Molecular diagnostic for a screening investigation method of tick-borne pathogens in Didelphis albiventris road-killed in north of Paraná, Brazil

The synanthropization of wild animals puts public health at risk by promoting the circulation of zoonotic agents, found naturally in the wild, in the anthropic environment. The objective of this work was to carry out screening by molecular detection of pathogens of the Anaplasmatacea family in Didelphis albiventris, a specie characterized as having a synanthropic habit. Opossums that were dead (n = 25) after being road-killed were collected in the North of Paraná state, southern Brazil during the 2016 and 2018 years, through active search. A questionnaire was filled out with information about the animal and collected place. Biological samples of spleen and liver were collected. The genetic material extracted from the spleen and liver was submitted to molecular diagnosis through PCR for amplification of dsb of Ehrlichia and 16S genes for the other agents of the Anaplasmataceae family. One animal was positive for the genus Ehrlichia in semi-nested PCR for amplification of the 349 bp fragment of the dsb gene in extracted from the liver samples. In PCR for the 16S target no animal was positive. These are preliminary results that reinforce the circulation of Ehrlichia in opossums. To improve the knowledge of these agents in opossums more studies are necessary.(AU)

A sinantropização de animais silvestres coloca em risco a saúde pública por propiciar a circulação de agentes zoonóticos, encontrados naturalmente em ambiente silvestre, no ambiente antrópico. O trabalho teve como objetivo realizar a triagem por detecção molecular de patógenos da família Anaplasmataceae em Didelphis albiventris, espécie caracterizada como de hábito sinantrópico. Gambás mortos (n=25) por atropelamento durante os anos de 2016 e 2018 foram coletados na região norte do Paraná, sul do Brasil, por meio de busca ativa. Realizou-se o preenchimento de formulário com informações sobre a espécie do animal e o local do atropelamento. Foi realizada a necrópsia e coleta de amostras biológicas, de baço e fígado. O material genético extraído de baço e fígado foi submetido a diagnóstico molecular, por meio de PCR, para amplificação dos genes dsb de Ehrlichia sp. e 16S para os demais agentes da família Anaplasmataceae. Um animal foi positivo para o gênero Ehrlichia em semi-nested PCR para a amplificação do fragmento de 349 pb do gene dsb, extraído de fígado. Na PCR para detecção do gene 16S nenhum dos animais foi positivo. Esses resultados preliminares reforçam a circulação de Ehrlichias em gambás. Para melhorar o conhecimento desses agentes em gambás mais estudos são necessários.(AU)

Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions / Reprodução e comportamento reprodutivo do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902, em condições de cativeiro

Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.

O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.

Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions

Abstract Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.

Resumo O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.

Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions / Reprodução e comportamento reprodutivo do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902, em condições de cativeiro

Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.(AU)

O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.(AU)

Breeding and reproductive behaviour of the neo-tropical opossum, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 under captive conditions / Reprodução e comportamento reprodutivo do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902, em condições de cativeiro

Developing a captive breeding system for the widely hunted Caribbean species of opossum Didelphis marsupialis insularis can greatly aide in the management and conservation of this species in the neo-tropics. Although this species possesses ideal traits for captive breeding in this region (tolerance to high heat and humidity, high reproductive rate, and resistance to disease), challenges due to its aggressive behaviour and limited information on its breeding behaviour have prevented a system from being developed for this species. The present study describes a breeding system, and the reproductive behaviour of this species under captive conditions. Six (1 male; 5 females) adult opossums were maintained and managed for breeding over a ten (10) month period. Pouch litter sizes averaged 5±2.5 with a range of 2 to 8. Gestation length was found to be 13.25±0.96 days and 4 litters (n=23) were successfully weaned at 11-13 weeks. It was found that the male D. m. insularis exhibits behaviours of interest that can serve as indicators for receptivity of the female, and overall, that this species can be successfully reared and bred under captive conditions in the neo-tropics.

O desenvolvimento de um sistema de criação em cativeiro para as espécies de gambá do Caribe amplamente caçadas, Didelphis marsupialis insularis, pode auxiliar bastante no manejo e conservação dessa espécie nos neotrópicos. Embora essa espécie possua características ideais para a criação em cativeiro nessa região (tolerância a altas temperaturas e umidade, alta taxa de reprodução e resistência a doenças), alguns fatores, como o seu comportamento agressivo e informações limitadas sobre seu comportamento reprodutivo, impediram o desenvolvimento de um sistema para D. m. insularis. O presente estudo descreve um sistema de criação e o comportamento reprodutivo dessa espécie em condições de cativeiro. Seis gambás adultos (1 macho e 5 fêmeas) foram mantidos para reprodução durante um período de 10 meses. O tamanho da ninhada em bolsa foi em média de 5 ± 2,5 com um intervalo de 2 a 8. A duração da gestação foi de 13,25 ± 0,96 dias, e 4 ninhadas (n = 23) foram desmamadas com sucesso de 11 a 13 semanas. Verificou-se que o macho D. m. insularis exibe comportamentos de interesse que podem servir como indicadores de receptividade da fêmea, e, em geral, essa espécie pode ser criada com sucesso em condições de cativeiro nos neotrópicos.

