Comparative study of bullfrog (Rana catebeiana) skin preservation for use as a biomaterial / Estudo comparativo de meios de conservação de pele de rã-touro (Rana catesbeiana) para utilização como biomaterial

The use of biological membranes in wound dressings has increasingly become a reality. Accordingly, an ideal means of preservation is sought that can provide tissue maintenance for long periods without interfering with its quality or clinical applicability. Therefore, the objective of the present study was to evaluate and histologically and microbiologically compare frog skins subjected to two different preservation methods. Sixteen frog skins were evaluated and, depending on the preservation method, subdivided into two groups with eight skins each, namely, the Freezing Group, in which the skins were frozen at -4º in a 20% glycerin solution; and the Glycerin Group, whose skins were kept in 98% glycerin at room temperature (average of 28 ºC and average humidity of 78%). The skins were analyzed fresh (T0) and at 30 (T1), 60 (T2), 90 (T3), and 120 (T4) days of preservation. Data were analyzed comparatively. There was no bacterial or fungal growth, and the skin structure and collagen arrangement remained intact at all time points in both treatments. In conclusion, both preservation methods are efficient and capable of maintaining the tissue morphological structure and preventing the growth and proliferation of contaminants for up to 120 days.

A utilização de membranas biológicas em curativos tem se tornado cada vez mais uma realidade. Concomitante, busca-se um meio de conservação ideal que possa proporcionar a manutenção do tecido por longos períodos de tempo sem interferir em sua qualidade e aplicabilidade clínica. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi o de avaliar e comparar histologicamente e microbiologicamente peles de rã submetidas a dois diferentes métodos de conservação. Foram avaliadas 16 peles de rã-touro as quais foram, em função do método de conservação, subdivididas em dois grupos com 08 peles cada: O Grupo Congelamento (GC) no qual as peles foram submetidas ao congelamento a -4º, em solução de glicerina a 20%; e o grupo Glicerina (GG), no qual as peles foram conservadas em temperatura ambiente (média de 28ºC e umidade média de 78%) em glicerina a 98%. As peles foram analisadas a fresco (T0) e com 30 (T1), 60 (T2), 90 (T3) e 120 (T4) dias de conservação. Os dados foram analisados de forma comparativa. Em todos os tempos analisados e em ambos os tratamentos, não houve crescimento bacteriano ou fúngico e a estrutura da pele e o arranjo de colágeno mantiveram-se íntegros. Conclui-se que, ambos os métodos de conservação são eficientes e capazes de manter a estrutura morfológica tecidual, e impedem o crescimento e a proliferação de contaminantes por até 120 dias.

Uso da túnica vaginal canina conservada em glicerina a 98% como curativo biológico no tratamento de feridas cutâneas produzidas em ratos Wistar / Use of canine vaginal tunic preserved in 98% glycerin as biological curative in the treatment of skin produced in wound Wistar rats

Na procura por material alternativo no tratamento de feridas cutâneas, buscou-se com este estudo avaliar o comportamento da túnica vaginal canina conservada em glicerina a 98% como curativo biológico no tratamento de feridas cutâneas provocadas experimentalmente em ratos. Foram utilizados 16 ratos Wistar, nos quais foram induzidas experimentalmente duas lesões cutâneas na região dorsal, sendo uma cranial e a outra caudal. Uma ferida serviu de controle, a qual não recebeu tratamento, a outra recebeu a túnica vaginal recobrindo toda extensão da lesão. A seleção de qual das feridas, cranial ou caudal, iria receber a membrana foi feita de forma aleatória. Os animais foram distribuídos em quatro grupos de igual número para análises clínicas, macroscópicas e histológicas decorridos três, sete, 14 e 21 dias de pós-operatório. Na avaliação clínica e macroscópica pode-se observar que o processo de reparação teve evolução semelhante tanto no grupo controle quanto no grupo membrana. Na análise histopatológica foi constatada grande quantidade de infiltrado inflamatório nos períodos iniciais, no entanto, decorridos 21 dias, a epiderme já se encontrava reparada, e em todos os momentos foi observada maior presença de tecido conjuntivo no grupo membrana, sugerindo maior precocidade na cicatrização. Deste modo, concluiu-se que a túnica vaginal canina pode ser utilizada como nova alternativa no tratamento de feridas cutâneas.

