anfíbios e répteis do bioma Caatinga no Ceará, Nordeste do Brasil: alto potencial patogênico de Candida famata

Studies on the fungal microbiota of reptiles and amphibians are necessary to better understand of host-microbe interactions and the establishment of fungal disease in these animals. However, these studies are limited. The present researchidentified yeasts from free-ranging reptiles and amphibians from the Caatinga biome andevaluated the virulence factors production, the antifungal susceptibility in planktonic and biofilm growth and the pathogenicity of Candida famata isolates. Twenty-nine isolates of the genera Candida, Cryptococcus and Rhodotorula were identified by phenotypic and/or molecular methods and production of hydrolytic enzymes in vitro by these genera of fungi was evaluated. In addition, susceptibility of planktonic cells and biofilms to azoles and amphotericin B was evaluated. The pathogenicity of C. famata, the most prevalent yeast species isolated, was evaluated using Caenorhabditis elegans model. C. famata was the most prevalent yeast in amphibian and reptilian microbiota. Phospholipase and protease production was observed in 18/29 and 11/29 of the yeast isolates, respectively, while 100% formed biofilms. Itraconazole presented high minimal inhibitory concentrations against C. famata and C. tropicalis. Amphotericin B reduced the biomass and metabolic activity of biofilms. C. famata induced the mortality of C. elegans. In conclusion, reptiles and amphibians are colonized by yeasts capable of producing important virulence factors, especially by Candida spp. that present low susceptibility to azoles which may result from imbalances in ecosystem. Finally, C. famata isolated from these animals presented high pathogenicity, showing the importance of the study of reptile and amphibians fungal microbiota.(AU)

Estudos sobre a microbiota fúngica de répteis e anfíbios são necessários para melhor compreender as interações hospedeiro-microrganismo e o estabelecimento de doenças fúngicas nesses animais. No entanto, esses estudos são limitados. O objetivo da presente pesquisa foi identificar leveduras isoladas de répteis e anfíbios do bioma Caatinga e avaliar a produção de fatores de virulência, a sensibilidade a antifúngicos no crescimento planctônico e de biofilme e a patogenicidade de Candida famata. Vinte e nove isolados dos gêneros Candida, Cryptococcus e Rhodotorula foram identificados por métodos fenotípicos e/ou moleculares e a produção de enzimas hidrolíticas in vitro por esses gêneros de fungos foi avaliada. Além disso, foi avaliada a suscetibilidade de células planctônicas e biofilmes a azólicos e anfotericina B. A patogenicidade de C. famata, a espécie de levedura isolada mais prevalente, foi avaliada usando Caenorhabditis elegans. C. famata foi a levedura mais prevalente na microbiota de anfíbios e répteis. A produção de fosfolipase e protease foi observada em 18/29 e 11/29 dos isolados de levedura, respectivamente, enquanto 100% formaram biofilmes. O itraconazol apresentou altas concentrações inibitórias mínimas contra C. famata e C. tropicalis. A anfotericina B reduziu a biomassa e atividade metabólica dos biofilmes. C. famata induziu a mortalidade de C. elegans. Em conclusão, répteis e anfíbios são colonizados por leveduras capazes de produzir importantes fatores de virulência, especialmente por cepas de Candida spp. que apresentam baixa suscetibilidade a azólicos que podem resultar de desequilíbrio no ecossistema. Por fim, C. famata isolados desses animais apresentaram alta patogenicidade, mostrando a importância do estudo da microbiota fúngica de répteis e anfíbios.(AU)

Etiologia microbiana e perfil de resistência bacteriana in vitro em otites externas de cães: estudo retrospectivo em animais atendidos na rotina de hospital veterinário (2013 a 2020) / Microbial etiology and in vitro bacterial resistance profile in external dogs otitis: retrospective study in animals attended in the routine of veterinary hospital (2013 to 2020) / Etiología microbiana y perfil de resistencia bacteriana in vitro en otitis externa en perros: estudio retrospectivo en animales atendidos en la rutina de hospital veterinario (2013 a 2020)

El objetivo de este estudio fue identificar la microbiota y describir el perfil de sensibilidad de las bacterias a los antimicrobianos en perros con otitis externa tratados en un hospital veterinario. Para ello, se analizaron 559 muestras otológicas de perros con clínica de otitis externa sometidas a cultivo y antibiograma. Hubo crecimiento de microorganismos en el 93,6% (523/559) de las muestras, y en el 88,5% (463/523) hubo crecimiento de bacterias, 5,7% (30/523) de levaduras y 5,7% (30/523) infecciones mixtas. Se obtuvieron 702 cepas, Staphylococcus spp. 55,1% (387/702), Pseudomonas spp. 11,8% (83/702) y Proteus mirabilis 9,8% (69/702) los agentes bacterianos más aislados. Entre las levaduras, Malassezia pachydermatis 10,3% (54/523) fue la más frecuente. En cuanto a los resultados del perfil de sensibilidad de las bacterias a los antimicrobianos, se observó que las bacterias Gram positivas Staphylococcus spp. y Streptococcus spp. mostraron mayor sensibilidad a amoxicilina + ácido clavulánico, con 92,5% y 100% de cepas sensibles. Las bacterias gram negativas Pseudomonas spp., P. mirabilis y Escherichia coli, presentaron sensibilidad mayor al 90% a la tobramicina. Entre todos los agentes bacterianos, Pseudomonas spp. fue el que mostró mayores tasas de resistencia frente a amoxicilina + ácido clavulánico (6,2%), cefalexina (7,4%) y sulfametoxazol + trimetoprima (13,6%)...

The objective of this work was to identify the microbial etiology and describe the sensitivity profile of bacteria to antimicrobials in dogs with otitis externa attended at a veterinary school hospital. For this, 559 otological samples from dogs with clinical signs of otitis externa submitted to culture and antibiogram were analyzed. There was growth of microorganisms in 93.6% (523/559) of the samples, and in 88.5% (463/523) there was the growth of bacteria, in 5.7% (30/523) the growth of yeasts and 5.7% (30/523) mixed infections. 702 strains were obtained, being Staphylococcus spp. 55.1% (387/702), Pseudomonas spp. 11.8% (83/702) and Proteus mirabilis 9.8% (69/702) the most isolated bacterial agents. Among yeasts, Malassezia pachydermatis 10.3% (54/523) was the most frequent. Regarding the results of the sensitivity profile of bacteria to antimicrobials, it was observed that Gram-positive bacteria Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. showed greater sensitivity to amoxicillin + clavulanic acid, with 92.5% and 100% of sensitive strains. Gram-negative bacteria Pseudomonas spp., P. mirabilis and Escherichia coli, presented sensitivity greater than 90% to tobramycin. Among all bacterial agents, Pseudomonas spp. was the one that demonstrated the highest resistance rates against amoxicillin + clavulanic acid (6.2%), cephalexin (7.4%) and sulfamethoxazole + trimethoprim (13.6%)...

