Teores de mercúrio em mexilhões do mercado consumidor e influência do tratamento térmico / Mercury contents in mussels from the retail market and influence of thermal processing

A contaminação por mercúrio é um desafio para a saúde humana e animal. Os moluscos bivalves, especialmente os mexilhões, absorvem, retém e concentram o mercúrio. Este trabalho teve como objetivo determinar os teores de mercúrio em mexilhões do mercado varejista de Belo Horizonte, MG e investigar a influência do tratamento térmico. Foram analisadas 42 amostras de mexilhão marrom procedentes de cultivo marinho. Os teores de mercúrio foram determinados por espectrometria de absorção atômica de combustão após amalgamação em ouro. Todas amostras tinham mercúrio em teores que variaram de 0,020 a 0,076 mg/kg. Nenhuma amostra apresentou teor de mercúrio superior ao limite estabelecido pela legislação brasileira (0,05 mg/kg para crustáceos, moluscos e cefalópodes). O cozimento do mexilhão por 3 e 6 min não foi eficaz na eliminação do Hg.(AU)

Teores de mercúrio em mexilhões do mercado consumidor e influência do tratamento térmico / Mercury contents in mussels from the retail market and influence of thermal processing

A contaminação por mercúrio é um desafio para a saúde humana e animal. Os moluscos bivalves, especialmente os mexilhões, absorvem, retém e concentram o mercúrio. Este trabalho teve como objetivo determinar os teores de mercúrio em mexilhões do mercado varejista de Belo Horizonte, MG e investigar a influência do tratamento térmico. Foram analisadas 42 amostras de mexilhão marrom procedentes de cultivo marinho. Os teores de mercúrio foram determinados por espectrometria de absorção atômica de combustão após amalgamação em ouro. Todas amostras tinham mercúrio em teores que variaram de 0,020 a 0,076 mg/kg. Nenhuma amostra apresentou teor de mercúrio superior ao limite estabelecido pela legislação brasileira (0,05 mg/kg para crustáceos, moluscos e cefalópodes). O cozimento do mexilhão por 3 e 6 min não foi eficaz na eliminação do Hg.

Mariculture impacts on the benthonic icthyofauna of Itaguá Bay, Ubatuba, southeast Brazil / Impactos da maricultura sobre a ictiofauna bentônica da Baía do Itaguá, Ubatuba, sudeste do Brasil

Due to the decline of fishing stocks, aquaculture has been expanding throughout the world. Taking into account the possibility of conflicts of aquacultural activities in areas of environmental protection, this study aims at assessing the effects of mariculture upon the local ichthyofauna of Itaguá Bay in Ubatuba, São Paulo state, Brazil, which is within a marine protection area. In order to do so, the fish community was analyzed in areas with mussels and macroalgae farms and in areas without any maricultural activities. After six months of sampling efforts, 230 individuals were captured from 19 different species and 15 families. There was no difference in catchability, richness, diversity, and evenness among the areas. Nevertheless, the species composition was distinct in areas where mussels were farmed. These areas have presented twice as much fish biomass than the others. Based on these results, we can observe that the environmental alterations caused by mussel farming, are sources of habitat complexity, hence able to enrich the marine fauna of the region. Thus, we conclude that mariculture, specifically mussel farming, has a positive impact on ichthyofauna, contributing to biodiversity maintenance in protected areas.

Com o declínio dos estoques pesqueiros a aquicultura vem se desenvolvendo em todo o mundo. Considerando os possíveis conflitos existentes entre atividades produtivas e áreas de preservação ambiental, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da maricultura sobre a ictiofauna local da Baía do Itaguá em Ubatuba, estado de São Paulo, Brasil, que está dentro da Área de Proteção Ambiental Marinha Litoral Norte. Para isto a comunidade de peixes foi avaliada em áreas com cultivo de mexilhões, macroalgas marinhas e áreas sem atividade de maricultura. Após seis meses de coleta foram capturados 230 indivíduos, de 19 espécies e 15 famílias. Não houve diferença na capturabilidade, riqueza, diversidade e equitabilidade entre as áreas. Entretanto, a composição das espécies da área com mexilhões foi distinta das demais. A área com mexilhões também apresentou quase o dobro de biomassa de peixes que o obtido nas demais áreas. Com base em nossos resultados podemos observar que a alteração ambiental gerada pelo cultivo de mexilhões é uma fonte de complexidade de habitat capaz de agregar a fauna marinha da região. Dessa forma, concluímos que a maricultura, em especial a mitilicultura, exerce um impacto positivo sobre a ictiofauna, podendo contribuir para a manutenção da biodiversidade nas áreas de preservação ambiental.

Mariculture impacts on the benthonic icthyofauna of Itaguá Bay, Ubatuba, southeast Brazil / Impactos da maricultura sobre a ictiofauna bentônica da Baía do Itaguá, Ubatuba, sudeste do Brasil

Due to the decline of fishing stocks, aquaculture has been expanding throughout the world. Taking into account the possibility of conflicts of aquacultural activities in areas of environmental protection, this study aims at assessing the effects of mariculture upon the local ichthyofauna of Itaguá Bay in Ubatuba, São Paulo state, Brazil, which is within a marine protection area. In order to do so, the fish community was analyzed in areas with mussels and macroalgae farms and in areas without any maricultural activities. After six months of sampling efforts, 230 individuals were captured from 19 different species and 15 families. There was no difference in catchability, richness, diversity, and evenness among the areas. Nevertheless, the species composition was distinct in areas where mussels were farmed. These areas have presented twice as much fish biomass than the others. Based on these results, we can observe that the environmental alterations caused by mussel farming, are sources of habitat complexity, hence able to enrich the marine fauna of the region. Thus, we conclude that mariculture, specifically mussel farming, has a positive impact on ichthyofauna, contributing to biodiversity maintenance in protected areas.(AU)

