In vitro bacterial probiotic selection from Nannostomus beckfordi, an Amazon ornamental fish / [Seleção in vitro de bactérias probióticas do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi]

This study aimed to isolate and select in vitro bacteria with probiotic potential for the Amazon ornamental fish Nannostomus beckfordi. For isolate, twelve fish underwent surgery procedure to remove their intestinal tract, macerate and then inoculate in the plate petri containing de Man Rugosa Sharped Agar (MRS). After bacterial growth (48 hours at 35ºC), selected strains were inoculated in MRS broth and submitted to resistance test with NaCl (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) and bile salts (5% w/v). Inhibition test against pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae and Aeromonas Jandaei was also performed. Within the isolated strains group (23 strains), only six (S1, S2, S3, S4, S5 and S6) showed probiotic potential. Strains S1 and S6 showed the greater resistance for NaCl (0.5% and 1%) and pH (5 and 6), but only S1 obtained better results to resist the bile salts. Even against pathogenic bacteria, the S1 showed the best results with inhibition halos greater than 9 mm. In the end, this bacterial strain (S1) was identified as Enterococcus faecium 11037CHB. Thus, this is the first report regarding isolated autochthonous bacterium E. faecium with probiotic potential of N. beckfordi.

O objetivo deste estudo foi isolar e selecionar in vitro bactérias com potencial probiótico do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi. Para o isolamento, retirou-se o intestino de 12 espécimes, que foram macerados, homogeneizados e semeados em placa de petri contento Ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Posteriormente ao crescimento bacteriano (48 horas a 35ºC), as cepas selecionadas foram mantidas em caldo MRS e submetidas a testes de resistência a NaCl (0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e 2,5 e 3,0%), pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (5% p/v). O antagonismo foi realizado frente as bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae e Aeromonas jandaei. Das cepas isoladas (23 cepas), apenas seis (C1, C2, C3, C4, C5 e C6) apresentaram potencial probiótico. As cepas C1 e C6 tiveram maior resistência (p<0,05) para o NaCl (0,5 e 1%) e pH (5 a 6), na presença de sais biliares somente a C1 teve a melhor resistência de crescimento. Para o antagonismo frente as bactérias patogênicas, a C1 apresentou halo de inibição maior que 9 mm. Sendo esta cepa bactéria (C1) identificada como Enterococcus faecium 11037 CHB. Portanto, este é o primeiro relato do isolamento da bactéria autóctone E. faecium em N. beckfordi com potencial probiótico.

Diversity of metazoan parasites in fish Triportheus angulatus and Triportheus auritus living in sympatry in the Brazilian Amazon / Diversidade de parasitos metazoários em peixes Triportheus angulatus e Triportheus auritus vivendo em simpatria na Amazônia brasileira

The aim of this study was to compare the diversity and community structure of metazoan parasites in sympatric populations of Triportheus angulatus and Triportheus auritus in the Jari River basin, in the eastern Brazilian Amazon. All the specimens of T. angulatus and T. auritus examined were infected by Anacanthorus furculus, Anacanthorus pithophallus, Digenea gen. sp., Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus, Rhabdochona acuminata, Contracaecum sp., Ergasilus sp. and Acarina gen. sp. These parasites displayed aggregated or random dispersion. The parasite community in T. angulatus and T. auritus presented a similarity of 78%. The diversity indice and richness of parasite species were greater in T. auritus and there were differences in levels of host parasite infection for some infracommunities. Phyllodistomum spatula occurred only in T. angulatus, while metacercariae of Clinostomum marginatum and Digenea gen. sp.2 occurred only in T. auritus. The species richness of the parasites was influenced by host size, as well as the abundance of some parasite infracommunities. This is the first report of these parasites for T. angulatus and T. auritus, except for P. (S.) inopinatus and Contracaecum sp. for T. angulatus.(AU)

