População de protozoários ruminais em novilhos zebuínos alimentados com ou sem volumoso / Population of Protozoa in zebu steers fed with or without bulk

This study aimed to quantify and identify the profile of the rumen protozoa population of beef steers fed with or without roughage. Nellore crossbred steers raised in extensive system on lignified tropical pastures with mineral supplementation and steers confined for 60 days only receiving pelletized concentrate and whole corn kernels were evaluated. After slaughter, rumen fluid was collected and one ml aliquots were diluted in nine ml formaldehyde solution at 10%. The counts of small, medium and large protozoa were held in Sedgewick Rafter chambers and identification of genus was possible after staining lugol and optical microscope with a 40X objective. The concentration of rumen protozoa positively correlated with pH ruminal. Cattle fed without roughage had significantly lower rumen protozoa population (P<0.05). Animals fed roughage had higher occurrence of Dasytrichia genus, Charonina, Entodinum, Diplodinium, Ostracodinium and Epidinium while those fed without bulk, the Buetschilia, Isotricha, Eodinium, Polyplastron, Elyplastron, Metadinium and Enoploplastron were the most frequent genus.(AU)

População de protozoários ruminais em novilhos zebuínos alimentados com ou sem volumoso / Population of Protozoa in zebu steers fed with or without bulk

This study aimed to quantify and identify the profile of the rumen protozoa population of beef steers fed with or without roughage. Nellore crossbred steers raised in extensive system on lignified tropical pastures with mineral supplementation and steers confined for 60 days only receiving pelletized concentrate and whole corn kernels were evaluated. After slaughter, rumen fluid was collected and one ml aliquots were diluted in nine ml formaldehyde solution at 10%. The counts of small, medium and large protozoa were held in Sedgewick Rafter chambers and identification of genus was possible after staining lugol and optical microscope with a 40X objective. The concentration of rumen protozoa positively correlated with pH ruminal. Cattle fed without roughage had significantly lower rumen protozoa population (P<0.05). Animals fed roughage had higher occurrence of Dasytrichia genus, Charonina, Entodinum, Diplodinium, Ostracodinium and Epidinium while those fed without bulk, the Buetschilia, Isotricha, Eodinium, Polyplastron, Elyplastron, Metadinium and Enoploplastron were the most frequent genus.(AU)

Effect of spineless-cactus mucilage on the in vitro rumen fermentation of cellulose, starch, and protein / Efeito da mucilagem da palma forrageira sobre a fermentação ruminal in vitro da celulose, amido e proteína

The aim of this study was to evaluate the effect of the levels of spineless-cactus mucilage on the in vitro rumen fermentation of cellulose, starch, and protein. A completely randomized experimental design was adopted with a 5 × 3 factorial arrangement consisting of five levels of spineless-cactus mucilage (0, 5, 10, 20, and 40%) and three substrates (carboxymethylcellulose, starch, and trypticase). Treatments were evaluated in a ruminal environment simulated by in vitro incubation at different times of assessment: 0, 3, 6, 12, 24, and 48 h. The incubation procedure was repeated three times, totaling three evaluations per incubation time for each treatment. There was an interaction (P<0.05) between the mucilage levels and substrate for all evaluated ruminal parameters, except for the concentration of microbial protein after 48 h of fermentation and for the proportions of acetate and butyrate fermentation at time 0 h. There was a quadratic increase (P<0.05) in the concentration of ammoniacal nitrogen after 48 h of incubation in the media containing carboxymethylcellulose and trypticase. pH values decreased quadratically (P<0.05) as a function of the mucilage levels in the media containing carboxymethylcellulose and trypticase. Overall, no expressive alterations were observed between the individual molar proportions of acetate, propionate, and butyrate with the addition of spineless-cactus mucilage levels to the different substrates. Spineless- cactus mucilage affects the pattern of fermentation of starch, cellulase, and protein performed by rumen microorganisms.(AU)