Com o declínio dos estoques pesqueiros a aquicultura vem se desenvolvendo em todo o mundo. Considerando os possíveis conflitos existentes entre atividades produtivas e áreas de preservação ambiental, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da maricultura sobre a ictiofauna local da Baía do Itaguá em Ubatuba, estado de São Paulo, Brasil, que está dentro da Área de Proteção Ambiental Marinha Litoral Norte. Para isto a comunidade de peixes foi avaliada em áreas com cultivo de mexilhões, macroalgas marinhas e áreas sem atividade de maricultura. Após seis meses de coleta foram capturados 230 indivíduos, de 19 espécies e 15 famílias. Não houve diferença na capturabilidade, riqueza, diversidade e equitabilidade entre as áreas. Entretanto, a composição das espécies da área com mexilhões foi distinta das demais. A área com mexilhões também apresentou quase o dobro de biomassa de peixes que o obtido nas demais áreas. Com base em nossos resultados podemos observar que a alteração ambiental gerada pelo cultivo de mexilhões é uma fonte de complexidade de habitat capaz de agregar a fauna marinha da região. Dessa forma, concluímos que a maricultura, em especial a mitilicultura, exerce um impacto positivo sobre a ictiofauna, podendo contribuir para a manutenção da biodiversidade nas áreas de preservação ambiental.(AU)

Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb, and Zn in mussels collected in Santos Bay, São Paulo, Brazil: limits required by local legislation / Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn em mexilhões coletados na baía de Santos, São Paulo, Brasil: limites preconizados pela legislação brasileira

This study quantified and evaluated the concentrations of trace elements Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb and Zn in mussels Perna perna collected in Urubuqueçaba island, Santos Bay, São Paulo, Brazil. This region presents port and industrial activities, as well as high population densification. The collections in natural mussel beds occurred in eight campaigns, two per season of the year, totaling 240 samples, from April 2010 to June 2011. The determination of the concentration of trace elements was performed using the Atomic Absorption Spectrometer (AAS) Flame. The statistic alanalysis used the PAST Software 1 using p <0.05 as significant. Average concentrations in μg g-1 wet weight obeyed the order Cd (0.11), Cr (0.37), Pb (0.38), Cu (1.63), Ni (2.31), Mn (2.33), Zn (27.11), Fe (179.97) and Al (375.23). The results were compared with other studies of mussels and Brazilian standards that establish maximum allowable concentrations for human consumption, only Cr showed concentrations above those permitted by Brazilian standards.

Este estudo quantificou e avaliou as concentrações dos elementos traços metálicos Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn em mexilhões Perna perna na ilha Urubuqueçaba, baía de Santos, São Paulo, Brasil. Esta região apresenta atividades portuárias e industriais, além de alta densidade populacional. As coletas em bancos naturais do mexilhão ocorreram em oito campanhas, duas por estação do ano, totalizando 240 amostras, no período de abril de 2010 a junho de 2011. A determinação da concentração dos metais foi realizada empregando Espectrometria de Absorção Atômica – AAS. O tratamento estatístico utilizou o Software PAST 1 utilizando p < 0,05 como significativo. As concentrações médias, em µg g-1 de peso úmido obedeceram a seguinte ordem: Cd (0,11), Cr (0,37), Pb (0,38), Cu (1,63), Ni (2,31), Mn (2,33), Zn (27,11), Fe (179,97) e Al (375,23). Os resultados foram comparados com outros estudos realizados com mexilhões e com as normas brasileiras que estabelecem concentrações máximas permitidas para o consumo humano e somente o Cr apresentou concentrações acima do permitido pelas normas brasileiras.

MALDI-TOF MS as a tool for the identification of Vibrio alginolyticus from Perna perna mussels (Linnaeus, 1758) / MALDI-TOF MS como ferramenta na identificação de Vibrio alginolyticus isolados de mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758)

Vibrio species are ubiquitous in aquatic environments, including coastal and marine habitats. Vibrio alginolyticus is an opportunistic pathogen for fish, crustaceans and mussels and their identification by biochemical tests may be impaired due their nutritional requirements. The study used Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS) to identify 49 Vibrio spp. isolates associated with mussels (Perna perna) from different locations along the Rio de Janeiro coast. The rpoA gene was used as a genus-specific marker of Vibrio spp. and was positive in all 209 isolates. MALDI-TOF MS confirmed 87.8% of V. alginolyticus when compared to the results of the biochemical tests. Four isolates were identified as Shewanella putrefaciens (8.16%) and one was identified as V. parahaemolyticus (2.0%). Just one isolate was not identified by this technique (2.0%). The pyrH sequencing confirmed 75% of the proteomic technique results. MALDI-TOF MS is an excellent option for characterization of bacterial species, as it is efficient, fast and easy to apply. In addition, our study confirms its high specificity and sensitivity in these marine bacteria identification.(AU)

Espécies de Vibrio são ubiquitárias em ambientes aquáticos, incluindo habitats costeiros e marinhos. A espécie Vibrio alginolyticus é oportunista para peixes, crustáceos e moluscos e a sua identificação através de testes bioquímicos pode ter a qualidade prejudicada devido às suas exigências nutricionais. O presente estudo utilizou Espectrometria de Massa por Tempo de Vôo de Ionização/Desorção por Laser Assistida por Matriz (MALDI-TOF MS) para identificar diferentes espécies de Vibrio provenientes de mexilhões (Perna perna) coletados em diferentes locais ao longo da costa do Rio de Janeiro. O gene rpoA foi utilizado como um marcador gênero-específico de Vibrio spp. sendo positivo em todos os 209 isolados. MALDI-TOF MS confirmou 87,75% de V. alginolyticus quando comparados com os resultados dos testes bioquímicos. Quatro isolados foram identificados como Shewanella putrefaciens (8,16%), um como V. parahaemolyticus (2,0%) e apenas um (2,0%) não foi identificado pela técnica proteômica. E o sequenciamento do pyrH confirmou 75% dos resultados da técnica proteomica. MALDI-TOF MS tem sido considerada uma excelente opção para a caracterização bacteriana, por ser eficiente, rápida, de fácil aplicação e este estudo confirmou a sua elevada especificidade e sensibilidade na identificação de bactérias marinhas.(AU)