O objetivo deste estudo foi comparar a diversidade e comunidade de parasitos metazoários em populações simpátricas de Triportheus angulatus e Triportheus auritus da bacia do Rio Jari, na Amazônia oriental brasileira. Todos os espécimes de T. angulatus e T. auritus examinados estavam infectados por Anacanthorus furculus, Anacanthorus pithophallus, Digenea gen. sp., Procamallanus (Spirocamallanus) inopinatus, Rhabdochona acuminata, Contracaecum sp., Ergasilus sp. e Acarina gen. sp. Esses parasitos apresentaram dispersão agregada ou randômica. A comunidade de parasitos em T. angulatus e T. auritus apresentou uma similaridade de 78%. A diversidade e riqueza de espécies de parasitos foram maiores em T. auritus e houve diferenças nos níveis de infecção parasitária entre os hospedeiros para algumas infracomunidades. Phyllodistomum spatula ocorreu somente em T. angulatus, enquanto metacercárias de Clinostomum marginatum e Digenea gen. sp.2 ocorreram somente em T. auritus. A riqueza de espécies de parasitos foi influenciada pelo tamanho dos hospedeiros, bem como pela abundância de algumas infracomunidades de parasitos. Este é o primeiro relato desses parasitos para T. angulatus e T. auritus, exceto P. (S.) inopinatus e Contracaecum sp. para T. angulatus.(AU)

Qualidade higiênico-sanitária de tambaqui (Colossoma macropomum) comercializado na cidade de São Luís - MA / Sanitary hygienic quality of tambaqui (Colossoma macropomum) marketed in the city of São Luís - MA

A identificação das condições higiênico-sanitárias do pescado é de suma importância para a promoção da saúde e a qualidade de vida da população. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica e verificar o perfil de susceptibilidade a antimicrobianos das cepas isoladas de amostras de tambaqui (C. macropomum) comercializadas na cidade de São Luís, Maranhão. As 60 amostras de tambaqui, obtidas de supermercados e feiras livres, foram analisadas quanto à determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes; pesquisa de Escherichia coli; pesquisa de Aeromonas spp., e perfil de resistência antimicrobiana. Foi detectada uma elevada contagem de coliformes totais e termotolerantes, além de bactérias patogênicas, tais como: Aeromonas spp. em 56 (93,3%) e E. coli, em 13 (43,3%) das amostras analisadas. Em relação ao perfil de resistência antimicrobiana, os isolados de E. coli demonstraram baixos percentuais de resistência e as cepas de Aeromonas apresentaram elevados níveis de resistência aos antimicrobianos testados. Pode-se concluir que o tambaqui comercializado em São Luís − MA apresenta condições higiênico-sanitárias inadequadas para o consumo.

The identification of the hygienic-sanitary conditions of thTe fish is of is of the utmost importance for the promotion of health and life quality of the population, therefore the purpose of this study was to evaluate the microbiological quality and verify the susceptibility profile to antimicrobials of the isolated bacteria from tambaqui (C. macropomum) marketed in the city of São Luís, Maranhão. The 60 samples of tambaqui, obtained from supermarkets and free markets, were analyzed for the Most Probable Number (MPN) of total coliforms and thermotolerant; search for Escherichia coli; search for Aeromonas spp., and antimicrobial resistance profile. a high total coliform contagion and thermotolerant was detected, besides the presence of pathogenic bacteria, such as: Aeromonas spp. in 56 (93.3%) and E. coli, in 13 (43.3%) of the analyzed samples. Regarding the antimicrobial resistance profile, the isolated of E. coli showed low percentages of resistance and Aeromonas strains had high levels of antimicrobial resistance tested. It can be concluded that the tambaqui marketed in São Luís-MA presents hygienic-sanitary conditions that are inadequate for the consumer.

