Frequência de lesões sugestivas de tuberculose em bovinos abatidos no estado do Espírito Santo e perdas econômicas aos produtores / Frequency of suggestive lesions of tuberculosis in bovine slaughtered in the state of Espírito Santo and economic losses for farmers

A bovinocultura de corte tem papel fundamental na economia do Brasil, que atualmente é um dos maiores produtores, consumidores e exportadores de carne bovina, e consequentemente se faz necessária a inspeção sanitária desses animais abatidos no país. A legislação vigente determina que quando as carcaças possuem indicativos de doenças, como a tuberculose bovina, podem ser condenadas ou aproveitadas condicionalmente. A tuberculose bovina é uma zoonose crônica causada pelo bacilo Mycobacterium bovis que carece de estudos para estabelecer a sua frequência em frigoríficos no país, bem como as consequentes perdas econômicas aos pecuaristas decorrentes da condenação de carcaças e vísceras. Assim, esse trabalho objetivou analisar a frequência de condenação de carcaças de bovinos do Estado do Espírito Santo, em um frigorífico que condena todos os casos de tuberculose, durante os anos de 2019 a 2021, e estimar as perdas econômicas aos produtores. Verificou-se que entre os 156.800 animais abatidos, 120 (0,076%) apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, o que ocasionou uma perda econômica de R$ 461.160,00 (U$ 85.338,40). Conclui-se que a tuberculose é endêmica e responsável por importantes perdas econômicas para a cadeia produtiva da carne nesse estado. Também se destacou a importância da inspeção sanitária em abatedouros-frigoríficos de bovinos para reduzir os riscos à saúde pública.

Cattle farming has a fundamental role in the economy of Brazil, which is currently one of the largest producers, consumers, and exporters of beef, and consequently it is necessary to inspect meat from cattle slaughtered in the country. The current legislation establishes that when carcasses have signs of diseases, such as bovine tuberculosis, should be condemned or conditionally used. Bovine tuberculosis is a chronic zoonosis caused by Mycobacterium bovis that requires epidemiological studies to establish its frequency in abattoirs and the economic losses due condemnation of viscera and carcasses for beef farmers. Thus, this study aimed to analyze the frequency of condemnation of bovine carcasses slaughtered in the state of Espírito Santo, in an abattoir that condemned all cases of tuberculosis, during the years 2019 to 2021, and to estimate the economic losses to farmers. Among the 156,800 animals slaughtered, 120 (0.076%) had lesions suggestive of tuberculosis, which caused an economic loss of U$ 85,338.40 (R$ 461,160.00). Bovine tuberculosis is endemic and responsible for important economic losses to the meat production chain in this state. Additionally, the importance of inspecting beef in abattoirs to reduce the risks for public health was highlighted.

Indirect ELISA as a complementary diagnostic method of bovine tuberculosis / ELISA indreto como método complementar de diagnóstico da tuberculose bovina

Bovine tuberculosis is an economic and health problem, requiring precise diagnostic methods for its control and eradication. The aim of this study was to evaluate the performance of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the diagnosis of bovine tuberculosis. A total of 1,644 cattle from eight dairy herds were evaluated using the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Three of the herds had no recent tuberculosis infection, and the other five had shown positive results in a previous tuberculin test. For the serological diagnosis of tuberculosis, a commercial ELISA antibody test kit for Mycobacterium bovis was used. Serum samples from 846 cattle from the eight herds were evaluated using ELISA for M. bovis. Animals that were positive based on either CCTT or ELISA for M. bovis or both were sent to slaughter. Samples of their lungs, livers, and lymph nodes were collected and stored under refrigeration for microbiological culture and subsequent confirmation by polymerase chain reaction. Samples from the same tissues were also fixed with 10% formaldehyde in bottles for histopathological examination and stained with hematoxylin and eosin (HE). Of the 1,644 cattle, 61 were considered positive and 65 inconclusive based on CCTT. Retesting of the inconclusive samples identified an additional 19 positive cases, totaling 80 (4.8%) CCTT-positive animals from five herds. ELISA for M. bovis identified 4.2% (36/846) positive cattle, of which 35 were considered negative and one inconclusive based on CCTT. Of the 36 positive cases identified by ELISA for M. bovis, 27 were euthanized, 11% (3/27) showed suggestive lesions of tuberculosis on macroscopic examination, and two were confirmed by histological, microbiological, and PCR methods. The weak association of ELISA for M. bovis with the results obtained by macroscopic, histological, and microbiological isolation indicates the fragility of ELISA performance in field conditions. Therefore, it is suggested that its use as a complementary method for herd sanitation be based on the local epidemiological situation.