MALDI-TOF MS as a tool for the identification of Vibrio alginolyticus from Perna perna mussels (Linnaeus, 1758) / MALDI-TOF MS como ferramenta na identificação de Vibrio alginolyticus isolados de mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758)

Vibrio species are ubiquitous in aquatic environments, including coastal and marine habitats. Vibrio alginolyticus is an opportunistic pathogen for fish, crustaceans and mussels and their identification by biochemical tests may be impaired due their nutritional requirements. The study used Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS) to identify 49 Vibrio spp. isolates associated with mussels (Perna perna) from different locations along the Rio de Janeiro coast. The rpoA gene was used as a genus-specific marker of Vibrio spp. and was positive in all 209 isolates. MALDI-TOF MS confirmed 87.8% of V. alginolyticus when compared to the results of the biochemical tests. Four isolates were identified as Shewanella putrefaciens (8.16%) and one was identified as V. parahaemolyticus (2.0%). Just one isolate was not identified by this technique (2.0%). The pyrH sequencing confirmed 75% of the proteomic technique results. MALDI-TOF MS is an excellent option for characterization of bacterial species, as it is efficient, fast and easy to apply. In addition, our study confirms its high specificity and sensitivity in these marine bacteria identification.(AU)

Espécies de Vibrio são ubiquitárias em ambientes aquáticos, incluindo habitats costeiros e marinhos. A espécie Vibrio alginolyticus é oportunista para peixes, crustáceos e moluscos e a sua identificação através de testes bioquímicos pode ter a qualidade prejudicada devido às suas exigências nutricionais. O presente estudo utilizou Espectrometria de Massa por Tempo de Vôo de Ionização/Desorção por Laser Assistida por Matriz (MALDI-TOF MS) para identificar diferentes espécies de Vibrio provenientes de mexilhões (Perna perna) coletados em diferentes locais ao longo da costa do Rio de Janeiro. O gene rpoA foi utilizado como um marcador gênero-específico de Vibrio spp. sendo positivo em todos os 209 isolados. MALDI-TOF MS confirmou 87,75% de V. alginolyticus quando comparados com os resultados dos testes bioquímicos. Quatro isolados foram identificados como Shewanella putrefaciens (8,16%), um como V. parahaemolyticus (2,0%) e apenas um (2,0%) não foi identificado pela técnica proteômica. E o sequenciamento do pyrH confirmou 75% dos resultados da técnica proteomica. MALDI-TOF MS tem sido considerada uma excelente opção para a caracterização bacteriana, por ser eficiente, rápida, de fácil aplicação e este estudo confirmou a sua elevada especificidade e sensibilidade na identificação de bactérias marinhas.(AU)

Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb, and Zn in mussels collected in Santos Bay, São Paulo, Brazil: limits required by local legislation / Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn em mexilhões coletados na baía de Santos, São Paulo, Brasil: limites preconizados pela legislação brasileira

This study quantified and evaluated the concentrations of trace elements Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb and Zn in mussels Perna perna collected in Urubuqueçaba island, Santos Bay, São Paulo, Brazil. This region presents port and industrial activities, as well as high population densification. The collections in natural mussel beds occurred in eight campaigns, two per season of the year, totaling 240 samples, from April 2010 to June 2011. The determination of the concentration of trace elements was performed using the Atomic Absorption Spectrometer (AAS) Flame. The statistic alanalysis used the PAST Software 1 using p <0.05 as significant. Average concentrations in μg g-1 wet weight obeyed the order Cd (0.11), Cr (0.37), Pb (0.38), Cu (1.63), Ni (2.31), Mn (2.33), Zn (27.11), Fe (179.97) and Al (375.23). The results were compared with other studies of mussels and Brazilian standards that establish maximum allowable concentrations for human consumption, only Cr showed concentrations above those permitted by Brazilian standards.(AU)

Este estudo quantificou e avaliou as concentrações dos elementos traços metálicos Al, Cd, Cr, Cu, Fe, Mn, Ni, Pb e Zn em mexilhões Perna perna na ilha Urubuqueçaba, baía de Santos, São Paulo, Brasil. Esta região apresenta atividades portuárias e industriais, além de alta densidade populacional. As coletas em bancos naturais do mexilhão ocorreram em oito campanhas, duas por estação do ano, totalizando 240 amostras, no período de abril de 2010 a junho de 2011. A determinação da concentração dos metais foi realizada empregando Espectrometria de Absorção Atômica AAS. O tratamento estatístico utilizou o Software PAST 1 utilizando p < 0,05 como significativo. As concentrações médias, em µg g-1 de peso úmido obedeceram a seguinte ordem: Cd (0,11), Cr (0,37), Pb (0,38), Cu (1,63), Ni (2,31), Mn (2,33), Zn (27,11), Fe (179,97) e Al (375,23). Os resultados foram comparados com outros estudos realizados com mexilhões e com as normas brasileiras que estabelecem concentrações máximas permitidas para o consumo humano e somente o Cr apresentou concentrações acima do permitido pelas normas brasileiras.(AU)

Perna perna mussels as bioindicators of aquatic contamination by Cryptosporidium spp

