Detecção, isolamento de Leishmania (infantum) chagasi no trato urinário e sua relação com a histopatologia e bioquímica sérica de cães com infecção natural

A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença com alto grau de complexidade, tanto em relação ao diagnóstico quanto aos processos patológicos e imunológicos, em que muitos pontos ainda precisam ser esclarecidos. Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de diagnosticar a LV no trato urinário de cães e estudar os parâmetros bioquímicos e histopatológicos de tecido renal e bexiga. Neste experimento foram utilizados 90 cães, nos quais se realizaram avaliação física, testes sorológicos e parasitológicos para diagnóstico de LVC. Após o diagnóstico de LV os cães foram submetidos a estudos bioquímicos e histopatológicos. Os grupos foram comparados utilizando os testes: Kruskal-Wallis, Dunn e Exato de Fisher, admitindo 5% de probabilidade de erro. Em 5,6% (5/90) dos animais estudados detectaram-se Leishmania (infantum) chagasi na urina e, em 56,7% (51/90) observou-se presença de Leishmania (infantum) chagasi em pelo menos um dos órgãos pesquisados (medula, linfonodo e pele). Também, detectou-se Leishmania em imprint de bexiga corado com Giemsa em um dos cães positivo na urina. Em todos os grupos observou-se ocorrência de alterações degenerativas em rim e alterações inflamatórias em rim e bexiga, sendo que, os cães com Leishmania na urina apresentaram infiltrado inflamatório significativamente mais grave em bexiga. Nos parâmetros bioquímicos, os valores de albumina e da relação albumina/globulina dos animais com presença de Leishmania na urina foram estatisticamente inferior a dos cães infectados e negativos na urina. Conclui-se que é possível diagnosticar a LVC por meio da cultura de sedimento urinário, porém com baixa eficiência e a presença de Leishmania na urina, de alguns cães infectados, pode ser em decorrência das lesões no sistema urinário, principalmente na bexiga.

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a disease with a high degree of complexity, both in terms of diagnosis and the pathological and immunological processes in which many points need to be clarified. This work was developed with the purpose of diagnosing LV in the urinary tract of dogs and study the biochemical and histopathological parameters of renal tissue and bladder. This study used 90 dogs, who had had physical evaluation, serological and parasitological diagnostic LVC. After the diagnosis of LV dogs underwent biochemical and histopathological studies. The groups were compared using the test: Kruskal-Wallis, Dunn and Fisher exact test, assuming a 5% probability of error. 5.6% (5/90) of the animals studied were detected Leishmania (infantum) chagasi in urine and 56.7% (51/90) observed the presence of Leishmania (infantum) chagasi in at least one of surveyed organs (bone marrow, lymph nodes and skin). Also, Leishmania was detected in bladder imprint stained with Giemsa in a positive dogs in the urine. In all groups, we observed changes occur in kidney degenerative and inflammatory changes in the kidney and bladder, and the urine Leishmania dogs showed significantly more serious inflammatory infiltrate bladder. Biochemical parameters, the values of albumin and albumin / globulin animals with presence of Leishmania in urine were statistically lower than that of infected dogs and negative in urine. It follows that it is possible to diagnose the LVC by the urinary sediment culture, but with low efficiency and the presence of Leishmania in the urine of some infected dogs may be due to lesions of the urinary tract, especially the bladder.

Caracterização de sorotipos em linhagens do gênero Salmonella isoladas de diferentes afecções em animais domésticos / Serotype characterization of Salmonella strains isolated from different affections in domestic animals

Foram caracterizados os sorotipos, o perfil de sensibilidade microbiana e os achados clínico-epidemiológicos em 53 linhagens do gênero Salmonella isoladas de 41 cães, nove equinos e três bovinos, acometidos por diferentes manifestações clínicas entre 1997 e 2007. Salmonella Typhimurium (45,3 por cento), Salmonella enterica (22,6 por cento), Salmonella Enteritidis (7,5 por cento), Salmonella enterica subsp enterica 4,5,12i (5,7 por cento), Salmonella Newport (5,7 por cento), Salmonella Dublin (3,8 por cento), Salmonella Agona (3,8 por cento), Salmonella Glostrup (3,8 por cento), Salmonella Saintpaul (1,8 por cento) foram os sorotipos encontrados. Ciprofloxacina (100,0 por cento), norfloxacina (100,0 por cento) e gentamicina (100,0 por cento) foram os antimicrobianos mais efetivos, enquanto a maior resistência das linhagens foi observada para ceftiofur (28,5 por cento) e florfenicol (7,0 por cento). As linhagens foram isoladas de animais com enterite, infecção do trato urinário, septicemia, piometra, pneumonia e conjuntivite. Ressalta-se para o predomínio do sorovar Typhimurium nas diferentes manifestações da salmonelose nos animais. Destaca-se, também, a identificação de sorotipos nos animais que também são observados em casos de salmonelose em humanos(AU)

