Monoculture and polyculture of shrimp Litopenaeus schmitti and mullet Mugil curema in bioflocos system and clear water / Monocultivo e policultivo do camarão Litopenaeus schmitti e do parati Mugil curema em sistema de bioflocos e água clara

The aim of this study was to evaluate the monoculture and polyculture of white srimp Litopenaeus schmitti and mullet Mugil curema in bioflocs system and clear water. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement (4x2) with four cultures systems (shrimps and fish) and two culture medium (clear water and bioflocs), with four replications: (M50/0) - monoculture  L. schmitti density 50 m- 2; (P50/5) polyculture  L. schmitti  and M. curema density  50 m-2 and  5 m-2, respectively;  (P50/10) polyculture   L. schmitti and M. curema density 50 m -2 and 10 m-2 respectively; (M0/10) - monoculture M. curema density 10 m-2. The polyculture of L. schmitti with mullet affected zootechnical performance of shrimp, however, L. schmitti juveniles showed better performance, for all analyzed indexes, when cultured in the bioflocs. The mullet  in monoculture and polyculture with lower stocking density (5m-2) showed better final weight , weight gain and specific growth rate  than mullet in polyculture with higher density (10m-2) and better performance  when cultured in clear water. The bioflocs contributed significantly to shrimp juvenile growth, however fish did not present the same performance in bioflocs system.(AU)

O objetivo desse estudo foi avaliar o monocultivo e policultivo do camarão branco Litopenaeus schmitti e do parati Mugil curema em sistema de bioflocos e água clara. O delineamento experimental foi completamente casualizado em esquema fatorial (4x2) com quatro sistemas de cultivo (estocagens de camarões e peixes) e dois meios de cultivo (água clara e bioflocos), com quatro repetições: (M50/0) - monocultivo de L. schmitti na densidade de 50 m-2; (P50/5) - policultivo de L. schmitti e M. curema na densidade de 50 m-2 e 5 m-2, respectivamente; (P50/10) - policultivo de L. schmitti e M. curema na densidade de 50 m-2  e 10 m-2,  respectivamente; (M0/10) - monocultivo de M. curema na densidade de 10 m-2. O policultivo de L. schmitti com o parati prejudicou o desempenho zootécnico dos camarões, no entanto, juvenis de L. schmitti apresentaram melhor desempenho, para todos os índices analisados, quando cultivados em meio ao bioflocos. Os paratis em monocultivo e policultivo na menor densidade de estocagem (5m-2) apresentaram peso final, ganho de peso e taxa de crescimento específico superiores do que os paratis em policultivo na maior densidade (10m-2) e melhor desempenho quando cultivados em  água clara. Os bioflocos contribuíram para o crescimento dos juvenis de camarão, no entanto os peixes não apresentaram o mesmo desempenho em sistema de bioflocos.(AU)

Monoculture and polyculture of shrimp Litopenaeus schmitti and mullet Mugil curema in bioflocos system and clear water / Monocultivo e policultivo do camarão Litopenaeus schmitti e do parati Mugil curema em sistema de bioflocos e água clara

The aim of this study was to evaluate the monoculture and polyculture of white srimp Litopenaeus schmitti and mullet Mugil curema in bioflocs system and clear water. The experimental design was completely randomized in a factorial arrangement (4x2) with four cultures systems (shrimps and fish) and two culture medium (clear water and bioflocs), with four replications: (M50/0) - monoculture  L. schmitti density 50 m- 2; (P50/5) polyculture  L. schmitti  and M. curema density  50 m-2 and  5 m-2, respectively;  (P50/10) polyculture   L. schmitti and M. curema density 50 m -2 and 10 m-2 respectively; (M0/10) - monoculture M. curema density 10 m-2. The polyculture of L. schmitti with mullet affected zootechnical performance of shrimp, however, L. schmitti juveniles showed better performance, for all analyzed indexes, when cultured in the bioflocs. The mullet  in monoculture and polyculture with lower stocking density (5m-2) showed better final weight , weight gain and specific growth rate  than mullet in polyculture with higher density (10m-2) and better performance  when cultured in clear water. The bioflocs contributed significantly to shrimp juvenile growth, however fish did not present the same performance in bioflocs system.