A tuberculose bovina é um problema econômico mundial e de saúde, que requer métodos de diagnóstico precisos para controle e erradicação. Objetivou-se com este estudo avaliar o desempenho de um teste comercial de ELISA no diagnóstico da tuberculose bovina. Foram avaliados pelo teste cervical comparativo (TCC) 1644 bovinos, provenientes de oito rebanhos de exploração leiteira, sendo três deles sem histórico recente da doença, e outros cinco com resultados positivos no último exame de tuberculinização. Para o diagnóstico sorológico da tuberculose utilizou-se um kit comercial de ELISA Mycobacterium bovis antibody test (ELISA M. bovis). Amostras de soro sanguíneo de 846 bovinos provenientes dos mesmos rebanhos foram também avaliadas no ELISA M. bovis. Os bovinos positivos no TCC e/ou ELISA M. bovis foram encaminhados para o abate sanitário. Dos positivos no ELISA para M. bovis foi realizado o exame macroscópico das carcaças e classificação das mesmas em: com presença ou ausência de lesões. Amostras de pulmão, fígado, e linfonodos, foram colhidas em duplicata para realização dos exames de cultivo microbiológico com posterior confirmação por PCR, e exame histopatológico com coloração de hematoxilina e eosina (HE). Dos 1,644 bovinos, 61 foram considerados positivos e 65 inconclusivos no TCC. O reteste dos inconclusivos identificou mais 19 positivos. No total, 80 (4,8%) bovinos positivos no TCC, provenientes de 5 rebanhos foram encaminhados para abate. O ELISA para M. bovis identificou 4,2% (36/846) de bovinos positivos, sendo 36 considerados negativos e um inconclusivo no exame de tuberculinização. Dos positivos no ELISA para M. bovis, 27 foram eutanasiados, e no exame macroscópico das carcaças 11% (3/27) dos animais apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, e em apenas dois houve confirmação da doença pelos métodos histológico, microbiológico e PCR. A baixa associação dos resultados obtidos no ELISA para M. bovis com os exames macroscópico, histológico e isolamento microbiológico apontam para a fragilidade do desempenho do ELISA para o diagnóstico de tuberculose. Sugere-se assim que seu uso como método complementar para saneamento de rebanhos, seja adotado com cautela e considere a situação epidemiológica local.

The Rv2807 target gene: a determining factor to directly detect Mycobacterium bovis from suspected bovine tuberculosis lesions / Gene alvo Rv2807: um fator determinante para detectar Mycobacterium bovis diretamente de lesões suspeitas de tuberculose bovina

Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis caused by Mycobacterium bovis, a species belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) group. Direct bTB diagnosis from suggestive lesions can be performed by nested q-PCR targeting the Rv2807 gene present in the MTC group, as well as the TbD1 gene, present in M. bovis. In this context, the aim of the present study was to assess the importance of considering positive MTC results for the Rv2807 target gene obtained through the nested real time polymerase chain reaction (nested q-PCR) applied to samples obtained directly from suspected bTB lesions. A total of 174 samples of suggestive bTB caseous lesions were obtained during cattle slaughter in slaughterhouses in the state of Mato Grosso, Brazil. DNA was extracted from the lesions and nested q-PCR was performed to detect both MTC and M. bovis. Both samples positive for the Rv2807 (41/174) and TbD1 (29/174) were submitted to bacterial culturing (23/41), and the DNA of the isolates (23) was extracted and submitted again to nested q-PCR. The Rv2807 gene (MTC) was previously amplified by nested q-PCR directly from the lesions, although the TbD1 gene specific for M. bovis was not amplified previously in four of the successfully isolated samples (4/23), only following isolation, and only the Rv2807 gene was amplified before and after isolation. In conclusion, the target gene Rv2807(MTC) exhibited higher positivity in the analyzed samples compared to the TbD1 gene (M. bovis).

A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, uma espécie pertencente ao grupo do complexo Mycobacterium tuberculosis (MTC). O diagnóstico direto de bTB a partir de lesões sugestivas pode ser realizado por nested q-PCR visando o gene Rv2807 presente no grupo MTC, bem como o gene TbD1, presente em M. bovis. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a importância de considerar os resultados de MTC positivos para o gene alvo Rv2807 obtidos através da reação em cadeia da polimerase nested real time (nested q-PCR) aplicada a amostras obtidas diretamente de lesões suspeitas de bTB. Um total de 174 amostras de lesões caseosas sugestivas de bTB foram obtidas durante o abate de bovinos em frigoríficos do estado de Mato Grosso, Brasil. DNA foi extraído das lesões e nested q-PCR foi realizado para detectar tanto MTC quanto M. bovis. Ambas as amostras positivas para Rv2807 (41/174) e TbD1 (29/174) foram submetidas a cultura bacteriana (23/41), e o DNA dos isolados (23) foi extraído e submetido novamente à nested q-PCR. O gene Rv2807 (MTC) foi previamente amplificado por nested q-PCR diretamente das lesões, embora o gene TbD1 específico para M. bovis não tenha sido amplificado anteriormente em quatro das amostras isoladas com sucesso (4/23), apenas após o isolamento, e apenas o gene Rv2807 foi amplificado antes e após o isolamento. Em conclusão, o gene alvo Rv2807 (MTC) apresentou maior positividade nas amostras analisadas em relação ao gene TbD1 (M. bovis).

Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.

Tuberculosis in bovine slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, Brazil / Tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

Between November 2017 and August 2018, in order to determine the occurrence of tuberculosis in cattle slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, 11,610 bovine carcasses underwent a routine post-mortem inspection. One animal presented suggestive lesions and samples from lung, spleen and heart were submitted to microbiological culture in Stonebrink medium for 90 days and molecular analysis by nested-PCR. For histopathological examination and Ziehl Neelsen staining, the omentum was used. In the cultured samples, two of them (heart and spleen) showed growth, but were not confirmed as M. bovis by conventional PCR. At nested-PCR, the samples showed amplification for the TbD1 region. The presence of numerous granulomas was detected in the histopathological examination characterized by anecrotic center and areas of mineralization, as well as the presence of acid-fast bacilli (AFB) in the Ziehl Neelsen stain. Microbiological culture can show false negative results, despite being considered a gold standard technique, although it takes time. Nested-PCR and histopathology show fast and effective results for the diagnosis of the disease. The presence of positive animals represents a public health risk in the studied region. Therefore, one of the essential systems applied to the control of bovine tuberculosis is the epidemiological surveillance of animals in slaughterhouses.

Entre novembro de 2017 e agosto de 2018, com objetivo de determinar a ocorrência de tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, 11.610 carcaças de bovinos passaram por inspeção post-mortem de rotina. Um animal apresentou lesões sugestivas e amostras de pulmão, baço e coração foram submetidas ao cultivo microbiológico em meio Stonebrink por 90 dias e análise molecular pela nested-PCR. O omento foi utilizado para exame histopatológico e coloração de Ziehl Neelsen. Nas amostras cultivadas, duas (coração e baço) evidenciaram crescimento, mas M. bovis não foi confirmado na PCR convencional. Já na nested-PCR, as amostras exibiram amplificação para a região TbD1. Foi detectada a presença de inúmeros granulomas no exame histopatológico caracterizados por possuírem um centro necrótico e áreas de mineralização, bem como a presença de bacilos Álcool-ácido resistentes (BAAR)na coloração de Ziehl-Neelsen. A cultura microbiológica pode apresentar resultados falso-negativos, apesar de ser considerada uma técnica padrão-ouro, embora demorada. A nested-PCR e a histopatologia apresentam resultados rápidos e eficazes para o diagnóstico da enfermidade. A presença de animais positivos representa um risco a saúde pública na região estudada. Portanto, um dos sistemas essenciais aplicados ao controle da tuberculose bovina é a vigilância epidemiológica dos animais em abatedouros.

Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.(AU)

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.(AU)

Tuberculosis in bovine slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, Brazil / Tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, Brasil

Between November 2017 and August 2018, in order to determine the occurrence of tuberculosis in cattle slaughtered in the semi-arid region of Rio Grande do Norte, 11,610 bovine carcasses underwent a routine post-mortem inspection. One animal presented suggestive lesions and samples from lung, spleen and heart were submitted to microbiological culture in Stonebrink medium for 90 days and molecular analysis by nested-PCR. For histopathological examination and Ziehl Neelsen staining, the omentum was used. In the cultured samples, two of them (heart and spleen) showed growth, but were not confirmed as M. bovis by conventional PCR. At nested-PCR, the samples showed amplification for the TbD1 region. The presence of numerous granulomas was detected in the histopathological examination characterized by anecrotic center and areas of mineralization, as well as the presence of acid-fast bacilli (AFB) in the Ziehl Neelsen stain. Microbiological culture can show false negative results, despite being considered a gold standard technique, although it takes time. Nested-PCR and histopathology show fast and effective results for the diagnosis of the disease. The presence of positive animals represents a public health risk in the studied region. Therefore, one of the essential systems applied to the control of bovine tuberculosis is the epidemiological surveillance of animals in slaughterhouses.(AU)