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o efeito dos níveis de mucilagem de palma forrageira sobre a fermentação ruminal in vitro de celulose, amido e proteína. Utilizou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado, disposto em um esquema fatorial 5 × 3, com 5 níveis de mucilagem de palma forrageira (0, 5, 10, 20 e 40%) e três substratos (carboxymetilcelulose, amido e trypticase). Os tratamentos foram avaliados em ambiente ruminal simulado por incubação in vitro em diferentes tempos de incubação: 0, 3, 6, 12, 24 e 48 horas. O procedimento de incubação foi repetido três vezes, perfazendo-se o total de três avaliações por tempo de incubação para cada tratamento. Houve interação (P<0,05) entre os níveis de mucilagem e substratos para todos os parâmetros ruminais avaliados, com exceção da concentração de proteína microbiana após 48 horas de fermentação e para as proporções de acetato e butirato às 0 hora de fermentação. Houve aumento quadrático (P<0,05) para a concentração de nitrogênio amoniacal após 48 horas de incubação nos meios, contendo carboxymetilcelulose e trypticase. Os valores de pH reduziram de forma quadrática (P<0,05) em função dos níveis de mucilagem nos meios contendo carboxymetilcelulose e trypticase. De maneira geral, não foram observadas alterações expressivas entre as proporções molares individuais de acetato, propionato e butirato com a adição dos níveis de mucilagem de palma forrageira aos diferentes substratos. A inclusão de níveis de mucilagem de palma forrageira afeta o padrão de fermentação do amido, celulose e proteína realizada por microrganismos ruminais.(AU)

Effect of spineless-cactus mucilage on the in vitro rumen fermentation of cellulose, starch, and protein / Efeito da mucilagem da palma forrageira sobre a fermentação ruminal in vitro da celulose, amido e proteína

The aim of this study was to evaluate the effect of the levels of spineless-cactus mucilage on the in vitro rumen fermentation of cellulose, starch, and protein. A completely randomized experimental design was adopted with a 5 × 3 factorial arrangement consisting of five levels of spineless-cactus mucilage (0, 5, 10, 20, and 40%) and three substrates (carboxymethylcellulose, starch, and trypticase). Treatments were evaluated in a ruminal environment simulated by in vitro incubation at different times of assessment: 0, 3, 6, 12, 24, and 48 h. The incubation procedure was repeated three times, totaling three evaluations per incubation time for each treatment. There was an interaction (P<0.05) between the mucilage levels and substrate for all evaluated ruminal parameters, except for the concentration of microbial protein after 48 h of fermentation and for the proportions of acetate and butyrate fermentation at time 0 h. There was a quadratic increase (P<0.05) in the concentration of ammoniacal nitrogen after 48 h of incubation in the media containing carboxymethylcellulose and trypticase. pH values decreased quadratically (P<0.05) as a function of the mucilage levels in the media containing carboxymethylcellulose and trypticase. Overall, no expressive alterations were observed between the individual molar proportions of acetate, propionate, and butyrate with the addition of spineless-cactus mucilage levels to the different substrates. Spineless- cactus mucilage affects the pattern of fermentation of starch, cellulase, and protein performed by rumen microorganisms.

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar o efeito dos níveis de mucilagem de palma forrageira sobre a fermentação ruminal in vitro de celulose, amido e proteína. Utilizou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado, disposto em um esquema fatorial 5 × 3, com 5 níveis de mucilagem de palma forrageira (0, 5, 10, 20 e 40%) e três substratos (carboxymetilcelulose, amido e trypticase). Os tratamentos foram avaliados em ambiente ruminal simulado por incubação in vitro em diferentes tempos de incubação: 0, 3, 6, 12, 24 e 48 horas. O procedimento de incubação foi repetido três vezes, perfazendo-se o total de três avaliações por tempo de incubação para cada tratamento. Houve interação (P<0,05) entre os níveis de mucilagem e substratos para todos os parâmetros ruminais avaliados, com exceção da concentração de proteína microbiana após 48 horas de fermentação e para as proporções de acetato e butirato às 0 hora de fermentação. Houve aumento quadrático (P<0,05) para a concentração de nitrogênio amoniacal após 48 horas de incubação nos meios, contendo carboxymetilcelulose e trypticase. Os valores de pH reduziram de forma quadrática (P<0,05) em função dos níveis de mucilagem nos meios contendo carboxymetilcelulose e trypticase. De maneira geral, não foram observadas alterações expressivas entre as proporções molares individuais de acetato, propionato e butirato com a adição dos níveis de mucilagem de palma forrageira aos diferentes substratos. A inclusão de níveis de mucilagem de palma forrageira afeta o padrão de fermentação do amido, celulose e proteína realizada por microrganismos ruminais.

