Comparison of five parasitological techniques for laboratory diagnosis of Balantidium coli cysts / Comparação de cinco técnicas parasitológicas para diagnóstico laboratorial de cistos de Balantidium coli

Abstract Balantidium coli is a protozoon that can cause dysentery in humans, pigs and nonhuman primates, with zoonotic potential. In the literature, there is still little information on the effectiveness of different laboratory techniques for diagnosing this disease. This study compared and evaluated the performance of the Lutz, modified Ritchie, Faust, modified Sheather and direct examination techniques for detecting cysts of this protozoon. Between 2012 and 2014, 1905 fecal samples were collected from captive animals in the state of Rio de Janeiro. Of these, 790 were obtained from the rectum of pigs and 1115 from enclosures occupied by nonhuman primates. B. coli cysts were most evident through direct examination (22.4% of the samples) and the Lutz technique (21%). Fair agreement (Kappa = 0.41; p 0.05) was observed only between direct examination and Lutz. The flotation techniques (Faust and modified Sheather) did not show good recovery of cysts. A statistically significant difference (p 0.05) in the frequency of cysts between pigs and nonhuman primates could only be observed through direct examination and the Lutz technique. The most efficient method for diagnosing this parasitosis was seen to an association between direct examination and the spontaneous sedimentation technique.(AU)

Resumo Balantidium coli é um protozoário que pode determinar disenteria em humanos, suínos e primatas não humanos apresentando potencial zoonótico. Na literatura ainda são escassas as informações sobre a eficiência das diferentes técnicas laboratoriais para o diagnóstico dessa parasitose. Este estudo comparou e avaliou o desempenho das técnicas de Lutz, Ritchie modificada, Faust, Sheather modificada e do exame direto para a detecção de cistos desse protozoário. Entre 2012 e 2014, foram coletadas 1905 amostras fecais de animais cativos no Estado do Rio de Janeiro. Dessas, 790 foram obtidas da ampola retal de suínos e 1115 dos recintos de primatas não humanos. Cistos de B. coli foram 22,4 % mais evidenciados pelo exame direto; e pela técnica de Lutz, 21% das amostras. Concordância regular (Kappa = 0,41; p 0,05) foi observada somente entre exame direto e Lutz. As técnicas de flutuação, Faust et al. e Sheather modificada não apresentaram boa recuperação dos cistos. Diferença estatística significativa (p 0,05) na frequência de cistos entre suínos e primatas não humanos pode ser observada somente no exame direto e na técnica de Lutz. A metodologia mais eficiente para diagnóstico dessa parasitose foi observada pela associação do exame direto e da técnica de sedimentação espontânea.(AU)

Diagnosis of gastrointestinal parasites in cats: a comparison of different methodologies / Diagnóstico de parasitoses gastrintestinais de felinos e comparação entre técnicas coproparasitológicas

We evaluated the effectiveness of the Willis-Mollay, Faust, sedimentation and direct test methods for diagnosing endoparasitic diseases in 198 domestic cats. Comparisons between these techniques were made using the chi-square test (χ2) and Cochran’s Q-test. No infection was detected in 47 (23.7%) out of the 198 cats examined. Ancylostoma spp. proved to be the most important parasite in cats, occurring in 129 animals (65.2%), followed by Cystoisospora spp. in 61 (30.8%), Dipylidium caninum in 18 (9.1%), Toxocaracati in 9 (4.5%), Taenia spp. in 9 (4.5%), Sarcocystis spp. in 2 (1.0%) and Giardia spp. in 2 (1.0%). No association was noticed between the parasites diagnosed and the variables of breed, gender and age of the animals examined (P > 0.05). The Willis technique showed the highest effectiveness in diagnosing Ancylostomaspp. (76 cases; 45.5%), while the direct test had the least effectiveness (49 cases; 29.3%). The Willis and Faust techniques were superior for detecting Cystoisospora spp. and showed the same positivity (30 cases; 18.0%).Most of the Dipylidium caninum cases were diagnosed by means of the sedimentation technique (14 cases;8.4%). We recommend that the Willis and sedimentation techniques should be used in association for diagnosing' gastrointestinal parasites in cats

