Tomato fruit blotch virus cytopathology strengthens evolutionary links between plant blunerviruses and insect negeviruses

Tomato fruit blotch virus (ToFBV) is a blunervirus that causes blotches on mature tomato (Solanum lycopersicon L.) fruits in Italy and Australia in 2020, and was newly detected in Brazil. A cytological study on pericarp tissues from the blotched areas of infected fruits collected in Brasília, Brazil, revealed characteristic cell alterations. Small and slender bacilliform particles (ca. 25 nm wide × 100 nm long) were found accumulating in the perinuclear space and the lumen of the endoplasmic reticulum of the epidermis, peri- and mesocarp cells. No viroplasm-like inclusion was observed either in the nuclei or in the cytoplasm. Such cell alterations are reminiscent of those described in cultured mosquito cells infected by negeviruses, an unofficial group of insect viruses. Negeviruses and some other arthropod-borne viruses shared a common ancestor in the RdRp gene with kitavirids, including blunerviruses. Although additional detailed studies are required, we show evidence that ToFBV particles are enveloped and bacilliform, and that such similarity in cytopathology seems to support the evolutionary relationship between plant kitavirids and insect negeviruses.(AU)

Impact of filament denier on functional performance of microfiber in situ bags

In situbags made from microfiber fabrics have a greater surface area and filtration efficiency that retains the fine particles and reduce the variation in the results. Also, it is more durable than that made from traditional fabrics. This work aimed to study the effect of filament denier on the performance of in situbags. Two polyester microfilaments with 0.4 and 0.7 deniers were used in manufacturing of four fabrics. Physical and mechanical properties of manufactured fabrics were measured before and after incubation to show the efficiency ofthe manufactured samples. In vitro trail was conducted to estimate ruminal degradability after 24 and 48 hours for three feedstuffs using three cannulated rams as replicates. The mechanical properties of manufactured in situbags were significantly affected with both denier per filament and weft densities. According to the statistical analysis of radar chart, sample 2 remarked the highest value which achieved the acceptable ruminal dry matter disappearance compared with Ankom bags in different incubation times.(AU)

Impact of filament denier on functional performance of microfiber in situ bags

In situbags made from microfiber fabrics have a greater surface area and filtration efficiency that retains the fine particles and reduce the variation in the results. Also, it is more durable than that made from traditional fabrics. This work aimed to study the effect of filament denier on the performance of in situbags. Two polyester microfilaments with 0.4 and 0.7 deniers were used in manufacturing of four fabrics. Physical and mechanical properties of manufactured fabrics were measured before and after incubation to show the efficiency ofthe manufactured samples. In vitro trail was conducted to estimate ruminal degradability after 24 and 48 hours for three feedstuffs using three cannulated rams as replicates. The mechanical properties of manufactured in situbags were significantly affected with both denier per filament and weft densities. According to the statistical analysis of radar chart, sample 2 remarked the highest value which achieved the acceptable ruminal dry matter disappearance compared with Ankom bags in different incubation times.

Desenvolvimento de um método para análise de partículas de precipitação seca em ambiente atmosférico / Development of a method for analysis of dry precipitation particles in the atmospheric environment

This work is related to air pollution and particulate matter in air suspension. One environment was selected for the study: a residential building located in the south of São Paulo near the airport of Congonhas, selected for its proximity to major avenues and especially the airport, which directly influences the concentration and dispersion of particulate materials. Our objective was to develop a methodology for the analysis of particulate matter in dry precipitation, being this economically feasible for academic studies, from this our methodology is based on particle counting, determining the geometry and size of the same. The determination of the particles in precipitation was obtained by sampling every two floors of the residential building for laboratory studies with the use of appropriate software (imagej and ZEN) for the study. The physical characterization involved the determination of the geometry and the size of the particles. The techniques used for particle counting are based on the use of the optical microscope and the software to facilitate counting.(AU)

Este trabalho está relacionado a poluição atmosférica e principalmente o material particulado em suspensão no ar. Um ambiente foi selecionado para o estudo: prédio residencial localizado na zona sul de São Paulo próximo ao aeroporto de Congonhas, selecionado pela sua proximidade a grandes avenidas e principalmente o aeroporto, que influencia diretamente a concentração e a dispersão dos materiais particulados.   Nosso objetivo foi desenvolver uma metodologia para análise do material particulado em precipitação seca, sendo esta economicamente viável para estudos acadêmicos, a partir disso nossa metodologia baseia-se na contagem de partículas, determinando a geometria e o tamanho das mesmas. A determinação das partículas em precipitação foi obtida através de amostragem feita por cada dois andares do prédio residencial para estudos em laboratório com o uso de softwares apropriados (imageJ e ZEN) para o estudo. A caracterização física envolveu a determinação da geometria e o tamanho das partículas. As técnicas utilizadas para a contagem das partículas baseiam-se na utilização do microscópio óptico e do software para facilitar a contagem.(AU)

Desenvolvimento de um método para análise de partículas de precipitação seca em ambiente atmosférico / Development of a method for analysis of dry precipitation particles in the atmospheric environment

This work is related to air pollution and particulate matter in air suspension. One environment was selected for the study: a residential building located in the south of São Paulo near the airport of Congonhas, selected for its proximity to major avenues and especially the airport, which directly influences the concentration and dispersion of particulate materials. Our objective was to develop a methodology for the analysis of particulate matter in dry precipitation, being this economically feasible for academic studies, from this our methodology is based on particle counting, determining the geometry and size of the same. The determination of the particles in precipitation was obtained by sampling every two floors of the residential building for laboratory studies with the use of appropriate software (imagej and ZEN) for the study. The physical characterization involved the determination of the geometry and the size of the particles. The techniques used for particle counting are based on the use of the optical microscope and the software to facilitate counting.