Background: Bivalve mollusks, such as the Perna perna mussels, are used as bioindicators of aquatic contamination by heavy metals, pesticides, bacteria, viruses and protozoa. The protozoan Cryptosporidium spp. has species capable of infecting several hosts, including humans, with ingestion being the only form of transmission of oocysts, through water and/or contaminated food. The objective of this study was to use Perna perna mussels as bioindicators of aquatic contamination through the genetic characterization of species and/or genotypes of Cryptosporidium, associating the sources of environmental contamination by faeces and correlating the possible presence of the protozoan with precipitation indexes in the region of Mangaratiba, Rio de Janeiro.Materials, Methods & Results: The mussels were obtained from two sites, both formed by rocks bathed in natural sea water. Site A is called Lage Black and site B is called beach Bag. Samples were taken monthly from March 2009 to February 2010, totaling 12 collections. For the analyzes, the DNA extracted from tissues of mussels was used in the amplification of 18 SSU rDNA sequences, through the Nested-PCR technique. During all months of the study, we diagnosed Cryptosporidium-positive Perna perna mussels samples from, at least, one of the sites studied. We could identify the species C. andersoni, C. meleagridis and C. parvum...(AU)

Perna perna mussels as bioindicators of aquatic contamination by Cryptosporidium spp

Background: Bivalve mollusks, such as the Perna perna mussels, are used as bioindicators of aquatic contamination by heavy metals, pesticides, bacteria, viruses and protozoa. The protozoan Cryptosporidium spp. has species capable of infecting several hosts, including humans, with ingestion being the only form of transmission of oocysts, through water and/or contaminated food. The objective of this study was to use Perna perna mussels as bioindicators of aquatic contamination through the genetic characterization of species and/or genotypes of Cryptosporidium, associating the sources of environmental contamination by faeces and correlating the possible presence of the protozoan with precipitation indexes in the region of Mangaratiba, Rio de Janeiro.Materials, Methods & Results: The mussels were obtained from two sites, both formed by rocks bathed in natural sea water. Site A is called Lage Black and site B is called beach Bag. Samples were taken monthly from March 2009 to February 2010, totaling 12 collections. For the analyzes, the DNA extracted from tissues of mussels was used in the amplification of 18 SSU rDNA sequences, through the Nested-PCR technique. During all months of the study, we diagnosed Cryptosporidium-positive Perna perna mussels samples from, at least, one of the sites studied. We could identify the species C. andersoni, C. meleagridis and C. parvum...

Antifouling activity of twelve demosponges from Brazil / Atividade anti-incrustante de doze demosponjas do Brasil

Benthic marine organisms are constantly exposed to fouling, which is harmful to most host species. Thus, the production of secondary metabolites containing antifouling properties is an important ecological advantage for sessile organisms and may also provide leading compounds for the development of antifouling paints. High antifouling potential of sponges has been demonstrated in the Indian and Pacific oceans and in the Caribbean and Mediterranean seas. Brazilian sponges remain understudied concerning antifouling activities. Only two scientific articles reported this activity in sponges of Brazil. The objective of this study was to test crude extracts of twelve species of sponges from Brazil against the attachment of the mussel Perna perna through laboratorial assays, and highlight promising species for future studies. The species Petromica citrina, Amphimedon viridis, Desmapsamma anchorata, Chondrosia sp., Polymastia janeirensis, Tedania ignis, Aplysina fulva, Mycale angulosa, Hymeniacidon heliophila, Dysidea etheria, Tethya rubra, and Tethya maza were frozen and freeze-dried before extraction with acetone or dichloromethane. The crude extract of four species significantly inhibited the attachment of byssus: Tethya rubra (p = 0.0009), Tethya maza (p = 0.0039), Petromica citrina (p = 0.0277), and Hymeniacidon heliophila (p = 0.00003). These species, specially, should be the target of future studies to detail the substances involved in the ability antifouling well as to define its amplitude of action.(AU)

Organismos bentônicos marinhos estão expostos constantemente à incrustação, que pode ser danosa para a maioria das espécies. Assim, a produção de metabólitos secundários com propriedades anti-incrustantes é uma vantagem ecológica importante para organismos sésseis e pode também orientar o estudo de substâncias para o desenvolvimento de tintas anti-incrustantes. O alto potencial anti-incrustante de esponjas tem sido demonstrado nos oceanos Índico e Pacífico, nos mares Mediterrâneo e Caribenho. Esponjas brasileiras permanecem pouco estudadas em relação à atividade anti-incrustante. Apenas dois artigos científicos registraram essa atividade em esponjas do Brasil. O objetivo desse estudo foi testar os extratos brutos de doze espécies de esponjas do Brasil contra a fixação do molusco Perna perna através de ensaios laboratoriais e também destacar espécies promissoras para estudos futuros. As espécies Petromica citrina, Amphimedon viridis, Desmapsamma anchorata, Chondrosia sp., Polymastia janeirensis, Tedania ignis, Aplysina fulva, Mycale angulosa, Hymeniacidon heliophila, Dysidea etheria, Tethya rubra e Tethya maza foram congeladas e liofilizadas logo após a coleta e posteriormente procedeu-se a extração com acetona ou diclorometano. O extrato bruto de quatro espécies inibiu significativamente a fixação de bissos: Tethya rubra (p = 0.0009), Tethya maza (p = 0.0039), Petromica citrina (p = 0.0277), e Hymeniacidon heliophila (p = 0.00003). Essas espécies, especialmente, devem ser priorizadas em estudos futuros para detalhamento das substâncias envolvidas na capacidade anti-incrustante, bem como para definir sua amplitude de ação.(AU)

Modelagem estatística da contaminação microbiológica de áreas de cultivo de moluscos bivalves