Topografia dos órgãos abdominais em Didelphis albiventris / Topography of abdominal organs in Didelphis albiventris

O conhecimento da localização dos órgãos nas diferentes regiões do corpo do animal é essencial para a prática clínica, cirúrgica e para o diagnóstico por imagem. O objetivo do estudo foi descrever a anatomia topográfica abdominal do Didelphisalbiventris. Foram utilizados quatro cadáveres (animais jovens), dois destes destinados para o estudo macroscópico em peças a fresco e os outros fixados em solução aquosa de formaldeído a 10%. Os cadáveres foram dissecados e as estruturas anatômicas identificadas, analisadas e fotografadas. A maioria dos órgãos localizados na região abdominal dos cadáveres da espécie D. albiventris apresentou posição similar aos dos caninos, porém, alguns órgãos e a localização de determinadas estruturas apresentaram particularidades importantes, como a presença dos ossos epipúbicos, a ausência do lobo hepático quadrado, a presença de um ceco desenvolvido e o cólon dividido em três segmentos.(AU)

The knowledge about localization of organs in different regions of the animals body is essential for clinical, surgical and diagnostic imaging practice. The purpose of this study was to describe the abdominal topographic anatomy of Didelphis albiventris. Was used four dead bodys (young animals), two of these was intended for the macroscopic study of fresh pieces and the others fixed in 10% aqueous formaldehyde solution. The corpses was dissected and the anatomic structures was identified, analyzed and photographed. Most of the organs located in the abdominal region of cadavers from species D. albiventris presented structure and position similar to canines, however some of these organs and localization of structures presented important particularities, like the presence of epipubic bones, absence of square hepatic lobe, presence of an developed cecum and colon divided into three segments.(AU)

First report of Amblyomma latepunctatum and the second record of Ixodes luciae in the state of Acre, Brazil / Primeiro relato de Amblyomma latepunctatum e o segundo registro de Ixodes luciae no estado do Acre, Brasil

Abstract The state of Acre is in the western part of the Brazilian Amazon region and few studies involving ticks are available. The aim of the present study was to provide the first report of occurrence of Amblyomma latepunctatum and the second record of Ixodes luciae in Acre. Ticks were collected in October 2020 inside an open forested area in the municipality of Rio Branco, the state capital of Acre. Ixodid ticks were identified according to their external morphological characteristics. Three specimens were found on the vegetation by means of a visual search and were identified as Amblyomma scalpturatum (one male and one female) and Amblyomma latepunctatum (one male). Another specimen was found parasitizing a Didelphis marsupialis female that was caught using a Tomahawk trap; this was identified as Ixodes luciae (one male). This first report of A. latepunctatum in the state of Acre increases the number of species recorded here to 22. In addition, presence of I. luciae is confirmed in this state (second record), in the western Brazilian Amazon region.

Resumo O estado do Acre está localizado na Amazônia ocidental brasileira e apresenta poucos estudos envolvendo carrapatos. O presente estudo objetivou relatar, pela primeira vez, a ocorrência da espécie Amblyomma latepunctatum e o segundo registro de Ixodes luciae no estado do Acre, Brasil. A coleta de carrapatos foi realizada em outubro de 2020 no interior de uma floresta aberta no município de Rio Branco, capital do estado do Acre. Carrapatos ixodídeos foram identificados de acordo com suas características morfológicas externas. Três espécimes foram encontrados sobre a vegetação pelo método de inspeção visual e identificados como as espécies Amblyomma scalpturatum (um macho e uma fêmea) e Amblyomma latepunctatum (um macho); e outro foi encontrado parasitando uma fêmea de Didelphis marsupialis que foi capturada por uma armadilha Tomahawk, e identificado como Ixodes luciae (um macho). Este primeiro relato de A. latepunctatum no estado do Acre aumenta o número de espécies registradas aqui para 22. Além disso, a presença de I. luciae é confirmada no estado do Acre (segundo registro), na região da Amazônia ocidental brasileira.

