Cyclosporine A increases the intensity of Toxocara canis infection in swiss mice / Ciclosporina A aumenta a intensidade da infecção por Toxocara canis em camundongos suíços

Toxocariasis is a zoonotic disease of worldwide distribution. The connection between parasitic diseases and conditions that depress the immune system, such as the use of immunosuppressive drugs, has been studied. The purpose of this study was to evaluate the effect of Cyclosporine A (CsA) on the intensity of infection, humoral response and gene transcription of interleukins IL-4, IL-10 and IL-12 in mice experimentally infected with Toxocara canis. To this end, mice were divided into two groups treated with CsA (G1: 10 mg/Kg and G2: 50 mg/kg), the G3 and G4 group received PBS. After the last administration of the drug or PBS (orally every 48 hours for 15 days), groups G1, G2 and G3 were inoculated with 1200 eggs of T. canis. Was collected blood samples on days zero, 15 and 30 days post-inoculation (PI), for ELISA test and the mice were euthanized 30 days PI. The organs and striated muscle tissue were collected for the recovery of larvae. The splenocytes were analyzed by RT-PCR. The intensity of infection in the mice treated with 50 mg/kg of CsA was 65.5% higher than in the control group (p=0.001). An analysis of the kinetics of anti-Toxocara antibody revealed that the groups treated with CsA showed significantly higher mean levels of antibodies on day 15 PI. The transcription of the three tested interleukins showed no statistical difference between G2 and G3 (control). It was concluded that the immunosuppression triggered by CsA (50 mg/Kg) favored the establishment of a larger number of T. canis larvae without, however, altering immunoglobulin production and IL-4, IL-10 and IL-12 transcription on day 30 PI.

A toxocaríase é uma zoonose de distribuição mundial. A conexão entre doenças parasitárias e condições que deprimem o sistema imunológico, como o uso de drogas imunossupressoras, tem sido estudada. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da Ciclosporina A (CsA) na intensidade da infecção, resposta humoral e transcrição gênica das interleucinas IL-4, IL-10 e IL-12 em camundongos experimentalmente infectados com Toxocara canis. Para tanto, os camundongos foram divididos em dois grupos tratados com CsA (G1: 10 mg/Kg e G2: 50 mg/kg), os grupos G3 e G4 receberam PBS. Após a última administração da droga ou PBS (via oral a cada 48 horas por 15 dias), os grupos G1, G2 e G3 foram inoculados com 1200 ovos de T. canis. Foram coletadas amostras de sangue nos dias zero, 15 e 30 dias pós-inoculação (PI), para teste de ELISA e os camundongos foram eutanasiados 30 dias PI. Os órgãos e tecido muscular estriado foram coletados para a recuperação das larvas. Os esplenócitos foram analisados ​​por RT-PCR. A intensidade da infecção nos camundongos tratados com 50 mg/kg de CsA foi 65,5% maior do que no grupo controle (p=0,001). Uma análise da cinética do anticorpo anti-Toxocara revelou que os grupos tratados com CsA apresentaram níveis médios de anticorpos significativamente maiores no dia 15 PI. A transcrição das três interleucinas testadas não apresentou diferença estatística entre G2 e G3 (controle). Concluiu-se que a imunossupressão desencadeada pela CsA (50 mg/Kg) favoreceu o estabelecimento de um maior número de larvas de T. canis sem, no entanto, alterar a produção de imunoglobulinas e a transcrição de IL-4, IL-10 e IL-12 no dia 30 PI.

Frequency of enteroparasitic infections and serum positivity for Toxocara spp. in children from a public day care center in Southern Brazil / Frequência de enteroparasitos e de soropositividade para Toxocara spp. em crianças de uma creche pública do Sul do Brasil

Introduction Day care centers play an important social role in childrens early education and development. The objective of this study was to investigate the frequency of intestinal parasitic infections and infection with Toxocara spp. in children from a day care center in the city of Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil. Methods: The study was conducted using fecal samples from 50 children, ages three to six years, using Ritchie, Faust, Rugai, and Kinyouns techniques. A closed and structured epidemiological questionnaire was used to collect data from the parents/guardians of the children. Serological studies for detection of antibodies to Toxocara spp. by immunoenzymatic assays using Toxocara excretion and secretion antigen (TES) were conducted on sera collected from 41 children. Results: The frequency of enteroparasites was 18%, with 43.9% of the children testing seropositive for Toxocara spp. Low family income and low literacy levels of parents/guardians were common factors between the families of the parasite-positive children. For the children who tested positive for Toxocara spp., most of the parents/guardians reported using only water for sanitizing raw vegetables and fruits. Conclusions: The high seropositivity rates for Toxocara spp. indicate that children were exposed to this parasite, and it is important to reduce the risk of infection. In addition, the seropositivity for enteroparasites and the interviews with the parents/guardians indicate the need to educate the studied population regarding the modes of intestinal parasite transmission and the prophylactic measures needed to prevent their dissemination.(AU)

Introdução As creches desempenham um importante papel social na educação e desenvolvimento inicial das crianças. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de infecções parasitárias intestinais, além de infecção por Toxocara spp. em crianças de uma creche na cidade do Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil. Métodos: Para o estudo, foram coletadas amostras fecais de 50 crianças de três a seis anos, analisadas pelas técnicas de Ritchie, Faust, Rugai e Kinyoun, sendo aplicado um questionário epidemiológico fechado e estruturado aos pais/responsáveis das crianças. Também foi realizada uma pesquisa sorológica de anticorpos para Toxocara spp. em 41 crianças, pelo ensaio imunoenzimático, associado ao antígeno de excreção e secreção (ES), com soros pré-adsorvidos com antígeno somático de Ascaris lumbricoides. Resultados: A frequência de enteroparasitos foi de 18%, enquanto que 43.9% das crianças foram soropositivas para Toxocara spp.. Baixa renda familiar e baixo nível de alfabetização dos pais/responsáveis foram fatores comuns entre as famílias das crianças parasitadas. A maioria dos pais ou responsáveis das crianças, com diagnóstico positivo para enteroparasitos ou para Toxocara spp., relatou utilizar apenas água para a higienização de verduras e frutas. Conclusões: As altas taxas de soropositividade para Toxocara spp. indicam que as crianças foram expostas a esse parasito, sendo importante minimizar o risco de infecção. Além disso, a positividade de 18% para enteroparasitos e os dados obtidos com as entrevistas realizadas com os pais ou responsáveis demonstram a necessidade da realização de trabalhos com a população estudada que visem a divulgação sobre as parasitoses intestinais, especialmente sobre medidas profiláticas especificas.(AU)

Parasitos zoonóticos em solos de praças públicas no município de Sousa, Paraíba / Zoonotic parasites in soils of public squares in the municipality of Sousa, Paraíba

Os espaços coletivos com grande circulação de pessoas e animais tutelados ou errantes, como as praças públicas, podem gerar um problema para a saúde pública, uma vez que os animais podem eliminar fezes contaminadas por parasitos nesses locais, desempenhando um importante papel epidemiológico na transmissão de zoonoses parasitárias. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar a contaminação por parasitos zoonóticos em dez praças públicas da cidade de Sousa, Paraíba, bem como avaliar o melhor método de diagnóstico de infestação ambiental por estes parasitas. Foram feitas coletas de solo em cinco pontos diferentes de cada praça, por raspagem superficial em quadrantes delimitados por 15 cm, sendo coletados 200g da parte central de cada ponto. Os métodos de diagnósticos utilizados foram Flutuação Simples, Sedimentação Simples, Faust e Centrífugo-Flutuação em Solução de Sacarose. Das praças avaliadas, 90% (9/10) obtiveram pelo menos uma amostra positiva. O gênero de parasito mais frequente foi Ancylostoma spp., presente em 70% (7/ 10) das praças analisadas; seguido por Strongyloides spp., coccídeos e Taenia spp., em 40% (4/10); Toxocara spp.,em 30% (3/10); eCystoisospora spp. e Trichuris spp., em 10% (1/10). O método de Sedimentação Simples foi o mais eficaz, resultando em 44% (22/50) de amostras positivas. Os demais métodos não atingiram 15% de positividade. Concluiu-se que as praças públicas analisadas encontram-se altamente infestadas por parasitos zoonóticos, representando um risco a saúde pública no município de Sousa-PB.