Este trabalho está relacionado a poluição atmosférica e principalmente o material particulado em suspensão no ar. Um ambiente foi selecionado para o estudo: prédio residencial localizado na zona sul de São Paulo próximo ao aeroporto de Congonhas, selecionado pela sua proximidade a grandes avenidas e principalmente o aeroporto, que influencia diretamente a concentração e a dispersão dos materiais particulados.   Nosso objetivo foi desenvolver uma metodologia para análise do material particulado em precipitação seca, sendo esta economicamente viável para estudos acadêmicos, a partir disso nossa metodologia baseia-se na contagem de partículas, determinando a geometria e o tamanho das mesmas. A determinação das partículas em precipitação foi obtida através de amostragem feita por cada dois andares do prédio residencial para estudos em laboratório com o uso de softwares apropriados (imageJ e ZEN) para o estudo. A caracterização física envolveu a determinação da geometria e o tamanho das partículas. As técnicas utilizadas para a contagem das partículas baseiam-se na utilização do microscópio óptico e do software para facilitar a contagem.

Behaviors of beef cattle fed crude glycerol as a replacement for sorghum grain

The study of the animal behavior is a useful tool to comprehend the performance of beef animals finished in feedlots. Twenty-eight non-castrated Nellore males with initial body weight of 441 kg and 21.5 months of age were randomly assigned to receive a diet containing either sorghum grain orcrude glycerol as energy sources, and housed in individual (twelve animals) or collective pens (16 animals in four pens) at the School-Farm of IF Goiano (Iporá Campus). The experiment lasted 98 days (14 for adaptation and 84 for data collection). Feeding behaviors (eating, rumination, and resting) were determined every 14 days for one-hour intervals in four times post-feeding (0, 1, 5, and 9 hours). Feed sorting was evaluated every 14 days in three times post-feeding (4, 10, and 24 hours). Time spent eating was reduced (P<0.05) by crude glycerol in comparison with the sorghum grain diet (18.19 vs. 12.29 minutes/hour, sorghum vs. glycerol, respectively), while animals fed crude glycerol increased (P<0.05) the time spent resting compared with sorghum grain-fed animals (26.23 vs. 32.85 minutes/hour, sorghum vs. glycerol, respectively). Substituting sorghum grain with crude glycerol increased (P<0.05) the preference for long (44.77 vs. 106.66%, sorghum vs. glycerol, respectively), medium (64.95 vs. 105.78%, sorghum vs. glycerol, respectively), and short (88.57 vs. 101.29%, sorghum vs. glycerol, respectively) particles, whereas sorghum grain increased (P<0.05) the preference for fine particles of the diet (112.36 vs. 100.03%, sorghum vs. glycerol, respectively). Crude glycerol can be recommended as a replacement for sorghum grain in rations fed to beef cattle.(AU)

Behaviors of beef cattle fed crude glycerol as a replacement for sorghum grain

The study of the animal behavior is a useful tool to comprehend the performance of beef animals finished in feedlots. Twenty-eight non-castrated Nellore males with initial body weight of 441 kg and 21.5 months of age were randomly assigned to receive a diet containing either sorghum grain orcrude glycerol as energy sources, and housed in individual (twelve animals) or collective pens (16 animals in four pens) at the School-Farm of IF Goiano (Iporá Campus). The experiment lasted 98 days (14 for adaptation and 84 for data collection). Feeding behaviors (eating, rumination, and resting) were determined every 14 days for one-hour intervals in four times post-feeding (0, 1, 5, and 9 hours). Feed sorting was evaluated every 14 days in three times post-feeding (4, 10, and 24 hours). Time spent eating was reduced (P<0.05) by crude glycerol in comparison with the sorghum grain diet (18.19 vs. 12.29 minutes/hour, sorghum vs. glycerol, respectively), while animals fed crude glycerol increased (P<0.05) the time spent resting compared with sorghum grain-fed animals (26.23 vs. 32.85 minutes/hour, sorghum vs. glycerol, respectively). Substituting sorghum grain with crude glycerol increased (P<0.05) the preference for long (44.77 vs. 106.66%, sorghum vs. glycerol, respectively), medium (64.95 vs. 105.78%, sorghum vs. glycerol, respectively), and short (88.57 vs. 101.29%, sorghum vs. glycerol, respectively) particles, whereas sorghum grain increased (P<0.05) the preference for fine particles of the diet (112.36 vs. 100.03%, sorghum vs. glycerol, respectively). Crude glycerol can be recommended as a replacement for sorghum grain in rations fed to beef cattle.

