New sensitive real-time PCR targeting p28 gene for detection of Ehrlichia canis in blood samples from dogs / Novo PCR em tempo real sensível que visa o gene p28 para a detecção de Ehrlichia canis em amostras de sangue de cães

This study aims to describe a new detection method of a quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) targeting the 28 kDa outer membrane protein gene (p28) as well as to compare this method with a conventional PCR (cPCR), which targets the same gene, in order to evaluate the performance of the technique designed in this study in detecting Ehrlichia canis (E. canis). Optimum oligonucleotides concentrations were reached, and the analytical sensitivity and specificity of the qPCR were performed. A total of 218 dogs’ whole blood samples were conventionally collected for this study. The DNA was extracted from each sample. Subsequently, the samples were tested by an established cPCR and the new qPCR to compare each technique’s performances. This new qPCR method for the molecular detection of E. canis presented a detection limit of ten copies of the fragment and was considered specific for E. canis according to analytical specificity analyses performed in vitro and in silico. The standard curve revealed 100% efficiency and a coefficient of determination (R²) equivalent to 99.8%. Among the samples examined by qPCR, 24.31% were considered positive, significantly greater than those detected by cPCR (15.13%). The qPCR technique reached a higher sensitivity than the cPCR when targeting the p28 gene in detecting E. canis. The qPCR standardized in this study is an efficient method for confirming canine monocytic ehrlichiosis (CME) diagnosis and might provide the parasitemia monitoring during the disease treatment.

Este estudo tem como objetivo descrever um novo método de detecção de uma reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) visando o gene da proteína da membrana externa de 28 kDa (p28), bem como comparar este método com um PCR convencional (cPCR), que visa o mesmo gene, a fim de avaliar o desempenho da técnica desenhada neste estudo na detecção de Ehrlichia canis (E. canis). As concentrações ideais de oligonucleotídeos foram alcançadas e a sensibilidade analítica e a especificidade do qPCR foram determinadas. Um total de 218 amostras de sangue total de cães foram coletadas convencionalmente para este estudo. O DNA foi extraído de cada amostra. Posteriormente, as amostras foram testadas por um cPCR estabelecido e o novo qPCR para comparar os desempenhos entre cada técnica. A curva padrão revelou 100% de eficiência e coeficiente de determinação (R²) equivalente a 99,8%. Dentre as amostras examinadas por qPCR, 24,31% foram consideradas positivas, percentual significativamente maior do que as detectadas por cPCR (15,13%). A técnica qPCR atingiu uma sensibilidade maior do que a cPCR na detecção de E. canis. A qPCR padronizada neste estudo é um método eficiente para a confirmação do diagnóstico de erliquiose monocítica canina (EMC) e pode fornecer o monitoramento de níveis de parasitemia ao longo do tratamento da doença.

New sensitive real-time PCR targeting p28 gene for detection of Ehrlichia canis in blood samples from dogs / Novo PCR em tempo real sensível que visa o gene p28 para a detecção de Ehrlichia canis em amostras de sangue de cães

ABSTRACT: This study aims to describe a new detection method of a quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) targeting the 28 kDa outer membrane protein gene (p28) as well as to compare this method with a conventional PCR (cPCR), which targets the same gene, in order to evaluate the performance of the technique designed in this study in detecting Ehrlichia canis (E. canis). Optimum oligonucleotides concentrations were reached, and the analytical sensitivity and specificity of the qPCR were performed. A total of 218 dogs' whole blood samples were conventionally collected for this study. The DNA was extracted from each sample. Subsequently, the samples were tested by an established cPCR and the new qPCR to compare each technique's performances. This new qPCR method for the molecular detection of E. canis presented a detection limit of ten copies of the fragment and was considered specific for E. canis according to analytical specificity analyses performed in vitro and in silico. The standard curve revealed 100% efficiency and a coefficient of determination (R2) equivalent to 99.8%. Among the samples examined by qPCR, 24.31% were considered positive, significantly greater than those detected by cPCR (15.13%). The qPCR technique reached a higher sensitivity than the cPCR when targeting the p28 gene in detecting E. canis. The qPCR standardized in this study is an efficient method for confirming canine monocytic ehrlichiosis (CME) diagnosis and might provide the parasitemia monitoring during the disease treatment.

RESUMO: Este estudo tem como objetivo descrever um novo método de detecção de uma reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) visando o gene da proteína da membrana externa de 28 kDa (p28), bem como comparar este método com um PCR convencional (cPCR), que visa o mesmo gene, a fim de avaliar o desempenho da técnica desenhada neste estudo na detecção de Ehrlichia canis (E. canis). As concentrações ideais de oligonucleotídeos foram alcançadas e a sensibilidade analítica e a especificidade do qPCR foram determinadas. Um total de 218 amostras de sangue total de cães foram coletadas convencionalmente para este estudo. O DNA foi extraído de cada amostra. Posteriormente, as amostras foram testadas por um cPCR estabelecido e o novo qPCR para comparar os desempenhos entre cada técnica. A curva padrão revelou 100% de eficiência e coeficiente de determinação (R2) equivalente a 99,8%. Dentre as amostras examinadas por qPCR, 24,31% foram consideradas positivas, percentual significativamente maior do que as detectadas por cPCR (15,13%). A técnica qPCR atingiu uma sensibilidade maior do que a cPCR na detecção de E. canis. A qPCR padronizada neste estudo é um método eficiente para a confirmação do diagnóstico de erliquiose monocítica canina (EMC) e pode fornecer o monitoramento de níveis de parasitemia ao longo do tratamento da doença.