Topografia dos órgãos abdominais em Didelphis albiventris / Topography of abdominal organs in Didelphis albiventris

O conhecimento da localização dos órgãos nas diferentes regiões do corpo do animal é essencial para a prática clínica, cirúrgica e para o diagnóstico por imagem. O objetivo do estudo foi descrever a anatomia topográfica abdominal do Didelphisalbiventris. Foram utilizados quatro cadáveres (animais jovens), dois destes destinados para o estudo macroscópico em peças a fresco e os outros fixados em solução aquosa de formaldeído a 10%. Os cadáveres foram dissecados e as estruturas anatômicas identificadas, analisadas e fotografadas. A maioria dos órgãos localizados na região abdominal dos cadáveres da espécie D. albiventris apresentou posição similar aos dos caninos, porém, alguns órgãos e a localização de determinadas estruturas apresentaram particularidades importantes, como a presença dos ossos epipúbicos, a ausência do lobo hepático quadrado, a presença de um ceco desenvolvido e o cólon dividido em três segmentos.

The knowledge about localization of organs in different regions of the animal's body is essential for clinical, surgical and diagnostic imaging practice. The purpose of this study was to describe the abdominal topographic anatomy of Didelphis albiventris. Was used four dead bodys (young animals), two of these was intended for the macroscopic study of fresh pieces and the others fixed in 10% aqueous formaldehyde solution. The corpses was dissected and the anatomic structures was identified, analyzed and photographed. Most of the organs located in the abdominal region of cadavers from species D. albiventris presented structure and position similar to canines, however some of these organs and localization of structures presented important particularities, like the presence of epipubic bones, absence of square hepatic lobe, presence of an developed cecum and colon divided into three segments.

First report of Amblyomma latepunctatum and the second record of Ixodes luciae in the state of Acre, Brazil / Primeiro relato de Amblyomma latepunctatum e o segundo registro de Ixodes luciae no estado do Acre, Brasil

The state of Acre is in the western part of the Brazilian Amazon region and few studies involving ticks are available. The aim of the present study was to provide the first report of occurrence of Amblyomma latepunctatum and the second record of Ixodes luciae in Acre. Ticks were collected in October 2020 inside an open forested area in the municipality of Rio Branco, the state capital of Acre. Ixodid ticks were identified according to their external morphological characteristics. Three specimens were found on the vegetation by means of a visual search and were identified as Amblyomma scalpturatum (one male and one female) and Amblyomma latepunctatum (one male). Another specimen was found parasitizing a Didelphis marsupialis female that was caught using a Tomahawk trap; this was identified as Ixodes luciae (one male). This first report of A. latepunctatum in the state of Acre increases the number of species recorded here to 22. In addition, presence of I. luciae is confirmed in this state (second record), in he western Brazilian Amazon region.(AU)

O estado do Acre está localizado na Amazônia ocidental brasileira e apresenta poucos estudos envolvendo carrapatos. O presente estudo objetivou relatar, pela primeira vez, a ocorrência da espécie Amblyomma latepunctatum e o segundo registro de Ixodes luciae no estado do Acre, Brasil. A coleta de carrapatos foi realizada em outubro de 2020 no interior de uma floresta aberta no município de Rio Branco, capital do estado do Acre. Carrapatos ixodídeos foram identificados de acordo com suas características morfológicas externas. Três espécimes foram encontrados sobre a vegetação pelo método de inspeção visual e identificados como as espécies Amblyomma scalpturatum (um macho e uma fêmea) e Amblyomma latepunctatum (um macho); e outro foi encontrado parasitando uma fêmea de Didelphis marsupialis que foi capturada por uma armadilha Tomahawk, e identificado como Ixodes luciae (um macho). Este primeiro relato de A. latepunctatum no estado do Acre aumenta o número de espécies registradas aqui para 22. Além disso, a presença de I. luciae é confirmada no estado do Acre (segundo registro), na região da Amazônia ocidental brasileira.(AU)

Topografia dos órgãos abdominais em Didelphis albiventris / Topography of abdominal organs in Didelphis albiventris

O conhecimento da localização dos órgãos nas diferentes regiões do corpo do animal é essencial para a prática clínica, cirúrgica e para o diagnóstico por imagem. O objetivo do estudo foi descrever a anatomia topográfica abdominal do Didelphisalbiventris. Foram utilizados quatro cadáveres (animais jovens), dois destes destinados para o estudo macroscópico em peças a fresco e os outros fixados em solução aquosa de formaldeído a 10%. Os cadáveres foram dissecados e as estruturas anatômicas identificadas, analisadas e fotografadas. A maioria dos órgãos localizados na região abdominal dos cadáveres da espécie D. albiventris apresentou posição similar aos dos caninos, porém, alguns órgãos e a localização de determinadas estruturas apresentaram particularidades importantes, como a presença dos ossos epipúbicos, a ausência do lobo hepático quadrado, a presença de um ceco desenvolvido e o cólon dividido em três segmentos.