Entre novembro de 2017 e agosto de 2018, com objetivo de determinar a ocorrência de tuberculose em bovinos abatidos no semiárido do Rio Grande do Norte, 11.610 carcaças de bovinos passaram por inspeção post-mortem de rotina. Um animal apresentou lesões sugestivas e amostras de pulmão, baço e coração foram submetidas ao cultivo microbiológico em meio Stonebrink por 90 dias e análise molecular pela nested-PCR. O omento foi utilizado para exame histopatológico e coloração de Ziehl Neelsen. Nas amostras cultivadas, duas (coração e baço) evidenciaram crescimento, mas M. bovis não foi confirmado na PCR convencional. Já na nested-PCR, as amostras exibiram amplificação para a região TbD1. Foi detectada a presença de inúmeros granulomas no exame histopatológico caracterizados por possuírem um centro necrótico e áreas de mineralização, bem como a presença de bacilos Álcool-ácido resistentes (BAAR)na coloração de Ziehl-Neelsen. A cultura microbiológica pode apresentar resultados falso-negativos, apesar de ser considerada uma técnica padrão-ouro, embora demorada. A nested-PCR e a histopatologia apresentam resultados rápidos e eficazes para o diagnóstico da enfermidade. A presença de animais positivos representa um risco a saúde pública na região estudada. Portanto, um dos sistemas essenciais aplicados ao controle da tuberculose bovina é a vigilância epidemiológica dos animais em abatedouros.(AU)

Detection of Mycobacterium sp. by multiplex PCR directly from suspicious granulomas from cold chambers in the state of Bahia, Brazil

ABSTRACT The diagnosis of bovine tuberculosis (TB) by molecular techniques has been broadly studied. These methods allow accelerating the diagnosis, in addition to presenting high specificity and sensitivity in the identification of the pathogen, critical characteristic for public health, especially when it comes to the direct diagnosis of the biologic samples, which has been little explored. This paper has evaluated a multiplex polymerase chain reaction (mPCR) as a tool to diagnose TB, which was performed directly on the granulomatous material of suspicious lesions collected in a cold chamber under state inspection in the state of Bahia, Brazil. Of the 74 samples evaluated, 14.86% were positive, with 10.81% positive for mPCR and culture, 4.05% negative for cultivation and positive for mPCR. The correlation between the cultivation and the mPCR presented agreeance higher than 61.54% of the cases. The results have indicated that the protocol proved itself effective, fast and very promising in the surveillance in slaughterhouses for the diagnosis of tuberculosis directly from the granuloma.

Detection of Mycobacterium sp. by multiplex PCR directly from suspicious granulomas from cold chambers in the state of Bahia, Brazil

The diagnosis of bovine tuberculosis (TB) by molecular techniques has been broadly studied. These methods allow accelerating the diagnosis, in addition to presenting high specificity and sensitivity in the identification of the pathogen, critical characteristic for public health, especially when it comes to the direct diagnosis of the biologic samples, which has been little explored. This paper has evaluated a multiplex polymerase chain reaction (mPCR) as a tool to diagnose TB, which was performed directly on the granulomatous material of suspicious lesions collected in a cold chamber under state inspection in the state of Bahia, Brazil. Of the 74 samples evaluated, 14.86% were positive, with 10.81% positive for mPCR and culture, 4.05% negative for cultivation and positive for mPCR. The correlation between the cultivation and the mPCR presented agreeance higher than 61.54% of the cases. The results have indicated that the protocol proved itself effective, fast and very promising in the surveillance in slaughterhouses for the diagnosis of tuberculosis directly from the granuloma.(AU)

Tuberculosis outbreak in intensive swine farming from southern Brazil / Surto de tuberculose em suínos de criação intensiva no Sul do Brasil

Mycobacterium tuberculosis var. bovis is the etiologic agent of animal tuberculosis (aTB), a neglected zoonotic disease. Animal tuberculosis can affect many species, including swine. aTB-consistent granulomas in these animals lead to carcass disposal, generating economic losses and posing risks to human health. In the present study, an aTB outbreak was identified at an intensive swine farming operation in Southern Brazil. Inspection during swine slaughter revealed aTB-suspected lesions, which were collected for diagnosis by histology, PCR, and bacterial isolation. The animals had no clinical signs of tuberculosis. Granulomatous lesions were identified in 0.73% (59/8,071) of the slaughtered swine, and were confirmed by histology. Nine samples were further examined by PCR and bacterial isolation, with 44.4% and 55.5% positive results, respectively. Data from abattoirs subjected to federal surveillance show an aTB prevalence in Brazil of <0.001%. The present data thus indicate a swine aTB outbreak in intensive breeding. Swine infection can be related to exposure to infected animals or to contaminated food or environment. Biosecurity measures must be taken to avoid aTB transmission. Although certified swine breeding farms adopt such measures, this report indicates that constant monitoring is crucial, and greater control in swine breeding and finishing units is required to prevent outbreaks and spread of tuberculosis.