The serotype characterization, antimicrobial susceptibility profile, and clinical-epidemiological findings were evaluated in 53 Salmonella spp. strains isolated from 41 dogs, nine horses and three cattle presenting different clinical manifestations between 1997 at 2007. Salmonella Typhimurium (45.3 percent), Salmonella enterica (22.6 percent), Salmonella Enteritidis (7.5 percent), Salmonella enterica subsp. enterica 4,5,12i (5.7 percent), Salmonella Newport (5.7 percent), Salmonella Dublin (3.8 percent), Salmonella Agona (3.8 percent), Salmonella Glostrup (3.8 percent), Salmonella Saintpaul (1.8 percent) were the more common serotypes. Ciprofloxacin (100.0 percent), norfloxacin (100.0 percent) and gentamicin (100.0 percent) were more effective drugs while resistance of isolates was observed to ceftiofur (28.5 percent) and florfenicol (7.0 percent). The strains were isolated from animals with enteritis, urinary tract infections, septicaemia, pyometra, pneumonia and conjuntivits. The results showed the high frequency of Salmonella Typhimurium serotype in different animals studied. The study highlighted also the presence of serotypes in our animals that also have been identified in humans with salmonellosis.(AU)

GENES ASSOCIADOS À VIRULÊNCIA E MULTIRRESISTÊNCIA AOS ANTIMICROBIANOS EM LINHAGENS DE Trueperella pyogenes ISOLADAS DE MASTITE E OUTRAS AFECÇÕES EM ANIMAIS DOMÉSTICOS.

Trueperella pyogenes são bactérias oportunistas caracterizadas por infecções piogênicas em animais, em geral refratárias aos tratamentos com antimicrobianos convencionais. Recentemente, os genes que codificam a exotoxina piolisina (plo), e fatores relacionados à adesão de T. pyogenes às células do animal susceptível, como fímbrias (fimA, fimC, fimE, fimG), neuraminidases (nanH, nanP), e proteína ligada ao colágeno (cbpA) têm sido associados a virulência do patógeno. O presente estudo investigou a ocorrência de multirresistência dos isolados aos antimicrobianos e a presença dos genes plo, fimA, fimC, fimE, fimG, nanH, nanP e cbpA em 41 linhagens de T. pyogenes isoladas de diferentes afecções em bovinos, caprinos, ovinos, equino e cão. T. pyogenes foi identificado predominantemente em casos de mastite (46,3%), abscessos (19,5%), pneumonia (9,8%), metritie (9,8%), linfadenite (7,3%), seguidos em menor frequência por encefalite (4,9%) e orquite (2,4%). A maior sensibilidade dos isolados foi observada para florfenicol (97,6%), azitromicina (97,6%), tetraciclina (95,2%), ceftiofur (92,7%), penicilina (92,7%), ampicilina (92,7%), gentamicina (90,3%) e eritromicina (87,8%). Em contraste, alta frequência de resistência dos isolados foi observada para bacitracina (46,3%), neomicina (31,7%), lincomicina (31,7%) e sulfametoxazole/trimetoprim (24,3%). O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos ¿ IRMA (>0,3) foi encontrado em 13 (31.7%) isolados, particularmente nos casos de mastite bovina. Dentre os isolados multirresistentes a três ou mais grupos de antimicrobianos, 12 (92,3%) foram identificados na espécie bovina, notadamente em infecções mamárias. Os genes mais frequentes detectados nos isolados foram: plo (40/41=97,6%), fimA (36/41=87,9%), nanP (34/41=82,9%), fimE (32/41=78,0%), nanH (28/41=62,3%), fimC (23/41=56,0%) e cbpA (5/41=12,2%). As principais associações de genes nos isolados foram observadas entre plo, fimA, fimE, nanH e nanP (10/41=24,4%) e plo, fimA, fimE, fimC, nanH e nanP (8/41=19,5%), principalmente nos casos de mastite bovina. Dentre a literatura consultada, refere-se pela primeira vez em animais domésticos, a detecção dos genes plo, fimA, fimG, fimE, fimC, nanH, nanP e/ou cpbA em casos de abscessos em bovinos, caprinos e cão, orquite em equino, pneumonia bovina, linfadenite caprina e encefalite bovina. Infere-se a grande diversidade de manifestações clínicas causadas por T. pyogenes em animais domésticos, com predomínio da mastite bovina. A ocorrência de isolados multirresistentes aos antimicrobianos reforça a importância de instituição do tratamento do patógeno com respaldo em testes ¿in vitro¿ de sensibilidade microbiana. plo, fimA, fimC, fimE, nanH e nanP são, aparentemente, os principais genes associados a virulência nas diferentes afecções piogênicas causadas por T. pyogenes em animais de produção.