Nós comparamos a eficiência dos métodos de Willis-Mollay, Faust, Sedimentação e Exame Diretono diagnóstico de infecções por helmintos e protozoários em felinos. Um total de 167 gatos domiciliados doMunicípio de Araçatuba, São Paulo, foram examinados por meio das técnicas supramencionadas, sendo que as comparações entre as mesmas foram efetuadas pelo teste Qui-Quadrado (χ2) e pela prova Q de Cochran. Não foi detectada infecção, em 47 (23.7%) dos 198 gatos examinados. Ancylostoma spp. foi o principal parasito de gatos, tendo ocorrido em 129 animais (65,2%), seguido por Cystoisospora spp. em 61 (30,8%), Dipylidium caninumem 18 (9,1%), Toxocara cati em 9 (4,5%), Taenia spp. em 9 (4,5%), Sarcocystis spp. em 2 (1,0%) e Giardia spp.em 2 (1,0%). Não foi observada associação entre os parasitos diagnosticados e a raça, sexo e idade dos animais examinados (P > 0,05). A técnica de Willis teve maior eficiência para o diagnóstico de Ancylostoma spp. (76 =45,5%), enquanto o Exame Direto mostrou-se o menos eficiente (49 = 29,3%). As técnicas de Willis e Faust foram superiores na detecção de Cystoisospora spp. e apresentaram a mesma positividade (30 = 18,0%). A maioria dos casos de Dipylidium caninum foi diagnosticada pela técnica de Sedimentação (14 = 8,4%). Nós recomendamos a associação das técnicas de Willis e Sedimentação para o diagnóstico de parasitos gastrintestinais de felinos

Evaluation of the accuracy of parasitological techniques for the diagnosis of intestinal parasites in cats / Avaliação da acurácia de técnicas parasitológicos para o diagnóstico de parasitos intestinais em gatos

The accuracy of the parasitological techniques of Willis, Hoffman-Pons-Janer or Lutz (HPLJ), Sheather and Faust was evaluated in fecal samples from stray cats caught by the Zoonosis Control Center in Goiânia, Goiás, Brazil. These four techniques were applied separately to analyze 154 fecal samples, and their accuracy was analyzed based on an evaluation of their sensitivity, specificity, positive and negative predictive values, and Kappa index, resulting in the selection of the Willis technique as the nominal gold standard. Of the 154 samples, 115 (74.68%) tested positive for intestinal parasites. The analysis of the frequency of positivity indicated that the HPLJ technique detected 86.1% of the positive samples and was the closest to the gold standard. The analysis of the accuracy of the techniques was evaluated using the most prevalent parasites. The Sheather technique showed the highest accuracy in the detection of Ancylostomatidae, while the Sheather and HPLJ techniques showed similar accuracies in the detection of Cystoisospora spp. when compared to the gold standard. Lastly, the Faust technique showed the highest accuracy in the detection of Toxoplasma gondii when compared to the gold standard. This study underscores the importance of combining parasitological techniques in the diagnosis of intestinal parasites in cats.(AU)

