Evaluation in vitro of the virulence of two entomopathogenic heterorhabditid nematodes in the control of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) larvae in byproducts of the sugar and alcohol industry / Avaliação in vitro da virulência de dois nematoides entomopatogênicos heterorhabditídeos no controle de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) em subprodutos da indústria sucroalcooleira

Stomoxys calcitrans causes losses to livestock, mainly to cattle. This study aimed to determine the pathogenic potential of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and H. baujardi LPP7 against S. calcitrans larvae after being exposed to byproducts of the sugar and alcohol industry. The efficacy of EPNs on stable fly larvae was evaluated in bioassays with vinasse at three temperatures (16, 25 and 35 °C) and concentrations (0, 50 and 100%), as well as in relation to larva age (4, 6 and 8 days) in filter cake and EPNs concentration (100, 300 and 500 IJs/larva) in sugarcane bagasse. H. bacteriophora showed higher efficacy than H. baujardi at all temperatures. Vinasse did not have a negative effect on the virulence of H. bacteriophora. The age of fly larvae did not affect the mortality rates caused by the EPNs. In bagasse, H. bacteriophora presented higher mortality rates than the control group. It is concluded that EPNs can be a potential component in integrated strategies of stable fly control and outbreak prevention in areas of sugar and alcohol production.(AU)

Stomoxys calcitrans causa perdas à agropecuária, principalmente na bovinocultura. Este estudo objetivou verificar o potencial patogênico de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e H. baujardi LPP7 para larvas de S. calcitrans, após serem expostos a subprodutos da indústria sucroalcooleira. A eficácia dos NEPs sobre larvas da mosca-dos-estábulos foi avaliada em bioensaios com vinhaça em três temperaturas (16, 25 e 35 °C) e concentrações (0, 50 e 100%), bem como em relação à idade da larva (4, 6 e 8 dias) em torta de filtro e concentração de NEPs (100, 300 e 500 JIs/larva) em bagaço de cana-de-açúcar. H. bacteriophora apresentou maior eficácia do que H. baujardi em todas as temperaturas. O vinhoto não apresentou efeito negativo sobre a virulência de H. bacteriophora. A idade das larvas não influenciou no aumento ou diminuição da mortalidade dos NEPs. Em bagaço de cana, H. bacteriophora apresentou taxas de mortalidade superiores à do grupo controle. Conclui-se que os NEPs podem ser um potencial componente em estratégias de controle integrado e prevenção de surtos da mosca-dos-estábulos, em áreas de produção de açúcar e álcool.(AU)

Infection and reinfection of Stomoxys calcitrans larvae (Diptera: Muscidae) by entomopathogenic nematodes in different times of exposure / Infecção e reinfecção de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) por nematoides entomopatogênicos em diferentes tempos de exposição

Stomoxys calcitrans is a hematophagous dipteran. Several agents are used in biological control, including entomopathogenic nematodes (EPNs). Bioassay I involved an evaluation of the effect of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and Heterorhabditis baujardi LPP7 on S. calcitrans larvae in different periods of exposure. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added, which were divided into groups according to the exposure times of 2, 4, 6, 12, 24 and 48 hours. The purpose of Bioassay II was to evaluate the efficacy of the EPNs in infecting S. calcitrans larvae when they were isolated from stable fly larvae in Bioassay I. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added. In bioassay I, H. bacteriophora caused mortality rates of 51.7, 83.3 and 91.7% in 12, 24 and 48 hours, respectively, while H. baujardi caused mortality rates of 9.3 (12h), 35 (24h) and 35% (48h). In Bioassay II, H. bacteriophora and H. baujardi resulted in mortality rates of 35% and 25%, respectively. It was concluded that the longest exposure times presented the highest larval mortality and that EPNs isolated from S. calcitrans are not efficient in controlling the larvae fly.(AU)

Stomoxys calcitrans é um díptero hematófago. Vários agentes são usados no controle biológico, incluindo nematoides entomopatogênicos (NEPs). O bioensaio I objetivou avaliar o efeito de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e Heterorhabditis baujardi LPP7 sobre larvas de S. calcitrans em diferentes períodos de exposição. Grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri, adicionou-se 200 NEPs/larva, e foram divididos de acordo com tempos de exposição de 2, 4, 6, 12, 24 e 48 horas. O objetivo do Bioensaio II foi avaliar a eficácia dos NEPs na infecção de larvas de S. calcitrans, quando esses foram isolados de larvas da mosca oriundos do Bioensaio I. Os grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri e 200 NEPs/larva foram adicionados. No bioensaio I, H. bacteriophora causou taxas de mortalidade de 51,7%, 83,3% e 91,7% em 12, 24 e 48 horas, respectivamente, enquanto H. baujardi causou taxas de mortalidade de 9,3% (12h), 35% (24h) e 35% (48h). No Bioensaio II, H. bacteriophora e H. baujardi resultaram em taxas de mortalidade de 35% e 25%, respectivamente. Concluiu-se que os maiores tempos de exposição apresentaram as maiores mortalidades larvais e que NEPs isolados de S. calcitrans não são eficientes no controle das larvas mosca.(AU)

Attractivity of vinasse spraying to stable flies, Stomoxys calcitrans in a sugarcane area

ABSTRACT: Stable fly (Stomoxys calcitrans) outbreaks have been associated with sugarcane mills in Brazil. This study aimed to evaluate the attractivity of vinasse, a liquid byproduct of ethanol production applied to postharvest sugarcane fields, to adult S. calcitrans. Stable fly abundance was monitored for 21 days in August-September 2014, at a sugarcane mill in the municipality of Nova Alvorada do Sul, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Following mechanized harvesting of sugarcane and the consequent deposition of large amounts of plant residue (straw) in the field, the study area (13.5ha) was surrounded by 22 sticky cylinder (alsynite) traps. The area was fertigated with vinasse immediately after the traps were placed. Insects caught in the traps were collected daily at 7:00 a.m., 11:00 a.m. and 15:00 p.m. A total of 83,593 specimens of S. calcitrans were caught, of which 5,516 (6.6%) were attracted within the first five hours after vinasse application. The highest number of S. calcitrans was caught in the first week following vinasse application, with a peak on the 4th day (12,818 flies), which was influenced by adverse weather conditions on the previous days. This study confirms that fertigation of sugarcane fields by spraying vinasse after the harvest attracts S. calcitrans, thus quickly increasing their abundance over the days following application.

RESUMO: Surtos da mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) têm sido associados a usinas sucroalcooleiras no Brasil. Este estudo objetivou avaliar a atratividade da aspersão de vinhaça, um subproduto líquido da produção de etanol aplicado após a colheita em áreas canavieiras, a adultos de S. calcitrans. A abundância desta mosca foi monitorada em uma usina de cana-de-açúcar por 21 dias, entre agosto e setembro de 2014, em Nova Alvorada do Sul/MS. Após a colheita mecanizada da cana e consequente deposição de grande quantidade de palha no campo, a área de estudo (13,5ha) foi cercada com 22 armadilhas adesivas cilíndricas (alsynite). Fertirrigação com vinhaça foi iniciada imediatamente após instalação das armadilhas. A coleta das moscas capturadas nas armadilhas foi realizada diariamente às 7:00 a.m., 11:00 a.m. e 15:00 p.m. Foram capturados 83.593 espécimes de S. calcitrans, sendo 5.516 (6,6%) atraídos nas primeiras cinco horas após a aplicação da vinhaça. Maior número de S. calcitrans foi capturado na primeira semana do estudo (53.937 moscas), com pico no 4º dia (12.818 moscas), influenciado pelas condições climáticas adversas ocorridas nos dias anteriores. O presente estudo confirma que o processo de fertirrigação de áreas canavieiras com aspersão de vinhaça após a colheita é atrativo à S. calcitrans, aumentando rapidamente sua abundância nos dias subsequentes à aplicação.

