Utilização comparativa de enrofloxacino, probiótico (Lactobacilus plantarum) e propionato de sódio na larvicultura de camarão branco do pacífico / Comparative use of enrofloxacin, probiotic (Lactobacillus plantarum) and sodium propionate in pacific white shrimp larvae / Utilización comparativa de enrofloxacino, probiótico (Lactobacillus plantarum) y propionato de sodio en larvicultura de camarón blanco del pacífico

O objetivo do presente trabalho foi avaliar métodos de controle e tratamento de bacterioses na larvicultura de Litopenaeus vannamei, avaliando o uso contínuo de probiótico e o uso pontual de enrofloxacino 15mg.L-1 e propionato de sódio 0,5 mM.L-1 nos momentos de metamorfose sobre os, parâmetros zootécnicos e microbiológicos (larvas e da água). Foram utilizadas 16 unidades de 60L, povoadas na densidade de 325 náuplios.5L-1, divididos em três tratamentos: enrofloxacino, probiótico, propionato de sódio e controle. O enrofloxacino e o propionato foram ministrados em protozoea 3, misis 3 e pós-larva 4 e o probiótico foi ministrado na ração ao longo de todo o experimento. O probiótico aumentou as contagens de bactérias ácido-láticas em relação aos demais tratamentos na água de cultivo (p=0,00001) e em relação ao enrofloxacino e o proprionato nas larvas (p=0,0048). A água do tratamento com probiótico apresentou menor contagem de Vibrio spp. que o enrofloxacino (p=0,0011) e as larvas tratadas com probiótico apresentaram menor contagem de Vibrio spp. que o propionato (p=0,0158). Contudo, não foi observada diferença nos índices zootécnicos avaliados. Assim, os aditivos na dose utilizada não alteram parâmetros zootécnicos da larvicultura do camarão L. vannamei.(AU)

The purpose of this study was to assess control and treatment methods for bacterial diseases in Litopenaeus vannamei, evaluating the continuous use of probiotics and occasional use of 15mg-L-1 enrofloxacin and 0.5-mM.L-1 sodium propionate at the morphological change moments on the performance and microbiological parameters of larvae and water. A total of 16 60-L units were used, stocked with 325 nauplii/5L-1, divided into three treatments and one control. Enrofloxacin and propionate were administered into protozoea 3, misis 3 and 4, and post-larvae 4, while the probiotic was administered in the feed throughout the experiment. The probiotic increased the counts of lactic acid bacteria in relation to the other treatments in the culture water (p = 0.00001) and in relation to enrofloxacin and propionate in larvae (p = 0.0048). The treatment water with probiotic had lower counts of Vibrio ssp. than enrofloxacin (p = 0.0011) and larvae treated with probiotic showed lower counts of Vibrio ssp. that propionate (p = 0.0158). However, no difference was observed in the performance indexes assessed. Thus, it can be concluded that additives in the assessed doses did not influence the performance parameters of L. vannamei.(AU)

El objetivo del presente trabajo fue evaluar métodos de control y tratamiento de enfermedades bacterianas en larvicultura de Litopenaeus vannamei, evaluando el uso continuo de probiótico y el uso puntual de 15 mg.L-1 de enrofloxacino y 0,5 mM.L-1 de propionato de sodio en momentos de metamorfosis sobre los parámetros zootécnicos y microbiológicos (larvas y del agua). Se han utilizado 16 unidades de 60L, pobladas en la densidad de 325 nauplios.5L-1, divididos en tres tratamientos: enrofloxacino, probiótico, propionato de sodio y control. El enrofloxacino y el propionato fueron suministrados en protozoea 3, misis 3 y postlarva 4 y el probiótico suministrado en alimento durante el transcurso del experimento. El probiótico aumentó el contaje de bacterias ácido-lácticas en correlación a los demás tratamientos en agua de cultivo (p=0,0001) y las larvas en relación al enrofloxacino y el propionato en las larvas (p=0,0048). El agua del tratamiento con probiótico presentó menor contaje de Vibrio spp. que el enrofloxacino (p=0,0011) y las larvas tratadas con probiótico presentaron menor contaje de Vibrio spp. que el propionato (p=0,0158). Sin embargo, no se ha observado diferencia en los índices zootécnicos de larvicultura de camarón L. vannamei.(AU)