A avaliação da acurácia das técnicas parasitológicas de Willis, Hoffman-Pons-Janer ou Lutz (HPJL), Sheather e Faust foram realizadas em amostras fecais de gatos capturados pelo Centro de Controle de Zoonoses em Goiânia, Goiás. Essas quatro técnicas foram utilizadas separadamente para análise de 154 amostras fecais. A análise de acurácia foi empregada, avaliando-se a sensibilidade, especificidade, valor preditivo positivo, valor preditivo negativo e índice kappa, sendo a técnica de Willis eleita como padrão-ouro. Das amostras analisadas 74,68% (115/154) foram positivas para enteroparasitos. A análise de frequência de positividade demonstrou que a técnica HPJL detectou 86,1% dos positivos, aproximando-se do padrão-ouro. A avaliação da acurácia foi realizada pela análise dos parasitos mais prevalentes, sendo que, para Ancilostomídeos, a técnica de Sheather apresentou melhor acurácia; para Cystoisospora spp., as técnicas de Sheather e HPJL foram semelhantes e para Toxoplasma gondii, a técnica de Faust apresentou melhor acurácia comparada ao padrão ouro. Este estudo demonstra a importância da associação de técnicas parasitológicas para o diagnóstico de enteroparasitos em gatos.(AU)

Diagnosis of gastrointestinal parasites in cats: a comparison of different methodologies / Diagnóstico de parasitoses gastrintestinais de felinos e comparação entre técnicas coproparasitológicas

We evaluated the effectiveness of the Willis-Mollay, Faust, sedimentation and direct test methods for diagnosing endoparasitic diseases in 198 domestic cats. Comparisons between these techniques were made using the chi-square test (χ2) and Cochrans Q-test. No infection was detected in 47 (23.7%) out of the 198 cats examined. Ancylostoma spp. proved to be the most important parasite in cats, occurring in 129 animals (65.2%), followed by Cystoisospora spp. in 61 (30.8%), Dipylidium caninum in 18 (9.1%), Toxocaracati in 9 (4.5%), Taenia spp. in 9 (4.5%), Sarcocystis spp. in 2 (1.0%) and Giardia spp. in 2 (1.0%). No association was noticed between the parasites diagnosed and the variables of breed, gender and age of the animals examined (P > 0.05). The Willis technique showed the highest effectiveness in diagnosing Ancylostomaspp. (76 cases; 45.5%), while the direct test had the least effectiveness (49 cases; 29.3%). The Willis and Faust techniques were superior for detecting Cystoisospora spp. and showed the same positivity (30 cases; 18.0%).Most of the Dipylidium caninum cases were diagnosed by means of the sedimentation technique (14 cases;8.4%). We recommend that the Willis and sedimentation techniques should be used in association for diagnosing' gastrointestinal parasites in cats(AU)

Nós comparamos a eficiência dos métodos de Willis-Mollay, Faust, Sedimentação e Exame Diretono diagnóstico de infecções por helmintos e protozoários em felinos. Um total de 167 gatos domiciliados doMunicípio de Araçatuba, São Paulo, foram examinados por meio das técnicas supramencionadas, sendo que as comparações entre as mesmas foram efetuadas pelo teste Qui-Quadrado (χ2) e pela prova Q de Cochran. Não foi detectada infecção, em 47 (23.7%) dos 198 gatos examinados. Ancylostoma spp. foi o principal parasito de gatos, tendo ocorrido em 129 animais (65,2%), seguido por Cystoisospora spp. em 61 (30,8%), Dipylidium caninumem 18 (9,1%), Toxocara cati em 9 (4,5%), Taenia spp. em 9 (4,5%), Sarcocystis spp. em 2 (1,0%) e Giardia spp.em 2 (1,0%). Não foi observada associação entre os parasitos diagnosticados e a raça, sexo e idade dos animais examinados (P > 0,05). A técnica de Willis teve maior eficiência para o diagnóstico de Ancylostoma spp. (76 =45,5%), enquanto o Exame Direto mostrou-se o menos eficiente (49 = 29,3%). As técnicas de Willis e Faust foram superiores na detecção de Cystoisospora spp. e apresentaram a mesma positividade (30 = 18,0%). A maioria dos casos de Dipylidium caninum foi diagnosticada pela técnica de Sedimentação (14 = 8,4%). Nós recomendamos a associação das técnicas de Willis e Sedimentação para o diagnóstico de parasitos gastrintestinais de felinos(AU)