Attractivity of vinasse spraying to stable flies, Stomoxys calcitrans in a sugarcane area / C Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), em área canavieira

Stable fly (Stomoxys calcitrans) outbreaks have been associated with sugarcane mills in Brazil. This study aimed to evaluate the attractivity of vinasse, a liquid byproduct of ethanol production applied to postharvest sugarcane fields, to adult S. calcitrans. Stable fly abundance was monitored for 21 days in August-September 2014, at a sugarcane mill in the municipality of Nova Alvorada do Sul, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Following mechanized harvesting of sugarcane and the consequent deposition of large amounts of plant residue (straw) in the field, the study area (13.5ha) was surrounded by 22 sticky cylinder ("alsynite") traps. The area was fertigated with vinasse immediately after the traps were placed. Insects caught in the traps were collected daily at 7:00 a.m., 11:00 a.m. and 15:00 p.m. A total of 83,593 specimens of S. calcitrans were caught, of which 5,516 (6.6%) were attracted within the first five hours after vinasse application. The highest number of S. calcitrans was caught in the first week following vinasse application, with a peak on the 4th day (12,818 flies), which was influenced by adverse weather conditions on the previous days. This study confirms that fertigation of sugarcane fields by spraying vinasse after the harvest attracts S. calcitrans, thus quickly increasing their abundance over the days following application.(AU)

Surtos da mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) têm sido associados a usinas sucroalcooleiras no Brasil. Este estudo objetivou avaliar a atratividade da aspersão de vinhaça, um subproduto líquido da produção de etanol aplicado após a colheita em áreas canavieiras, a adultos de S. calcitrans. A abundância desta mosca foi monitorada em uma usina de cana-de-açúcar por 21 dias, entre agosto e setembro de 2014, em Nova Alvorada do Sul/MS. Após a colheita mecanizada da cana e consequente deposição de grande quantidade de palha no campo, a área de estudo (13,5ha) foi cercada com 22 armadilhas adesivas cilíndricas ("alsynite"). Fertirrigação com vinhaça foi iniciada imediatamente após instalação das armadilhas. A coleta das moscas capturadas nas armadilhas foi realizada diariamente às 7:00 a.m., 11:00 a.m. e 15:00 p.m. Foram capturados 83.593 espécimes de S. calcitrans, sendo 5.516 (6,6%) atraídos nas primeiras cinco horas após a aplicação da vinhaça. Maior número de S. calcitrans foi capturado na primeira semana do estudo (53.937 moscas), com pico no 4º dia (12.818 moscas), influenciado pelas condições climáticas adversas ocorridas nos dias anteriores. O presente estudo confirma que o processo de fertirrigação de áreas canavieiras com aspersão de vinhaça após a colheita é atrativo à S. calcitrans, aumentando rapidamente sua abundância nos dias subsequentes à aplicação.(AU)

Infection and reinfection of Stomoxys calcitrans larvae (Diptera: Muscidae) by entomopathogenic nematodes in different times of exposure / Infecção e reinfecção de larvas de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) por nematoides entomopatogênicos em diferentes tempos de exposição

Abstract Stomoxys calcitrans is a hematophagous dipteran. Several agents are used in biological control, including entomopathogenic nematodes (EPNs). Bioassay I involved an evaluation of the effect of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and Heterorhabditis baujardi LPP7 on S. calcitrans larvae in different periods of exposure. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added, which were divided into groups according to the exposure times of 2, 4, 6, 12, 24 and 48 hours. The purpose of Bioassay II was to evaluate the efficacy of the EPNs in infecting S. calcitrans larvae when they were isolated from stable fly larvae in Bioassay I. Groups of 10 larvae were placed in Petri dishes and 200 EPNs/larva were added. In bioassay I, H. bacteriophora caused mortality rates of 51.7, 83.3 and 91.7% in 12, 24 and 48 hours, respectively, while H. baujardi caused mortality rates of 9.3 (12h), 35 (24h) and 35% (48h). In Bioassay II, H. bacteriophora and H. baujardi resulted in mortality rates of 35% and 25%, respectively. It was concluded that the longest exposure times presented the highest larval mortality and that EPNs isolated from S. calcitrans are not efficient in controlling the larvae fly.

Resumo Stomoxys calcitrans é um díptero hematófago. Vários agentes são usados no controle biológico, incluindo nematoides entomopatogênicos (NEPs). O bioensaio I objetivou avaliar o efeito de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e Heterorhabditis baujardi LPP7 sobre larvas de S. calcitrans em diferentes períodos de exposição. Grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri, adicionou-se 200 NEPs/larva, e foram divididos de acordo com tempos de exposição de 2, 4, 6, 12, 24 e 48 horas. O objetivo do Bioensaio II foi avaliar a eficácia dos NEPs na infecção de larvas de S. calcitrans, quando esses foram isolados de larvas da mosca oriundos do Bioensaio I. Os grupos de 10 larvas foram colocados em placas de Petri e 200 NEPs/larva foram adicionados. No bioensaio I, H. bacteriophora causou taxas de mortalidade de 51,7%, 83,3% e 91,7% em 12, 24 e 48 horas, respectivamente, enquanto H. baujardi causou taxas de mortalidade de 9,3% (12h), 35% (24h) e 35% (48h). No Bioensaio II, H. bacteriophora e H. baujardi resultaram em taxas de mortalidade de 35% e 25%, respectivamente. Concluiu-se que os maiores tempos de exposição apresentaram as maiores mortalidades larvais e que NEPs isolados de S. calcitrans não são eficientes no controle das larvas mosca.

Attractivity of vinasse spraying to stable flies, Stomoxys calcitrans in a sugarcane area / C Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), em área canavieira

Stable fly (Stomoxys calcitrans) outbreaks have been associated with sugarcane mills in Brazil. This study aimed to evaluate the attractivity of vinasse, a liquid byproduct of ethanol production applied to postharvest sugarcane fields, to adult S. calcitrans. Stable fly abundance was monitored for 21 days in August-September 2014, at a sugarcane mill in the municipality of Nova Alvorada do Sul, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Following mechanized harvesting of sugarcane and the consequent deposition of large amounts of plant residue (straw) in the field, the study area (13.5ha) was surrounded by 22 sticky cylinder ("alsynite") traps. The area was fertigated with vinasse immediately after the traps were placed. Insects caught in the traps were collected daily at 7:00 a.m., 11:00 a.m. and 15:00 p.m. A total of 83,593 specimens of S. calcitrans were caught, of which 5,516 (6.6%) were attracted within the first five hours after vinasse application. The highest number of S. calcitrans was caught in the first week following vinasse application, with a peak on the 4th day (12,818 flies), which was influenced by adverse weather conditions on the previous days. This study confirms that fertigation of sugarcane fields by spraying vinasse after the harvest attracts S. calcitrans, thus quickly increasing their abundance over the days following application.(AU)

Surtos da mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) têm sido associados a usinas sucroalcooleiras no Brasil. Este estudo objetivou avaliar a atratividade da aspersão de vinhaça, um subproduto líquido da produção de etanol aplicado após a colheita em áreas canavieiras, a adultos de S. calcitrans. A abundância desta mosca foi monitorada em uma usina de cana-de-açúcar por 21 dias, entre agosto e setembro de 2014, em Nova Alvorada do Sul/MS. Após a colheita mecanizada da cana e consequente deposição de grande quantidade de palha no campo, a área de estudo (13,5ha) foi cercada com 22 armadilhas adesivas cilíndricas ("alsynite"). Fertirrigação com vinhaça foi iniciada imediatamente após instalação das armadilhas. A coleta das moscas capturadas nas armadilhas foi realizada diariamente às 7:00 a.m., 11:00 a.m. e 15:00 p.m. Foram capturados 83.593 espécimes de S. calcitrans, sendo 5.516 (6,6%) atraídos nas primeiras cinco horas após a aplicação da vinhaça. Maior número de S. calcitrans foi capturado na primeira semana do estudo (53.937 moscas), com pico no 4º dia (12.818 moscas), influenciado pelas condições climáticas adversas ocorridas nos dias anteriores. O presente estudo confirma que o processo de fertirrigação de áreas canavieiras com aspersão de vinhaça após a colheita é atrativo à S. calcitrans, aumentando rapidamente sua abundância nos dias subsequentes à aplicação.(AU)