Caracterização do microbioma ruminal de búfalos de água (Bubalus bubalis) mantidos em diferentes ecossistemas na Amazônia Oriental

A elevada eficiência da fermentação ruminal é uma das principais formas para maximizar a produção de ruminantes, por isso é importante conhecer o perfil microbiano do rúmen, além das condições que favorecem o crescimento dessa comunidade. Entretanto, não há relatos que descrevam a composição microbiana em búfalos na Amazônia. O estudo foi realizado com o objetivo de caracterizar o microbioma de búfalos na Amazônia Oriental, nos períodos seco e chuvoso, de agosto de 2018 a janeiro de 2019, nos ecossistemas: Baixo Amazonas (BA), Continente do Pará (PA), Ilha do Marajó (IM) e Tomé-Açú (TA) (sistema de confinamento). Foram usados 71 búfalos machos, idade de 26 a 36 meses, mestiços Murrah x Mediterrâneo, peso médio de 432 kg no final do período chuvoso e 409 kg no final do período seco, alimentados com pastagens nativas e cultivadas. No sistema de confinamento a alimentação era composta por silagem de sorgo, farelo de soja, pré-mistura sorgo úmido e ração comercial. Foram coletadas amostras da dieta de cada ecossistema para análise bromatológica. As coletas do conteúdo ruminal foram realizadas em matadouros frigoríficos, com rúmen totalmente esvaziado e homogeneizado, as frações sólidas e líquidas foram separadas e o pH ruminal foi mensurado. O DNA foi extraído das amostras do rúmen e então sequenciado, utilizando-se o sequencimaneto com enzima de restrição reduzida. A composição taxonômica revelou grande similaridade entre os ecossistemas. Em nível de filo, houve predominância dos Bacteroidetes e Firmicutes. Dentre as arqueas, o filo Euryarchaeota foi mais abundante. A Prevotellaceae, Lachnospiraceae e Acidaminococcaceae foram as famílias bacterianas de maior abundância. Foram identificados 61 gêneros na microbiota analisada, entre os domínios bactérias e arqueas. 23 gêneros bacterianos diferiram significativamente (P< 0,001) entre o confinamento e os demais ecossistemas, como, Bacillus, Ruminococcus e Bacteroides tiveram menor abundância em amostras do sistema de Tomé-Açu. Dentre as Archaeas, o gênero Methanomicrobium apresentou menor abundância relativa em Tomé-Açu, enquanto Methanosarcina foi mais abundante.Quatro gêneros bacterianos diferiram entre os períodos do ano e o sistema de confinamento, dentre eles, Bacillus e Clostridium foram menos abundantes no confinamento. Methanomicrobium foi a arquea mais abundante no período chuvoso, enquanto a Methanosarcina teve abundância elevada no confinamento. Observou-se 27 gêneros bacterianos e 2 arqueais com diferenças significativas entre as frações sólida e líquida do conteúdo ruminal. Doze gêneros foram mais abundantes na fração líquida, dentre eles Bacillus, Ruminobacter e Prevotella. Quinze gêneros tiveram maiores abundâncias relativas na fração sólida, dentre eles, Clostridium e Eubacterium. Methanosarcina foi o gênero de arquea mais abundante na fração líquida e Methanosbrevibacter mais abundante na fração sólida. Foram encontradas diferenças significativas entre os micro-organismos nas diferentes dietas, períodos do ano e frações do conteúdo ruminal.