A presente tese é composta por quatro capítulos. No primeiro é feita a contextualização dos objetivos da pesquisa. O segundo apresenta uma revisão das práticas de monitoramento em vigor no Brasil, na União Europeia e nos Estados Unidos da América para a classificação de áreas de produção de moluscos. Os sistemas de classificação não são imediatamente comparáveis porque alguns são baseados no monitoramento de água e outros da carne dos moluscos. Para criar uma base comum de comparação, modelos de regressão foram desenvolvidos para correlacionar os níveis de organismos indicadores fecais (FIOs) na água e nos moluscos. Diferenças importantes nos níveis de segurança proporcionados pelas classificações estabelecidas pelas diferentes legislações foram identificadas. O terceiro capítulo descreve uma metodologia para o desenvolvimento de modelos de regressão para prever os níveis de FIOs em áreas costeiras influenciadas por fontes de poluição localizadas em múltiplas bacias hidrográficas. Concentrações de FIOs em mexilhões (Perna perna) e em água marinha medidas em 50 locais nas baías da Ilha de Santa Catarina (SC, Brasil) entre agosto de 2012 e outubro de 2013 foram utilizadas no estudo. Modelos de regressão foram utilizados para estudar as relações entre as variações espaciais dos níveis de FIOs e características geográficas de bacias hidrográficas próximas aos pontos de monitoramento. Ao considerar na análise bacias hidrográficas com exutórios localizados em até 3 km dos pontos de monitoramento foi possível aumentar em até 150% o coeficiente de determinação (R2) dos modelos. Variáveis meteorológicas foram testadas para prever a variação temporal nos níveis de FIOs. Para otimizar os modelos, o efeito cumulativo desses parâmetros foi avaliado considerando diferentes janelas de tempo antes das coletas. Essa abordagem permitiu aumentar o R2 dos modelos em até 160%. No quarto capítulo, um único modelo é desenvolvido para prever tanto variações espaciais quanto temporais dos níveis de FIOs. O referido modelo é validado e usado para prever a poluição fecal nas baías em diferentes cenários. Foram comparados 288 pares de resultados medidos/modelados, dados obtidos de março de 2009 a abril de 2010 em 15 pontos de monitoramento. Os resultados da validação indicaram que o modelo fornece uma representação justa dos níveis de FIOs no ambiente de estudo dentro das condições meteorológicas sob as quais o modelo foi treinado

This thesis is composed of four chapters. The first one contextualizes the objectives of the research. The second one presents a review of the monitoring practices for classification of commercial shellfish production areas in force in Brazil, European Union and United States of America. The classification systems are not immediately comparable principally because some regulations are based on the monitoring of water and others of shellfish flesh. To create a common baseline to compare these regulations, regression models were developed based on monitoring data and used to correlate levels of faecal indicator bacteria in water and in shellfish. Important differences in the levels of shellfish safety provided by the classifications in the different legislations were identified. The third chapter describes a methodology for developing regression models to predict the FIO levels in coastal areas influenced by pollution sources located in multiple catchments. Concentrations of faecal indicator organisms (FIO) in mussels (Perna perna) and water sampled from 50 sites in the North and South bays of Santa Catarina (SC, Brazil) from August 2012 to October 2013 were used in the study. Regression models were used to study the relationships between the spatial variations of FIO levels and geographic characteristics of catchments located near the monitoring points. By considering in the analysis catchments with outlets within three kilometres from the monitoring points, it was possible to increase the coefficients of determination (R2) of the models up to 150%. Meteorological variables were tested to predict the temporal variation in the FIO levels. To optimize the models, the cumulative effect of these parameters was evaluated considering different time windows prior to samplings. This approach allowed increasing the models R2 up to 160%. In the fourth chapter, a single model is developed to predict both the spatial and the temporal variations in the FIO levels. The referred model is validated and applied to predict the FIO levels in the bays under different scenarios. The analysis considered 288 pairs of measured/modelled results to validate the model, data obtained from March 2009 to April 2010 regarding 15 monitoring points. The validation results indicated that the model provides a fair representation of the FIO levels in the studied environment under the meteorological conditions under which the model was trained

Detecção de Salmonella spp. em mexilhões Perna perna dos bancos naturais de baía densamente urbanizada / Salmonella spp. detection in brown mussels Perna perna from natural sea beds of a densely urbanized bay

O objetivo deste estudo foi detectar a presença de Salmonella spp. em amostras de mexilhão Perna perna(L.) de bancos naturais da Ilha das Palmas, Baia de Santos, São Paulo, Brasil. No período de agosto de 2010 a julho de 2011 foram realizadas dez coletas de mexilhões Perna perna de três pontos distintos, no total de 29 amostras. Estas foram processadas segundo a metodologia descrita no Compendium of Methods forthe Microbiological Examination of Foods. A Salmonella spp. foi isolada em 20,7 por cento das amostras analisadas. As cepas de Salmonella spp. apresentaram quatro diferentes sorotipos dentre os seis isolados. O sorotipo dominante foi o S. Livingstone, detectado em três (50 por cento) amostras, e os demais (S. Infantis, S. enterica subsp.salamae e S. Albany) foram isolados de uma amostra (16,6 por cento). Salienta-se que em cada um dos pontos de coleta foram isoladas duas cepas distintas de Samonella spp,; no ponto 1 S. Livingstone e S. Albany, ponto 2S. Infantis e S. Livingstone, e ponto 3 S. enterica subsp. salamae e S. Livingstone. A S. Livingstone foi isolada em amostras de três pontos, duas no mês de janeiro de 2011 e uma no mês de junho de 2011. (AU)

DESEMPENHO PRODUTIVO DO MEXILHÃO Perna perna (LINNAEUS, 1758) CULTIVADO PELO SISTEMA DE CORDAS EM DIFERENTES DENSIDADES, EM CARAGUATATUBA, SP, BRASIL

No Brasil, como em outros países tropicais, as sementes de mexilhões não são um recurso abundante, e sua escassez por vezes constitui um gargalo para o crescimento da atividade. Assim, estudos que determinam a quantidade ideal de sementes nos cultivos têm aumentado nos últimos anos. Este trabalho objetiva determinar a influência de três densidades de semeadura (200, 300 e 400 sementes / m) sobre diferentes indicadores de desempenho produtivo de mexilhões Perna perna cultivados pelo sistema de cordas suspensas na Praia da Cocanha, Caraguatatuba, SP, Brasil. A ANOVA não apontou diferenças significativas (p<0.05) entre as densidades testadas e a abundância de organismos ornamentais, sementes adicionais associadas às cordas de cultivo, pesos e comprimentos médios dos mexilhões, índice de condição e sobrevivência. Como esperado, o peso total dos mexilhões foi maior nas maiores densidades. Conclui-se que qualquer das densidades testadas pode ser utilizada no sistema de produção em corda, sendo que as menores densidades podem ser indicadas em situações de escassez de sementes.

