Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants

ABSTRACT: Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.

RESUMO: Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.

Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants / Níveis de protodioscina em Brachiaria spp. em um sistema de produção de ovinos e uma breve revisão da literatura da intoxicação por Brachiaria spp. em ruminantes

Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.(AU)

Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.(AU)

Protodioscin levels in Brachiaria spp. in a sheep production system and a brief review of the literature of Brachiaria spp. poisoning in ruminants / Níveis de protodioscina em Brachiaria spp. em um sistema de produção de ovinos e uma breve revisão da literatura da intoxicação por Brachiaria spp. em ruminantes

Plants of the genus Brachiaria, used in several countries as forage, are poisonous to some livestock species. Their toxic principle is protodioscin, and the main form of clinical presentation of the toxicosis is hepatogenous photosensitization. Here we compare protodioscin levels in B. decumbens and B. brizantha and review the literature on the concentrations and methodologies of collection and analysis of the toxic principle in Brachiaria spp. and the risk of contamination of pastures by more toxic species that may facilitate poisoning by plants of this genus in sheep. The experiment was conducted in pastures originally formed by B. brizantha, with many B. decumbens invasion points. The occurrence of cases of poisoning by Brachiaria spp. was the criterion for confirming pasture toxicity. The forage samples were collected at ten random points every 28 days through manual grazing simulation. The samples were analyzed for protodioscin by high-performance liquid chromatography (HPLC) with light scattering by evaporation (ELSD) after being dried and crushed. In the flock of 69 sheep, five poisoning cases occurred, three sheep died, and two recovered. The protodioscin levels found in the evaluated pastures ranged from 0.70 to 0.45%; higher levels appeared in B. decumbens (7.09%) compared to 1.04% in B. brizantha. We suggest that Brachiaria spp. should be avoided in pastures where sheep are grazing.(AU)

Plantas do gênero Brachiaria, utilizadas em vários países como forragem, são tóxicas para várias espécies pecuárias. Seu princípio tóxico é a protodioscina, e a principal forma de apresentação clínica da toxicose é a fotossensibilização hepatógena. Este estudo teve como objetivo comparar os níveis de protodioscina em B. decumbens e B. brizantha e revisar a literatura sobre as concentrações e metodologias de coleta e análise do princípio tóxico em Brachiaria spp. e o risco de contaminação das pastagens por espécies mais tóxicas que podem facilitar a intoxicação por plantas desse gênero em ovinos. O experimento foi conduzido em pastagens originalmente formadas por B. brizantha, com diversos pontos de invasão por B. decumbens. Ocorrência de casos de intoxicação por Brachiaria spp. foi o critério para confirmação da toxicidade da pastagem. As amostras de forragem foram coletadas a cada 28 dias em dez pontos aleatórios por meio de simulação de pastejo manual. As amostras foram analisadas para protodioscina por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com dispersão de luz por evaporação (ELSD) após serem secadas e trituradas. No rebanho de 69 ovelhas, cinco desenvolveram a intoxicação, três morreram e duas se recuperaram. Os níveis de protodioscina encontrados nas pastagens avaliadas variaram de 0,70 a 0,45%; níveis mais elevados apareceram em B. decumbens (7,09%) em comparação com 1,04% em B. brizantha. Sugerimos que Brachiaria spp. deve ser evitada no pasto de ovelhas em pastejo.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. poisoning / Comparação entre dois métodos de coleta para determinar as concentrações de protodioscina em Brachiaria spp. e monitorar a intoxicação por Brachiaria spp

The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiaria spp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.(AU)

Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiaria spp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiaria spp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. poisoning / Comparação entre dois métodos de coleta para determinar as concentrações de protodioscina em Brachiaria spp. e monitorar a intoxicação por Brachiaria spp

The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiaria spp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.(AU)

Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiaria spp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiaria spp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.(AU)

Comparison of two collection methods to determine protodioscin concentrations in Brachiaria spp. and to monitor Brachiaria spp. Poisoning