The high efficiency of rumen fermentation is one of the main ways to maximize the production of ruminants, so it is important to know the microbial profile of the rumen, in addition to the conditions that favor the growth of this community. However, there are no studies that describe the ruminal microbiota in buffaloes in the Amazon. The study was carried out with the objective of characterizing the buffalo microbiome in the Eastern Amazon, in the dry and rainy seasons, from August 2018 to January 2019, in the ecosystems: Baixo Amazonas (BA), Continente do Pará (PA), Ilha do Marajó (IM) and Tomé-Açú (TA) (confinement system). 71 male buffalo were sampled, aged 26 to 36 months, crossbred Murrah x Mediterranean, average weight of 432 kg at the end of the rainy season and 409 kg at the end of the dry season, fed on native and cultivated pastures.In the confinement system, the feed consisted of sorghum silage, soybean meal, wet sorghum premix and commercial feed. Samples of the diet from each ecosystem were collected for bromatological analysis. The collections of ruminal content were carried out in slaughterhouses, with rumen completely emptied and homogenized, the solid and liquid fractions were separated, the ruminal pH was measured. DNA was extracted from the rumen samples and then sequenced using the restriction enzyme representation sequencing, with reduced restriction enzyme. The taxonomic composition showed great similarity between ecosystems. At the phylum level, there was a predominance of Bacteroidetes andFirmicutes. Among archaea, the phylum Euryarchaeota was mostabundant.Prevotellaceae, Lachnospiraceae and Acidaminococcaceae were the most abundant bacterial families. 61 genera were recognized in the analyzed microbiota, between the bacterial and archaeal domains. 23 bacterial genera differed significantly (P<0.001) between confinement and other ecosystems, such as Bacillus, Ruminococcus and Bacteroides had less abundance in samples from the Tomé-Açu system. Among the Archaeas, the genus Methanomicrobium was less abundant in Tomé-Açu, while Methanosarcina was more abundant.Four bacterial genus differed significantly between periods of the year and the confinement system, among them, Bacillus and Clostridium were less abundant in the confinement. Methanomicrobium was the most abundant archaea in the rainy season, while Methanosarcina had high abundance in confinement. Significant differences between microorganisms were found between different diets, periods of the year and fractions of rumen content.

Efeito de diferentes concentrações de sais sobre a fermentação e crescimento de microbiano ruminal de bovinos e caprinos