In the search for alternative material in the treatment of cutaneous wounds, this study aimed to evaluate the behavior of canine vaginal tunic conserved in glycerin 98% as a biological dressing in the treatment of cutaneous wounds provoked experimentally in rats. Sixteen animals were used in which two cutaneous lesions were caused in the dorsal region, one cranial and the other caudal. One wound served as a control which did not receive treatment, the other received the vaginal tunic covering all extension of the lesion. The selection of which of the wounds, cranial or caudal, would receive the membrane was made at random. The animals were divided into four groups of equal numbers for clinical, macroscopic, and histological analyzes after three, seven, 14 and 21 postoperative days. In the clinical and macroscopic evaluation, it can be observed that the healing process had similar evolution in both the control group and the membrane group. In the histopathological analysis, a large amount of inflammatory infiltrate was observed in the initial periods; however, after 21 days the epidermis was already healed, and at all times a greater presence of connective tissue was observed in the membrane group, suggesting a greater precocity in healing. Thus, it was concluded that the canine vaginal tunic can be used as a new alternative in the treatment of cutaneous wounds.

Using tilapia skin (Oreochromis niloticus) as an occlusive biological curative in equine wounds: short communication / Uso da pele de tilápia (Oreochromis niloticus) como curativo biológico oclusivo em feridas de equinos: nota prévia

Tilapia skin is being already use in humans and wild animals present burning wounds and showed a great result. The objective is to evaluate if tilapia skin used as an occlusive curative improves equine wound healing in two horses present chronic wound. Both animals are males, adults, both of breed Mangalarga Marchador South America. Every seven days wound we measured, photographed, biopsied for histopathological analysis, cleaned and tilapia curative was changed. Image J software was used to measure wound area. Tilapia skin as an occlusive biological factor seemed to improve healing process, wounds present an area reduction and clinical improvement during 35 days treatment, even though is still waiting for complete wound healing. In equine tilapia skin curative seemed to speed up healing process and allowed reduced curative change from every two days to once a week. This implies in decrease animal ́s stress, less pain and treatment cost reduction since we used less bandage amount. Beside that tilapia skin industrial waste. Furthermore, it allowed avoid using antibiotics, which reduces environment pollution and there ́s no antibiotic resistance issues.(AU)

A pele de tilápia está sendo utilizada em humanos e animais silvestres com feridas por queimadura demonstrando um excelente resultado. O objetivo do estudo é avaliar se a pele de tilápia utilizada como curativo oclusivo melhora o processo de cicatrização em dois equinos machos adultos da raça Mangalarga Machador, os quais apresentam feridas crônicas. A cada 7 dias as feridas eram medidas, fotografadas, biopsiadas para a análise histopatológica, limpas e o curativo de pele de tilápia trocado. O programa Image J foi utilizado para calcular a área da ferida. A pele de tilápia utilizada como curativo oclusivo parece ter um efeito positivo na cicatrização das feridas, a área diminuiu e a o aspecto clínico melhorou nos 35 dias avaliados, no entanto é necessário esperar pela cicatrização completa das feridas. Em equinos, a utilização de curativo de pele de tilápia parece diminuir o tempo de cicatrização e permite a redução do número de trocas de curativos de a cada dois dias para uma vez por semana. Isso implica em menos estresse e dor para o animal devido à menor manipulação e menor custo de tratamento, pois há menor quantidade de material de curativo sendo utilizado. Além disso, permite evitar a utilização de antibióticos, o que diminui o impacto ambiental e não gera resistência.(AU)

Using tilapia skin (Oreochromis niloticus) as an occlusive biological curative in equine wounds: short communication / Uso da pele de tilápia (Oreochromis niloticus) como curativo biológico oclusivo em feridas de equinos: nota prévia