Utilização comparativa de enrofloxacino, probiótico (Lactobacilus plantarum) e propionato de sódio na larvicultura de camarão branco do pacífico / Comparative use of enrofloxacin, probiotic (Lactobacillus plantarum) and sodium propionate in pacific white shrimp larvae / Utilización comparativa de enrofloxacino, probiótico (Lactobacillus plantarum) y propionato de sodio en larvicultura de camarón blanco del pacífico

O objetivo do presente trabalho foi avaliar métodos de controle e tratamento de bacterioses na larvicultura de Litopenaeus vannamei, avaliando o uso contínuo de probiótico e o uso pontual de enrofloxacino 15mg.L-1 e propionato de sódio 0,5 mM.L-1 nos momentos de metamorfose sobre os, parâmetros zootécnicos e microbiológicos (larvas e da água). Foram utilizadas 16 unidades de 60L, povoadas na densidade de 325 náuplios.5L-1, divididos em três tratamentos: enrofloxacino, probiótico, propionato de sódio e controle. O enrofloxacino e o propionato foram ministrados em protozoea 3, misis 3 e pós-larva 4 e o probiótico foi ministrado na ração ao longo de todo o experimento. O probiótico aumentou as contagens de bactérias ácido-láticas em relação aos demais tratamentos na água de cultivo (p=0,00001) e em relação ao enrofloxacino e o proprionato nas larvas (p=0,0048). A água do tratamento com probiótico apresentou menor contagem de Vibrio spp. que o enrofloxacino (p=0,0011) e as larvas tratadas com probiótico apresentaram menor contagem de Vibrio spp. que o propionato (p=0,0158). Contudo, não foi observada diferença nos índices zootécnicos avaliados. Assim, os aditivos na dose utilizada não alteram parâmetros zootécnicos da larvicultura do camarão L. vannamei.

The purpose of this study was to assess control and treatment methods for bacterial diseases in Litopenaeus vannamei, evaluating the continuous use of probiotics and occasional use of 15mg-L-1 enrofloxacin and 0.5-mM.L-1 sodium propionate at the morphological change moments on the performance and microbiological parameters of larvae and water. A total of 16 60-L units were used, stocked with 325 nauplii/5L-1, divided into three treatments and one control. Enrofloxacin and propionate were administered into protozoea 3, misis 3 and 4, and post-larvae 4, while the probiotic was administered in the feed throughout the experiment. The probiotic increased the counts of lactic acid bacteria in relation to the other treatments in the culture water (p = 0.00001) and in relation to enrofloxacin and propionate in larvae (p = 0.0048). The treatment water with probiotic had lower counts of Vibrio ssp. than enrofloxacin (p = 0.0011) and larvae treated with probiotic showed lower counts of Vibrio ssp. that propionate (p = 0.0158). However, no difference was observed in the performance indexes assessed. Thus, it can be concluded that additives in the assessed doses did not influence the performance parameters of L. vannamei.

El objetivo del presente trabajo fue evaluar métodos de control y tratamiento de enfermedades bacterianas en larvicultura de Litopenaeus vannamei, evaluando el uso continuo de probiótico y el uso puntual de 15 mg.L-1 de enrofloxacino y 0,5 mM.L-1 de propionato de sodio en momentos de metamorfosis sobre los parámetros zootécnicos y microbiológicos (larvas y del agua). Se han utilizado 16 unidades de 60L, pobladas en la densidad de 325 nauplios.5L-1, divididos en tres tratamientos: enrofloxacino, probiótico, propionato de sodio y control. El enrofloxacino y el propionato fueron suministrados en protozoea 3, misis 3 y postlarva 4 y el probiótico suministrado en alimento durante el transcurso del experimento. El probiótico aumentó el contaje de bacterias ácido-lácticas en correlación a los demás tratamientos en agua de cultivo (p=0,0001) y las larvas en relación al enrofloxacino y el propionato en las larvas (p=0,0048). El agua del tratamiento con probiótico presentó menor contaje de Vibrio spp. que el enrofloxacino (p=0,0011) y las larvas tratadas con probiótico presentaron menor contaje de Vibrio spp. que el propionato (p=0,0158). Sin embargo, no se ha observado diferencia en los índices zootécnicos de larvicultura de camarón L. vannamei.