O objetivo desse estudo foi avaliar o monocultivo e policultivo do camarão branco Litopenaeus schmitti e do parati Mugil curema em sistema de bioflocos e água clara. O delineamento experimental foi completamente casualizado em esquema fatorial (4x2) com quatro sistemas de cultivo (estocagens de camarões e peixes) e dois meios de cultivo (água clara e bioflocos), com quatro repetições: (M50/0) - monocultivo de L. schmitti na densidade de 50 m-2; (P50/5) - policultivo de L. schmitti e M. curema na densidade de 50 m-2 e 5 m-2, respectivamente; (P50/10) - policultivo de L. schmitti e M. curema na densidade de 50 m-2  e 10 m-2,  respectivamente; (M0/10) - monocultivo de M. curema na densidade de 10 m-2. O policultivo de L. schmitti com o parati prejudicou o desempenho zootécnico dos camarões, no entanto, juvenis de L. schmitti apresentaram melhor desempenho, para todos os índices analisados, quando cultivados em meio ao bioflocos. Os paratis em monocultivo e policultivo na menor densidade de estocagem (5m-2) apresentaram peso final, ganho de peso e taxa de crescimento específico superiores do que os paratis em policultivo na maior densidade (10m-2) e melhor desempenho quando cultivados em  água clara. Os bioflocos contribuíram para o crescimento dos juvenis de camarão, no entanto os peixes não apresentaram o mesmo desempenho em sistema de bioflocos.

UTILIZAÇÃO DA ESPECTROSCOPIA DE INFRAVERMELHO PRÓXIMO (NIR) COMO FERRAMENTA PARA DIFERENCIAR PERFIS ESPECTRAIS ASSOCIADOS AO CULTIVO IN VITRO DE OÓCITOS DE CABRAS

A tecnologia de espectroscopia de infravermelho próximo (NIR) é uma técnica analítica automatizada que permite a investigação de perfis espectrais (ou chamado fingerprint metabólico) baseados nos metabólitos presentes na amostra analisada, de forma rápida, não invasiva e com mínima preparação prévia. A técnica em associação com métodos estatísticos multivariados vem sendo aplicada na análise de meios de cultivo in vitro (CIV) de oócitos e embriões, a fim detectar diferenças metabólicas entre perfis espectrais. Dessa forma, o presente estudo tem como objetivo discriminar os perfis espectrais do meio de cultivo após a maturação in vitro (MIV) oocitária e CIV de prováveis embriões de cabras de diferentes idades submetidas a repetidos tratamentos hormonais. Para tanto, 19 cabras (jovens = 10; velhas = 9) de peso e escore corporal homogêneo foram submetidas à três sessões de estimulação hormonal (HS) com gonadotrofinas e os complexos cumulus oophorus (COCs) foram obtidos por aspiração folicular guiada por laparoscopia (LOPU). Os COCs recuperados e classificados (Grau I-III) foram submetidos a MIV e ativação partenogenética. Os presumíveis zigotos foram submetidos ao CIV por dois dias (D2). O meio de cultivo foi coletado após a MIV dos oócitos e no D2 de CIV de cada grupo experimental (Jovens vs Velhos; Sessões de HS) e analisado por espectroscopia NIR. Os dados espectrais NIR foram interpretados através de métodos quimiométricos, tais como análise de componentes principais (PCA) e análise discriminante por mínimos quadrados parciais (PLS-DA). Os resultados da análise de PCA mostraram claramente uma separação entre os perfis espectrais dos grupos experimentais (animais jovens e velhos; sessões de HS), tanto após a MIV como o CIV. No geral, as principais bandas de absorção foram atribuídas ao segundo sobretom do grupo C-H, primeiro sobretom das ligações de O-H e N-H e combinações de C-H, podendo servir como marcadores moleculares. Por outro lado, a análise dos dados espectrais pelo modelo de PLS-DA forneceu uma melhor classificação dos grupos. Os resultados mostraram uma separação dos grupos de animais jovens e velhos, bem como das três sessões de HS com alta especificidade, sensibilidade e acurácia utilizando espectros NIR. Assim, a análise do meio de cultivo utilizando a espectroscopia NIR combinada com métodos multivariados indicou diferenças entre os grupos experimentais e forneceu informações úteis sobre o desenvolvimento in vitro de oócitos e embriões caprinos.

Near infrared spectroscopy (NIR) technology is an automated analytical technique that allows the investigation of spectral profiles (or so-called metabolic fingerprint) based on the metabolites present in the analyzed sample, in a fast, non-invasive manner and with minimal prior preparation. The technique in association with multivariate statistical methods has been applied in the analysis of in vitro culture (IVC) media of oocytes and embryos in order to detect metabolic differences between spectral profiles. Therefore, the present study aimed to discriminate the spectral profiles of the culture medium after the in vitro maturation (IVM) of oocytes and IVC of embryos of goats with different ages submitted to repeated hormonal treatments. Thus, 19 goats (young = 10; old = 9) of homogeneous body weight and condition score were submitted to three sessions of hormonal stimulation (HS) with gonadotrophins and cumulus oophorus complexes (COCs) were obtained by laparoscopic ovum pick-up (LOPU). The recovered and classified COCs (Grade I-III) were submitted to IVM and parthenogenetic activation. The presumptive zygotes were submitted to IVC for two days (D2). The culture medium was collected after the IVM of the oocytes and on the D2 of IVC of each experimental group (young vs. old; HS Sessions) and analyzed by NIR spectroscopy. NIR spectral data were interpreted using chemometric methods such as principal component analysis (PCA) and partial least squares discriminant analysis (PLS-DA). The results of the PCA analysis clearly showed a separation between the spectral profiles of the experimental groups (young and old animals; HS sessions), both after IVM and IVC. In general, the main absorption bands were assigned to the second overtone C-H, the first O-H and N-H overtone and C-H combinations, which could serve as molecular markers. On the other hand, the analysis of the spectral data by the PLS-DA model provided a better classification of the groups. The results showed a separation of the groups of young and old animals, as well as the three HS sessions with high specificity, sensitivity and accuracy using NIR spectra. Thus, analysis of the culture medium using NIR spectroscopy combined with multivariate methods indicated differences between the experimental groups and provided useful information on the in vitro development of goat oocytes and embryos.