Resistance of the stable fly, Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), to cypermethrin in outbreak areas in Midwestern Brazil / Resistência da mosca-dos-estábulos, Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae), à cipermetrina em áreas de surtos no Centro-Oeste brasileiro

Population explosions of the stable fly (Stomoxys calcitrans) have become a serious concern for livestock producers near sugarcane mills in some regions of Brazil due to the insects massive reproduction on sugarcane byproducts and waste. Despite the limited efficiency of insecticides for controlling stable fly outbreaks, producers still rely on chemical control to mitigate the alarming infestations in affected areas. This study evaluated the susceptibility of S. calcitrans populations to cypermethrin in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Stable flies were tested from three field populations and two colonies, established from flies previously collected at sugarcane mills. Wild flies were collected with Nzi traps in areas of sugarcane plantations. Both wild and colonized flies were exposed to eleven concentrations of cypermethrin in impregnated filter paper bioassays. All the populations proved to be resistant to cypermethrin, with resistance factors among field populations ranging from 6.8 to 38.6. The intensive use of insecticides has led to the development of pyrethroid resistance in stable fly populations in the proximities of sugarcane mills in the state of Mato Grosso do Sul.(AU)

Explosões populacionais da mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) tornaram-se uma séria preocupação para a pecuária próxima a usinas de cana-de-açúcar em algumas regiões do Brasil, devido à massiva reprodução da mosca em resíduos e subprodutos do processamento da cana. Apesar da limitada eficiência dos inseticidas no controle dos surtos desta mosca, produtores dependem do controle químico para mitigar as alarmantes infestações nas áreas afetadas. Este estudo objetivou avaliar a suscetibilidade de populações de S. calcitrans a piretroides no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Moscas-dos-estábulos de três populações de campo e duas colônias, estabelecidas a partir de moscas previamente coletadas em usinas de cana-de-açúcar, foram testadas. Moscas selvagens foram coletadas com armadilhas Nzi em áreas de cana. Moscas coletadas foram expostas a onze concentrações de cipermetrina em bioensaios com papel de filtro impregnado. Todas as populações testadas mostraram-se resistentes ao piretroide, com fatores de resistência variando de 6,8 a 38,6 nas populações de campo. O uso intensivo de inseticidas tem levado ao desenvolvimento de resistência da mosca-dos-estábulos a piretroides em populações próximas a usinas de cana-de-açúcar no estado do Mato Grosso do Sul.(AU)

Potential of entomopathogenic nematodes of the genus Heterorhabditis for the control of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) / Potencial de nematoides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis para o controle de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae)

The present study verified the pathogenic potential of entomopathogenic nematodes (EPNs) of the genus Heterorhabditis (Heterorhabditis bacteriophora, isolate HP88 and Heterorhabditis baujardi isolate LPP7) to immature stages of Stomoxys calcitrans in the laboratory. All EPN concentrations of the H. bacteriophora HP88 strain caused mean larval mortality greater than 90% after four days. Higher concentrations of the H. baujardi LPP7 isolate (≥50 EPNs/larva) eliminated more than 70% of larvae after six days with the concentration 200 EPNs/larva reaching mortality levels of 93.3%. The larval mortality at all concentrations of EPNs (25, 50, 100, 150, and 200 EPNs/larva) for both strains was significant (p<0.05) when compared to the respective control groups. Concentrations of H. bacteriophora HP88 yielded an LC50 of 0.36 EPN/larva and LC90 of 29.1; while H. baujardi LPP7 yielded an LC50 of 39.85 and LC90 of 239.18. H. bacteriophora HP88 provided greater inhibition of the emergence of adults when compared to the response obtained with H. baujardi LPP7. EPNs did not cause considerable mortality when applied directly to pupae. The set of observed results suggests that the EPNs of the genus Heterorhabditis, isolates HP88 and LPP7, are a promising alternative in the control of the stable fly.(AU)

O presente estudo verificou o potencial patogênico de nematoides (NEP) do gênero Heterorhabditis (H. bacteriophora- isolado HP88 e H. baujardi - isolado LPP7) para estágios imaturos de Stomoxys calcitrans em laboratório. Todas as concentrações de NEPs da cepa HP88 causaram mortalidade larval média maior que 90% após quatro dias. Concentrações mais elevadas da cepa LPP7 (≥50 NEPs/larva) eliminaram mais de 70% após seis dias, com a concentração 200 NEPs/larva atingindo níveis de 93,3%. A mortalidade larval em todas as concentrações de NEPs (25, 50, 100, 150, and 200 NEPs/larva) para ambas as cepas foi significativa (p<0,05), quando comparadas aos respectivos grupos controle. Concentrações de H. bacteriophora HP88 obtiveram LC50 de 0,36 NEP/larva e LC90 de 29,1; enquanto H. baujardi LPP7 obteve LC50 de 39,85 e LC90 de 239,18. O isolado H. bacteriophora HP88 propiciou maior inibição da emergência de adultos, quando comparado à resposta obtida com H. baujardi LPP7. NEPs não provocaram mortalidade considerável quando aplicados diretamente sobre pupas. O conjunto de resultados observados indica os nematoides entomopatogênicos do gênero Heterorhabditis (estirpes HP88 e LPP7) como uma alternativa promissora no controle da mosca dos estábulos.(AU)

Genetic relationship between Escherichia coli strains isolated from dairy mastitis and from the stable fly Stomoxys calcitrans / Caracterização genotípica de Escherichia coli isolados de leite com mastite e da mosca dos estábulos Stomoxys calcitrans

The stable fly Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) has been described as a potential spreader of infectious agents to cattle herds. Among the agents transmitted by this fly, Escherichia coli has attracted attention due to its potential to cause gastrointestinal disorders as well as environmental mastitis in dairy cows. Therefore, the aim of this study was to isolate and to assess the genetic diversity and the clonal relatedness among E. coli isolates from the milk of dairy mastitis and from stable flies anatomical sites by the Random Amplification of Polymorphic DNA (RAPD-PCR) technique. The molecular typing revealed a high degree of genetic polymorphism suggesting that these microorganisms have a non-clonal origin. Identical electrophoretic profiles were observed between E. coli isolates from different flies, different mammary quarters of the same cow and from cows on a single farm. These results reveal the circulation of the same bacterial lineages and suggest the role of the stable fly in bacterial dispersion. Considering the high pathogenic potential of this bacterial species, our findings alert to a more effective health surveillance.(AU)

A mosca dos estábulos Stomoxys calcitrans é descrita como um importante dispersor de agentes infecciosos aos bovinos. Dentre os agentes veiculados por esta mosca a bactéria Escherichia coli ganha relevância devido ao seu potencial em desenvolver alterações gastroentéricas, bem como mastite bovina ambiental. Desta forma, objetiva-se com este estudo isolar e acessar a diversidade genética e relação de clonalidade entre isolados de E. coli provenientes de casos de mastite e de moscas dos estábulos utilizando a técnica da Amplificação Randômica do DNA Polimórfico (RAPD). A tipagem molecular revelou elevado polimorfismo genético sugerindo que esses microrganismos têm origem não clonal. Perfis eletroforéticos idênticos entre si foram observados entre amostras isoladas de diferentes moscas, quartos mamários de uma mesma vaca, bem como de diferentes vacas dentro de uma mesma propriedade. Esses resultados revelam a circulação de uma mesma linhagem bacteriana e sugerem o papel da Stomoxys calcitrans na dispersão bacteriana. Considerando o elevado potencial patogênico dessa espécie bacteriana, nossos achados alertam para uma vigilância sanitária mais efetiva.(AU)