Trueperella pyogenes are opportunistic bacterium characterized by suppurative infections in domestic animals, commonly refractory to conventional therapy. Recently, genes which encode exotoxin pyolysin (plo), and factors that promote adhesion of T. pyogenes to host cells, such as fimbriae (fimA, fimC, fimE, fimG), neuraminidases (nanH, nanP), and collagen-binding protein (cbpA) have been associated to virulence of pathogen. The aim of present study was investigate occurrence of multi-drug resistance of isolates, as well the presence of genes plo, fimA, fimC, fimE, fimG, nanH, nanP, and cbpA in 41 T. pyogenes strains obtaned from bovine, goats, sheep, horses, and dog isolated among different clinical manifestations. T. pyogenes was identified predominantly in mastitis (46.3%), abscesses (19.5%), pneumonia (9.8%), metritis (9.8%), lymphadenitis (7.3%), followed by encephalitis (4.9%) and orchitis (2.4%). The strains showed major in vitro sensitivity to florfenicol (97.6%), azithromicin (97.6%), tetracycline (95.2%), ceftiofur (92.7%), penicillin (92.7%), ampicillin (92.7%), gentamicin (90.3%), and erythromycin (87.8%). In contrast, highest frequency of resistance among isolates was observed to bacitracin (46.3%), neomycin (31.7%), lincomycin (31.7%), and trimethropim/sulfamethoxazole (24.3%). Antimicrobial multiple resistance index ¿ AMRI (>0.3) was found in 13 (31.7%) isolates, particularly in bovine mastitis cases. Among multi-drug resistant isolates to 3 or more group of antimicrobials, 12 (92.3%) were identified in bovine, predominantly in mammary infections. The most common genes detected among isolates were: plo (40/41=97.6%), fimA (36/41=87.9%), nanP (34/41=82.9%), fimE (32/41=78.0%), nanH (28/41=62.3%), fimC (23/41=56.0%), and cbpA (5/41=12.2%). The major associations between genes of isolates were plo, fimA, fimE, nanH, and nanP (10/41=24.4%), and plo, fimA, fimE, fimC, nanH, and nanP (8/41=19.5%), mainly in bovine mastitis. To the best of our knowledge, the presence of genes plo, fimA, fimG, fimE, fimC, nanH, nanP, and/or cpbA are referred by first time in domestic animals, among bovine, goats and canine abscesses, bovine pneumonia, goat lymphadenitis, and bovine encephalitis. This study highlights the diversity of clinical manifestations caused by T. pyogenes infections in domestic animals, with predominance of bovine mastitis. The high occurrence of multi-drug resistance patterns among isolates reinforces that first-choice of antimicrobial treatment should be based on in vitro resistance profile. plo, fimA, fimC, fimE, nanH, and nanP are, apparently, the major genes associated to virulence in miscellaneous suppurative T. pyogenes infections in livestock.

