The Rv2807 target gene: a determining factor to directly detect Mycobacterium bovis from suspected bovine tuberculosis lesions / Gene alvo Rv2807: um fator determinante para detectar Mycobacterium bovis diretamente de lesões suspeitas de tuberculose bovina

Bovine tuberculosis (bTB) is a zoonosis caused by Mycobacterium bovis, a species belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex (MTC) group. Direct bTB diagnosis from suggestive lesions can be performed by nested q-PCR targeting the Rv2807 gene present in the MTC group, as well as the TbD1 gene, present in M. bovis. In this context, the aim of the present study was to assess the importance of considering positive MTC results for the Rv2807 target gene obtained through the nested real time polymerase chain reaction (nested q-PCR) applied to samples obtained directly from suspected bTB lesions. A total of 174 samples of suggestive bTB caseous lesions were obtained during cattle slaughter in slaughterhouses in the state of Mato Grosso, Brazil. DNA was extracted from the lesions and nested q-PCR was performed to detect both MTC and M. bovis. Both samples positive for the Rv2807 (41/174) and TbD1 (29/174) were submitted to bacterial culturing (23/41), and the DNA of the isolates (23) was extracted and submitted again to nested q-PCR. The Rv2807 gene (MTC) was previously amplified by nested q-PCR directly from the lesions, although the TbD1 gene specific for M. bovis was not amplified previously in four of the successfully isolated samples (4/23), only following isolation, and only the Rv2807 gene was amplified before and after isolation. In conclusion, the target gene Rv2807(MTC) exhibited higher positivity in the analyzed samples compared to the TbD1 gene (M. bovis).

A tuberculose bovina (bTB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, uma espécie pertencente ao grupo do complexo Mycobacterium tuberculosis (MTC). O diagnóstico direto de bTB a partir de lesões sugestivas pode ser realizado por nested q-PCR visando o gene Rv2807 presente no grupo MTC, bem como o gene TbD1, presente em M. bovis. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a importância de considerar os resultados de MTC positivos para o gene alvo Rv2807 obtidos através da reação em cadeia da polimerase nested real time (nested q-PCR) aplicada a amostras obtidas diretamente de lesões suspeitas de bTB. Um total de 174 amostras de lesões caseosas sugestivas de bTB foram obtidas durante o abate de bovinos em frigoríficos do estado de Mato Grosso, Brasil. DNA foi extraído das lesões e nested q-PCR foi realizado para detectar tanto MTC quanto M. bovis. Ambas as amostras positivas para Rv2807 (41/174) e TbD1 (29/174) foram submetidas a cultura bacteriana (23/41), e o DNA dos isolados (23) foi extraído e submetido novamente à nested q-PCR. O gene Rv2807 (MTC) foi previamente amplificado por nested q-PCR diretamente das lesões, embora o gene TbD1 específico para M. bovis não tenha sido amplificado anteriormente em quatro das amostras isoladas com sucesso (4/23), apenas após o isolamento, e apenas o gene Rv2807 foi amplificado antes e após o isolamento. Em conclusão, o gene alvo Rv2807 (MTC) apresentou maior positividade nas amostras analisadas em relação ao gene TbD1 (M. bovis).

Indirect ELISA as a complementary diagnostic method of bovine tuberculosis / ELISA indreto como método complementar de diagnóstico da tuberculose bovina