Composition of bacterial community in enrichment cultures of shale by-products from Irati Formation, Brazil

We examined microbial communities from enriched fine and retorted shale particles using sequencing of V4 variable region of 16S rRNA. High number of microbial genera was found in both enriched shale by-products that were dominate by Actinobacteria, Firmicutes and Proteobacteria, showing differences due to microbial colonization after the pyrolysis process.(AU)

Technological properties of cement-wood panels produced with eucalypt particles / Propriedades tecnológicas de painéis cimento-madeira produzidos com partículas de eucalipto

The study aimed to determine the technological properties of cement-wood panels produced with the particle Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. The experiment plan consisted of four compositions with different treatments of the particles (cold water, hot water, sodium hidroxyde (NaOH) and calcium hidroxyde (Ca(OH)2), and a control composition. The panels were produced with nominal specific gravity of 1.20 g cm-³, with the ratios wood:concrete 1:2.75 and water:cement 0.40. The panels were evaluated for their physical and mechanical properties through the European standard EN. Analyses were performed to verify the occurrence of outliers, data normality and homogeneity of variances, and subsequently submitted to analysis of variance and Tukey test. The results of physical and mechanical properties of the panels indicated that the best method of treating particles is through the use of Ca(OH)2. With the exception of the modulus of rupture, the thickness swelling, modulus of elasticity and tensile perpendicular, they met the specifications of commercial panels produced by the BISON process. Therefore, the feasibility of use of Eucalyptus benthamii for wood-cement panels production was discovered.

O estudo teve como objetivo determinar as propriedades tecnológicas de painéis cimento-madeira produzidos com partículas de Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. O plano experimental foi formado por quatro composições com diferentes tratamentos das partículas (água fria, água quente, hidróxido de sódio (NaOH) e hidróxido de cálcio (Ca(OH)2), e uma composição testemunha. Os painéis foram produzidos com massa específica nominal de 1,20 g/cm³, com relação madeira:cimento de 1:2,75 e água:cimento de 0,40. Os painéis foram avaliados quanto as suas propriedades físicas e mecânicas por meio da norma europeia EN. Foram realizadas análises para verificar a ocorrência de outliers, normalidade dos dados e homogeneidade das variâncias, sendo posteriormente submetidas à análise da variância e teste de Tukey. Os resultados das propriedades físicas e mecânicas dos painéis indicaram que o melhor método de tratamento de partículas foi com o uso de Ca(OH)2. Com exceção do módulo de ruptura, o inchamento em espessura, módulo de elasticidade e tração perpendicular, atenderam às especificações de painéis comerciais produzidos pelo processo BISON. Dessa forma, verificou-se a viabilidade de uso da madeira de Eucalyptus benthamii para produção de painéis cimento-madeira.

Technological properties of cement-wood panels produced with eucalypt particles / Propriedades tecnológicas de painéis cimento-madeira produzidos com partículas de eucalipto

The study aimed to determine the technological properties of cement-wood panels produced with the particle Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. The experiment plan consisted of four compositions with different treatments of the particles (cold water, hot water, sodium hidroxyde (NaOH) and calcium hidroxyde (Ca(OH)2), and a control composition. The panels were produced with nominal specific gravity of 1.20 g cm-³, with the ratios wood:concrete 1:2.75 and water:cement 0.40. The panels were evaluated for their physical and mechanical properties through the European standard EN. Analyses were performed to verify the occurrence of outliers, data normality and homogeneity of variances, and subsequently submitted to analysis of variance and Tukey test. The results of physical and mechanical properties of the panels indicated that the best method of treating particles is through the use of Ca(OH)2. With the exception of the modulus of rupture, the thickness swelling, modulus of elasticity and tensile perpendicular, they met the specifications of commercial panels produced by the BISON process. Therefore, the feasibility of use of Eucalyptus benthamii for wood-cement panels production was discovered.(AU)

O estudo teve como objetivo determinar as propriedades tecnológicas de painéis cimento-madeira produzidos com partículas de Eucalyptus benthamii Maiden et Cambage. O plano experimental foi formado por quatro composições com diferentes tratamentos das partículas (água fria, água quente, hidróxido de sódio (NaOH) e hidróxido de cálcio (Ca(OH)2), e uma composição testemunha. Os painéis foram produzidos com massa específica nominal de 1,20 g/cm³, com relação madeira:cimento de 1:2,75 e água:cimento de 0,40. Os painéis foram avaliados quanto as suas propriedades físicas e mecânicas por meio da norma europeia EN. Foram realizadas análises para verificar a ocorrência de outliers, normalidade dos dados e homogeneidade das variâncias, sendo posteriormente submetidas à análise da variância e teste de Tukey. Os resultados das propriedades físicas e mecânicas dos painéis indicaram que o melhor método de tratamento de partículas foi com o uso de Ca(OH)2. Com exceção do módulo de ruptura, o inchamento em espessura, módulo de elasticidade e tração perpendicular, atenderam às especificações de painéis comerciais produzidos pelo processo BISON. Dessa forma, verificou-se a viabilidade de uso da madeira de Eucalyptus benthamii para produção de painéis cimento-madeira.(AU)

Occurrence of magnetic particles in sugar produced and sold in Sao Paulo State/ Brazil / Ocorrência de partículas magnéticas em açúcar produzido e comercializado no Estado de São Paulo/Brasil

This study reports the results of microscopic analysis for detecting and identifying magnetic particles in granulated sugar produced and commercialized in the regions of Ribeirão Preto, Bauru and Campinas of São Paulo State. The National Health Surveillance Agency through the REALI (Alert and Communication of Risks in Foods Network) nº17/2011 requested for the Sanitary Surveillance Groups action for supervising and collecting samples from sugar factories after consumers complaints. Sixty samples collected between 2011 e 2012 were analyzed at the Centers for Regional Laboratories of these three regions. The methodologies of scattering sample (Zamboni, 1986) and of dissolution of sample (AOAC, 2005) were employed for detecting the magnetic particles, and the results were evaluated according to legislations in force. Of 41 samples collected in 2011, 41.5 % contained magnetic particles up to 4.5 mm of length, and of 19 samples analyzed in 2012, 21.1 % contained particles up to 2.0 mm, which indicate fails in good practical of manufacture and potentials health risks, which require corrective measures in production. It is crucial to institute a legislation to set benchmarks and limits for the presence of these particles, and the greater integration among industry, scientific community and regulatory agencies to ensure safe food production.(AU)