ÍNDICE DE RESISTÊNCIA MÚLTIPLA AOS ANTIMICROBIANOS, CONCENTRAÇÃO INIBITÓRIA MÍNIMA E BETA-LACTAMASES DE ESPECTRO ESTENDIDO EM LINHAGENS DE PROTEUS MIRABILIS E PROTEUS VULGARIS ISOLADAS DE DIFERENTES AFECÇÕES EM ANIMAIS DOMÉSTICOS

Nas últimas décadas é crescente o número de infecções por enterobactérias oportunistas multidroga resistentes em animais domésticos e humanos, em geral secundárias ao uso abusivo de antimicrobianos, incluindo pelo gênero Proteus. No entanto, as infecções por linhagens do gênero Proteus em animais domésticos são negligenciadas, relegadas ao segundo plano ou, por vezes, o micro-organismo é considerado ¿contaminante¿, ainda que em infecções como agente primário. Os registros de infecções por Proteus sp. em animais domésticos estão praticamente restritos aos relatos de casos, estudos retrospectivos ou compondo estudos com outros micro-organismos. São restritos no Brasil os estudos sistematizados envolvendo os principais aspectos clínico-epidemiológicos das afecções pelo gênero Proteus em grande número de animais domésticos, tampouco da presença de linhagens multirresistentes e/ou produtoras de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL). O presente estudo investigou o índice de resistência múltipla (IRMA) e a concentração inibitória mínima (CIM) de 73 isolados de Proteus mirabilis (n=69) e Proteus vulgaris (n=4) a diferentes antimicrobianos, bem com a produção fenotípica de ESBL, em isolados obtidos de várias manifestações clínicas em animais domésticos. Em cães, o micro-organismo foi identificado predominantemente em casos de cistite (48,21%), enterite (21,42%), otite (14,29%), conjuntivite (3,57%), dermatite (1,79%), artrite (1,79%) e em secreção de ferida cirúrgica (1,79%). Nos bovinos, o agente foi isolado de casos enterite (22,22%), abscesso (11,11%), otite (11,11%), onfalite (11,11%), peritonite (11,11%), metrite (11,11%) e em fragmento de órgão (11,11%). Nos equinos, enterite (50,0%), artrite (22,22%) e abscesso (16,67%) foram as principais afecções clínicas, enquanto nos felinos o agente foi isolado exclusivamente de casos de enterite (100,0%). A maior sensibilidade dos isolados no teste de sensibilidade microbiana ¿in vitro¿ utilizando o método padrão de difusão com discos foi observada para imipeném (98,63%), norfloxacino (95,89%), amicacina (95,89%), levofloxacino (90,41%), ceftriaxona (87,64%) e florfenicol (87,67%). Em contraste, a maior resistência das linhagens foi observada para novobiocina (95,89%), azitromicina (57,53%) e sulfametoxazole-trimetropim (39,73%). Dentre as 73 linhagens, a eficácia da amoxicilina/ácido clavulânico, gentamicina, ceftriaxona e ciprofloxacino utilizando o teste de CIM foi, respectivamente, 87,67%, 86,30%, 84,93% e 82,19%. A CIM50 para amoxicilina/ácido clavulânico, ceftriaxona, ciprofloxaicno e gentamicina foi, respectivamente, 1,0 µg/mL, 0,004 µg/mL, 0,03 µg/mL e 1,0 µg/mL. O índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA ¿0,3) foi observado em 33 (45,21%) linhagens. O IRMA dos isolados variou entre 0,1 a 1. Dentre os isolados com perfis de multirresistência, a maior ocorrência foi observada em cães (n=25; 75,76%), particularmente em animais com cistite (n=13; 52,0%), seguido pelos bovinos (n=4; 12,12%), equinos (n=2; 6,06%) e felinos (n=2; 6,06%). A presença fenotípica de ESBL foi identificada em dois (2,7%) dos isolados obtidos de dermatite e fezes de cães. Infere-se o comportamento oportunista das espécies de Proteus nas infecções em animais domésticos em razão da diversidade de manifestações clínicas, a presença de isolados ESBL-positivos e a ocorrência de isolados multirresistentes aos antimicrobianos, reforçando a importância da instituição do tratamento do patógeno com respaldo em testes ¿in vitro¿ de sensibilidade microbiana e do uso racional de antimicrobianos no tratamento de infecções em animais domésticos.