Mortalidade em pacus (Piaractus mesopotamicus) ocasionada por Pantoea agglomerans e Pseudomonas aeruginosa em tanque escavado / Mortality in pacus (Piaractus mesopotamicus) caused by Pantoea agglomerans and Pseudomonas aeruginosa in excavated tank

Background: Fish production in Brazil is growing strongly. This growth is being mainly driven by mainland aquaculture,which in 2017 produced 691.700 tons of fish. To improve production levels, fish farms have become increasingly intensive,but in these systems, the high fish densities in the ponds, the high feeding rate, and the high organic matter levels in thewater can lead the fish becoming stressed. This can cause bacterial proliferation and an increase in mortality. Most species of fish-causing bacteria are saprophytes. They are found naturally in the environment and are usually responsible forsecondary or opportunistic infections. This study reports on an outbreak of Pacus (Piaractus mesopotamicus) mortality atan intensive fish farm, in the municipality of Campo Grande, MS, Brazil, that used excavated tanks.Cases: The outbreak occurred at a fish farm in the municipality of Campo Grande, MS, during August, 2015. A total of200 pacus in two tanks died after they showed the following symptoms: lethargy, anorexia, increased mucus production,and disordered swimming and water surface searching. The temperature and dissolved oxygen were measured using adigital thermometer and an oximeter, respectively, and water transparency was measured with a Secchi disc. The pH wasmeasured using a portable digital potentiometer. The values for the water quality parameters analyzed during the mortalityperiod were temperature, 22.5oC; transparency, 20 cm; oxygen dissolved in the early morning 3 mg/L and at the end ofthe afternoon, 4.5 mg/L; pH 8.3; and toxic ammonia, 0.002 ppm. Five fishes were collected from the tank, immediatelycooled to 4°C, and sent to the Microbiology and Pathology Laboratories to perform the microbiological and pathologicallaboratory procedures. After the replication process, the slow glucose fermentation characteristics in MacConkey Agar andother biochemical tests showed that the lactose non-fermenter bacterium was Pseudomonas...

Mortalidade em pacus (Piaractus mesopotamicus) ocasionada por Pantoea agglomerans e Pseudomonas aeruginosa em tanque escavado / Mortality in pacus (Piaractus mesopotamicus) caused by Pantoea agglomerans and Pseudomonas aeruginosa in excavated tank

Background: Fish production in Brazil is growing strongly. This growth is being mainly driven by mainland aquaculture,which in 2017 produced 691.700 tons of fish. To improve production levels, fish farms have become increasingly intensive,but in these systems, the high fish densities in the ponds, the high feeding rate, and the high organic matter levels in thewater can lead the fish becoming stressed. This can cause bacterial proliferation and an increase in mortality. Most species of fish-causing bacteria are saprophytes. They are found naturally in the environment and are usually responsible forsecondary or opportunistic infections. This study reports on an outbreak of Pacus (Piaractus mesopotamicus) mortality atan intensive fish farm, in the municipality of Campo Grande, MS, Brazil, that used excavated tanks.Cases: The outbreak occurred at a fish farm in the municipality of Campo Grande, MS, during August, 2015. A total of200 pacus in two tanks died after they showed the following symptoms: lethargy, anorexia, increased mucus production,and disordered swimming and water surface searching. The temperature and dissolved oxygen were measured using adigital thermometer and an oximeter, respectively, and water transparency was measured with a Secchi disc. The pH wasmeasured using a portable digital potentiometer. The values for the water quality parameters analyzed during the mortalityperiod were temperature, 22.5oC; transparency, 20 cm; oxygen dissolved in the early morning 3 mg/L and at the end ofthe afternoon, 4.5 mg/L; pH 8.3; and toxic ammonia, 0.002 ppm. Five fishes were collected from the tank, immediatelycooled to 4°C, and sent to the Microbiology and Pathology Laboratories to perform the microbiological and pathologicallaboratory procedures. After the replication process, the slow glucose fermentation characteristics in MacConkey Agar andother biochemical tests showed that the lactose non-fermenter bacterium was Pseudomonas...(AU)

Qualidade higiênico-sanitária de tambaqui (Colossoma macropomum) comercializado na cidade de São Luís - MA / Sanitary hygienic quality of tambaqui (Colossoma macropomum) marketed in the city of São Luís - MA