ABSTRACT: The objective of this study was to evaluate the methods of collecting Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs. Total Collection) for the determination of protodioscin concentrations and to monitor the intoxication in sheep susceptible and resistant to poisoning by Brachiariaspp. The collection of Brachiaria spp. was done through two different methods. The first one consisted in throwing a metallic square at 10 random picket points. The second was performed simulating, with the hands, the grazing behavior of sheep. The leaf blades obtained by the two methods were conditioned in a forced ventilation oven. The extraction and quantification of protodioscin from the dry milled plant material was done by reverse-phase high-performance liquid chromatography (HPLC). The collections were carried out at three stages of the life of experimental lamb (suckling, rearing, and finishing). The lambs were divided into resistant and susceptible to intoxication by Brachiaria spp. The criterion for a lamb to be considered sensitive was to present some clinical signs at some stage of its life. No significant differences were observed between the general averages of the two collections when the evaluation was done in the whole period. However, a significant difference was found at the onset of the clinical signs. The concentrations of protodioscin in this period were higher in Brachiaria spp. collected by the simulating grazing method. Both methodologies were efficient to determine the level of protodioscin in the pastures of Brachiaria spp. However, during the periods when the outbreaks occurred, the simulated grazing method was more reliable.

RESUMO: Objetivou-se avaliar dois métodos de coleta de Brachiariaspp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e efetuar o monitoramento da intoxicação em rebanhos sensíveis e resistentes à intoxicação por Brachiaria spp. Foram realizadas coletas de Brachiariaspp. através de duas metodologias. A primeira consistiu em fazer o lançamento de um quadrado metálico em 10 pontos aleatórios do piquete. A segunda foi realizada simulando com as mãos o comportamento de pastejo dos ovinos. As lâminas foliares obtidas pelas duas metodologias foram acondicionadas em estufa de ventilação forçada. O material seco e moído foi encaminhado para extração e quantificação da protodioscina por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) de fase reversa. As coletas foram realizadas em três fases de vida dos cordeiros (cria, recria e terminação). Os cordeiros foram divididos em resistentes e sensíveis a intoxicação por Brachiaria spp. O critério para o ovino ser considerado sensível foi apresentar algum sinal clínico da intoxicação em alguma fase de sua vida. Não foram observadas diferenças significativas entre a média geral das duas coletas quando a avaliação foi feita no período total. Porém, foi observada diferença significativa no período de aparecimento dos casos. As concentrações de protodioscina neste período foram superiores pelo método do pastejo simulado. Ambas as metodologias mostraram-se eficientes para determinação da concentração da protodioscina nas pastagens de Brachiaria spp. No entanto, nos períodos em que ocorreram os surtos, o método do pastejo simulado foi mais fidedigno.

The effect of ensiling and haymaking on the concentrations of steroidal saponin in two Brachiaria grass species / O efeito da ensilagem e fenação sobre as concentrações de saponina esteroide em duas espécies de gramínea Brachiaria

Brachiaria (signalgrass) is now the most widely used tropical grass genus in Central and South America. However, Brachiaria spp. can cause hepatogenous photosensitization in livestock. Steroidal saponins, specifically protodioscin, present in Brachiaria spp. may be responsible for liver injury and subsequent photosensitization. The objective of this study was to determine the effect of ensiling Brachiaria decumbens and Brachiaria brizantha or making hay from Brachiaria decumbens on the concentrations of steroidal saponin in these grasses. Brachiaria grass had no detectable levels of the saponin protodioscin after 24 days of ensiling. In addition, in Brachiaria decumbens, the concentration of the protodioscin decreased 48% over the first three days after haymaking and then remained constant. These results suggest that livestock consuming Brachiaria either as silage or hay may have reduced risk of intoxication by protodioscin. .(AU)

Brachiaria atualmente é o gênero de gramínea tropical mais amplamente utilizado na América Central e do Sul. Entretanto, as espécies de Brachiaria podem causar fotossensibilização hepatógena em animais de produção. Saponinas esteroides, especificamente protodioscina, presentes em Brachiaria, podem ser responsáveis pelo dano hepático e consequentemente fotossensibilização. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da ensilagem de Brachiaria decumbens e Brachiaria brizantha e fenação de Brachiaria decumbens sobre a concentração de saponina esteroide. As amostras de Brachiaria ensiladas não tiveram concentrações detectáveis de saponina protodioscina depois de 24 dias de ensilagem. Assim como em Brachiaria decumbens, a concentração de protodioscina reduziu 48% nos três primeiros dias após a fenação e posteriormente manteve-se constante. Estes resultados sugerem que animais de produção, ao consumirem Brachiaria tanto como silagem ou feno, podem ter o risco de intoxicação por protodioscina reduzido.(AU)

Efeito da suplementação alimentar sobre a ocorrência de intoxicação por Brachiaria spp. em cordeiros