Bovine tuberculosis is an economic and health problem, requiring precise diagnostic methods for its control and eradication. The aim of this study was to evaluate the performance of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the diagnosis of bovine tuberculosis. A total of 1,644 cattle from eight dairy herds were evaluated using the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Three of the herds had no recent tuberculosis infection, and the other five had shown positive results in a previous tuberculin test. For the serological diagnosis of tuberculosis, a commercial ELISA antibody test kit for Mycobacterium bovis was used. Serum samples from 846 cattle from the eight herds were evaluated using ELISA for M. bovis. Animals that were positive based on either CCTT or ELISA for M. bovis or both were sent to slaughter. Samples of their lungs, livers, and lymph nodes were collected and stored under refrigeration for microbiological culture and subsequent confirmation by polymerase chain reaction. Samples from the same tissues were also fixed with 10% formaldehyde in bottles for histopathological examination and stained with hematoxylin and eosin (HE). Of the 1,644 cattle, 61 were considered positive and 65 inconclusive based on CCTT. Retesting of the inconclusive samples identified an additional 19 positive cases, totaling 80 (4.8%) CCTT-positive animals from five herds. ELISA for M. bovis identified 4.2% (36/846) positive cattle, of which 35 were considered negative and one inconclusive based on CCTT. Of the 36 positive cases identified by ELISA for M. bovis, 27 were euthanized, 11% (3/27) showed suggestive lesions of tuberculosis on macroscopic examination, and two were confirmed by histological, microbiological, and PCR methods. The weak association of ELISA for M. bovis with the results obtained by macroscopic, histological, and microbiological isolation indicates the fragility of ELISA performance in field conditions. Therefore, it is suggested that its use as a complementary method for herd sanitation be based on the local epidemiological situation.

A tuberculose bovina é um problema econômico mundial e de saúde, que requer métodos de diagnóstico precisos para controle e erradicação. Objetivou-se com este estudo avaliar o desempenho de um teste comercial de ELISA no diagnóstico da tuberculose bovina. Foram avaliados pelo teste cervical comparativo (TCC) 1644 bovinos, provenientes de oito rebanhos de exploração leiteira, sendo três deles sem histórico recente da doença, e outros cinco com resultados positivos no último exame de tuberculinização. Para o diagnóstico sorológico da tuberculose utilizou-se um kit comercial de ELISA Mycobacterium bovis antibody test (ELISA M. bovis). Amostras de soro sanguíneo de 846 bovinos provenientes dos mesmos rebanhos foram também avaliadas no ELISA M. bovis. Os bovinos positivos no TCC e/ou ELISA M. bovis foram encaminhados para o abate sanitário. Dos positivos no ELISA para M. bovis foi realizado o exame macroscópico das carcaças e classificação das mesmas em: com presença ou ausência de lesões. Amostras de pulmão, fígado, e linfonodos, foram colhidas em duplicata para realização dos exames de cultivo microbiológico com posterior confirmação por PCR, e exame histopatológico com coloração de hematoxilina e eosina (HE). Dos 1,644 bovinos, 61 foram considerados positivos e 65 inconclusivos no TCC. O reteste dos inconclusivos identificou mais 19 positivos. No total, 80 (4,8%) bovinos positivos no TCC, provenientes de 5 rebanhos foram encaminhados para abate. O ELISA para M. bovis identificou 4,2% (36/846) de bovinos positivos, sendo 36 considerados negativos e um inconclusivo no exame de tuberculinização. Dos positivos no ELISA para M. bovis, 27 foram eutanasiados, e no exame macroscópico das carcaças 11% (3/27) dos animais apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, e em apenas dois houve confirmação da doença pelos métodos histológico, microbiológico e PCR. A baixa associação dos resultados obtidos no ELISA para M. bovis com os exames macroscópico, histológico e isolamento microbiológico apontam para a fragilidade do desempenho do ELISA para o diagnóstico de tuberculose. Sugere-se assim que seu uso como método complementar para saneamento de rebanhos, seja adotado com cautela e considere a situação epidemiológica local.

Isolation and molecular identification of Mycobacterium bovis in tissue lesions of cattle slaughtered in slaughterhouses located in the State of Ceará / [Isolamento e identificação molecular de Mycobacterium bovis em lesões teciduais de bovinos abatidos em matadouros-frigoríficos localizados no estado do Ceará]

The objective of this research was to identify Mycobacterium bovis in lesions suggestive of tuberculosis in bovine carcasses in the State of Ceará, by means of bacteriological and molecular diagnostic tests. Between August 2017 and January 2019, the State inspection service (SIE) inspected 59,512 cattle, of which 7.4% (44 / 59,512) presented suggestive lesions. Of these animals, 68 samples were sent, of which 4.5% (31/68) located in the lung, 2.9% (20/68) in lymph nodes, 2.0% (14/68) in the liver, and 0.4% in the carcass (3/68). When performing bacteriological isolation, 15.9% (7/44) of bovines showed colony growth in the samples. The smears of the isolates were submitted to Zielh-Neelsen staining and all confirmed acid-fast bacilli. The polymerase chain reaction identified all isolates 100% (7/7) as M. bovis. The association of diagnostic techniques allowed to identify the presence of the agent in the State and the molecular analysis proved to be a beneficial technique in the monitoring of bovine tuberculosis and can be used as an auxiliary method in the bovine tuberculosis control and eradication program in the State of Ceará.