In Brazil, as in other tropical countries, mussel seed are not a plentiful resource, and its scarcity sometimes constitutes an important bottleneck to the mussel farming improvement. Thus, studies determining the ideal amount of seed used in mussel culture have gained importance in the recent years. This work aims to determine the influence of three seeding densities (200, 300 and 400 seed / m) on different indicators of productive performance of Perna perna mussels cultured by the suspended rope system in Cocanha Beach, Caraguatatuba, SP, Brazil. The one-way ANOVA showed no significant differences (p<0.05) among the densities tested with respect to the abundance of ornamental organisms, additional mussel seed associated to the culture ropes, mean mussel weight and length, condition index and survival. As expected, total mussel weight was higher in the greater densities. It is concluded that any of densities can be used in the rope production system, thus lower densities can be indicated in situations of seed scarcity.

Macro e micropatógenos em mexilhões Perna perna (Linnaeus, 1758) e implicações na mitilicultura catarinense

O incremento da mitilicultura catarinense gerou a necessidade da identificação dos patógenos que acometem o cultivo de Perna perna nos municípios de Palhoça, Florianópolis, Governador Celso Ramos e Penha. Durante o período de julho de 2010 a junho de 2011 foram coletados 720 animais em cada local de cultivo, totalizando 2.880 mexilhões. Do total coletado, a metade (1.440) foi observada ao estereomicroscópio onde foram realizadas as coletas do turbelário Urastoma cyprinae e dos copépodes Pseudomyicola spinosus e Monstrilla sp., que após serem tratados através dos protocolos de Microscopia Eletrônica de Varredura e clarificação com Polyvinil-Lactophenol foram medidos e fotografados ao microscópio de contraste diferencial de fase (DIC) e tratados para histologia de cortes seriados, que auxiliaram nas identificações das espécies e gênero. Os outros mexilhões (1.440) tiveram seus tecidos processados conforme os protocolos de Histologia Clássica e da OIE: Monocamadas de hemócitos, Imprint e Cultivo em Meio de Tioglicolato de Ray. Através das análises dos cortes histológicos foi identificada a presença dos protozoários Ancistrocoma sp. e Nematopsis sp. e dos metazoários Tylocephalum sp., Urastoma cyprinae, Pseudomyicola spinosus, Monstrilla sp. e Bucephalus margaritae, já através dos protocolos da OIE, foi verificado que as doenças de notificação obrigatória não estão presentes nos cultivos de mexilhão de Santa Catarina. Dos patógenos registrados por esta pesquisa, o Cestoda Tylocephalum sp. é responsável pela ocorrência de infiltração hemocitária e o Trematoda Bucephalus margaritae, pelo alto índice de mexilhões de sexo indeterminado e castração parasitária

The increment of mytiliculture in the municipalities of Santa Catarina, Palhoça, Florianópolis, Governador Celso Ramos e Penha, generated the demand for pathogens identification in Perna perna. During the period July 2010 to June 2011 were collected 720 animals in each studied local, totaling 2,880 mussels. From the total collected, half (1,440) was observed under a microscope stereoscope, where was collected the tuberllary Urastoma cyprinae and the copepods Pseudomyicola spinosus and Monstrilla sp.. After sampling, the parasites were analyzed by scanning electron microscopy differential contrast microscope (DIC), and processed for histological serial sections for species identification. Other mussels (1,440) had their tissues processed according to classical histology protocols and OIE: Monolayers of hemocytes, Imprint and Cultivation Ray's Fluid Thioglycollate Medium. Through the analysis of histological sections showed the presence of protozoa Ancistrocoma sp. and Nematopsis sp. and metazoan Tylocephalum sp., Urastoma cyprinae, Pseudomyicola spinosus, Monstrilla sp. and Bucephalus margaritae, already through the OIE protocols, it was found that the notifiable diseases are not present in mussel cultivated in the studied location of Santa Catarina. Pathogens recorded by this survey, the Cestoda Tylocephalum sp. is responsible for the occurrence of hemocyte infiltration and the Trematoda Bucephalus margaritae, the high rate of indeterminate sex and parasitic castration mussels

The life cycle of Bucephalus margaritae Ozaki & Ishibashi, 1934 ( Digenea, Bucephalidae ) from the coast of Santa Catarina State, Brazil / O ciclo de vida de Bucephalus margaritae Ozaki e Ishibashi, 1934 (Digenea, Bucephalidae) da costa do Estado de Santa Catarina, Brasil

The orange disease is considered the main parasitosis in Perna perna mussel. It is caused by a complex life cycle bucephalid, involving three hosts, among them mollusks and fishes. With the aim of contributing to the knowledge of orange disease in mussel culture, the parasite life cycle was investigated. Experimental studies and monthly samples in the study area allowed the identification and characterization of the Bucephalus margaritae life cycle. Larvae and adults of B. margaritae were fixed in 5% formaldehyde, stained with Gomoris trichrome, clarified in creosote and mounted in Canada balsam. The cercariae are found in the first intermediate host P. perna inside the sporocysts, which have the form of orange and ramified filaments. The metacercariae encysts in the gills and gill cavity of the second intermediate host, the blenniid Hypleurochilus fissicornis. The definitive host Menticirrhus americanus is infected ingesting blenniids parasitized with metacercariae. The high parasitological indexes of B. margaritae suggests that M. americanus and H. fissicornis act as the main definitive and intermediate hosts, respectively, in the trematode life cycle. The blenniid H. fissicornis is a new intermediate host to the species. Key words: Bucephalus margaritae, Hypleurochilus fissicornis, life cycle, orange disease, Perna perna. (AU)