The knowledge about localization of organs in different regions of the animal’s body is essential for clinical, surgical and diagnostic imaging practice. The purpose of this study was to describe the abdominal topographic anatomy of Didelphis albiventris. Was used four dead bodys (young animals), two of these was intended for the macroscopic study of fresh pieces and the others fixed in 10% aqueous formaldehyde solution. The corpses was dissected and the anatomic structures was identified, analyzed and photographed. Most of the organs located in the abdominal region of cadavers from species D. albiventris presented structure and position similar to canines, however some of these organs and localization of structures presented important particularities, like the presence of epipubic bones, absence of square hepatic lobe, presence of an developed cecum and colon divided into three segments.

Anti-Leptospira spp. antibodies in wild mammals in the municipality of Monte Mor, São Paulo State, Brazil / Anticorpos anti-Leptospira spp. em mamíferos silvestres do município de Monte Mor, estado de São Paulo, Brasil

Leptospirosis is a potentially fatal zoonosis caused by Leptospira bacteria. Some animal host species are adapted to specific serovars being potential carriers and environmental dispersers. From 2009 to 2011, 45 wild mammals (39 opossums Didelphis albiventris, four porcupines Sphiggurus villosus, one coypu Myocastor coypus and one capybara Hidrochoerus hidrochaeris) found by citizens in anthropic areas of Monte Mor municipality were captured, restrained and had sera samples collected for Leptospira antibody detection. The samples were titrated by the microagglutination technique (MAT) for different serogroups. A total of 35.56% (16/45) animals were reactive for Leptospira antibodies for 11 different serogroups. The most frequent serovar, among the 12 identified, was Icterohaemorrhagiae (6/16), followed by Gryppotyphosa (4/16) and Pyrogenes (2/16). Didelphis albiventris, the most abundant species in the study, had a prevalence of 35.9% (14/39) for Leptospira antibodies, while S. villosus had 0% (0/4), M. coypus (1/1) and H. hydrochaeris (1/1) 100%. Among the seropositive D. albiventris, 35.71% (5/14) and 28.57% (4/14) seroreacted for Leptospira interrogans species, serogroups Icterohaemorrhagiae and Gryppotyphosa respectively, indicating environmental contamination by these bacteria and the possibility of exposure and infection of humans and domestic animals in the studied area.

A leptospirose é uma zoonose potencialmente fatal causada por bactérias do gênero Leptospira. Espécies animais hospedeiras adaptadas a sorovares específicos podem ser portadoras e dispersoras ambientais da bactéria. De 2009 a 2011, 45 mamíferos silvestres (39 gambás Didelphis albiventris, quatro ouriços Sphiggurus villosus, um ratão-do-banhado Myocastor coypus e uma capivara Hidrochoerus hidrochaeris) encontrados por munícipes em áreas antrópicas de Monte Mor, SP, foram capturados, contidos e tiveram amostras de soro coletadas para detecção de anticorpos para Leptospira. As amostras foram tituladas pela técnica de soroaglutinação microscópica (MAT) para diferentes sorogrupos. Um total de 35,56% (16/45) animais foram reagentes para presença de anticorpos para um total de 11 sorogrupos diferentes. O sorovar dominante mais frequente, dentre os 12 identificados, foi o Icterohaemorrhagiae (6/16), seguido de Gryppotyphosa (4/16) e Pyrogenes (2/16). Didelphis albiventris, espécie mais abundante no estudo, apresentou uma prevalência de 35,9% (14/39) de anticorpos anti-Leptospira, enquanto S. villosus teve 0% (0/4) e ambos M. coypus (1/1) e H. hidrochaeris (1/1) 100%. Dentre os Didelphis albiventris avaliados, houve maior frequência de reatividade sorológica à Leptospira interrogans, sorogrupos Icterohaemorrhagiae, com 35,71% (5/14) e Gryppotyphosa com 28,57% (4/14), indicando contaminação ambiental por tais leptospiras e a possibilidade de exposição e infecção de humanos e animais domésticos para tais bactérias na área estudada.