Collective spaces with large circulation of people and animals domiciled or wandering, such as public squares, can generate a public health problem, since the animals can eliminate feces contaminated by parasites in these places, playing an important epidemiological role for zoonose transmission. Therefore, the objective of this work was to evaluate the contamination by zoonotic parasites in ten public squares of the city of Sousa, Paraíba, as well as to evaluate the best method for the diagnosis of environmental infestation by these parasites. Soil samples were collected at five different points of each square, by surface scraping in quadrants delimited by 15 cm, with 200g of the central part of each point being collected. The diagnostic methods used were Simple Flotation, Simple Sedimentation, Faust and Centrifugal-Fluctuation in Sucrose Solution. At least one positive sample in 90% (9/10) of the evaluated squares. The most frequent parasite genus was Ancylostoma spp., present in 70% (7/10) of the analyzed squares; followed by Strongyloides spp., coccidia and Taenia spp., in 40% (4/10); Toxocara spp., in 30% (3/10); and Cystoisospora spp. and Trichurisspp., in 10% (1/10). The Simple Sedimentation method was the most effective, resulting in 44% (22/50) of positive samples. The other methods did not reach 15% positivity. It was concluded that the analyzed public squares are highly infested by zoonotic parasites, representing a public health risk in the municipality of Sousa-PB.

Parasitos zoonóticos em solos de praças públicas no município de Sousa, Paraíba / Zoonotic parasites in soils of public squares in themunicipality of Sousa, Paraíba

Os espaços coletivos com grande circulação de pessoas e animais tutelados ou errantes, como as praças públicas, podem gerar um problema para a saúde pública, uma vez que os animais podem eliminar fezes contaminadas por parasitos nesses locais, desempenhando um importante papel epidemiológico na transmissão de zoonoses parasitárias. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar a contaminação por parasitos zoonóticos em dez praças públicas da cidade de Sousa, Paraíba, bem como avaliar o melhor método de diagnóstico de infestação ambiental por estes parasitas. Foram feitas coletas de solo em cinco pontos diferentes de cada praça, por raspagem superficial em quadrantes delimitados por 15 cm, sendo coletados 200g da parte central de cada ponto. Os métodos de diagnósticos utilizados foram Flutuação Simples, Sedimentação Simples, Faust e Centrífugo-Flutuação em Solução de Sacarose. Das praças avaliadas, 90% (9/10) obtiveram pelo menos uma amostra positiva. O gênero de parasito mais frequente foi Ancylostoma spp., presente em 70% (7/ 10) das praças analisadas; seguido por Strongyloides spp., coccídeos e Taenia spp., em 40% (4/10); Toxocara spp., em 30% (3/10); e Cystoisospora spp. e Trichuris spp., em 10% (1/10). O método de Sedimentação Simples foi o mais eficaz, resultando em 44% (22/50) de amostras positivas. Os demais métodos não atingiram 15% de positividade. Concluiu-se que as praças públicas analisadas encontram-se altamente infestadas por parasitos zoonóticos, representando um risco a saúde pública no município de Sousa-PB.(AU)

Collective spaces with large circulation of people and animals domiciled or wandering, such as public squares, can generate a public health problem, since the animals can eliminate feces contaminated by parasites in these places, playing an important epidemiological role for zoonosis transmission. Therefore, the objective of this work was to evaluate the contamination by zoonotic parasites in ten public squares of the city of Sousa, Paraíba, as well as to evaluate the best method for the diagnosis of environmental infestation by these parasites. Soil samples were collected at five different points of each square, by surface scraping in quadrants delimited by 15 cm, with 200g of the central part of each point being collected. The diagnostic methods used were Simple Flotation, Simple Sedimentation, Faust and Centrifugal-Fluctuation in Sucrose Solution. At least one positive sample in 90% (9/10) of the evaluated squares. The most frequent parasite genus was Ancylostoma spp., present in 70% (7/10) of the analyzed squares; followed by Strongyloides spp., coccidia and Taenia spp., in 40% (4/10); Toxocara spp., in 30% (3/10); and Cystoisospora spp. and Trichuris spp., in 10% (1/10). The Simple Sedimentation method was the most effective, resulting in 44% (22/50) of positive samples. The other methods did not reach 15% positivity. It was concluded that the analyzed public squares are highly infested by zoonotic parasites, representing a public health risk in the municipality of Sousa-PB.(AU)

Parasitos zoonóticos em solos de praças públicas no município de Sousa, Paraíba / Zoonotic parasites in soils of public squares in themunicipality of Sousa, Paraíba

Os espaços coletivos com grande circulação de pessoas e animais tutelados ou errantes, como as praças públicas, podem gerar um problema para a saúde pública, uma vez que os animais podem eliminar fezes contaminadas por parasitos nesses locais, desempenhando um importante papel epidemiológico na transmissão de zoonoses parasitárias. Portanto, este trabalho teve como objetivo avaliar a contaminação por parasitos zoonóticos em dez praças públicas da cidade de Sousa, Paraíba, bem como avaliar o melhor método de diagnóstico de infestação ambiental por estes parasitas. Foram feitas coletas de solo em cinco pontos diferentes de cada praça, por raspagem superficial em quadrantes delimitados por 15 cm, sendo coletados 200g da parte central de cada ponto. Os métodos de diagnósticos utilizados foram Flutuação Simples, Sedimentação Simples, Faust e Centrífugo-Flutuação em Solução de Sacarose. Das praças avaliadas, 90% (9/10) obtiveram pelo menos uma amostra positiva. O gênero de parasito mais frequente foi Ancylostoma spp., presente em 70% (7/ 10) das praças analisadas; seguido por Strongyloides spp., coccídeos e Taenia spp., em 40% (4/10); Toxocara spp., em 30% (3/10); e Cystoisospora spp. e Trichuris spp., em 10% (1/10). O método de Sedimentação Simples foi o mais eficaz, resultando em 44% (22/50) de amostras positivas. Os demais métodos não atingiram 15% de positividade. Concluiu-se que as praças públicas analisadas encontram-se altamente infestadas por parasitos zoonóticos, representando um risco a saúde pública no município de Sousa-PB.

Collective spaces with large circulation of people and animals domiciled or wandering, such as public squares, can generate a public health problem, since the animals can eliminate feces contaminated by parasites in these places, playing an important epidemiological role for zoonosis transmission. Therefore, the objective of this work was to evaluate the contamination by zoonotic parasites in ten public squares of the city of Sousa, Paraíba, as well as to evaluate the best method for the diagnosis of environmental infestation by these parasites. Soil samples were collected at five different points of each square, by surface scraping in quadrants delimited by 15 cm, with 200g of the central part of each point being collected. The diagnostic methods used were Simple Flotation, Simple Sedimentation, Faust and Centrifugal-Fluctuation in Sucrose Solution. At least one positive sample in 90% (9/10) of the evaluated squares. The most frequent parasite genus was Ancylostoma spp., present in 70% (7/10) of the analyzed squares; followed by Strongyloides spp., coccidia and Taenia spp., in 40% (4/10); Toxocara spp., in 30% (3/10); and Cystoisospora spp. and Trichuris spp., in 10% (1/10). The Simple Sedimentation method was the most effective, resulting in 44% (22/50) of positive samples. The other methods did not reach 15% positivity. It was concluded that the analyzed public squares are highly infested by zoonotic parasites, representing a public health risk in the municipality of Sousa-PB.