New sensitive real-time PCR targeting p28 gene for detection of Ehrlichia canis in blood samples from dogs / Novo PCR em tempo real sensível que visa o gene p28 para a detecção de Ehrlichia canis em amostras de sangue de cães

This study aims to describe a new detection method of a quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) targeting the 28 kDa outer membrane protein gene (p28) as well as to compare this method with a conventional PCR (cPCR), which targets the same gene, in order to evaluate the performance of the technique designed in this study in detecting Ehrlichia canis (E. canis). Optimum oligonucleotides concentrations were reached, and the analytical sensitivity and specificity of the qPCR were performed. A total of 218 dogs whole blood samples were conventionally collected for this study. The DNA was extracted from each sample. Subsequently, the samples were tested by an established cPCR and the new qPCR to compare each techniques performances. This new qPCR method for the molecular detection of E. canis presented a detection limit of ten copies of the fragment and was considered specific for E. canis according to analytical specificity analyses performed in vitro and in silico. The standard curve revealed 100% efficiency and a coefficient of determination (R²) equivalent to 99.8%. Among the samples examined by qPCR, 24.31% were considered positive, significantly greater than those detected by cPCR (15.13%). The qPCR technique reached a higher sensitivity than the cPCR when targeting the p28 gene in detecting E. canis. The qPCR standardized in this study is an efficient method for confirming canine monocytic ehrlichiosis (CME) diagnosis and might provide the parasitemia monitoring during the disease treatment.(AU)

Este estudo tem como objetivo descrever um novo método de detecção de uma reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) visando o gene da proteína da membrana externa de 28 kDa (p28), bem como comparar este método com um PCR convencional (cPCR), que visa o mesmo gene, a fim de avaliar o desempenho da técnica desenhada neste estudo na detecção de Ehrlichia canis (E. canis). As concentrações ideais de oligonucleotídeos foram alcançadas e a sensibilidade analítica e a especificidade do qPCR foram determinadas. Um total de 218 amostras de sangue total de cães foram coletadas convencionalmente para este estudo. O DNA foi extraído de cada amostra. Posteriormente, as amostras foram testadas por um cPCR estabelecido e o novo qPCR para comparar os desempenhos entre cada técnica. A curva padrão revelou 100% de eficiência e coeficiente de determinação (R²) equivalente a 99,8%. Dentre as amostras examinadas por qPCR, 24,31% foram consideradas positivas, percentual significativamente maior do que as detectadas por cPCR (15,13%). A técnica qPCR atingiu uma sensibilidade maior do que a cPCR na detecção de E. canis. A qPCR padronizada neste estudo é um método eficiente para a confirmação do diagnóstico de erliquiose monocítica canina (EMC) e pode fornecer o monitoramento de níveis de parasitemia ao longo do tratamento da doença.(AU)

Molecular detection of Babesia vogeli, Ehrlichia canis and Anaplasma platys in a hospital population of dogs clinically diagnosed with hemoparasitosis / Detecção molecular de Babesia vogeli, Ehrlichia canis e Anaplasma platys em uma população hospitalar de cães diagnosticados clinicamente com hemoparasitoses

There is an increase in tick-borne diseases in dogs in urban and rural areas in Brazil and some of these are of public health importance. Rhipicephalus sanguineus-transmitted hemoparasitoses are the main causes of mortality in dogs. The present study investigated the molecular occurrence of Ehrlichiacanis, Babesia vogeli and Anaplasma platys in dogs with clinical sings and hematological abnormalities suggestive of tick-borne diseases. These dogs were seen at a Veterinary Hospital of a Public University between January 2014 and December 2016, and were evaluated through anamnesis, clinical examination and complementary exams. The polymerase chain reaction technique was used to detect the presence of hemoparasites DNA. From the 461 dogs that were tested for B. vogeli, 10.6% (49/461) were positive, the associated variable was age. Regarding the 730 animals screened for E. canis, 15.1% (110/730) were positive, and the infection was associated with hematocrit and number of platelets. Relative to the 86 samples evaluated for A. platys, 15.1% (13/86) were positive, and no variable presented statistical significance. From the animals positive for B. vogeli, no of these showed positivity by qPCR for Rangelia vitalii. It is concluded that the occurrence of hemoparasitosis in dogs from the Londrina region is common. Therefore, it is emphasized that molecular techniques should be used as an auxiliary tool for the differential diagnosis of the different etiological agents causing hemoparasitosis. Additionally, these molecular tools are essential for better investigation and preventive assertiveness because it allows to detect parasite DNA.

Há um aumento na ocorrência das doenças transmitidas carrapato em cães em áreas urbanas e rurais no Brasil, algumas, inclusive, são de importância para a saúde pública. As hemoparasitoses transmitidas por Rhipicephalus sanguineus estão entre as principais causas de mortalidade em cães. O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência por meio de detecção molecular de Ehrlichia canis, Babesiavogeli e Anaplasma platys em cães com sinais clínicos e anormalidades hematológicas sugestivas de doenças transmitidas por carrapatos. Esses cães foram atendidos em um hospital veterinário de uma universidade pública entre janeiro de 2014 e dezembro de 2016, onde foram avaliados por anamnese, exame clínico e exames complementares. A técnica de reação em cadeia da polimerase foi utilizada para detectar a presença de hemoparasitas. Dos 461 cães testados para B. vogeli, 10,6% (49/461) foram positivos, a variável associada foi a idade. Em relação aos 730 animais testados para E. canis, 15,1%(110/730) foram positivos, e a infecção foi associada ao hematócrito e ao número de plaquetas. Das86 amostras testadas para A. platys, 15,1% (13/86) foram positivas e nenhuma variável apresentou significância estatística. Dentre os animais positivos para B. vogeli, nenhum foi positivo no qPCR para Rangelia vitalii. Conclui-se que a ocorrência de hemoparasitose em cães da região de Londrina é comum. Assim, enfatiza-se que as técnicas moleculares devem ser utilizadas como ferramentas auxiliares para o diagnóstico diferencial dos diferentes agentes etiológicos causadores da hemoparasitose. Além disso, são essenciais para uma melhor investigação e assertividade preventiva, pois permitem detectar o DNA do parasita.