Tilapia skin is being already use in humans and wild animals present burning wounds and showed a great result. The objective is to evaluate if tilapia skin used as an occlusive curative improves equine wound healing in two horses present chronic wound. Both animals are males, adults, both of breed Mangalarga Marchador South America. Every seven days wound we measured, photographed, biopsied for histopathological analysis, cleaned and tilapia curative was changed. Image J software was used to measure wound area. Tilapia skin as an occlusive biological factor seemed to improve healing process, wounds present an area reduction and clinical improvement during 35 days treatment, even though is still waiting for complete wound healing. In equine tilapia skin curative seemed to speed up healing process and allowed reduced curative change from every two days to once a week. This implies in decrease animal ́s stress, less pain and treatment cost reduction since we used less bandage amount. Beside that tilapia skin industrial waste. Furthermore, it allowed avoid using antibiotics, which reduces environment pollution and there ́s no antibiotic resistance issues.(AU)

A pele de tilápia está sendo utilizada em humanos e animais silvestres com feridas por queimadura demonstrando um excelente resultado. O objetivo do estudo é avaliar se a pele de tilápia utilizada como curativo oclusivo melhora o processo de cicatrização em dois equinos machos adultos da raça Mangalarga Machador, os quais apresentam feridas crônicas. A cada 7 dias as feridas eram medidas, fotografadas, biopsiadas para a análise histopatológica, limpas e o curativo de pele de tilápia trocado. O programa Image J foi utilizado para calcular a área da ferida. A pele de tilápia utilizada como curativo oclusivo parece ter um efeito positivo na cicatrização das feridas, a área diminuiu e a o aspecto clínico melhorou nos 35 dias avaliados, no entanto é necessário esperar pela cicatrização completa das feridas. Em equinos, a utilização de curativo de pele de tilápia parece diminuir o tempo de cicatrização e permite a redução do número de trocas de curativos de a cada dois dias para uma vez por semana. Isso implica em menos estresse e dor para o animal devido à menor manipulação e menor custo de tratamento, pois há menor quantidade de material de curativo sendo utilizado. Além disso, permite evitar a utilização de antibióticos, o que diminui o impacto ambiental e não gera resistência.(AU)

Effects of the application of the amniotic membrane in the healing process of skin wounds in rats

Purpose: To evaluate the efficacy of the application of the human amniotic membrane (HAM) on the inflammatory process, fibroblast proliferation, formation of collagenand reduction of skin wound areas in rats.Methods: Thirty six rats were submitted to a surgical injury induction and divided into two groups (n = 18): group C (control) and T (treated with the HAM). The macroscopic evolution in the wound area and the histological characteristics of the skin samples were evaluated.Results: The regression of the wound area was greater in group T. The histological analysis revealed a significant reduction (p < 0.05) in the inflammatory infiltrate in group T at all experimental periods compared with that in the control group. Furthermore, the group T presented a significant increase in the proliferation of fibroblasts at 14 and 21 days compared with group C (p < 0.05). Regarding the deposition of mature collagen fibers, there was an increase in the replacement of type III collagen by type I collagen in group T (p < 0.05).Conclusion: Treatment with the HAM reduced the healing time as well as the inflammatory responses, increased the proliferation of fibroblasts, and induced a higher concentration of mature collagen fibers.(AU)

Applicability of crystalline cellulose membrane in the treatment of skin wounds induced in Wistar rats

PURPOSE: To evaluate the healing of skin wounds induced experimentally in rats using a crystalline cellulose membrane (Veloderm(r)). METHODS: Thirty-two rats were divided into two groups: control group (CG) wounds treated with a solution of 0.9% sodium chloride and Veloderm(r) group (VG) wounds treated with a crystalline cellulose membrane. The rats were evaluated at different times over twenty-six days. RESULTS: Weight loss was observed in the animals from both groups in the early stages, with greater weight in the VG animals at the end. Times of predominant hypothermia, pink color of the wound in both groups over all time points, increased granulation tissue in the CG animals, the presence of slight oozing from the wound and feature in the VG animals, more serous exudation of the bloody feature, greater wound contraction and pain in the CG animals and an absence of pain and earlier complete wound healing in the VG rats were also observed. CONCLUSION: The crystalline cellulose membrane is effective in the treatment of wounds in rats, easy to use, protects and maintains the humidity of the wound, decreases pain, eases the visualization and control of the evolution of the lesion. (AU)