Frequency of enteroparasitic infections and serum positivity for Toxocara spp. in children from a public day care center in Southern Brazil

Abstract Introduction Day care centers play an important social role in childrens early education and development. The objective of this study was to investigate the frequency of intestinal parasitic infections and infection with Toxocara spp. in children from a day care center in the city of Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil. Methods: The study was conducted using fecal samples from 50 children, ages three to six years, using Ritchie, Faust, Rugai, and Kinyouns techniques. A closed and structured epidemiological questionnaire was used to collect data from the parents/guardians of the children. Serological studies for detection of antibodies to Toxocara spp. by immunoenzymatic assays using Toxocara excretion and secretion antigen (TES) were conducted on sera collected from 41 children. Results: The frequency of enteroparasites was 18%, with 43.9% of the children testing seropositive for Toxocara spp. Low family income and low literacy levels of parents/guardians were common factors between the families of the parasite-positive children. For the children who tested positive for Toxocara spp., most of the parents/guardians reported using only water for sanitizing raw vegetables and fruits. Conclusions: The high seropositivity rates for Toxocara spp. indicate that children were exposed to this parasite, and it is important to reduce the risk of infection. In addition, the seropositivity for enteroparasites and the interviews with the parents/guardians indicate the need to educate the studied population regarding the modes of intestinal parasite transmission and the prophylactic measures needed to prevent their dissemination.

Resumo Introdução As creches desempenham um importante papel social na educação e desenvolvimento inicial das crianças. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de infecções parasitárias intestinais, além de infecção por Toxocara spp. em crianças de uma creche na cidade do Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil. Métodos: Para o estudo, foram coletadas amostras fecais de 50 crianças de três a seis anos, analisadas pelas técnicas de Ritchie, Faust, Rugai e Kinyoun, sendo aplicado um questionário epidemiológico fechado e estruturado aos pais/responsáveis das crianças. Também foi realizada uma pesquisa sorológica de anticorpos para Toxocara spp. em 41 crianças, pelo ensaio imunoenzimático, associado ao antígeno de excreção e secreção (ES), com soros pré-adsorvidos com antígeno somático de Ascaris lumbricoides. Resultados: A frequência de enteroparasitos foi de 18%, enquanto que 43.9% das crianças foram soropositivas para Toxocara spp.. Baixa renda familiar e baixo nível de alfabetização dos pais/responsáveis foram fatores comuns entre as famílias das crianças parasitadas. A maioria dos pais ou responsáveis das crianças, com diagnóstico positivo para enteroparasitos ou para Toxocara spp., relatou utilizar apenas água para a higienização de verduras e frutas. Conclusões: As altas taxas de soropositividade para Toxocara spp. indicam que as crianças foram expostas a esse parasito, sendo importante minimizar o risco de infecção. Além disso, a positividade de 18% para enteroparasitos e os dados obtidos com as entrevistas realizadas com os pais ou responsáveis demonstram a necessidade da realização de trabalhos com a população estudada que visem a divulgação sobre as parasitoses intestinais, especialmente sobre medidas profiláticas especificas.

Frequency of anti-Toxocara antibodies in broiler chickens in southern Brazil / Frequência de anticorpos anti-Toxocara em frangos de corte no Sul do Brasil

The aim of this study was to evaluate the presence of anti-Toxocara antibodies in naturally infected broiler chickens (n = 189) from the state of Paraná, southern Brazil. The chickens were reared in a semi-intensive system by small family farmers (n = 7). An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to detect the presence of anti- Toxocara spp. IgY after serum adsorption with Ascaridia galli antigens. An overall seroprevalence of 67.7% (128/189; 95% CI = 61.1-74.4) was observed. The frequency of positive animals by farm ranged from 29.6% to 100%. The optical density and reactivity index values observed in ELISA test indicated the possible chronicity of infection of the evaluated chickens. Associations between the presence of antibodies and the area where the chickens were reared (p = 0.382) or the population density of dogs on the farm (p = 0.785) were not observed. This study shows a high prevalence of Toxocara spp. antibodies in broiler chickens reared in semi-intensive systems and provides evidence that chickens are a good indicator of environmental contamination by larva migrans agents. Further studies are necessary to assess the risk factors associated with poultry infection and the likelihood of toxocariasis transmission to humans via the ingestion of free-range chicken meat.(AU)

A finalidade do presente estudo foi avaliar a presença de anticorpos anti- Toxocara, em frangos de corte naturalmente infectados (n = 189), no Norte do Paraná, Sul do Brasil. Os frangos foram criados em sistema semi-intensivo, em pequenas propriedades rurais (n = 7). Os testes sorológicos foram realizados pela técnica de ELISA, para detecção de anticorpos IgY (IgG), com pré-adsorção do soro com antígenos de Ascaridia galli. Foi observada uma prevalência de 67,7% (128/189; IC 95% = 61,1-74,4). A frequência de animais soropositivos por propriedade variou de 29,6% a 100%. Os valores da Densidade Ótica e do Índice de Reatividade observados no teste de ELISA indicaram uma possível cronicidade de infecção dos frangos avaliados. Não foi observada correlação entre a positividade dos animais, quando comparada a área (p = 0,382) e a densidade populacional de cães por propriedade (p = 0,785). O presente estudo verificou uma alta prevalência de anticorpos anti-Toxocara em frangos de corte criados em sistema semi-intensivo e oferece dados que apontam esses animais como bons indicadores de contaminação ambiental por agentes de larva migrans . Estudos futuros são necessários para avaliar os fatores de risco associados e a possibilidade da transmissão de toxocaríase ao ser humano pela ingestão de carne de frango.(AU)

Frequency of enteroparasitic infections and serum positivity for Toxocara spp. in children from a public day care center in Southern Brazil

Abstract Introduction Day care centers play an important social role in childrens early education and development. The objective of this study was to investigate the frequency of intestinal parasitic infections and infection with Toxocara spp. in children from a day care center in the city of Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brazil. Methods: The study was conducted using fecal samples from 50 children, ages three to six years, using Ritchie, Faust, Rugai, and Kinyouns techniques. A closed and structured epidemiological questionnaire was used to collect data from the parents/guardians of the children. Serological studies for detection of antibodies to Toxocara spp. by immunoenzymatic assays using Toxocara excretion and secretion antigen (TES) were conducted on sera collected from 41 children. Results: The frequency of enteroparasites was 18%, with 43.9% of the children testing seropositive for Toxocara spp. Low family income and low literacy levels of parents/guardians were common factors between the families of the parasite-positive children. For the children who tested positive for Toxocara spp., most of the parents/guardians reported using only water for sanitizing raw vegetables and fruits. Conclusions: The high seropositivity rates for Toxocara spp. indicate that children were exposed to this parasite, and it is important to reduce the risk of infection. In addition, the seropositivity for enteroparasites and the interviews with the parents/guardians indicate the need to educate the studied population regarding the modes of intestinal parasite transmission and the prophylactic measures needed to prevent their dissemination.

Resumo Introdução As creches desempenham um importante papel social na educação e desenvolvimento inicial das crianças. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de infecções parasitárias intestinais, além de infecção por Toxocara spp. em crianças de uma creche na cidade do Rio Grande, Rio Grande do Sul, Brasil. Métodos: Para o estudo, foram coletadas amostras fecais de 50 crianças de três a seis anos, analisadas pelas técnicas de Ritchie, Faust, Rugai e Kinyoun, sendo aplicado um questionário epidemiológico fechado e estruturado aos pais/responsáveis das crianças. Também foi realizada uma pesquisa sorológica de anticorpos para Toxocara spp. em 41 crianças, pelo ensaio imunoenzimático, associado ao antígeno de excreção e secreção (ES), com soros pré-adsorvidos com antígeno somático de Ascaris lumbricoides. Resultados: A frequência de enteroparasitos foi de 18%, enquanto que 43.9% das crianças foram soropositivas para Toxocara spp.. Baixa renda familiar e baixo nível de alfabetização dos pais/responsáveis foram fatores comuns entre as famílias das crianças parasitadas. A maioria dos pais ou responsáveis das crianças, com diagnóstico positivo para enteroparasitos ou para Toxocara spp., relatou utilizar apenas água para a higienização de verduras e frutas. Conclusões: As altas taxas de soropositividade para Toxocara spp. indicam que as crianças foram expostas a esse parasito, sendo importante minimizar o risco de infecção. Além disso, a positividade de 18% para enteroparasitos e os dados obtidos com as entrevistas realizadas com os pais ou responsáveis demonstram a necessidade da realização de trabalhos com a população estudada que visem a divulgação sobre as parasitoses intestinais, especialmente sobre medidas profiláticas especificas.

Limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated bovine milk / Limite de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino experimentalmente contaminado

This study aimed to evaluate the limit of detection of Toxocara canis larvae in experimentally contaminated commercial bovine milk samples, based on a centrifuge-sedimentation technique. Firstly, bovine milk (whole and skim) samples were contaminated with 50 T. canis larvae in order to evaluate the interference of milk fat with the recovery of the larvae. Next, the effects of 10% formalin (100 μL), ether (100 μL), and a combination of both solutions on the recovery of the larvae was examined. Thereafter, the limit of detection of the larvae was determined using the solution (from step 2) considered optimal for degreasing the milk sample. Samples were contaminated with aliquots of 1, 5, 10, 25, and 50 larvae. For each milk sample (1.0 mL), 15 repetitions were analysed. The recovery of the larvae from the skim milk samples was higher (p = 0.0031) than that from the whole milk samples. No significant difference (p = 0.5681) was observed with regard to the percentage of recovered larvae when comparing the degreasing solutions. Nevertheless, the formalin-ether combination was more efficient for recovering the larvae (73.1%) than ether (71.9%), formalin (67.6%), and pure whole milk (70.0%). Concerning the limit of detection (using formalin-ether), all the samples contaminated with 5, 10, 25, and 50 larvae tested positive (minimum: 62.7%). Of the samples contaminated with a single larva, 66.7% tested positive. These results suggest that the centrifugation-sedimentation technique may be useful for recovering larvae of Toxocara spp. in naturally or experimentally contaminated milk samples obtained from a wide range of animal species.(AU)

O objetivo do estudo foi avaliar o limite de detecção de larvas de Toxocara canis em leite bovino comercial contaminado experimentalmente, a partir de uma técnica de centrifugo-sedimentação. Primeiramente, amostras de leite bovino comercial (integral e desnatado) foram contaminadas com 50 larvas de T. canis, para avaliação da interferência da gordura sobre a recuperação das larvas. Em uma segunda etapa, foi avaliada a ação de formalina 10% (100 μL), éter (100 μL) e combinação das soluções. A terceira etapa consistiu da verificação do limite de detecção de larvas, com uso da melhor solução desengordurante (etapa 2), em amostras de leite (1,0 mL) contendo 1; 5; 10; 25 e 50 larvas. Para cada análise de detecção do leite (1,0 mL), foram realizadas 15 repetições. Foi observado que o percentual de recuperação de larvas no leite desnatado foi significativamente maior (p= 0,0031) que o observado no leite integral. Na comparação das soluções, não houve diferença significativa (p= 0,5681) no percentual de larvas recuperadas. Entretanto, houve uma maior recuperação quando do emprego da combinação de formol-éter (73,1%) em relação ao éter (71,9%), ao formol (67,6%) e ao leite integral puro (70,0%). Em relação ao limite de detecção, com uso de formalina-éter, todas as alíquotas apresentaram resultado positivo (mínimo de 62,7% de larvas recuperadas), para as amostras com 5, 10, 25 e 50 larvas. Nas amostras contaminadas com uma larva, 66,7% das alíquotas foram positivas. A técnica apresentada poderá servir para recuperação de larvas de Toxocara spp. em amostras de leite de várias espéciesanimais, contaminados naturalmente ou experimentalmente.(AU)

Kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with Toxocara canis / Cinética e avidez de anticorpos (IgG) anti-Toxocara em coelhos experimentalmente infectados com Toxocara canis

An evaluation was made of the kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with embryonated Toxocara canis eggs. Seventeen four month old New Zealand White rabbits were distributed into two groups. In the experimental group, twelve rabbits were infected orally with 1,000 embryonated T. canis eggs. A second group (n = 5), uninfected, was used as a control. Serum samples were collected for analysis on days 7, 14, 21, 28 and 60 post-infection (DPI). An indirect ELISA test was performed to evaluate the reactivity index (RI) of IgG anti-T. canis antibodies and to calculate the avidity index (AI). The animals showed seroconversion from the 14th DPI, with high AI (over 50%) except for one animal, which presented an intermediate AI. At 60 DPI, all the animals were seropositive and maintained a high AI. The data indicated that specific IgG antibodies formed early (14 DPI) in rabbits infected with T. canis, with a high avidity index that persisted throughout the course of the infection.(AU)

O objetivo deste estudo foi o de avaliar a cinética e a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis, em coelhas infectadas experimentalmente com ovos embrionados de Toxocara canis. Foram utilizados 17 coelhos New Zealand de linhagem branca, com quatro meses de idade, distribuídos em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. Um segundo grupo (n=5), não infectado, foi utilizado como controle. Nos dias 7, 14, 21, 28 e 60 pós-infecção (DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do140 DPI, com verificação de alto IA (superior a 50%), com exceção de um animal, que apresentou médio IA. Aos 60 DPI, todos os animais foram soropositivos e mantiveram alto IA. Os dados mostram que em coelhos infectados por T. canis, anticorpos IgG específicos formam-se precocemente (14 DPI), apresentando alto índice de avidez e que se mantém durante o curso da infecção.(AU)

Kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with Toxocara canis

Abstract An evaluation was made of the kinetics and avidity of anti-Toxocara antibodies (IgG) in rabbits experimentally infected with embryonated Toxocara canis eggs. Seventeen four month old New Zealand White rabbits were distributed into two groups. In the experimental group, twelve rabbits were infected orally with 1,000 embryonated T. canis eggs. A second group (n = 5), uninfected, was used as a control. Serum samples were collected for analysis on days 7, 14, 21, 28 and 60 post-infection (DPI). An indirect ELISA test was performed to evaluate the reactivity index (RI) of IgG anti-T. canis antibodies and to calculate the avidity index (AI). The animals showed seroconversion from the 14th DPI, with high AI (over 50%) except for one animal, which presented an intermediate AI. At 60 DPI, all the animals were seropositive and maintained a high AI. The data indicated that specific IgG antibodies formed early (14 DPI) in rabbits infected with T. canis, with a high avidity index that persisted throughout the course of the infection.

Resumo O objetivo deste estudo foi o de avaliar a cinética e a avidez de anticorpos anti-Toxocara canis, em coelhas infectadas experimentalmente com ovos embrionados de Toxocara canis. Foram utilizados 17 coelhos New Zealand de linhagem branca, com quatro meses de idade, distribuídos em dois grupos. No grupo experimental, doze coelhas foram infectadas, oralmente, com 1.000 ovos larvados de T. canis. Um segundo grupo (n=5), não infectado, foi utilizado como controle. Nos dias 7, 14, 21, 28 e 60 pós-infecção (DPI), foram coletadas amostras de soro para análise. O teste de ELISA indireto foi realizado para avaliar o índice de reatividade (IR) de anticorpos IgG anti-T. canis e para cálculo do índice de avidez (IA). A soroconversão nos animais ocorreu a partir do140 DPI, com verificação de alto IA (superior a 50%), com exceção de um animal, que apresentou médio IA. Aos 60 DPI, todos os animais foram soropositivos e mantiveram alto IA. Os dados mostram que em coelhos infectados por T. canis, anticorpos IgG específicos formam-se precocemente (14 DPI), apresentando alto índice de avidez e que se mantém durante o curso da infecção.