Comparative study of five techniques for the diagnosis of canine gastrointestinal parasites / Estudo comparativo de cinco técnicas para o diagnóstico de parasitos gastrointestinais caninos

Differences in the efficacy of diagnostic techniques employed in the parasitological examination of feces are a limiting factor of this laboratory procedure in the field of Veterinary Parasitology. To verify advances in this type of examination in dogs, we conducted a study using a new technique (TFGII/Dog). Fifty naturally infected dogs were housed in individual stalls, and their feces were evaluated comparatively using this technique and four other conventional techniques. The TFGII/Dog showed high levels of sensitivity and efficiency, surpassing the diagnostic accuracy of the other techniques with a kappa concordance index of 0.739 (Substantial), as opposed to 0.546 (Moderate), 0.485 (Moderate), 0.467 (Moderate), and 0.325 (Fair) of the Spontaneous-Sedimentation, Centrifugal-Flotation in Saturated Zinc Sulfate Solution, Centrifugal-Flotation in Saturated Sugar Solution, and Spontaneous-Flotation in Saturated Sodium Chloride Solution techniques, respectively. The combination of positive results of all techniques comprises eight genera of parasites, with Ancylostoma spp. predominating among helminths, and Cystoisospora spp. among protozoa. The TFGII/Dog technique showed better diagnostic performance, and can therefore be considered an important tool for optimizing the results of laboratory routines and for the control of canine gastrointestinal parasites.(AU)

As diferenças na eficácia de técnicas de diagnóstico empregadas no exame parasitológico das fezes é um factor limitante desse procedimento de laboratório no campo da Medicina Veterinária. Com o objetivo de confirmar avanços desse tipo de examinação em cães, a abordagem desse trabalho foi apresentar um estudo com o uso de uma nova técnica (TFGII/Dog). Cinquenta cães naturalmente infectados foram alojados em baias individuais, e suas fezes foram avaliadas comparativamente, usando-se a nova técnica e outras quatro técnicas convencionais. O TFGII/Dog apresentou altos níveis de sensibilidade e eficiência, superando o diagnóstico de outras técnicas com um índice de concordância kappa de 0,739 (Substancial), em oposição a 0,546 (Moderado), 0,485 (Moderado), 0,467 (Moderado) e 0,325 (Pobre) de Sedimentação-Espontânea, Centrífugo-Flutuação em Solução Saturada de Sulfato de Zinco, Centrífugo-Flutuação em Solução Saturada de Açúcar, e Flutuação-Espontânea em Solução Saturada de Cloreto de Sódio, respectivamente. A combinação de resultados positivos das técnicas mostrou oito gêneros de parasitos, com Ancylostoma spp. predominando entre helmintos, e Cystoisospora spp. entre os protozoários. A técnica de TFGII/Dog apresentou melhor desempenho diagnóstico e, portanto, pode ser considerada uma importante ferramenta para otimizar os resultados de rotinas de laboratório e o controle de parasitos gastrintestinais de cães.(AU)

Comparative study of five techniques for the diagnosis of canine gastrointestinal parasites / Estudo comparativo de cinco técnicas para o diagnóstico de parasitos gastrointestinais caninos

Differences in the efficacy of diagnostic techniques employed in the parasitological examination of feces are a limiting factor of this laboratory procedure in the field of Veterinary Parasitology. To verify advances in this type of examination in dogs, we conducted a study using a new technique (TFGII/Dog). Fifty naturally infected dogs were housed in individual stalls, and their feces were evaluated comparatively using this technique and four other conventional techniques. The TFGII/Dog showed high levels of sensitivity and efficiency, surpassing the diagnostic accuracy of the other techniques with a kappa concordance index of 0.739 (Substantial), as opposed to 0.546 (Moderate), 0.485 (Moderate), 0.467 (Moderate), and 0.325 (Fair) of the Spontaneous-Sedimentation, Centrifugal-Flotation in Saturated Zinc Sulfate Solution, Centrifugal-Flotation in Saturated Sugar Solution, and Spontaneous-Flotation in Saturated Sodium Chloride Solution techniques, respectively. The combination of positive results of all techniques comprises eight genera of parasites, with Ancylostoma spp. predominating among helminths, and Cystoisospora spp. among protozoa. The TFGII/Dog technique showed better diagnostic performance, and can therefore be considered an important tool for optimizing the results of laboratory routines and for the control of canine gastrointestinal parasites.