Objetivou-se avaliar o efeito de diferentes concentrações de cloreto de sódio (NaCl), cloreto de magnésio (MgCl2) e cloreto de cálcio (CaCl2) sobre a condutividade elétrica, fermentação e crescimento de microrganismos celulolíticos, glicolíticos e amilolíticos advindas de líquido ruminal de bovinos e caprinos. Foram utilizados líquidos ruminais de um bovino e um caprino, fistulados no rúmen para obtenção do inóculo. Avaliaram-se seis níveis de NaCl, MgCl2 e CaCl2 (0 mg/dL, 100 mg/dL, 200 mg/dL, 400 mg/dL, 800 mg/dL e 1600 mg/dL) e três substratos (amido, celulose e glicose), em delineamento inteiramente casualizado, no esquema fatorial 6 x 3 para determinação dos parâmetros de crescimento microbiano. Nos experimentos com bovinos, obteve-se efeito quadrático dos níveis de CaCl2 sobre a concentração de proteína microbiana nos meios com amido, e efeito quadrático para o MgCl2 quando no meio com celulose. Ocorreu efeito quadrático dos níveis de NaCl, MgCl2 e CaCl2 sobre a concentração de proteína microbiana nos meios com glicose. A concentração de NNH3 cresceu linearmente com o aumento dos níveis de NaCl e CaCl2, no meio contendo celulose. Já as concentrações de acetato decresceram linearmente em função do aumento do NaCl nos meios contendo amido, celulose e glicose. Obteve-se efeito quadrático para o substrato amido e celulose sobre as concentrações de propionato nos níveis de NaCl. Nos experimentos com caprino, as concentrações de proteína microbiana aumentaram linearmente com o aumento dos níveis do NaCl, MgCl2 e CaCl2, quando o substrato foi o amido. Ocorreu efeito quadrático do CaCl2 sobre a concentração de proteína microbiana quando o substrato foi a celulose. Contudo, nos níveis de CaCl2 sobre a concentração de N-NH3 existiu efeito linear crescente para amido. Em relação ao MgCl2, possuiu efeito linear sobre a concentração de N-NH3 quando o substrato foi a celulose. Observou-se efeito quadrático dos níveis de NaCl no meio contendo amido sobre a concentração de acetato. Houve efeito linear decrescente dos níveis de CaCl2 no meio contendo celulose sobre a concentração de acetato. Obteve-se efeito linear decrescente dos níveis de NaCl e MgCl2 no meio contendo amido sobre a concentração de propionato. Obteve-se efeito linear decrescente nos níveis de NaCl, MgCl2 e CaCl2 no meio contendo amido sobre a concentração de butirato, e ocorreu efeito linear decrescente do MgCl2 no meio contendo glicose. Concluindo-se que os microrganismos advindos de bovino na presença do sal NaCl e do CaCl2 até 1600 mg/dL ou condutividade elétrica de 34,81dS/m e de 22,95dS/m não afetam a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de amido, celulose e glicose. O MgCl2 também não afeta a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de celulose e glicose ao nível de até 1600 mg/dL ou condutividade elétrica de 24,11dS/m. Entretanto, a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de amido é inibida a níveis acima de 800 mg/dL ou com condutividade 18,22dS/m. Entretanto, os microrganismos advindos de caprino na constituição do sal NaCl e do CaCl2 até 1600 mg/dL ou condutividade elétrica de 34,81dS/m e de 22,95dS/m não afetam a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de amido, celulose e glicose. O MgCl2 também não afeta a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de celulose e glicose ao nível de até 1600 mg/dL ou condutividade elétrica de 24,11dS/m. Entretanto, a eficiência microbiana das bactérias fermentadoras de amido é inibida a níveis acima de 800 mg/dL ou com condutividade 18,22dS/m.