Genetic relationship between Escherichia coli strains isolated from dairy mastitis and from the stable fly Stomoxys calcitrans / Caracterização genotípica de Escherichia coli isolados de leite com mastite e da mosca dos estábulos Stomoxys calcitrans

The stable fly Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) has been described as a potential spreader of infectious agents to cattle herds. Among the agents transmitted by this fly, Escherichia coli has attracted attention due to its potential to cause gastrointestinal disorders as well as environmental mastitis in dairy cows. Therefore, the aim of this study was to isolate and to assess the genetic diversity and the clonal relatedness among E. coli isolates from the milk of dairy mastitis and from stable flies anatomical sites by the Random Amplification of Polymorphic DNA (RAPD-PCR) technique. The molecular typing revealed a high degree of genetic polymorphism suggesting that these microorganisms have a non-clonal origin. Identical electrophoretic profiles were observed between E. coli isolates from different flies, different mammary quarters of the same cow and from cows on a single farm. These results reveal the circulation of the same bacterial lineages and suggest the role of the stable fly in bacterial dispersion. Considering the high pathogenic potential of this bacterial species, our findings alert to a more effective health surveillance.(AU)

A mosca dos estábulos Stomoxys calcitrans é descrita como um importante dispersor de agentes infecciosos aos bovinos. Dentre os agentes veiculados por esta mosca a bactéria Escherichia coli ganha relevância devido ao seu potencial em desenvolver alterações gastroentéricas, bem como mastite bovina ambiental. Desta forma, objetiva-se com este estudo isolar e acessar a diversidade genética e relação de clonalidade entre isolados de E. coli provenientes de casos de mastite e de moscas dos estábulos utilizando a técnica da Amplificação Randômica do DNA Polimórfico (RAPD). A tipagem molecular revelou elevado polimorfismo genético sugerindo que esses microrganismos têm origem não clonal. Perfis eletroforéticos idênticos entre si foram observados entre amostras isoladas de diferentes moscas, quartos mamários de uma mesma vaca, bem como de diferentes vacas dentro de uma mesma propriedade. Esses resultados revelam a circulação de uma mesma linhagem bacteriana e sugerem o papel da Stomoxys calcitrans na dispersão bacteriana. Considerando o elevado potencial patogênico dessa espécie bacteriana, nossos achados alertam para uma vigilância sanitária mais efetiva.(AU)

Avaliação da infecção e reinfecção de nematoides entomopatogênicos sobre larvas de Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae) em variados tempos de exposição.

Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758), é um díptero hematófago conhecido como mosca dos estábulos, é capaz de parasitar diversas espécies animais, sua distribuição é cosmopolita, com aumento populacional nos períodos mais quentes do ano. O parasitismo desta mosca é um empecilho à produção animal, levando a perdas consideráveis na pecuária mundial. Devido à resistência das pragas aos pesticidas químicos, somada à demanda mundial por alimentos livres de vestígios destas substâncias, diferentes microrganismos vêm sendo pesquisados com o objetivo de verificar suas aplicações no controle de parasitas de importância econômica. Neste contexto, diversos agentes aparecem como alternativas para o uso no controle biológico, entres estes estão fungos, bactérias, vírus e nematoides entomopatogênicos (NEP). Os NEP possuem alta virulência para artrópodes; são móveis, facilmente cultivados e detêm grande potencial reprodutivo. Este trabalho foi dividido em dois capítulos, o capitulo I teve como objetivo avaliar o efeito da infecção de H.bacteriophora (HP88) e H.baujardi (LPP7) sobre larvas de S. calcitrans em diferentes tempos de exposição; o capítulo II objetivou avaliar a eficácia dos NEP H.bacteriophora (HP88) e H.baujardi (LPP7) sobre larvas de S. calcitrans quando estes são isolados de larvas de terceiro instar da mosca dos estábulos, além de verificar a taxa de emergência de moscas adultas. No capítulo I observou-se que o NEP H. bacteriophora apresentou taxas de mortalidade de 51,7, 83,3 e 91,7%, para os tempos 12, 24 e 48 horas, respectivamente, enquanto que para H. baujardi as taxas foram de 9,3 (12 h), 35 (24h) e 35% (48h). Quando se avalia quais são os melhores tempos de exposição para cada nematoide, observa-se que para H. bacteriophora, os dois maiores tempos de exposição (24 e 48 h) foram efetivamente mais eficientes aos demais, embora sejam estatisticamente iguais entre sí. Já para H. baujardi, pouca variação foi observada entre os tempos utilizados. No capítulo II verificou-se que as taxas de mortalidade foram de 15% para o grupo controle, 35% para H. bacteriophora e de 25% para H. baujardi, a taxa de mortalidade de H. bacteriophora foi estatisticamente superior ao grupo controle, porém estatisticamente igual à de H. baujardi. Quando se avaliou a taxa de emergência de adultos, observou-se que não houve diferença estatística entre os grupos tratados e o controle, onde a média geral foi de 70,54%. Conclui-se que os NEP se mostram promissores no controle de larvas de terceiro instar de S. calcitrans. Sendo H. bacteriophora o mais indicado para o uso no controle da mosca dos estábulos (capitulo I), e que os NEP H. bacteriophora-HP88 e H. baujardi-LPP7 quando isolados de larvas de S. calcitrans, não se mostraram eficientes no controle de larvas de terceiro instar da mosca dos estábulos, assim como também não causaram efeitos negativos na emergência de adultos da mosca (capitulo II).

Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758), its a haematophagous dipterous popularly known as the "stable fly", It is able to parasite several animal species, its distribution is worldwide, with population increase in the hottest periods of the year. The parasitism of this fly is a problem to livestock, leading to considerable losses around the world. Due to the resistance of pests to chemical pesticides, added to the worldwide demand for food free of traces of these substances, different microorganisms have been researched in order to verify their applications in the control of parasites of economic importance. In this context, several agents appear as alternatives for use in biological control, among them are fungi, bacteria, viruses and entomopathogenic nematodes (EPN). EPN have high virulence for arthropods; they are mobile, easily grown and have great reproductive potential. This work was divided into two chapters. Chapter I aimed to evaluate the effect of H. bacteriophora (HP88) and H. baujardi (LPP7) infection on S. calcitrans larvae at different exposure times; Chapter II aimed to evaluate the effect of EPN H. bacteriophora (HP88) and H. baujardi (LPP7) reared on S. calcitrans larvae on third instar larvae of the stable fly, and to verify the emergence rate of adult flies. In Chapter I, it was observed that EPN H. bacteriophora presented mortality rates of 51.7, 83.3 and 91.7%, for the 12, 24 and 48 hours, respectively, while for H. baujardi were 9.3 (12h), 35 (24h) and 35% (48h). When evaluating exposure times for each nematode, it is observed that for H. bacteriophora, the two longest exposure times (24 and 48 h) were effectively more efficient for the others, although they were statistically equal between them. For H. baujardi, a slight variation was observed between the times. In Chapter II the mortality rates were 15% for the control group, 35% for H. bacteriophora and 25% for H. baujardi, the mortality rate of H. bacteriophora was statistically higher than the control group, but statistically the same as H. baujardi. When assessing the adult emergence rate, it was observed that there was no statistical difference between the treated and control groups, where the overall average was 70.54%. It was concluded that the EPN are promising in the control of third instar larvae of S. calcitrans. H. bacteriophora-HP88 is the most suitable for use in stable fly control (Chapter I), and that H. bacteriophora-HP88 and H. baujardi- LPP7 when isolated from S. calcitrans larvae are not efficient in the control of stable third instar larvae of the stable fly, nor do they cause negative effects on the emergence of adult flies (chapter II).

Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) outbreaks: current situation and future outlook with emphasis on Brazil / Surtos por Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) no Brasil: situação atual e perspectivas

The stable fly (Stomoxys calcitrans) has historically been a pest of dairy cattle and feedlots due to the availability of decaying plant matter mixed with animal excrements in such production systems. In the last few decades, stable fly outbreaks have also been reported in pasture-raised beef cattle, usually associated with wastes accumulated from animal feeding during winter, the introduction of large-scale crop operations near cattle ranches, and/or the inadvertent use of organic fertilizers. Population explosions of Stomoxys flies may also have natural causes, affecting not only domestic and/or wild animals but also humans. This article compiles information on stable fly outbreaks in Brazil and abroad and discusses their causes and consequences. (AU)

A mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) tem sido historicamente uma praga em gado de leite e gado de corte em confinamento devido à disponibilidade de matéria orgânica vegetal em decomposição, misturada a dejetos animais, nestes sistemas de produção. Nas últimas décadas, surtos de infestação por esta mosca passaram a ocorrer também em rebanhos de corte mantidos extensivamente, geralmente associados ao acúmulo de resíduos de suplementação alimentar durante o inverno, introdução de culturas agrícolas em larga escala no entorno de propriedades pecuárias e/ou uso inadvertido de fertilizantes orgânicos. Eventualmente, explosões populacionais de Stomoxys podem ter causas naturais, afetando animais domésticos e/ou selvagens, além do próprio homem. Este artigo reúne informações sobre surtos da mosca-dos-estábulos no Brasil e em outros países e discute suas causas e consequências. (AU)

Stomoxys calcitrans: estabelecimento de colônia, caracterização da glândula salivar e interação com patógenos

Stomoxys calcitrans, conhecida como mosca-dos-estábulos é um díptero de grande importância médico veterinária. Macho e fêmeas se alimentam de sangue, hábito parasita que tem como consequência prejuízos nos ambientes de animais de criação. Os desdobramentos da alimentação sanguínea incluem o estresse da picada, que leva a menor ganho de peso e produção de leite, e à infecção por patógenos que S. calcitrans transmite mecanicamente. Os prejuízos anuais causados pela mosca-dos-estábulos no Brasil são estimados em 340 milhões de dólares. A manutenção desse artrópode em condições de laboratório é um passo crucial no estabelecimento de linhas de pesquisa sob condições controladas. Colônias de insetos em laboratório são importantes para diversos estudos que vão desde o comportamento até estratégias de controle dos mesmos. No presente trabalho são apresentados dados de nossa colônia ao longo de cinco meses e estratégias para a criação dessa mosca em laboratório. Além disso, temos procurado estabelecer diferentes frentes para entender melhor aspectos fisiológicos do vetor, bem como sua interação com patógenos de modo a entender melhor a dinâmica da transmissão mecânica. Os componentes saliva de insetos hematófagos é fator evolutivo crucial para a hematofagia e os patógeno vem se beneficiando de suas propriedades nessa relação. As glândulas salivares são órgãos de grande importância, tanto para a alimentação sanguínea, como na dinâmica de transmissão de patógenos. Por isso, caracterizamos morfologicamente as glândulas salivares de S. calcitrans. As análises realizadas nesse trabalho revelaram que esse órgão possui característica merócrina, com células poligonais e núcleos volumosos, além de apresentarem citoplasma rico em perfis de mitocôndria e retículo endoplasmático rugoso, característico de grande atividade de síntese proteica. Entender como S. calcitrans interage com patógenos é um passo importante para esclarecer a dinâmica de transmissão por essa mosca, sendo assim o modelo escolhido foi Leishmania agente etiológico das leishmanioses, doenças com característica antropozoonótica. Leishmania sp. foi capaz de interagir com o intestino de S. calcitrans, mas os mecanismos pelo qual essa ligação ocorre ainda devem ser esclarecidos.

Stomoxys calcitrans (Diptera), known as stable fly presents great veterinary importance. Males and females feed on blood, a parasitic habit that results in damage to livestock. The consequences of blood feeding include bite stress, which leads to lower weight gain and milk production, and infection with pathogens that S. calcitrans mechanically transmits. The annual damage caused by the stable fly in Brazil is estimated at US $ 340 million. Maintaining this organism under laboratory conditions is a crucial step in establishing research lines under controlled conditions. Insect colonies establishment in the laboratory is important for several studies, ranging from behavior observations to control strategies. This work presents data from S. calcitrans colony that we established in our lab over five months and strategies for breeding this fly in the laboratory. Additionally, we intend to define different actions to better understand the physiological aspects of the vector, as well as its interaction with pathogens in order to better understand the dynamics of mechanical transmission. The saliva composition of hematophagous insects is a crucial evolutionary factor for hematophagy and pathogens have been benefiting from its properties in this relationship. Salivary glands are organs of great importance, both for blood feeding and for the dynamics of pathogen transmission. Therefore, we characterized the salivary glands of S. calcitrans morphologically. The analyzes performed in this work revealed that this organ has merocrine gland characteristic, with polygonal cells presenting large nuclei, besides exhibiting cytoplasm rich in mitochondrial profiles and rough endoplasmic reticulum, characteristics of high protein synthesis activity. Understanding how S. calcitrans interacts with pathogens is an important step to clarify the dynamics of transmission by this fly, and the chosen model was Leishmania, etiological agent of leishmaniasis, diseases with anthropozoonotic characteristics. Leishmania sp. has been able to interact with the S. calcitrans gut, but the mechanisms by which this binding occurs must still be clarified.

Avaliação da eficiência de nematoides entomopatogenicos expostos à diferentes temperaturas de vinhoto no controle de Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae)

A utilização da colheita mecanizada e o processamento da cana de açúcar nos dias atuais, geram subprodutos que ajudam na proliferação de Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758), que acomete várias espécies de animais domésticos e o homem, provocando prejuízos econômicos devido à ocorrência de surtos. Com o uso constante de produtos químicos para o controle da mosca dos estábulos, observa-se a resistência aos mesmos e isso levou ao aprofundamento dos estudos em controle biológico, onde os nematoides entomopatogenicos (NEP) aparecem como organismos com potencial uso para o controle biológico. O objetivo do presente estudo foi verificar a eficiência de Heterorhabditis bacteriophora linhagem HP88 e H. baujardi linhagem LPP7, mantidos em diferentes temperaturas de vinhoto sobre larvas de S. calcitrans em laboratório. Cada unidade experimental foi constituída de dez larvas de terceiro instar colocados em potes plásticos contendo quatro mililitros da solução de vinhoto a 50%. Em cada tratamento foram adicionados 300 juvenis infectantes de H. bacteriophora linhagem HP88 ou H. baujardi linhagem LPP7 por larva na solução de vinhoto acima descrita, aquecidos durante dez minutos nas temperaturas de 25, 28, 31, 34, 37 e 40°C, os grupos tratados e os grupos controles do experimento foram mantidos em câmara climatizada tipo BOD a 25±1°C e 70±10% UR. Ao todo foram realizadas seis repetições para cada tratamento, sendo observado a mortalidade diariamente por um período de 15 dias. Os resultados foram avaliados, e na análise estatística, utilizando-se o procedimento GLIMMIX a 5% de probabilidade, verificouse que não houve diferença estatística entre os grupos tratados, grupos controles e temperaturas para taxa de mortalidade de larval (P=0,8573), percentual de pupas mortas (P=0,1782) e emergência de adultos (P=0,4386). Quando avaliados apenas os grupos com presença e ausência de NEPs, foram observadas as taxas de mortalidade larval de 30% e 14,17% para H. bacteriophora linhagem HP88 e H. baujardi linhagem LPP7 respectivamente, enquanto que os grupos controles apresentaram 3,89% no H. bacteriophora linhagem HP88 e 8,61% H. baujardi linhagemLPP7. Na avaliação das temperaturas, foram observadas diferenças estatísticas significativas apenas nas temperaturas 37 e 40 ºC do H. baujardi linhagem LPP7 na taxa de mortalidade larval. Nas taxas de mortalidade pupal, o grupo com H. bacteriophora linhagem HP88 apresentou médias de 32,5, 34,17 e 27,5% nas temperaturas de 25, 31 e 34 ºC, respectivamente. No grupo com H. baujardi linhagem LPP7 as temperaturas de 37 e 40 ºC apresentaram 40% e 37,5% de mortalidade pupal. Na análise da taxa de emergência de adultos, houve uma menor emergência nas temperaturas de 25, 28, 31 e 34 ºC no grupo com presença de H. bacteriophora linhagem HP88 e o grupo com H. baujardi linhagem LPP7 com as menores taxas de emergência de adultos nas temperaturas de 37 e 40 ºC. Os resultados do estudo mostram que houve uma diminuição da mortalidade dos estágios imaturos de S. calcitrans causada pelos NEPs mantidos em diferentes temperaturas de vinhoto, quando comparado a outros estudos sem o aquecimento do mesmo. Existe a necessidade de mais estudos para adequar o uso dos NEP juntamente com vinhoto, aquecido ou não.