EFFECT OF SERUM STARVATION AND DOWN-REGULATION OF CD146 PROTEINEXPRESSION ON THE CELLULAR LIFE CYCLE OF ORAL CANINE MELANOMA CELLS

A cavidade oral é o local de 6% de todos os tumores em cães, sendo a quinta localização mais importante de neoplasias nesta espécie. O melanoma é um tipo de câncer que se origina em melanócitos e seu estabelecimento envolve vários estágios, até a formação de um tumor invasivo e metastático. Os mecanismos moleculares exatos da desregulação no melanoma ainda são desconhecidos. Muitos estudos tem avançado nosso conhecimento para a compreensão dos múltiplos papéis do CD146 na biologia e na patologia, e apontaram o significado do CD146 como um possível marcador de diagnóstico para certas lesões, incluindo melanomas. No presente estudo, examinamos o impacto de diferentes condições de inanição de soro e a redução da expressão de CD146 no ciclo de vida celular das células de melanoma canino, a fim de obter mais informações sobre a relação funcional de CD146 e a insuficiência nutricional na proliferação de células tumorais e comportamento metastático. Após o cultivo celular, células de melanoma foram submetidas à inanição de soro e, em seguida, o ensaio de proliferação foi realizado através da técnica de ELISA. Então, o teste em citômetro de fluxo pôde analisar a supressão da regulação de CD146 para que a análise do ciclo celular pudesse ser feita. A estatística foi realizada entre as diferentes densidades celulares, tempo de cultivo e diferentes concentrações utilizando os dados obtidos a partir do ensaio de proliferação, através de procedimentos do SAS® University Edition. A densidade de semeadura de 5.000 células por poço mostrou R2 = 0,70, sendo a melhor densidade para realizar o ensaio de proliferação. O número específico de siRNA 34 provou uma redução na porcentagem de células que expressam CD146, e em comparação com as células de controle para CD146, estas mostraram um acúmulo maior dentro da fase G0/G1 demonstrando uma inibição na proliferação celular e na senescência celular. Fazem-se necessários mais estudos para fornecer informações moleculares adicionais sobre a relação funcional do CD146 e a análise do ciclo celular usando células de melanoma.

The oral cavity is place of 6% of all tumors in dogs, being the fifth most important localization of neoplasms in this specie. Melanoma is a type of cancer that originates from melanocytes and its establishment involves several stages, until the formation of an invasive and metastatic tumor. The exact molecular mechanisms of the dysregulation in melanoma are yet unknown. Many studies have advanced our knowledge towards understanding the multiple roles of CD146 in biology and pathology and have pointed to the significance of CD146 as a potential diagnostic marker for certain lesions including melanomas. In the present study we examine the impact of different serum starved conditions and reduction of CD146 expression on the cellular life cycle of canine melanoma cell in order to obtain more information about the functional relationship of CD146 and nutritional undersupply on tumor cell proliferation and metastatic behavior. After cell culture, melanoma cells were serum starved and then proliferation assay was performed through ELISA technique. Then, FACS staining could analyze the CD146 down-regulation so the cell cycle could be done. Statistics was performed between the different cell densities, media times and concentrations, using the data obtained from proliferation assay, through procedures of SAS® University Edition. The 5,000 cells per well seeding density had a R2 = 0.70, being the best density to perform the proliferation assay; specific siRNA number 34 proved a reduction in the percentage of cells expressing CD146; and compared to the siRNA scrambled control CD146 silenced cells showed an accumulation of cells within the G0/G1 phase demonstrating an inhibition in cell proliferation and cellular senescence. Further studies are needed to provide additional molecular information about the functional relationship of CD146 and the cell cycle analysis using melanoma cells.