O objetivo do trabalho foi pesquisar Mycobacterium bovis em lesões sugestivas de tuberculose nas carcaças de bovinos no estado do Ceará, por meio dos testes de diagnóstico bacteriológico e molecular. Entre agosto de 2017 e janeiro de 2019, o Serviço de Inspeção Estadual (SIE) inspecionou 59.512 bovinos; destes, 7,4% (44/59.512) apesentaram lesões sugestivas. Desses animais foram enviadas 68 amostras, das quais 4,5% (31/68) estavam localizadas no pulmão, 2,9% (20/68) nos linfonodos, 2,0% (14/68) no fígado e 0,4% (3/68) na carcaça. Ao realizar o isolamento bacteriológico, 15,9% (7/44) dos bovinos evidenciaram crescimento de colônias nas amostras. Os esfregaços dos isolados foram submetidos à coloração de Zielh-Neelsen e todos eles confirmaram bacilo álcool-ácido resistente. A reação em cadeia da polimerase identificou todos os isolados, 100% (7/7), como M. bovis. A associação das técnicas de diagnóstico permitiu identificar a presença do agente no estado, e a análise molecular demonstrou ser uma técnica benéfica no monitoramento da tuberculose bovina, podendo ser utilizada como um método auxiliar no programa de controle e erradicação da tuberculose bovina no estado do Ceará.

Frequência de lesões sugestivas de tuberculose em bovinos abatidos no estado do Espírito Santo e perdas econômicas aos produtores / Frequency of suggestive lesions of tuberculosis in bovine slaughtered in the state of Espírito Santo and economic losses for farmers

A bovinocultura de corte tem papel fundamental na economia do Brasil, que atualmente é um dos maiores produtores, consumidores e exportadores de carne bovina, e consequentemente se faz necessária a inspeção sanitária desses animais abatidos no país. A legislação vigente determina que quando as carcaças possuem indicativos de doenças, como a tuberculose bovina, podem ser condenadas ou aproveitadas condicionalmente. A tuberculose bovina é uma zoonose crônica causada pelo bacilo Mycobacterium bovis que carece de estudos para estabelecer a sua frequência em frigoríficos no país, bem como as consequentes perdas econômicas aos pecuaristas decorrentes da condenação de carcaças e vísceras. Assim, esse trabalho objetivou analisar a frequência de condenação de carcaças de bovinos do Estado do Espírito Santo, em um frigorífico que condena todos os casos de tuberculose, durante os anos de 2019 a 2021, e estimar as perdas econômicas aos produtores. Verificou-se que entre os 156.800 animais abatidos, 120 (0,076%) apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, o que ocasionou uma perda econômica de R$ 461.160,00 (U$ 85.338,40). Conclui-se que a tuberculose é endêmica e responsável por importantes perdas econômicas para a cadeia produtiva da carne nesse estado. Também se destacou a importância da inspeção sanitária em abatedouros-frigoríficos de bovinos para reduzir os riscos à saúde pública.

Cattle farming has a fundamental role in the economy of Brazil, which is currently one of the largest producers, consumers, and exporters of beef, and consequently it is necessary to inspect meat from cattle slaughtered in the country. The current legislation establishes that when carcasses have signs of diseases, such as bovine tuberculosis, should be condemned or conditionally used. Bovine tuberculosis is a chronic zoonosis caused by Mycobacterium bovis that requires epidemiological studies to establish its frequency in abattoirs and the economic losses due condemnation of viscera and carcasses for beef farmers. Thus, this study aimed to analyze the frequency of condemnation of bovine carcasses slaughtered in the state of Espírito Santo, in an abattoir that condemned all cases of tuberculosis, during the years 2019 to 2021, and to estimate the economic losses to farmers. Among the 156,800 animals slaughtered, 120 (0.076%) had lesions suggestive of tuberculosis, which caused an economic loss of U$ 85,338.40 (R$ 461,160.00). Bovine tuberculosis is endemic and responsible for important economic losses to the meat production chain in this state. Additionally, the importance of inspecting beef in abattoirs to reduce the risks for public health was highlighted.

