Efeitos imediatos, tardios e transgeracionais do estresse térmico em gametas / Immediate, late and transgenerational effects of heat stress on gametes

As perdas de produtividade e fertilidade animal associadas ao estresse térmico durante os meses mais quentes do ano é um dos maiores desafios do setor pecuário. Na indústria de leite as perdas econômicas causadas pelo estresse térmico foram estimadas em mais de 1,5 bilhões de dólares por ano. No que tange a reprodução, já foi demonstrado que o estresse térmico exerce múltiplos efeitos deletérios, causando disfunções endócrinas e alterando a sequência orquestrada de eventos importantes para a gametogênese e para o desenvolvimento embrionário inicial. Estudos recentes têm esclarecido o padrão temporal no qual os danos são estabelecidos e carreados dependendo da intensidade do estresse. Enquanto os efeitos imediatos do estresse térmico nos gametas já são bem caracterizados, existem evidências de que alguns danos podem ser carreados de forma tardia e possivelmente entre gerações. Além disso, dados emergentes indicam que o estresse térmico compromete a reprogramação da metilação do DNA que ocorre durante a gametogênese e a programação do desenvolvimento in utero. Dessa forma, esse artigo visa explorar os efeitos imediatos, tardios e transgeracionais do estresse térmico nos gametas.(AU)

The drop on animal productivity and fertility associated with heat stress during the hot months of the year is one of the biggest challenges for the livestock sector. For the dairy industry the economic losses caused by heat stress have been estimated over 1.5 billion dollars per year. It has already been demonstrated that heat stress exerts multiple deleterious effects on reproductive function, causing endocrine dysfunctions as well as changes in the sequence of events required for gametogenesis and early embryonic development. Recent studies have shed a light in the temporal pattern in which heat-induced damage is established and carried forward depending on the intensity of stress. While the immediate effects of heat stress on gametes are well characterized, there is evidence that some damage can be carried over for longer periods and even across generations. Furthermore, emerging data indicate that heat stress compromises DNA methylation reprogramming that occurs during gametogenesis and developmental programming in utero. Thus, this paper aims to explore the immediate, late and transgenerational effects of heat stress on gametes.(AU)

Insulin-like growth factor-1 improves in vitro meiotic resumption of dromedary camel (Camelus Dromedarius) oocytes

Despite relatively high maturation rate of in vitro matured oocytes in the dromedary camel, however, blastocyst production is very low after in vitro fertilization (IVF). Herein, the influences of oocyte collection method (follicular aspiration vs slicing; Experiment I), the addition of Insulin-like growth factor I (IGF-I) to the maturation medium (Experiment II) on in vitro maturation (IVM) of oocyte were investigated. Although the nuclear maturation did not differ regardless of collecting method, follicular aspiration led to lower degeneration rates than those in controls (P < 0.05). The percentages of oocytes at MII were greater in the presence of IGF-1 than in its absence (71.9% vs 48.4%, respectively, P<0.05). Additionally, the percentages of degenerated oocytes were higher in the control group compared to oocytes cultured in the presence of IGF-I (23.6% vs 10.4%, respectively, P<0.05). IGF-I treatment improved the quality of MII matured oocytes as evidenced by the decrease of cathepsin B (CTSB) activity, a marker of poor quality oocytes, when compared to control ones (P < 0.05). In conclusion, follicular aspiration decreased the degeneration rate; however, it had no effect on completion of maturation. IGF-I enhanced the IVM of oocyte and decreased degeneration rate.(AU)

Reproduction cycle of Longtail shad (Tenualosa macrura) in Bengkalis Waters, Riau, Indonesia

Tenualosa macrura is an endangered fish in Riau Province, which is classified as a protected fish. Therefore, the first step is to study the reproductive cycle, aiming o prevent these species from extinction. The observation was carried out for 13 months from January 2019 to February 2020 (except February 2019) in Indonesia's Bengkalis waters. This study's purpose was to determine the spawning season, fecundity, and behavior of this species. The results showed that the relationship between length and weight positively correlates with the length-weight of male T. macrura (R² = 0.84) and female (R² = 0.67), while the length-weight of all males and females were reported to be (R² = 0.95). Meanwhile, the relationship between fecundity and length-weight has no relationship. Furthermore, the spawning season lasted throughout the year, and it occurred at every low tide (dark moon) and high tide (full moon). Despite being discovered occasionally in a limited amount, the greatest amount of T. macrura was reported between July and September each year.(AU)