Mycobacterium bovis é o agente etiológico da tuberculose animal (aTB), uma doença zoonótica negligenciada. A tuberculose animal pode afetar muitas espécies, incluindo suínos. Os granulomas compatíveis com a aTB nesses animais levam ao descarte de carcaças, gerando perdas econômicas e trazendo riscos à saúde humana. No presente estudo, um surto de aTB foi identificado em um sistema de criação intensiva de suínos na região Sul do Brasil. A inspeção durante um abate de suínos revelou lesões suspeitas de tuberculose, as quais foram coletadas para diagnóstico por histologia, PCR e isolamento bacteriano. Os animais não apresentavam sinais clínicos de tuberculose. Lesões granulomatosas foram identificadas em 0,73% (59/8.071) dos suínos abatidos, e foram confirmadas pela histologia. Nove amostras foram posteriormente examinadas por PCR e isolamento bacteriano, com 44,4% e 55,5% de resultados positivos, respectivamente. Dados de frigoríficos submetidos à vigilância federal demostram prevalência da aTB de < 0,001% no Brasil. Os dados presentes indicam, portanto, um surto de aTB em suínos de criação intensiva. A infecção em suínos pode estar relacionada à exposição a animais infectados, alimentos ou ambientes contaminados. Medidas de biossegurança devem ser tomadas para evitar a transmissão da aTB. Embora as granjas suinícolas certificadas adotem tais medidas, este relato indica que o monitoramento constante é crucial, e maior controle nas unidades de criação e terminação de suínos é necessário para prevenir surtos e disseminação da tuberculose.

Spoligotyping, genotyping, and spatial distribution of Mycobacterium bovis in cattle in the state of Bahia, Brazil

ABSTRACT: Mycobacterium bovis is responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The knowledge of the distribution and the precise identification of this disease, including advanced diagnoses such as spoligotyping, allows choosing the best strategies to fight the diseases progress. The present work aimed to investigate mycobacterias presence, genotype their strains, and evaluate tuberculosis cases spatial distribution from suggestive lesions in carcasses of bovine and buffalo inspected in slaughterhouses under an official inspection regime in the state of Bahia, Brazil. The study investigated 453,417 animals. Among these, 31 (0.007%) from 17 municipalities were suspected of tuberculosis. Among the culture medium growth, 95% of these were categorized as alcohol-acid resistant bacilli (BAAR). All isolates were subjected to spoligotyping and 95% were confirmed as M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). The strain SB0120 was the most prevalent, and this profile has been described in cases of human tuberculosis by M. bovis, highlighting the zoonotic potential of this profile. This study also identified strains never reported in Bahia, highlighting a distinctive pattern from other parts of Brazil, besides mixed infections. Besides, to identify strains never before described in the state, highlighting a distinctive pattern in Brazil (SB6119 and SB0852, respectively). An unpublished profile was identified and inserted in the international database (Mbovis.org), named SB2715.

RESUMO: O Mycobacterium bovis é o responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. O conhecimento da distribuição e a identificação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados como o spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. O presente trabalho objetivou investigar a presença de micobactérias, genotipar suas estirpes e avaliar a distribuição espacial dos casos de tuberculose a partir de lesões sugestivas nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial no estado da Bahia. Foram investigados 453.417 animais dentre os quais 31 (0,007%) foram suspeitos de doença e provenientes de 17 municípios. Após o crescimento em meio de cultura, 95% foram categorizados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR). Todos os isolados foram submetidos à spoligotyping e 95% foram confirmados M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). A cepa SB0120 foi a mais prevalente e este perfil vem sendo descrito na literatura com casos de tuberculose humana por M. bovis ressaltando o potencial zoonótico deste perfil. Este estudo também identificou cepas nunca relatadas no estado da Bahia, destacando um padrão distinto de outras partes do Brasil, além da existência de infecções mistas. Permitiu ainda relatar linhagens nunca antes descritas no estado com destaque para um padrão novo no Brasil (SB6119 e SB0852 respectivamente). Um perfil inédito identificado foi identificado e inserido no banco de dados internacional (Mbovis.org), nomeado SB2715.

