Breed composition does not influence the performance of Holstein-Gyr crossbred as oocyte donors for OPU/IVP

Holstein-Gyr crossbred cattle are strategic for dairy systems in tropical countries, since they combine milk yield genetics with adaptability to tropical climate. However, Holstein (Bos taurus) and Gyr (Bos indicus) breeds present remarkable differences regarding reproductive physiology. Brazil stands out as the world’s largest user of embryo in vitro production (IVP) in bovine, and the use of this technique is increasing in dairy systems. As Holstein-Gyr crossbreds are important oocyte donors for IVP, the present work aimed at investigating whether increased Gyr or Holstein breed composition influences donor’s performance. Sixteen Holstein-Gyr crossbred females presenting increased (HG, 71.4 to 87.5% Holstein; n = 9) or decreased (GH, 40.2 to 46.6% Holstein; n = 7) Holstein composition were submitted to three ovum pick up (OPU) sessions. We observed similar (P = 0.2946) antral follicle count between HG and GH donors (24.8 ± 3.2 vs 29.4 ± 2.8 respectively; mean ± SEM). Groups also display similar morphological oocyte grading (Grade I: 0.1 ± 0.1 vs 0.1 ± 0.1 – P = 0.9680; Grade II: 0.9 ± 0.5 vs 1.9 ± 0.5 – P = 0.1942; Grade III, 4.0 ± 1.2 vs 7.2 ± 1.4 – P = 0.1047, HG vs GH respectively; mean ± SEM). Additionally, the proportion of viable oocyte was similar between HG and GH groups (27.8% vs 31.9%, respectively, P = 0.3500) and oocyte lipid area fraction (6.8% vs 9.5%, respectively; P = 0.1539). Our results indicate that the individual variation has more influence than breed composition of crossbred oocyte donors.

Breed composition does not influence the performance of Holstein-Gyr crossbred as oocyte donors for OPU/IVP

Holstein-Gyr crossbred cattle are strategic for dairy systems in tropical countries, since they combine milk yield genetics with adaptability to tropical climate. However, Holstein (Bos taurus) and Gyr (Bos indicus) breeds present remarkable differences regarding reproductive physiology. Brazil stands out as the worlds largest user of embryo in vitro production (IVP) in bovine, and the use of this technique is increasing in dairy systems. As Holstein-Gyr crossbreds are important oocyte donors for IVP, the present work aimed at investigating whether increased Gyr or Holstein breed composition influences donors performance. Sixteen Holstein-Gyr crossbred females presenting increased (HG, 71.4 to 87.5% Holstein; n = 9) or decreased (GH, 40.2 to 46.6% Holstein; n = 7) Holstein composition were submitted to three ovum pick up (OPU) sessions. We observed similar (P = 0.2946) antral follicle count between HG and GH donors (24.8 ± 3.2 vs 29.4 ± 2.8 respectively; mean ± SEM). Groups also display similar morphological oocyte grading (Grade I: 0.1 ± 0.1 vs 0.1 ± 0.1 P = 0.9680; Grade II: 0.9 ± 0.5 vs 1.9 ± 0.5 P = 0.1942; Grade III, 4.0 ± 1.2 vs 7.2 ± 1.4 P = 0.1047, HG vs GH respectively; mean ± SEM). Additionally, the proportion of viable oocyte was similar between HG and GH groups (27.8% vs 31.9%, respectively, P = 0.3500) and oocyte lipid area fraction (6.8% vs 9.5%, respectively; P = 0.1539). Our results indicate that the individual variation has more influence than breed composition of crossbred oocyte donors.(AU)

Fatores ligados à doadora que influenciam na produção de embriões in vitro (PIVE) / Factors associated to the donor influencing the production of embryos in vitro (PIVE)

A produtividade dos rebanhos bovinos, seja de corte ou de leite, tem sido ampliada consideravelmenteatravés do aperfeiçoamento das biotécnicas de manejo reprodutivo. Entre estas, a produção in vitro (PIVE) deembriões tem sido utilizada com o objetivo de se produzir um maior número de descendentes por fêmea doadora,aumentando a vida útil desta. No entanto, apesar dos enormes avanços nos últimos anos, esta biotécnica aindaapresenta grandes limitações, pois diversos fatores podem interferir nos resultados finais, tornando viável ou nãosua implementação a nível comercial. O objetivo deste trabalho de revisão é apontar algumas fontes de variaçãoligadas à doadora na produção in vitro de embriões bovinos.(AU)

Productivity of livestock cattle, either beef or milk, has been expanded greatly through the improving ofreproductive biotechnologies. Among these, in vitro production (EIVP) of embryos have been used in order togenerate a larger number of offspring per female, extending the life cycle of them. However, despite the greateradvances in most recent years, this biotech still has major limitations, because many factors may interfere on thefinal results, making feasible or not their implementation on a commercial level. The aim of this review ishighlight some sources of variation for in vitro production of embryos in cattle.(AU)

Fatores ligados à doadora que influenciam na produção de embriões in vitro (PIVE) / Factors associated to the donor influencing the production of embryos in vitro (PIVE)

A produtividade dos rebanhos bovinos, seja de corte ou de leite, tem sido ampliada consideravelmenteatravés do aperfeiçoamento das biotécnicas de manejo reprodutivo. Entre estas, a produção in vitro (PIVE) deembriões tem sido utilizada com o objetivo de se produzir um maior número de descendentes por fêmea doadora,aumentando a vida útil desta. No entanto, apesar dos enormes avanços nos últimos anos, esta biotécnica aindaapresenta grandes limitações, pois diversos fatores podem interferir nos resultados finais, tornando viável ou nãosua implementação a nível comercial. O objetivo deste trabalho de revisão é apontar algumas fontes de variaçãoligadas à doadora na produção in vitro de embriões bovinos.