Dietary supplementation with probiotic and butyrate for Litopenaeus vannamei in pre-nursery / Suplementação dietética com probiótico e butirato de sódio no pré-berçário de Litopenaeus vannamei

This study aimed to evaluate the diet supplementation with sodium butyrate, probiotic (Lactobacillus plantarum) and their interaction, in the diet for post-larvae of the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) in pre-nursery. We used the following treatments during the entire experimental period: (1) Probiotic 1x108 UFC/g, sodium butyrate 2%, (3) probiotic 1x108 UFC/g + sodium butyrate 2%, (4) control (Base diet). In all treatment we added culture medium in the same doses as in the probiotic treatments. We used 16 experimental units of 60L each, with the bottom Ushaped, stocked with 2,880 post-larvae 5. Fifteen days later, regardless the presence or absence of the probiotic, shrimps from treatment with butyrate had higher survival (p = 0.0039) and lowest individual dry weight (p = 0.0043). No morphological changes were observed in the gut of postlarvae in any treatment. Therefore, the diet supplementation with sodium butyrate increases the survival of shrimp post-larvae of in the pre-nursery phase, without causing morphological changes in its gut.(AU)

Este estudo teve por objetivo avaliar o uso suplementar de probiótico (Lactobacillus plantarum) e butirato de sódio, e a interação deles na dieta de póslarvas de camarão-branco-do-pacífico (Litopenaeus vannamei) em fase de pré-berçário. Durante o experimento foram aplicados nas dietas os tratamentos: (1) probiótico 1x108 UFC/g, (2) butirato de sódio 2%, (3) probiótico 1x108 UFC/g + butirato de sódio 2%, (4) controle (dieta base). Todos os tratamentos tiveram a adição de meio de cultura na mesma dosagem utilizada nos tratamentos com probiótico. Foram utilizadas 16 unidades experimentais de 60 L cada uma, com fundo em formato U, povoadas com 2.880 póslarvas 5. Após quinze dias, independentemente da presença ou não do probiótico, os camarões dos tratamentos com butirato apresentaram maior sobrevivência (p = 0,0039) e menor peso seco individual (p = 0,0043). Não foram observadas alterações morfológicas no intestino das pós-larvas em nenhum dos tratamentos. Portanto, a suplementação com butirato de sódio na ração aumenta a sobrevivência das pós-larvas de camarões na fase de pré-berçário sem causar alteração morfológica em seu intestino.(AU)

Dietary supplementation with probiotic and butyrate for Litopenaeus vannamei in pre-nursery / Suplementação dietética com probiótico e butirato de sódio no pré-berçário de Litopenaeus vannamei

This study aimed to evaluate the diet supplementation with sodium butyrate, probiotic (Lactobacillus plantarum) and their interaction, in the diet for post-larvae of the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) in pre-nursery. We used the following treatments during the entire experimental period: (1) Probiotic 1x108 UFC/g, sodium butyrate 2%, (3) probiotic 1x108 UFC/g + sodium butyrate 2%, (4) control (Base diet). In all treatment we added culture medium in the same doses as in the probiotic treatments. We used 16 experimental units of 60L each, with the bottom Ushaped, stocked with 2,880 post-larvae 5. Fifteen days later, regardless the presence or absence of the probiotic, shrimps from treatment with butyrate had higher survival (p = 0.0039) and lowest individual dry weight (p = 0.0043). No morphological changes were observed in the gut of postlarvae in any treatment. Therefore, the diet supplementation with sodium butyrate increases the survival of shrimp post-larvae of in the pre-nursery phase, without causing morphological changes in its gut.