Spoligotyping, genotyping, and spatial distribution of Mycobacterium bovis in cattle in the state of Bahia, Brazil / Genotipagem por spoligotyping e distribuição espacial de Mycobacterium bovis em bovinos no estado da Bahia, Brasil

Mycobacterium bovis is responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The knowledge of the distribution and the precise identification of this disease, including advanced diagnoses such as spoligotyping, allows choosing the best strategies to fight the disease's progress. The present work aimed to investigate mycobacteria's presence, genotype their strains, and evaluate tuberculosis cases' spatial distribution from suggestive lesions in carcasses of bovine and buffalo inspected in slaughterhouses under an official inspection regime in the state of Bahia, Brazil. The study investigated 453,417 animals. Among these, 31 (0.007%) from 17 municipalities were suspected of tuberculosis. Among the culture medium growth, 95% of these were categorized as alcohol-acid resistant bacilli (BAAR). All isolates were subjected to spoligotyping and 95% were confirmed as M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). The strain SB0120 was the most prevalent, and this profile has been described in cases of human tuberculosis by M. bovis, highlighting the zoonotic potential of this profile. This study also identified strains never reported in Bahia, highlighting a distinctive pattern from other parts of Brazil, besides mixed infections. Besides, to identify strains never before described in the state, highlighting a distinctive pattern in Brazil (SB6119 and SB0852, respectively). An unpublished profile was identified and inserted in the international database (Mbovis.org), named SB2715.(AU)

O Mycobacterium bovis é o responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. O conhecimento da distribuição e a identificação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados como o spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. O presente trabalho objetivou investigar a presença de micobactérias, genotipar suas estirpes e avaliar a distribuição espacial dos casos de tuberculose a partir de lesões sugestivas nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial no estado da Bahia. Foram investigados 453.417 animais dentre os quais 31 (0,007%) foram suspeitos de doença e provenientes de 17 municípios. Após o crescimento em meio de cultura, 95% foram categorizados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR). Todos os isolados foram submetidos à spoligotyping e 95% foram confirmados M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). A cepa SB0120 foi a mais prevalente e este perfil vem sendo descrito na literatura com casos de tuberculose humana por M. bovis ressaltando o potencial zoonótico deste perfil. Este estudo também identificou cepas nunca relatadas no estado da Bahia, destacando um padrão distinto de outras partes do Brasil, além da existência de infecções mistas. Permitiu ainda relatar linhagens nunca antes descritas no estado com destaque para um padrão novo no Brasil (SB6119 e SB0852 respectivamente). Um perfil inédito identificado foi identificado e inserido no banco de dados internacional (Mbovis.org), nomeado SB2715.(AU)

Tuberculosis outbreak in intensive swine farming from southern Brazil / Surto de tuberculose em suínos de criação intensiva no Sul do Brasil

ABSTRACT: Mycobacterium tuberculosis var. bovis is the etiologic agent of animal tuberculosis (aTB), a neglected zoonotic disease. Animal tuberculosis can affect many species, including swine. aTB-consistent granulomas in these animals lead to carcass disposal, generating economic losses and posing risks to human health. In the present study, an aTB outbreak was identified at an intensive swine farming operation in Southern Brazil. Inspection during swine slaughter revealed aTB-suspected lesions, which were collected for diagnosis by histology, PCR, and bacterial isolation. The animals had no clinical signs of tuberculosis. Granulomatous lesions were identified in 0.73% (59/8,071) of the slaughtered swine, and were confirmed by histology. Nine samples were further examined by PCR and bacterial isolation, with 44.4% and 55.5% positive results, respectively. Data from abattoirs subjected to federal surveillance show an aTB prevalence in Brazil of <0.001%. The present data thus indicate a swine aTB outbreak in intensive breeding. Swine infection can be related to exposure to infected animals or to contaminated food or environment. Biosecurity measures must be taken to avoid aTB transmission. Although certified swine breeding farms adopt such measures, this report indicates that constant monitoring is crucial, and greater control in swine breeding and finishing units is required to prevent outbreaks and spread of tuberculosis.

RESUMO: Mycobacterium bovis é o agente etiológico da tuberculose animal (aTB), uma doença zoonótica negligenciada. A tuberculose animal pode afetar muitas espécies, incluindo suínos. Os granulomas compatíveis com a aTB nesses animais levam ao descarte de carcaças, gerando perdas econômicas e trazendo riscos à saúde humana. No presente estudo, um surto de aTB foi identificado em um sistema de criação intensiva de suínos na região Sul do Brasil. A inspeção durante um abate de suínos revelou lesões suspeitas de tuberculose, as quais foram coletadas para diagnóstico por histologia, PCR e isolamento bacteriano. Os animais não apresentavam sinais clínicos de tuberculose. Lesões granulomatosas foram identificadas em 0,73% (59/8.071) dos suínos abatidos, e foram confirmadas pela histologia. Nove amostras foram posteriormente examinadas por PCR e isolamento bacteriano, com 44,4% e 55,5% de resultados positivos, respectivamente. Dados de frigoríficos submetidos à vigilância federal demostram prevalência da aTB de < 0,001% no Brasil. Os dados presentes indicam, portanto, um surto de aTB em suínos de criação intensiva. A infecção em suínos pode estar relacionada à exposição a animais infectados, alimentos ou ambientes contaminados. Medidas de biossegurança devem ser tomadas para evitar a transmissão da aTB. Embora as granjas suinícolas certificadas adotem tais medidas, este relato indica que o monitoramento constante é crucial, e maior controle nas unidades de criação e terminação de suínos é necessário para prevenir surtos e disseminação da tuberculose.