A identificação das condições higiênico-sanitárias do pescado é de suma importância para a promoção da saúde e a qualidade de vida da população. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica e verificar o perfil de susceptibilidade a antimicrobianos das cepas isoladas de amostras de tambaqui (C. macropomum) comercializadas na cidade de São Luís, Maranhão. As 60 amostras de tambaqui, obtidas de supermercados e feiras livres, foram analisadas quanto à determinação do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais e termotolerantes; pesquisa de Escherichia coli; pesquisa de Aeromonas spp., e perfil de resistência antimicrobiana. Foi detectada uma elevada contagem de coliformes totais e termotolerantes, além de bactérias patogênicas, tais como: Aeromonas spp. em 56 (93,3%) e E. coli, em 13 (43,3%) das amostras analisadas. Em relação ao perfil de resistência antimicrobiana, os isolados de E. coli demonstraram baixos percentuais de resistência e as cepas de Aeromonas apresentaram elevados níveis de resistência aos antimicrobianos testados. Pode-se concluir que o tambaqui comercializado em São Luís − MA apresenta condições higiênico-sanitárias inadequadas para o consumo.(AU)

The identification of the hygienic-sanitary conditions of thTe fish is of is of the utmost importance for the promotion of health and life quality of the population, therefore the purpose of this study was to evaluate the microbiological quality and verify the susceptibility profile to antimicrobials of the isolated bacteria from tambaqui (C. macropomum) marketed in the city of São Luís, Maranhão. The 60 samples of tambaqui, obtained from supermarkets and free markets, were analyzed for the Most Probable Number (MPN) of total coliforms and thermotolerant; search for Escherichia coli; search for Aeromonas spp., and antimicrobial resistance profile. a high total coliform contagion and thermotolerant was detected, besides the presence of pathogenic bacteria, such as: Aeromonas spp. in 56 (93.3%) and E. coli, in 13 (43.3%) of the analyzed samples. Regarding the antimicrobial resistance profile, the isolated of E. coli showed low percentages of resistance and Aeromonas strains had high levels of antimicrobial resistance tested. It can be concluded that the tambaqui marketed in São Luís-MA presents hygienic-sanitary conditions that are inadequate for the consumer.(AU)

Qualidade microbiológica de tambaqui e pintado produzidos em viveiros escavados / Microbiological quality of tambaqui and pintado produced in excavated tanks

O presente trabalho teve como objetivo avaliar e quantificar S. aureus e presença ou ausência de salmonela em peixes frescos nativos provenientes de viveiros escavados localizados na Região Norte. Foram analisados 4 lotes de pintado e 4 lotes de tambaqui, com 4 amostras (peixes) em cada lote, onde o lote representava uma despesca em tanque escavado. As análises foram realizadas com kits da 3M mundialmente utilizados e recomendados pela Association of Official Analytical Chemists (AOAC). Os resultados demonstraram presença de salmonella em todos os lotes de tambaqui e em três lotes de pintado. Quanto à contagem de S. aureus, apenas uma amostra (peixe) apresentou acima do estabelecido, da espécie pintado.(AU)

Qualidade microbiológica de tambaqui e pintado produzidos em viveiros escavados / Microbiological quality of tambaqui and pintado produced in excavated tanks

O presente trabalho teve como objetivo avaliar e quantificar S. aureus e presença ou ausência de salmonela em peixes frescos nativos provenientes de viveiros escavados localizados na Região Norte. Foram analisados 4 lotes de pintado e 4 lotes de tambaqui, com 4 amostras (peixes) em cada lote, onde o lote representava uma despesca em tanque escavado. As análises foram realizadas com kits da 3M mundialmente utilizados e recomendados pela Association of Official Analytical Chemists (AOAC). Os resultados demonstraram presença de salmonella em todos os lotes de tambaqui e em três lotes de pintado. Quanto à contagem de S. aureus, apenas uma amostra (peixe) apresentou acima do estabelecido, da espécie pintado.