O objetivo deste trabalho foi identificar a etiologia microbiana e descrever o perfil de sensibilidade das bactérias aos antimicrobianos em cães com otite externa atendidos em serviço hospitalar médico veterinário. Para isso, foram analisadas 559 amostras otológicas de cães com sinais clínicos de otite externa submetidas à cultura e antibiograma. Houve crescimento de microrganismos em 93,6% (523/559) das amostras, sendo que em 88,5% (463/523) houve crescimento de bactérias, 5,7% (30/523) crescimento de leveduras e 5,7% (30/523) infecções mistas. Foram obtidas 702 cepas, sendo Staphylococcus spp. 55,1% (387/702), Pseudomonas spp. 11,8% (83/702) e Proteus mirabilis 9,8% (69/702) os agentes bacterianos mais isolados. Dentre as leveduras, Malassezia pachydermatis 10,3% (54/523) foi a mais freqüente. Em relação aos resultados do perfil de sensibilidade das bactérias aos antimicrobianos, observou-se que as bactérias Gram-positivas Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. apresentaram maior sensibilidade a amoxicilina + ácido clavulânico, com 92,5% e 100% das cepas sensíveis. Já as bactérias Gram-negativas Pseudomonas spp., P. mirabilis e Escherichia coli, apresentaram sensibilidade superior a 90% a tobramicina. Dentre todos os agentes bacterianos, Pseudomonas spp. foi o que demonstrou as maiores taxas de resistência frente a amoxicilina + ácido clavulânico (6,2%), cefalexina (7,4%) e...

Etiologia microbiana e perfil de resistência bacteriana in vitro em otites externas de cães: estudo retrospectivo em animais atendidos na rotina de hospital veterinário (2013 a 2020) / Microbial etiology and in vitro bacterial resistance profile in external dogs otitis: retrospective study in animals attended in the routine of veterinary hospital (2013 to 2020) / Etiología microbiana y perfil de resistencia bacteriana in vitro en otitis externa en perros: estudio retrospectivo en animales atendidos en la rutina de hospital veterinario (2013 a 2020)

El objetivo de este estudio fue identificar la microbiota y describir el perfil de sensibilidad de las bacterias a los antimicrobianos en perros con otitis externa tratados en un hospital veterinario. Para ello, se analizaron 559 muestras otológicas de perros con clínica de otitis externa sometidas a cultivo y antibiograma. Hubo crecimiento de microorganismos en el 93,6% (523/559) de las muestras, y en el 88,5% (463/523) hubo crecimiento de bacterias, 5,7% (30/523) de levaduras y 5,7% (30/523) infecciones mixtas. Se obtuvieron 702 cepas, Staphylococcus spp. 55,1% (387/702), Pseudomonas spp. 11,8% (83/702) y Proteus mirabilis 9,8% (69/702) los agentes bacterianos más aislados. Entre las levaduras, Malassezia pachydermatis 10,3% (54/523) fue la más frecuente. En cuanto a los resultados del perfil de sensibilidad de las bacterias a los antimicrobianos, se observó que las bacterias Gram positivas Staphylococcus spp. y Streptococcus spp. mostraron mayor sensibilidad a amoxicilina + ácido clavulánico, con 92,5% y 100% de cepas sensibles. Las bacterias gram negativas Pseudomonas spp., P. mirabilis y Escherichia coli, presentaron sensibilidad mayor al 90% a la tobramicina. Entre todos los agentes bacterianos, Pseudomonas spp. fue el que mostró mayores tasas de resistencia frente a amoxicilina + ácido clavulánico (6,2%), cefalexina (7,4%) y sulfametoxazol + trimetoprima (13,6%)...(AU)

The objective of this work was to identify the microbial etiology and describe the sensitivity profile of bacteria to antimicrobials in dogs with otitis externa attended at a veterinary school hospital. For this, 559 otological samples from dogs with clinical signs of otitis externa submitted to culture and antibiogram were analyzed. There was growth of microorganisms in 93.6% (523/559) of the samples, and in 88.5% (463/523) there was the growth of bacteria, in 5.7% (30/523) the growth of yeasts and 5.7% (30/523) mixed infections. 702 strains were obtained, being Staphylococcus spp. 55.1% (387/702), Pseudomonas spp. 11.8% (83/702) and Proteus mirabilis 9.8% (69/702) the most isolated bacterial agents. Among yeasts, Malassezia pachydermatis 10.3% (54/523) was the most frequent. Regarding the results of the sensitivity profile of bacteria to antimicrobials, it was observed that Gram-positive bacteria Staphylococcus spp. and Streptococcus spp. showed greater sensitivity to amoxicillin + clavulanic acid, with 92.5% and 100% of sensitive strains. Gram-negative bacteria Pseudomonas spp., P. mirabilis and Escherichia coli, presented sensitivity greater than 90% to tobramycin. Among all bacterial agents, Pseudomonas spp. was the one that demonstrated the highest resistance rates against amoxicillin + clavulanic acid (6.2%), cephalexin (7.4%) and sulfamethoxazole + trimethoprim (13.6%)...(AU)

O objetivo deste trabalho foi identificar a etiologia microbiana e descrever o perfil de sensibilidade das bactérias aos antimicrobianos em cães com otite externa atendidos em serviço hospitalar médico veterinário. Para isso, foram analisadas 559 amostras otológicas de cães com sinais clínicos de otite externa submetidas à cultura e antibiograma. Houve crescimento de microrganismos em 93,6% (523/559) das amostras, sendo que em 88,5% (463/523) houve crescimento de bactérias, 5,7% (30/523) crescimento de leveduras e 5,7% (30/523) infecções mistas. Foram obtidas 702 cepas, sendo Staphylococcus spp. 55,1% (387/702), Pseudomonas spp. 11,8% (83/702) e Proteus mirabilis 9,8% (69/702) os agentes bacterianos mais isolados. Dentre as leveduras, Malassezia pachydermatis 10,3% (54/523) foi a mais freqüente. Em relação aos resultados do perfil de sensibilidade das bactérias aos antimicrobianos, observou-se que as bactérias Gram-positivas Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. apresentaram maior sensibilidade a amoxicilina + ácido clavulânico, com 92,5% e 100% das cepas sensíveis. Já as bactérias Gram-negativas Pseudomonas spp., P. mirabilis e Escherichia coli, apresentaram sensibilidade superior a 90% a tobramicina. Dentre todos os agentes bacterianos, Pseudomonas spp. foi o que demonstrou as maiores taxas de resistência frente a amoxicilina + ácido clavulânico (6,2%), cefalexina (7,4%) e...(AU)

Sensitivity to antifungals by Candida spp samples isolated from cases of chronic atrophic candidiasis (CAC) / Sensibilidade a antifúngicos por amostras de Candida spp isoladas de casos de candidíase atrófica crônica (CAC)