Tuberculosis outbreak in intensive swine farming from southern Brazil / Surto de tuberculose em suínos de criação intensiva no Sul do Brasil

Mycobacterium tuberculosis var. bovis is the etiologic agent of animal tuberculosis (aTB), a neglected zoonotic disease. Animal tuberculosis can affect many species, including swine. aTB-consistent granulomas in these animals lead to carcass disposal, generating economic losses and posing risks to human health. In the present study, an aTB outbreak was identified at an intensive swine farming operation in Southern Brazil. Inspection during swine slaughter revealed aTB-suspected lesions, which were collected for diagnosis by histology, PCR, and bacterial isolation. The animals had no clinical signs of tuberculosis. Granulomatous lesions were identified in 0.73% (59/8,071) of the slaughtered swine, and were confirmed by histology. Nine samples were further examined by PCR and bacterial isolation, with 44.4% and 55.5% positive results, respectively. Data from abattoirs subjected to federal surveillance show an aTB prevalence in Brazil of <0.001%. The present data thus indicate a swine aTB outbreak in intensive breeding. Swine infection can be related to exposure to infected animals or to contaminated food or environment. Biosecurity measures must be taken to avoid aTB transmission. Although certified swine breeding farms adopt such measures, this report indicates that constant monitoring is crucial, and greater control in swine breeding and finishing units is required to prevent outbreaks and spread of tuberculosis.(AU)

Mycobacterium bovis é o agente etiológico da tuberculose animal (aTB), uma doença zoonótica negligenciada. A tuberculose animal pode afetar muitas espécies, incluindo suínos. Os granulomas compatíveis com a aTB nesses animais levam ao descarte de carcaças, gerando perdas econômicas e trazendo riscos à saúde humana. No presente estudo, um surto de aTB foi identificado em um sistema de criação intensiva de suínos na região Sul do Brasil. A inspeção durante um abate de suínos revelou lesões suspeitas de tuberculose, as quais foram coletadas para diagnóstico por histologia, PCR e isolamento bacteriano. Os animais não apresentavam sinais clínicos de tuberculose. Lesões granulomatosas foram identificadas em 0,73% (59/8.071) dos suínos abatidos, e foram confirmadas pela histologia. Nove amostras foram posteriormente examinadas por PCR e isolamento bacteriano, com 44,4% e 55,5% de resultados positivos, respectivamente. Dados de frigoríficos submetidos à vigilância federal demostram prevalência da aTB de < 0,001% no Brasil. Os dados presentes indicam, portanto, um surto de aTB em suínos de criação intensiva. A infecção em suínos pode estar relacionada à exposição a animais infectados, alimentos ou ambientes contaminados. Medidas de biossegurança devem ser tomadas para evitar a transmissão da aTB. Embora as granjas suinícolas certificadas adotem tais medidas, este relato indica que o monitoramento constante é crucial, e maior controle nas unidades de criação e terminação de suínos é necessário para prevenir surtos e disseminação da tuberculose.(AU)

Spoligotyping, genotyping, and spatial distribution of Mycobacterium bovis in cattle in the state of Bahia, Brazil / Genotipagem por spoligotyping e distribuição espacial de Mycobacterium bovis em bovinos no estado da Bahia, Brasil

Mycobacterium bovis is responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The knowledge of the distribution and the precise identification of this disease, including advanced diagnoses such as spoligotyping, allows choosing the best strategies to fight the disease's progress. The present work aimed to investigate mycobacteria's presence, genotype their strains, and evaluate tuberculosis cases' spatial distribution from suggestive lesions in carcasses of bovine and buffalo inspected in slaughterhouses under an official inspection regime in the state of Bahia, Brazil. The study investigated 453,417 animals. Among these, 31 (0.007%) from 17 municipalities were suspected of tuberculosis. Among the culture medium growth, 95% of these were categorized as alcohol-acid resistant bacilli (BAAR). All isolates were subjected to spoligotyping and 95% were confirmed as M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). The strain SB0120 was the most prevalent, and this profile has been described in cases of human tuberculosis by M. bovis, highlighting the zoonotic potential of this profile. This study also identified strains never reported in Bahia, highlighting a distinctive pattern from other parts of Brazil, besides mixed infections. Besides, to identify strains never before described in the state, highlighting a distinctive pattern in Brazil (SB6119 and SB0852, respectively). An unpublished profile was identified and inserted in the international database (Mbovis.org), named SB2715.(AU)

