Antibiotic resistance profile of gram-negative bacteria isolated from dog nasal swab samples, and antibacterial and antioxidant activities of aqueous extracts of Alpinia purpurta (Vieill.) K. Schum (Zingiberaceae) / Perfil de resistência a antibióticos de bactérias gramnegativas isoladas de amostras de swab nasal de cães e atividades antibacteriana e antioxidante de extratos aquosos de Alpinia purpurta (Vieill.) K. Schum. (Zingiberaceae)

The indiscriminate use of antibiotics in veterinary medicine and their negligent use among dog owners have contributed to the rise of antibiotic resistance in microorganisms found in pets. In addition, the search for medicinal plants with antibacterial properties has made the evaluation of aqueous extracts of Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum an important issue. Thus, the aim of this work was to determine the antibiotic resistance profile of gram-negative bacteria isolated from nasal swab samples of dogs and assess the antibacterial activity of the aqueous extracts of leaves and rhizomes of A. purpurata. The bacteria identified were tested using the agar disc diffusion assay for the evaluation of antibiotic resistance. A total of 16 isolates were obtained from the 19 samples collected, with a high prevalence of Escherichia coli (n=5). There was a high rate of resistance to ß-lactams, where the highest percentage was seen for amoxicillin (72.5%). Aqueous leaf extracts had high levels of total phenolic compounds (637.47 µg GAE mg-1), differing significantly (p < 0.05) from aqueous rhizome extracts (228.64 µg GAE mg-1). There was no significant difference in EC50 of DPPH values between the aqueous extracts; however, the antioxidant capacity of rhizome extracts had higher values than leaf extracts. The minimum inhibitory concentration (MIC) of leaves and rhizomes for the evaluated bacteria ranged from 9000 to 32,000 µg mL-1. For the minimum bactericidal concentration (MBC), most bacteria showed an MBC over 38,400 µg mL-1 for the rhizome. In conclusion, the bacteria isolated from dog nasal swabs showed a high resistance profile for the antibiotics of the penicillin class. Additionally, the results from the analysis of the aqueous extracts of rhizomes and leaves of A. purpurata showed an antimicrobial effect possibly associated with a high content of total phenolic compounds; these results can create a scope for using these extracts together with conventional antibiotics to control the emergence of antibiotic resistance among microbial species.(AU)

O uso indiscriminado de antibióticos na Medicina Veterinária e negligência de tutores de cães no uso adequado contribuíram no aumento de resistência em animais de companhia. Além disso, a busca por plantas medicinais que tenham efeito antibacteriano tornou importante a avaliação de extratos aquosos de Alpinia purpurata (Vieill.) K. Schum. Dessa forma, o objetivo do trabalho foi determinar o perfil de resistência aos antibióticos de bactérias Gram-negativas isoladas de amostras de swabs nasais de cães e verificar a atividade antibacteriana dos extratos aquosos das folhas e dos rizomas de A. purpurata. As bactérias identificadas foram submetidas à técnica de disco difusão em ágar para avaliação da resistência aos antibióticos. Das 19 amostras colhidas, foram isoladas 16 bactérias, com maior prevalência para Escherichia coli (n=5). Verificou-se um alto índice de resistência aos ß-lactâmicos testados, com maior percentual para amoxicilina (72,5%). Os extratos aquosos das folhas apresentam elevados teores de compostos fenólicos totais (637,47 µg GAE mg-1 extrato), sendo diferente (p < 0,05) dos extratos aquosos dos rizomas (228,64 µg GAE mg-1 extrato). Não houve diferença significativa nos valores de EC50 ­ DPPH para os extratos aquosos, entretanto, para a capacidade antioxidante FRAP, os extratos dos rizomas de A. purpurata demonstraram maiores valores quando comparados com os extratos aquosos das folhas. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) das folhas e rizomas para as bactérias avaliadas variaram entre 9.000 a 32.000 µg mL-1. Para a Concentração Bactericida Mínima (CBM), a maioria das bactérias apresentaram CBM acima de 38.400 µg mL-1 para o rizoma. Conclui-se que as bactérias isoladas de swab nasal de cães apresentam alto perfil de resistência aos antibióticos da classe das penicilinas, no entanto, os resultados dos extratos aquosos dos rizomas e das folhas de A. purpurata sinalizam efeito antimicrobiano possivelmente associado ao elevado teor de compostos fenólicos totais, podendo ser utilizado em conjunto aos antibióticos convencionais, reduzindo assim sua resistência.(AU)

Identificação e perfil de sensibilidade de Enterobacter spp. isolados de leite bovino cru / Identification and sensitivity profile of Enterobacter spp. isolated from raw cow milk / Identificación y perfil de la sensibilidad de Enterobacter spp. aislados de leche cruda de vaca