The use of amniotic membrane in the repair of duodenal wounds in Wistar rats / Uso da membrana amniótica no reparo de feridas duodenais em ratos Wistar

Purpose: In the search of a new material to repair duodenal wounds, a trial was conducted to assess the behavior of human amniotic membrane in the repair of the duodenal wall in rats. METHODS: Fifty Wistar rats weighing between 250 and 350g, male, were submitted to duodenotomy and randomly distributed into two groups. Group A (n=8) had no treatment and was used as the control group. In Group B (n=42) the duodenal wound was treated with a patch of human amniotic membrane. RESULTS: All animals in Group A died. In Group B no changes were observed with regards to death or the formation of duodenal fistula. All animals presented peritoneal adherences in the region on the duodenal wall repair and intestinal obstruction was observed in two animals. Healing of the duodenal wall in the region of the patch took place progressively as the post-operatory period increased, with regeneration of the mucosa and of the smooth muscle layer. CONCLUSION: From the clinical standpoint, the amniotic membrane proved to be a biological tissue which served as a temporary seal and allowed the wound to heal by second-intention, with re-establishment of the duodenal wall structure.(AU)

OBJETIVO: Na busca de um novo material para o reparo dos ferimentos duodenais, foi efetuado um estudo para avaliar o comportamento da membrana amniótica humana no reparo da parede duodenal em ratos. MÉTODOS: Foram utilizados 50 ratos Wistar, com peso entre 250 e 350g, machos, distribuídos, aleatoriamente, em dois grupos. Grupo A (n=8), submetido à duodenotomia sem tratamento, utilizados como controle. Grupo B (n=42), submetido a um remendo de membrana amniótica humana para tratamento de ferimento duodenal provocado. RESULTADOS: Todos os animais do grupo A foram a óbito. No grupo B não foram observadas alterações quanto a óbito ou formação de fístula duodenal. Observaram-se em todos os animais aderências peritoneais à região do reparo da parede do duodeno e obstrução intestinal em dois animais. O reparo da parede duodenal na área do remendo ocorreu de maneira progressiva com o aumento do período pós-operatório, com regeneração da mucosa e da camada muscular. CONCLUSÃO: A análise da membrana amniótica, do ponto de vista clínico, mostrou ser um tecido biológico que serviu para selar.(AU)

Membrana amniótica e pericárdio canino como curativos biológicos na preparação do leito receptor para enxertia cutânea autógena / Canine amniotic membrane and pericardium as a biological wound dressing in the preparation of the recipient site to autogenous skin graft

Avaliou-se o tecido de granulação formado com o uso de membrana amniótica e pericárdio canino como curativo biológico oclusivo em feridas cutâneas experimentais. Utilizaram-se 15 cães; em cada animal, foram produzidas três feridas na região torácica dorsal. As feridas craniais e caudais receberam aloenxerto de membrana amniótica e pericárdio canino, respectivamente, e as feridas intermediárias (controle) curativo não aderente. No sétimo dia, sobre todas as feridas, foram feitas auto-enxertias cutâneas. Foram realizadas avaliações clínicas, histológicas, incluindo contagem e diâmetro médio dos vasos sangüíneos do tecido de granulação bem como coleta de secreção das feridas e dos enxertos. Concluiu-se que a aplicação do curativo de membrana amniótica e de pericárdio canino sobre feridas cutâneas durante sete dias não estimula o aparecimento da granulação necessária para a aplicação à enxertia cutânea, podendo, apenas, ser utilizado como curativo biológico oclusivo.(AU)

The granulation tissue formed with the use of amniotic membrane (ME) and canine pericardium (PE) as an occlusive biological dressing in experimental cutaneous wounds was evaluated Fifteen dogs, having three wounds on the dorsal thoracic region of each (FA -amniotic, FC -control and FP-pericardium) were used. Clinical and histological evaluations were carried out, including counting and measuring the average diameter of the blood vessels of the granulation tissue, as well as bacteriological exams (swabs) of the wounds and the grafts. The granulation tissue formed after seven days of using the canine amniotic membrane showed a vascular histological aspect, being able to be favorable to the cutaneous grafting. It was concluded that the use of amniotic membrane and canine pericardium dressing on cutaneous wounds during seven days did not stimulate the presence of granulation necessary for the use of cutaneous grafting, however, it can be used as an occlusive biological graft.(AU)