Productivity of livestock cattle, either beef or milk, has been expanded greatly through the improving ofreproductive biotechnologies. Among these, in vitro production (EIVP) of embryos have been used in order togenerate a larger number of offspring per female, extending the life cycle of them. However, despite the greateradvances in most recent years, this biotech still has major limitations, because many factors may interfere on thefinal results, making feasible or not their implementation on a commercial level. The aim of this review ishighlight some sources of variation for in vitro production of embryos in cattle.

Diagnosis of bovine brucellosis in bulls by seroagglutination and seminal plasma agglutination tests / Diagnóstico da brucelose bovina em reprodutores através da soroaglutinação e sêmen plasma aglutinação

Brucellosis is a zoonotic disease with common agent is Brucella abortus in bovine specie. The disease in bulls is usually asymptomatic and could have absence of anti-B. abortus antibody in serum. It was investigated of the occurrence of bovine brucellosis in bulls, which involved testing blood serum and seminal plasma from 177 bulls used for natural mating or as semen donors. Blood was collected from all the animals by venipuncture of the jugular vein to obtain the serum samples, while seminal plasma was obtained from the animals by electroejaculation. Samples were tested in a screening test (rose Bengal test). In the second stage, the samples testing positive in the RBT were subjected to the confirmatory test (2-mercaptoethanol). None of the animals tested positive when blood serum was used. However, 5.06% of the bulls were considered reagent positive when seminal plasma was tested. It also sought to determine whether there was an association between the kind of production and the destination of animals with positive results. The calculated odds ratio indicated that bulls of the kind of production dairy/both (beef and dairy) had a higher risk of brucellosis infection. It is recommended that seminal plasma agglutination and seroagglutination techniques are applied concomitantly.(AU)

Brucelose é uma zoonose que nos bovinos tem como principal agente a bactéria Brucella abortus. A doença nos touros é geralmente assintomática e pode haver ausência de anticorpos anti- B. abortus no soro sanguíneo. O presente estudo teve como objetivo principal avaliar a ocorrência da brucelose bovina em reprodutores para isso foram empregados testes oficiais tendo como material o soro sanguíneo e o plasma seminal. Foram utilizados 177 machos bovinos destinados à monta natural ou doação de sêmen. O soro sanguíneo foi obtido através de venopunção da jugular e o plasma seminal através da eletroejaculação. As amostras foram submetidas ao teste de triagem (Antígeno acidificado tamponado) e na segunda etapa, apenas as amostras positivas na triagem foram submetidas ao exame confirmatório (2-mercaptoetanol). Não houveram animais positivos quando utilizado o soro sanguíneo. Para plasma seminal houve 5,06% de touros reagentes. Avaliou-se também se sistema produtivo ou a destinação do animal possuíam associação com resultados positivos. O cálculo de odds ratio demonstrou que os reprodutores bovinos do sistema produtivo misto/leite tem maior risco de infecção para brucelose. Recomenda-se que a técnica de sêmen plasma aglutinação seja feita em conjunto com a soroaglutinação.(AU)

PERFIL LABORATORIAL E MOLECULAR PARA AGENTES TRANSMITIDOS POR CARRAPATOS EM CÃES PARTICIPANTES DE TRIAGEM PARA DOAÇÃO DE SANGUE EM MUNICÍPIOS DE SÃO PAULO.

As hemoparasitoses caninas são doenças causadas por microrganismos, transmitidas por carrapatos e comumente encontradas na clínica veterinária de pequenos animais. Essas doenças representam um problema histórico e emergente em diversos países do mundo, porsua alta prevalência, relevância e por riscos a saúde pública, já que algumas são consideradas zoonoses. O diagnóstico desses patógenos é um grande desafio na Medicina Veterinária o que o torna motivo de diversos estudos. A medicina transfusional vem crescendo dentro das práticas veterinárias devido à grande demanda e necessidade do uso de hemocomponentes em doenças específicas ou emergências. Esse aumento requer que os bancos de sangue refinem seus protocolos de coleta e produção de componentes sanguíneospara atender clínicas e hospitais. Dentro desse protocolo se encontra a triagem de doadores de sangue, crescendo assim a preocupação em relação aos mesmos, que passam por uma rigorosa triagem para serem aptos à doação, visando a não propagação de doenças infecciosas e cada vez mais oferecer um produto de boa qualidade para o receptor. O presente trabalho avaliou a infecção por Anaplasma platys, B. canis vogeli, Ehrlichia canis, R. vitalii eR. rickettsii em cães através do diagnóstico molecular e sorológico e correlacionou com os dados encontrados no hemograma durante a triagem para doação de sangue. De 159 amostras analisadas, 8,17% (13/159) foram positivas em PCR para pelo menos um agente, sendo que 3 amostras apresentaram infecção concomitante. Ao exame sorológico o resultado foi não reagente para todos os agentes. Apenas 7 amostras (4,40%) apresentaram alteração hematológica e dessas, apenas 1 estava relacionada ao agente Ehrlichia canis. Os resultados obtidos por esta pesquisa serviram para entender a importância de uma boa triagem de doadores de sangue canino em relação aos principais agentes infecciosos e compreender quais métodos diagnósticos podem auxiliar neste processo de maneira prática e rápida.