Metazoan parasites of the lambari Astyanax altiparanae collected in the Batalha River, State of São Paulo, Brazil / Metazoários parasitos do lambari Astyanax altiparanae coletados no rio Batalha, estado de São Paulo, Brasil

Here we conduct a qualitative and quantitative analysis of ectoparasites and endoparasites of Astyanax altiparanae (Garutti & Britski, 2000), popularly known as lambari-do-rabo-amarelo collected from the Batalha River, State of São Paulo, Brazil. Of the 67 specimens of A. altiparanae, 52 were parasitized by at least one parasitic metazoan species. The following metazoan parasites were found: Monogenea, Digenea and Nematoda. The monogenetic Diaphorocleidus sp. was the predominant species, presenting a higher frequency of dominance, prevalence and mean abundance. However, the monogenean Trinigyrus sp. was the one with the highest mean intensity value. All parasites showed aggregate distribution pattern. The parasitic community of A. altiparanae was characterized by low diversity, low richness and low uniformity. The digenetic Rhipidocotyle santanaensis is recorded for the first time in A. altiparanae, in the same way, this parasite is being registered for the first time in the Batalha River.(AU)

Foi realizada uma análise qualitativa e quantitativa de ectoparasitas e endoparasitas de Astyanax altiparanae (Garutti & Britski, 2000), popularmente conhecido como lambari-do-rabo-amarelo coletados no rio Batalha, estado de São Paulo, Brasil. Dos 67 espécimes de A. altiparanae, 52 estavam parasitados por pelo menos uma espécie de metazoário parasito. Foram encontrados os seguintes metazoários parasitos: Monogenea, Digenea e Nematoda. O monogenético Diaphorocleidus sp. foi a espécie predominante, apresentando maior frequência de dominância, prevalência e abundância média. Porém o monogenético Trinigyrus sp. foi o que apresentou maior valor de intensidade média. Todos os parasitos mostraram padrão de distribuição agregado. A comunidade parasitária de A. altiparanae foi caracterizada pela baixa diversidade, baixa riqueza e baixa uniformidade. Registra-se pela primeira vez o digenético Rhipidocotyle santanaensis em A. altiparanae, da mesma forma, este parasito está sendo registrado pela primeira vez no rio Batalha.(AU)

Toxicity of Lippia origanoides essential oil in tambaqui (Colossoma macropomum) and its effect against Aeromonas hydrophila / Toxicidade do óleo essencial de Lippia origanoides em tambaqui (Colossoma macropomum) e seu efeito frente à Aeromonas hydrophila

The study evaluated the toxicity of Lippia origanoides essential oil (EO) in tambaqui (Colossoma macropomum) and its in vivo activity against Aeromonas hydrophila. Toxicity was tested by tambaqui exposure to 0, 5, 10, 12.5, 15, 17.5 and 20 mg L-1 of L. origanoides EO for 96 h. The mean lethal concentration (LC50) was 15.2 mg L-1. After tambaqui exposure to sublethal concentrations of L. origanoides EO (7.6 and 11.4 mg L-1) for 96 h, only the 7.6 mg L-1 level caused minor hematologic and biochemical changes that include increase in mean corpuscular volume and decrease in total protein, which did not compromise fish homeostasis. Tambaqui experimentally infected with A. hydrophila had higher survival rate (79.2%) after therapeutic bath with 10 mg L-1 L. origanoides EO. Therefore, tambaqui exhibits moderate tolerance to L. origanoides EO, and this oil has potential for use in the treatment of tambaqui infected with A. hydrophila.(AU)