Bovine tuberculosis in safari park in Brazil / Tuberculose bovina em parque safári no Brasil

Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the "Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis" (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.(AU)

Bovine tuberculosis in safari park in Brazil / Tuberculose bovina em parque safári no Brasil

Bovine tuberculosis (bTB) is an infectious disease caused by Mycobacterium bovis, affecting domestic animals, wild animals and humans. In captivity, for wild animals, bTB represents a risk to animal keepers and zoo visitors, in addition to the possibility of spreading the infection to domestic animals or through the trade of infected wild animals. Sambar (Cervus unicolor), red deer (Cervus elaphus) and fallow deer (Dama dama) from a safari park in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, showed a clinical condition of dyspnea and weight loss. Some animals died and showed lesions suggestive of tuberculosis (LST), which were confirmed by histopathology. After the interdiction of the safari park by the state veterinary authorities, 281 deer were euthanized with the authorization of the "Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis" (IBAMA). Retropharyngeal and submandibular lymph nodes and viscera were collected from 21 animals, which were grown in Stonebrink medium for up to 90 days. After DNA extraction from the bacterial colonies, PCR was performed for targets flanking the region of differentiation 4 (RD4). Of the 21 samples, 14 (66.7%) presented LST with a granulomatous appearance, a whitish coloration, and caseous or calcified consistency, and seven samples (33.3%), showed no lesions. In the culture of 14 samples with LST, 13 (92.8%) presented bacterial growth compatible with M. bovis. In the cultivation of the seven samples without LST, four (57.1%) presented colonies compatible with M. bovis. PCR and DNA sequencing of the PCR amplicons detected as positive all the 17 (100%) bacteriological cultures suggestive of M. bovis, thus confirming the outbreak of bTB in deer. Decisions about positive tested and suspicious animals should be taken based on the evaluation of the risk of transmission to the rest of the zoological animals, animal welfare, conservation considerations and, the zoonotic potential of this pathogen.(AU)

A tuberculose bovina (bTB) é uma doença infecciosa causada por Mycobacterium bovis, afetando animais domésticos, animais selvagens e humanos. Para animais selvagens em cativeiro, a bTB representa um risco para os tratadores de animais e visitantes do zoológico, além da possibilidade de espalhar a infecção para animais domésticos ou por meio do comércio de animais silvestres infectados. Cervídeos sambar (Cervus unicolor), veado-vermelho (Cervus elaphus) e gamo (Dama dama) de um parque safári no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil, mostraram uma condição clínica de dispneia e perda de peso. Alguns animais morreram e apresentaram lesões sugestivas de tuberculose (LST), as quais foram confirmadas por histopatologia. Após a interdição do parque safári pelas autoridades veterinárias estaduais, 281 veados sofreram eutanásia com a autorização do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente e dos Recursos Naturais Renováveis (IBAMA). Os linfonodos retrofaríngeos e submandibulares e vísceras foram coletados de 21 animais, que foram cultivados em meio Stonebrink por até 90 dias. Após extração de DNA das colônias bacterianas, foi realizada PCR para alvos que flanqueavam a região de diferenciação 4 (RD4). Das 21 amostras, 14 (66,7%) apresentaram LST com aspecto granulomatoso, coloração esbranquiçada e consistência caseosa ou calcificada, e sete amostras (33,3%) não apresentaram lesões. Na cultura de 14 amostras com LST, 13 (92,8%) apresentaram crescimento bacteriano compatível com M. bovis. No cultivo das sete amostras sem LST, quatro (57,1%) apresentaram colônias compatíveis com M. bovis. A PCR e o sequenciamento de DNA dos fragmentos de PCR detectaram como positivo todas as 17 (100%) culturas bacteriológicas sugestivas de M. bovis, confirmando assim o surto de bTB em cervídeos. As decisões sobre animais positivos testados e suspeitos devem ser tomadas com base na avaliação do risco de transmissão para o restante dos animais zoológicos, bem-estar animal, considerações de conservação e no potencial zoonótico desse patógeno.(AU)