Molecular detection of Babesia vogeli, Ehrlichia canis and Anaplasma platys in a hospital population of dogs clinically diagnosed with hemoparasitosis / Detecção molecular de Babesia vogeli, Ehrlichia canis e Anaplasma platys em uma população hospitalar de cães diagnosticados clinicamente com hemoparasitoses

There is an increase in tick-borne diseases in dogs in urban and rural areas in Brazil and some of these are of public health importance. Rhipicephalus sanguineus-transmitted hemoparasitoses are the main causes of mortality in dogs. The present study investigated the molecular occurrence of Ehrlichiacanis, Babesia vogeli and Anaplasma platys in dogs with clinical sings and hematological abnormalities suggestive of tick-borne diseases. These dogs were seen at a Veterinary Hospital of a Public University between January 2014 and December 2016, and were evaluated through anamnesis, clinical examination and complementary exams. The polymerase chain reaction technique was used to detect the presence of hemoparasites DNA. From the 461 dogs that were tested for B. vogeli, 10.6% (49/461) were positive, the associated variable was age. Regarding the 730 animals screened for E. canis, 15.1% (110/730) were positive, and the infection was associated with hematocrit and number of platelets. Relative to the 86 samples evaluated for A. platys, 15.1% (13/86) were positive, and no variable presented statistical significance. From the animals positive for B. vogeli, no of these showed positivity by qPCR for Rangelia vitalii. It is concluded that the occurrence of hemoparasitosis in dogs from the Londrina region is common. Therefore, it is emphasized that molecular techniques should be used as an auxiliary tool for the differential diagnosis of the different etiological agents causing hemoparasitosis. Additionally, these molecular tools are essential for better investigation and preventive assertiveness because it allows to detect parasite DNA.(AU)

Há um aumento na ocorrência das doenças transmitidas carrapato em cães em áreas urbanas e rurais no Brasil, algumas, inclusive, são de importância para a saúde pública. As hemoparasitoses transmitidas por Rhipicephalus sanguineus estão entre as principais causas de mortalidade em cães. O presente trabalho teve como objetivo investigar a ocorrência por meio de detecção molecular de Ehrlichia canis, Babesiavogeli e Anaplasma platys em cães com sinais clínicos e anormalidades hematológicas sugestivas de doenças transmitidas por carrapatos. Esses cães foram atendidos em um hospital veterinário de uma universidade pública entre janeiro de 2014 e dezembro de 2016, onde foram avaliados por anamnese, exame clínico e exames complementares. A técnica de reação em cadeia da polimerase foi utilizada para detectar a presença de hemoparasitas. Dos 461 cães testados para B. vogeli, 10,6% (49/461) foram positivos, a variável associada foi a idade. Em relação aos 730 animais testados para E. canis, 15,1%(110/730) foram positivos, e a infecção foi associada ao hematócrito e ao número de plaquetas. Das86 amostras testadas para A. platys, 15,1% (13/86) foram positivas e nenhuma variável apresentou significância estatística. Dentre os animais positivos para B. vogeli, nenhum foi positivo no qPCR para Rangelia vitalii. Conclui-se que a ocorrência de hemoparasitose em cães da região de Londrina é comum. Assim, enfatiza-se que as técnicas moleculares devem ser utilizadas como ferramentas auxiliares para o diagnóstico diferencial dos diferentes agentes etiológicos causadores da hemoparasitose. Além disso, são essenciais para uma melhor investigação e assertividade preventiva, pois permitem detectar o DNA do parasita.(AU)

Detection molecular of Rangelia vitalii in dogs from Parana State, Southern Brazil / Detecção molecular de Rangelia vitalii em cães do Estado do Paraná, Sul do Brasil

Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.(AU)

Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.(AU)

Detection molecular of Rangelia vitalii in dogs from Parana State, Southern Brazil / Detecção molecular de Rangelia vitalii em cães do Estado do Paraná, Sul do Brasil

Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.(AU)

Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.(AU)

Detection molecular of Rangelia vitalii in dogs from Parana State, Southern Brazil

Abstract Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.

Resumo Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.

Rangeliosis: histopathological analysis, hematology and molecular detection of canine Rangelia vitalii in Rio Grande do Sul, Brazil / Rangeliose: achados anatomopatológicos, hematológicos e detecção molecular de Rangelia vitalii em cães no Rio Grande do Sul, Brasil

In the period from January 2004 to December 2015, 56 dogs were diagnosed with rangeliosis in the Setor de Patologia Veterinária at Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS). The main hematological abnormalities were thrombocytopenia and anemia. The affected dogs showed signs of apathy, anorexia, fetid and bloody diarrhea, vomiting, and dehydration. At necropsy, the main changes were jaundice, splenomegaly, hepatomegaly, and lymphadenomegaly. Histological analyses revealed parasitophorous vacuoles of Rangelia vitalii in cytoplasmic endothelial cells, mainly in the heart, kidneys, lymph nodes, intestines, and pancreas. Inflammation characterized by mononuclear cells was predominant in the analysis, and most was due to the presence of plasma cells. Other lesion types observed were lymphoid hyperplasia, extramedullary hematopoiesis, erythrophagocytosis, and erythroid lineage hyperplasia in bone marrow. Of the total number of animals, 49 were diagnosed using necropsy and histological analysis, and seven were diagnosed using a molecular analysis (i.e., PCR and genetic sequencing of blood samples). This paper presented a different method of diagnosing rangeliosis in canines. This approach involved histological methods including the quantification and determination of the intensity and distribution of the infectious agent in different organs.