Este estudo teve por objetivo avaliar o uso suplementar de probiótico (Lactobacillus plantarum) e butirato de sódio, e a interação deles na dieta de póslarvas de camarão-branco-do-pacífico (Litopenaeus vannamei) em fase de pré-berçário. Durante o experimento foram aplicados nas dietas os tratamentos: (1) probiótico 1x108 UFC/g, (2) butirato de sódio 2%, (3) probiótico 1x108 UFC/g + butirato de sódio 2%, (4) controle (dieta base). Todos os tratamentos tiveram a adição de meio de cultura na mesma dosagem utilizada nos tratamentos com probiótico. Foram utilizadas 16 unidades experimentais de 60 L cada uma, com fundo em formato U, povoadas com 2.880 póslarvas 5. Após quinze dias, independentemente da presença ou não do probiótico, os camarões dos tratamentos com butirato apresentaram maior sobrevivência (p = 0,0039) e menor peso seco individual (p = 0,0043). Não foram observadas alterações morfológicas no intestino das pós-larvas em nenhum dos tratamentos. Portanto, a suplementação com butirato de sódio na ração aumenta a sobrevivência das pós-larvas de camarões na fase de pré-berçário sem causar alteração morfológica em seu intestino.

ANÁLISES BACTERIOLÓGICAS DE VIBRIOS E EXAME PRESUNTIVO NO CAMARÃO (Litopenaeus vannamei) CULTIVADO EM SISTEMA SEMI-INTENSIVO DE BAIXA SALINIDADE

A intensificação dos sistemas de cultivo do camarão marinho Litopenaeus vannamei associada a fatores estressantes gerados por perturbações ambientais podem deixar os animais suscetíveis a doenças. Uma delas é a Vibriose, causada por bactérias do gênero vibrio que podem ser diagnosticadas através de análise presuntiva e análises bacteriológica. Assim esse trabalho tem por objetivo relacionar as análises bacteriológicas de Vibrio com a análise presuntiva indicativa de vibriose no camarão marinho Litopenaeus vannamei. O estudo foi desenvolvido em campo, utilizando três viveiros denominados V11, V12 e V13 em dois ciclos de produção em sistema semi-intensivo com baixa salinidade. Com coletas semanais, o experimento teve início em abril de 2019 estendendo-se até outubro. Foram avaliados a correlação entre a contagem de Vibrios Sacarose positiva e Sacarose negativa com as variáveis da análise presuntiva (Preenchimento dos Túbulos do Hepatopâncreas-P1, Necrose no hepatopâncreas -P2, Deposição de cálcio -P3, Cor do urópodes-P4 e Black spot -P5) e com salinidade, temperatura, pH e Oxigênio Dissolvido (O2) da água. No ciclo I, as bactérias Sacarose negativa apresentaram correlação positiva com a temperatura da água, com P2 e com P5. E também uma correlação negativa entre Sacarose negativa e P3. Já no segundo ciclo apresentou correlação positiva entre as Sacarose negativa com o pH da água, P2 e P5 e um correlação negativa entre Sacarose negativa com O2 e P4. Foram identificadas em todos os viveiros e ciclos as bactérias Sacarose positiva V. Cholera e V. alginolyticus, e as bactérias Sacarose positiva V. parahaemolyticus e V. Vulnificus. A análise de vibrios juntamente com as presuntivas se mostraram eficazes para possível detecção de vibriose em campo.