The treatment of choice for chronic atrophic candidiasis (CAC), also known as denture stomatitis, is topical antifungal therapy. This study aimed to isolate, identify, and assess the antifungal susceptibility of Candida species from mucosal sites in denture wearers with a diagnosis of CAC and determine the prevalence of associated variables. The sample consisted of 44 patients wearing complete or partial dentures who had a clinical diagnosis of CAC. Using sterile cotton swabs, specimens were collected from the oral mucosa of all patients and grown at 30ºC for 48 h in CHROMagar Candida, as a means of isolating and screening the species. The complementary identification of the species was performed using the VITEK 2 automated system (BioMérieux), as well as the determination of their susceptibility to antifungal agents. Data were analyzed using the chi-square test. STATA 13.1 was used for statistical analysis ( = 5%). Of 44 patients with CAC, 33 (75%) had lesions classified as Newton type II. Yeasts were isolated in 38 cases. The most prevalent species was Candida albicans. None of the isolates were resistant to the antifungals tested. Our findings suggest that current indications for antifungal agents are appropriate. Also, antifungal susceptibility testing and proper fungal identification can help dentists to determine the optimal course of treatment for CAC.(AU)

O tratamento de escolha para candidíase atrófica crônica (CAC), também conhecida como estomatite protética, é a terapia antifúngica tópica. Este estudo teve como objetivo isolar, identificar e avaliar a susceptibilidade antifúngica de espécies de Candida de locais mucosos em portadores de prótese com diagnóstico de CAC e determinar a prevalência de variáveis associadas. A amostra consistiu em 44 pacientes portadores de próteses completas ou parciais que tiveram um diagnóstico clínico de CAC. Usando swab estéril, foram coletados espécimes da mucosa oral de todos os pacientes e cultivados a 30ºC durante 48 h em CHROMagar Candida, como forma de isolamento e triagem das espécies. A identificação complementar das espécies foi realizada no sistema automatizado VITEK 2 (BioMérieux), bem como a determinação da susceptibilidade delas a agentes antifúngicos. Os dados foram analisados usando o teste do qui-quadrado. O STATA 13.1 foi utilizado para análise estatística ( = 5%). Dos 44 pacientes com CAC, 33 (75%) apresentaram lesões classificadas como Newton tipo II. As leveduras foram isoladas em 38 casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans. Nenhum dos isolados foi resistente aos antifúngicos testados. Nossas descobertas sugerem que as indicações atuais para os agentes antifúngicos são apropriadas. Além disso, testes de susceptibilidade antifúngicos e identificação fúngica adequada podem ajudar os dentistas a determinar o curso ótimo de tratamento para CAC.(AU)

Mold species and fungi load of washed and unwashed table eggs / Espécies de bolores e contaminação fúngica de ovos de galinha lavados e não lavados

Egg quality has been widely studied, mainly because defects in quality can pose risks to public health, as well as economic losses. Nevertheless, studies about fungi in eggs are scarce. The objective was to compare the fungal microbiota from washed and unwashed eggs in the rainy season and dry season of the year. This exploratory research consisted in the analysis of large size white table eggs acquired from 48 different lots. Two manufacturers were sampled considering the main characteristic of washed or unwashed eggs. From each lot, a 30-egg pack were purchased and six of those eggs were used for mycological analyzes. The eggs were analyzed externally with 0.1% peptone salt solution wash of the eggshells and internally with aliquots being sampled from a pool made from the six eggs content. Samples were inoculated in Potato Dextrose Agar and isolated colonies were passed to test tubes. When sporulated, the isolates were subjected to decimal dilutions using 0.1% Tween 80 to dissociate the conidia. Microcultures were carried out for optical microscopy observation of the reproductive structures of fungi, stained with lactophenol. Aspergillus spp. was the most frequently isolated fungi isolated, with A. niger and A. flavus predominant in the dry season, while A. fumigatus and A. terreus in the rainy season. Low numbers of fungi were identified from egg shells, with a higher

A qualidade do ovo já foi largamente estudada, especialmente por causa de defeitos na qualidade que podem significar riscos para a saúde pública, além de perdas econômicas. Entretanto, estudos sobre fungos em ovos são escassos. O objetivo foi comparar a microbiota fúngica de ovos lavados e ovos não lavados nas estações chuvosa e seca do ano. As amostras consistiram de ovos comerciais, do tipo branco e tamanho grande, com caráter exploratório pela análise de 48 lotes. Dois fabricantes foram amostrados considerando a característica principal de ovos lavados ou não lavados. De cada lote, foram adquiridos 30 ovos, sendo seis ovos utilizados nas análises micológicas. Os ovos foram analisados externamente fazendo lavagem com solução salina peptonada e internamentecom alíquotas retiradas de pools de seis ovos. Amostras foram inoculadas em Ágar Dextrose Batata e os isolados foram passados para tubos de ensaio. Posteriormente as colônias foram replicadas para tubos de ensaio contendo meio Ágar Dextrose Batata. Quandojá esporulados, os isolados foram submetidos a diluições utilizando Tween 80 0,1% para desagregar os conídios. Foram realizados microcultivos para observação em microscópio óptico das estruturas de reprodução dos fungos, corados com lactofenol. Aspergillusspp. foi a espécie mais frequentemente isolada, com predominância de A. niger e A. flavus na estação seca e A. fumigatuseA. terreusna chuvosa. Baixas quantidades de fungos foram observadas nas cascas dos ovos, com quantidades maiores em ovos não lavados.

Mold species and fungi load of washed and unwashed table eggs / Espécies de bolores e contaminação fúngica de ovos de galinha lavados e não lavados

Egg quality has been widely studied, mainly because defects in quality can pose risks to public health, as well as economic losses. Nevertheless, studies about fungi in eggs are scarce. The objective was to compare the fungal microbiota from washed and unwashed eggs in the rainy season and dry season of the year. This exploratory research consisted in the analysis of large size white table eggs acquired from 48 different lots. Two manufacturers were sampled considering the main characteristic of washed or unwashed eggs. From each lot, a 30-egg pack were purchased and six of those eggs were used for mycological analyzes. The eggs were analyzed externally with 0.1% peptone salt solution wash of the eggshells and internally with aliquots being sampled from a pool made from the six eggs content. Samples were inoculated in Potato Dextrose Agar and isolated colonies were passed to test tubes. When sporulated, the isolates were subjected to decimal dilutions using 0.1% Tween 80 to dissociate the conidia. Microcultures were carried out for optical microscopy observation of the reproductive structures of fungi, stained with lactophenol. Aspergillus spp. was the most frequently isolated fungi isolated, with A. niger and A. flavus predominant in the dry season, while A. fumigatus and A. terreus in the rainy season. Low numbers of fungi were identified from egg shells, with a higher(AU)