A produção e o consumo de leite e derivados vêm aumentando anualmente no Brasil. A emergência do consumo de leite cru está relacionada à busca por produtos que mantenham preservadas suas propriedades nutricionais. No entanto, este hábito aumenta os riscos do consumo de leite e derivados contaminados por micro-organismos patogênicos. As bactérias do gênero Enterobacter são amplamente distribuídas na natureza e fazem parte da microbiota do trato gastrintestinal humano e animal. Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Pantoea agglomerans e Cronobacter sakazakii são considerados patógenos oportunistas. Nesse sentido, o presente estudo investigou a ocorrência e a diferenciação bioquímica de espécies de Enterobacter isolados de leite bovino cru, a caracterização do perfil de sensibilidade aos antimicrobianos e a pesquisa de genes de resistência. Do total de 104 cepas de Enterobacter spp. foram identificadas E. cloacae (n=39), Pantoea agglomerans (n=23), Cronobacter sakazakii (n=18) e E. aerogenes (n=9). Destas, 26% apresentaram resistência a três ou mais antimicrobianos. O gene blaTEM foi encontrado em 27% dos isolados. Este achado alerta quanto ao risco de infecções por micro-organismos ambientais resistentes, associados ao consumo de leite bovino cru.

The production and consumption of milk and dairy products is growing fast in Brazil. The increase consumption of raw milk is related to the interest for products that keep conserved their nutritional properties. However, this habit increases the risks of consumption of milk and dairy products contaminated with pathogenic microorganisms. Enterobacter spp. is widely distributed in nature and is part of the commensal microbiota of the intestinal tracts of humans and animal. Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Pantoea agglomerans and Cronobacter sakazakii are recognized as opportunistic pathogens. The current study investigated the occurrence and the differentiation of Enterobacter species isolated from raw cow milk, the characterization of sensitivity profile to antimicrobials and presence of resistant genes. From a total of 104 strains of Enterobacter spp. were identified E. cloacae (n=39), Pantoea agglomerans (n=23), Cronobacter sakazakii (n=18) and E. aerogenes (n=9). Among these, 26% were resistant to three or more antimicrobials. The blaTEM gene was found in 27% of the isolates. Here, we highlighted the risk of infection by potential environmental microorganisms, resistant to some antimicrobials, associated with consumption of raw cow milk.

La producción y el consumo de leche y productos lácteos está aumentando anualmente en Brasil. El surgimiento del consumo de leche cruda se relaciona con la búsqueda de productos que conservan sus propiedades nutricionales. Esta conducta aumenta riesgos del consumo de leche y productos lácteos contaminados con microorganismos patógenos. Las bacterias del género Enterobacter son ampliamente distribuidas en la naturaleza y forma parte de los microorganismos comensales del aparato gastrointestinal humano y animal. Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Pantoca agglomerans y Cronobacter sakazakii son citadas como patógenos oportunistas. De esta manera, este estudio investigó la ocurrencia y diferenciación bioquímica de Enterobacter spp. aislados de leche cruda de ganado bobino, la caracterización del perfil de sensibilidad frente a los antimicrobianos y la detección de los genes de resistencia. Del total de 104 cepas de Enterobacter spp. se identificaron E. cloacae (n=39), Pantoea agglomerans (n=23), Cronobacter sakazakii (n=18), E. aerogenes (n=9). De estos, 26% mostraron resistencia a tres o más antimicrobianos. En 27% de las cepas el gen blaTEM fue detectado. Por lo tanto, este hallazgo advierte sobre el riesgo de infecciones por microorganismos resistentes ambientales, asociados con el consumo de leche cruda de vaca.

Heteroantagonismo entre estirpes de Enterobacter agglomerans isoladas de urubu (Coragyps atratus) como produtoras e Pseudomonas aeruginosa como reveladoras / Evaluation of the heteroantagonism between Enterobacter agglomerans strains isolated from vulture (Coragyps atratus) for production and Pseudomonas aeruginosa as developed

Avaliou-se o heteroantagonismo entre Enterobacter agglomerans isolada do trato gastrintestinal de urubu (Coragyps atratus) e Pseudomonas aeruginosa isoladas do ambiente hospitalar. Foram utilizados o método de sobrecamada ou lento e a técnica direta ou de poços. Pelo método da sobrecamada, de 196 testes realizados para pesquisa da atividade antagonista, foi detectada a presença de halos de inibição relacionados ao fenômeno de heteroantagonismo em 118 deles (60,2 por cento). Pelo método de poços, obtiveram-se resultados semelhantes. As sete amostras de E. agglomerans foram capazes de realizar heteroantagonismo nas condições testadas, que foram detectados pela formação de halos claros de inibição. O extrato de levedura adicionado a 1 por cento no meio de cultura foi um suplemento adequado para a demonstração do antagonismo.(AU)