Anti-Leptospira spp. antibodies in wild mammals in the municipality of Monte Mor, São Paulo State, Brazil / Anticorpos anti-Leptospira spp. em mamíferos silvestres do município de Monte Mor, estado de São Paulo, Brasil

Leptospirosis is a potentially fatal zoonosis caused by Leptospira bacteria. Some animal host species are adapted to specific serovars being potential carriers and environmental dispersers. From 2009 to 2011, 45 wild mammals (39 opossums Didelphis albiventris, four porcupines Sphiggurus villosus, one coypu Myocastor coypus and one capybara Hidrochoerus hidrochaeris) found by citizens in anthropic areas of Monte Mor municipality were captured, restrained and had sera samples collected for Leptospira antibody detection. The samples were titrated by the microagglutination technique (MAT) for different serogroups. A total of 35.56% (16/45) animals were reactive for Leptospira antibodies for 11 different serogroups. The most frequent serovar, among the 12 identified, was Icterohaemorrhagiae (6/16), followed by Gryppotyphosa (4/16) and Pyrogenes (2/16). Didelphis albiventris, the most abundant species in the study, had a prevalence of 35.9% (14/39) for Leptospira antibodies, while S. villosus had 0% (0/4), M. coypus (1/1) and H. hydrochaeris (1/1) 100%. Among the seropositive D. albiventris, 35.71% (5/14) and 28.57% (4/14) seroreacted for Leptospira interrogans species, serogroups Icterohaemorrhagiae and Gryppotyphosa respectively, indicating environmental contamination by these bacteria and the possibility of exposure and infection of humans and domestic animals in the studied area.(AU)

A leptospirose é uma zoonose potencialmente fatal causada por bactérias do gênero Leptospira. Espécies animais hospedeiras adaptadas a sorovares específicos podem ser portadoras e dispersoras ambientais da bactéria. De 2009 a 2011, 45 mamíferos silvestres (39 gambás Didelphis albiventris, quatro ouriços Sphiggurus villosus, um ratão-do-banhado Myocastor coypus e uma capivara Hidrochoerus hidrochaeris) encontrados por munícipes em áreas antrópicas de Monte Mor, SP, foram capturados, contidos e tiveram amostras de soro coletadas para detecção de anticorpos para Leptospira. As amostras foram tituladas pela técnica de soroaglutinação microscópica (MAT) para diferentes sorogrupos. Um total de 35,56% (16/45) animais foram reagentes para presença de anticorpos para um total de 11 sorogrupos diferentes. O sorovar dominante mais frequente, dentre os 12 identificados, foi o Icterohaemorrhagiae (6/16), seguido de Gryppotyphosa (4/16) e Pyrogenes (2/16). Didelphis albiventris, espécie mais abundante no estudo, apresentou uma prevalência de 35,9% (14/39) de anticorpos anti-Leptospira, enquanto S. villosus teve 0% (0/4) e ambos M. coypus (1/1) e H. hidrochaeris (1/1) 100%. Dentre os Didelphis albiventris avaliados, houve maior frequência de reatividade sorológica à Leptospira interrogans, sorogrupos Icterohaemorrhagiae, com 35,71% (5/14) e Gryppotyphosa com 28,57% (4/14), indicando contaminação ambiental por tais leptospiras e a possibilidade de exposição e infecção de humanos e animais domésticos para tais bactérias na área estudada.(AU)

Rickets in white-eared opossums (Didelphis albiventris) / Raquitismo em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)

Two young opossums were necropsied and diagnosed with rickets. This study aims to describe the clinical-pathological aspects of rickets in Didelphis albiventris. Macroscopically, the opossums presented kyphosis and scoliosis, lateral deviation of the limbs in varus, locomotion difficulty, and enlargement with softening of costochondral junctions (rickety rosary). Samples of bones and joints were processed for hematoxylin and eosin staining and Masson's trichrome. Microscopically, we observed thickening of the epiphyseal plate, characterized by irregular and multifocal proliferation of serialized and hypertrophic cartilage zones, which formed circular groups of large, dysplastic chondrocytes towards the spongy zone, often surrounded by non-mineralized osteoid tissue. In the cortical bone, there were pale eosinophilic zones around the Havers channels consistent with non-mineralized osteoid. The staining of Masson's trichrome evidenced the accumulation of osteoid tissue in cortical and trabecular bones. It is possible that a mixed cause of absorption deficiency of vitamin D3 associated with an unbalanced Ca:P diet based on lactose-free milk and fruits may have triggered the disease.(AU)

Dois gambás jovens foram necropsiados e diagnosticados com raquitismo. O objetivo do trabalho é descrever os aspectos clínico-patológicos de raquitismo em Didelphis albiventris. Macroscopicamente os gambás apresentaram cifose e escoliose, desvio lateral dos membros em varus, dificuldade de locomoção e alargamento com amolecimento das junções costocondrais (rosário raquítico). Amostras dos ossos e articulações foram processadas para coloração de hematoxilina e eosina e Tricrômico de Masson. Microscopicamente havia espessamento da placa epifisária, caracterizada pela proliferação irregular e multifocal das zonas de cartilagem seriada e hipertrófica, que formavam grupos circulares de condrócitos grandes, displásicos em direção a zona esponjosa frequentemente cercados por tecido osteoide não mineralizado. No osso cortical haviam zonas eosinofílicas pálidas ao redor dos canais de Havers consistentes com osteoide não mineralizado. A coloração de Tricrômico de Masson evidenciou o acúmulo de tecido osteoide no nosso cortical e trabecular. Acredita-se que uma causa mista de déficit de absorção de vitamina D3 associada a uma dieta desbalanceada em Ca:P a base de leite sem lactose e frutas tenha desencadeado a doença.(AU)