A qualidade do ovo já foi largamente estudada, especialmente por causa de defeitos na qualidade que podem significar riscos para a saúde pública, além de perdas econômicas. Entretanto, estudos sobre fungos em ovos são escassos. O objetivo foi comparar a microbiota fúngica de ovos lavados e ovos não lavados nas estações chuvosa e seca do ano. As amostras consistiram de ovos comerciais, do tipo branco e tamanho grande, com caráter exploratório pela análise de 48 lotes. Dois fabricantes foram amostrados considerando a característica principal de ovos lavados ou não lavados. De cada lote, foram adquiridos 30 ovos, sendo seis ovos utilizados nas análises micológicas. Os ovos foram analisados externamente fazendo lavagem com solução salina peptonada e internamentecom alíquotas retiradas de pools de seis ovos. Amostras foram inoculadas em Ágar Dextrose Batata e os isolados foram passados para tubos de ensaio. Posteriormente as colônias foram replicadas para tubos de ensaio contendo meio Ágar Dextrose Batata. Quandojá esporulados, os isolados foram submetidos a diluições utilizando Tween 80 0,1% para desagregar os conídios. Foram realizados microcultivos para observação em microscópio óptico das estruturas de reprodução dos fungos, corados com lactofenol. Aspergillusspp. foi a espécie mais frequentemente isolada, com predominância de A. niger e A. flavus na estação seca e A. fumigatuseA. terreusna chuvosa. Baixas quantidades de fungos foram observadas nas cascas dos ovos, com quantidades maiores em ovos não lavados.(AU)

Avaliação microbiológica e sensorial de alfajor vegano e sem glúten elaborado a partir da farinha de okara de amendoim / Microbiological analysis and sensory evaluation of a vegan gluten free alfajor produced with okara peanut flour

O veganismo cresceu nos últimos anos e é cada vez maior o número de pessoas que praticam uma dieta com restrições alimentares. O objetivo do trabalho foi desenvolver um alfajor vegano sem glúten, utilizando farinha de okara de amendoim e avaliar suas características microbiológicas e aceitação sensorial. As amostras foram submetidas a testes sensoriais de aceitação e microbiológicos para coliformes, bolores e leveduras. Os testes para coliformes foram realizados utilizando-se Caldo Lauril Sulfato Triptose e para a análise de bolores e leveduras foi realizada a contagem total por plaqueamento em superfície nos meios Ágar Dicloran Rosa de Bengala Cloranfenicol e Ágar Batata Dextrose. A formulação obteve boa aceitação e os resultados das análises microbiológicas mostraram que o produto possui qualidade microbiológica satisfatória de pelo menos seis dias. Logo, a utilização da farinha de okara de amendoim se mostrou interessante para o desenvolvimento de um alfajor venago e sem glúten.(AU)

Avaliação microbiológica e sensorial de alfajor vegano e sem glúten elaborado a partir da farinha de okara de amendoim / Microbiological analysis and sensory evaluation of a vegan gluten free alfajor produced with okara peanut flour

O veganismo cresceu nos últimos anos e é cada vez maior o número de pessoas que praticam uma dieta com restrições alimentares. O objetivo do trabalho foi desenvolver um alfajor vegano sem glúten, utilizando farinha de okara de amendoim e avaliar suas características microbiológicas e aceitação sensorial. As amostras foram submetidas a testes sensoriais de aceitação e microbiológicos para coliformes, bolores e leveduras. Os testes para coliformes foram realizados utilizando-se Caldo Lauril Sulfato Triptose e para a análise de bolores e leveduras foi realizada a contagem total por plaqueamento em superfície nos meios Ágar Dicloran Rosa de Bengala Cloranfenicol e Ágar Batata Dextrose. A formulação obteve boa aceitação e os resultados das análises microbiológicas mostraram que o produto possui qualidade microbiológica satisfatória de pelo menos seis dias. Logo, a utilização da farinha de okara de amendoim se mostrou interessante para o desenvolvimento de um alfajor venago e sem glúten.

Micobiota do Queijo Artesanal Serrano produzido em Santa Catarina, Brasil / Mycobiota of Serrano Artisanal Cheese produced in Santa Catarina, Brazil

O Queijo Artesanal Serrano é um produto nativo do sul do Brasil, produzido por mão de obra familiar a partir do leite cru, e que vem buscando a obtenção da sua indicação geográfica. Muitas das características que particularizam os tipos de queijo são dadas pela sua micobiota natural. O objetivo deste estudo foi determinar as espécies fúngicas presentes em 20 amostras de Queijo Artesanal Serrano de quatro períodos de maturação (14, 21, 28 e 35 dias), produzidos em outubro de 2017, em Santa Catarina. A identificação dos bolores foi feita por chaves de identificação e das leveduras por MALDI-TOF. Os bolores foram isolados em 28 das 80 amostras e com espécies variáveis, sendo algumas contaminantes. Por outro lado, as leveduras foram detectadas em todas as amostras, com alguns gêneros mais frequentes, principalmente o Kluyveromyces lactis, presente em 27 amostras, e algumas espécies de Candida spp. As espécies identificadas já foram isoladas em outros queijos artesanais brasileiros, produzido em locais com características de clima e relevo semelhantes ao do Queijo Artesanal Serrano.(AU)

Serrano Artisanal Cheese is a native product from the South region of Brazil, produced by family labor from raw milk, which seeks to obtain its geographical indication. Many of the characteristics that particularize the types of cheese are given by its natural mycobiota. The objective of this study was to determine the fungal species present in 20 samples of Serrano Artisanal Cheese from four ripening periods (14, 21, 28, and 35 days), produced in October 2017, in Santa Catarina. Identification of molds was made by identification keys and yeasts by MALDI-TOF. The molds were isolated in 28 of the 80 samples and with various species, some being attributed to contamination. On the other hand, yeasts were detected in all samples, with some genera being more frequent, specially Kluyveromyces lactis, present in 27 samples, and some species of Candida spp. The identified species have already been isolated in other Brazilian artisanal cheeses produced in places with similar climate and relief to that of Serrano Artisanal Cheese. (AU)

Nutritive value of sugarcane silages added with increasing levels of acetic acid / Valor nutricional de silagens de cana-de-açúcar aditivadas com níveis crescentes de ácido acético

The objective of this study was to evaluate the effect of adding acetic acid during ensiling on fermentation quality and nutritive value of sugarcane (Saccharum officinarum). The treatments consisted of sugarcane silages of IAC 86-2480 variety added with five inclusion levels of glacial acetic acid (0, 15, 30, 45 and 60 g kg-1 in the dry matter basis). A completely randomized design with five treatments and six replicates was used. The glacial acetic acid had a pH of 2.9 (0.1M). The pH of the sugarcane silage reduced by 0.07 units for each 10 g kg-1 of acetic acid added (P < 0.01). The N-NH3 concentration in the ensiled mass was not affected by treatments, averaging 4.5 g kg-1 in the dry matter basis (P = 0.91). The means for effluent losses were adjusted to the quadratic regression model (P < 0.01). The yeast population reduced by 0.44 log CFU g-1 of silage for each 10 g kg-1 of acetic acid added (P < 0.01). The addition of acetic acid to sugarcane silages reduces the fermentation losses and the yeast population, besides improving the nutritive value of silages in levels from 15 g kg-1 of dry matter.