As diferenças na eficácia de técnicas de diagnóstico empregadas no exame parasitológico das fezes é um factor limitante desse procedimento de laboratório no campo da Medicina Veterinária. Com o objetivo de confirmar avanços desse tipo de examinação em cães, a abordagem desse trabalho foi apresentar um estudo com o uso de uma nova técnica (TFGII/Dog). Cinquenta cães naturalmente infectados foram alojados em baias individuais, e suas fezes foram avaliadas comparativamente, usando-se a nova técnica e outras quatro técnicas convencionais. O TFGII/Dog apresentou altos níveis de sensibilidade e eficiência, superando o diagnóstico de outras técnicas com um índice de concordância kappa de 0,739 (Substancial), em oposição a 0,546 (Moderado), 0,485 (Moderado), 0,467 (Moderado) e 0,325 (Pobre) de Sedimentação-Espontânea, Centrífugo-Flutuação em Solução Saturada de Sulfato de Zinco, Centrífugo-Flutuação em Solução Saturada de Açúcar, e Flutuação-Espontânea em Solução Saturada de Cloreto de Sódio, respectivamente. A combinação de resultados positivos das técnicas mostrou oito gêneros de parasitos, com Ancylostoma spp. predominando entre helmintos, e Cystoisospora spp. entre os protozoários. A técnica de TFGII/Dog apresentou melhor desempenho diagnóstico e, portanto, pode ser considerada uma importante ferramenta para otimizar os resultados de rotinas de laboratório e o controle de parasitos gastrintestinais de cães.

A new laboratorial method for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs

In this study, we aimed to introduce a new technique calledTF-Test ModifiedDog for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs. Fecal samples from 106 dogs were processed by the technique TF-Test ModifiedDog and the techniques of centrifugation-flotation in zinc sulfate, simple-flotation by saturated solution of sodium chloride, direct microscopy exam and TF-Test Conventional. Sensitivity was higher in the TF-Test ModifiedDog (98.41%), followed by flotation in saturated zinc sulfate (77.78%), TF-Test Conventional (73.02%), flotation by saturated sodium chloride (55.55%), and direct microscopy exam (30.16%). The diagnostic efficiency varied from 58.49% to 99.06%, with the highest value also obtained by the new proposed technique. Efficiency level of 99.06% with kappa index 0.979 (almost perfect) was obtained with the TF-Test ModifiedDog. These results represent significant statistical gains (P 0.05) of 20.63% in sensitivity and 12.27% in efficiency over the best among the other techniques flotation by saturated zinc sulfate, whose kappa index was 0.738, much lower than that of the TF-Test ModifiedDog. All techniques presented 100% specificity. In this sense, the high sensitivity of theTF-Test ModifiedDog makes it suitable for epidemiological surveys of gastrointestinal parasitosis in dogs, zoonoses control and preventive surveillance programs.