Interação in vitro dos meios de cultivo glutamina aditivado e folicular ovariano sobre a cinética e plasticidade de células-tronco mesenquimais caprinas

As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam maior plasticidade, dentre as linhagens de células-tronco adultas (CTA) pesquisadas, originando tecidos mesodermais e não mesodermais, sendo a medula óssea um dos principais sítios para sua obtenção. Em decorrência da multipotencialidade das CTM, estas células vêm apresentando alto potencial para uso em terapia celular e gênica, assim, tem sido propostos inúmeros co-cultivos com outros grupos celulares. Para obter êxito em cultivos in vitro é necessário fornecer às células um meio de desenvolvimento que simule as condições encontradas in vivo. Os meios de cultivo devem ser ricos em nutrientes para sustentar o crescimento e proliferação celular. O objetivo deste trabalho foi avaliar a interação entre os meios de cultivo celular e folicular ovariano, baseado na resposta celular quanto à cinética e plasticidade de células-tronco caprinas. Para tanto, foi utilizado um caprino, macho, com idade de um ano, higido como doador. Após cinco minutos da realização da medicação pré-anestésica, o animal foi induzido à anestesia por via intravenosa e mantido por via inalatória. A medula óssea foi coletada através do fêmur. O aspirado medular foi imediatamente encaminhado ao Laboratório de cultivo de células-tronco (LABCelt), para realização dos protocolos de isolamento e cultivo. As CTM foram expandidas até a terceira passagem e criopreservadas. O experimento foi realizado em delineamento em blocos casualizados, compostos por quatro tratamentos e três repetições, possuindo como variáveis dependentes, cinética, plasticidade e agrupamento celular. Após seis meses, as células foram descongeladas, expandidas, divididas em quatro grupos cultivados com diferentes meios e submetidas aos ensaios de unidade formadora de colônia fibroblastóide, diferenciação (osteogênica, adipogênica e condrogênica) e cinética celular por curva de crescimento por saturação. Em todos os tratamento utilizados foi observada a capacidade de formar colônias. As diferenciações foram certificadas pela observação de alterações morfológicas semelhantes aos fenótipos de osteoblastos, adipócitos e condrócitos em todos os grupos. O desempenho das células em curva de crescimento, observado nos quatro grupos, revelou uma fase lag curta, seguida de um crescimento exponencial na fase log e finalizado pela fase de declínio ou morte. Onde os grupos 1, 2, 3 e 4 apresentaram curva de crescimento com média de 83,1x103±13,5; 98,2x103±13,1; 72,4x103±14,1 e 48,2x103±13,0 células/mL por poço, respectivamente, ao longo de 21 dias de cultivo. A associação de 70% de meio de cultivo de CTM a 30% de meio folicular proporciona crescimento celular significativamente similar ao encontrado no cultivo com 100% de meio de CTM. As diferentes associações de meio de cultivo de CTM com meio folicular foram capazes de manter a clonogenicidade das células, assim como a plasticidade celular. Pode-se inferir que o tratamento utilizado no grupo 3 apresentou o melhor resultado quanto à cinética e os demais tratamentos não interferiram na plasticidade de CTMMO caprinas.

As células-tronco mesenquimais (CTM) apresentam maior plasticidade, dentre as linhagens de células-tronco adultas (CTA) pesquisadas, originando tecidos mesodermais e não mesodermais, sendo a medula óssea um dos principais sítios para sua obtenção. Em decorrência da multipotencialidade das CTM, estas células vêm apresentando alto potencial para uso em terapia celular e gênica, assim, tem sido propostos inúmeros co-cultivos com outros grupos celulares. Para obter êxito em cultivos in vitro é necessário fornecer às células um meio de desenvolvimento que simule as condições encontradas in vivo. Os meios de cultivo devem ser ricos em nutrientes para sustentar o crescimento e proliferação celular. O objetivo deste trabalho foi avaliar a interação entre os meios de cultivo celular e folicular ovariano, baseado na resposta celular quanto à cinética e plasticidade de células-tronco caprinas. Para tanto, foi utilizado um caprino, macho, com idade de um ano, higido como doador. Após cinco minutos da realização da medicação pré-anestésica, o animal foi induzido à anestesia por via intravenosa e mantido por via inalatória. A medula óssea foi coletada através do fêmur. O aspirado medular foi imediatamente encaminhado ao Laboratório de cultivo de células-tronco (LABCelt), para realização dos protocolos de isolamento e cultivo. As CTM foram expandidas até a terceira passagem e criopreservadas. O experimento foi realizado em delineamento em blocos casualizados, compostos por quatro tratamentos e três repetições, possuindo como variáveis dependentes, cinética, plasticidade e agrupamento celular. Após seis meses, as células foram descongeladas, expandidas, divididas em quatro grupos cultivados com diferentes meios e submetidas aos ensaios de unidade formadora de colônia fibroblastóide, diferenciação (osteogênica, adipogênica e condrogênica) e cinética celular por curva de crescimento por saturação. Em todos os tratamento utilizados foi observada a capacidade de formar colônias. As diferenciações foram certificadas pela observação de alterações morfológicas semelhantes aos fenótipos de osteoblastos, adipócitos e condrócitos em todos os grupos. O desempenho das células em curva de crescimento, observado nos quatro grupos, revelou uma fase lag curta, seguida de um crescimento exponencial na fase log e finalizado pela fase de declínio ou morte. Onde os grupos 1, 2, 3 e 4 apresentaram curva de crescimento com média de 83,1x103±13,5; 98,2x103±13,1; 72,4x103±14,1 e 48,2x103±13,0 células/mL por poço, respectivamente, ao longo de 21 dias de cultivo. A associação de 70% de meio de cultivo de CTM a 30% de meio folicular proporciona crescimento celular significativamente similar ao encontrado no cultivo com 100% de meio de CTM. As diferentes associações de meio de cultivo de CTM com meio folicular foram capazes de manter a clonogenicidade das células, assim como a plasticidade celular. Pode-se inferir que o tratamento utilizado no grupo 3 apresentou o melhor resultado quanto à cinética e os demais tratamentos não interferiram na plasticidade de CTMMO caprinas.