Rickets in white-eared opossums (Didelphis albiventris) / Raquitismo em gambás-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)

Two young opossums were necropsied and diagnosed with rickets. This study aims to describe the clinical-pathological aspects of rickets in Didelphis albiventris. Macroscopically, the opossums presented kyphosis and scoliosis, lateral deviation of the limbs in varus, locomotion difficulty, and enlargement with softening of costochondral junctions (rickety rosary). Samples of bones and joints were processed for hematoxylin and eosin staining and Masson's trichrome. Microscopically, we observed thickening of the epiphyseal plate, characterized by irregular and multifocal proliferation of serialized and hypertrophic cartilage zones, which formed circular groups of large, dysplastic chondrocytes towards the spongy zone, often surrounded by non-mineralized osteoid tissue. In the cortical bone, there were pale eosinophilic zones around the Havers channels consistent with non-mineralized osteoid. The staining of Masson's trichrome evidenced the accumulation of osteoid tissue in cortical and trabecular bones. It is possible that a mixed cause of absorption deficiency of vitamin D3 associated with an unbalanced Ca:P diet based on lactose-free milk and fruits may have triggered the disease.(AU)

Dois gambás jovens foram necropsiados e diagnosticados com raquitismo. O objetivo do trabalho é descrever os aspectos clínico-patológicos de raquitismo em Didelphis albiventris. Macroscopicamente os gambás apresentaram cifose e escoliose, desvio lateral dos membros em varus, dificuldade de locomoção e alargamento com amolecimento das junções costocondrais (rosário raquítico). Amostras dos ossos e articulações foram processadas para coloração de hematoxilina e eosina e Tricrômico de Masson. Microscopicamente havia espessamento da placa epifisária, caracterizada pela proliferação irregular e multifocal das zonas de cartilagem seriada e hipertrófica, que formavam grupos circulares de condrócitos grandes, displásicos em direção a zona esponjosa frequentemente cercados por tecido osteoide não mineralizado. No osso cortical haviam zonas eosinofílicas pálidas ao redor dos canais de Havers consistentes com osteoide não mineralizado. A coloração de Tricrômico de Masson evidenciou o acúmulo de tecido osteoide no nosso cortical e trabecular. Acredita-se que uma causa mista de déficit de absorção de vitamina D3 associada a uma dieta desbalanceada em Ca:P a base de leite sem lactose e frutas tenha desencadeado a doença.(AU)

Fibroblastic osteosarcoma in a white-eared opossum (Didelphis albiventris) / Osteossarcoma fibroblástico em gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris)

Osteosarcoma is characterized by the production of osteoid or woven bone, using neoplastic osteoblasts. It is the most common primary bone neoplasm in canines and humans. This neoplasm was previously reported in all vertebrate classes, including a wide variety of mammals. However, there is no case report describing this neoplasm in Didelphis albiventris. Therefore, the objective of this manuscript is to describe the clinical-pathological aspects of fibroblastic osteosarcoma in D. albiventris. A wild adult male white-eared opossum (D. albiventris) arrived at the zoological park of the "Universidade de Caxias do Sul" with a swollen left thoracic limb. After a general clinical examination, the animal was transferred to the Veterinary Clinic of "Universidade de Caxias do Sul" for radiographic examination of the left thoracic limb and thorax. Additionally, some material was collected through fine needle aspiration (FNA) for cytologic evaluation. The radiographic findings and cytologic evaluation indicated osteosarcoma. The animal was euthanized due to severe clinical conditions and guarded prognosis. During necropsy, macroscopic analysis of the viscera was performed, fragments of various organs were collected and fixed in 10% neutral buffered formalin. All fragments were processed following routine histological techniques. The histopathological evaluation confirmed osteosarcoma, which was classified as a fibroblastic subtype. Case reports are crucial for the knowledge of incidence, prevalence, and behavior of the current mentioned disease, as well as other diseases, in species with such limited information. In order to obtain a decisive diagnosis, a few different examination methods were associated. Although the observations presented are based on a single case, this neoplasm had a similar clinical presentation to that described in other species.(AU)