No período de janeiro de 2004 a dezembro de 2015, 56 caninos domésticos obtiveram o diagnóstico de rangeliose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Os cães apresentaram sinais de apatia, anorexia, diarreia fétida e sanguinolenta, êmese e desidratação. As principais alterações hematológicas foram trombocitopenia e anemia. Na necropsia as principais alterações foram icterícia, esplenomegalia, hepatomegalia e linfadenomegalia. Na análise histológica observou-se vacúolos parasitóforos de Rangelia vitalii no citoplasma de células endoteliais, principalmente no coração, rins, linfonodos, intestinos e pâncreas. A inflamação mononuclear foi predominante na análise, sendo que a maioria deu-se pela presença de plasmócitos. Entre outras lesões frequentemente observadas estão hiperplasia linfoide, hematopoiese extramedular e eritrofagocitose, e hiperplasia de linhagem eritroide em medula óssea. Do total, 49 cães foram diagnosticados através de necropsia e análise histológica, e 7 animais através de análise molecular da PCR e sequenciamento genético de amostras de sangue. Este trabalho apresenta um diagnóstico diferencial de rangeliose em caninos, através do método histológico de quantificação e determinação de intensidade e distribuição do agente em diferentes órgãos.

Detection molecular of Rangelia vitalii in dogs from Parana State, Southern Brazil

Abstract Rangelia vitalii infects erythrocytes, leukocytes and endothelial cells of dogs. The present study aimed to report the molecular detection confirmed by sequencing of R. vitalii in the state of Paraná, as well as describe the clinical, hematological and biochemical alterations of the infected dogs. Three sick dogs from the metropolitan area of Curitiba, PR, Brazil, underwent a physical exam, and laboratory tests included hematology, biochemistry, polymerase chain reaction (PCR), and gene sequencing. Clinical signs included apathy, anorexia, and hemorrhage. Intra-erythrocytic and extracellular piroplasms were found on peripheral blood smears from all three dogs. Blood samples from these animals were positive for Babesia sp. by PCR targeting 18S rRNA. PCR products from all three dogs were sequenced, and BLAST analysis showed that the PCR-generated sequences were highly homologous with those of R. vitalii previously reported. Hematologic findings included severe anemia, shift of neutrophils to the regenerative left, and thrombocytopenia. Serum urea levels were increased in all three dogs, and direct bilirubin levels were elevated in one dog.

Resumo Rangelia vitalii infecta eritrócitos, leucócitos e células endoteliais de cães. O presente estudo objetivou relatar a detecção molecular confirmada por sequenciamento de R. vitalii no estado do Paraná e descrever as alterações clínicas, hematológicas e bioquímicas dos cães infectados. Três cães doentes da região metropolitana de Curitiba, PR, Brasil, foram submetidos a exame físico e exames laboratoriais que incluíram hematologia, bioquímica, reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento genético. Os sinais clínicos incluíram apatia, anorexia e hemorragia. Piroplasmas intra-eritrocíticos e extracelulares foram encontrados em esfregaços de sangue periférico dos três cães. As amostras de sangue destes animais foram positivas para Babesia sp. pela PCR baseada no gene 18S rRNA. Os produtos de PCR dos três cães foram sequenciados e a análise de BLAST mostrou que as seqüências geradas por PCR eram altamente homólogas com as de R. vitalii previamente relatadas. Os achados hematológicos incluíram anemia grave, desvio de neutrófilos à esquerda regenerativo e trombocitopenia. Os níveis de uréia no soro aumentaram nos três cães, e os níveis de bilirrubina direta foram elevados em um cão.

Rangeliosis: histopathological analysis, hematology and molecular detection of canine Rangelia vitalii in Rio Grande do Sul, Brazil / Rangeliose: achados anatomopatológicos, hematológicos e detecção molecular de Rangelia vitalii em cães no Rio Grande do Sul, Brasil

In the period from January 2004 to December 2015, 56 dogs were diagnosed with rangeliosis in the Setor de Patologia Veterinária at Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS). The main hematological abnormalities were thrombocytopenia and anemia. The affected dogs showed signs of apathy, anorexia, fetid and bloody diarrhea, vomiting, and dehydration. At necropsy, the main changes were jaundice, splenomegaly, hepatomegaly, and lymphadenomegaly. Histological analyses revealed parasitophorous vacuoles of Rangelia vitalii in cytoplasmic endothelial cells, mainly in the heart, kidneys, lymph nodes, intestines, and pancreas. Inflammation characterized by mononuclear cells was predominant in the analysis, and most was due to the presence of plasma cells. Other lesion types observed were lymphoid hyperplasia, extramedullary hematopoiesis, erythrophagocytosis, and erythroid lineage hyperplasia in bone marrow. Of the total number of animals, 49 were diagnosed using necropsy and histological analysis, and seven were diagnosed using a molecular analysis (i.e., PCR and genetic sequencing of blood samples). This paper presented a different method of diagnosing rangeliosis in canines. This approach involved histological methods including the quantification and determination of the intensity and distribution of the infectious agent in different organs.(AU)

No período de janeiro de 2004 a dezembro de 2015, 56 caninos domésticos obtiveram o diagnóstico de rangeliose no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Os cães apresentaram sinais de apatia, anorexia, diarreia fétida e sanguinolenta, êmese e desidratação. As principais alterações hematológicas foram trombocitopenia e anemia. Na necropsia as principais alterações foram icterícia, esplenomegalia, hepatomegalia e linfadenomegalia. Na análise histológica observou-se vacúolos parasitóforos de Rangelia vitalii no citoplasma de células endoteliais, principalmente no coração, rins, linfonodos, intestinos e pâncreas. A inflamação mononuclear foi predominante na análise, sendo que a maioria deu-se pela presença de plasmócitos. Entre outras lesões frequentemente observadas estão hiperplasia linfoide, hematopoiese extramedular e eritrofagocitose, e hiperplasia de linhagem eritroide em medula óssea. Do total, 49 cães foram diagnosticados através de necropsia e análise histológica, e 7 animais através de análise molecular da PCR e sequenciamento genético de amostras de sangue. Este trabalho apresenta um diagnóstico diferencial de rangeliose em caninos, através do método histológico de quantificação e determinação de intensidade e distribuição do agente em diferentes órgãos.(AU)

Serological evidence of exposure to Ehrlichia canis in cats / Evidências sorológicas da exposição de gatos a Ehrlichia canis

The aim of the present study was to estimate the occurrence of Ehrlichia canis in cats from the semiarid region of Northeast of Brazil. Sera of 101 healthy cats were submitted by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA), and considered positive when antibody titers 40 were obtained. Seroprevalence of 35.6% (36/101) was found, with the following titers: 40 (15 animals); 160 (6); 320 (1); 640 (3), and 2,560 (11). No statistical differences were observed when comparing county of origin, gender, age, breed, and modus vivendi (pet and stray cats), and no ticks were observed in any of the cats. This study revealed exposure to E. canis in cats of the Semiarid Northeast of Brazil.