Canine hemoparasitosis are diseases caused by microorganisms, transmitted by ticks and commonly found in the veterinary clinic of small animals. These diseases represent a historical and emerging problem in several countries around the world, due to their high prevalence, generated and to public health risks, since they are considered zoonoses. The diagnosis of these pathogens is a major challenge in Veterinary Medicine, which is the reason for several studies. Transfusion medicine has been growing within veterinary practices due to the great demand and need for the use of blood components in specific diseases or emergencies. This increase requires blood banks to refine their blood component collection and production protocols to serve clinics and hospitals.Within this protocol is the screening of blood donors, thus increasing the concern in relation to them, who undergo a rigorous screening to be able to donate, taking the non-spread of infectious diseases and, increasingly, a good quality product to the receiver. The present work evaluated the infection by Anaplasma platys, B. canis vogeli, Ehrlichia canis, R. vitalii and R. rickettsii in dogs through molecular and serological diagnosis and correlated with the data found in the blood count during a blood donation screening. Of 159 analyzed, 8.17% (13/159) were positive in PCR for at least one agent, with 3 dissipated concomitantly. Upon serological examination, the result was not reagent for all agents. Only 7 defining (4.40%), altering hematology and of these, only 1 was related to the agent Ehrlichia canis. The results obtained by this research served to understand the importance of good screening of canine blood donors in relation to the main infectious agents and to understand which diagnostic methods canassist in this process in a practical and quick way.

Effect of number of aspirations and months of the year on the total and viable oocytes in Nellore donors / Efeito do número de aspirações e meses do ano sobre a quantidade de oócitos totais e viáveis em doadoras Nelore

Several factors can influence the recovery of the amount of oocytes for in vitro embryo production (IVEP), including the age of the donor, the time and the frequency at which the animal is collected and climate station year. Another factor is the individual variation of each animal in the number of oocytes and embryos. Thus, the aim of this work was to evaluate the effect of the number of aspirations and the influence of the months of the year in the amount of total and viable oocytes in Nellore cows. The date was collected from January 2011 to December 2012. Non-lactating, cycling Nellore cows (n = 42) of high genetic value were used as oocyte donors. The procedures were carried out in a farm in southeast Brazil (21816S/48582W), located in humid tropical climate. All the donors were maintained on pasture consisting of guinea grass (Panicum maximum and Urochloa brizantha), getting protein mineral supplement energy and water ad libitum daily. The analyzes were performed by proc GLIMMIX of SAS 9.3 (SAS Inst., Inc., Cary, NC).  The amount of total oocytes (P=0.16) and viable (P=0.11) did not influenced by the number of aspirations. However, the months of the year have an effect on the amount of total and viable (P 0.0001) oocytes. Probably the production of oocytes did not suffer influences the number of aspirations performed mainly because the intervals between each OPU

O artigo não possui resumo em português.