In the last decades have been highlighted the increase number of infections in domestic animals and humans caused by opportunistic multidrug resistant enterobacteria, commonly associated to improper use of antimicrobials, including by Proteus species. However, Proteus infections in domestic animals have been misdiagnosed or the microorganism is considered a contaminant of microbiological cultures, besides to be a primary agent of diseases. Descriptions of Proteus infections in domestic animals usually are restricted to case reports, retrospective studies or part of studies involving other microorganisms. In Brazil, are restricted the comprehensive studies involving the main clinical and epidemiologic aspects of Proteus infections in a great number of domestic animals, as well as multiple drug resistant strains to conventional antimicrobials, and extended-spectrum beta-lactamase producers (ESBL). The present study investigated multiple antibiotic resistance index, minimum inhibitory concentration (MIC), and ESBL production in 73 strains of Proteus mirabilis (n=69) and Proteus vulgaris (n=4) isolated from different clinical manifestations in domestic animals. In dogs, the pathogen was identified most commonly causing cystitis (48.21), enteritis (21.42%), otitis (14.29%), conjuntivitis (3.57%), dermatitis (1.79%), arthritis (1.79%), and from surgical wound secretion (1.79%). In bovines, the microorganism occurred predominantly in enteritis (22.22%), abscesses (11.11%), otitis (11.11%), omphalitis (11.11%), peritonitis (11.11%), and in organ fragments (11.11%). Among equines, diarrhea (50.0%), arthritis (22.22%), and abscesses (16.67%) were the most common clinical manifestations, whereas in domestic cats the agent was identified exclusively in two cases of enteritis. In vitro standard disk diffusion method showed that the most effective antimicrobials against strains were imipenem (98.63), norfloxacin (95.89), amikacin (95.89), levofloxacin (90.41), ceftriaxone (87.64), and florfenicol (87.67). In contrast, the most common resistance of isolates was observed to novobiocin (95.89), azithromycin (57.53) and trimethropim/sulfamethoxazole (39.73). Among 73 isolates, efficacy of amoxicillin/clavulanic acid, gentamicin, ceftriaxone, and ciprofloxacin on basis in MIC was 87.67%, 86.30%, 84.93%, and 82.19%, respectively. MIC50 of amoxicillin/clavulanic acid, ceftriaxone, ciprofloxacin, and gentamicin was, respectively, 1.0 µg/mL, 0.004 µg/mL, 0.03 µg/mL, and 1.0 µg/mL. Thirty-three strains (45.21%) showed multiple antibiotic resistance (MAR) index (¿0.3). The MAR range of isolates was 0.1 to 1.0. Multidrug resistant profiles of isolates were observed most frequently in dogs (n=25; 75.76%), particularly in animals with cystitis (n=13; 52.0%), followed by bovines (n=4; 12.12%), equines (n=2; 6.06%), and cats (n=2; 6.06%). Phenotypic diagnosis identified two (2.7%) strains ESBL-producers obtained from canine skin and feces. Here, we observed a diversity of clinical manifestations in domestic animals caused by Proteus infections probably by typical opportunistic behavior of the microorganism. In addition, the presence of multidrug resistance isolates, and ESBL-producers highlights the need of adequate use of antimicrobials and in vitro antimicrobial tests to support therapy

Accumulative copper poisoning in buffaloes / lativa em búfalos

The main objective of this study was to evaluate the clinical and hematological alterations, and the hepatic concentration of Cu in buffaloes with chronic copper poisoning (CCP). Ten buffalo yearling steers were randomly distributed into two groups: one copper supplemented (BUFCu; n = 6) and another control group (BUF; n = 4). The group BUFCu received, by ruminal fistula, 2 mg Cu/kgBW (as CuSO4.5H2O) daily during one week; after which 2 mg Cu/kgBW was added during each additional week, until the end of the experiment (105th day). Three liver biopsies were realized during the experiment (day zero, 45th, and 105th day) to determine the degree of copper accumulation. Alterations in body weight, clinical examination, and hematological values were monitored every 15 days. Two buffaloes supplemented with copper demonstrated clinical manifestations consistent with CCP, and died. Two distinct clinical manifestations were observed, one classical (n = 1) and another atypical (n = 1), characterized by remarkable high levels of liver copper, progressive hyporexia followed by anorexia, dehydration, severe apathy, decreased rumen movements, oliguria, and death. Some animals were resistant to CCP although high copper intake. In buffalos with clinical picture similar to the one described as atypical, CCP should be considered as a possible diagnostic even without presence of macroscopic hemoglo