Crescimento vegetativo de porta-enxertos de citros produzidos em substratos comerciais

This research was aimed at evaluating the vegetative growth of citrus rootstocks produced in different commercial substrates and cultivated in four liters containers. The experiment was carried out in greenhouse conditions at the Estação Experimental Agronômica of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul, from June 2003 to July 2004. Three commercial substrates [black peat (Commercial 1); processed and enriched husks, expanded vermiculite, expanded perlite and peat (Commercial 2); and (pinus husks and expanded vermiculite (Commercial 3)] and three rootstocks (Trifoliate orange - Poncirus trifoliata [ L. ] Raf.; "C13" citrange - Citrus sinensis [ L. ] Osbeck x P. trifoliata, and Rangpur lime - C. limonia Osbeck) were tested in randomized blocks under dripping irrigation. The following variables were evaluated: stem height and diameter; leaf number and area; root, aerial and total dry mass; leaf nutrient content and relative number of available rootstocks for grafting. The substrate with processed and enriched husks, expanded vermiculite, expanded perlite and peat provided greater vegetative development of rootstocks due to higher nutrient availability. The rootstocks showed diverse development. The "C13" citrange may be offered to the citrus industry as a choice for diversification of rootstocks, due its vegetative growth.

Este trabalho teve o objetivo de avaliar o crescimento vegetativo de porta-enxertos de citros produzidos em diferentes substratos comerciais, mantidos em recipientes de quatro litros. O experimento foi desenvolvido em casa de vegetação, na Estação Experimental Agronômica da UFRGS, em Eldorado do Sul, RS, no período de junho/2003 a março/2004, e seguiu o delineamento experimental de blocos casualizados, testando-se três substratos comerciais: Turfa preta (Comercial 1); cascas processadas e enriquecidas, vermiculita expandida, perlita expandida e turfa (Comercial 2); e casca de pínus compostada e vermiculita (Comercial 3) e três porta-enxertos: ("Trifoliata"; citrangeiro "C13" e limoeiro "Cravo"). A irrigação foi feita por gotejamento. Avaliaram-se as seguintes variáveis: diâmetro do colo; altura da parte aérea; número de folhas e área foliar; matéria seca das raízes, da parte aérea e total; conteúdo de nutrientes nas folhas e percentual de porta-enxertos aptos à enxertia. A interpretação dos resultados revelou que o substrato com cascas processadas e enriquecidas, vermiculita expandida, perlita expandida e turfa possibilitou maior desenvolvimento vegetativo aos porta-enxertos utilizados, devido ao maior aporte de nutrientes. Os porta-enxertos mostraram desenvolvimento diferenciado, sendo que o citrangeiro "C13" tem potencial de uso para a diversificação de porta-enxertos na citricultura, devido ao seu desenvolvimento vegetativo.

Crescimento vegetativo de porta-enxertos de citros produzidos em substratos comerciais

This research was aimed at evaluating the vegetative growth of citrus rootstocks produced in different commercial substrates and cultivated in four liters containers. The experiment was carried out in greenhouse conditions at the Estação Experimental Agronômica of the Universidade Federal do Rio Grande do Sul, from June 2003 to July 2004. Three commercial substrates [black peat (Commercial 1); processed and enriched husks, expanded vermiculite, expanded perlite and peat (Commercial 2); and (pinus husks and expanded vermiculite (Commercial 3)] and three rootstocks (Trifoliate orange - Poncirus trifoliata [ L. ] Raf.; "C13" citrange - Citrus sinensis [ L. ] Osbeck x P. trifoliata, and Rangpur lime - C. limonia Osbeck) were tested in randomized blocks under dripping irrigation. The following variables were evaluated: stem height and diameter; leaf number and area; root, aerial and total dry mass; leaf nutrient content and relative number of available rootstocks for grafting. The substrate with processed and enriched husks, expanded vermiculite, expanded perlite and peat provided greater vegetative development of rootstocks due to higher nutrient availability. The rootstocks showed diverse development. The "C13" citrange may be offered to the citrus industry as a choice for diversification of rootstocks, due its vegetative growth.