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da adição de ácido acético durante a ensilagem na qualidade fermentativa e valor nutritivo de silagem de cana-de-açúcar (Saccharaum officinarum). Os tratamentos consistiram de silagem de cana-de-açúcar variedade IAC 86-2480 com cinco doses de ácido acético glacial (0, 15, 30, 45 e 60 g kg-1 na base da matéria seca). Foi utilizado delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e seis repetições. O pH do ácido acético glacial foi de 2,9 (0.1M). O ph da silagem de cana-de-açúcar reduziu 0,07 unidades para cada 10 g kg-1 de ácido acético adicionado (P < 0,01). A concentração de N-NH3 na massa ensilada não foi afetada pelos tratamentos, com média de 4,5 g kg-1 na matéria seca (P = 0,91). As médias para perdas por efluente se ajustaram ao modelo de regressão quadrático (P < 0,01). A população de leveduras reduziu 0,44 log UFC g-1 na silagem para cada 10 g kg-1 de ácido acético adicionado (P < 0,01). A adição de ácido acético em silagens de cana-de-açúcar reduz as perdas fermentativas e a população de leveduras, além de melhorar o valor nutritivo de silagens na dose de 15 g kg-1 na matéria seca.

Micobiota do Queijo Artesanal Serrano produzido em Santa Catarina, Brasil / Mycobiota of Serrano Artisanal Cheese produced in Santa Catarina, Brazil

O Queijo Artesanal Serrano é um produto nativo do sul do Brasil, produzido por mão de obra familiar a partir do leite cru, e que vem buscando a obtenção da sua indicação geográfica. Muitas das características que particularizam os tipos de queijo são dadas pela sua micobiota natural. O objetivo deste estudo foi determinar as espécies fúngicas presentes em 20 amostras de Queijo Artesanal Serrano de quatro períodos de maturação (14, 21, 28 e 35 dias), produzidos em outubro de 2017, em Santa Catarina. A identificação dos bolores foi feita por chaves de identificação e das leveduras por MALDI-TOF. Os bolores foram isolados em 28 das 80 amostras e com espécies variáveis, sendo algumas contaminantes. Por outro lado, as leveduras foram detectadas em todas as amostras, com alguns gêneros mais frequentes, principalmente o Kluyveromyces lactis, presente em 27 amostras, e algumas espécies de Candida spp. As espécies identificadas já foram isoladas em outros queijos artesanais brasileiros, produzido em locais com características de clima e relevo semelhantes ao do Queijo Artesanal Serrano.

Serrano Artisanal Cheese is a native product from the South region of Brazil, produced by family labor from raw milk, which seeks to obtain its geographical indication. Many of the characteristics that particularize the types of cheese are given by its natural mycobiota. The objective of this study was to determine the fungal species present in 20 samples of Serrano Artisanal Cheese from four ripening periods (14, 21, 28, and 35 days), produced in October 2017, in Santa Catarina. Identification of molds was made by identification keys and yeasts by MALDI-TOF. The molds were isolated in 28 of the 80 samples and with various species, some being attributed to contamination. On the other hand, yeasts were detected in all samples, with some genera being more frequent, specially Kluyveromyces lactis, present in 27 samples, and some species of Candida spp. The identified species have already been isolated in other Brazilian artisanal cheeses produced in places with similar climate and relief to that of Serrano Artisanal Cheese.

Nutritive value of sugarcane silages added with increasing levels of acetic acid / Valor nutricional de silagens de cana-de-açúcar aditivadas com níveis crescentes de ácido acético

The objective of this study was to evaluate the effect of adding acetic acid during ensiling on fermentation quality and nutritive value of sugarcane (Saccharum officinarum). The treatments consisted of sugarcane silages of IAC 86-2480 variety added with five inclusion levels of glacial acetic acid (0, 15, 30, 45 and 60 g kg-1 in the dry matter basis). A completely randomized design with five treatments and six replicates was used. The glacial acetic acid had a pH of 2.9 (0.1M). The pH of the sugarcane silage reduced by 0.07 units for each 10 g kg-1 of acetic acid added (P < 0.01). The N-NH3 concentration in the ensiled mass was not affected by treatments, averaging 4.5 g kg-1 in the dry matter basis (P = 0.91). The means for effluent losses were adjusted to the quadratic regression model (P < 0.01). The yeast population reduced by 0.44 log CFU g-1 of silage for each 10 g kg-1 of acetic acid added (P < 0.01). The addition of acetic acid to sugarcane silages reduces the fermentation losses and the yeast population, besides improving the nutritive value of silages in levels from 15 g kg-1 of dry matter.(AU)

Objetivou-se com este estudo avaliar o efeito da adição de ácido acético durante a ensilagem na qualidade fermentativa e valor nutritivo de silagem de cana-de-açúcar (Saccharaum officinarum). Os tratamentos consistiram de silagem de cana-de-açúcar variedade IAC 86-2480 com cinco doses de ácido acético glacial (0, 15, 30, 45 e 60 g kg-1 na base da matéria seca). Foi utilizado delineamento inteiramente casualizado com cinco tratamentos e seis repetições. O pH do ácido acético glacial foi de 2,9 (0.1M). O ph da silagem de cana-de-açúcar reduziu 0,07 unidades para cada 10 g kg-1 de ácido acético adicionado (P < 0,01). A concentração de N-NH3 na massa ensilada não foi afetada pelos tratamentos, com média de 4,5 g kg-1 na matéria seca (P = 0,91). As médias para perdas por efluente se ajustaram ao modelo de regressão quadrático (P < 0,01). A população de leveduras reduziu 0,44 log UFC g-1 na silagem para cada 10 g kg-1 de ácido acético adicionado (P < 0,01). A adição de ácido acético em silagens de cana-de-açúcar reduz as perdas fermentativas e a população de leveduras, além de melhorar o valor nutritivo de silagens na dose de 15 g kg-1 na matéria seca.(AU)

Sensitivity to antifungals by Candida spp samples isolated from cases of chronic atrophic candidiasis (CAC)

Abstract The treatment of choice for chronic atrophic candidiasis (CAC), also known as denture stomatitis, is topical antifungal therapy. This study aimed to isolate, identify, and assess the antifungal susceptibility of Candida species from mucosal sites in denture wearers with a diagnosis of CAC and determine the prevalence of associated variables. The sample consisted of 44 patients wearing complete or partial dentures who had a clinical diagnosis of CAC. Using sterile cotton swabs, specimens were collected from the oral mucosa of all patients and grown at 30ºC for 48 h in CHROMagar Candida, as a means of isolating and screening the species. The complementary identification of the species was performed using the VITEK 2 automated system (BioMérieux), as well as the determination of their susceptibility to antifungal agents. Data were analyzed using the chi-square test. STATA 13.1 was used for statistical analysis ( = 5%). Of 44 patients with CAC, 33 (75%) had lesions classified as Newton type II. Yeasts were isolated in 38 cases. The most prevalent species was Candida albicans. None of the isolates were resistant to the antifungals tested. Our findings suggest that current indications for antifungal agents are appropriate. Also, antifungal susceptibility testing and proper fungal identification can help dentists to determine the optimal course of treatment for CAC.