Reproduction cycle of Longtail shad (Tenualosa macrura) in Bengkalis Waters, Riau, Indonesia

Tenualosa macrura is an endangered fish in Riau Province, which is classified as a protected fish. Therefore, the first step is to study the reproductive cycle, aiming o prevent these species from extinction. The observation was carried out for 13 months from January 2019 to February 2020 (except February 2019) in Indonesia's Bengkalis waters. This study's purpose was to determine the spawning season, fecundity, and behavior of this species. The results showed that the relationship between length and weight positively correlates with the length-weight of male T. macrura (R² = 0.84) and female (R² = 0.67), while the length-weight of all males and females were reported to be (R² = 0.95). Meanwhile, the relationship between fecundity and length-weight has no relationship. Furthermore, the spawning season lasted throughout the year, and it occurred at every low tide (dark moon) and high tide (full moon). Despite being discovered occasionally in a limited amount, the greatest amount of T. macrura was reported between July and September each year.

Avances en el manejo de gametos caninos in vitro / Advance in handling canine gametes in vitro

Las características fisiológicas de los gametos caninos que los hace especiales respecto a los de otras especies han dificultado los estudios tendientes a incrementar los porcentajes de éxito en diversas biotecnologías reproductivas. Entre estas características está el inicio de la meiosis de los ovocitos posterior al nacimiento y la ovulación de un gameto inmaduro como ovocito primario, lo que ha complejizado la maduración in vitro de estos ovocitos y, por parte de los espermatozoides, una gran diferencia en la sobrevivencia de los espermatozoides eyaculados versus los congelados-descongelados, que hace imprescindible evaluar la biología reproductiva de estos gametos tendiente a optimizar nuevos protocolos haciendo énfasis previamente en una adecuada evaluación del crecimiento del ovocito in vivo y de la viabilidad espermática en aquellos sometidos a criopreservación(AU)

The physiological characteristics of canine gametes that make them unique compared to those of other species have hindered studies aimed at increasing the success rates in various reproductive biotechnologies. Among these characteristics is the meiosis of the oocytes after birth and the ovulation of an immature gamete as a primary oocyte, which has made the in vitro maturation of these oocytes more complex and, on the part of the spermatozoa, a significant difference in the viability of ejaculated versus frozen-thawed spermatozoa, which makes it essential to evaluate the reproductive biology of these gametes in order to optimize new protocols, previously emphasizing an adequate evaluation of in vivo oocyte growth and sperm viability in those subjected to cryopreservation.(AU)

Evaluation of fertilization capability of frozen-thawed completely immotile spermatozoa collected from a white bengal tiger after interspecific ICSI with bovine oocytes

The objective of this study was to evaluate the fertilization capability of White Bengal Tiger frozen-thawed completely immotile spermatozoa after interspecific intracytoplasmic sperm injection (ICSI) with bovine oocytes. The fertilization status of presumptive zygotes was assessed 18 h after ICSI by immunofluorescence staining and confocal microscopy. The fertilization rate was 34.8% (8/23), as confirmed by the extrusion of two polar bodies, or male and female pronuclei formation. For unfertilized oocytes (65.2%, 15/23), one activated oocyte had an activated spermatozoon but most were unactivated oocytes with unactivated spermatozoa (1/15, 6.7% vs 10/15, 66.7%, respectively, p < 0.05). These results showed that White Bengal Tiger frozen-thawed completely immotile spermatozoa retained the capacity to fertilize bovine oocytes after interspecific ICSI. This is the first report of in vitro produced zygotes using tiger immotile sperm with bovine oocytes by interspecific ICSI technique, which provides an efficient and feasible method for preservation and utilization of endangered feline animals.(AU)

Dynamics of nuclear and cytoplasm maturation of bovine oocytes cultivated in vitro in medium supplemented with fulerol / Dinâmica da maturação nuclear e citoplasmática de oócitos bovinos cultivados in vitro em meio suplementado com fulerol