Este trabalho apresenta os resultados do monitoramento realizado por meio das análises microscópicas para pesquisa e identificação de partículas magnéticas presentes em açúcar cristal produzido e comercializado nas regiões de Ribeirão Preto, Bauru e Campinas/SP. A Agência Nacional de Vigilância Sanitária por meio da REALI (Rede de Alerta e Comunicação de Riscos em Alimentos) nº 17/2011 solicitou aos Grupos de Vigilância Sanitária a fiscalização e coleta de amostras nas usinas de açúcar após denúncias de consumidores. Sessenta amostras coletadas entre 2011 e 2012 foram analisadas nos Centros de Laboratórios Regionais dessas três regiões, utilizando-se as metodologias de espalhamento da amostra para análise visual (Zamboni, 1986) e de dissolução da amostra (Tec. Nº 945.80–AOAC, 2005). Os resultados foram avaliados segundo as legislações em vigor. Das 41 amostras de 2011, 41,5 % continham partículas magnéticas de até 4,5 mm de comprimento e das 19 amostras analisadas em 2012, 21,1 % continham partículas de até 2,0 mm, as quais indicam falhas nas boas práticas e riscos à saúde, exigindo-se medidas corretivas na produção. É necessária uma legislação que defina padrões de referência e limites para a presença destas partículas, além de maior entrosamento entre indústria, comunidade científica e órgãos reguladores para garantia de alimentos seguros.(AU)

EFEITO DO TAMANHO DE AGREGADO MICROBIANO NO PROCESSO DE NITRIFICAÇÃO DURANTE A PRODUÇÃO DO CAMARÃO BRANCO LITOPENAEUS VANNAMEI EM SISTEMA DE BIOFLOCOS (BIOFLOC TECHNOLOGY - BFT).

O sistema de produção de camarões em bioflocos (Biofloc Technology System - BTF) possui como principal característica a mínima troca de água. O acúmulo de compostos nitrogenados pode causar prejuízos, uma vez que a amônia e o nitrito, quando presentes em elevadas concentrações causam efeito tóxicos para os organismos produzidos. Os microrganismos nitrificantes são eficientes na remoção da amônia e nitrito, porém estes são extremamente sensíveis à vários fatores como pH, oxigênio, temperatura entre outros, e em sistema BFT há indícios de que o tamanho das partículas de Bioflocos podem afetar a atividade de nitrificação. Com isso, a presente Dissertação teve por objetivo avaliar, em três experimentos, se o tamanho dos bioflocos afeta o processo de nitrificação no cultivo do Litopenaeus vannamei. No experimento 1, os bioflocos foram separados através de filtração constante com diferentes tamanhos de malhas, sendo este composto por quatro tratamentos: Malhas de 50, 150 e 300 m, e o tratamento controle sem filtração - S.F. No experimento 2, realizado com malhas maiores os bioflocos foram separados nos tratamentos com malhas de 300 e 600 m, e o tratamento controle - S.F. O experimento 3 objetivou avaliar a recuperação dos Bioflocos quando estes são reduzidos de tamanho, em conjunto com o processo de nitrificação, este experimento foi composto por três tratamentos, o tratamento onde houve filtração parcial dos bioflocos malhas de 50 m durante cinco dias, o tratamento com filtração constante com malhas de 150 m, e o tratamento controle - S.F. Os resultados destes três experimentos indicam que o tamanho dos bioflocos, bem como a quantidade de material em suspensão, não afetam o processo de nitrificação no sistema BFT. Em todos os experimentos os parâmetros de qualidade de água estavam dentro das faixas ideais para a produção de L. vannamei. Com relação ao desempenho zootécnico, os melhores resultados foram obtidos nos tratamentos em que não houve filtração - S.F nos três experimentos. Isto ocorreu devido a maior disponibilidade de bioflocos nestes tratamentos, refletindo diretamente em melhores taxas de ganho de peso e conversão alimentar.

The system of shrimp production in bioflocs (Biofloc Technology System - BTF) has with main characteristic the minimum water exchange. The accumulation of nitrogenous compounds can cause damages, once the ammonia and nitrite, when present in high concentrations cause toxic effects to the produced organisms. The nitrifying microorganisms are efficient in the removal of ammonia and nitrite, however these are extremely sensitive to several factors such as pH, oxygen, temperature and others, in the BFT system there are indications that the size of the particles of Bioflocs can affect the activity of nitrification. Thereby, the present dissertation had as objective evaluate, in three experiments, whether the size of the bioflocs affects the nitrification process in cultivation of Litopenaeus vannamei. In the experiment 1, the bioflocs were separated through constant filtration with different mesh sizes, and it was composed of four treatments: 50, 150 and 300 m meshes, and the control treatment without filtration - S.F. In experiment 2, performed with larger meshes the bioflocs were separated in the treatments with meshes of 300 and 600 m, and the control treatment - S.F. The experiment 3 aimed to evaluate the recovery of the Bioflocs when they has your size reduced, together with the nitrification process, this experiment was composed of three treatments, the treatment where there were partial filtration of bioflocs with meshes of 50 m for five days, the treatment with constant filtration with meshes of 150 m, and the control treatment - S.F. The results of these three experiments indicate that the size of the bioflocs as well as the amount of material in suspension, do not affect the nitrification process in the BFT system. In all experiments the water quality parameters were within the ideal ranges for the production of L. vannamei. Regarding the zootechnical performance, the best results were obtained in the treatments without filtration - S.F, in the three experiments. This occurred due to the greater availability of bioflocs in these treatments, reflecting directly on better rates of weight gain and feed conversion.