O objetivo deste estudo foi introduzir a nova técnicaTF-Test ModifiedDog para diagnóstico de parasitos gastrointestinais em cães. Amostras fecais de 106 cães foram processadas pela técnica de TF-Test ModifiedDog e também por técnicas de centrifugação-flutuação em sulfato de zinco, flutuação simples em solução saturada de cloreto de sódio, exame microscópico direto e TF-Test Convencional. A sensibilidade foi maior no TF-Test ModifiedDog (98,41%), seguido por centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco (77,78%), TF-Test Convencional(73,02%), flutuação em solução saturada de cloreto de sódio (55,55%), e exame microscópico direto (30,16%). A eficiência diagnóstica variou de 58,49% a 99,06%, com maior valor obtido pela nova técnica. Foi obtido com o TF-Test ModifiedDog eficiência de 99,06%, com índice kappa de 0,979 (Quase perfeito). Estes resultados representam ganhos estatisticamente significativos (P 0,05) de 20,63% de sensibilidade e 12,27% de eficiência sobre a melhor entre as outras técnicas empregadas, centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco, cujo índice kappa foi 0,738, bem menor do que o TF-Test ModifiedDog. Todas as técnicas apresentaram especificidade de 100%. Nesse sentido, a sua alta sensibilidade o torna adequado para levantamentos epidemiológicos das parasitoses gastrointestinais em cães, bem como para programas de controle de zoonoses e de vigilância preventiva.

A new laboratorial method for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs / Um novo método laboratorial para diagnóstico de parasitos gastrointestinais em cães

In this study, we aimed to introduce a new technique called TF-Test Modified/Dog for the diagnosis of gastrointestinal parasites in dogs. Fecal samples from 106 dogs were processed by the technique TF-Test Modified/Dog and the techniques of centrifugation-flotation in zinc sulfate, simple-flotation by saturated solution of sodium chloride, direct microscopy exam and TF-Test Conventional. Sensitivity was higher in the TF-Test Modified/Dog (98.41%), followed by flotation in saturated zinc sulfate (77.78%), TF-Test Conventional (73.02%), flotation by saturated sodium chloride (55.55%), and direct microscopy exam (30.16%). The diagnostic efficiency varied from 58.49% to 99.06%, with the highest value also obtained by the new proposed technique. Efficiency level of 99.06% with kappa index 0.979 (almost perfect) was obtained with the TF-Test Modified/Dog. These results represent significant statistical gains (P < 0.05) of 20.63% in sensitivity and 12.27% in efficiency over the best among the other techniques ­ flotation by saturated zinc sulfate, whose kappa index was 0.738, much lower than that of the TF-Test Modified/Dog. All techniques presented 100% specificity. In this sense, the high sensitivity of the TF-Test Modified/Dog makes it suitable for epidemiological surveys of gastrointestinal parasitosis in dogs, zoonoses control and preventive surveillance programs.

O objetivo deste estudo foi introduzir a nova técnica TF-Test Modified/Dog para diagnóstico de parasitos gastrointestinais em cães. Amostras fecais de 106 cães foram processadas pela técnica de TF-Test Modified/Dog e também por técnicas de centrifugação-flutuação em sulfato de zinco, flutuação simples em solução saturada de cloreto de sódio, exame microscópico direto e TF-Test Convencional. A sensibilidade foi maior no TF-Test Modified/Dog (98,41%), seguido por centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco (77,78%), TF-Test Convencional (73,02%), flutuação em solução saturada de cloreto de sódio (55,55%), e exame microscópico direto (30,16%). A eficiência diagnóstica variou de 58,49% a 99,06%, com maior valor obtido pela nova técnica. Foi obtido com o TF-Test Modified/Dog eficiência de 99,06%, com índice kappa de 0,979 (Quase perfeito). Estes resultados representam ganhos estatisticamente significativos (P < 0,05) de 20,63% de sensibilidade e 12,27% de eficiência sobre a melhor entre as outras técnicas empregadas, centrífugo-flutuação em solução de sulfato de zinco, cujo índice kappa foi 0,738, bem menor do que o TF-Test Modified/Dog. Todas as técnicas apresentaram especificidade de 100%. Nesse sentido, a sua alta sensibilidade o torna adequado para levantamentos epidemiológicos das parasitoses gastrointestinais em cães, bem como para programas de controle de zoonoses e de vigilância preventiva.