The aim of this work was to evaluate, in vitro, the dynamics of nuclear and cytoplasmic maturation of bovine oocytes in traditional IVM medium (CT) and supplemented with fullerol (MF50), for 36 hours. The nuclear maturation of CT (n=300) and MF50 (n=270) every 6 hours, stained with Hoechst33342 and cytoplasmic, the mitochondrial distribution of CT (n=197) and MF50 (n=159) at every 12 hours, stained with Mitotracker Orange. At 6 hours, CT oocytes (19%) were in MI (metaphase I), while in MF50 they were in GV (germ vesicle) or GVB (GV breakeage), repeating at 12 hours. At 18 hours, 46.3% were matured in CT, and 20% in MF50. At 24 hours, 43.9% of maturation was observed in the MF50 group, and 63.8% in the CT. At 30 and 36 hours, the maturation pattern was stable, but with the onset of oocyte degeneration. There was a delay in cytoplasmic maturation with 36 hours (P < 0.05) in MF50 (53.9% of mature gametes), compared to CT (69.8%). With immature cytoplasm, they were 10.4% and 31.7% for CT and MF50 (P< 0.05), respectively. It was concluded that fullerol possibly interfered in the expansion of cumulus oophorus cells, as well as delayed the meiotic progression and cytoplasmic maturation.

O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a dinâmica da maturação nuclear e citoplasmática de oócitos bovinos em meio MIV tradicional (TC) e suplementado com fulerol (MF50), durante 36 horas. Na maturação nuclear do TC (n=300) e do MF50 (n=270) a cada seis horas, corados com Hoechst 33342, e na citoplasmática, avaliou-se a distribuição mitocondrial do TC (n=197) e do MF50 (n=159) a cada 12 horas, corados com Mitotracker Orange (Life® Technologies). Às seis horas, oócitos do TC (19%) se encontravam em MI (metáfase I), enquanto no MF50 estavam em VG (vesícula germinativa) ou QVG (quebra VG), repetindo com 12 horas. Às 18 horas, 46,3% estavam maturados no TC, e 20% no MF50. Com 24 horas, verificaram-se 43,9% de maturação no grupo MF50, e 63,8% no TC. Às 30 e 36 horas, o padrão de maturação foi estável, mas com início de degeneração oócitária. Houve retardo na maturação citoplasmática com 36 horas (P<0,05) no MF50 (53,9% de gametas maduros), comparado ao TC (69,8%). Com citoplasma imaturo, foram 10,4% e 31,7% para TC e MF50 (P<0,05), respectivamente. Conclui-se que o fulerol possivelmente interferiu na expansão das células do cumulus oophorus, bem como retardou a progressão meiótica e a maturação citoplasmática dos oócitos.

Quantification of multi-oocyte follicles in ovaries of bitches / [Quantificação de folículos multiócitos em ovários de cadelas]

The objective of this study was to quantify the number and frequency of monocyte (MnOF) and multi-oocyte (MtOF) follicles in ovaries of bitches subjected to ovary salpingohysterectomy (OSH). Right and left ovaries of 38 bitches were collected after OSH, prepared, and a histological analysis was carried out. The ovaries were subjected to surface and deep histological cuts; the follicles were classified, and the number of follicles and cumulus oophorus complexes (COC) per follicle were quantified for each histological cut. MnOF and MtOF were found in all ovaries, at different developmental stages; primary follicles were grouped in the ovarian cortex, and follicles at other follicular stages presented a random distribution. MtOF containing two, three, four, or more COC were found in the ovaries of bitches, with a decreasing frequency trend, according to the number of COC in the MtOF. The effect of the age, number of estrus, estrus interval, and number of progenies per delivery was not significant for the number and frequency of MtOF in the ovaries of the bitches, whereas the size, number of pregnancies, use and number of contraceptive applications had some effect on the number and frequency of MtOF in the ovaries of the bitches.(AU)