Após a introdução de gramíneas do gênero Brachiaria no Brasil, a intoxicação hepatógena passou a ser descrita com grande frequência e tornou-se uma dos principais problemas sanitários em rebanhos bovinos e ovinos criados extensivamente. Objetivou-se avaliar a influência de diferentes tratamentos nutricionais a cordeiros lactentes e na fase de terminação de diferentes origens genéticas, sobre as frequências de intoxicação causadas pela ingestão de Brachiaria spp. Além disso, objetivou-se comparar metodologias de coletas das pastagens para determinação das concentrações de protodioscina presentes nestas pastagens. No primeiro artigo avaliou-se a frequência de intoxicação em pastagens de Brachiaria spp. em 34 cordeiros lactentes suplementados com concentrado proteico em creep feeding e 34 cordeiros não suplementados. Constatou-se que baixas concentrações de protodioscina são consideradas tóxicas para cordeiros lactentes e que a ingestão de concentrado proteico em sistema creepfeeding diminuiu os efeitos da intoxicação por Brachiaria spp. nesses cordeiros. No segundo artigo objetivou-se avaliar a frequência de intoxicação por Brachiaria spp. em cordeiros com origens genéticas distintas na fase de terminação, submetidos a níveis crescentes de suplementação alimentar. Concluiu-se que os crescentes níveis de suplementação não foram suficientes para diminuir a frequência de intoxicação que foi determinada pela origem genética dos cordeiros. No entanto, a suplementação foi eficiente para minimizar os efeitos da intoxicação nos cordeiros na fase de terminação. No terceiro artigo objetivou-se avaliar métodos de coleta de Brachiaria spp. (Pastejo Simulado vs Coleta Total) para determinação das concentrações de protodioscina e realizar o monitoramento das intoxicações em rebanhos sensível e resistentes à intoxicação. Concluiu-se que ambas as metodologias são eficazes para determinação da protodioscina nas pastagens. No entanto, em períodos de surtos, o Pastejo simulado foi mais eficaz, pois retrata de maneira mais fidedigna as quantidades de protodioscina ingerida pelos cordeiros

After the introduction of grasses of Brachiaria genus in Brazil, hepatogenic intoxication been described with great frequency and has become one of the main sanitary problems in bovine and ovine cattle raised extensively. The objective of this study was to evaluate the influence of different nutritional treatments on suckling lambs and the termination phase of different genetic origins on the frequency of intoxication caused by the ingestion of Brachiaria spp. In addition, the objective was to compare pasture collection methodologies to determine the concentrations of protodioscin present in these pastures. In the first article the frequency of intoxication was evaluated in pastures of Brachiaria spp. in 34 suckling lambs supplemented with protein concentrate in creep feeding and 34 lambs not supplemented. It was found that low concentrations of protodioscin are considered toxic for suckling lambs and that the ingestion of protein concentrate in a creep-feeding system decreased the effects of Brachiaria spp. intoxication in these lambs. In the second article we aimed to evaluate the frequency of intoxication by Brachiaria spp. in lambs with distinct genetic origins in the termination phase, submitted to increasing levels of dietary supplementation. It was concluded that increasing levels of supplementation were not enough to decrease the frequency of intoxication that was determined by the genetic origin of the lambs. However, supplementation was efficient to minimize the effects of intoxication on lambs at the termination stage. In the third article the objective was to evaluate methods of Brachiaria spp. (Simulated Grazing vs Total Collection) to determine the concentrations of protodioscin and to conduct the monitoring of intoxication in susceptible and resistant herds of intoxication. It was concluded that both methodologies are effective for determination of protodioscin in the pastures. However, during periods of outbreaks, simulated grazing was more effective, as it more reliably portrays the amounts of protodioscin ingested by lambs.