O papel do epítopo -Gal (Gal1-3Gal1-4GlcNAc-R) no diagnóstico sorológico e na infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi

O protozoário Trypanosoma cruzi apresenta uma superfície celular abundante em glicoconjugados imunogênicos que contém o epítopo -Gal, responsável pela produção de elevados níveis de anticorpos específicos anti--Gal, excelentes alvos para o diagnóstico sorológico em indivíduos chagásicos. Nesse sentido, as plataformas Albumina Sérica Bovina (BSA) e Q virus-like particles (Q-VLP), que aumentam o número do epítopo -Gal exposto, foram avaliadas como ferramentas para o diagnóstico sorológico da infecção pelo T. cruzi na fase crônica. Para isso, aproximadamente 22 unidades do epítopo -Gal foram acopladas à BSA, e a reatividade dos anticorpos anti--Gal purificados de indivíduos chagásicos foi 230 vezes maior quando comparada àqueles purificados de indivíduos não chagásicos. Da mesma forma, o pool de soros de indivíduos chagásicos apresentou uma reatividade aproximadamente 20 vezes maior que o pool de soros de indivíduos não chagásicos. A outra plataforma utilizada, na qual 540 unidades de -Gal foram acopladas ao Q-VLP foi testada frente a soros de indivíduos infectados pelo T. cruzi, não infectados ou com leishmaniose visceral. Os resultados evidenciaram uma excelente discriminação entre indivíduos chagásicos e não chagásicos, independente da parasitemia, grau de cardiopatia chagásica crônica e idade, assim como ausência de reatividade cruzada. Além disso, os níveis de IgG anti--Gal diminuíram, com o passar do tempo, em pacientes que receberam tratamento com benznidazol, sugerindo que a avaliação dos níveis séricos deste anticorpo pode fornecer informações importantes sobre a evolução da doença. Estes resultados indicam que o -Gal acoplado à BSA ou ao Q-VLP poderia ser um potencial candidato para diagnóstico da infecção pelo T. cruzi. Sendo -Gal altamente imunogênico, e não produzido em células ou tecidos de humanos, foi levantada a hipótese deste epítopo ser utilizado como partícula vacinal. Com isso, avaliamos, na outra parte deste trabalho, camundongos que não expressam o epítopo -Gal em seus tecidos como modelos experimentais na infecção pelo T. cruzi. Esses camundongos foram mais eficientes em controlar a infecção, e a elevada produção de anticorpos líticos anti--Gal pode ser um dos mecanismos responsáveis por essa proteção, assim como pela maior sobrevivência encontrada quando estes animais foram desafiados com uma dose letal de tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi.

The protozoan parasite Trypanosoma cruzi has a cell surface covered by immunogenic glycoconjugates expressing the -Gal epitope, which triggers high levels of protective anti--Gal antibodies in infected individuals, representing excellent targets for the serological diagnosis. The use of bovine serum albumin (BSA) and Q virus-like particle (Q-VLP) platforms, which increase the number of displayed -Gal epitope, was evaluated as a tool for the serological diagnosis of T. cruzi infection in chronic phase. For this purpose, ~22 units of -Gal epitope were coupled to BSA and this neoglycoprotein was used as antigen, showing that purified anti--Gal antibodies from chagasic patients were ~230-fold more reactive than purified anti--Gal antibodies from healthy individuals. Similarly, the pooled sera from chagasic patients were recognized ~20-fold more strongly than pooled sera from health individuals. On the other platform used, 540 molecules of the -Gal epitope were coupled to Q-VLP and this antigen was tested against a panel of sera from patients chronically infected with T. cruzi, both untreated and benznidazole-treated, and compared with sera from patients with leishmaniasis and from healthy donors. The results showed excellent discrimination between chagasic and non-chagasic patients, regardless of parasitemia, degree of chronic chagasic cardiopathy and age, as well as the absence of cross-reactivity. Moreover, the anti--Gal IgG levels decreased substantially in patients receiving treatment with benznidazole, suggesting that the assessment of serum levels of this highly abundant type of antibody can report on disease status in individual patients. Taken together, these results indicate that -Gal coupled to BSA or Q-VLP could be a potential diagnostic candidate for T. cruzi infection. Since -Gal is highly immunogenic and human cells or tissues are not able to produce it, it was hypothesized that this epitope could be used as a vaccine. Therefore, the last part of this work aimed to evaluate mice that do not express the -Gal epitope in their tissues as experimental models in T. cruzi infection. These mice were more efficient at controlling the infection, showing a more organized immune response, and the high levels of lytic anti--Gal antibodies may be responsible by this protection, as well as by the greater survival found when these animals were challenged with a lethal dose of T. cruzi trypomastigotes (Y strain).