Objetivou-se, com este estudo, quantificar o número e a frequência de folículos monocitários (MOF) e polioocitários (POF) provenientes de ovários de cadelas submetidas à ovariossalpingo-histerectomia (OSH). Para tanto, coletaram-se os ovários (direito e esquerdo) de 38 cadelas após OSH, com posterior preparação e análise histológica. Cada ovário foi submetido a dois cortes histológicos (superficial e profundo) onde se quantificou o número e a classificação dos folículos, bem como o número de complexos cumulus oophorus (COCs) por folículo em cada corte histológico. Observaram-se MOF e POF em todos os ovários estudados, em diferentes estádios de desenvolvimento, sendo os folículos primários agrupados no córtex ovariano, frente a uma distribuição aleatória dos outros estádios foliculares. FOPs contendo dois, três, quatro ou mais COCs foram observados nos ovários de todas as fêmeas estudadas, e sua frequência tendeu a diminuir de acordo com o número de COC presente no POF. Não se observou influência da idade, do número e do intervalo de estros, assim como do número de filhotes por gestação sobre o número/frequência de FOP nos ovários das cadelas estudadas, enquanto o porte, o número de gestações, o uso e o número de contraceptivo apresentaram algum grau de influência sobre o número/frequência de FOP nos ovários das cadelas estudadas.(AU)

Taxas de maturação de oócitos congelados lentamente de caprinos / Slowly frozen caprine oocyte maturation rate

The objective was to evaluate the maturation rates of goat oocytes submitted to slow freezing in conventional medium for IVM. For this purpose, cumulus-oocyte complexes aspirated from pubic goat ovaries were classified morphologically and slowly frozen with 1.5 M ethylene glycol. After thawing the cryopreserved oocytes, those classified as viable were matured in conventional in vitro maturation medium. Evaluating the maturation rate, the percentage of matured oocytes in the group that underwent the cryopreservation process is significantly lower (17.6%) when compared to the control group (69.2%), also showing a high percentage of immature oocytes. Several oocyte injuries were found, caused by the studied cryopreservation method, interfering with their oocyte competence. Even with nuclear maturation rates, observed through the extrusion of the first polar corpuscle, the morphologies were altered in most oocytes, and further studies using new techniques and / or other cryoprotectants are necessary.

Influence of long-term thermal stress on the in vitro maturation on embryo development and Heat Shock Protein abundance in zebu cattle

The objective of this study was to investigate the influence of long-term temperature stress during the in vitro maturation (IVM) of oocytes on the in vitro embryo production (IVP) and the abundance of HSP70 and HSP90 in zebu cattle. Viable cumulus-oocyte complexes (COCs) were incubated for 24 h at 37 °C, 38.5 °C, or 40 °C for the low-, physiological, and high-temperature stress treatments, respectively. Thereafter, they were subjected to in vitro fertilization and culture. Temperature did not affect the polar body extrusion. However, IVP was adversely affected when IVM took place at 37 °C and 40 °C. The highest abundance of HSP70 was observed in cumulus cells after maturation of COCs at 40 °C. In contrast, HSP70 was more abundant in oocytes at both 37 °C and 40 °C; however, at 40 °C, the difference to the control group (38.5 °C) was not significant. In contrast, the highest abundance of HSP90 was observed in oocytes and cumulus cells at 37 °C. It appears that HSP70 and HSP90 respond to cold and heat stress in different ways. In conclusion, moderately high (40 °C) and low (37 °C) thermal stress for 24 h during IVM is detrimental to the developmental competence of oocyte and is accompanied by changes in the abundances of HSP70 and HSP90, especially in cumulus cells.

Influence of long-term thermal stress on the in vitro maturation on embryo development and Heat Shock Protein abundance in zebu cattle

The objective of this study was to investigate the influence of long-term temperature stress during the in vitro maturation (IVM) of oocytes on the in vitro embryo production (IVP) and the abundance of HSP70 and HSP90 in zebu cattle. Viable cumulus-oocyte complexes (COCs) were incubated for 24 h at 37 °C, 38.5 °C, or 40 °C for the low-, physiological, and high-temperature stress treatments, respectively. Thereafter, they were subjected to in vitro fertilization and culture. Temperature did not affect the polar body extrusion. However, IVP was adversely affected when IVM took place at 37 °C and 40 °C. The highest abundance of HSP70 was observed in cumulus cells after maturation of COCs at 40 °C. In contrast, HSP70 was more abundant in oocytes at both 37 °C and 40 °C; however, at 40 °C, the difference to the control group (38.5 °C) was not significant. In contrast, the highest abundance of HSP90 was observed in oocytes and cumulus cells at 37 °C. It appears that HSP70 and HSP90 respond to cold and heat stress in different ways. In conclusion, moderately high (40 °C) and low (37 °C) thermal stress for 24 h during IVM is detrimental to the developmental competence of oocyte and is accompanied by changes in the abundances of HSP70 and HSP90, especially in cumulus cells.(AU)