O presente trabalho objetivou analisar o quadro clínico, variáveis metabólicas e a concentração de cobre nos tecidos de bufalinos submetidos à intoxicação cúprica acumulativa (ICA). Foram utilizados 10 bufalinos jovens, da raça Murrah, aleatoriamente distribuídos em seis animais no grupo suplementado com cobre (BUFCu) e quatro no grupo controle (BUF). O grupo BUFCu recebeu suplementação progressiva de cobre através de administração diária de solução aquosa deste microelemento, por meio da fistula ruminal. A dose diária inicial era de 2 mg de Cu/kgPV (CuSO4.5H2O), durante 7 dias, sendo esta dose de cobre aumentada em 2 mg/kgPV a cada semana, até o término do experimento (105 dias). Foram realizadas três biópsias hepáticas (dias 0 45 105) nos animais para determinação da concentração de Cu e de Zn. Quinzenalmente, foi realizado exame clínico, pesagem e coleta de sangue. Dois búfalos do grupo BUFCu manifestaram quadro clínico fatal sugestivo de ICA. Destaca-se a presença de dois quadros clínicos diferentes, o clássico (n = 1) e um atípico (n = 1), caracterizado pelo acúmulo destacado de cobre hepático, hiporexia progressiva seguida de anorexia, desidratação, oligúria, apatia acentuada e morte, mas sem apresentar hemoglobinúria. Quatro búfalos foram resistentes à ICA a despeito da administração de altas quantidades de cobre. Em búfalos que apresentem quadros clínicos similares

Accumulative copper poisoning in buffaloes / lativa em búfalos

The main objective of this study was to evaluate the clinical and hematological alterations, and the hepatic concentration of Cu in buffaloes with chronic copper poisoning (CCP). Ten buffalo yearling steers were randomly distributed into two groups: one copper supplemented (BUFCu; n = 6) and another control group (BUF; n = 4). The group BUFCu received, by ruminal fistula, 2 mg Cu/kgBW (as CuSO4.5H2O) daily during one week; after which 2 mg Cu/kgBW was added during each additional week, until the end of the experiment (105th day). Three liver biopsies were realized during the experiment (day zero, 45th, and 105th day) to determine the degree of copper accumulation. Alterations in body weight, clinical examination, and hematological values were monitored every 15 days. Two buffaloes supplemented with copper demonstrated clinical manifestations consistent with CCP, and died. Two distinct clinical manifestations were observed, one classical (n = 1) and another atypical (n = 1), characterized by remarkable high levels of liver copper, progressive hyporexia followed by anorexia, dehydration, severe apathy, decreased rumen movements, oliguria, and death. Some animals were resistant to CCP although high copper intake. In buffalos with clinical picture similar to the one described as atypical, CCP should be considered as a possible diagnostic even without presence of macroscopic hemoglo

O presente trabalho objetivou analisar o quadro clínico, variáveis metabólicas e a concentração de cobre nos tecidos de bufalinos submetidos à intoxicação cúprica acumulativa (ICA). Foram utilizados 10 bufalinos jovens, da raça Murrah, aleatoriamente distribuídos em seis animais no grupo suplementado com cobre (BUFCu) e quatro no grupo controle (BUF). O grupo BUFCu recebeu suplementação progressiva de cobre através de administração diária de solução aquosa deste microelemento, por meio da fistula ruminal. A dose diária inicial era de 2 mg de Cu/kgPV (CuSO4.5H2O), durante 7 dias, sendo esta dose de cobre aumentada em 2 mg/kgPV a cada semana, até o término do experimento (105 dias). Foram realizadas três biópsias hepáticas (dias 0 45 105) nos animais para determinação da concentração de Cu e de Zn. Quinzenalmente, foi realizado exame clínico, pesagem e coleta de sangue. Dois búfalos do grupo BUFCu manifestaram quadro clínico fatal sugestivo de ICA. Destaca-se a presença de dois quadros clínicos diferentes, o clássico (n = 1) e um atípico (n = 1), caracterizado pelo acúmulo destacado de cobre hepático, hiporexia progressiva seguida de anorexia, desidratação, oligúria, apatia acentuada e morte, mas sem apresentar hemoglobinúria. Quatro búfalos foram resistentes à ICA a despeito da administração de altas quantidades de cobre. Em búfalos que apresentem quadros clínicos similares