Spoligotyping, genotyping, and spatial distribution of Mycobacterium bovis in cattle in the state of Bahia, Brazil / Genotipagem por spoligotyping e distribuição espacial de Mycobacterium bovis em bovinos no estado da Bahia, Brasil

Mycobacterium bovis is responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The knowledge of the distribution and the precise identification of this disease, including advanced diagnoses such as spoligotyping, allows choosing the best strategies to fight the disease's progress. The present work aimed to investigate mycobacteria's presence, genotype their strains, and evaluate tuberculosis cases' spatial distribution from suggestive lesions in carcasses of bovine and buffalo inspected in slaughterhouses under an official inspection regime in the state of Bahia, Brazil. The study investigated 453,417 animals. Among these, 31 (0.007%) from 17 municipalities were suspected of tuberculosis. Among the culture medium growth, 95% of these were categorized as alcohol-acid resistant bacilli (BAAR). All isolates were subjected to spoligotyping and 95% were confirmed as M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). The strain SB0120 was the most prevalent, and this profile has been described in cases of human tuberculosis by M. bovis, highlighting the zoonotic potential of this profile. This study also identified strains never reported in Bahia, highlighting a distinctive pattern from other parts of Brazil, besides mixed infections. Besides, to identify strains never before described in the state, highlighting a distinctive pattern in Brazil (SB6119 and SB0852, respectively). An unpublished profile was identified and inserted in the international database (Mbovis.org), named SB2715.(AU)

O Mycobacterium bovis é o responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. O conhecimento da distribuição e a identificação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados como o spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. O presente trabalho objetivou investigar a presença de micobactérias, genotipar suas estirpes e avaliar a distribuição espacial dos casos de tuberculose a partir de lesões sugestivas nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial no estado da Bahia. Foram investigados 453.417 animais dentre os quais 31 (0,007%) foram suspeitos de doença e provenientes de 17 municípios. Após o crescimento em meio de cultura, 95% foram categorizados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR). Todos os isolados foram submetidos à spoligotyping e 95% foram confirmados M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). A cepa SB0120 foi a mais prevalente e este perfil vem sendo descrito na literatura com casos de tuberculose humana por M. bovis ressaltando o potencial zoonótico deste perfil. Este estudo também identificou cepas nunca relatadas no estado da Bahia, destacando um padrão distinto de outras partes do Brasil, além da existência de infecções mistas. Permitiu ainda relatar linhagens nunca antes descritas no estado com destaque para um padrão novo no Brasil (SB6119 e SB0852 respectivamente). Um perfil inédito identificado foi identificado e inserido no banco de dados internacional (Mbovis.org), nomeado SB2715.(AU)

Spoligotyping, genotyping, and spatial distribution of Mycobacterium bovis in cattle in the state of Bahia, Brazil / Genotipagem por spoligotyping e distribuição espacial de Mycobacterium bovis em bovinos no estado da Bahia, Brasil

Mycobacterium bovis is responsible for bovine and buffalo tuberculosis, an important zoonotic disease with global distribution. The knowledge of the distribution and the precise identification of this disease, including advanced diagnoses such as spoligotyping, allows choosing the best strategies to fight the disease's progress. The present work aimed to investigate mycobacteria's presence, genotype their strains, and evaluate tuberculosis cases' spatial distribution from suggestive lesions in carcasses of bovine and buffalo inspected in slaughterhouses under an official inspection regime in the state of Bahia, Brazil. The study investigated 453,417 animals. Among these, 31 (0.007%) from 17 municipalities were suspected of tuberculosis. Among the culture medium growth, 95% of these were categorized as alcohol-acid resistant bacilli (BAAR). All isolates were subjected to spoligotyping and 95% were confirmed as M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). The strain SB0120 was the most prevalent, and this profile has been described in cases of human tuberculosis by M. bovis, highlighting the zoonotic potential of this profile. This study also identified strains never reported in Bahia, highlighting a distinctive pattern from other parts of Brazil, besides mixed infections. Besides, to identify strains never before described in the state, highlighting a distinctive pattern in Brazil (SB6119 and SB0852, respectively). An unpublished profile was identified and inserted in the international database (Mbovis.org), named SB2715.(AU)