O presente estudo avaliou a toxicidade do óleo essencial de Lippia origanoides em tambaqui (Colossoma macropomum) e sua atividade in vivo frente à Aeromonas hydrophila. Para os testes de toxicidade, tambaquis foram expostos a 0, 5, 10, 12,5, 15, 17,5 e 20 mg L-1 do óleo essencial de L. origanoides por 96 horas. A concentração média letal (CL50) foi estimada em 15,2 mg L-1. Após exposição dos tambaquis às concentrações subletais de L. origanoides (7,6 e 11,4 mg L-1) por 96 horas, poucas alterações hematológicas e bioquímicas como aumento no volume corpuscular médio e decréscimo nos valores de proteínas totais foram observadas na concentração de 7,6 mg L-1, o que não compromete a homeostase orgânica dos peixes. Tambaquis experimentalmente infectados com A. hydrophila alcançaram maior taxa de sobrevivência (79,2%) após banho terapêutico com 10 mg L-1 do óleo essencial de L. origanoides. Portanto, o tambaqui exibe moderada tolerância ao óleo essencial de L. origanoides e este óleo tem potencial para uso no tratamento de tambaqui (C. macropomum) infectado com A. hydrophila.(AU)

Toxicity of Lippia origanoides essential oil in tambaqui (Colossoma macropomum) and its effect against Aeromonas hydrophila / Toxicidade do óleo essencial de Lippia origanoides em tambaqui (Colossoma macropomum) e seu efeito frente à Aeromonas hydrophila

The study evaluated the toxicity of Lippia origanoides essential oil (EO) in tambaqui (Colossoma macropomum) and its in vivo activity against Aeromonas hydrophila. Toxicity was tested by tambaqui exposure to 0, 5, 10, 12.5, 15, 17.5 and 20 mg L-1 of L. origanoides EO for 96 h. The mean lethal concentration (LC50) was 15.2 mg L-1. After tambaqui exposure to sublethal concentrations of L. origanoides EO (7.6 and 11.4 mg L-1) for 96 h, only the 7.6 mg L-1 level caused minor hematologic and biochemical changes that include increase in mean corpuscular volume and decrease in total protein, which did not compromise fish homeostasis. Tambaqui experimentally infected with A. hydrophila had higher survival rate (79.2%) after therapeutic bath with 10 mg L-1 L. origanoides EO. Therefore, tambaqui exhibits moderate tolerance to L. origanoides EO, and this oil has potential for use in the treatment of tambaqui infected with A. hydrophila.

O presente estudo avaliou a toxicidade do óleo essencial de Lippia origanoides em tambaqui (Colossoma macropomum) e sua atividade in vivo frente à Aeromonas hydrophila. Para os testes de toxicidade, tambaquis foram expostos a 0, 5, 10, 12,5, 15, 17,5 e 20 mg L-1 do óleo essencial de L. origanoides por 96 horas. A concentração média letal (CL50) foi estimada em 15,2 mg L-1. Após exposição dos tambaquis às concentrações subletais de L. origanoides (7,6 e 11,4 mg L-1) por 96 horas, poucas alterações hematológicas e bioquímicas como aumento no volume corpuscular médio e decréscimo nos valores de proteínas totais foram observadas na concentração de 7,6 mg L-1, o que não compromete a homeostase orgânica dos peixes. Tambaquis experimentalmente infectados com A. hydrophila alcançaram maior taxa de sobrevivência (79,2%) após banho terapêutico com 10 mg L-1 do óleo essencial de L. origanoides. Portanto, o tambaqui exibe moderada tolerância ao óleo essencial de L. origanoides e este óleo tem potencial para uso no tratamento de tambaqui (C. macropomum) infectado com A. hydrophila.

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.