The use of mechanized harvesting and the processing of sugar cane nowadays, generate by-products that help in the proliferation of Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758), which affects various species of domestic animals and man, causing economic losses due to the occurrence of outbreaks . With the constant use of chemicals to control the fly in the stables, resistance to them is observed and this has led to further studies in biological control, where entomopathogenic nematodes (NEP) appear as organisms with potential use for biological control . The objective of the present study was to verify the efficiency of Heterorhabditis bacteriophora - HP88 and H. baujardi - LPP7, maintained at different temperatures of vinasse on S. calcitrans larvae in the laboratory. Each experimental unit consisted of ten third instar larvae placed in plastic pots containing four milliliters of the 50% vinasse solution. In each treatment, 300 infectious juveniles of H. bacteriophora - HP88 line or H. baujardi - LPP7 line were added per larva in the vinasse solution described above, heated for ten minutes at temperatures of 25, 28, 31, 34, 37 and 40 ° C, the treated groups and the control groups of the experiment were kept in an air-conditioned BOD chamber at 25 ± 1 ° C and 70 ± 10% RH. In total, 6 repetitions were performed for each treatment, with mortality observed daily for a period of 15 days. The results were evaluated, and in the statistical analysis, using the GLIMMIX procedure at 5% probability, it was found that there was no statistical difference between the treated groups, control groups and temperatures for larval mortality rate (P = 0, 8573), percentage of dead pupae (P = 0.1782) and adult emergence (P = 0.4386). When only the groups with presence and absence of NEPs were evaluated, larval mortality rates of 30% and 14.17% were observed for H. bacteriophora HP88 line and H. baujardi - LPP7 line respectively, while the control groups presented 3,89% in H. bacteriophora HP88 strain and 8.61% in H. baujardi - LPP7 strain. In the evaluation of temperatures, significant statistical differences were observed only in the temperatures 37 and 40 ºC of H. baujardi - strain LPP7 in the larval mortality rate. In pupal mortality rates, the group with H. bacteriophora - HP88 strain showed averages of 32.5, 34.17 and 27.5% at temperatures of 25, 31 and 34 ºC, respectively. In the group with H. baujardi - lineage LPP7, temperatures of 37 and 40 ºC presented 40% and 37.5% of pupal mortality. In the analysis of the adult emergence rate, there was a lesser emergence at temperatures of 25, 28, 31 and 34 ºC in the group with the presence of H. bacteriophora strain HP88 and the group with H. baujardi - strain LPP7 with the lowest rates of emergence of adults at temperatures of 37 and 40 ºC. The results of the study show that there was a decrease in the mortality of the immature stages of S. calcitrans caused by NEPs maintained at different temperatures of vinasse, when compared to other studies without heating it. There is a need for further studies to adapt the use of NEP together with vinasse, heated or not.

Influência do vinhoto no desenvolvimento de Stomoxys calcitrans

Stomoxys calcitrans is known for its painful sting that causes stress in animals and also by transmitting several diseases, and attack man. Due to the outbreaks in sugarcane fields in Brazil, where the vinasse is used in fertigation of the sugarcane fields, this study was conducted, aiming to verify if the vinasse would improve posture and development of the immature stages of this insect. For this, eggs were deposited into diet of larval growth of Bailey (control), and also in diets with replacement of 5, 10, 20 and 30% of this water volume per vinasse. Part of the results was submitted to analysis of variance and means were compared by Tuket test, and the other, was assessed by Chi-square. The eggs viability was of 66%, 64%, 69%, 80% e 20%, the larvae was of 96.4%, 96.,9%, 95.1%, 99.3% e 97.2% and the pupae was of 90.2%, 94.7%, 93.5%, 91.5% and 86.1%, respectively to the control, 5, 10, 20, e 30%. The weight of the third stage larvae was 16.4; 16.9; 19.7; 15.8 and 18mg, and pupae was of 12.9; 13.9; 17.4; 14.5 e 21.9mg. The larval period was of 10.38, 11.81, 10.00, 10.86, 9.5 days, and the pupal was of 6.57, 6.19, 7.05, 7.00 and 6.00 days, respectively. The viability of the immature stages was higher in diet with replacement of vinasse. Some of vinasse concentrations used in diets affected the biology of immature stages of S. calcitrans.

Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae) é conhecida por sua dolorosa picada, que causa estresse nos animais, e pela transmissão de diversas enfermidades, além de atacar o homem. Devido aos surtos ocorridos em áreas sucroalcooleiras no Brasil, onde o vinhoto é utilizado na fertirrigação dos canaviais, elaborou-se o presente estudo, que teve como objetivo verificar se o vinhoto favorece a postura e o desenvolvimento dos estádios imaturos desse inseto. Para tanto, ovos foram depositados em dieta de crescimento larval de Bailey (controle) e também em dietas com substituição de 5, 10, 20 e 30% do seu volume de água por vinhoto. Parte dos resultados foi submetida à analise de variância e as médias foram comparadas entre si pelo teste de Tukey. A outra parte foi avaliada pelo teste do Qui Quadrado. A viabilidade dos ovos foi de 66%, 64%, 69%, 80% e 20% das larvas de 96,4%, 96,9%, 95,1%, 99,3% e 97,2% e das pupas de 90,2%, 94,7%, 93,5%, 91,5% e 86,1%, respectivamente, para os grupos controle, 5, 10, 20, e 30%. O peso das larvas de terceiro estágio foi de 16,4; 16,9; 19,7; 15,8 e 18mg, e das pupas foi 12,9; 13,9; 17,4; 14,5 e 21,9mg. O período larval foi de 10,38, 11,81, 10,00, 10,86, 9,5 dias, e o pupal foi de 6,57; 6,19; 7,05; 7,00 e 6,00, respectivamente. A viabilidade dos estádios imaturos foi maior nas dietas com substituição de vinhoto. Algumas concentrações de vinhoto utilizadas nas dietas afetaram a biologia dos estádios imaturos de S. calcitrans.