O Mycobacterium bovis é o responsável pela tuberculose bovina e bubalina, doença zoonótica importante e com distribuição global. O conhecimento da distribuição e a identificação precisa dessa enfermidade, incluindo diagnósticos mais avançados como o spoligotyping, permite escolher as melhores estratégias de combate ao avanço da doença. O presente trabalho objetivou investigar a presença de micobactérias, genotipar suas estirpes e avaliar a distribuição espacial dos casos de tuberculose a partir de lesões sugestivas nas carcaças de bovinos e bubalinos inspecionadas em frigoríficos sob regime de inspeção oficial no estado da Bahia. Foram investigados 453.417 animais dentre os quais 31 (0,007%) foram suspeitos de doença e provenientes de 17 municípios. Após o crescimento em meio de cultura, 95% foram categorizados como bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR). Todos os isolados foram submetidos à spoligotyping e 95% foram confirmados M. bovis (SB0120, SB0121, SB0852, SB0828, SB0295, SB0881, SB1648, SB6119, SB0140, SB1055). A cepa SB0120 foi a mais prevalente e este perfil vem sendo descrito na literatura com casos de tuberculose humana por M. bovis ressaltando o potencial zoonótico deste perfil. Este estudo também identificou cepas nunca relatadas no estado da Bahia, destacando um padrão distinto de outras partes do Brasil, além da existência de infecções mistas. Permitiu ainda relatar linhagens nunca antes descritas no estado com destaque para um padrão novo no Brasil (SB6119 e SB0852 respectivamente). Um perfil inédito identificado foi identificado e inserido no banco de dados internacional (Mbovis.org), nomeado SB2715.(AU)

Tuberculosis outbreak in intensive swine farming from southern Brazil / Surto de tuberculose em suínos de criação intensiva no Sul do Brasil

Mycobacterium tuberculosis var. bovis is the etiologic agent of animal tuberculosis (aTB), a neglected zoonotic disease. Animal tuberculosis can affect many species, including swine. aTB-consistent granulomas in these animals lead to carcass disposal, generating economic losses and posing risks to human health. In the present study, an aTB outbreak was identified at an intensive swine farming operation in Southern Brazil. Inspection during swine slaughter revealed aTB-suspected lesions, which were collected for diagnosis by histology, PCR, and bacterial isolation. The animals had no clinical signs of tuberculosis. Granulomatous lesions were identified in 0.73% (59/8,071) of the slaughtered swine, and were confirmed by histology. Nine samples were further examined by PCR and bacterial isolation, with 44.4% and 55.5% positive results, respectively. Data from abattoirs subjected to federal surveillance show an aTB prevalence in Brazil of <0.001%. The present data thus indicate a swine aTB outbreak in intensive breeding. Swine infection can be related to exposure to infected animals or to contaminated food or environment. Biosecurity measures must be taken to avoid aTB transmission. Although certified swine breeding farms adopt such measures, this report indicates that constant monitoring is crucial, and greater control in swine breeding and finishing units is required to prevent outbreaks and spread of tuberculosis.