AVALIAÇÃO DA EFICÁCIA OVICIDA IN VITRO DE DESINFETANTES COMERCIAIS ASSOCIADOS OU NÃO AO FUNGO NEMATÓFAGO DUDDINGTONIA FLAGRANS (AC001) SOBRE OVOS DE TOXOCARA CANIS

Nematoides são geohelmintos de cães e gatos que podem trazer prejuízos à saúde única. Dentre esses geohelmintos potencialmente zoonóticos citamos o Toxocara canis, causando toxocaríase em cães e gatos e larva migrans visceral em humanos. Em geral, os ovos deste nematoide são liberados nas fezes dos animais contaminados no ambiente. Estes ovos são muito resistentes às intempéries climáticas e até mesmo a alguns desinfetantes comuns. Nesse sentido, o controle ambiental de T. canis torna-se um grande desafio à saúde única. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia ovicida in vitro de dois desinfetantes de uso comercial, associados ou não, ao fungo nematófago Duddingtonia flagrans (AC001) sobre ovos de T. canis. No ensaio experimental foram criados 7 grupos, com 6 repetições cada: G1 (ovos + AC001); G2 (ovos + hipoclorito de sódio 2-2,5%); G3 (ovos + cloreto de benzalcônio 15%); G4 (ovos + AC001 + hipoclorito de sódio 2-2,5%); G5 (ovos + AC001 + cloreto de benzalcônio 15%); G6 (ovos + hipoclorito de sódio 2-2,5% + cloreto de benzalcônio 15%); e G7 (ovos + água: controle). As leituras ocorreram nos dias 1, 7, 14 e 21 após o início do estudo. As médias de cada grupo foram obtidas e transformadas em percentuais. Ao final do experimento, os percentuais de redução ovicida de cada grupo foram: G1 (29.8%); G2 (73%); G3 (44.1%); G4 (59.7%); G5 (39.4%) e G6 (75.7%) (p<0,005). Todos os grupos estudados demonstraram eficácia ovicida sobre os ovos de T. canis. Esses resultados permitem concluir que tanto o hipoclorito de sódio 2-2,5% quanto o cloreto de benzalcônio 15%, desinfetantes de uso doméstico já consagrados, são efetivos in vitro na destruição de ovos T. canis. Outro ponto interessante nos resultados obtidos foi a atuação ovicida de D. flagrans, com eficácia de 29,8% de redução em relação ao grupo controle. Mais estudos são necessários para avaliar possíveis efeitos potencializadores e/ou antagônicos desses desinfetantes, associados entre si ou às ferramentas promissoras de controle biológico, como os fungos nematófagos. Estudos voltados para o uso desses produtos no ambiente, inclusive em solo terroso, também devem ser realizados a fim de buscar alternativas viáveis para aprimorar o controle ambiental desses parasitas.

Nematodes are geohelminths affecting cats and dogs that can cause damage to One Health. Among these potentially zoonotic geohelminths, we can mention Toxocara canis, causing toxocariasis in cats and dogs and visceral larva migrans in humans. In general, eggs from this nematode are released into the environment through the feces of these infected animals. These eggs are highly resistant to different weather conditions and even to some common disinfectants. In this sense, the environmental control of T. canis becomes a major challenge to One Health. The present study aimed to evaluate the in vitro ovicidal efficacy of two commercially used disinfectants, associated or not, with the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans (AC001) on T. canis eggs. 7 groups were created in the experimental test, with 6 repetitions each: G1 (eggs + AC001); G2 (eggs + 2-2.5% sodium hypochlorite); G3 (eggs + 15% benzalkonium chloride); G4 (eggs + AC001 + 2-2.5% sodium hypochlorite); G5 (eggs + AC001 + 15% benzalkonium chloride); G6 (eggs + 2-2.5% sodium hypochlorite + 15% benzalkonium chloride); and G7 (eggs + water: control). The readings took place on days 1, 7, 14 and 21 after the start of the study. The averages of each group were obtained and transformed into percentages. At the end of the experiment, the percentages of ovicidal activity in each group were: G1 (29.8%); G2 (73%); G3 (44.1%); G4 (59.7%); G5 (39.4%) and G6 (75.7%) (p <0.005). All studied groups showed ovicidal efficacy on T. canis eggs. These results allow us to conclude that both 2-2.5% sodium hypochlorite and 15% benzalkonium chloride, already established domestic disinfectants, are effective in vitro in the destruction of T. canis eggs. Another interesting point in the results obtained was the ovicidal performance of D. flagrans, with a 29.8% reduction efficacy compared to the control group. Further studies are required to assess possible enhancing and / or antagonistic effects of these disinfectants, associated with each other or with promising biological control tools, such as nematophagous fungi. Studies focused on the use of these products in the environment, including in wet soil, should also be carried out in order to seek viable alternatives to improve the environmental control of these parasites.

FATORES DE RISCO E PREVALÊNCIA DE ANTICORPOS PARA Toxocara spp. EM GESTANTES ATENDIDAS PELO SISTEMA ÚNICO DE SAÚDE, EM PRESIDENTE PRUDENTE, SÃO PAULO, BRASIL

Fatores de risco e prevalência de anticorpos anti-Toxocara spp. em gestantes atendidas pelo sistema único de saúde, em Presidente Prudente, São Paulo, Brasil A toxocaríase é uma antropozoonose parasitária cosmopolita e endêmica em várias partes do mundo, sendo mais prevalente em populações em vulnerabilidade. A doença ocorre, principalmente, em crianças, mas pode acometer adultos. A prevalência de anticorpos anti-Toxocara spp. tem sido avaliada em gestantes, mas a comparação dos fatores de risco em gestantes adolescentes e adultas é escassa na literatura. O objetivo do estudo foi comparar a prevalência de anticorpos anti-Toxocara spp. e os fatores de risco para toxocaríase entre gestantes adolescentes e adultas atendidas pelo Sistema Único de Saúde no município de Presidente Prudente, SP. Foram incluídas 280 gestantes (adolescentes n=71; adultas n=209) que responderam a questionário socioeconômico. A pesquisa de anticorpos séricos IgG foi realizada pelo método de ELISA indireto, com uso de antígenos excretórios-secretórios de T. canis. A prevalência geral foi de 20,7%, com diferença significativa (p=0,0029; OR: 2,628; IC 95%: 1,422-4,856) entre adolescentes (33,8%) e em adultas (16,3%). O contato com solo e a idade gestacional apresentaram-se como fatores de risco para as adolescentes, enquanto que o nível de escolaridade foi fator de risco para as gestantes adultas. Apesar da persististência de anticorpos anti-Toxocara por até 5 anos, a prevalência em adolescentes foi 2,6 vezes superior que que em gestantes adultas. O agrupamento da variável idade mostrou maior diferença entre os grupos de sorologia de 25-26 anos. Mulheres grávidas adolescentes (jovens) devem ser sempre monitoradas para toxocaríase e sinais clínicos correspondentes, especialmente no final da gravidez. Os dados do estudos podem fundamentar estratégias educativas para profilaxia da toxocaríase.

Risk factors and prevalence anti-Toxocara spp. antibodies in pregnants attended by the public health system, in Presidente Prudente, São Paulo, Brazil Toxocariasis is a cosmopolitan and endemic parasitic anthropozoonosis in many parts of the world and is most prevalent in vulnerable populations. The disease occurs primarily in children. The prevalence of anti-Toxocara spp. antibodies in pregnant women had been studied previously, but knowledge of risk factors in pregnant women according to age is limited. The objective of the study was to compare the prevalence of anti-Toxocara spp. antibodies and risk factors for toxocariasis among pregnant women treated in public health facilities in Presidente Prudente, a municipality in South-East Brazil. A total of 280 pregnant women (71 adolescents, 209 adults) took part in the study. Participants completed a socioeconomic questionnaire and serum anti-Toxocara IgG antibodies were measured using indirect ELISA, using TES (Excretory-secretory antigens of T. canis). The overall prevalence was 20.7%, and was significantly higher in adolescents (33.8%) than adults (16.3%) (OR: 2.63; 95% CI: 1.424.86, p=0.003). Contact with soil and gestational age were risk factors in adolescents, while the education level was a risk factor in adults. Despite serology may persist up to 5 years, adolescents were 2.6-fold more exposed than adults. Adolescents were also more likely seropositive due to soil contact and late pregnancy, while adults to education level. Clustering of variable age has shown the highest difference between serology groups at 25-26 years. Adolescent (young) pregnant women should be always monitored for toxocariasis and correspondent clinical signs, particularly at late pregnancy. The results may contribute for elaborating educational programs on toxocariasis for pregnant women.