Isolation of Saprolegnia aenigmatica oomycetes and protocol for experimental infection of pacu (Piaractus mesopotamicus) / Isolamento do oomiceto Saprolegnia aenigmatica e protocolo de infecção experimental em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Successful disease treatment depends on molecular studies under indoor conditions with experimental infection protocols that facilitate understanding the disease and the drug`s efficacy. The internal transcribed spacer (ITS) region was sequenced from three isolates, which were identified as Saprolegnia aenigmatica. Subsequently, healthy fish were immunosuppressed with dexamethasone (1.2 mg kg-1) and descaled to the skin using a sharp scalpel. These individuals were isolated in individual aquariums maintained at 22°C. Individuals in one group were subcutaneously inoculated with 9,000 zoospores (DDZ treatment), a second group was exposed to oomycetes in water with three colonized baits (DDB), a third group was maintained in water without zoospores (DD), and a control group (C) consisted of healthy animals. After 48 and 96 hours, two animals from each group were euthanized for fungal reisolation. The fish from groups DD and C did not show clinical signs, and no oomycetes were isolated. The animals from the DDZ and DDB groups showed cotton-wool-like masses on the skin, and S. aenigmatica was re-isolated. Thus, for infection using zoospores or baits parasitized by S. aenigmatica, an immunosuppressor (dexamethasone) and a sharp scalpel can be used effectively to establish an experimental infection in P. mesopotamicus.(AU)

O sucesso do tratamento de uma enfermidade depende do estudo de moléculas em condições de laboratório por meio de protocolos de infecção experimental que viabilizam a compreensão da doença e da eficácia dos fármacos. Pela sequência ITS foram identificadas três cepas de Saprolegnia aenigmatica. Dessa forma, pacus sadios foram submetidos à imunossupressão com dexametasona (1,2 mg kg-1), esfoliados com auxílio de bisturi e distribuídos em aquários a 22ºC. Após este procedimento, um grupo de animais foi inoculado com 9.000 zoósporos/peixe subcutâneo (DEZ), a outro foram adicionadas três iscas colonizadas com o oomiceto na água (DEI), um terceiro grupo foi mantido sem contato com o oomiceto (DE) e um quarto grupo, de animais sadios, representaram o controle (C). Após 48 e 96h deste procedimento, foram eutanaziados animais de cada grupo para reisolamento. Os animais do grupo DE e C não apresentaram sinais clínicos e não foi reisolado o oomiceto. Porém, tanto os animais do grupo DEZ quanto como os animais do grupo DEI apresentaram micélio branco na pele e foi reisolado Saprolegnia aenigmatica. Assim, a infecção com zoósporos ou com iscas colonizadas por S. aenigmatica, com o uso de dexametasona e abrasivo epitelial são formas eficazes de infecção experimental em P. mesopotamicus.(AU)

Selection of autochtone probiotic for Astyanax bimaculatus / Seleção de probiótico autóctone para Astyanax bimaculatus

This study aimed to isolate native lactic acid bacteria of yellow tail lambari (Astyanax bimaculatus) and evaluate their effect on host microbiota and gut morphology, as well as survival after experimental challenge. The isolated bacterial strains were evaluated for their inhibition against pathogenic bacterial strains in vitro, and the strain with highest inhibitory ability was molecularly identified as Lactobacillus spp. For in vivo testing, eighty fish were distributed in ten tanks equipped with a recirculation system. The experimental units were divided into two treatments: fish fed with Lactobacillus spp. supplement and fish fed an unsupplemented diet (control). After 30 days, guts from three fish from each experimental unit were pooled for microbiological and histological analysis. The other five fish were inoculated with 2.1x104CFU.mL-1 of Aeromonas hydrophila to evaluate survival after 24h. Lambaris fed with the probiotic diet had a lower count of Vibrios spp., Pseudomonas spp. and Staphylococcus spp., and a higher count of lactic acid bacteria compared to control treatment, as well as, increased length, width and perimeter of intestinal villi, as well as higher survival rate (16.2%) after experimental challenge compared to the unsupplemented group. The results show that the Lactobacillus spp. used has effect probiotic for yellow tail lambari.(AU)