Taxas de maturação de oócitos congelados lentamente de caprinos / Slowly frozen caprine oocyte maturation rate

The objective was to evaluate the maturation rates of goat oocytes submitted to slow freezing in conventional medium for IVM. For this purpose, cumulus-oocyte complexes aspirated from pubic goat ovaries were classified morphologically and slowly frozen with 1.5 M ethylene glycol. After thawing the cryopreserved oocytes, those classified as viable were matured in conventional in vitro maturation medium. Evaluating the maturation rate, the percentage of matured oocytes in the group that underwent the cryopreservation process is significantly lower (17.6%) when compared to the control group (69.2%), also showing a high percentage of immature oocytes. Several oocyte injuries were found, caused by the studied cryopreservation method, interfering with their oocyte competence. Even with nuclear maturation rates, observed through the extrusion of the first polar corpuscle, the morphologies were altered in most oocytes, and further studies using new techniques and / or other cryoprotectants are necessary.(AU)

In vitro performance of Zebu (Bos indicus) and Taurus (Bos taurus) donor cow embryos / Desempenho de vacas doadoras zebuínas (Bos indicus) e taurinas (Bos taurus) na produção de embrião in vitro

In this study, the in vitro production of bovine embryos from zebu and taurine donors was compared. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from 167 Bos taurus and 161 Bos indicus donors by ovum pick-up. COCs were classified based on their morphological quality, matured in incubators for 22 to 24 h in maturation medium, and then fertilized for 18 to 22 h. The zygotes were transferred to the culture medium for seven days. The embryos were classified as morula (OM), initial blastocyst (BI), blastocyst (BL), and expanded blastocyst (BX), before being transferred to synchronized recipient cows. Pregnancy was diagnosed 30-45 days post-transfer. The Bos indicus donors had a higher oocyte yield (n = 2556) than Bos taurus donors (n = 1903) (P = 0.008). The COCs from zebu donors had a better morphological quality than those from taurine donors (n = 689 vs. 444 for grade 1 COC, P < 0.0001; n = 681 vs. 509 for grade 2 COC, P = 0.010, for zebu and taurine donors, respectively). There were differences in embryo production percentages obtained from OM (0.44% from zebu and 6.42% from taurine, P = 0.017), BL (14.18% from zebu and 3.74% from taurine, P < 0.0001), and BX (81.43% from zebu and 75.13% from taurine, P < 0.0001). No significant difference was observed for embryo production from BI and pregnancy rate (P > 0.05). The Bos indicus cows showed greater oocyte recovery, number of viable oocytes, and production of viable embryos than the Bos taurus cows.(AU)

O objetivo foi avaliar a produção in vitro de embriões bovinos a partir de doadoras zebuína e taurina. Os complexos cumulus oócitos (COCs) foram obtidos de 167 doadoras Bos taurus e 161 Bos indicus, por meio de Ovum pick-up. Os COCs foram classificados quanto à qualidade morfológica, maturados em incubadora por 22 a 24h em meio de maturação, e encaminhados à fertilização entre 18 e 22h. Os zigotos foram transferidos para meio de cultivo, onde permaneceram durante sete dias. Os embriões foram classificados em mórula (MO), blastocisto inicial (BI), blastocisto (BL) e blastocisto expandido (BX), envasados em palhetas contendo meio de cultivo, e inovulados em receptoras sincronizadas. Após 30 e 45 dias da inovulação, realizou-se o diagnóstico de gestação. Os animais Bos indicus apresentaram maior produção oocitária (n = 2556) em comparação aos Bos taurus (n = 1903) (P = 0,008). Os COCs das doadoras zebu apresentaram melhor qualidade morfológica do que das doadoras taurina (n = 689 vs. 444 para COCs grau I, P < 0,0001; n = 681 vs. 509 para COCs grau II, P = 0,010, para doadoras zebu e taurina, respectivamente). Quanto à produção de embriões, houve diferença nas porcentagens obtidas de MO (0,44% zebuínas e 6,42% taurinas, P = 0,017), BL (14,18% zebuínas e 3,74% taurinas, P < 0,0001) e BX (81,43% zebuínas e 75,13% taurinas, P < 0,0001). Não foi observado diferença para BI e taxa de prenhez (P > 0,05). Os animais Bos indicus apresentaram maior recuperação oocitária e maior número de oócitos viáveis em comparação às vacas Bos taurus, como também, maior produção de embriões viáveis.(AU)