INQUÉRITO SOROLÓGICO E FATORES ASSOCIADOS À INFECÇÃO POR TOXOCARA SPP. DE BOVINOS ABATIDOS EM FRIGORÍFICOS DA REGIÃO DE PRESIDENTE PRUDENTE, SÃO PAULO

Inquérito sorológico e fatores associados à infecção por Toxocara spp. de bovinos abatidos em frigoríficos da região de Presidente Prudente, São Paulo A toxocaríase é uma das helmintozoonoses mais prevalentes no mundo. A transmissão para os humanos pode ocorrer por meio da ingestão de larvas presentes em tecidos/vísceras cruas ou malcozidas de hospedeiros paratênicos, mais comumente os bovinos. Entretanto, há escassez de estudos sobre inquérito sorológico e os fatores de risco associados com a toxocaríase em bovinos. O objetivo do estudo foi avaliar a prevalência de anticorpos anti-Toxocara em bovinos e determinar fatores de risco associados à toxocaríase, na região oeste do Estado de São Paulo. Foram colhidas 553 amostras de sangue bovino em dois frigoríficos da região de Presidente Prudente, para pesquisa de anticorpos anti-Toxocara pelo teste de ELISA indireto padronizado para este objetivo. No momento do abate, os proprietários dos bovinos foram convidados para participar do estudo e houve a aplicação de questionário para obtenção de dados relacionadas ao sexo dos bovinos e às características das propriedades. A prevalência geral de anticorpos anti-Toxocara dos bovinos avaliados foi de 38% (212/553), e 95,66% das propriedades apresentavam pelo menos um bovino soropositivo (22/23). Aptidão para corte (OR=2,47; IC 95%=1,21-5,23; p= 0,014) e presença de cães (OR=2,39; IC 95%=1,26-4,80; p=0,010) ou de gatos (OR=2,18; IC 95%=1,41-3,41; p<0,001) na propriedade foram os fatores de risco associados às propriedades. O sistema de criação em confinamento mostrou-se um fator de proteção (OR=0,37; IC 95%=0,23-0.60; p<0,001). Em relação aos cães, a não utilização de ração comercial (OR: 2,09; IC 95%: 1,443-3,028; p= 0,0001), o fornecimento regular de carne crua (OR: 4,88; IC 95%: 3,14-7,72; p< 0,001), e o hábito de caça (OR: 2,10; IC 95%: IC 95%: 1,44-3,08; p< 0,001) foram associados com a presença de anticorpos anti-Toxocara nos bovinos. Estes resultados apontam a exposição de bovinos à infecção por Toxocara spp. e a possibilidade de transmissão da toxocaríase humana por meio da ingestão de tecidos malcozidos de bovinos.

Serological survey and factors associated with the infection by Toxocara spp. of slaughtered cattle in slaughterhouses at the region of Presidente Prudente, São Paulo The Toxocariasis is one of the most prevalent helmintozoonoses in the world. The transmission to the humans can occur through the ingestion of larvae present in raw or undercooked viscera/tissue from paratenic hosts, most commonly in cattle. However, there is a scarcity of studies on serological survey and the risk factors associated with the toxocariasis in cattle. The aim of the study was to evaluate the prevalence of the anti-Toxocara antibodies in cattle and to determine the risk factors associated with toxocariasis in the region of Presidente Prudente, São Paulo. A total of 553 bovine blood samples were collected in two slaughterhouses in the region of Presidente Prudente, to verify the production of anti-Toxocara antibodies, by using the standardized indirect ELISA test for this purpose. At the time of the slaughter, the cattle owners were invited to take part in the study and a questionnaire was applied to obtain some data related to the sex of the cattle and the characteristics of the properties. The overall prevalence of anti-Toxocara antibodies was 38% (212/553), and 95.66% of the properties had at least one seropositive bovine (22/23). Beef cattle farms (OR = 2.47; 95% CI = 1.21-5.23; p = 0.014) and presence of dogs (OR = 2.39; 95% CI = 1.26-4.80; p = 0.010) or cats (OR = 2.18; 95% CI = 1.41-3.41; p <0.001) on the property were associated with a positive ELISA test. The feedlot system was shown to be a protective factor (OR = 0.37; 95% CI = 0.23-0.60; p <0.001). Regarding dogs, the non-use of commercial feed (OR: 2.09; 95% CI: 1.443-3.028; p = 0.0001), the regular supply of raw meat (OR: 4.88; 95% CI: 3.14-7.72; p <0.001), and the hunting habit (OR: 2.10; 95% CI: 95% CI: 1.44-3.08; p <0.001) were associated with the presence of anti-Toxocara antibodies. These results indicate the exposure of cattle to infection by Toxocara spp. and the possibility of transmission of human toxocariasis through the ingestion of undercooked bovine tissues.

Efficacy of pyrantel pamoate and ivermectin for the treatment of canine nematodes / Eficácia do pamoato de pirantel e da ivermectina no tratamento de nematódeos caninos

This study evaluated the efficacy of pyrantel pamoate and ivermectin on gastrointestinal nematodes in dogs. Fecal egg counts per gram (EPG) were measured by the fecal egg count reduction test (FECRT) in order to evaluate the anthelmintic efficiency and fecal float exams were also performed to assess the concordance between coproparasitological techniques. A total of 45 naturally infected dogs in the city of Bandeirantes, Paraná State, were selected and divided into three groups: Group 1, 15 animals that received pyrantel pamoate (145 mg) in a single dose; Group 2, 15 animals that received ivermectin (3 mg); and Group 3, 15 animals that comprised an untreated control group. Fecal testing was performed two and 10 days after treatment. Toxocara was the most prevalent genus, followed by Ancylostoma and Trichuris. Ancylostoma had low resistance to ivermectin and pyrantel pamoate treatment, while Toxocara were resistant to both treatments. Statistical correlation testing to compare coproparasitogical techniques revealed moderate concordance, substantial and almost perfect concordance for detection of Ancylostoma, Trichuris, and Toxocara, respectively. The results of this study suggest that the gender Ancylostoma had low resistance and Toxocara is resistant to both drugs and because of their high prevalence in young animals means that others anthelmintic drugs may be recommended to...(AU)

Objetivou-se neste estudo avaliar a eficácia do pamoato pirantel e da ivermectina sobre nematódeos gastrointestinais de cães. Para tanto foram realizados a contagem de ovos nas fezes (OPG) para avaliação da eficiência anti-helmíntica através do Teste de Redução da Contagem de Ovos nas Fezes (RCOF) e exame de flutuação Willis-Mollay para verificação de concordância entre as técnicas coproparasitológicas. Selecionou-se 45 cães na cidade de Bandeirantes, Paraná, naturalmente infectados, os quais foram divididos em três grupos experimentais: Grupo 1, 15 animais que receberam pamoato de pirantel 145 mg; Grupo 2, 15 animais que receberam ivermectina 3 mg e Grupo 3, 15 animais do grupo controle, não tratados. Coletas de fezes foram realizadas dois e dez dias depois para realização dos exames coproparasitológicos. Observou-se que o gênero de maior prevalência foi Toxocara, seguido de Ancylostoma e Trichuris. Ancylostoma apresentou baixa resistência ao tratamento com pamoato de pirantel e ivermectina, e Toxocara foi resistente a ambos os tratamentos. Através de testes de concordância estatística entre as técnicas coproparasitológicas utilizadas, foram constatadas concordâncias moderada, quase perfeita e substancial, respectivamente, na detecção de Ancylostoma, Toxocara e Trichuris. Concluímos neste estudo que o gênero Ancylostoma apresentou baixa resistência e Toxocara é resistente...(AU)

Detecção de larvas de Toxocara canis em leite: um estudo experimental em coelhas / Detection of larvae of Toxocara canis in milk: an experimental study in rabbits