EFEITO DO USO DA BETAÍNA ONTOP E REFORMULADA, COM E SEM USO DE COLINA, EM RAÇÕES DE CODORNAS JAPONESAS EM POSTURA

O objetivo foi avaliar o uso da betaína sob duas formas de valorização e uso, associada com 8 Cloreto de Colina em rações de codornas japonesas na fase de postura. Foram utilizadas 504 9 codornas japonesas (Coturnix cortunix japonica) de 74 a 208 dias de idade, em esquema 10 fatorial 3x2+1 (3 forma de uso Betaína OnTop, Reformulada 100% e Reformulada 105%, 2 11 formas de uso da colina, Sem e Com, mais um tratamento controle), em delineamento 12 inteiramente casualizado, totalizando sete tratamentos, com nove repetições de oito aves por 13 unidade experimental. PPCX30médio MAs rações foram formuladas com base nas 14 recomendações das aves na fase experimental, usando alimentos de origem vegetal. A betaína 15 entrou no nível de enriquecimento de 20% do nível de metionina digestível recomendado nas 16 rações ontop, enquanto nas dietas com uso da betaina reformulada, o nível de enriquecimento 17 foi da matriz nutricional do produto (100%) e com valorização extra de 5% (105%).O cloreto 18 de colina entrou nas dietas na dose fixa de 0,07%. Foram analisados dados de desempenho 19 produtivo, qualidade de ovos, histologia e células caliciformes do duodeno e glicogênio 20 hepático. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância com auxílio do programa 21 estatístico com médias comparadas pelo teste Tukey a 5% de probabilidade. No desempenho, 22 apenas o peso médio dos ovos foi influenciado. O uso da betaína promoveu maior peso dos 23 ovos em relação ao controle (P=0,012), independente do modo de uso, enquanto que o uso da 24 colina promoveu resultado superior no peso dos ovos (P=0,016), entretanto, não houve 25 interação entre a betaína e o uso da colina nas rações (P=0,998) para essa variável. Na 26 qualidade dos ovos, somente percentual de casca foi influenciado. O uso da betaína com 27 reformulação a 105% promoveu maior percentual de casca (P=0,0002), quanto o modo de uso 28 a betaina On Top apresentou menor percentual de caca (P=0,006), no entento, não apresentou 29 interação (P=0,9975) O uso da betaína promoveu maior altura dos vilos no tratamento com 30 reformulação de 100% da matriz, contudo teve menor relação vilo:cripta em relação ao 31 tratamento com a reformulação enriquecida em 5% (P=0,011). O glicogênio hepático não foi 32 influenciado (P= 0,187). Nas células caliciformes, a reformulação em 5% extras da matriz foi 33 superior a matriz em 100% (P<0,001). O uso da colina reduziu a altura dos vilos (P=0,010), 34 foi numericamente superior na relação vilo:cripta, e ainda, promoveu maior numero de células 35 caliciformes (P<0,001). Nos geral, o uso da betaína se mostra interessante, pois promove 36 redução no uso de DL-Metionina nas dietas, proporciona melhoria produtiva, e, quando 37 reformulada promove um efeito adicional, potencializando o não uso de colina nas rações. Em 38 conclusão, recomenda-se o uso da betaína reformulada em 100 ou 105% de sua matriz, sem 39 uso de colina, em rações de codornas japonesas em postura.

The objective was to evaluate the use of betaine under two forms of recovery and use, associated with Choline 8 Chloride in Japanese quail rations in the laying phase. Fifty-four Japanese quail (Coturnix cortunix japonica) 9 from 74 to 208 days old were used in a factorial scheme 3x2 + 1 (3 forms of use Betaine 'OnTop, 100% 10 Reformulated and 105% Reformulated', 2 forms of choline use, No and Com ', plus one control treatment), in a 11 completely randomized design, totaling seven treatments, with nine replicates of eight birds per experimental 12 unit. The feed intake (CR, g / bird / day), posture percentage (PPTP,% / bird), feed conversion per 30 egg carton 13 (CCX30A, kg / 30 eggs) and egg mass (g / cm 3), relative weight of bark (CASCA,%), yolk (GEMA,%), bark 14 thickness (ESP, mm) ), albumen (ALBUMIN,%). The rations were formulated based on the recommendations of 15 the birds in the experimental phase, using foods of vegetal origin. Betaine was added to the enrichment level of 16 20% of the recommended digestible methionine level in the ontop rations, while in the diets with the use of the 17 reformulated betaine, the enrichment level was of the nutritional matrix of the product (100%) and with an extra 18 recovery of 5% (105%). Choline chloride entered the diets at a fixed dose of 0.07%. Data of productive 19 performance, egg quality, histology and goblet cells of the duodenum and hepatic glycogen were analyzed. Data 20 of productive performance, egg quality, histology and goblet cells of the duodenum and hepatic glycogen were 21 analyzed. The data were submitted to analysis of variance with the aid of the statistical program with averages 22 compared by the Tukey test at 5% probability. In performance, only the mean egg weight was influenced. The 23 use of betaine promoted a higher egg weight in relation to the control (P = 0.012), regardless of the mode of use, 24 whereas the use of choline promoted a superior egg weight (P = 0.016), however, there was no interaction 25 between betaine and the use of choline in feed (P = 0.998) for this variable. In egg quality, only percentage of 26 bark was influenced. The use of betaine with 105% reformulation promoted a higher percentage of bark (P = 27 0.0002), and the mode of use of betaine On Top had a lower percentage of poop (P = 0,006), therefore, no 28 interaction (P = 0,998). The use of betaine promoted higher villi height in treatment with 100% matrix 29 reformulation, however, it had lower villus: crypt ratio in relation to treatment with 5% enriched reformulation 30 (P = 0.011). Hepatic glycogen was not influenced (P = 0.187). In the goblet cells, the extra 5% reformulation of 31 the matrix was superior to the matrix in 100% (P <0.001). The use of choline reduced the height of the villi (P = 32 0.010), was numerically superior in relation to villus: crypt, and also promoted a greater number of goblet cells 33 (P <0.001). In general, the use of betaine is interesting, since it promotes a reduction in the use of DL-34 Methionine in the diets, it provides productive improvement, and, when reformulated it promotes an additional 35 effect, potentiating the non-use of choline in the diets. In conclusion, it is recommended to use re-formulated 36 betaine in 100 or 105% of its matrix, without the use of choline, in rations of Japanese laying quails.