Resumo O tratamento de escolha para candidíase atrófica crônica (CAC), também conhecida como estomatite protética, é a terapia antifúngica tópica. Este estudo teve como objetivo isolar, identificar e avaliar a susceptibilidade antifúngica de espécies de Candida de locais mucosos em portadores de prótese com diagnóstico de CAC e determinar a prevalência de variáveis associadas. A amostra consistiu em 44 pacientes portadores de próteses completas ou parciais que tiveram um diagnóstico clínico de CAC. Usando swab estéril, foram coletados espécimes da mucosa oral de todos os pacientes e cultivados a 30ºC durante 48 h em CHROMagar Candida, como forma de isolamento e triagem das espécies. A identificação complementar das espécies foi realizada no sistema automatizado VITEK 2 (BioMérieux), bem como a determinação da susceptibilidade delas a agentes antifúngicos. Os dados foram analisados usando o teste do qui-quadrado. O STATA 13.1 foi utilizado para análise estatística ( = 5%). Dos 44 pacientes com CAC, 33 (75%) apresentaram lesões classificadas como Newton tipo II. As leveduras foram isoladas em 38 casos. A espécie mais prevalente foi Candida albicans. Nenhum dos isolados foi resistente aos antifúngicos testados. Nossas descobertas sugerem que as indicações atuais para os agentes antifúngicos são apropriadas. Além disso, testes de susceptibilidade antifúngicos e identificação fúngica adequada podem ajudar os dentistas a determinar o curso ótimo de tratamento para CAC.

Antifungal susceptibility profile of diferent yeasts isolates from wild animals, cows milk with subclinical mastitis and hospital environment / Perfil de suscetibilidade antifúngica de diferentes leveduras isoladas damicrobiota de animais silvestres, leite com mastite subclínica eambiente hospitalar

Yeast infections have acquired great importance due to increasing frequency in immunocompromised patients or patients undergoing invasive diagnostic and therapeutic techniques, and also because of its high morbidity and mortality. At the same time, it has been seen an increase in the emergence of new pathogenic species difficult to diagnose and treat. The aim of this study was to determine the in vitro susceptibility of 89 yeasts from different sources against the antifungals amphotericin B, voriconazole, fluconazole and flucytosine, using the VITEK® 2 Compact system. The antifungal susceptibility was performed automatically by the Vitek® 2 Compact system. The origin of the yeasts was: Group 1 - microbiota of wild animals (W) (26/89), 2 - cows milk with subclinical mastitis (M) (27/89) and 3 - hospital enviorment (H) (36/89). Of the 89 yeasts submitted to the Vitek® 2 test, 25 (20.9%) were resistant to fluconazole, 11 (12.36%) to amphotericin B, 3 (3.37%) to voriconazole, and no sample was resistant to flucytosine. Regarding the minimum inhibitory concentration (MIC), fluconazole showed an MIC between 1 and 64 mg/mL for the three groups, voriconazole had an MIC between 0.12 and 8 mg/mL, amphotericin B had an MIC between 0.25 and 4 mg/mL for group H and group W respectively, between 0.25 and 16 mg/mL for group M and flucytosine had an MIC equal to 1g/mL for all groups. The yeasts isolated from the H group showed the highest resistance to fluconazole 12/89 (13.49%), followed by group W (7.87%) and group M (5.62%). The more resistant group to voriconazole was followed by the M and H groups, the W group showed no resistance to this antifungal. Group H was the least resistant (2.25%) to amphotericin.(AU)

As infecções por leveduras têm adquirido grande importância, devido ao aumento da sua frequência em pacientes imunocomprometidos ou pacientes submetidos a técnicas diagnosticas e terapêuticas agressivas, e devido sua alta morbidade e mortalidade. Paralelamente tem-se observado um incremento na aparição de novas espécies patógenas difíceis de diagnosticar e tratar. O objetivo desse estudo foi avaliar a suscetibilidade in vitro de 89 leveduras de diferentes origens frente aos antifúngicos Anfotericina B, Voriconazol, Fluconazol e Fluocitocina pelo Sistema Vitek 2.O antifungigrama foi realizado automaticamente pelo Vitek 2 Compact. A origem das leveduras foi: Grupo 1-Microbiota de Animais Silvestres (S) (26/89), 2- Leite com mastite bovina subclínica (L) (27/89) e 3- Ambiente Hospitalar (H)(36/89). Das 89 leveduras submetidas à carta Vitek, 25 (20.09%) foram resistentes ao fluconazol, oito (8.99%) à anfotericina B, três (3.37%) ao voriconazol, e nenhuma amostra mostrou-se resistente a fluocitosina. O grupo três (H)foi mais resistente ao fluconazol que os demais, já o dois (L) foi mais resistente ao voriconazol e a anfotericina B que os outros dois. O fluconazol pode ter apresentado maior número de resistências devido ser um fármaco comumente usado principalmente em humanos. As leveduras isoladas de humanos apresentaram maior número de resistências aos fármacos testados do que as leveduras isoladas de animais silvestres. O que pode ocorrer devido a uma maior exposição dos humanos aos fármacos em relação aos animais que vivem isolados em ambientes selvagens e na maioria dos casos nunca teve contato com fármacos de qualquer origem.(AU)

Identification and susceptibility of clinical isolates of Candida spp. to killer toxins

Abstract Although invasive infections and mortality caused by Candida species are increasing among compromised patients, resistance to common antifungal agents is also an increasing problem. We analyzed 60 yeasts isolated from patients with invasive candidiasis using a PCR/RFLP strategy based on the internal transcribed spacer (ITS2) region to identify different Candida pathogenic species. PCR analysis was performed from genomic DNA with a primer pair of the ITS2-5.8S rDNA region. PCR-positive samples were characterized by RFLP. Restriction resulted in 23 isolates identified as C. albicans using AlwI, 24 isolates as C. parapsilosis using RsaI, and 13 as C. tropicalis using XmaI. Then, a group of all isolates were evaluated for their susceptibility to a panel of previously described killer yeasts, resulting in 75% being susceptible to at least one killer yeast while the remaining were not inhibited by any strain. C. albicans was the most susceptible group while C. tropicalis had the fewest inhibitions. No species-specific pattern of inhibition was obtained with this panel of killer yeasts. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri and Wickerhamomyces anomalus were the strains that inhibited the most isolates of Candida spp.