The objective was to evaluate the effect of sodium chloride (NaCl), magnesium chloride (MgCl2) and calcium chloride (CaCl2) different concentrations on the electrical conductivity, growth and fermentation of cellulolytic, glycolytic and amylolytic bacterias, resulting from cattle and goats. Were used cattle and goats rumen liquid, from rumen cannulated animals to obtain the inoculum. Was evaluated six levels of NaCl, MgCl2 and CaCl2 (0 mg/dL, 100 mg/dL, 200 mg/dL, 400 mg/dL, 800 mg/dL and 1600 mg/dL) and three substrates (starch, cellulose and glucose) in a completely randomized delineation in a factorial 6 x 3 to microbial growth parameters determination. In the cattle experiments, was obtained a CaCl2 quadratic effect levels on microbial protein concentration in the starch medium, and an MgCl2 quadratic effect in the cellulose medium. Occurred a quadratic levels effect of NaCl, MgCl2 and CaCl2 on the microbial protein concentration in glucose medium. While acetate concentrations decreased linearly with the increase of NaCl in starch, cellulose and glucose containing medium. Was obtained a quadratic effect to starch and cellulose medium, above the propionate concentrations in NaCl levels. However in goat experiments the microbial protein concentrations increased linearly with NaCl, MgCl2 and CaCl2 increasing levels, in starch medium. Occurred a quadratic effect of CaCl2 concentration on the microbial protein in cellulose medium . However, at CaCl2 levels on N-NH3 concentration existed a linear increasing effect for starch. Regarding MgCl2, happened a linear effect on the NH3 concentration in cellulose medium. Was observed a quadratic effect levels of NaCl in starch containing medium on the acetate concentration. There was a decreasing linear effect of CaCl2 levels in cellulose containing medium on the acetate concentration. Was obtained a NaCl and MgCl2 linear effect levels in starch containing medium on propionate concentration. Was obtained a NaCl, MgCl2 and CaCl2 linear decrease levels in starch containing medium on the butyrate concentration and was MgCl2 declining linear effect on glucose containing medium. Concluding that the bovine bacteria in NaCl presence above of 400 mg /dl reduced the cellulose fermenting bacteria efficiency. While glucose fermenting bacteria are tolerant to NaCl concentrations supporting levels of up to 800mg/dl and the amylolytic bacteria tolerate levels up to 1600 mg/dl. However, the MgCl2 salt at levels of 1600 mg/dl does not affect the efficiency of starch and glucose fermenting bacteria, on the other hand, the cellulose fermentative bacteria have shown to be less tolerant to levels above 400 mg/dl. However, the CaCl2 at the level of 1600 mg/dl does not affect the efficiency of starch, cellulose and glucose microbial fermenting bacteria. However, the goats bacteria in the constitution of NaCl salt to 1600mg /dl does not affect the efficiency of starch, cellulose and glucose microbial fermenting bacteria. At the same way MgCl2 did not affected the cellulose and glucose fermenting microbial efficiency at the level up to 1600mg /dl. However, the microbial efficiency of starch fermenting bacteria is inhibited at levels above 800 mg /dl. The CaCl2 up to 1600mg /dl does not affect the microbial efficiency of starch, cellulose and glucose fermenting bacteria.

Efeitos de diferentes níveis de concentrado, tipos de carboidratos não fibrosos e digestibilidade da fibra sobre o ecossistema ruminal.

Objetivou-se com o presente estudo caracterizar as mudanças na população bacteriana ruminal, ocasionadas pelo aumento de concentrado na dieta, utilização de diferentes fontes de CNF e volumosos com diferentes digestibilidades da fibra. Para tanto, foram coletadas amostras de líquido ruminal, para posterior quantificação relativa de bactérias ruminais, oriundas de quatro projetos de pesquisa conduzidos no Laboratório de Pesquisa em Gado de Corte, pela FMVZ/USP - Pirassununga-SP. Em todos os experimentos, foram utilizados animais da raça Nelore, castrados e canulados no rúmen, em delineamento experimental de quadrado latino. Foi realizada uma quantificação relativa através da técnica de qPCR de três bactérias celulolíticas (Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus e Ruminococcus flavefaciens), duas amilolíticas (Streptococcus bovis e Ruminobacter amylophilus), e uma consumidora de lactato (Megasphaera elsdenii), para determinação do efeito da dieta sobre a população de microrganismos ruminais. No Experimento 1, as dietas experimentais foram formuladas com dois níveis de concentrado: 60% ou 80%, sendo que o volumoso utilizado foi silagem de cana-de-açúcar (variedade IACSP 93-3046). Dentro de cada nível de inclusão de concentrado, foram utilizados três fontes de CNF: milho floculado a vapor (MFV), polpa cítrica peletizada (PCP), ou milho moído (MM). MFV e PCP foram incluídas na dieta em substituição parcial de 70% do MM. No Experimento 2, as dietas experimentais foram formuladas com 60% de concentrado, sendo que o volumoso utilizado foi a cana-de-açúcar fresca ou ensilada, com alta ou baixa digestibilidade da fibra (DFDN). No Experimento 3, as dietas experimentais foram formuladas com dois níveis de concentrado: 60% ou 80%, sendo que o volumoso utilizado foi a cana-de-açúcar fresca, com alta ou baixa DFDN. No Experimento 1, o aumento de concentrado resultou em queda da população de F. succinogenes (P<0,01) e S. bovis (P<0,01), e aumentou R. flavefaciens (P=0,05). A substituição parcial do MM por PCP resultou em aumento de S. bovis (P=0,01) e redução de R. flavefaciens (P<0,01). Já a substituição do MM por MFV reduziu R. albus (P<0,01). Houve uma interação Dieta*CNF apenas para a M. elsdenii (P=0,02), onde o MFV aumentou M. elsdenii apenas na dieta com 80% de concentrado. No Experimento 2, o fornecimento de cana fresca resultou em um aumento da população de S. bovis (P<0,01), e M. elsdenii (P=0,06). Houve interação entre DFDN e modo de conservação da cana sobre a população de F. succinogenes (P=0,01), onde a cana de alta DFDN aumentou a população de F. succinogenes apenas com o fornecimento de cana fresca. No Experimento 3, o aumento de concentrado resultou em queda de S. bovis (P<0,01), e aumento de R. amylophilus (P=0,07). Houve interação entre DFDN e nível de concentrado para a F. succinogenes (P=0,06) e R. albus (P<0,01), onde a cana de alta DFDN aumentou a população destes microrganismos apenas na dieta com 60% de concentrado. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que o desempenho animal pode ser explicado pela modulação da população de microrganismos ruminais por meio da composição da dieta.