Aplicação da ultrassonografia colorida doppler em programas de transferência de embriões equinos

Embryo transfer in mares has been commercially used for more than three decades and it is one of most frequently applied biotechnologies on equine reproduction. Ultrasonic doppler exam of donors during the pre and post-breeding and recipients evaluation at the embryo transfer moment is essential for embryo transfer program success. Doppler ultrasonography is a non-invasive technic that allows real-time evaluation of the reproductive system hemodynamics in large animal. For providing anatomical details and blood-flow physiologic information of vessels and tissues, doppler exam can be used for ovulation prognostication, and to evaluate uterine and luteal functional status. Additionally, it can serve as a diagnostic aid of hemodynamic disturbance in reproductive system. Vascularity changes of future ovulatory follicles precede the diameter deviation. Based on this, it is possible to estimate the beginning of the breeding season and the best moment to initiate superovulatory treatments. Moreover, follicular blood flow can be used to decide the most appropriated moment for ovulation induction and breeding of donors mares. Uterine and luteal evaluation using Doppler-mode in mares can be useful to select embryo recipients with satisfactory progesterone production and adequate uterine vascularity for embryo development and maintenance of pregnancy. The maternal recognition of pregnancy also can be evaluated. Although the applicability of the Doppler technology in embryo transfer programs, additional studies are necessary to determine the standards of normality and to characterize different blood-flow disturbances of the reproductive system.

Os programas comerciais de transferência de embriões em éguas existem por mais de três décadas e são hoje uma das biotécnias mais utilizadas na reprodução assistida de equinos. O exame ultrassonográfico nos períodos pré e pós-cobertura de doadoras de embriões, assim como a avaliação de receptoras no momento da inovulação é de vital importância para o êxito de um programa de transferência de embriões. A ultrassonografia Doppler é uma técnica não-invasiva que permite a avaliação em tempo real da hemodinâmica do trato reprodutivo de animais de grande porte. Por fornecer detalhes anatômicos e informações imediatas sobre a fisiologia do fluxo sanguíneo de tecidos e órgãos, o exame doppler permite a avaliação do potencial ovulatório de folículos e do status funcional de corpo lúteo e útero, além de ser uma técnica auxiliar para o diagnóstico de distúrbios na hemodinâmica do sistema reprodutivo. Alterações na perfusão sanguínea dos futuros folículos dominantes são detectáveis em diferentes fases de seu desenvolvimento, como na divergência folicular e no período pré-ovulatório. A partir dessas informações, é possível determinar o princípio da atividade sexual e o momento ideal para o início de tratamentos superovulatórios e indutores de ovulação, assim como o momento mais apropriado para a realização de coberturas de éguas doadoras de embriões. A avaliação através do modo-Doppler do corpo lúteo e útero de éguas receptoras é também um instrumento auxiliar para a seleção de animais com perfil sérico de progesterona e ambiente uterino adequados para a sobrevivência do embrião e manutenção da gestação. Essa técnica pode ser útil ainda ao se avaliar a interação concepto-maternal. Apesar da aplicabilidade da tecnologia doppler dentro de programas de transferência de embriões, novos estudos visando a determinar padrões de normalidade e posterior caracterização de distúrbios de fluxo sanguíneo de trato reprodutivo ainda se fazem necessários.

Aplicação da ultrassonografia colorida doppler em programas de transferência de embriões equinos

Embryo transfer in mares has been commercially used for more than three decades and it is one of most frequently applied biotechnologies on equine reproduction. Ultrasonic doppler exam of donors during the pre and post-breeding and recipients evaluation at the embryo transfer moment is essential for embryo transfer program success. Doppler ultrasonography is a non-invasive technic that allows real-time evaluation of the reproductive system hemodynamics in large animal. For providing anatomical details and blood-flow physiologic information of vessels and tissues, doppler exam can be used for ovulation prognostication, and to evaluate uterine and luteal functional status. Additionally, it can serve as a diagnostic aid of hemodynamic disturbance in reproductive system. Vascularity changes of future ovulatory follicles precede the diameter deviation. Based on this, it is possible to estimate the beginning of the breeding season and the best moment to initiate superovulatory treatments. Moreover, follicular blood flow can be used to decide the most appropriated moment for ovulation induction and breeding of donors mares. Uterine and luteal evaluation using Doppler-mode in mares can be useful to select embryo recipients with satisfactory progesterone production and adequate uterine vascularity for embryo development and maintenance of pregnancy. The maternal recognition of pregnancy also can be evaluated. Although the applicability of the Doppler technology in embryo transfer programs, additional studies are necessary to determine the standards of normality and to characterize different blood-flow disturbances of the reproductive system.