Toxocaríase, causada geralmente pelo Toxocara canis, é uma importante zoonose de distribuição mundial. Hospedeiros paratênicos têm sido utilizados para obtenção de informações sobre a transmissão de T. canis. A transmissão transmamária em murinos infectados experimentalmente foi observada com a recuperação de larvas. O objetivo do presente estudo foi de avaliar a possibilidade de transmissão transmamária de Toxocara canis em coelhos, pela detecção direta de larvas no leite. Dezessete coelhas (Nova Zelândia branca) púberes e virgens foram distribuídas em dois grupos. Doze fêmeas foram infectadas com 1000 ovos embrionados de T. canis (Grupo Infectado), por via oral, enquanto outras cinco coelhas foram mantidas sem infecção (Grupo Controle). Um mês após a inoculação, as coelhas foram acasaladas. Nos dias +7, +14 e +21 após o nascimento dos filhotes, foram coletados, por ordenha manual, 500μL de leite, em três lactações consecutivas. A recuperação de larvas foi determinada pelo uso da técnica de centrífugo-sedimentação com formol-éter. A técnica de ELISA foi empregada para confirmar a produção de anticorpos (IgG) anti-T. canis pelas fêmeas infectadas. Observou-se a presença de larvas em cinco das doze (41,7%) coelhas por amostra. As larvas foram recuperadas exclusivamente nos dias +7, +14 de lactação. A detecção foi observada em diferentes lactações. Não houve diferença significativa entre o número de larvas na mesma lactação ou entre as diferentes lactações. Anticorpos anti-T. canis foram detectados em todas as coelhas infectadas. Em conclusão, a presença de larvas no leite de coelhas sugere a possibilidade de transmissão lactogênica em hospedeiros paratênicos. Ademais, a técnica empregada no estudo permite a recuperação de larvas diretamente do leite.(AU)

Toxocariasis, caused most commonly by Toxocara canis, is an important cosmopolitan zoonosis. Paratenic hosts have been employed to provide knowledge regard to the transmission of toxocariasis. Transmammary transmission in murine experimentally infected was observed based on the recovery of larvae from the tissue. The aim of this study was to evaluate the possibility of transmammary transmission of Toxocara canis in rabbits by detecting larvae directly in milk. Seventeen sexually mature virgin white New Zealand female rabbits were divided into two groups. Twelve animals were orally inoculated with 1,000 T. canis embryonated eggs (infected group), and five animals remained uninfected (control group). One month following the infection, the females were mated. Manual collection of 500 μL of milk from each rabbit was performed on days +7, +14 and +21 of lactation for three consecutive lactations. The recovery of larvae was determined via a centrifuge-sedimentation technique using ether and formalin solutions. ELISA test was run to confirm the production of anti-T. canis antibodies (IgG) by infected rabbits. The presence of larvae was observed in milk samples from 5 (41.7%) of the 12 infected rabbits. The total number of recovered larvae was 20, ranging from 1 to 4 larvae per lactation/rabbit. Larvae were recovered exclusively on days 7 and 14 of lactation. Recovery was verified in different lactations. No significant difference was observed with respect to the number of larvae either in the same lactation period or in different lactation periods. Anti-T. canis antibodies were detected in all infected rabbits. In conclusion, the presence of larvae in rabbit milk samples suggests the possibility of galactogenic transmission of T. canis in paratenic hosts. Moreover, the technique employed in this study allows for the recovery of larvae directly from milk.(AU)

Avaliação do potencial de tilápias do Nilo na eliminação de ovos de Toxocara canis para o meio ambiente

A cultura do consumo de carne de peixe cru vem se disseminando pelo mundo, e com isso cresce também o número de casos de zoonoses causadas por agentes parasitários que utilizam os peixes como hospedeiros. Embora a toxocaríase seja primariamente uma geozoonose, sua transmissão também é passível pelo consumo de carne crua ou mal cozida de hospedeiros paratênicos. Nos humanos as larvas migram do intestino delgado para diversos órgãos, mas o ciclo de vida do parasita não se completa. Na literatura são escassos os estudos sobre o papel dos peixes na cadeia epidemiológica da doença. O objetivo desse estudo foi avaliar a capacidade de peixes em promover a dispersão de ovos de Toxocara canis no meio aquático e verificar a migração de larvas para os órgãos (fígado, trato gastrintestinal (TGI), olhos, sistema nervoso central) e na musculatura de peixes, usando como modelo experimental a tilápia do Nilo. Os peixes (n=15) foram inoculados experimentalmente por gavagem com 300 ovos embrionados de T. canis, e mantidos individualmente em caixas plásticas durante o experimento. A avaliação da contaminação da água, foi realizada pela filtragem seriada em um conjunto de tamises (212 e 38 m), onde os sedimentos retidos foram recuperados e analisados em microscopia. A avaliação da migração tecidual, foi feita por digestão ácida dos órgãos, realizadas nos tempos de 16, 24, 48, 72 e 240 horas pós-inoculação. Em cada momento, foram analisados três peixes inoculados e um peixe do grupo controle (Grupo controle n= 5). A recuperação total de ovos no experimento foi de 48,4%, sendo que, das estruturas parasitárias 76,3% estavam meio aquático e 23,7% no TIG. O modelo de regressão binomial negativo mostrou declínio significativo tanto da eliminação de ovos embrionados para o meio aquático (p= 0,001) quanto na presença de ovos de T. canis no TGI dos peixes (p=0,007), ao longo do tempo. Nenhuma larva foi recuperada dos tecidos. Os dados do estudo mostram que peixes são proficientes em eliminar ovos de Toxocara canis em ambiente aquático, e que embora não haja migração tecidual, os peixes podem manter ovos aparentemente infectivos de Toxocara canis no trato gastrintestinal. Desta forma, torna-se necessário a adoção de práticas adequadas de manejo com treinamentos regulares para os trabalhadores da cadeia produtiva e manipuladores de pescados para minimizar os impactos das zoonoses transmitidas por peixes.

The culture of the consumption of raw fish flesh is spreading around the world, and with this also increases the number of cases of zoonoses caused by parasitic agents that use the fish as hosts. Although toxocariasis is primarily a geozoonosis, its transmission is also amenable to the consumption of raw or undercooked meat from paratenic hosts. In humans the larvae migrate from the small intestine to various organs, but the life cycle of the parasite is not complete. There is a scarcity of studies about role of fish in the epidemiological chain of the disease. The objective of this study is to evaluate the ability of fish to promote the dispersion of Toxocara canis eggs in the aquatic environment and to verify the migration of larvae to the organs (liver, gastrointestinal tract (TGI), eyes, central nervous system) and in the musculature of using Nile tilapia as the experimental model. The fish (n = 15) was inoculated experimentally by gavage with 300 embryonic eggs of T. canis, and kept individually in plastic boxes during the experiment. The evaluation of the water contamination was performed by serial filtration in a set of sieves (212 and 38 m), where the retained sediments were recovered and analyzed by microscopy. The evaluation of the tissue migration was made by acid digestion of the organs, performed at 16, 24, 48, 72 and 240 hours after inoculation. At each moment, three inoculated fish and one fish of the control group were analyzed (Control Group n = 5). The total egg recovery in the experiment was 48.4%, and 76.3% of the parasitic structures were aquatic and 23.7% in TIG. The negative binomial regression model showed a significant decline in both the elimination of embryonated eggs into the aquatic environment (p = 0.001) and in the presence of T. canis eggs in fish TGI (p = 0.007) over time. No larvae was recovered from the tissues. The data show that fish are proficient at eliminating T. canis eggs in the aquatic environment, and that although there is no tissue migration, fish can maintain apparently infective eggs of T. canis in the gastrointestinal tract. Thus, it is necessary to adopt adequate management practices with regular training for workers in the chain of production and fish handling to minimize the impacts of zoonoses transmitted by fish.

Determination of IgG avidity in BALB/c mice experimentally infected with Toxocara canis / Determinação da avidez de IgG em camundongos BALB/c experimentalmente infectados com Toxocara canis

Toxocariasis is a zoonotic disease in that IgM titers can remain high for long periods making difficult to determine the stage of the disease. The aim of this study is to investigate the applicability of indirect ELISA, associated with urea, to discriminate between the acute and chronic toxocariasis. IgG avidity was evaluated in 25 BALB/c mice experimentally infected with 1000 Toxocara canis eggs. Blood samples were collected, and sera treated with 6 M urea and assayed by ELISA every two weeks. The percent IgG avidity was determined using the mean absorbance of sera treated with urea, divided by the mean absorbance of untreated sera. In the first 15 days post-inoculation, was observed a low percentage, between 7.25 and 27.5%, IgG avidity, characteristic of an acute infection. After 60 days of infection, all the mice showed between 31.4 and 58% IgG avidity, indicating a chronic infection.