ESTIMATIVAS DE CONSUMO POR OVINOS MANEJADOS SOB DIFERENTES OFERTAS DE FOLHA EM PASTAGEM DE BRACHIARIA SPP

Objetivou-se estabelecer um período de coleta, entre 3 ou 5 dias, que consiga validar experimentos de consumo em pastejo de Brachiaria spp. (syn. Brachiaria spp.), que seja capaz de apresentar estimação correta do valor nutritivo da forrageira e os componentes das fezes através de pastejo simulado e coleta retal de fezes única, uma vez ao dia. Avaliar os indicadores internos: matéria seca indigestível; fibra em detergente neutro indigestível; fibra em detergente ácido indigestível; lignina em detergente ácido indigestível; e indicadores externos: óxido crômico e dióxido de titânio (TiO2). Ao realizar as avaliações com o uso do indicador externo TiO2 notou-se dificuldade na aplicação da metodologia, com isso propõe-se uma adaptação, afim de facilitar sua quantificação. Os ovinos são animais selecionadores e preferencialmente escolhem folhas ao pastejarem, baseado nisso foi realizada a determinação do consumo de matéria seca dos animais submetidos a quatro níveis de ofertas de folha 60, 75, 90 e 105 g/kg e dentro dessas ofertas avaliar a concentração de protodioscina, logo sua capacidade de intoxicação. Não houve diferença significativa entre os períodos de coleta avaliados, podendo ser utilizado apenas 3 dias para avaliação em experimentos a pasto. O indicador óxido crômico por ser o mais utilizado em experimentos desse caráter e não diferindo da coleta total de fezes, foi aplicado como referência e com isso os indicadores dióxido de titânio e lignina em detergente ácido indigestível, não diferiam estaticamente entre si, demonstrando serem aptos e acurados para estimação do consumo de matéria seca (CMS) em experimentos a pasto utilizando cordeiros. A concentração de protodioscina variou entre as ofertas apresentando valor médios de 2,23 a 5,29 g/kg, sendo importante ressaltar que durante este experimento, foram relatadas 2 mortes por fotossensibilização. O CMS, foi influenciado negativamente pela concentração de protodioscina, devido a rebrota estimulada pelo pastejo dos animais aumentando sua concentração na forrageira. A digestibilidade e a cinética da degradação in vitro demonstraram a baixa degradação da forrageira e com isso a necessidade de maior tempo de retenção de partículas no rúmen. No Brasil grande parte dos trabalhos avaliando a protodioscina são apenas relatos de casos, mostrando clinicamente o que acontece ao animal, porém poucos discutem a ação da protodioscina dentro do rúmen. No entanto nota-se que sua atuação está associada à qualidade da forrageira. Para que a protodioscina venha a intoxicar os animais, os microrganismos ruminais necessitam realizar a sua degradação e quanto maior o tempo de retenção da partícula no rúmen, maior será a possibilidade de ocorrer a injuria

The objective was to establish a collection period, between 3 or 5 days, that can validate experiments of grazing consumption of Brachiaria spp. (syn. Brachiaria spp.), which is able to present correct estimation of the nutritive value of the forage and the components of the feces through simulated grazing and single rectal collection of feces once a day. Evaluate internal markers: indigestible dry matter; indigestible neutral detergent fiber; indigestible acid detergent fiber; indigestible acid detergent lignin; and external markers: chromium oxide and titanium dioxide (TiO2). When carrying out the evaluations using the external TiO2 indicator, it was noted that the methodology was difficult to apply, so an adaptation is proposed, in order to facilitate its quantification. Sheep are selective animals and prefer to select leaves when grazing. Based on this, the dry matter intake of the animals submitted to four levels of leaf offerings 60, 75, 90 and 105 g / kg was carried out. of protodioscin, thus its intoxication capacity. There was no significant difference between the collection periods evaluated, and only 3 days could be used for evaluation in pasture experiments. The indicator of chromium oxide being the most used in experiments of this character and not differing from the total collection of feces, was applied as reference and with this the indicators titanium dioxide and lignin in indigestible acid detergent did not differ statically among them, proving to be fit and accuracy for dry matter consumption (CMS) estimation in grass experiments using lambs. The concentration of protodioscin varied between the offers presenting average values of 2.23 to 5.29 g / kg, being important to note that during this experiment, 2 deaths were reported by photosensitization. The CMS was negatively influenced by the concentration of protodioscin, due to regrowth stimulated by grazing of the animals increasing their concentration in the forage. The digestibility and the kinetics of in vitro degradation demonstrated the low degradation of the forage and with this the need for a longer retention time of particles in the rumen. In Brazil, most of the studies evaluating protodioscin are only case reports, showing clinically what happens to the animal, but few discuss the action of protodioscin within the rumen. However, it is noted that its performance is associated with forage quality. In order for protodioscin to intoxicate the animals, the ruminal microorganisms need to perform their degradation and the longer the retention time of the particle in the rumen, the greater the possibility of injury.