In vitro performance of Zebu (Bos indicus) and Taurus (Bos taurus) donor cow embryos / Desempenho de vacas doadoras zebuínas (Bos indicus) e taurinas (Bos taurus) na produção de embrião in vitro

In this study, the in vitro production of bovine embryos from zebu and taurine donors was compared. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were obtained from 167 Bos taurus and 161 Bos indicus donors by ovum pick-up. COCs were classified based on their morphological quality, matured in incubators for 22 to 24 h in maturation medium, and then fertilized for 18 to 22 h. The zygotes were transferred to the culture medium for seven days. The embryos were classified as morula (OM), initial blastocyst (BI), blastocyst (BL), and expanded blastocyst (BX), before being transferred to synchronized recipient cows. Pregnancy was diagnosed 30-45 days post-transfer. The Bos indicus donors had a higher oocyte yield (n = 2556) than Bos taurus donors (n = 1903) (P = 0.008). The COCs from zebu donors had a better morphological quality than those from taurine donors (n = 689 vs. 444 for grade 1 COC, P 0.05). The Bos indicus cows showed greater oocyte recovery, number of viable oocytes, and production of viable embryos than the Bos taurus cows.

O objetivo foi avaliar a produção in vitro de embriões bovinos a partir de doadoras zebuína e taurina. Os complexos cumulus oócitos (COC’s) foram obtidos de 167 doadoras Bos taurus e 161 Bos indicus, por meio de Ovum pick-up. Os COC’s foram classificados quanto à qualidade morfológica, maturados em incubadora por 22 a 24h em meio de maturação, e encaminhados à fertilização entre 18 e 22h. Os zigotos foram transferidos para meio de cultivo, onde permaneceram durante sete dias. Os embriões foram classificados em mórula (MO), blastocisto inicial (BI), blastocisto (BL) e blastocisto expandido (BX), envasados em palhetas contendo meio de cultivo, e inovulados em receptoras sincronizadas. Após 30 e 45 dias da inovulação, realizou-se o diagnóstico de gestação. Os animais Bos indicus apresentaram maior produção oocitária (n = 2556) em comparação aos Bos taurus (n = 1903) (P = 0,008). Os COCs das doadoras zebu apresentaram melhor qualidade morfológica do que das doadoras taurina (n = 689 vs. 444 para COCs grau I, P 0,05). Os animais Bos indicus apresentaram maior recuperação oocitária e maior número de oócitos viáveis em comparação às vacas Bos taurus, como também, maior produção de embriões viáveis.

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.

In vitro embryo production in Nelore cows supplemented with calcium salts of long-chain fatty acid / Produção de embriões in vitro em vacas Nelore suplementadas com sais de cálcio e ácidos graxos de cadeia longa

This study was performed to evaluate the effects of supplementation of lactating Nelore cows with calcium salts of long-chain fatty acids (Ca-LCFA) of soybean oil on in vitro oocytes competency, cleavage rate, embryo production rate, pregnancy rate, and sex ratio of transferred embryos. Fifteen multiparous Nelore cows grazed on a Tifton 85 pasture were allotted to two treatments: (1) supplement without fat inclusion (CONT, n = 6) and (2) supplement containing 47.2 g Ca-LCFA /kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) based on dry matter (n = 9). Animals were subjected to 2.53 ± 1.35 rounds of consecutive ovum pick up at intervals of 27.65 ± 21.72 days. Oocytes were morphologically evaluated, selected, maturated, fertilized, and cultivated for embryo production in vitro and then transferred into recipients who had previously undergone an embryo transfer protocol at a fixed time. The number of aspirated oocytes, the proportion of viable oocytes, cleavage rate, embryo percentage, pregnancy rate, and sex ratio were not affected when Nelore cows were supplemented with Ca-LCFA of soybean oil compared with non-supplemented Nelore cows. In conclusion, our results suggest that feeding a supplement containing 47.2 g Ca-LCFA/kg (to provide an intake of 0.2 kg Ca-LCFA/day) to Nelore cows does not affect in vitro embryo production in lactating Nelore cows. However, further studies...(AU)