Isolamento do ambiente de lesão óssea em diáfise femoral de cão por membrana biológica heterógena conservada em glicerina 98% / Isolation of the osseous lesion environment in dog femoral diaphysis by means of heterogeneous biological membrane conserved in 98% glycerin

Foram utilizados 12 cães separados em dois grupos de seis animais cada. Três animais de cada grupo foram submetidos a avaliação radiográfica e histopatológica aos 30 e 60 dias. Após acesso lateral adiáfise do fêmur esquerdo, foi confeccionado com auxílio de uma serra oscilatória, um defeito ósseo de 1,5 cm x 3 mm. O defeito ósseo foi envolvido por um segmento de pericárdio suíno conservado em glicerina 98%, que foi fixado ao redor do osso por sutura contínua com fio sintético inabsorvível. O fêmur contralateral foi utilizado como controle, sendo submetido ao mesmo procedimento, porém sem receber a membrana. A análise radiográfica e histológica demonstrou que a membrana atua promovendo o isolamento do coágulo circunjacente ao defeito, permitindo assim a formação de um calo ósseo menos exuberante. O emprego desta membrana não produziu alterações clinicas ou histológicas de rejeição(AU

Twelve dogs separated in two groups of six animals were used. From each group, three animals were submitted to radiographic and histopathologic assessment at 30 and 60 days. Subsequent to lateral access to the left femur diaphysis, a 1,5 cm x 3 mm bone defect was produced, with the aid of an oscillatory saw. The bone defect was wrapped with a segment of swine pericardium conserved in 98% glycerin, which was fixed around the bone by means of a continuous suture pattern with synthetic nonabsorbable suture material. The counterlateral femur was utilized as control, undergoing the same procedure but without receiving the membrane. The radiographic and histopathologic analysis evinced that the membrane acts promoting the isolation of the coagulum circumjacent to the defect, allowing a less exuberant callus formation. The use of this membrane did not generate clinical or histologic changes of rejection(AU)

Isolamento do ambiente de lesão óssea em diáfise femoral de cão por membrana biológica heterógena conservada em glicerina 98% / Isolation of the osseous lesion environment in dog femoral diaphysis by means of heterogeneous biological membrane conserved in 98% glycerin

Foram utilizados 12 cães separados em dois grupos de seis animais cada. Três animais de cada grupo foram submetidos a avaliação radiográfica e histopatológica aos 30 e 60 dias. Após acesso lateral adiáfise do fêmur esquerdo, foi confeccionado com auxílio de uma serra oscilatória, um defeito ósseo de 1,5 cm x 3 mm. O defeito ósseo foi envolvido por um segmento de pericárdio suíno conservado em glicerina 98%, que foi fixado ao redor do osso por sutura contínua com fio sintético inabsorvível. O fêmur contralateral foi utilizado como controle, sendo submetido ao mesmo procedimento, porém sem receber a membrana. A análise radiográfica e histológica demonstrou que a membrana atua promovendo o isolamento do coágulo circunjacente ao defeito, permitindo assim a formação de um calo ósseo menos exuberante. O emprego desta membrana não produziu alterações clinicas ou histológicas de rejeição

Twelve dogs separated in two groups of six animals were used. From each group, three animals were submitted to radiographic and histopathologic assessment at 30 and 60 days. Subsequent to lateral access to the left femur diaphysis, a 1,5 cm x 3 mm bone defect was produced, with the aid of an oscillatory saw. The bone defect was wrapped with a segment of swine pericardium conserved in 98% glycerin, which was fixed around the bone by means of a continuous suture pattern with synthetic nonabsorbable suture material. The counterlateral femur was utilized as control, undergoing the same procedure but without receiving the membrane. The radiographic and histopathologic analysis evinced that the membrane acts promoting the isolation of the coagulum circumjacent to the defect, allowing a less exuberant callus formation. The use of this membrane did not generate clinical or histologic changes of rejection