The heteroantagonism between Enterobacter agglomerans, isolated from the gastrointestinal tract of American vulture Coragyps atratus, and Pseudomonas aeruginosa isolated from a hospital environment was evaluated. The slow (layer) and the wells (direct) techniques were tested, using agar and soy tryptone broth pH 7.3 at 37ºC. Through the slow method from 196 tests, inhibition growth halos, related heteroantagonism phenomenon observed in 118, corresponding to 60.2 percent positive results. Equivalent positive results were detected using wells (direct) methodology. The seven samples of E. agglomerans tested were capable of revealing heteroantagonism in the experimental conditions; antagonism reveled by the presence of a clear growth inhibition halo. The added 1 percent yeast extract to media was adequate for revealing antagonisms best.(AU)

Biological control of fire blight in pear orchards with a formulation of Pantoea agglomerans strain Eh 24

Biological control by using epiphytic bacteria against Erwinia amylovora has been considered as an alternative method for controlling the disease. Talc-based formulation of Pantoea agglomerans strain Eh-24 was applied at 30% and 100% bloom on two pear orchards which were selected from different locations in the Aegean Region in Turkey. Pear orchard trials were replicated for two years (1999 and 2000) in each place. Talc-based formulation of P. agglomerans strain Eh-24 was sprayed on pear trees which were naturally infected with E. amylovora. In the orchard trials conducted in 1999 and 2000, talc-based formulation of P. agglomerans strain Eh-24 reduced the percentage of blighted blossoms on pear orchards by 63% to 76%, approximately. Copper oxychloride+maneb was less effective in reducing the incidence of blossom infection by E. amylovora in each pear orchard than the bioformulation treatment. P. agglomerans strain Eh-24 labelled with StrR+ was applied at 30% and 100% bloom to monitor the colonization and population dynamics of P. agglomerans on pear blossoms. The population size of P. agglomerans strain Eh-24 strR+ on pear blossoms increased from 2x10(4) to 1.3x10(6) cfu per blossom over 18 days.

Controle biológico de Erwinia amylovora através do uso de bactérias epifíticas tem sido considerado um método alternativo para o controle de "fire blight". Uma formulação de Pantoea agglomerans Eh 24 em talco foi utilizada em pereiras a 30% e a 100% de floração, em duas plantações selecionadas na região Aegean da Turquia. Os experimentos foram repetidos duas vezes (1999 e 2000) em cada plantação. A formulação de P. agglomerans foi aspergida nas pereiras naturalmente infectadas com E. amylovora. Nos experimentos de 1999 e 2000, a redução da porcentagem de ocorrência de "fire blight" foi reduzida aproximadamente em 63% e em 76%, respectivamente. Oxicloreto de cobre + maneb foi menos eficiente na redução da infecção por E. amylovora do que o tratamento com a bioformulação. P. agglomerans Eh 24 marcada com StrR+ foi aplicada a 30% e a 100% de floração para monitorar a colonização e a dinâmica da população de P. agglomerans nos brotos das pereiras. Após 18 dias, a população de P. agglomerans aumentou de 2x10(4) para 1,3 x 10(6) UFC/broto.

IDENTIFICAÇÃO E PERFIL DE SENSIBILIDADE DE Enterobacter spp. ISOLADOS DE LEITE BOVINO CRU

A produção e o consumo de leite e derivados vêm aumentando anualmente no Brasil. A emergência do consumo de leite cru está relacionada à busca por produtos que mantenham preservadas suas propriedades nutricionais. Esta falsa ideia aumenta o risco do consumo de leite e derivados contaminados por micro-organismos patogênicos. As bactérias do gênero Enterobacter são amplamente distribuídas na natureza e fazem parte da microbiota do trato gastrointestinal humano e animal.  Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Pantoea agglomerans e Cronobacter sakazakii são apontadas como patógenos oportunistas. Nesse sentido, o estudo buscou a identificação e diferenciação bioquímica de espécies de Enterobacter spp. a partir de isolados de leite bovino cru, a caracterização do perfil de sensibilidade a antimicrobianos e a pesquisa de genes de resistência. A partir de 104 cepas de Enterobacter spp. foram identificadas E. cloacae (39), Pantoea agglomerans (23), Cronobacter sakazakii (18) e E. aerogenes (9). Destas, 26% apresentaram resistência a três ou mais antimicrobianos. O gene blaTEM foi encontrado em 27% dos isolados. Dessa forma, este estudo alerta quanto ao risco de infecções por micro-organismos resistentes, potencialmente patogênicos, associados ao consumo de leite bovino cru.