A bucefalose é considerada a principal parasitose do mexilhão Perna perna. É causada por um Bucephalidae, de ciclo de vida complexo, envolvendo três hospedeiros, entre eles, moluscos e peixes. Com o objetivo de se contribuir para o conhecimento da bucefalose em mexilhões de cultivo, foi investigado o ciclo de vida deste parasito. Estudos experimentais e coletas mensais na área de estudo permitiram caracterizar o ciclo de vida de Bucephalus margaritae. Larvas e adultos do parasito foram fixados em formol 5%, corados com tricrômico de Gômori, clarificados em creosoto e montados em lâminas permanentes com bálsamo do Canadá. As cercárias ocorrem no primeiro hospedeiro intermediário P. perna, no interior dos esporocistos que têm a forma de filamentos ramificados e alaranjados. As metacercárias encistam nas brânquias e cavidade branquial do segundo hospedeiro intermediário, o blenídeo Hypleurochilus fissicornis. O hospedeiro definitivo, Menticirrhus americanus, é infectado quando ingere blenídeos com metacercárias. Os elevados índices parasitológicos de B. margaritae sugerem que M. americanus e H. fissicornis sejam os principais hospedeiros definitivo e intermediário, respectivamente, deste trematódeo. O blenídeo H. fissicornis é um novo hospedeiro intermediário para a espécie.(AU)

The life cycle of Bucephalus margaritae Ozaki & Ishibashi, 1934 ( Digenea, Bucephalidae ) from the coast of Santa Catarina State, Brazil / O ciclo de vida de Bucephalus margaritae Ozaki e Ishibashi, 1934 (Digenea, Bucephalidae) da costa do Estado de Santa Catarina, Brasil

The orange disease is considered the main parasitosis in Perna perna mussel. It is caused by a complex life cycle bucephalid, involving three hosts, among them mollusks and fishes. With the aim of contributing to the knowledge of orange disease in mussel culture, the parasite life cycle was investigated. Experimental studies and monthly samples in the study area allowed the identification and characterization of the Bucephalus margaritae life cycle. Larvae and adults of B. margaritae were fixed in 5% formaldehyde, stained with Gomori’s trichrome, clarified in creosote and mounted in Canada balsam. The cercariae are found in the first intermediate host P. perna inside the sporocysts, which have the form of orange and ramified filaments. The metacercariae encysts in the gills and gill cavity of the second intermediate host, the blenniid Hypleurochilus fissicornis. The definitive host Menticirrhus americanus is infected ingesting blenniids parasitized with metacercariae. The high parasitological indexes of B. margaritae suggests that M. americanus and H. fissicornis act as the main definitive and intermediate hosts, respectively, in the trematode life cycle. The blenniid H. fissicornis is a new intermediate host to the species. Key words: Bucephalus margaritae, Hypleurochilus fissicornis, life cycle, orange disease, Perna perna.

A bucefalose é considerada a principal parasitose do mexilhão Perna perna. É causada por um Bucephalidae, de ciclo de vida complexo, envolvendo três hospedeiros, entre eles, moluscos e peixes. Com o objetivo de se contribuir para o conhecimento da bucefalose em mexilhões de cultivo, foi investigado o ciclo de vida deste parasito. Estudos experimentais e coletas mensais na área de estudo permitiram caracterizar o ciclo de vida de Bucephalus margaritae. Larvas e adultos do parasito foram fixados em formol 5%, corados com tricrômico de Gômori, clarificados em creosoto e montados em lâminas permanentes com bálsamo do Canadá. As cercárias ocorrem no primeiro hospedeiro intermediário P. perna, no interior dos esporocistos que têm a forma de filamentos ramificados e alaranjados. As metacercárias encistam nas brânquias e cavidade branquial do segundo hospedeiro intermediário, o blenídeo Hypleurochilus fissicornis. O hospedeiro definitivo, Menticirrhus americanus, é infectado quando ingere blenídeos com metacercárias. Os elevados índices parasitológicos de B. margaritae sugerem que M. americanus e H. fissicornis sejam os principais hospedeiros definitivo e intermediário, respectivamente, deste trematódeo. O blenídeo H. fissicornis é um novo hospedeiro intermediário para a espécie.

Desenvolvimento de juvenis da Panulirus laevicauda, alimentadas com moluscos e dieta peletizada / Development of early juveniles of Panulirus laevicauda, fed on molluscos and pelleted diet

Realizou-se este experimento no Centro de Tecnologia em Aquicultura da Universidade Federal do Ceará no período de 14 de março a 14 de julho de 2006. O objetivo foi comparar o desenvolvimento de juvenis recentes da Panulirus laevicauda, alimentadas com moluscos (Perna perna e Mytella falcata) e dieta peletizada. Desenvolveram-se três tratamentos (TA – P. perna, TB – M. falcata e TC – dieta peletizada) com quatro repetições, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado. A densidade de estocagem foi de um indivíduo por recipiente. A alimentação ofertada foi de 10% da biomassa. Na manutenção do experimento, mediram-se o pH, a temperatura e a salinidade e realizaram-se biometrias mensais. Ampliaram-se os seguintes testes estatísticos: Kolmogorov-Smirnov, teste “t” de Student, ANOVA e o teste do qui-quadrado. Os parâmetros físico-químicos não diferiram estatisticamente entre si (P > 0,05). As taxas em ganhos, incrementos, números de mudas, frequências de mudas e taxas de sobrevivência não apresentaram diferenças estatísticas entre os tratamentos (P > 0,05). A P. laevicauda tem ótima aceitação de uma dieta peletizada na sua alimentação. Já outras espécies de lagostas não se alimentam de tais dietas.