O objetivo do presente estudo foi estimar a ocorrência de Ehrlichia canis em gatos na região semiárida do Nordeste. Soros de 101 gatos saudáveis foram submetidos à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), sendo considerados positivos títulos 40.  Soroprevalência de 35,6% (36/101) foi encontrada, com os seguintes títulos: 40 (15 animais); 160 (6); 320 (1); 640 (3) e 2560 (11). Não foram observadas diferenças estatísticas quanto ao município de origem, gênero, faixa etária, raça e modus vivendi (gatos domiciliados e errantes) e não foram observados carrapatos em qualquer um dos animais testados. Este estudo revelou exposição de gatos a E. canis na região semiárida do nordeste brasileiro.

Serological evidence of exposure to Ehrlichia canis in cats / Evidências sorológicas da exposição de gatos a Ehrlichia canis

The aim of the present study was to estimate the occurrence of Ehrlichia canis in cats from the semiarid region of Northeast of Brazil. Sera of 101 healthy cats were submitted by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA), and considered positive when antibody titers 40 were obtained. Seroprevalence of 35.6% (36/101) was found, with the following titers: 40 (15 animals); 160 (6); 320 (1); 640 (3), and 2,560 (11). No statistical differences were observed when comparing county of origin, gender, age, breed, and modus vivendi (pet and stray cats), and no ticks were observed in any of the cats. This study revealed exposure to E. canis in cats of the Semiarid Northeast of Brazil.(AU)

O objetivo do presente estudo foi estimar a ocorrência de Ehrlichia canis em gatos na região semiárida do Nordeste. Soros de 101 gatos saudáveis foram submetidos à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), sendo considerados positivos títulos 40.  Soroprevalência de 35,6% (36/101) foi encontrada, com os seguintes títulos: 40 (15 animais); 160 (6); 320 (1); 640 (3) e 2560 (11). Não foram observadas diferenças estatísticas quanto ao município de origem, gênero, faixa etária, raça e modus vivendi (gatos domiciliados e errantes) e não foram observados carrapatos em qualquer um dos animais testados. Este estudo revelou exposição de gatos a E. canis na região semiárida do nordeste brasileiro.(AU)

SEROLOGICAL EVIDENCE OF EXPOSURE TO Ehrlichia canis IN CATS

Abstract The aim of the present study was to estimate the occurrence of Ehrlichia canis in cats from the semiarid region of Northeast of Brazil. Sera of 101 healthy cats were submitted by Indirect Immunofluorescence Assay (IFA), and considered positive when antibody titers 40 were obtained. Seroprevalence of 35.6% (36/101) was found, with the following titers: 40 (15 animals); 160 (6); 320 (1); 640 (3), and 2,560 (11). No statistical differences were observed when comparing county of origin, gender, age, breed, and modus vivendi (pet and stray cats), and no ticks were observed in any of the cats. This study revealed exposure to E. canis in cats of the Semiarid Northeast of Brazil.

Resumo O objetivo do presente estudo foi estimar a ocorrência de Ehrlichia canis em gatos na região semiárida do Nordeste. Soros de 101 gatos saudáveis foram submetidos à Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), sendo considerados positivos títulos 40. Soroprevalência de 35,6% (36/101) foi encontrada, com os seguintes títulos: 40 (15 animais); 160 (6); 320 (1); 640 (3) e 2560 (11). Não foram observadas diferenças estatísticas quanto ao município de origem, gênero, faixa etária, raça e modus vivendi (gatos domiciliados e errantes) e não foram observados carrapatos em qualquer um dos animais testados. Este estudo revelou exposição de gatos a E. canis na região semiárida do nordeste brasileiro.

Primeiro relato de Hepatozoon spp. em jaguatirica (Leopardus pardalis) em Mato Grosso do Sul / First report Hepatozoon spp. in ocelot (Leopardus pardalis) in Mato Grosso do Sul

A hepatozoonose é uma doença transmitida por carrapatos, causada pelo protozoário Hepatozoonspp. que acomete uma grande variedade de animais. No Brasil, existem poucos relatos da doença em jaguatiricas(Leopardus pardalis) assim como dados sobre sua epidemiologia, patogenicidade, vetores e caracterizaçãogenética. Este trabalho tem por objetivo a ocorrência de Hepatozoon spp em uma jaguatirica de vida livreatendida em um Hospital Veterinário Escola, em Mato Grosso do Sul. No hemograma, durante a pesquisa dehemoparasitas, foi observado gametócito de Hepatozoon spp. em neutrófilo e monócito. Na análise hematológicaconstatou-se anemia microcítica normocrômica e leucocitose com neutrofilia, monocitose e linfopenia

The hepatozoonosis is a tick-borne disease caused by protozoan Hepatozoon spp. affecting awide range of animals. In Brazil, there are few reports of the disease in ocelots (Leopardus pardalis) as well asdata on its epidemiology, pathogenicity, vectors and genetic characterization. This work aims the occurrence ofHepatozoon spp in a free ocelot life treated at a Veterinary School Hospital in Mato Grosso do Sul. In the CBC,when searching for hemoparasites was observed gametocyte of Hepatozoon spp. on neutrophils and monocytes.In hematological analysis it was found microcytic normochromic anemia and leukocytosis with neutrophilia,monocytosis and lymphopenia