Este trabalho teve o objetivo de avaliar o crescimento vegetativo de porta-enxertos de citros produzidos em diferentes substratos comerciais, mantidos em recipientes de quatro litros. O experimento foi desenvolvido em casa de vegetação, na Estação Experimental Agronômica da UFRGS, em Eldorado do Sul, RS, no período de junho/2003 a março/2004, e seguiu o delineamento experimental de blocos casualizados, testando-se três substratos comerciais: Turfa preta (Comercial 1); cascas processadas e enriquecidas, vermiculita expandida, perlita expandida e turfa (Comercial 2); e casca de pínus compostada e vermiculita (Comercial 3) e três porta-enxertos: ("Trifoliata"; citrangeiro "C13" e limoeiro "Cravo"). A irrigação foi feita por gotejamento. Avaliaram-se as seguintes variáveis: diâmetro do colo; altura da parte aérea; número de folhas e área foliar; matéria seca das raízes, da parte aérea e total; conteúdo de nutrientes nas folhas e percentual de porta-enxertos aptos à enxertia. A interpretação dos resultados revelou que o substrato com cascas processadas e enriquecidas, vermiculita expandida, perlita expandida e turfa possibilitou maior desenvolvimento vegetativo aos porta-enxertos utilizados, devido ao maior aporte de nutrientes. Os porta-enxertos mostraram desenvolvimento diferenciado, sendo que o citrangeiro "C13" tem potencial de uso para a diversificação de porta-enxertos na citricultura, devido ao seu desenvolvimento vegetativo.

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal na zona oeste da cidade de São Paulo: análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase - PCR / Occurence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and organ samples obtained at a commercial retail market in the western area of the city of São Paulo: a critical analysis of traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR

O presente estudo teve por objetivos estudar a ocorrência de Salmonella spp em amostras de carcaças e miúdos de frango obtidas em uma feira e um mercado municipal da zona oeste da cidade de São Paulo e fazer uma análise crítica entre a técnica convencional em meios de cultivo e reação em cadeia pela polimerase PCR. Foram utilizadas 63 carcaças de frangos e 63 conjuntos de miúdos, obtidos no período de novembro de 2006 a maio de 2007. Pesquisou-se salmonela nas amostras pela técnica convencional em meios de cultivo e pela PCR. Pela técnica convencional identificou-se Salmonella em (6/63) das amostras de carcaça e (5/63) das amostras de miúdos e, pela PCR obteve-se (20/63) das amostras de miúdos e (28/63) das amostras de carcaça. As estirpes sorotipificadas como Salmonella oriundas das amostras de carcaças foram identificadas, como S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As estirpes provenientes das amostras de miúdos foram identificadas como S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis. As (18/21) estirpes identificadas como Salmonella pelo estudo apresentaram resistência aos antimicrobianos testados. O método convencional é indispensável quando se necessita a obtenção da estirpe para estudos de outras naturezas, para se cumprir a legislação brasileira que se vale de padrões microbiológicos estabelecidos pelos métodos convencionais. A técnica da PCR é válida e útil desde que seja padronizada de acordo com as necessidades e condições de cada laboratório; é bastante útil na implementação de sistema APPCC; no monitoramento de agentes específicos dentro de produções de alimentos; para estudos epidemiológicos da ocorrência, dinâmica de distribuição do agente

The aim of this study was to evaluate the presence of Salmonella spp in whole broiler carcasses and multiple-organ samples collected at a commercial retail point in the western area of the city of São Paulo and to conduct a critical analysis of the traditional culture media growth technique and polymerase chain reaction PCR. A total of 63 whole broiler carcasses and a 63 multiple-organ samples were collected between November 2006 and May 2007. The conventional technique revealed the presence of Salmonella in 6/63 whole carcasses and in 5/63 multiple-organ samples, PCR detected Salmonella in 28/63 whole carcasses and in 20/63 multiple-organ samples The following strains were identified in the whole carcasses S. Senftenberg; S. Kentucky; S. Enteritidis; S. Montevideo; S. Infantis, S. enterica subsp enterica (0: 6.7). S. Enteritidis; S. enterica subsp enterica; S. Infantis were identified in multiple organ samples. The (18/21) Salmonella strains identified in this study were resistant to the antimicrobial agents tested in this study. In conclusion, the traditional method is essential for the collection of strains for different study purposes; for the observance of the Brazilian legislation, which is based on microbiological standards that were established using traditional methods. Polymerase chain reacton is a valid and useful technique, as long as it is standardized according to the needs and conditions of each laboratory. Polymerase chain reacton is remarkably useful in the implementation of the APPCC system; in the monitorization of specific agents within the food production chain; and for epidemiological studies that evaluate the occurrence, dynamic and distribution of a specific agent

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Quality control for microbiological culture media: Is it enough to follow the NCCLS M22-A2 procedures?