Os programas comerciais de transferência de embriões em éguas existem por mais de três décadas e são hoje uma das biotécnias mais utilizadas na reprodução assistida de equinos. O exame ultrassonográfico nos períodos pré e pós-cobertura de doadoras de embriões, assim como a avaliação de receptoras no momento da inovulação é de vital importância para o êxito de um programa de transferência de embriões. A ultrassonografia Doppler é uma técnica não-invasiva que permite a avaliação em tempo real da hemodinâmica do trato reprodutivo de animais de grande porte. Por fornecer detalhes anatômicos e informações imediatas sobre a fisiologia do fluxo sanguíneo de tecidos e órgãos, o exame doppler permite a avaliação do potencial ovulatório de folículos e do status funcional de corpo lúteo e útero, além de ser uma técnica auxiliar para o diagnóstico de distúrbios na hemodinâmica do sistema reprodutivo. Alterações na perfusão sanguínea dos futuros folículos dominantes são detectáveis em diferentes fases de seu desenvolvimento, como na divergência folicular e no período pré-ovulatório. A partir dessas informações, é possível determinar o princípio da atividade sexual e o momento ideal para o início de tratamentos superovulatórios e indutores de ovulação, assim como o momento mais apropriado para a realização de coberturas de éguas doadoras de embriões. A avaliação através do modo-Doppler do corpo lúteo e útero de éguas receptoras é também um instrumento auxiliar para a seleção de animais com perfil sérico de progesterona e ambiente uterino adequados para a sobrevivência do embrião e manutenção da gestação. Essa técnica pode ser útil ainda ao se avaliar a interação concepto-maternal. Apesar da aplicabilidade da tecnologia doppler dentro de programas de transferência de embriões, novos estudos visando a determinar padrões de normalidade e posterior caracterização de distúrbios de fluxo sanguíneo de trato reprodutivo ainda se fazem necessários.

PRODUÇÃO DE OÓCITOS E EMBRIÕES BUBALINOS: EFEITOS DA ÉPOCA DO ANO E DA ADIÇÃO DE ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia origanoides NA MATURAÇÃO IN VITRO

Esta pesquisa pretendeu estabelecer estratégias para aumentar a eficiência da produção in vitro de embriões (PIVE) bubalinos. Neste contexto, avaliou a eficiência de protocolos de sincronização de doadoras de oócitos bubalinas visando aumentar a disponibilidade e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom (OPU) e o efeito da fonte de obtenção dos oócitos sobre a quantidade e qualidade dos mesmos. Além disso, analisou-se o efeito do fotoperíodo sobre a quantidade e qualidade do oócitos disponíveis, além da competência destes expressos pelas taxas de PIVE. Por fim, avaliou-se o efeito da adição do óleo essencial de Lippia origanoides (OELO) nas concentrações de 2,5; 5,0 e 10µg/mL, no meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de maturação oocitária, qualidade embrionária e PIVE em bovinos e bubalinos. Ovários e oócitos de animais não protocolados, protocolados por aspiração prévia dos folículos e protocolados com uso de hormônios esteróides e gonadotróficos, foram avaliados ultrassonograficamente e de acordo com a qualidade dos oócitos recolhidos por OPU. Demonstrou-se não haver variação na população folicular, no número e na qualidade dos oócitos recuperados por sessão, exceto uma redução dos folículos e oócitos Grau A foi notada quando o ciclo estral foi sincronizado por aspiração prévia dos folículos(p<0,05). Em relação a fonte de obtenção, para todos parâmetros avaliados, foi notada superioridade quando oócitos são recuperados de ovários de frigorífico(p<0,05). A qualidade dos oócitos recolhidos por OPU e a PIVE bubalinos foi influenciada pelo fotoperíodo na região estudada, elevando-se durante os meses de baixa luminosidade(p<0,05), fato não observado em bovinos. Por fim, a partir de avaliações da cromatina com DAPI, encontrou-se uma elevação da taxa de maturação nuclear em bovinos quando utilizou-se concentrações de 2,5µg/mL de OELO(p<0,05). A qualidade dos embriões, expressa pelo número de células, aumentou quando utilizou-se concentrações de 2,5 e 5µg/mL do OELO em bubalinos(p<0,05). Embora não tenha alterado a taxa final de PIVE em ambas as espécies, o OELO apresentou boas perspectivas quando acrescido aos meios MIV em razão da melhoria da qualidade embrionária e da maturação nuclear dos oócitos.

This study aimed to develop strategies to increase the efficiency of buffalo in vitro embryo production (IVEP). In this context, we evaluated the efficiency of synchronization protocols on buffalo oocyte donor aimed at increasing the availability and quality of oocytes obtained by ovum pick-up (OPU) and the effect of the source of obtaining oocytes on the quantity and quality. In addition, we analyzed the effect of photoperiod on the quantity and quality of oocytes available on ovary, beyond the competence of those expressed by the blastocyst rate. Finally, we evaluate the effect of essential oil of Lippia origanoides (EOLO) added at concentrations of 2.5, 5.0 and 10¿g/ml, on in vitro maturation (IVM) media over oocyte maturation rate, embryo quality and IVEP on cattle and buffalo. Ovaries and oocytes of animals without protocol, protocol by prior aspiration of follicles and protocol with use of steroids and gonadotropic hormones were evaluated by ultrasonography and according to the of oocyte quality. It was demonstrated not vary the follicular population, number and quality of oocytes retrieved per session between the protocols but a reduction of follicles and Grade A oocytes was noted when the follicles were aspirated previously OPU. Regarding the oocyte source (live animals and abattoir ovaries), all evaluated parameters showed superiority when oocytes were derived from abattoir ovaries. The quality of oocytes collected by OPU and IVEP buffaloes was influenced by photoperiod in the region studied, increased when daylight decreases, which was not observed in cattle. Finally, from evaluations of chromatin stained with DAPI, it was found that bovine nuclear maturation rate increased when used concentrations of 2,5¿g/ml EOLO. The quality of oocytes, expressed by cell number, increased when used concentrations of 2.5 and 5¿g/ml of EOLO in buffaloes. Although it has not changed the blastocyst rate of PIVE in both species, the EOLO has good prospects when added to IVM media.