Este estudo foi realizado para avaliar os efeitos da suplementação de vacas Nelores em lactação com sais de cálcio de ácidos graxos de cadeia longa (Ca-SCACL) feitos com óleo de soja sobre a competência in vitro de oócitos, taxa de clivagem, taxa de produção de embriões, taxa de prenhez e proporção de sexo de embriões transferidos. Foram utilizadas 15 vacas Nelore (lactantes, multíparas e mantidas em pastagem de Tifton 85) distribuídas em dois tratamentos: (1) suplemento sem inclusão de lipídios (CONT, n = 6) e (2) suplemento contendo 47,2 g Ca-SCACL/kg (para proporcionar uma ingestão de 0,2 kg Ca-SCACL/ dia) com base na matéria seca (n = 9). Os animais foram submetidos a 2,53 ± 1,35 rodadas consecutivas de aspiração folicular a intervalos de 27,65 ± 21,72 dias. Os oócitos foram avaliados morfologicamente, selecionados, maturados, fertilizados e cultivados para produção de embriões in vitro. Em seguida, os embriões foram transferidos para receptoras previamente submetidas a um protocolo de transferência de embriões em tempo fixo. O número de oócitos aspirados, a proporção de oócitos viáveis, a taxa de clivagem, a porcentagem de embriões, a taxa de prenhez e a proporção de sexo de embriões não foram afetados quando as vacas Nelore foram suplementadas com Ca-SCACL de óleo de soja em comparação com as vacas Nelore não suplementadas. Em conclusão, nossos resultados sugerem que suplemento contendo 47,2 g de Ca-SCACL/kg (para fornecer uma ingestão de 0,2 kg de Ca-SCACL) não afeta a produção in vitro de embriões de vacas Nelore em lactação. No entanto, novos estudos utilizando doses mais altas de gordura na dieta poderiam ser úteis para determinar o seu potencial sobre produção embrionária in vitro.(AU)

Criopreservação de tecido ovariano e/ou folículos pré-antrais: uma alternativa para salvaguardar o material genético e a fertilidade de ovelhas e cabras valiosas / Cryopreservation of ovarian tissue and/or preantral follicles: an alternative to safeguard the genetic material and fertility of valuable sheep and goats

A redução da biodiversidade tem levado a uma preocupação emergencial frente a conservação do material biológico de animais geneticamente valiosos. Para tanto, a implantação de bancos de germoplasma, como embriões, gametas e tecido gonadal e somáticos, tem sido uma alternativa para auxiliar na manutenção da biodiversidade. No tocante ao material genético de fêmeas, a criopreservação de folículos pré-antrais isolados ou inclusos no tecido ovariano associada ao uso de tecnologias de reprodução assistida, como cultivo, fertilização in vitro e produção de embriões in vitro, poderá auxiliar na conservação da fertilidade de animais domésticos de interesse econômico com dificuldades reprodutivas ou animais ameaçados de extinção. Além disso, a criopreservação de tecido ovariano seguida de transplante pode ser uma alternativa promissora, uma vez que permite a restauração da função ovariana e reprodutiva. Estudos realizados em humanos relataram o nascimento de 130 indivíduos após o transplante de tecido ovariano previamente criopreservado. Apesar desse sucesso, a criopreservação de ovário ainda é considerada uma técnica experimental. Especialmente em caprinos e ovinos, a grande maioria dos estudos tem usado essas espécies como modelo experimental para a espécie humana. Nessas espécies, o sucesso da criopreservação de folículos ovarianos já foi evidenciado, o que nos dá esperança para o uso dessa tecnologia, vislumbrando, não somente a conservação do material genético, mas a obtenção de embriões e nascimento de crias mesmo após a morte de um animal geneticamente valioso. Assim, todos os esforços atuais estão voltados para a avaliação adequada da qualidade de protocolos de criopreservação que assegurem que esses recursos genéticos permaneçam como parte funcional dos sistemas de produção e conservação das espécies.(AU)