Resumo Embora as infecções invasivas e a mortalidade causada por espécies de Candida estejam aumentando entre pacientes comprometidos, a resistência a agentes antifúngicos comuns também é um problema crescente. Analisamos 60 leveduras isoladas de pacientes com candidíase invasiva utilizando como estratégia PCR/RFLP baseada na região espaçadora transcrita interna (ITS2) para identificar diferentes espécies patogênicas de Candida. A análise por PCR foi realizada a partir de ADN genómico com um par de iniciadores da região ITS2-5.8S rDNA. As amostras PCR-positivas foram caracterizadas por RFLP. A restrição resultou em 23 isolados identificados como C. albicans usando AlwI, 24 isolados como C. parapsilosis usando RsaI e 13 como C. tropicalis usando XmaI. Em seguida, avaliou-se o grupo de todos os isolados quanto à sua susceptibilidade a um painel de leveduras killer previamente descritas, resultando em 75% sendo suscetíveis a pelo menos uma levedura killer, enquanto que as restantes não foram inibidas por qualquer cepa. C. albicans foi o grupo mais suscetível enquanto C. tropicalis teve o menor número de inibições. Não se obteve um padrão de inibição específico da espécie com este painel de leveduras killer. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri e Wickerhamomyces anomalus foram as cepas que inibiram a maioria dos isolados de Candida spp.

Identification and susceptibility of clinical isolates of Candida spp. to killer toxins

Abstract Although invasive infections and mortality caused by Candida species are increasing among compromised patients, resistance to common antifungal agents is also an increasing problem. We analyzed 60 yeasts isolated from patients with invasive candidiasis using a PCR/RFLP strategy based on the internal transcribed spacer (ITS2) region to identify different Candida pathogenic species. PCR analysis was performed from genomic DNA with a primer pair of the ITS2-5.8S rDNA region. PCR-positive samples were characterized by RFLP. Restriction resulted in 23 isolates identified as C. albicans using AlwI, 24 isolates as C. parapsilosis using RsaI, and 13 as C. tropicalis using XmaI. Then, a group of all isolates were evaluated for their susceptibility to a panel of previously described killer yeasts, resulting in 75% being susceptible to at least one killer yeast while the remaining were not inhibited by any strain. C. albicans was the most susceptible group while C. tropicalis had the fewest inhibitions. No species-specific pattern of inhibition was obtained with this panel of killer yeasts. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri and Wickerhamomyces anomalus were the strains that inhibited the most isolates of Candida spp.

Resumo Embora as infecções invasivas e a mortalidade causada por espécies de Candida estejam aumentando entre pacientes comprometidos, a resistência a agentes antifúngicos comuns também é um problema crescente. Analisamos 60 leveduras isoladas de pacientes com candidíase invasiva utilizando como estratégia PCR/RFLP baseada na região espaçadora transcrita interna (ITS2) para identificar diferentes espécies patogênicas de Candida. A análise por PCR foi realizada a partir de ADN genómico com um par de iniciadores da região ITS2-5.8S rDNA. As amostras PCR-positivas foram caracterizadas por RFLP. A restrição resultou em 23 isolados identificados como C. albicans usando AlwI, 24 isolados como C. parapsilosis usando RsaI e 13 como C. tropicalis usando XmaI. Em seguida, avaliou-se o grupo de todos os isolados quanto à sua susceptibilidade a um painel de leveduras killer previamente descritas, resultando em 75% sendo suscetíveis a pelo menos uma levedura killer, enquanto que as restantes não foram inibidas por qualquer cepa. C. albicans foi o grupo mais suscetível enquanto C. tropicalis teve o menor número de inibições. Não se obteve um padrão de inibição específico da espécie com este painel de leveduras killer. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri e Wickerhamomyces anomalus foram as cepas que inibiram a maioria dos isolados de Candida spp.

Antifungal susceptibility profile of diferent yeasts isolates from wild animals, cows milk with subclinical mastitis and hospital environment

Abstract Yeast infections have acquired great importance due to increasing frequency in immunocompromised patients or patients undergoing invasive diagnostic and therapeutic techniques, and also because of its high morbidity and mortality. At the same time, it has been seen an increase in the emergence of new pathogenic species difficult to diagnose and treat. The aim of this study was to determine the in vitro susceptibility of 89 yeasts from different sources against the antifungals amphotericin B, voriconazole, fluconazole and flucytosine, using the VITEK® 2 Compact system. The antifungal susceptibility was performed automatically by the Vitek® 2 Compact system. The origin of the yeasts was: Group 1 - microbiota of wild animals (W) (26/89), 2 - cows milk with subclinical mastitis (M) (27/89) and 3 - hospital enviorment (H) (36/89). Of the 89 yeasts submitted to the Vitek® 2 test, 25 (20.9%) were resistant to fluconazole, 11 (12.36%) to amphotericin B, 3 (3.37%) to voriconazole, and no sample was resistant to flucytosine. Regarding the minimum inhibitory concentration (MIC), fluconazole showed an MIC between 1 and 64 mg/mL for the three groups, voriconazole had an MIC between 0.12 and 8 mg/mL, amphotericin B had an MIC between 0.25 and 4 mg/mL for group H and group W respectively, between 0.25 and 16 mg/mL for group M and flucytosine had an MIC equal to 1g/mL for all groups. The yeasts isolated from the H group showed the highest resistance to fluconazole 12/89 (13.49%), followed by group W (7.87%) and group M (5.62%). The more resistant group to voriconazole was followed by the M and H groups, the W group showed no resistance to this antifungal. Group H was the least resistant (2.25%) to amphotericin.

Resumo As infecções por leveduras têm adquirido grande importância, devido ao aumento da sua frequência em pacientes imunocomprometidos ou pacientes submetidos a técnicas diagnosticas e terapêuticas agressivas, e devido sua alta morbidade e mortalidade. Paralelamente tem-se observado um incremento na aparição de novas espécies patógenas difíceis de diagnosticar e tratar. O objetivo desse estudo foi avaliar a suscetibilidade in vitro de 89 leveduras de diferentes origens frente aos antifúngicos Anfotericina B, Voriconazol, Fluconazol e Fluocitocina pelo Sistema Vitek® 2. O antifungigrama foi realizado automaticamente pelo Vitek® 2 Compact. A origem das leveduras foi: Grupo 1- Microbiota de Animais Silvestres (S) (26/89), 2- Leite com mastite bovina subclínica (L) (27/89) e 3- Ambiente Hospitalar (H) (36/89). Das 89 leveduras submetidas à carta Vitek®, 25 (20.09%) foram resistentes ao fluconazol, oito (8.99%) à anfotericina B, três (3.37%) ao voriconazol, e nenhuma amostra mostrou-se resistente a fluocitosina. O grupo três (H) foi mais resistente ao fluconazol que os demais, já o dois (L) foi mais resistente ao voriconazol e a anfotericina B que os outros dois. O fluconazol pode ter apresentado maior número de resistências devido ser um fármaco comumente usado principalmente em humanos. As leveduras isoladas de humanos apresentaram maior número de resistências aos fármacos testados do que as leveduras isoladas de animais silvestres. O que pode ocorrer devido a uma maior exposição dos humanos aos fármacos em relação aos animais que vivem isolados em ambientes selvagens e na maioria dos casos nunca teve contato com fármacos de qualquer origem.