Effect of number of aspirations and months of the year on the total and viable oocytes in Nellore donors / Efeito do número de aspirações e meses do ano sobre a quantidade de oócitos totais e viáveis em doadoras Nelore

Several factors can influence the recovery of the amount of oocytes for in vitro embryo production (IVEP), including the age of the donor, the time and the frequency at which the animal is collected and climate station year. Another factor is the individual variation of each animal in the number of oocytes and embryos. Thus, the aim of this work was to evaluate the effect of the number of aspirations and the influence of the months of the year in the amount of total and viable oocytes in Nellore cows. The date was collected from January 2011 to December 2012. Non-lactating, cycling Nellore cows (n = 42) of high genetic value were used as oocyte donors. The procedures were carried out in a farm in southeast Brazil (21816S/48582W), located in humid tropical climate. All the donors were maintained on pasture consisting of guinea grass (Panicum maximum and Urochloa brizantha), getting protein mineral supplement energy and water ad libitum daily. The analyzes were performed by proc GLIMMIX of SAS 9.3 (SAS Inst., Inc., Cary, NC).  The amount of total oocytes (P=0.16) and viable (P=0.11) did not influenced by the number of aspirations. However, the months of the year have an effect on the amount of total and viable (P 0.0001) oocytes. Probably the production of oocytes did not suffer influences the number of aspirations performed mainly because the intervals between each OPU

O artigo não possui resumo em português.

Transplante renal em bloco de doadores-cadáveres infantis: experiência do hcfmrp-usp

The high demand for organs for transplantation has made it necessary to consider using the youngest of potential donors in order to increase the organ supply. Previous reports of decreased graft survival and increased complication rates have made surgeons wary of using such kidneys. This is a chart review with the objective to analyse the results achieved with transplantation of children kidneys ( 2 years) in the HCFMRP-USP from 1998 to 2000. A total of 5 pacients received en bloc renal transplants from donors aged 9 months to 2 years old, weighthing between 8 and 14 kg. Results: Only one patient lost the allograft within 8 days of transplantation due to allograft trombosis. Two patients had ureteral complications, one with ureteral necrosis and urinary fistula and the other with total ureterovesical anastomosis disrupture. Both were successfully repaired. Intra operatory complication was experienced in one pacient, with arterial anastomosis rupture. In loco reperfusion and repair was made. Another patient had inferior renal pole rupture, treated with polar nefrectomy at the 4º PO. Despite such problems, mean follow up of 20,7 months showed serum creatinine ranging from 0,9 to 2 mg/100ml, with no serious complications. Conclusion: Our data support the use of en bloc child cadaveric kidneys, even from infant donors less than two year of age, when the organ necessity supplant the higher rates of complications.

A grande procura de órgãos para transplante tornou necessária a aceitação de potenciais doadores pediátricos a fim de aumentar a oferta. Trabalhos anteriores relatando menor sobrevida do enxerto e taxas maiores de complicação fizeram com que cirurgiões considerassem o assunto com cautela. Esse é um estudo retrospectivo com o objetivo de analisar os resultados de transplantes renais em bloco de doadores infantis ( 2 anos) no HCFMRP-USP entre 1998 e 2000. Um total de cinco pacientes foi submetido a transplante renal em bloco de doadores com idades entre 9 meses e 2 anos de vida, pesando entre 8 e 14 kg. Apenas um paciente perdeu o enxerto no oitavo dia após transplante devido à trombose. Dois pacientes tiveram complicações ureterais, um com necrose do ureter e fístula urinária e outro com ruptura completa da anastomose ureterovesical. Ambos foram reparados com sucesso. Complicação intra-operatória foi observada em um paciente, com ruptura da anastomose arterial. Corrigiu-se com reperfusão in loco e reanastomose. Outro paciente apresentou ruptura do pólo renal inferior, tratada com nefrectomia polar no quarto dia pós-operatório. Seguimento médio de 20,7 meses mostrou, apesar de tais problemas, creatinina sérica variando entre 0,9 e 2 mg/100 ml, sem complicações sérias. Nossos achados sustentam o uso de rins infantis, em bloco, mesmo de doadores com menos de 2 anos de idade, desde que a necessidade do órgão seja maior que o risco oferecido pelo alto índice de complicações.