Primeiro relato de Hepatozoon spp. em jaguatirica (Leopardus pardalis) em Mato Grosso do Sul / First report Hepatozoon spp. in ocelot (Leopardus pardalis) in Mato Grosso do Sul

A hepatozoonose é uma doença transmitida por carrapatos, causada pelo protozoário Hepatozoonspp. que acomete uma grande variedade de animais. No Brasil, existem poucos relatos da doença em jaguatiricas(Leopardus pardalis) assim como dados sobre sua epidemiologia, patogenicidade, vetores e caracterizaçãogenética. Este trabalho tem por objetivo a ocorrência de Hepatozoon spp em uma jaguatirica de vida livreatendida em um Hospital Veterinário Escola, em Mato Grosso do Sul. No hemograma, durante a pesquisa dehemoparasitas, foi observado gametócito de Hepatozoon spp. em neutrófilo e monócito. Na análise hematológicaconstatou-se anemia microcítica normocrômica e leucocitose com neutrofilia, monocitose e linfopenia(AU)

The hepatozoonosis is a tick-borne disease caused by protozoan Hepatozoon spp. affecting awide range of animals. In Brazil, there are few reports of the disease in ocelots (Leopardus pardalis) as well asdata on its epidemiology, pathogenicity, vectors and genetic characterization. This work aims the occurrence ofHepatozoon spp in a free ocelot life treated at a Veterinary School Hospital in Mato Grosso do Sul. In the CBC,when searching for hemoparasites was observed gametocyte of Hepatozoon spp. on neutrophils and monocytes.In hematological analysis it was found microcytic normochromic anemia and leukocytosis with neutrophilia,monocytosis and lymphopenia(AU)

ALTERAÇÕES CLÍNICAS, HEMATOLÓGICAS E MEDULARES EM GATOS DOMÉSTICOS, COM DIAGNÓSTICO FENOTÍPICO DE Leishmania spp. NA REGIÃO METROPOLITANA DE ARACAJU, ESTADO DE SERGIPE, BRASIL.

A leishmaniose é uma zoonose negligenciada com alta incidência em diversas regiões brasileiras, principalmente, no Nordeste. É causada por protozoários do gênero Leishmania, transmitidos por vetores flebotomíneos. Os canídeos são os principais reservatórios e, apesar de estudos apontando a presença da infecção em felinos domésticos, sua participação na epidemiologia da doença ainda é dúbia, principalmente, por esses animais serem, frequentemente, assintomáticos, o que leva ao baixo número de diagnósticos em áreas endêmicas. Com este trabalho objetivou-se detectar Leishmania spp. em gatos domésticos e verificar alterações clínicas, hematológicas e medulares associadas à infecção. Foram coletadas amostras de sangue total e medula óssea de 100 felinos, assim como também de linfonodos, de forma aleatória, domiciliados e peridomiciliados, residentes na região metropolitana de Aracaju, Sergipe. As amostras foram coradas em coloração tipo Romanoswky e avaliadas sob microscopia óptica. Parasitas de Leishmania spp. foram detectados no exame citológico da medula óssea de 19% dos gatos. Os animais positivos apresentaram, em sua maioria, assintomáticos. Quando sintomáticos apresentaram linfoadenopatia, lesões cutâneas e oculares. As alterações hematológicas observadas nos animais positivos foram: anemia 10,53%, 24% rouleaux eritrocitário, 5,3% hipoalbuminemia, policitemia 15,78%, 31,57% trombocitopenia, 15,78% leucocitose, 10,53% neutrofilia, 15,78%linfocitose, 5,3% linfopenia, 10,53%eosinofilia e 15,78%monocitose. A avaliação qualitativa revelou presença de macroplaquetas 13%, linfócitos reativos 8%, plaquetas ativadas 8%, monócitos ativados 5%, anisocitose 5%, policromasia 5%, equinócitos 5%, ovalócitos 5%, agregados plaquetários 5%, esquistócitos 3%, blastos 3%, desvio nuclear neutrofílico à direita 3%, neutrófilos hipersegmentados 3%. No mielograma foi demonstrada 36,84% eritrofagocitose, 31,57% mott cell, 26,31% emperipolese megacariocítica, 26,31% emperipolese, 15,78% possuíam baixa celularidade, 5,78% deseritropoiese, 10,52% flame cell, 5,3% dacriócitos, 5,3% Rouleaux eritrocitário, 5,3% Mielodisplasia, 5,3% leucofagocitose, 5,3% núcleos neutrofílicos em formado de rosca, 5,26% elevação do estoque de ferro. Através dos dados obtidos, pode inferir-se que os protozoários do gênero Leishmania spp. estão circulantes nos felinos da região metropolitana de Aracaju, sugere-se relação com o ciclo de transmissão do parasita entre os indivíduos locais, os achados hematológicos e medulares podem sugerir a resposta da medula em infecções por Leishmania spp., assim como sugerem que a ausência de sintomatologia apresentada possa potencializar a importância do gato no ciclo de transmissão e revela a importância da adição da leishmaniose na lista de diagnóstico diferencial na clínica felina .