Stringent quality control protocols must be used in order to guaranty that a particular medium is able to recover all sort of organism that may be present in clinical samples. Our aim was to evaluate an alternative protocol that would allow us to detect medium failure to yield quantitative growth of selected pathogens, and compare with the document M22-A2 from NCCLS. The detection limit of Haemophilus influenzae was significantly different depending on media source. We conclude that for some fastidious microorganisms, quantitative verification of the growth capacity of the culture medium is advised.

O uso de protocolos de controle de qualidade com padrões rígidos devem ser utilizados para garantir o isolamento dos microrganismos. Nosso objetivo foi o de avaliar um procedimento alternativo que nos permitisse detectar falhas de crescimento bacteriano em termos quantitativos, e comparação com o protocolo estabelecido pelo documento M22-A2 do NCCLS. Haemophilus influenzae apresentou diferença significativa de crescimento entre meio de cultivo de fontes distintas. Nos concluímos que, para alguns microrganismos fastidiosos, seja feita uma verificação quantitativa da capacidade de crescimento de cada meio de cultivo.

Quality control for microbiological culture media: Is it enough to follow the NCCLS M22-A2 procedures?

Stringent quality control protocols must be used in order to guaranty that a particular medium is able to recover all sort of organism that may be present in clinical samples. Our aim was to evaluate an alternative protocol that would allow us to detect medium failure to yield quantitative growth of selected pathogens, and compare with the document M22-A2 from NCCLS. The detection limit of Haemophilus influenzae was significantly different depending on media source. We conclude that for some fastidious microorganisms, quantitative verification of the growth capacity of the culture medium is advised.

O uso de protocolos de controle de qualidade com padrões rígidos devem ser utilizados para garantir o isolamento dos microrganismos. Nosso objetivo foi o de avaliar um procedimento alternativo que nos permitisse detectar falhas de crescimento bacteriano em termos quantitativos, e comparação com o protocolo estabelecido pelo documento M22-A2 do NCCLS. Haemophilus influenzae apresentou diferença significativa de crescimento entre meio de cultivo de fontes distintas. Nos concluímos que, para alguns microrganismos fastidiosos, seja feita uma verificação quantitativa da capacidade de crescimento de cada meio de cultivo.

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxicogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 10 1 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparandose os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados

Quality control for microbiological culture media: Is it enough to follow the NCCLS M22-A2 procedures?

Stringent quality control protocols must be used in order to guaranty that a particular medium is able to recover all sort of organism that may be present in clinical samples. Our aim was to evaluate an alternative protocol that would allow us to detect medium failure to yield quantitative growth of selected pathogens, and compare with the document M22-A2 from NCCLS. The detection limit of Haemophilus influenzae was significantly different depending on media source. We conclude that for some fastidious microorganisms, quantitative verification of the growth capacity of the culture medium is advised.

O uso de protocolos de controle de qualidade com padrões rígidos devem ser utilizados para garantir o isolamento dos microrganismos. Nosso objetivo foi o de avaliar um procedimento alternativo que nos permitisse detectar falhas de crescimento bacteriano em termos quantitativos, e comparação com o protocolo estabelecido pelo documento M22-A2 do NCCLS. Haemophilus influenzae apresentou diferença significativa de crescimento entre meio de cultivo de fontes distintas. Nos concluímos que, para alguns microrganismos fastidiosos, seja feita uma verificação quantitativa da capacidade de crescimento de cada meio de cultivo.

Growth and sporulation of Metarhizium flavoviride var. Flavoviride on culture media and lighting regimes

Entomopathogenic fungi from the genus Metarhizium are largely used for the biological control of agricultural pests by conidia spreading on the field. Although conidia production is well studied in M. anisopliae, only few research studies were done in M. flavoviride. The present work was carried out alming to evaluate the Mycelial growth and sporulation of the entomopathogenic fungus Metarhizium flavoviride var. flavoviride growing at 27 ± 2°C on Potato-dextrose-agar (PDA), Czapek-agar (CZP) and a complete agar medium (CM) under three lighting regimes, (continuous illumination, light/dark cycle and an black light/dark cycle) were investigated. A completely randomized 3 × 3 (culture media × lighting regime) factorial design with four replicates was used. The best mycelial growth and sporulation occurred on the PDA and CM media under continuous illumination (P = 0,05).