O osteossarcoma é caracterizado pela produção de osteoide ou osso imaturo, por osteoblastos neoplásicos. É a neoplasia óssea primária mais comum em caninos e humanos. Essa neoplasia já foi relatada em todas as classes de vertebrados, incluindo uma grande variedade de mamíferos. Não havendo descrição dessa neoplasia até o momento em Didelphis albiventris. O objetivo deste trabalho é descrever aspectos clínico-patológicos de um caso de osteossarcoma fibroblástico em D. albiventris. Chegou para atendimento no Zoológico da Universidade de Caxias do Sul um gambá-de-orelha-branca (D. albiventris), macho, adulto, de vida livre com aumento de volume no membro torácico esquerdo. Após avaliação clínica geral, o animal foi encaminhado para a Clínica Veterinária da Universidade de Caxias do Sul para realização de radiografia do membro torácico esquerdo e de tórax, sendo também realizada coleta de material por punção aspirativa por agulha fina (PAAF) para avaliação citológica. Os achados radiográficos e da avaliação citológica foram sugestivos de osteossarcoma. Devido ao estado clínico grave e prognóstico reservado optou-se pela eutanásia. Durante a necropsia realizou-se a análise macroscópica das vísceras, foram coletados fragmentos de diversos órgãos, fixados em formalina 10%, processados pelas técnicas histológicas de rotina. Na avaliação histopatológica confirmou-se a suspeita de osteossarcoma sendo classificado no subtipo fibroblástico. A descrição de relatos é fundamental para conhecimento da incidência, prevalência e comportamento desta e de outras doenças em espécies que as informações são limitadas. A associação de diferentes métodos de exames foram necessários para a obtenção de um diagnóstico definitivo. Embora as observações apresentadas se baseiem em um caso único, esta neoplasia possuiu apresentação clínica semelhante a descrita em outras espécies.(AU)

Wildlife rehabilitation: A case study of the neo-tropical, opossum Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902 / Reabilitação de vida selvagem: um estudo de caso do gambá neotropical, Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902

Wildlife rehabilitation facilities in the Caribbean region are limited, yet they can provide relevant information on wild populations. Didelphis marsupialis insularis is a popularly hunted, under-studied, neo-tropical marsupial species that is increasingly being admitted for rehabilitation. The aim of this study was 1. To record the experiences of rehabilitating D. marsupialis insularis in the neo-tropical island of Trinidad and Tobago and 2. To extract and highlight information on the biology of this opossum sub-species. Using admission records, obtained over a roughly four year period, two breeding periods (February to March and August to October) were illustrated. Litter sizes averaged five individuals, with a range of 1 to 8 young. This species was found to be common in urban areas of the country, with dog attacks reported as the major cause for admission. Thus the information recorded by this wildlife rehabilitation facility has provided great insight on the sparsely studied opossum, D. marsupialis insularis.(AU)

As instalações de reabilitação e assistência à vida selvagem na região neotropical do Caribe são limitadas, mas informações relevantes sobre populações selvagens podem ser obtidas nesses locais. Didelphis marsupialis insularis é uma espécie de marsupial neotropical, subestimada e popularmente caçada; no entanto, essa espécie está sendo cada vez mais admitida para a reabilitação. Os objetivos deste estudo foram: 1. Registrar as experiências de reabilitação de D. marsupialis insularis na ilha neotropical de Trinidad e Tobago; e 2. Extrair e destacar informações sobre a biologia dessa subespécie de gambá. Utilizando registros de admissão, obtidos ao longo de um período de aproximadamente quatro anos, foram mostrados dois períodos de reprodução, de fevereiro a março e de agosto a outubro. O tamanho da ninhada foi em média de cinco indivíduos, variando de um a oito jovens. Comumente encontrado em áreas urbanas do país, os ataques de cães foram relatados como a principal causa de internação dessa espécie. Assim, a informação registrada por essa instalação de reabilitação de vida selvagem forneceu uma grande visão sobre o gambá D. marsupialis insularis, que tem sido pouco estudado.(AU)

Fibroblastic osteosarcoma in a white-eared opossum (Didelphis albiventris)

ABSTRACT: Osteosarcoma is characterized by the production of osteoid or woven bone, using neoplastic osteoblasts. It is the most common primary bone neoplasm in canines and humans. This neoplasm was previously reported in all vertebrate classes, including a wide variety of mammals. However, there is no case report describing this neoplasm in Didelphis albiventris. Therefore, the objective of this manuscript is to describe the clinical-pathological aspects of fibroblastic osteosarcoma in D. albiventris. A wild adult male white-eared opossum (D. albiventris) arrived at the zoological park of the Universidade de Caxias do Sul with a swollen left thoracic limb. After a general clinical examination, the animal was transferred to the Veterinary Clinic of Universidade de Caxias do Sul for radiographic examination of the left thoracic limb and thorax. Additionally, some material was collected through fine needle aspiration (FNA) for cytologic evaluation. The radiographic findings and cytologic evaluation indicated osteosarcoma. The animal was euthanized due to severe clinical conditions and guarded prognosis. During necropsy, macroscopic analysis of the viscera was performed, fragments of various organs were collected and fixed in 10% neutral buffered formalin. All fragments were processed following routine histological techniques. The histopathological evaluation confirmed osteosarcoma, which was classified as a fibroblastic subtype. Case reports are crucial for the knowledge of incidence, prevalence, and behavior of the current mentioned disease, as well as other diseases, in species with such limited information. In order to obtain a decisive diagnosis, a few different examination methods were associated. Although the observations presented are based on a single case, this neoplasm had a similar clinical presentation to that described in other species.