The intensification of the cultivation systems of the marine shrimp Litopenaeus vannamei associated with stressors generated by environmental disturbances can leave animals susceptible to diseases. One of them is Vibriose, caused by bacteria of the genus vibrio that can be diagnosed through presumptive analysis and bacteriological analysis. Thus, this work aims to relate the bacteriological analyzes of Vibrio with the presumptive analysis indicative of vibriosis in the marine shrimp Litopenaeus vannamei. The study was developed in the field, using three nurseries called V11, V12 and V13 in two production cycles in a semiintensive system with low salinity. With weekly collections, the experiment started in April 2019 and continued until October. The correlation between the count of Vibrios Sucrose positive and Sucrose negative was evaluated with the variables of the presumptive analysis (Filling of the Hepatopancreas Tubules-P1, Necrosis in the hepatopancreas -P2, Calcium deposition -P3, Color of the uropods-P4 and Black spot - P5) and with salinity, temperature, pH and Dissolved Oxygen (O2) of the water. In cycle I, the negative sucrose bacteria showed a positive correlation with water temperature, with P2 and with P5. And also a negative correlation between negative sucrose and P3. In the second cycle, there was a positive correlation between negative sucrose with water pH, P2 and P5 and a negative correlation between negative sucrose with O2 and P4. The bacteria Sucrose positive V. Cholera and V. alginolyticus, and the bacteria Positive sucrose V. parahaemolyticus and V. Vulnificus were identified in all nurseries and cycles. The analysis of vibrios together with the presumptive ones proved to be effective for possible detection of vibriosis in the field.

Isolation and experimental infection with Vibrio alginolyticus in the sea horse, Hippocampus reidi Ginsburg, 1933 (Osteichthyes: Syngnathidae) in Brazil / Isolamento e infecção experimental de Vibrio alginolyticus em cavalo-marinho, Hippocampus reidi Ginsburg, 1933 (Osteichthyes: Syngnathidae) no Brasil

The aim of this study was to evaluate the pathogenicity of Vibrio alginolyticus isolated from an outbreak of sea horse Hippocampus reidi reared in the State of Santa Catarina, Brazil, by experimental infection. Sea horses with necrosis on the mouth epithelium were collected from aquaria at the Aquaculture Department, UFSC and the bacterium isolated from the mouth, liver, heart and blood in tiosulphate citrate bilesalt sucrose agar broth. The strains were identified by API 20E kit with 99.1 percent probability as Vibrio alginolyticus. Twelve adult sea horses (9.63 ± 2.42 g and 15.12 ± 0.87 cm) were distributed in six aquaria of 10 L capacity with aerated sea water. Fish from three aquaria were submitted to an immersion bath in a solution containing 1.0 × 10(7) CFU of V. alginolyticus/mL for 15 minutes. Fish from the other three aquaria received the same procedure without bacteria. Twenty four hours after this challenge, 100 percent mortality was observed in the animals infected with V. alginolyticus. No mortality was observed in non-infected fish. Hyperplasia, displacement and fusion of secondary lamellae of the gills; leukocyte infiltration and necrotic foci in the kidney; hyperplasia, sinusoidal deformation and necrotic foci in the liver were observed in histopathological analysis. The V. alginolyticus isolated in this study was pathogenic to H. reidi and constitutes an important sanitary problem to its culture.(AU)

Foi avaliado por meio de infecção experimental a patogenicidade de Vibrio alginolyticus isolado de um surto de enfermidade em cavalo-marinho Hippocampus reidi cultivado no Estado de Santa Catarina, Brasil. Os peixes com necroses no epitélio bucal foram coletados em aquários do Departamento de Aquicultura, UFSC e as bactérias isoladas da boca, fígado, coração e sangue em meio Agar tiossulfato citrato bile sacarose. Os isolados foram identificados pelo kit API 20E como Vibrio alginolyticus com 99,1 por cento de probabilidade. Doze peixes adultos (9,63 ± 2,42 g e 15,12 ± 0,87 cm) foram distribuídos em seis aquários de 10 L com água marinha e aeração. Peixes de três aquários foram submetidos a um banho de imersão por 15 minutos em uma solução contendo 1,0 × 10(7) UFC de V. alginolyticus/mL. Nos outros três aquários realizou-se o mesmo procedimento sem a bactéria. Vinte e quatro horas após o desafio, 100 por cento de mortalidade foi observada nos animais infectados com V. alginolyticus. Não houve mortalidade nos peixes não infectados. Nas análises histopatológicas, foi observado hiperplasia, deslocamento do epitélio e fusão das lamelas secundárias das brânquias; infiltração de leucócitos e necrose no rim; hiperplasia, deformação sinusoidal e necrose no fígado nos animais desafiados com V. alginolyticus. O V. alginolyticus isolado neste estudo foi patogênico para H. reidi, constituindo-se de um importante problema para seu cultivo.(AU)