The aim of this study was to characterize the population change of cellulolytic and amylolytic rumen bacteria, caused by the increase of concentrate, and by the use of different sources of NFC in diets with sugarcane silage. Samples of rumen contents were collected for subsequent analysis of the relative quantification of rumen microorganisms, from four research projects conducted at the Research Laboratory in Beef Cattle at FMVZ / USP - Pirassununga-SP. In all experiments, Nellore beef cattle, castrated, and ruminal cannulated, were used in a Latin square design. Three cellulolytic bacteria (Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus and Ruminococcus flavefaciens); two amylolytic (Streptococcus bovis and Ruminobacter amylophilus); and a lactate fermenting microorganism (Megasphaera elsdenii), were quantified by the technique of qPCR, to determine the effect of diet on the population of rumen microorganisms. Experiment 1, the experimental diets were formulated with two levels of concentrate: 60% or 80%, and the roughage used was sugarcane silage (IACSP 93-3046). Within each level of concentrate inclusion, three different sources of NFC were used: steam flaked corn (SFC), pelleted citrus pulp (PCP), or ground corn (GC). SFC and PCP were included in the diet in partial replacement of 70% of GC. Experiment 2, the experimental diets were formulated with 60% of concentrate level, and two sugarcane genotypes divergent for stalk NDFD, with high or low NDFD, either freshly cut or as silage. Experiment 3, the experimental diets were formulated with two levels of concentrate: 60% or 80%, and the roughage used was fresh sugarcane, with high or low NDFD. In the Experiment 1, increasing concentrate in the diet decreased the population of F. succinogenes (P<0.01) and S. bovis (P<0.01), and increased R. flavefaciens population (P=0.05). The partial replacement of GC by PCP increased S. bovis population (P=0.01) and decreased R. flavefaciens population (P<0.01). The replacement of GC by SFC decreased the population of R. albus (P<0.01). There was a significant Diet*NFC interaction only for M. elsdenii (P=0.02), where SFC increased the relative population only at the 80% concentrate diet. Experiment 2, Diets with fresh sugarcane increased the population of S. bovis (P <0.01), and M. elsdenii (P=0.06). There was a significant interaction between NDFD and conservation mode of sugarcane for F. succinogenes (P = 0.01), where sugarcane with high NDFD increased F. succinogenes population only when sugarcane was offered as freshly cut. In Experiment 3, the increase concentrate in the diet decreased S. bovis population (P<0.01), and increased R. amylophilus (P=0.07). There was a significant interaction between NDFD and concentrate level for F. succinogenes (P=0.06) and R. albus (P<0.01), where sugarcane with high NDFD increased the population of these microorganisms only at the 60% concentrate diet. The animal performance can be explained by modulation of the population of the rumen microorganisms through diet composition.