Atividade antibacteriana de nanopartículas poliméricas doadoras de óxido nítricocontra Staphylococcus aureus e Escherichia coli

A mastite bovina é uma grave enfermidade veterinária que causa grande perda para a indústria de laticínios em todo o mundo. Ela é uma das principais doenças infecciosas, e é de difícil tratamento e controle. Além disso, o surgimento de bactérias multirresistentes que causam a mastite tem complicado o seu controle. O radical livre óxido nítrico (NO) é um potente agente antimicrobiano. Assim, o objetivo deste estudo foi sintetizar partículas poliméricas doadoras de NO, e avaliar a atividade antibacteriana contra cepas de Staphylococcus aureus (MBSA) e Escherichia coli (MBEC) isoladas de mastite bovina. Quinze isolados de MBSA e quinze de MBEC foram obtidos de vacas com mastite bovina subclínica e clínica. Partículas poliméricas biocompatíveis compostas de alginato/quitosana, ou quitosana/tripolifosfato de sódio (TPP), foram sintetizadas e utilizadas para encapsular o ácido mercaptosuccínico (MSA), que é uma molécula contendo tiol. A nitrosação de grupo tiol em partículas contendo MSA formaram as partículas S- nitroso-MSA, que são doadores de NO. A cinética de liberação das partículas de S- nitroso-MSA mostrou liberação de NO constante e controlada durante várias horas. A atividade antibacteriana das partículas liberadoras de NO foi avaliada pela incubação das nanopartículas com uma cepa de MBSA multirresistente, o qual é responsável por causar mastite bovina. Ensaios de atividade anti-biofilme na formação e em biofilmes maduros foram realizados utilizando as cepas de S. aureus e as partículas poliméricas de S-nitroso-MSA liberadoras de NO. A concentração mínima inibitória das partículas de S-nitroso-MSA-alginato/quitosana contra cepas de MBSA variou de 125 a 250 µg/mL. As mesmas nanopartículas apresentaram atividade anti-biofilme nas concentrações de 250 e 500 µg/mL para as cepas de MBSA. Os resultados indicam que o uso de partículas poliméricas doadoras de NO é uma interessante alternativa para combater a resistência bacteriana no tratamento e prevenção da mastite bovina.

Bovine mastitis is a serious veterinary disease that causes great loss to the dairy industry worldwide. It is a major infectious disease and is difficult to manage and control. Furthermore, emerging multidrug resistant bacteria that cause mastitis have complicated such management. The free radical nitric oxide (NO) is a potent antimicrobial agent. Thus, the aims of this study were to prepare and evaluate the antibacterial activity of nitric oxide-releasing polymeric particles against Staphylococcus aureus (MBSA) and Escherichia coli (MBEC), which were isolated from bovine mastitis. Fifteen MBSA isolates and fifteen MBEC were collected from subclinical and clinical bovine mastitis. Biocompatible polymeric particles composed of alginate/chitosan or chitosan/sodium tripolyphosphate (TPP) were prepared and used to encapsulate mercaptosuccinic acid (MSA), which is a thiol-containing molecule. Nitrosation of thiol groups of MSA-containing particles formed S-nitroso- MSA particles, which are NO donors. The NO release kinetics from the S-nitroso- MSA particles showed sustained and controlled NO release over several hours. The antibacterial activity of NO-releasing particles was evaluated by incubating the particles with an MBSA multi-resistant strain, which is responsible for bovine mastitis. Anti-biofilm activity assays on the formation and mature biofilms were performed using nitric oxide-releasing S-nitroso-MAS polymeric particles and S. aureus strains. The minimum inhibitory concentration for S-nitroso-MSA-alginate/chitosan particles against MBSA ranged from 125 g/mL to 250 g/mL. The same nanoparticles showed anti-biofilm activity at the concetrations of 250 e 500 µg/mL against MBSA strains. The results indicate that NO-releasing polymeric particles are an interesting approach to combating bacteria resistance in bovine mastitis treatment and prevention.

Digestibilidade in vitro de micropartículas lipídicas sólidas contendo óleo de babaçu e determinação de bioacessibilidade de quercetina encapsulada

O estilo de vida contemporâneo tem aumentado a demanda por produtos alimentícios que proporcionem benefícios à saúde como os alimentos funcionais. Entretanto, a incorporação de diversos compostos bioativos nas matrizes alimentícias é dificultada pela característica hidrofóbica da maioria destes compostos, que também desfavorece a absorção no intestino. Este é o caso de muitos flavonoides como a quercetina, e sistemas de encapsulação como as micropartículas lipídicas sólidas são capazes de diminuir estes problemas. O presente trabalho de Mestrado teve como objetivo avaliar a digestibilidade in vitro de micropartículas lipídicas sólidas produzidas com óleo de babaçu como fonte de triacilglicerois de cadeia média (MCTs) e triestearina, e a bioacessibilidade da quercetina encapsulada nestes sistemas lipídicos. Foram produzidas dispersões variando-se a concentração de tensoativo (de 2,0 a 4,0%) e de óleo de babaçu (1,2, 2,0 e 2,8%). Os sistemas produzidos apresentaram diâmetro médio que variou de 700 nm a 1800 nm para as diferentes formulações e estabilidade físico-química durante 30 dias. Os resultados obtidos nos ensaios de digestibilidade in vitro indicam uma maior tendência de desestabilização dos sistemas produzidos com mais óleo de babaçu na fase gástrica. O resultado da hidrólise dos triacilglicerois mostrou que30% de ácidos graxos foram liberados na fase intestinal, independente da formulação de micropartículas lipídicas. Os resultados de bioacessibilidade indicaram que em baixas concentrações de tensoativo há influência da concentração de triacilglicerois de cadeia média nas formulações e os resultados mais altos foram obtidos para as partículas contendo 2,8% de óleo de babaçu e 2,0% de tensoativo. Desta forma, pode-se concluir que os sistemas produzidos neste trabalho foram eficientes para preservação da quercetina, o que possibilita sua incorporação em sistemas alimentícios e também aumentou a bioacessibilidade deste bioativo