TRANSPLANTE RENAL EM BLOCO DE DOADORES-CADÁVERES INFANTIS: EXPERIÊNCIA DO HCFMRP-USP

The high demand for organs for transplantation has made it necessary to consider using the youngest of potential donors in order to increase the organ supply. Previous reports of decreased graft survival and increased complication rates have made surgeons wary of using such kidneys. This is a chart review with the objective to analyse the results achieved with transplantation of children kidneys ( 2 years) in the HCFMRP-USP from 1998 to 2000. A total of 5 pacients received en bloc renal transplants from donors aged 9 months to 2 years old, weighthing between 8 and 14 kg. Results: Only one patient lost the allograft within 8 days of transplantation due to allograft trombosis. Two patients had ureteral complications, one with ureteral necrosis and urinary fistula and the other with total ureterovesical anastomosis disrupture. Both were successfully repaired. Intra operatory complication was experienced in one pacient, with arterial anastomosis rupture. In loco reperfusion and repair was made. Another patient had inferior renal pole rupture, treated with polar nefrectomy at the 4º PO. Despite such problems, mean follow up of 20,7 months showed serum creatinine ranging from 0,9 to 2 mg/100ml, with no serious complications. Conclusion: Our data support the use of en bloc child cadaveric kidneys, even from infant donors less than two year of age, when the organ necessity supplant the higher rates of complications.

A grande procura de órgãos para transplante tornou necessária a aceitação de potenciais doadores pediátricos a fim de aumentar a oferta. Trabalhos anteriores relatando menor sobrevida do enxerto e taxas maiores de complicação fizeram com que cirurgiões considerassem o assunto com cautela. Esse é um estudo retrospectivo com o objetivo de analisar os resultados de transplantes renais em bloco de doadores infantis ( 2 anos) no HCFMRP-USP entre 1998 e 2000. Um total de cinco pacientes foi submetido a transplante renal em bloco de doadores com idades entre 9 meses e 2 anos de vida, pesando entre 8 e 14 kg. Apenas um paciente perdeu o enxerto no oitavo dia após transplante devido à trombose. Dois pacientes tiveram complicações ureterais, um com necrose do ureter e fístula urinária e outro com ruptura completa da anastomose ureterovesical. Ambos foram reparados com sucesso. Complicação intra-operatória foi observada em um paciente, com ruptura da anastomose arterial. Corrigiu-se com reperfusão in loco e reanastomose. Outro paciente apresentou ruptura do pólo renal inferior, tratada com nefrectomia polar no quarto dia pós-operatório. Seguimento médio de 20,7 meses mostrou, apesar de tais problemas, creatinina sérica variando entre 0,9 e 2 mg/100 ml, sem complicações sérias. Nossos achados sustentam o uso de rins infantis, em bloco, mesmo de doadores com menos de 2 anos de idade, desde que a necessidade do órgão seja maior que o risco oferecido pelo alto índice de complicações.

Diagnosis of bovine brucellosis in bulls by seroagglutination and seminal plasma agglutination tests / Diagnóstico da brucelose bovina em reprodutores através da soroaglutinação e sêmen plasma aglutinação

Brucellosis is a zoonotic disease with common agent is Brucella abortus in bovine specie. The disease in bulls is usually asymptomatic and could have absence of anti-B. abortus antibody in serum. It was investigated of the occurrence of bovine brucellosis in bulls, which involved testing blood serum and seminal plasma from 177 bulls used for natural mating or as semen donors. Blood was collected from all the animals by venipuncture of the jugular vein to obtain the serum samples, while seminal plasma was obtained from the animals by electroejaculation. Samples were tested in a screening test (rose Bengal test). In the second stage, the samples testing positive in the RBT were subjected to the confirmatory test (2-mercaptoethanol). None of the animals tested positive when blood serum was used. However, 5.06% of the bulls were considered reagent positive when seminal plasma was tested. It also sought to determine whether there was an association between the kind of production and the destination of animals with positive results. The calculated odds ratio indicated that bulls of the kind of production dairy/both (beef and dairy) had a higher risk of brucellosis infection. It is recommended that seminal plasma agglutination and seroagglutination techniques are applied concomitantly.

Brucelose é uma zoonose que nos bovinos tem como principal agente a bactéria Brucella abortus. A doença nos touros é geralmente assintomática e pode haver ausência de anticorpos anti- B. abortus no soro sanguíneo. O presente estudo teve como objetivo principal avaliar a ocorrência da brucelose bovina em reprodutores para isso foram empregados testes oficiais tendo como material o soro sanguíneo e o plasma seminal. Foram utilizados 177 machos bovinos destinados à monta natural ou doação de sêmen. O soro sanguíneo foi obtido através de venopunção da jugular e o plasma seminal através da eletroejaculação. As amostras foram submetidas ao teste de triagem (Antígeno acidificado tamponado) e na segunda etapa, apenas as amostras positivas na triagem foram submetidas ao exame confirmatório (2-mercaptoetanol). Não houveram animais positivos quando utilizado o soro sanguíneo. Para plasma seminal houve 5,06% de touros reagentes. Avaliou-se também se sistema produtivo ou a destinação do animal possuíam associação com resultados positivos. O cálculo de odds ratio demonstrou que os reprodutores bovinos do sistema produtivo misto/leite tem maior risco de infecção para brucelose. Recomenda-se que a técnica de sêmen plasma aglutinação seja feita em conjunto com a soroaglutinação.