PADRONIZAÇÃO PARA COLHEITA E CONSERVAÇÃO DE AMOSTRAS DE BRAQUIÁRIA PARA QUANTIFICAÇÃO DE SAPONINA E TOXIDADE SUBCRÔNICA DA DIOSGENINA EM Cavia porcellus

O gênero Brachiaria possui importantes espécies de forrageiras utilizadas em países localizados em regiões tropicais. No entanto, esse gênero de gramíneas está associado à fotossensibilização e intoxicações em animais de produção. Deste modo, objetivou-se com este estudo estabelecer o padrão para colheita, processamento e conservação de amostras de Brachiaria brizantha para quantificação de protodioscina e contagem de esporos de Pithomyces chartarum e a avaliação da Cavia porcellus (cobaias) como modelo experimental na intoxicação por diosgenina. Para a avaliação da Brachiaria brizantha, amostras foram colhidas de oito pastagens as quais foram subdivididas em folhas jovens, folhas maduras, folhas velhas e planta inteira e submetidas a nove diferentes métodos de processamento. Após separação e tratamento das amostras foi realizada a quantificação de saponinas e a contagem de esporos. Observou-se que na maioria dos tratamentos as folhas jovens apresentaram quantidades maiores de protodioscina que as folhas velhas e a planta inteira. Os tratamentos que mantiveram as maiores quantidades de protodioscina foram temperatura ambiente, estufa e estufa com ventilação forçada. Nas amostras das pastagens não foram encontrados esporos do fungo. Desta forma, conclui-se que a concentração de protodioscina é maior nas folhas jovens; a secagem em temperatura ambiente, em estufa ou em estufa de ventilação forçada são os melhores métodos para preservação de protodioscina e o congelamento de plantas para a quantificação de protodioscina não é recomendado. Para a avaliação das cobaias como modelos experimentais na intoxicação por diosgenina foram utilizadas 14 cobaias, divididas em dois grupos, o grupo tratado (GT) e o grupo controle (GC). O GT recebeu 480 mg/kg de diosgenina diluída em óleo vegetal e o GC recebeu somente o óleo vegetal, ambos por 30 dias. Para avaliação do hemograma e análises bioquímicas foram colhidas amostras sanguíneas no dia 0 (M0) e no dia 30 (M30). Na bioquímica plasmática foram realizadas análises para ALT, AST, GGT, ALP, ureia, creatinina, glicose, colesterol, HDL, triglicerídeos, lactato, colinesterase e cálcio. A hematologia e a bioquímica não apresentaram alterações relacionadas à doença hepática causada por saponinas. Na histologia apenas um animal apresentou hiperplasia de ductos biliares, as outras alterações observadas foram de forma geral inespecíficas. Conclui-se que, na dose utilizada, a administração da diosgenina a cobaias não produz lesões hepáticas expressivas nem alterações hematológicas e bioquímicas relacionadas a hepatopatia.

The genus Brachiaria has provided important forage species to the countries located in tropical regions. However, this genus of grass is associated with photosensitization and poisoning in animal production. Thus, the aim of this study was to establish the standard for collection, processing, and conservation of Brachiaria brizantha for protodioscin quantification and spore count from Pithomyces chartarum and the evaluation of guinea pig (Cavia porcellus) as an experimental model of poisoning by diosgenin. For Brachiaria brizantha evaluation, samples were collected from eight pastures, which were subdivided into young leaves, mature leaves, old leaves, and whole plant. After that, the samples were submitted to nine different drying and conservation treatments. After separation and treatment of the samples, saponins were quantified and spores were counted. In most of treatments, the young leaves presented larger amounts of protodioscin than the old leaves and the whole plant. The treatments that maintained the highest amounts of protodioscin were room temperature, oven, and oven with forced air circulation. No fungal spores were found in the pasture samples. Thus, we concluded that the concentration of protodioscin varies with the maturation stage of the leaves; drying at room temperature, in an oven, or in an oven with forced air circulation are the best methods, and freezing plants for preservation of protodioscin is not recommended. In the guinea pigs evaluation, 14 guinea pigs were divided into two groups, the treatment group (TG) and the control group (CG). The TG received 480 mg/kg of diosgenin and the CG received only vegetable oil. Both groups received the treatment for 30 days. Blood samples were collected on day 0 (M0) and day 30 (M30) for blood cell count and biochemical analyzes. In clinical biochemistry, the analyzes were performed for alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, gamma glutamyl trasferase, alkaline phosphatase, urea, creatinine, glucose, cholesterol, HDL, triglycerides, lactate, cholinesterase, and calcium. Hematology and biochemistry did not present alterations, which could not be related to hepatic disease caused by saponins. In histology, only one animal had bile duct hyperplasia, the other alterations observed were generally nonspecific. Therefore, we concluded that the administration of 480 mg/kg of diosgenin to guinea pigs did not produce significant hepatic lesions or hematological and biochemical alterations related to liver disease.