Este estudo objetivou isolar bactéria ácido-láctica nativa do lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax bimaculatus) e seu efeito na microbiota e morfologia do trato digestório do hospedeiro, assim como a sobrevivência após um desafio experimental. As bactérias isoladas foram avaliadas quanto a suas inibições in vitro contra bactérias patogênicas; a cepa com maior capacidade de inibição foi identificada como Lactobacillus spp. Para o teste in vivo, 80 peixes foram distribuídos em 10 tanques equipados com sistema de recirculação. As unidades experimentais foram divididas em dois tratamentos: peixes alimentados com Lactobacillus spp. suplementado e peixes alimentados com dieta não suplementada (controle). Após 30 dias, foram coletados o trato intestinal de três peixes, por unidade experimental, para análises microbiológicas e histológicas. Outros cinco peixes foram inoculados com 2,1x104UFCmL-1 de Aeromonas hydrophila para se avaliar a sobrevivência após 24h. Lambaris alimentados com probiótico apresentaram menor contagem de Vibrios spp., Pseudomonas spp. e Staphylococcus spp., e maior de bactérias ácido-lácticas quando comparados com o tratamento controle, assim como aumento do comprimento, da largura e do perímetro das vilosidades intestinais e maior taxa de sobrevivência (16,2%,) após desafio experimental, em comparação com o grupo sem suplementação. Os resultados mostram que o Lactobacillus spp. possui efeito probiótico para o lambari-do-rabo-amarelo.(AU)

Selection of autochtone probiotic for Astyanax bimaculatus / Seleção de probiótico autóctone para Astyanax bimaculatus

This study aimed to isolate native lactic acid bacteria of yellow tail lambari (Astyanax bimaculatus) and evaluate their effect on host microbiota and gut morphology, as well as survival after experimental challenge. The isolated bacterial strains were evaluated for their inhibition against pathogenic bacterial strains in vitro, and the strain with highest inhibitory ability was molecularly identified as Lactobacillus spp. For in vivo testing, eighty fish were distributed in ten tanks equipped with a recirculation system. The experimental units were divided into two treatments: fish fed with Lactobacillus spp. supplement and fish fed an unsupplemented diet (control). After 30 days, guts from three fish from each experimental unit were pooled for microbiological and histological analysis. The other five fish were inoculated with 2.1x104CFU.mL-1 of Aeromonas hydrophila to evaluate survival after 24h. Lambaris fed with the probiotic diet had a lower count of Vibrios spp., Pseudomonas spp. and Staphylococcus spp., and a higher count of lactic acid bacteria compared to control treatment, as well as, increased length, width and perimeter of intestinal villi, as well as higher survival rate (16.2%) after experimental challenge compared to the unsupplemented group. The results show that the Lactobacillus spp. used has effect probiotic for yellow tail lambari.(AU)

Este estudo objetivou isolar bactéria ácido-láctica nativa do lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax bimaculatus) e seu efeito na microbiota e morfologia do trato digestório do hospedeiro, assim como a sobrevivência após um desafio experimental. As bactérias isoladas foram avaliadas quanto a suas inibições in vitro contra bactérias patogênicas; a cepa com maior capacidade de inibição foi identificada como Lactobacillus spp. Para o teste in vivo, 80 peixes foram distribuídos em 10 tanques equipados com sistema de recirculação. As unidades experimentais foram divididas em dois tratamentos: peixes alimentados com Lactobacillus spp. suplementado e peixes alimentados com dieta não suplementada (controle). Após 30 dias, foram coletados o trato intestinal de três peixes, por unidade experimental, para análises microbiológicas e histológicas. Outros cinco peixes foram inoculados com 2,1x104UFCmL-1 de Aeromonas hydrophila para se avaliar a sobrevivência após 24h. Lambaris alimentados com probiótico apresentaram menor contagem de Vibrios spp., Pseudomonas spp. e Staphylococcus spp., e maior de bactérias ácido-lácticas quando comparados com o tratamento controle, assim como aumento do comprimento, da largura e do perímetro das vilosidades intestinais e maior taxa de sobrevivência (16,2%,) após desafio experimental, em comparação com o grupo sem suplementação. Os resultados mostram que o Lactobacillus spp. possui efeito probiótico para o lambari-do-rabo-amarelo.(AU)