Influência do vinhoto no desenvolvimento de Stomoxys calcitrans

Stomoxys calcitrans is known for its painful sting that causes stress in animals and also by transmitting several diseases, and attack man. Due to the outbreaks in sugarcane fields in Brazil, where the vinasse is used in fertigation of the sugarcane fields, this study was conducted, aiming to verify if the vinasse would improve posture and development of the immature stages of this insect. For this, eggs were deposited into diet of larval growth of Bailey (control), and also in diets with replacement of 5, 10, 20 and 30% of this water volume per vinasse. Part of the results was submitted to analysis of variance and means were compared by Tuket test, and the other, was assessed by Chi-square. The eggs viability was of 66%, 64%, 69%, 80% e 20%, the larvae was of 96.4%, 96.,9%, 95.1%, 99.3% e 97.2% and the pupae was of 90.2%, 94.7%, 93.5%, 91.5% and 86.1%, respectively to the control, 5, 10, 20, e 30%. The weight of the third stage larvae was 16.4; 16.9; 19.7; 15.8 and 18mg, and pupae was of 12.9; 13.9; 17.4; 14.5 e 21.9mg. The larval period was of 10.38, 11.81, 10.00, 10.86, 9.5 days, and the pupal was of 6.57, 6.19, 7.05, 7.00 and 6.00 days, respectively. The viability of the immature stages was higher in diet with replacement of vinasse. Some of vinasse concentrations used in diets affected the biology of immature stages of S. calcitrans.

Stomoxys calcitrans (Linnaeus, 1758) (Diptera: Muscidae) é conhecida por sua dolorosa picada, que causa estresse nos animais, e pela transmissão de diversas enfermidades, além de atacar o homem. Devido aos surtos ocorridos em áreas sucroalcooleiras no Brasil, onde o vinhoto é utilizado na fertirrigação dos canaviais, elaborou-se o presente estudo, que teve como objetivo verificar se o vinhoto favorece a postura e o desenvolvimento dos estádios imaturos desse inseto. Para tanto, ovos foram depositados em dieta de crescimento larval de Bailey (controle) e também em dietas com substituição de 5, 10, 20 e 30% do seu volume de água por vinhoto. Parte dos resultados foi submetida à analise de variância e as médias foram comparadas entre si pelo teste de Tukey. A outra parte foi avaliada pelo teste do Qui Quadrado. A viabilidade dos ovos foi de 66%, 64%, 69%, 80% e 20% das larvas de 96,4%, 96,9%, 95,1%, 99,3% e 97,2% e das pupas de 90,2%, 94,7%, 93,5%, 91,5% e 86,1%, respectivamente, para os grupos controle, 5, 10, 20, e 30%. O peso das larvas de terceiro estágio foi de 16,4; 16,9; 19,7; 15,8 e 18mg, e das pupas foi 12,9; 13,9; 17,4; 14,5 e 21,9mg. O período larval foi de 10,38, 11,81, 10,00, 10,86, 9,5 dias, e o pupal foi de 6,57; 6,19; 7,05; 7,00 e 6,00, respectivamente. A viabilidade dos estádios imaturos foi maior nas dietas com substituição de vinhoto. Algumas concentrações de vinhoto utilizadas nas dietas afetaram a biologia dos estádios imaturos de S. calcitrans.

Sugarcane stems as larval habitat for the stable fly (Stomoxys calcitrans) in sugarcane plantations / Colmos de cana-de-açúcar como habitat para o desenvolvimento de larvas de mosca-dos-estábulos (Stomoxys calcitrans) em plantações de cana-de-açúcar

Outbreaks of stable fly, Stomoxys calcitrans, cause losses for livestock producers located near sugarcane mills in Brazil, especially in southern Mato Grosso do Sul. The sugarcane mills are often pointed by local farmers as the primary source of these outbreaks; some mills also joined the farmers in combating the flies. Brazilian beef cattle production has great economic importance in similar level to bio-fuel production as ethanol. In this context, the wide-ranging knowledge on the biology and ecology of the stable fly, including larval habitats and their reproduction sites is extremely important for further development of control programs. This paper aims to report the occurrence and development of S. calcitrans larvae inside sugarcane stems in three municipalities of Mato Grosso do Sul. The sugarcane stems give protection against bad weather conditions and insecticide application. In this way, for sustainable sugarcane growth specific research concerning this situation should be conducted.(AU)

Surtos de mosca dos estábulos, Stomoxys calcitrans, vêm causando prejuízos em fazendas de pecuaria localizadas próximas as usinas de cana no Brasil, especialmente no sul do Mato Grosso do Sul. As usinas são frequentemente apontadas pelos pecuarístas locais, como a principal fonte desses surtos e algumas destas usinas também se uniram aos agricultores no combate a este parasita. No Brasil, a produção de gado de corte tem grande importância econômica em nível semelhante ao de bio-combustíveis como o etanol. Neste contexto, o conhecimento amplo sobre a bioecologia, incluindo os habitats das larvas e os seus locais de reprodução, é extremamente importante para o desenvolvimento de programas de controle para a mosca dos estábulos. Este trabalho teve como objetivo registrar que larvas de S. calcitrans podem desenvolver dentro do colmo da cana. Larvas foram encontradas dentro de colmos de cana de açúcar em três oportunidades em diferentes cidades. O colmo da cana pode dar proteção para as larvas em condições climáticas desfavoráveis e aplicação de inseticidas. Desta forma, para o crescimento sustentável destas atividades, mais pesquisas específicas focadas nestas relações devem ser realizadas.(AU)

Abundância de Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) em diferentes subprodutos canavieiros / Abundance of Stomoxys calcitrans (Diptera: Muscidae) in different sugar cane byproducts

Um aumento na abundância de Stomoxys calcitrans tem sido observado em áreas de produção sucroalcooleira devido aos subprodutos orgânicos resultantes desta atividade. O objetivo do presente estudo foi avaliar a abundância desta espécie em diferentes subprodutos da cana-de-açúcar. De janeiro a dezembro de 2011, a abundância de S. calcitrans foi monitorada em quatro subprodutos: bagaço, palha, torta de filtro (TF) e palha com vinhaça (PV), em uma usina sucroalcooleira no município de Angélica, Mato Grosso do Sul, Brasil. Mensalmente, 20 armadilhas de emergência foram distribuídas em cada substrato, mantidas ativas por quatro semanas. Durante todo o período de estudo, 4.049 espécimes de S. calcitrans foram coletados nos diferentes substratos, representando 9,22% do total de dípteros capturados nas armadilhas. Os quatro subprodutos amostrados apresentaram significativas diferenças em relação à abundância de S. calcitrans, sendo maior na TF (67,20%) e na PV (29,19%). Picos de abundância foram observados em junho (PV) e outubro (PV e TF). Maior produtividade de S. calcitrans foi observada na TF (55,8 moscas/mII) e na PV (24,2 moscas/mII), com produção média mensal de S. calcitrans na usina estimada em 37 mil e 24 milhões, respectivamente. A elevada capacidade de reprodução da S. calcitrans em subprodutos da usina explica as explosões populacionais desta espécie, ocorridas recentemente em fazendas pecuárias próximas a usinas sucroalcooleiras. (AU)

Increasing abundance of Stomoxyscalcitrans has been observed in organic byproducts resulting from sugar cane alcohol production. This study aimed to evaluate the abundance of S. calcitrans in such byproducts. From January to December 2011, the abundance of S. calcitrans was monitored in four byproducts: sugar cane bagasse, mulch, filter cake (FC) and mulch plus vinasse (MV), in a sugar cane mill located at the municipality of Angélica, state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Monthly, 20 emergence traps were placed in each substrate, remaining active for the following four weeks. A total of 4,049 specimens of S. calcitrans was caught during the whole period, representing 9.22% of total amount of collected flies. The four byproducts studied showed significant differences regarding the abundance of S. calcitrans, being higher in FC (67.20%) and MV (29.19%). Abundance peaks were observed in June (PV) and October (PV and TF). The highest productivity of S. calcitrans was observed in TF (55.8 flies/mII) and PV (24.2 flies/mII) and the average monthly production of S. calcitrans at the mill was estimated at 37,000 and 24 million, respectively. The high capacity of S. calcitrans breeding in sugar cane byproducts explains the recent population explosions of this species reported in cattle ranches around sugarcane mills. (AU)