O Mycobacterium bovis é o responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. O conhecimento da distribuição e a identificação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados como o spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. O presente trabalho objetivou investigar a presença de micobactérias, genotipar suas estirpes e avaliar a distribuição espacial dos casos de tuberculose a partir de lesões sugestivas nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial no estado da Bahia. Foram investigados 453.417 animais dentre os quais 31 (0,007%) foram suspeitos de doença e provenientes de 17 municípios. Após o crescimento em meio de cultura, 95% foram categorizados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR). Todos os isolados foram submetidos à spoligotyping e 95% foram confirmados M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). A cepa SB0120 foi a mais prevalente e este perfil vem sendo descrito na literatura com casos de tuberculose humana por M. bovis ressaltando o potencial zoonótico deste perfil. Este estudo também identificou cepas nunca relatadas no estado da Bahia, destacando um padrão distinto de outras partes do Brasil, além da existência de infecções mistas. Permitiu ainda relatar linhagens nunca antes descritas no estado com destaque para um padrão novo no Brasil (SB6119 e SB0852 respectivamente). Um perfil inédito identificado foi identificado e inserido no banco de dados internacional (Mbovis.org), nomeado SB2715.(AU)

Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

Bovine tuberculosis in safari park in Brazil

ABSTRACT: Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.

RESUMO: A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.

Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

ABSTRACT: Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.

RESUMO: Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.

Bovine tuberculosis in safari park in Brazil / Tuberculose bovina em parque safári no Brasil

Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the "Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis" (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.(AU)

Risk factors associated with intramammary colonization with Mollicutes in dairy cattle from Southeast Brazil / Fatores de risco associados à colonização intramamária por Mollicutes em bovinos leiteiros do Sudeste brasileiro

Bacteria of Mollicutes Class are associated with intramammary infection and decrease in milk production. This study investigated the occurrence of Mollicutes and elucidated their risk factors in dairy herds from Southeast Brazil. For this, milk samples from 387 lactation cows from Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo States were subjected to the polymerase chain reaction (PCR) to detect Mollicutes. Species of Mycoplasma were investigated in Mollicutes positive samples by PCR, including Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini and A. laidlawii. An epidemiological questionnaire was applied to collect data on possible risk factors, which were assessed using Pearson's Chi-square test followed by odds ratio (P≤0.05). Mollicutes were reported in 21% (4/19) of the herds and 4% (16/387) of the animals, while 1% (5/387) were positive for M. bovis and 3% (11/387) for M. arginini. All samples were negative to the other agents. Herds with more than 150 animals [OR=3.51 (95% CI 1.11-11.08)], manual milking [OR=9.97 (95% CI 2.80-35.49)] and not-milking animals with mastitis last [OR=6.54 (95% CI 1.92-22.29)] were risk factors. The presence of these conditions may favor intramammary infection by Mollicutes in dairy herds from Southeast Brazil. This is the first report of M. bovis in Rio de Janeiro and M. arginini in the studied states.(AU)

Bactérias da Classe Mollicutes estão associadas à infecção intramamária e diminuição da produção leiteira. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de Mollicutes e elucidar seus fatores de risco em rebanhos leiteiros do sudeste brasileiro. Para isso, amostras de leite de 387 vacas em lactação dos estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Mollicutes. Espécies de Mycoplasma foram investigadas nas amostras positivas por PCR, incluindo Mycoplasma bovis, M. alkalescens, M. bovigenitalium, M. bovirhinis, M. arginini e A. laidlawii. Foi aplicado um questionário epidemiológico para a coleta de dados sobre possíveis fatores de risco, que foram avaliados pelo teste de Qui-Quadrado de Pearson seguido de odds ratio (P≤0.05). Mollicutes foram detectados em 21% (4/19) dos rebanhos e 4% (16/387) dos animais, enquanto 1% (5/387) destes foram positivos para m. bovis, 3% (11/387) para m. arginini, sendo todas as amostras negativas para os demais agentes. Rebanhos com mais de 150 animais [OR=3,51 (95% IC 1,11-11,08)], ordenha manual [OR=9,97 (95% IC 2,80-35,49)] e ausência de linha de ordenha [OR=6,54 (95% IC 1,92-22,29)] foram considerados fatores de risco. A presença dessas condições pode favorecer a infecção intramamária por Mollicutes em rebanhos leiteiros no sudeste do Brasil. Este é o primeiro relato de M. bovis no Rio de Janeiro e M. arginini nos estados estudados.(AU)