This experiment was carried out at the Technology Center of Aquaculture, Federal University of Ceara during the period of March 14th, 2006 to July 14th, 2006. The objective of this study was to compare the growth of early juveniles of Panulirus laevicauda, fed on molluscs (Perna perna and Mytella falcata) and pelleted feed. The experiments were delineated and conducted using completely randomized distributions. Three treatments (TA – P. perna, TB – M. falcata and TC – pellet feed) were repeated 4 times. Initial density used was one individual per container. The feed rate was 10 % of the individual biomass. The chemical and physical parameters of the experimental water (pH, temperature and salinity) were measured daily and the juveniles were measured verifying cephalotorax and total length and weighed at each 30 days of culture. For the statistical tests Analysis with Kolmogorov-Smirnov the Student Test (chemical and physical parameters), Analysis of Variance (ANOVA) and test CHI-SQUARE, were used. In this work chemical and physical parameters did not show differences among the treatments (P > 0.05). At the end of the experiment, growth rate, number and frequency of molts per individual, and survival rate did not show statistical differences (P > 0.05). P. laevicauda has a good acceptance of pelleted feed but other species of lobster did not feed of this type of diets.

Desenvolvimento de juvenis da Panulirus laevicauda, alimentadas com moluscos e dieta peletizada / Development of early juveniles of Panulirus laevicauda, fed on molluscos and pelleted diet

Realizou-se este experimento no Centro de Tecnologia em Aquicultura da Universidade Federal do Ceará no período de 14 de março a 14 de julho de 2006. O objetivo foi comparar o desenvolvimento de juvenis recentes da Panulirus laevicauda, alimentadas com moluscos (Perna perna e Mytella falcata) e dieta peletizada. Desenvolveram-se três tratamentos (TA P. perna, TB M. falcata e TC dieta peletizada) com quatro repetições, distribuídos em delineamento inteiramente casualizado. A densidade de estocagem foi de um indivíduo por recipiente. A alimentação ofertada foi de 10% da biomassa. Na manutenção do experimento, mediram-se o pH, a temperatura e a salinidade e realizaram-se biometrias mensais. Ampliaram-se os seguintes testes estatísticos: Kolmogorov-Smirnov, teste “t” de Student, ANOVA e o teste do qui-quadrado. Os parâmetros físico-químicos não diferiram estatisticamente entre si (P > 0,05). As taxas em ganhos, incrementos, números de mudas, frequências de mudas e taxas de sobrevivência não apresentaram diferenças estatísticas entre os tratamentos (P > 0,05). A P. laevicauda tem ótima aceitação de uma dieta peletizada na sua alimentação. Já outras espécies de lagostas não se alimentam de tais dietas.(AU)

This experiment was carried out at the Technology Center of Aquaculture, Federal University of Ceara during the period of March 14th, 2006 to July 14th, 2006. The objective of this study was to compare the growth of early juveniles of Panulirus laevicauda, fed on molluscs (Perna perna and Mytella falcata) and pelleted feed. The experiments were delineated and conducted using completely randomized distributions. Three treatments (TA P. perna, TB M. falcata and TC pellet feed) were repeated 4 times. Initial density used was one individual per container. The feed rate was 10 % of the individual biomass. The chemical and physical parameters of the experimental water (pH, temperature and salinity) were measured daily and the juveniles were measured verifying cephalotorax and total length and weighed at each 30 days of culture. For the statistical tests Analysis with Kolmogorov-Smirnov the Student Test (chemical and physical parameters), Analysis of Variance (ANOVA) and test CHI-SQUARE, were used. In this work chemical and physical parameters did not show differences among the treatments (P > 0.05). At the end of the experiment, growth rate, number and frequency of molts per individual, and survival rate did not show statistical differences (P > 0.05). P. laevicauda has a good acceptance of pelleted feed but other species of lobster did not feed of this type of diets.(AU)

Protocolo de Identificação e Quantificação de Bucefalose (Enfermida de Laranja) em mexilhões Perna perna / Protocol of Identification and Quantification of Bucephalosis (Orange Disease) in the Mussel Perna perna

Este trabalho propõe um protocolo de identificação e quantificação da bucefalose em mexilhões Perna perna, através da histologia clássica e análise estereológica. Dentre 50 indivíduos com 30 a 70 mm de comprimento, obtidos em cordas do cultivo experimental da Universidade Federal de Santa Catarina, na Praia de Sambaqui-Florianópolis/SC, foram identificados seis animais parasitados por Bucephalus sp., correspondendo a uma prevalência de 12%. Secções transversais inclinadas dos moluscos foram fixadas em Davidson, processadas por histologia clássica, cortadas (3 μm) e coradas com HHE. O volume fracionário do tecido do parasita (TP), do hospedeiro (TH) e dos espaços vazios (EV) foi quantificado por estereologia, com auxílio de gratícula de Weibel acoplada ao microscópio óptico. A objetiva de 10x foi mais eficiente que a de 40x, na análise microscópica das secções. Metade do total de animais analisados apresentou grau moderado (5-50% da secção com tecidos do parasita) de parasitismo, e a outra metade, grau pesado (> 50%). Não foram encontrados animais com parasitismo leve (< 5%) (AU)

This study proposes a protocol for the identification and quantification of bucephalosis in the mussel Perna perna, by classical histology and stereological methods. Among fifty animals with length between 30 and 70 mm, proceeding from experimental mussel culture strings of Universidade Federal de Santa Catarina, at Sambaqui Beach-Florianópolis/SC, six animals infected with Bucephalus sp. were identified, corresponding to a prevalence of 12%. Inclined transverse sections of the molluscs were fixed in Davidsons solution, processed through classical histology, cut (3 μm) and stained with HHE. The fractional volume of the parasite tissue (PT), host tissue (HT) and empty spaces (ES) were quantified by Weibel graticule attached to a microscope. The objective of 10x was more efficient than that of 40x, for the stereological analysis of the sections. Half of the infected animals presented a moderate rate of parasite infection (5-50% of the section with parasite tissue), while the other half presented greater rates (> 50%). Animals with light infection (< 5%) were not found.(AU)