Leishmaniasis is a neglected zoonosis with high incidence in several Brazilian regions, mainly in the Northeast. It is caused by protozoa of the genus Leishmania, transmitted by phlebotomine vectors. Canids are the main reservoirs and, despite studies pointing to the presence of the infection in domestic felines, their participation in the epidemiology of the disease is still dubious, mainly because these animals are frequently asymptomatic, which leads to the low number of diagnoses in endemic areas. The objective of this work was to detect Leishmania spp. in domestic cats and to verify clinical, hematological and medullary changes associated with the infection. Samples of whole blood and bone marrow were collected from 100 felines, as well as from lymph nodes, randomly, domiciled and peridomicilied, living in the metropolitan region of Aracaju, Sergipe. The samples were stained in Romanoswky staining and evaluated under light microscopy. Parasites of Leishmania spp. were detected in the cytologic examination of the bone marrow of 19% of the cats. Positive animals were mostly asymptomatic. When symptomatic, they presented lymphadenopathy, cutaneous and ocular lesions. The hematological changes observed in the positive animals were: anemia 10,53%, 24% erythrocyte rouleaux, 5.3% hypoalbuminemia, polycythemia 15,78%, 31.57% thrombocytopenia, 15.78% leukocytosis, 10.53% neutrophilia, 15.78% lymphocytosis, 5.3% lymphopenia, 10.53% eosinophilia and 15.78% monocytosis. The qualitative evaluation revealed the presence of 13% macroplasts, reactive lymphocytes 8%, activated platelets 8%, activated monocytes 5%, anisocytes 5%, polychromasia 5%, 5% echocytes, 5% ovalocytes, 5% platelet aggregates, 3% blasts 3%, neutrophil nuclear deviation to the right 3%, neutrophils 3% hypersegmented. The myelogram showed 36.84% erythrophagocitosis, 31.57% mott cell, 26.31% megakaryocytic emperipolesis, 26.31% emperipolesis, 15.78% had low cellularity, 5.78% deseritropoiesis, 10.52% flame cell , 5.3% red blood cells, 5.3% red blood cells, 5.3% myelodysplasia, 5.3% leukophagocytosis, 5.3% neutrophilic nuclei in threaded form, 5.26% increase in iron stock. From the obtained data, it can be inferred that the protozoa of the genus Leishmania spp. are circulating in the felines of the metropolitan region of Aracaju, it is suggested a relation with the transmission cycle of the parasite among the local individuals, the hematological and spinal findings may suggest the response of the marrow in infections by Leishmania spp., as well as suggest that the absence of the presented symptomatology may potentiate the importance of the cat in the transmission cycle and reveals the importance of the addition of leishmaniasis in the list of differential diagnosis in the feline clinic.

Imunização de bezerros com Anaplasma marginale amostra UFMG3: avaliação da faixa etária e dos fatores que influenciam na infectividade.

Objetivou-se com o seguinte trabalho avaliar a capacidade protetiva de um isolado de Anaplasma marginale de baixa virulência e origem congênita UFMG 3 (Gen Bank - KF005076) em bezerros desafiados naturalmente, assim como também determinar a melhor faixa etária a ser utilizada e a importância do uso de duas inoculações. Esta será uma contribuição para conhecer o comportamento de vacinas contra A. marginale a campo, utilizando amostra de A. marginale de origem congênita com características moleculares e de virulência conhecidas submetidas a desafio natural. A estirpe UFMG3 de Anaplasma marginale na dose de 106 hemácias parasitadas foi capaz de infectar bezerros na fase de aleitamento, independente do status prévio de infecção ou de sorologia para anticorpos anti A. marginale, ou ainda de faixa etária entre 1-45 dias de vida. A inoculação de 106 hemácias parasitadas por Anaplasma marginale , estirpe UFMG3, em bezerros de 1 a 45 dias de vida não causou doença clínica e foi, em parte, responsável pela infecção em 98% e soroconversão em 74% dos bezerros após a segunda inoculação. A faixa etária na qual os bezerros foram inoculados não influenciou a taxa de infecção por A. marginale ou de soroconversão. Bezerros com volume globular mais alto apresentaram maior chance de se infectar pela inoculação de 106 hemácias parasitadas por Anaplasma marginale , estirpe UFMG3. Os bezerros inoculados entre 15-30 dias de vida, apresentaram maior estabilidade em relação a anaplasmose e suas consequências durante a fase de desafio natural pós desmama. O status de infecção por A. marginale e da sorologia após as duas inoculações de A. marginale cepa UFMG3, não influenciaram no número de tratamentos e na incidência de anaplasmose na fase de desafio natural.

The objective of this study was to evaluate the protective capacity of an Anaplasma marginale isolate of low virulence and congenital origin UFMG 3 (Gen Bank - KF005076) in naturally challenged calves, as well as to determine the best age range to be used and the importance of the use of two inoculations. This will be a contribution to know the behavior of vaccines against A. marginale to the field, using sample of A. marginale of congenital origin with known molecular and virulence characteristics submitted to natural challenge. The strain UFMG3 of Anaplasma marginale at the dose of 106 parasitized red blood cells was able to infect calves in the lactation phase, regardless of the previous infection status or serology for antibodies to A. marginale or even between the ages of 1-45 days . The inoculation of 106 red blood cells parasitized by Anaplasma marginale, strain UFMG3, in calves from 1 to 45 days old did not cause clinical disease and was responsible for infection in 98% and seroconversion in 74% of the calves after the second inoculation. The age range in which the calves were inoculated did not influence the rate of infection by A. marginale or seroconversion. Calves with higher globular volume had a greater chance of being infected by the inoculation of 106 red blood cells parasitized by Anaplasma marginale, strain UFMG3. The calves inoculated between 15 and 30 days of life presented greater stability in relation to anaplasmosis and its consequences during the natural challenge phase after weaning. The status of infection by A. marginale and serology after the two inoculations of A. marginale strain UFMG3 did not influence the number of treatments and the incidence of anaplasmosis in the natural challenge phase.