RESUMO: O osteossarcoma é caracterizado pela produção de osteoide ou osso imaturo, por osteoblastos neoplásicos. É a neoplasia óssea primária mais comum em caninos e humanos. Essa neoplasia já foi relatada em todas as classes de vertebrados, incluindo uma grande variedade de mamíferos. Não havendo descrição dessa neoplasia até o momento em Didelphis albiventris. O objetivo deste trabalho é descrever aspectos clínico-patológicos de um caso de osteossarcoma fibroblástico em D. albiventris. Chegou para atendimento no Zoológico da Universidade de Caxias do Sul um gambá-de-orelha-branca (D. albiventris), macho, adulto, de vida livre com aumento de volume no membro torácico esquerdo. Após avaliação clínica geral, o animal foi encaminhado para a Clínica Veterinária da Universidade de Caxias do Sul para realização de radiografia do membro torácico esquerdo e de tórax, sendo também realizada coleta de material por punção aspirativa por agulha fina (PAAF) para avaliação citológica. Os achados radiográficos e da avaliação citológica foram sugestivos de osteossarcoma. Devido ao estado clínico grave e prognóstico reservado optou-se pela eutanásia. Durante a necropsia realizou-se a análise macroscópica das vísceras, foram coletados fragmentos de diversos órgãos, fixados em formalina 10%, processados pelas técnicas histológicas de rotina. Na avaliação histopatológica confirmou-se a suspeita de osteossarcoma sendo classificado no subtipo fibroblástico. A descrição de relatos é fundamental para conhecimento da incidência, prevalência e comportamento desta e de outras doenças em espécies que as informações são limitadas. A associação de diferentes métodos de exames foram necessários para a obtenção de um diagnóstico definitivo. Embora as observações apresentadas se baseiem em um caso único, esta neoplasia possuiu apresentação clínica semelhante a descrita em outras espécies.

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichiaspp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.(AU)

A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.(AU)

A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.(AU)

Wildlife rehabilitation: A case study of the neo-tropical, opossum Didelphis marsupialis insularis, Allen 1902.

Abstract Wildlife rehabilitation facilities in the Caribbean region are limited, yet they can provide relevant information on wild populations. Didelphis marsupialis insularis is a popularly hunted, under-studied, neo-tropical marsupial species that is increasingly being admitted for rehabilitation. The aim of this study was 1. To record the experiences of rehabilitating D. marsupialis insularis in the neo-tropical island of Trinidad and Tobago and 2. To extract and highlight information on the biology of this opossum sub-species. Using admission records, obtained over a roughly four year period, two breeding periods (February to March and August to October) were illustrated. Litter sizes averaged five individuals, with a range of 1 to 8 young. This species was found to be common in urban areas of the country, with dog attacks reported as the major cause for admission. Thus the information recorded by this wildlife rehabilitation facility has provided great insight on the sparsely studied opossum, D. marsupialis insularis.

Resumo As instalações de reabilitação e assistência à vida selvagem na região neotropical do Caribe são limitadas, mas informações relevantes sobre populações selvagens podem ser obtidas nesses locais. Didelphis marsupialis insularis é uma espécie de marsupial neotropical, subestimada e popularmente caçada; no entanto, essa espécie está sendo cada vez mais admitida para a reabilitação. Os objetivos deste estudo foram: 1. Registrar as experiências de reabilitação de D. marsupialis insularis na ilha neotropical de Trinidad e Tobago; e 2. Extrair e destacar informações sobre a biologia dessa subespécie de gambá. Utilizando registros de admissão, obtidos ao longo de um período de aproximadamente quatro anos, foram mostrados dois períodos de reprodução, de fevereiro a março e de agosto a outubro. O tamanho da ninhada foi em média de cinco indivíduos, variando de um a oito jovens. Comumente encontrado em áreas urbanas do país, os ataques de cães foram relatados como a principal causa de internação dessa espécie. Assim, a informação registrada por essa instalação de reabilitação de vida selvagem forneceu uma grande visão sobre o gambá D. marsupialis insularis, que tem sido pouco estudado.