A toxocaríase é uma zoonose na qual os títulos de IgM podem permanecer elevados por longos períodos, tornando difícil a determinação do estágio em que a doença se encontra. O objetivo deste estudo foi investigar a aplicabilidade de um teste indireto de ELISA, associado com ureia, para fazer a discriminação entre as fases aguda e crônica da toxocaríase. A avidez de IgG foi avaliada em 25 camundongos BALB/c experimentalmente infectados com 1000 ovos embrionados de Toxocara canis. A cada duas semanas, amostras de sangue foram coletadas, o soro tratado com ureia 6M e realizado o ensaio pela técnica de ELISA. O percentual de avidez de IgG foi determinado, usando-se a média das absorbâncias dos soros tratados com ureia dividida pela média das absorbâncias dos soros não tratados. Nos primeiros 15 dias pós-inoculação, foi observado um baixo percentual de avidez de IgG, entre 7,25 e 27,5%, característico da fase aguda da infecção. Após 60 dias de infecção, todos apresentaram avidez de IgG entre 31,4 e 58%, indicando a fase crônica da infecção.

Comparação de métodos para recuperação de ovos de Toxocara spp. em amostras de solo

Comparação de métodos para recuperação de ovos de Toxocara spp. em amostras de solo O objetivo do estudo foi comparar a eficiência de três técnicas de recuperação de ovos de Toxocara spp., a partir de amostras de solo artificialmente e naturalmente contaminadas. Na primeira etapa, amostras de solo (n= 12 amostras de 1g) foram contaminadas com 100 ovos de T. canis. Foram utilizadas três técnicas: 1) centrifugo-sedimentação após filtragem do solo em série de quatro tamises (300, 212, 90 e 63 m); 2) centrifugo-flutuação com sulfato de zinco (d = 1.35 g/cm3) após tamisação; e, 3) centrifugo-flutuação com sulfato de zinco sem tamisação. A recuperação de ovos pela técnica 1 foi significativamente superior às demais, com 78,25%; 16,33% e 10,92% de positividade, respectivamente. Em uma segunda etapa, foram avaliadas amostras de solo de 15 praças e parques públicos de Presidente Prudente, São Paulo, durante um período de 6 meses, com comparação das técnicas 1 e 2. A recuperação de ovos pela técnica 1 mostrou ser mais eficiente. Em três meses avaliados, houve diferença significativa na média dos ovos recuperados. A técnica de tamisação centrifugo-sedimentação mostrou maior eficiência na recuperação de ovos de Toxocara spp. em relação as outras técnicas. A técnica é de baixo custo, fácil execução e não requer soluções com riscos ambientais para sua execução.

The objective of this study was to compare the efficiency of different techniques to recover Toxocara spp. eggs from artificially and naturally contaminated soil samples. In the first stage, soil samples (n= 12 samples of 1g) were artificially contaminated with 100 eggs of T. canis. Three techniques were used: 1) centrifugal-sedimentation after soil filtration in a series of four sieves, using distilled water (300, 212, 90, and 63 m); 2) centrifugal-flotation with zinc sulfate (d= 1.35 g/cm3) after sieving; and, 3) centrifugal-flotation with zinc sulfate without sieving. The recovery of eggs using technique 1 was significantly superior to the other techniques, with 78.25%, 16.33%, and 10.92% positivity, respectively. In the second stage, soil samples from 15 public squares/parks were evaluated over a period of 6 months, comparing the more efficient techniques in stage 1 (techniques 1 and 2). The recovery of eggs by technique 1 was more efficient. In the three out of the 6 months evaluated, there was a significant difference in the mean number of eggs recovered, using the technique of centrifugal-sedimentation with sieving. The technique is low cost, easy to implement, and does not require solutions which present environmental risks for its execution.

Frequência e fatores associados à contaminação de pêlo de cães por ovos de Toxocara spp. na região de Presidente Prudente, São Paulo

A toxocaríase é uma das zoonoses parasitárias mais prevalentes mundialmente. A doença pode se apresentar nas formas visceral, ocular e neurotoxocaríase, e é causada principalmente pelo nematódeo Toxocara canis, cujo hospedeiro definitivo é o cão. A transmissão da toxocaríase para o humano é ocasionada pela ingestão acidental de ovos larvados do parasita presentes no solo. Estudos têm mostrado que os pêlos de cães tem a capacidade de abrigar ovos do parasito e representar risco para a transmissão da zoonose. O presente estudo teve como objetivo avaliar a frequência e os fatores associados à contaminação do pêlo de cães por ovos de Toxocara spp. de animais atendidos e/ou abandonados em um hospital veterinário escola na região Oeste do Estado de São Paulo, Brasil. As amostras de pêlos foram coletadas das regiões perineal, superior e inferior da cauda. Para a análise das amostras e recuperação de ovos de Toxocara spp. foi realizada a lavagem do material em Tween 20 e posterior filtragem em tamises de 300µm, 212µm e 38µm. Foram analisadas amostras de pêlos de 165 cães, sendo, 23,0% abandonados e 77,0% domiciliados. Das amostras analisadas, 59 (35,8%) provenientes de filhotes e 106 (64,2%) de animais adultos. Na avaliação das amostras, 6,7% (11/165) estavam contaminadas, com média de 12,2 ovos por animal (1-70 ovos/animal) e de 57,5 ovos/grama de pêlo. Houve associação entre a presença de ovos no pêlo e o animal ser filhote, abandonado, sem definição racial. A desverminação foi fator de proteção para a contaminação do pêlo. Todos os animais com presença de ovos no pêlo apresentavam diarreia/fezes pastosas. Dos ovos recuperados, todos apresentavam características de viabilidade. A região perineal foi a mais contaminada (72,4%). Os resultados mostram que os ovos de Toxocara spp. podem aderir à superfície da pele/pêlos de cães, onde embrionam, principalmente nas categorias: filhotes, cães não domiciliados, sem desverminação e que possuem o pêlo curto. Dessa forma, o tratamento anti-helmíntico profilático e os cuidados corretos com a higiene dos animais, principalmente nos primeiros meses de vida, tornam-se fundamentais para reduzir os riscos de transmissão de toxocaríase aos humanos por contato direto com os cães.

Toxocariasis is one of the most prevalent parasitic zoonoses in the world. The disease can present visceral, ocular, and neurotoxocariasis forms, and is principally caused by the nematode Toxocara canis, whose definitive host is the dog. The transmission of toxocariasis to humans is caused by accidental ingestion of larval eggs of the parasite, present in the soil. Studies have shown that dog hair has the capacity to harbor eggs of the parasite and represents a risk for transmission of the zoonosis. The objective of the present study was to evaluate the frequency and factors associated with the contamination of dog hair by Toxocara spp. of animals attended and/or abandoned at a Veterinary School Hospital in the western region of the State of São Paulo, Brazil. The hair samples were collected from the perineal region, and upper and lower tail regions. For analysis of the samples and recovery of Toxocara spp., the material was washed in Tween 20 and then filtered through sieves of 300µm, 212µm, and 38µm. Hair samples from 165 dogs were analyzed (23.0% abandoned and 77.0% domiciled dogs). Of the analyzed samples, 59 (35.8%) were from puppies and 106 (64.2%) from adult animals. In the sample evaluation, 6.7% of the dogs (11/165) were contaminated, with a mean of 12.2 eggs per animal (1-70 eggs/animal) and 57.5 eggs/gram of hair. There was an association between the presence of eggs in the hair and the animal being a puppy, abandoned, with no defined breed. Deworming was a protective factor for hair contamination. All animals with the presence of eggs in the hair presented with diarrhea/soft feces. Of the recovered eggs, all presented characteristics of viability. The perineal region was the most commonly contaminated (72.4%).The results demonstrate that the eggs of Toxocara spp. can be eliminated in the feces and can adhere to the surface of the hair of dogs, where they embryonate, mainly in puppies, non-domiciled dogs, dogs that are not dewormed, and those with short hair. Thus, prophylactic anthelmintic treatment and correct care regarding the hygiene of animals, especially in the first months of life, become essential to reduce the risk of transmission of toxocariasis to humans through direct contact with dogs.