Avaliação de bacterina e Lactobacillus plantarum frente à infecção experimental por Vibrio harveyi em pós-larvas de Litopenaeus vannamei / Evaluation of bacterin and Lactobacillus plantarum front an experimental infection of Vibrio harveyi in pos-larvae of Litoenaeus vannamei

Objetivou-se averiguar o efeito da bactéria Lactobacillus plantarum e células inativas das bactérias Vibrio alginolyticus, Aeromonas salmonicida e Pasteurella multocida na sobrevivência larval de Litoenaeus vannamei, no teste de estresse e infecção experimental com Vibrio harveyi. Foram utilizados tanques cônicos de 30 L, povoados com 400 larvas cada, no estádio de pós-larva cinco. Tratamentos em triplicatas foram consistidos de: 1: ração comercial (controle), 2: ração comercial + bacterina via oral na artemia, 3: ração comercial + bacterina via imersãoe 4: ração comercial com inóculo de Lactobacillus plantarum. A aplicação da bacterina ocorreu seis horas antes da infecção e do teste de estresse; enquanto o Lactobacillus plantarum foi administrado por 15 dias antes dos desafios. As pós-larvas do tratamento 4 (ração suplementada com L. plantarum) obtiveram maior índice de sobrevivência no teste de estresse (87,86 ± 2,35%), seguido dos tratamentos 2 e 3 (bacterina via imersão e oral) com 81,54±1,50% e 80,16 ± 2,15% respectivamente, superiores ao índice do controle (72,63 ± 3,34%).Já no desafio com V. harveyi, os animais do grupo tratado com a adição de bacterina via imersão apresentaram maior sobrevivência(79,60 ± 7,12%). As pós-larvas dos tratamentos com bacterina via oral na artêmia e alimentadas com o probiótico L. plantarum,apresentaram sobrevivências de 65,60 ± 5,18% e 69,60 ± 10,43 %,respectivamente, sendo superiores ao controle (56,4 ± 5,58%), quando desafiados com V. harveyi. Os resultados demonstram que ouso de ração com L. plantarum e bacterina aumentam a sobrevivência das pós-larvas de L. vannamei frente aos testes de estresse e infecções experimentais com V. harveyi.(AU)

This study aimed to verify the effect of probiotics and inactivated cells of bacterias such as Vibrio alginolyticus, Aeromonas salmonicida and Pasteurella multocida in larvae survival of Litopenaeus vannamei, in stress test and experimental infection with Vibrio harveyi. Conic tanks of 30L, were stocked with 400 post-larvae stage five. Four experimental treatments with triplicates consisted of: 1: commercial feed (control),2: commercial feed plus bacterin by oral administration in artemia, 3:commercial feed plus bacterin by immersion administration, 4:commercial feed with Lactobacillus plantarum inoculation. Bacterin application was conducted 6h before the infection and stress test, while probiotic administration was for 15 days before challenges. In stress test, post-larvae of treatment 4 (commercial feed supplemented with Lactobacillus plantarum) with reached the highest survival rate(87,86 ± 2,35%) followed by the ones of treatment 3 and 2 (bacterimby immersion and bacterim by oral administration in artemia) with 81,54±1, 50% and 80,16 ± 2,15%, respectively, which were superior to the control treatment (72,63 ± 3,34%). Next to V. harveyi challenge, animals from treatment 3 presented the highest survival rate (79,60 ±7,12%) followed by treatments 4 (69,60 ± 10,43%), 2 (65,60 ± 5,18%)and control (56,4 ± 5,58%). All treatments were different from control. The present results demonstrate the possible use of L. plantarum and bacterin as promoters in survival rates of L. vannamei post-larvae in the stress tests and challenges with Vibrio harveyi.(AU)