DIAGNÓSTICO MOLECULAR DA ERLIQUIOSE CANINA NO MUNICÍPIO DE ITABUNA- BAHIA

A erliquiose monocítica canina (EMC), causada pela Ehrlichia canis, é uma das doenças que afetam os cães com maiores taxas de morbidade e mortalidade. Considerada uma zoonose, a EMC tem como vetor o carrapato Rhipicephalus sanguineus e está presente em grande extensão do território brasileiro. As manifestações clínicas da enfermidade são muito diversas e incluem febre, apatia, anorexia, pirexia, perda de peso e sinais neurológicos. O diagnóstico é feito através da associação dos sinais clínicos e exames parasitológicos, sorológicos e moleculares. Objetivou-se através deste estudo avaliar a ocorrência de infecção por E. canis em cães provenientes do município de Itabuna-Bahia, bem como identificar os fatores de risco relacionados à infecção. Para isso, foram avaliados 405 cães provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ), Organizações nãogovernamentais (ONGs) e cães domiciliados e semi-domiciliados da cidade de Itabuna. Os animais passaram inicialmente por avaliação clínica seguida de coleta de amostras de sangue por punção venosa, para posterior extração de DNA e pesquisa de E. canis pela técnica de Nested-Reação em Cadeia de Polimerase (nPCR). Adicionalmente, um questionário epidemiológico foi aplicado junto aos proprietários e/ou responsáveis pelos animais, no qual constavam questões relacionadas com os animais, com a finalidade de identificar os fatores de risco de exposição dos cães ao agente etiológico e vetor. Dos 405 cães avaliados, em 67 (16,5%) houve detecção do DNA de E. canis. Foram considerados como fatores de risco para a infecção o sexo e o contato com outros cães. Além disso, foi demonstrada a associação entre a infecção por E. canis e a presença de petéquias e equimoses nos animais estudados.

Canine monocytic ehrlichiosis (CME), caused by Ehrlichia canis, is one of the diseases that affect dogs with higher rates of morbidity and mortality. Considered a zoonosis, the CME has the tick Rhipicephalus sanguineus as vector and is present in a great extent of the Brazilian territory. The clinical manifestations of the disease are very variable and include fever, apathy, anorexia, pyrexia, weight loss and neurological signs.The diagnosis is obtained through the association of clinical signs and parasitological, serological and molecular tests. The aim of this study was to evaluate the occurrence of E. canis infection in dogs from the city of Itabuna-Bahia, as well as to identify risk factors related to infection. For this, 405 dogs from the Center of Control of Zoonosis (CCZ), non-governmental organizations (NGOs) and dogs domiciled and semi-domiciled from the city of Itabuna were evaluated. The animals initially underwent clinical evaluation followed by collection of blood samples by venipuncture, for subsequent DNA extraction and research of E. canis by the Nested-Reaction in Polymerase Chain (nPCR) test. Furthermore, an epidemiological questionnaire was applied to the owners and/or animal responsible, which included questions related to the animals, in order to identify the risk factors of exposure of the dogs to the etiologic agent and vector. Of the 405 dogs evaluated, in 67 (16,5%) there was detection of E. canis DNA. Sex and contact with other dogs were considered as risk factors for the infection. Moreover, the association between E. canis infection and the presence of petechiae and ecchymoses in the animals studied was observed.

Erliquiose uma zoonose em potencial / Ehrlichiosis: a zoonotic potential / Erliquiosis: una zoonosis en potencial

A Ehrlichia é uma bactéria gram-negativa pleomórfica, intracelular obrigatória de células hematopoiéticas maduras ou imaturas, especialmente do sistema fagocitário mononuclear, tais como monócitos e macrófagos. A erliquiose canina ocorre principalmente em regiões tropicais e subtropicais, devido a maior distribuição de seu principal vetor, o Rhipicephalus sanguineus. A doença ocorre em três fases, a aguda, a subclínica e a fase crônica, caracterizadas principalmente pela trombocitopenia. O tratamento é feito com tetraciclinas e seus derivados, principalmente a doxiciclina, tetraciclina, oxitetraciclina e minociclina. Estudos da doença são importantes, visto que a erliquiose canina pode ser patogênica para seres humanos, sendo os organismos causadores de erliquiose humana virtualmente indistinguíveis das espécies que acometem os animais, com homologia de 98,2% e mortalidade de 5% dos pacientes humanos com erliquiose monocítica.(AU)

The Ehrlichia is a gram-negative pleomorphic obligatory intracellular mature or immature hematopoietic cells, especially of the mononuclear phagocyte system, such as monocytes and macrophages. Canine's ehrtichiosis occurs mainly in tropical and subtropical regions, due to greater distribution of its main vector, the Rhipicephalus sanguineus. The disease occurs in three phases, the acute, the subclinical and chronic phase, mainly characterized by thrombocytopenia. Treatment is with tetracyclines and their derivatives, especially doxycycline, tetracycline, oxytetracycline and minocycline. Studies of the disease is important, since the canine ehrlichiosis may be pathogenic for humans, causing organisms and human ehrlichiosis virtually indistinguishable species that affect animals, homology of 98.2% and 5% mortality of human patients with monocytic ehrlichiosis.(AU)

La Ehrlichia es una bacteria gram-negativa pleomórfica, intracelular obligatoria de células hematopoyéticas maduras o inmaduras, especialmente del sistema fagocitário mononuclear, tales como monocitos y macrófagos. La erliquiosis canina ocurre principalmente en regiones tropicales y subtropicales, debido a la mayor distribución de su principal vector, Rhipicephalus sanguineus. La enfermedad se desarrolla en tres fases: aguda, subclínica y crónica,caracterizadas principalmente por una trombocitopenia. El tratamiento se realiza con tetraciclinas e sus derivados,principalmente la doxiciclina, tetraciclina, oxitetraciclina y minociclina. Estudios de la enfermedad son muy importantes,puesto que la erliquiosis canina puede ser patógena para seres humanos, siendo los organismos causadores de la erliquiosis humana virtualmente indistinguibles de las especies que acometen los animales, con homología de 98,2% y mortalidad del 5% de los pacientes humanos con erliquiosis monocítica.(AU)