DINÂMICA POPULACIONAL E SURTOS DE Stomoxys calcitrans EM USINA SUCROALCOOLEIRA E PROPRIEDADES PECUÁRIAS ADJACENTES

No Brasil, surtos por mosca-dos-estábulos, Stomoxys calcitrans, têm causado elevados prejuízos para aos setores pecuário e sucroenergético. Deste modo, os conhecimentos sobre o comportamento bioecológico são de extrema importância para a elaboração de um Programa de Manejo Integrado para Controle da Mosca-dos-estábulos. O objetivo deste trabalho foi estudar a dinâmica populacional e surtos de S. calcitrans em usina sucroalcooleira e propriedades pecuárias adjacentes e, ainda, avaliar o efeito da aspersão de vinhaça em área canavieira, na abundância de adultos deste díptero. O estudo sazonal da mosca-dos-estábulos no campo foi realizado em uma usina sucroalcooleira e três estabelecimentos pecuários adjacentes, no município de Nova Alvorada do Sul, MS, de janeiro de 2013 a dezembro de 2015. As armadilhas reflexivas tipo Alsynite foram instaladas em quatro ambientes: palha com vinhaça (n= 29), palha sem vinhaça (n= 31), torta de filtro (n=5 no 1° e 2° anos e n= 10 no 3° ano) e em três fazendas pecuárias (n=15, sendo 5 armadilhas por fazenda) localizadas a uma distância máxima de 15 km da sede industrial da usina. As armadilhas foram mantidas continuamente ativas, com substituição semanal do plástico adesivo com os insetos capturadas. Para avaliar o efeito de aspersão de vinhaça em lavoura canavieira, a área em estudo foi monitorada por 21 dias, entre agosto e setembro de 2014. Foram instaladas 22 armadilhas reflexivas, distantes aproximadamente 65 m entre si, delimitando uma área de 14,4 ha. Imediatamente após a instalação das armadilhas foi realizada a fertirrigação na área de estudo. As coletas dos insetos capturados foram realizadas diariamente, em três horários (7:00, 11:00 e 15:00), totalizando 61 coletas. O material entomológico coletado foi encaminhado ao Laboratório de Parasitologia Veterinária Aplicada da Embrapa Gado de Corte, para identificação e contagem dos espécimes. Durante o estudo foram capturados 1.305.231 S. calcitrans. A flutuação sazonal de S. calcitrans associada à usina sucroalcooleira apresenta maior abundância e picos populacionais entre os meses de abril/maio a dezembro (safra) e redução da população entre janeiro a março/abril (entressafra). As variáveis climáticas não foram determinantes na ocorrência dos surtos de S. calcitrans, existindo maior relação com o manejo da torta de filtro, palha de cana-de-açúcar, vinhaça e resíduos pecuários. Os surtos populacionais da mosca-dos-estábulos ocorreram após o segundo mês do início da safra de cana-de-açúcar. O pátio de compostagem de torta de filtro pode atuar como incializador do surto de S. calcitrans nas áreas da usina. As capturas de S. calcitrans foram mais intensas nas áreas canavieiras fertirrigadas com vinhaça quando comparadas com áreas sem aplicação de vinhaça. O processo de fertirrigação de áreas canavieiras pela aspersão de vinhaça é atrativo à S. calcitrans, aumentando a abundância desta mosca nestes locais, particularmente nos quatro dias subsequentes à aplicação. De modo geral, as propriedades pecuárias atuam na manutenção das populações de S. calcitrans na entressafra e as usinas sucroalcooleiras possibilitam a ocorrência de surtos ao disponibilizar extensas áreas de substratos propícios à reprodução em larga escala desta mosca durante a safra.

In Brazil, outbreaks of this Stable Fly infestation, Stomoxys calcitrans, have caused heavy losses for livestock and sugar-energy sectors. Thus, knowledge about bioecological behavior has extreme importance to elaborate an Integrated Management Program for the control of Stable flies. This study aimed to study the seasonal fluctuation of S. calcitrans in a sugarcane mill and adjacent livestock properties and to evaluate the effect of vinasse spraying on a sugarcane area on abundance of adults of this fly. The seasonal study was carried out in a sugarcane mill and in three adjacent livestock ranches, in Nova Alvorada do Sul, MS, from January 2013 to December 2015. Reflective traps (Alsynite type) were installed in four environments: straw with vinasse (n = 29), straw without vinasse (n = 31), filter cake (n = 5 in the 1st and 2nd years and n = 10 in the 3rd year) and three livestock ranches (n = 15, with 5 traps per farm). The traps were at a maximum distance of 15 km from sugarcane mill headquarter. The traps were kept continuously active, with weekly replacement of the adhesive plastic with the captured flies. In order to evaluate the sprinkling effect of vinasse in sugarcane plantations, the study area was monitored for 21 days between August and September 2014. There were installed 22 reflective traps, distant about 65 m from each other, delimiting an area of 14.4 ha. Immediately after traps installation, fertigation was carried out on this study area. The insects were collected daily in three schedules (7:00, 11:00 A.M and 15:00 P.M), totaling 61 collections. The entomological material collected was sent to the Laboratory of Applied Veterinary Parasitology at Embrapa Beef Cattle, to identify and count the specimens. Seasonal fluctuation of S. calcitrans near sugarcane mill presents greater abundance and peaks occurring between April/May and December (harvest season) and reduction of population between January and March/April (off-season). The climatic conditions were not determinant on occurrence of S. calcitrans outbreaks. There was a greater relationship with management of filter cake, sugarcane straw, vinasse and cattle residues. Population outbreaks occur after the second month after sugarcane harvest. The filter cake composting yard can act as the initiator of S. calcitrans outbreak in sugarcane fields. The catches of S. calcitrans were more intense in sugarcane areas fertigated with vinasse when compared to areas without application of vinasse. Fertigation of sugarcane areas by vinasse spraying is attractive to S. calcitrans, increasing the abundance of this fly in those places, particularly during the first four days following vinasse application. In general, the livestock properties maintan the S. calcitrans populations during off-season and the sugar-alcohol mills make the outbreaks possible by providing extensive areas of substrates favorable to large scale production of this fly during the harvest season

Ocorrência de Spalangia endius Walker, 1839 (Hymenoptera, Pteromalidae) em pupas de Musca domestica L. e Stomoxys calcitrans L. (Diptera, Muscidae) no sul do Rio Grande do Sul / Occurrence of Spalangia endius Walker, 1839 (Hymenoptera, Pteromalidae) in pupae of Musca domestica L. and Stomoxys calcitrans L. in southern Rio Grande do Sul, Brazil

It was reported the occurrence of Spalangia endius Walker, 1839 (Hymenoptera, Pteromalidae) as a parasitoid of pupae of Musca domestica Linnaeus, 1758 (Diptera, Muscidae) and Stomoxys calcitrans Linnaeus, 1758 (Diptera, Muscidae) in the extreme Southern of Brazil. The collection of pupae was performed in January and February, 2008. The pupae of M. domestica and S. calcitrans were collected from bovine feces using the flotation method. The pupae were individualized in glass tubes and maintained in acclimatized chamber at 27±2ºC with relative air humidity > 70 percent until the emergence of the flies or the parasitoids. The referred occurrence consists in the first report to Rio Grande do Sul.(AU)