Contemporary lifestyle has increased the demand for food products that provide health benefits as functional foods. However, the incorporation of bioactive compounds in food matrices is hampered by hydrophobic character of the majority of this compounds which also difficult the absorption in the intestine. This is the case of many flavonoids such as quercetin which has reduced bioactivity in plants. Encapsulation systems such as solid lipid microparticles are capable of solving these problems. The objective of this study was to evaluate the in vitro digestibility of solid lipid microparticles produced with babassu oil as a source of medium chain triacylglycerols (MCTs) and tristearin, besides the bioaccessibility of quercetin encapsulated in these lipid systems. Dispersions were produced by varying the surfactant (2.0 to 4.0%) and MCT (1.2, 2.0 and 2.8%) concentrations. The systems produced showed an average diameter ranging from 700 nm to 1800 nm for different formulations and colloidal stability for 30 days. The results obtained in the in vitro digestibility assays indicate a higher tendency to destabilization in gastric phase of the systems produced with more babassu oil. 30% of fatty acids were released in the intestinal phase for all formulations. The results indicated that bioaccessibility at low surfactant concentrations has the influence of the concentration of MCT in formulations. The highest results were obtained for particles containing 2.8% of babassu oil and 2.0% of surfactant. Thus, we can conclude that the systems produced in this work were efficient for preservation of quercetin, which allows its incorporation in food systems and also increased the bioaccessibility of this bioactive.

Microbiological monitoring of clean rooms in development of vaccines

The aim of the present work was to evaluate an environmental monitoring program for clean rooms, or classified environments, involved in the filling and quality control of biological products produced by Butantan Institute, São Paulo, Brazil. This monitoring established the quantification, characterization and seasonality of the microorganisms in air and operators and, moreover, determined the alert and action limits. The total detectable microbial number showed some contrasts in installed air purification systems and in the operational impact on adopted procedures. The typical microbial population consisted of Staphylococcus sp, Micrococcus sp, Bacillus sp and Penicillium sp. The highest microorganism concentration occurred during summer and springtime. The established internal alert and action limits supported the operational procedures. Therefore, the environmental monitoring program is recommended for other laboratories involved in the production of vaccines, hyperimmune sera and biopharmaceuticals.

O presente trabalho teve por objetivo avaliar um programa de monitoramento microbiológico ambiental para áreas limpas, ou ambientes classificados, envolvidas na produção, envasamento e controle dos imunobiológicos produzidos pelo Instituto Butantan. Este monitoramento permitiu a quantificação, a caracterização e a sazonalidade da população microbiana presente no ar e nos operadores, e a determinação dos limites de alerta e ação. O número total de bactérias detectáveis revelou diferenças nos sistemas de purificação de ar instalados e o impacto operacional ocasionado pelos procedimentos realizados. A população microbiana característica foi composta por bactérias dos gêneros Staphylococcus sp, Micrococcus sp, Bacillus sp e por fungos filamentosos do gênero Penicillium sp. A maior concentração de microrganismos ocorreu nos períodos de verão e primavera. Os limites internos de alerta e ação estabelecidos asseguram os procedimentos operacionais, recomendando o monitoramento microbiológico ambiental a outros laboratórios envolvidos na produção de vacinas, soros hiperimunes e imunobiológicos.

Química atmosférica na Amazônia: a floresta e as emissões de queimadas controlando a composição da atmosfera amazônica

The understanding of the natural processes that regulate atmospheric composition in Amazonia is critical to the establishment of a sustainable development strategy in the region. The large emissions of trace gases and aerosols during the dry season, as a result of biomass burning, profoundly change the composition of the atmosphere in most of its area. The concentration of trace gases and aerosols increases by a factor of 2 to 8 over large areas, affecting the natural mechanisms of several key atmospheric processes in the region. Cloud formation mechanisms, for instance, are strongly affected when the concentration of cloud condensation nuclei (CCN) changes from 200-300 CCN/cc in the wet season to 5,000-10,000 CCN/cc in the dry season. The cloud droplet radius is reduced from values of 18 to 25 micrometers in the wet season to 5 to 10 micrometers in the dry season, suppressing cloud formation and the occurrence of precipitation under some conditions. Ozone is a key trace gas for changes in the forest health, with concentrations increasing from 12 parts per billion (ppb), at the wet season, to values as high as 100 ppb (in the dry season in areas strongly affected by biomass burning emissions). At this level, ozone could be damaging the vegetation in regions far from the emissions. The atmospheric radiation balance is also strongly affected, with a net loss of up to 70% of photosynthetic active radiation at the surface.