Fungos entomopatogênicos do genêro Metarhizium são empregados no controle biológico de pragas agrícolas por meio da dispersão de seus conídios no campo. Embora a produção de conídios em M. anisopliae esteja bem estudada, poucas pesquisas a respeito existem na espécie M. flavoviride. O presente trabalho foi realizado para avaliar o efeito de três meios de cultura, batata-dextrose-ágar (BDA), Czapek-ágar (CZP) e meio completo (MC), e três regimes de luminosidade, claro contínuo, alternância com luz do dia/escuro e luz negra/escuro, sobre o crescimento miceliano e esporulação do fungo entomopatogênico Metarhizium flavoviride var. flavoviride. O experimento foi realizado em câmara de incubação à temperatura de 27 ± 2°C. Empregou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 3°C 3 (meios de cultura e regime de luminosidade) com quatro repetições. As melhores condições para o crescimento miceliano e esporulação foram conseguidas tanto no meio de cultura BDA como no MC quando combinados com o regime claro contínuo (P = 0,05).

Growth and sporulation of Metarhizium flavoviride var. Flavoviride on culture media and lighting regimes

Entomopathogenic fungi from the genus Metarhizium are largely used for the biological control of agricultural pests by conidia spreading on the field. Although conidia production is well studied in M. anisopliae, only few research studies were done in M. flavoviride. The present work was carried out alming to evaluate the Mycelial growth and sporulation of the entomopathogenic fungus Metarhizium flavoviride var. flavoviride growing at 27 ± 2°C on Potato-dextrose-agar (PDA), Czapek-agar (CZP) and a complete agar medium (CM) under three lighting regimes, (continuous illumination, light/dark cycle and an black light/dark cycle) were investigated. A completely randomized 3 × 3 (culture media × lighting regime) factorial design with four replicates was used. The best mycelial growth and sporulation occurred on the PDA and CM media under continuous illumination (P = 0,05).

Fungos entomopatogênicos do genêro Metarhizium são empregados no controle biológico de pragas agrícolas por meio da dispersão de seus conídios no campo. Embora a produção de conídios em M. anisopliae esteja bem estudada, poucas pesquisas a respeito existem na espécie M. flavoviride. O presente trabalho foi realizado para avaliar o efeito de três meios de cultura, batata-dextrose-ágar (BDA), Czapek-ágar (CZP) e meio completo (MC), e três regimes de luminosidade, claro contínuo, alternância com luz do dia/escuro e luz negra/escuro, sobre o crescimento miceliano e esporulação do fungo entomopatogênico Metarhizium flavoviride var. flavoviride. O experimento foi realizado em câmara de incubação à temperatura de 27 ± 2°C. Empregou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 3°C 3 (meios de cultura e regime de luminosidade) com quatro repetições. As melhores condições para o crescimento miceliano e esporulação foram conseguidas tanto no meio de cultura BDA como no MC quando combinados com o regime claro contínuo (P = 0,05).

Avaliação micológica de rações comerciais para cães e gatos e potencial micotoxinogênico de espécies selecionadas

A eficácia dos meios ágar batata acidificado, ágar dicloram rosa de bengala e cloranfenicol e ágar dicloram glicerol 18% foi comparada para isolamento e quantificação de fungos a partir da análise de 54 amostras de rações comerciais secas para cães e gatos (34 para cães e 20 para gatos), produzidas por 9 empresas. A atividade de água das amostras foi quantificada, apresentando valores entre 0,45 e 0,82. Em 74% das amostras foi detectada a presença fúngica, onde, além de fungos com micélio estéril e leveduras, 23 gêneros de fungos foram identificados. As 40 amostras positivas apresentaram níveis de contaminação, com contagens variando entre 101 e 103 UFC/g. Não se verificou correlação entre atividade de água e contaminação fúngica e não se observou diferença significativa entre o número de colônias isoladas e os diferentes meios de cultivo utilizados. Apesar disto, o DG18 foi o meio que apresentou melhores resultados tanto na quantidade quanto na variedade de fungos isolados. Comparando-se os resultados obtidos com diferentes meios observa-se que os microrganismos isolados dependem dos meios de cultivo empregados. O gênero Aspergillus e a espécie Aspergillus niger foram os mais freqüentemente isolados. Isolados pertencentes a espécies potencialmente produtoras de aflatoxinas e ocratoxina A foram avaliados através do método de ágar plug-TLC. Vinte por cento dos A. flavus isolados produziram aflatoxina B1, todos os isolados de A. ochraceus produziram ocratoxina A e nenhum isolado de A. niger foi detectado como produtor de ocratoxina através do método de screening utilizado. A avaliação fúngica realizada com o emprego de 3 meios de cultura tornou claro que a detecção de fungos é dependente do meio de cultura utilizado. A Aw do alimento e do meio também devem ser consideradas para que as análises microbiológicas possam detectar ou valorar a micobiota que, efetivamente, está contaminando o alimento