Reducing biodiversity has led to an emergency concern over the conservation of biological material from genetically valuable animals. Therefore, the establishment of gene banks, such as embryos, gametes and somatic and ovarian tissue has been an alternative to assist in maintaining biodiversity. Concerning the genetic material of females, the cryopreservation of preantral follicles isolated or included in the ovarian tissue associated with the use of assisted reproduction technologies, such as culture, in vitro fertilization and in vitro embryo production, may help to preserve the fertility of domestic animals of economic interest with reproductive difficulties or animals threatened with extinction. In addition, cryopreservation of ovarian tissue followed by transplantation may be a promising alternative, since it allows the restoration of ovarian and reproductive function. Studies in humans have reported the birth of 130 individuals after previously cryopreserved ovarian tissue transplantation. Despite this success, ovary cryopreservation is still considered an experimental technique. Especially in goats and sheep, the vast majority of studies have used these species as an experimental model for the human species. In these species, the success of cryopreservation of ovarian follicles has already been shown, which gives us hope for the use of this technology, noting not only the conservation of the genetic material, but the obtaining of embryos and the birth of youngsters even after the death of a genetically valuable animal. Thus, all current efforts are focused on the proper evaluation of the quality of cryopreservation protocols that ensure that these genetic resources remain as a functional part of the systems of production and conservation of the species.(AU)

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.(AU)

Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.(AU)

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.

Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.

Ovarian development and spawning of Macrobrachium amazonicum (Crustacea, Decapoda)

ABSTRACT Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) is the most important species for aquaculture native to South America. This study evaluates the phenotypic plasticity of females of Macrobrachium amazonicum with respect to the gonadal development, and determines the spawning type. Our study consisted of macro and microscopic analysis of the reproductive tract. Ovaries exhibited the following reproductive cells in developmental sequence: oogonia (OO) - mean diameter and standard deviation of 25.4 ± 6.5 m; previtellogenic oocyte (PVO) - 61.7 ± 10.7 m, vitellogenic oocyte (VO) - 113.9 ± 24.5 m; and mature oocyte (MO) - 308.7 ± 56.3 m. Ovaries increased in volume due to vitellogenesis and changing of basophilic to acidophilic composition. Follicular cells, atresic oocytes and postovulatory follicles were also analyzed. By combining macro and microscopic analysis, the ovaries of M. amazonicum were classified into six stages: Immature, In maturation, Mature, Spawned in maturation, Spawned and Resting. The ovarian development of M. amazonicum followed a standard pattern even among different populations. Considering our results and the evidence in literature, we conclude that spawning for this species is parceled or multiple, that is, synchronous in more than two groups (clutches of oocytes). Such observations provide basis for further studies addressing sustainable management strategies for species conservation and contribute to elucidate the biology of their specimens.

RESUMO Das espécies nativas de camarões da América do Sul, Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) é a mais importante para fins de aquicultura, possuindo elevado valor comercial. Devido à sua importância, este estudo objetivou avaliar a plasticidade fenotípica de fêmeas da espécie em relação ao desenvolvimento gonadal, e determinar o tipo de desova. Para tal, foi realizada análise macro e microscópica do aparelho reprodutor. Observaram-se ovários apresentando as seguintes células reprodutivas em sequência de desenvolvimento: oogônias (OO) com diâmetro médio e desvio padrão de 25,4 ± 6,5 µm, oócito pré-vitelogênico (OPV) com 61,7 ± 10,7 µm, oócito vitelogênico (OV) com 113,9 ± 24,5 µm, e oócito maturo (OM) com 308,7 ± 56,3 µm, havendo um aumento do volume devido ao processo de vitelogênese e uma alteração de composição basófila para acidófila. Além destas células, observaram-se células foliculares, oócitos atrésicos e folículos pós-ovulatórios. Unindo análise macro e microscópica, os ovários de M. amazonicum puderam ser classificados em seis estágios: Imaturo, Em maturação, Maturo, Desovado em maturação, Desovado e Repouso. Verificou-se que o desenvolvimento ovariano de M. amazonicum segue um padrão para as diferentes populações. Diante dos resultados encontrados e evidências na literatura, constata-se que a desova para esta espécie é do tipo parcelada ou múltipla, ou seja, sincrônica em mais de dois grupos (lotes de oócitos). Estas observações oferecem uma base para estudos que contribuirão para a criação de medidas de manejo sustentáveis para a manutenção da espécie na natureza, bem como contribuem para elucidar a biologia de seus indivíduos.