Entender os processos naturais que regulam a composição da atmosfera é crítico para que se possa desenvolver uma estratégia de desenvolvimento sustentável na região. As grandes emissões de gases e partículas durante a estação seca provenientes das queimadas alteram profundamente a composição da atmosfera amazônica na maior parte de sua área. As concentrações de partículas de aerossóis e gases traço aumentam por fatores de 2 a 8 em grandes áreas, afetando os mecanismos naturais de uma série de processos atmosféricos na região amazônica. Os mecanismos de formação de nuvens, por exemplo, são profundamente alterados quando a concentração de núcleos de condensação de nuvens (NCN) passa de 200 a 300 NCN/cm³ na estação chuvosa para 5.000-10.000 NCN/centímetro cúbico na estação seca. As gotas de nuvens sofrem uma redução de tamanho de 18 a 25 micrômetros para 5 a 10 micrômetros, diminuindo a eficiência do processo de precipitação e suprimindo a formação de nuvens. A concentração de ozônio, um gás importante para a saúde da floresta amazônica passa de cerca de 12 partes por bilhão em volume (ppb) (concentração típica ao meio do dia na estação chuvosa) para valores em regiões fortemente impactadas por queimadas de até 100 ppb, nível que pode ser fitotóxico para a vegetação. O balanço de radiação é fortemente afetado, com uma perda líquida de até 70% da radiação fotossinteticamente ativa na superfície.

Fusarium oxysporum; its enhanced entomopathogenic activity with acidic silver nanoparticles against Rhipicephalus microplus ticks / Fusarium oxysporum e sua atividade entomopatogênica aprimorada com nanopartículas de prata ácida contra carrapatos Rhipicephalus microplus

Fusarium oxysporum is an entomopathogenic fungus, and it has anti-biological activity against arthropods. Ticks are blood sucking arthropods which are responsible for transmitting different diseases in humans and animals. The use of chemical insecticides against ticks is not eco-friendly option and results in the development of acaricide resistance. Previously, we had cultured a local isolate of Fusarium oxysporum from soil samples which were identified through microscopy and confirmed through molecular technique. In our previous experiments, we have prepared Silver nanoparticles (AgNP) at pH 7 and they had been characterized through X-Ray Diffraction (XRD), UV-visible and zeta-potential. In our current study, the AgNP were prepared at different pH conditions and characterized through Scanning Electron Microscopy (SEM) and Transmission Electron Microscopy (TEM). The protein molecules of F. oxysporum were charged with Ag ions. F. oxysporum NP were observed to enhance anti-biological activity by killing Rhipicephalus microplus and they caused 100% mortality at pH 4 and pH 5 in 24 h in anti-tick biological assay. Our study is the first report to do biological assay against Rhipicehalus ticks by using Fusarium AgNP at acidic pH. Biological control using entomopathogenic fungi can be the best alternative of the chemical method to control the tick population.

Fusarium oxysporum é um fungo entomopatogênico com atividade antibiológica contra artrópodes. Os carrapatos são artrópodes sugadores de sangue responsáveis pela transmissão de diversas doenças em humanos e animais. O uso de inseticidas químicos contra carrapatos não é uma opção ecologicamente correta e resulta no desenvolvimento de resistência acaricida. Anteriormente, havíamos cultivado um isolado local de Fusarium oxysporum a partir de amostras de solo que foram identificadas por microscopia e confirmadas por técnica molecular. Em nossos experimentos anteriores, preparamos nanopartículas de Prata (AgNP) em pH 7 e elas foram caracterizadas por Difração de Raios X (XRD), UV-visível e potencial zeta. No presente estudo, os AgNP foram preparados em diferentes condições de pH e caracterizados através de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM). As moléculas de proteína de F. oxysporum foram carregadas com íons Ag. Assim, observou-se que F. oxysporum NP aumenta a atividade antibiológica matando Rhipicephalus microplus e causando 100% de mortalidade em pH 4 e pH 5 em 24h no ensaio biológico anticarrapato. Este estudo é o primeiro relato de caso a realizar um ensaio biológico contra carrapatos Rhipicehalus usando Fusarium AgNP em pH ácido. Nesse sentido, é possível concluir que o controle biológico utilizando fungos entomopatogênicos pode ser a melhor alternativa do método químico para controlar a população de carrapatos.

Time course of virus-like particles (VLPs) double-stranded rna accumulation in toxigenic and non-toxigenic strains of Aspergillus flavus

Two strains of Aspergillus flavus, non-toxigenic NRRL 6550 and toxigenic NRRL 5940, were studied over a period of 44 days, in order to detect the presence of virus-like particles (VLPs) by means of electron microscopy (EM) and nucleic acids electrophoresis. Only the toxigenic strain contained VLPs, presenting three-segmented dsRNA. An increase in VLPs number was observed during the exponential phase of fungal growth, up to day 12 of culture; after this, higher levels of aflatoxin production in toxigenic NRRL 5940 mycelia occurred in parallel with decreased VLPs replication.

Neste trabalho, foram estudadas duas cepas de Aspergillus flavus não toxigênica (NRRL 6550) e toxigênica (NRRL 5940). As cepas foram cultivadas durante 44 dias objetivando a pesquisa de partículas semelhantes a vírus (VLPs), por meio de microscopia eletrônica e pesquisa de ácidos nucléicos, através de eletroforese. Somente as cepas toxigênicas continham "VLPs", as quais apresentaram 3 segmentos de RNA de fita dupla. Um aumento no número de "VLPs" foi observado com 12 dias de cultivo, período correspondente a fase exponencial de crescimento de A. flavus.