Antifungal susceptibility profile of diferent yeasts isolates from wild animals, cows milk with subclinical mastitis and hospital environment

Abstract Yeast infections have acquired great importance due to increasing frequency in immunocompromised patients or patients undergoing invasive diagnostic and therapeutic techniques, and also because of its high morbidity and mortality. At the same time, it has been seen an increase in the emergence of new pathogenic species difficult to diagnose and treat. The aim of this study was to determine the in vitro susceptibility of 89 yeasts from different sources against the antifungals amphotericin B, voriconazole, fluconazole and flucytosine, using the VITEK® 2 Compact system. The antifungal susceptibility was performed automatically by the Vitek® 2 Compact system. The origin of the yeasts was: Group 1 - microbiota of wild animals (W) (26/89), 2 - cows milk with subclinical mastitis (M) (27/89) and 3 - hospital enviorment (H) (36/89). Of the 89 yeasts submitted to the Vitek® 2 test, 25 (20.9%) were resistant to fluconazole, 11 (12.36%) to amphotericin B, 3 (3.37%) to voriconazole, and no sample was resistant to flucytosine. Regarding the minimum inhibitory concentration (MIC), fluconazole showed an MIC between 1 and 64 mg/mL for the three groups, voriconazole had an MIC between 0.12 and 8 mg/mL, amphotericin B had an MIC between 0.25 and 4 mg/mL for group H and group W respectively, between 0.25 and 16 mg/mL for group M and flucytosine had an MIC equal to 1g/mL for all groups. The yeasts isolated from the H group showed the highest resistance to fluconazole 12/89 (13.49%), followed by group W (7.87%) and group M (5.62%). The more resistant group to voriconazole was followed by the M and H groups, the W group showed no resistance to this antifungal. Group H was the least resistant (2.25%) to amphotericin.

Resumo As infecções por leveduras têm adquirido grande importância, devido ao aumento da sua frequência em pacientes imunocomprometidos ou pacientes submetidos a técnicas diagnosticas e terapêuticas agressivas, e devido sua alta morbidade e mortalidade. Paralelamente tem-se observado um incremento na aparição de novas espécies patógenas difíceis de diagnosticar e tratar. O objetivo desse estudo foi avaliar a suscetibilidade in vitro de 89 leveduras de diferentes origens frente aos antifúngicos Anfotericina B, Voriconazol, Fluconazol e Fluocitocina pelo Sistema Vitek® 2. O antifungigrama foi realizado automaticamente pelo Vitek® 2 Compact. A origem das leveduras foi: Grupo 1- Microbiota de Animais Silvestres (S) (26/89), 2- Leite com mastite bovina subclínica (L) (27/89) e 3- Ambiente Hospitalar (H) (36/89). Das 89 leveduras submetidas à carta Vitek®, 25 (20.09%) foram resistentes ao fluconazol, oito (8.99%) à anfotericina B, três (3.37%) ao voriconazol, e nenhuma amostra mostrou-se resistente a fluocitosina. O grupo três (H) foi mais resistente ao fluconazol que os demais, já o dois (L) foi mais resistente ao voriconazol e a anfotericina B que os outros dois. O fluconazol pode ter apresentado maior número de resistências devido ser um fármaco comumente usado principalmente em humanos. As leveduras isoladas de humanos apresentaram maior número de resistências aos fármacos testados do que as leveduras isoladas de animais silvestres. O que pode ocorrer devido a uma maior exposição dos humanos aos fármacos em relação aos animais que vivem isolados em ambientes selvagens e na maioria dos casos nunca teve contato com fármacos de qualquer origem.

Identification and susceptibility of clinical isolates of Candida spp. to killer toxins / Identificação e susceptibilidade de isolados clínicos de Candida spp. para toxinas assassinas

Although invasive infections and mortality caused by Candida species are increasing among compromised patients, resistance to common antifungal agents is also an increasing problem. We analyzed 60 yeasts isolated from patients with invasive candidiasis using a PCR/RFLP strategy based on the internal transcribed spacer (ITS2) region to identify different Candida pathogenic species. PCR analysis was performed from genomic DNA with a primer pair of the ITS2-5.8S rDNA region. PCR-positive samples were characterized by RFLP. Restriction resulted in 23 isolates identified as C. albicans using AlwI, 24 isolates as C. parapsilosis using RsaI, and 13 as C. tropicalis using XmaI. Then, a group of all isolates were evaluated for their susceptibility to a panel of previously described killer yeasts, resulting in 75% being susceptible to at least one killer yeast while the remaining were not inhibited by any strain. C. albicans was the most susceptible group while C. tropicalis had the fewest inhibitions. No species-specific pattern of inhibition was obtained with this panel of killer yeasts. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri and Wickerhamomyces anomalus were the strains that inhibited the most isolates of Candida spp.(AU)

Embora as infecções invasivas e a mortalidade causada por espécies de Candida estejam aumentando entre pacientes comprometidos, a resistência a agentes antifúngicos comuns também é um problema crescente. Analisamos 60 leveduras isoladas de pacientes com candidíase invasiva utilizando como estratégia PCR/RFLP baseada na região espaçadora transcrita interna (ITS2) para identificar diferentes espécies patogênicas de Candida. A análise por PCR foi realizada a partir de ADN genómico com um par de iniciadores da região ITS2-5.8S rDNA. As amostras PCR-positivas foram caracterizadas por RFLP. A restrição resultou em 23 isolados identificados como C. albicans usando AlwI, 24 isolados como C. parapsilosis usando RsaI e 13 como C. tropicalis usando XmaI. Em seguida, avaliou-se o grupo de todos os isolados quanto à sua susceptibilidade a um painel de leveduras killer previamente descritas, resultando em 75% sendo suscetíveis a pelo menos uma levedura killer, enquanto que as restantes não foram inibidas por qualquer cepa. C. albicans foi o grupo mais suscetível enquanto C. tropicalis teve o menor número de inibições. Não se obteve um padrão de inibição específico da espécie com este painel de leveduras killer. Metschnikowia pulcherrima, Pichia kluyveri e Wickerhamomyces anomalus foram as cepas que inibiram a maioria dos isolados de Candida spp.(AU)