Mycobacterium bovis é o agente etiológico da tuberculose animal (aTB), uma doença zoonótica negligenciada. A tuberculose animal pode afetar muitas espécies, incluindo suínos. Os granulomas compatíveis com a aTB nesses animais levam ao descarte de carcaças, gerando perdas econômicas e trazendo riscos à saúde humana. No presente estudo, um surto de aTB foi identificado em um sistema de criação intensiva de suínos na região Sul do Brasil. A inspeção durante um abate de suínos revelou lesões suspeitas de tuberculose, as quais foram coletadas para diagnóstico por histologia, PCR e isolamento bacteriano. Os animais não apresentavam sinais clínicos de tuberculose. Lesões granulomatosas foram identificadas em 0,73% (59/8.071) dos suínos abatidos, e foram confirmadas pela histologia. Nove amostras foram posteriormente examinadas por PCR e isolamento bacteriano, com 44,4% e 55,5% de resultados positivos, respectivamente. Dados de frigoríficos submetidos à vigilância federal demostram prevalência da aTB de < 0,001% no Brasil. Os dados presentes indicam, portanto, um surto de aTB em suínos de criação intensiva. A infecção em suínos pode estar relacionada à exposição a animais infectados, alimentos ou ambientes contaminados. Medidas de biossegurança devem ser tomadas para evitar a transmissão da aTB. Embora as granjas suinícolas certificadas adotem tais medidas, este relato indica que o monitoramento constante é crucial, e maior controle nas unidades de criação e terminação de suínos é necessário para prevenir surtos e disseminação da tuberculose.

Tuberculosis outbreak in intensive swine farming from southern Brazil / Surto de tuberculose em suínos de criação intensiva no Sul do Brasil

Mycobacterium tuberculosis var. bovis is the etiologic agent of animal tuberculosis (aTB), a neglected zoonotic disease. Animal tuberculosis can affect many species, including swine. aTB-consistent granulomas in these animals lead to carcass disposal, generating economic losses and posing risks to human health. In the present study, an aTB outbreak was identified at an intensive swine farming operation in Southern Brazil. Inspection during swine slaughter revealed aTB-suspected lesions, which were collected for diagnosis by histology, PCR, and bacterial isolation. The animals had no clinical signs of tuberculosis. Granulomatous lesions were identified in 0.73% (59/8,071) of the slaughtered swine, and were confirmed by histology. Nine samples were further examined by PCR and bacterial isolation, with 44.4% and 55.5% positive results, respectively. Data from abattoirs subjected to federal surveillance show an aTB prevalence in Brazil of <0.001%. The present data thus indicate a swine aTB outbreak in intensive breeding. Swine infection can be related to exposure to infected animals or to contaminated food or environment. Biosecurity measures must be taken to avoid aTB transmission. Although certified swine breeding farms adopt such measures, this report indicates that constant monitoring is crucial, and greater control in swine breeding and finishing units is required to prevent outbreaks and spread of tuberculosis.(AU)

Mycobacterium bovis é o agente etiológico da tuberculose animal (aTB), uma doença zoonótica negligenciada. A tuberculose animal pode afetar muitas espécies, incluindo suínos. Os granulomas compatíveis com a aTB nesses animais levam ao descarte de carcaças, gerando perdas econômicas e trazendo riscos à saúde humana. No presente estudo, um surto de aTB foi identificado em um sistema de criação intensiva de suínos na região Sul do Brasil. A inspeção durante um abate de suínos revelou lesões suspeitas de tuberculose, as quais foram coletadas para diagnóstico por histologia, PCR e isolamento bacteriano. Os animais não apresentavam sinais clínicos de tuberculose. Lesões granulomatosas foram identificadas em 0,73% (59/8.071) dos suínos abatidos, e foram confirmadas pela histologia. Nove amostras foram posteriormente examinadas por PCR e isolamento bacteriano, com 44,4% e 55,5% de resultados positivos, respectivamente. Dados de frigoríficos submetidos à vigilância federal demostram prevalência da aTB de < 0,001% no Brasil. Os dados presentes indicam, portanto, um surto de aTB em suínos de criação intensiva. A infecção em suínos pode estar relacionada à exposição a animais infectados, alimentos ou ambientes contaminados. Medidas de biossegurança devem ser tomadas para evitar a transmissão da aTB. Embora as granjas suinícolas certificadas adotem tais medidas, este relato indica que o monitoramento constante é crucial, e maior controle nas unidades de criação e terminação de suínos é necessário para prevenir surtos e disseminação da tuberculose.(AU)

Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.

Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.(AU)

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.(AU)

Spatial and temporal analyses of culls due to bovine tuberculosis in slaughterhouses of Minas Gerais state, Brazil, 2008 to 2012 / Análise espacial e temporal das condenações por tuberculose bovina em frigoríficos do estado de Minas Gerais, Brasil, 2008 a 2012

The application of spatial and temporal analysis in epidemiology aims to understand the causes and consequences of spatial and temporal heterogeneity in studies of infectious diseases. Bovine tuberculosis (bTB) is a chronic and progressive infectious disease caused by Mycobacterium bovis and is an important zoonosis worldwide. The aim of this study was to conduct spatial and temporal analyses of a secondary database of bTB-positive cases registered by the Federal Inspection Service in two slaughterhouses from the West of Minas mesoregion of Minas Gerais state, Brazil, from 2008 to 2012 and to suggest its use in epidemiological surveillance. The culled cattle with bTB macroscopic lesions during post mortem inspection were considered positive in this study. The data used were the positive cases registered on the "Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal" (SIG/SIF - Management Information System of the Federal Inspection Service) of the "Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento" (MAPA - Ministry of Agriculture, Livestock and Supplies), the number of animals slaughtered monthly and their municipalities of origin, per slaughterhouse. The prevalence (%) of cases per cattle slaughtered was calculated, and the relationship between these cases of bTB and cases of human tuberculosis (hTB) and the GDP per capita of the mesoregions comprising the municipalities surveyed was evaluated. The prevalence was 1,030 cases of bTB (0.28%). The lowest case numbers and prevalence rates were obtained in 2010, while the highest rates were observed in 2011. Slaughterhouse 1 showed stationarity, while Slaughterhouse 2 showed an increasing annual trend for data since October 2009. A statistical correlation between the numbers of cases of bovine and human TB (p=0.006, r=0.148) was observed. The prevalence for Slaughterhouses 1 and 2 were not correlated (p>0.05). The municipalities of origin demonstrated randomness in their spatial distribution. SIG/SIF-MAPA may be used for the analysis of spatial and temporal distribution to contribute to the monitoring of animal health services with information on the prevalence of culling for bTB in the West of Minas, South/Southwest of Minas, Campo das Vertentes and Zona da Mata mesoregions of Minas Gerais, Brazil.(AU)

A aplicação de análises espacial e temporal em epidemiologia visa compreender as causas e consequências da heterogeneidade espacial e temporal nos estudos de doenças infecciosas. A tuberculose bovina (TBb) é uma doença infecciosa crônica e progressiva causada pelo Mycobacterium bovis e uma importante zoonose em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi realizar análises espaciais e temporais em um banco de dados secundário de casos positivos de TBb registrados pelo Serviço de Inspeção Federal em dois frigoríficos da mesorregião Oeste de Minas, estado de Minas Gerais, Brasil, de 2008 a 2012 e sugerir sua utilização na vigilância epidemiológica. Os bovinos abatidos com lesões macroscópicas de TBb durante a inspeção post mortem foram considerados positivos neste estudo. Os dados utilizados foram os casos positivos cadastrados no Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIGSIF/MAPA), o número de animais abatidos mensalmente e seus municípios de origem, por frigorífico. Foi calculada a prevalência (%) de casos por bovinos abatidos e avaliada a relação entre esses casos de TBb e os casos de tuberculose humana (TBh) e o PIB per capita das mesorregiões que compõem os municípios pesquisados. A prevalência foi de 1.030 casos de TBb (0,28%). Os menores números de casos e prevalências foram obtidos em 2010, enquanto as maiores prevalências foram observadas em 2011. O Frigorífico 1 apresentou estacionariedade, enquanto o Frigorífico 2 apresentou tendência anual crescente para os dados desde outubro de 2009. Correlação estatística entre o número de casos de TBb e TBh (p=0,006, r=0,148) foi observada. As prevalências nos Frigoríficos 1 e 2 não se correlacionaram (p>0,05). Os municípios de origem demonstraram aleatoriedade em sua distribuição espacial. O SIGSIF/MAPA pode ser utilizado para a análise da distribuição espacial e temporal a fim de contribuir com o monitoramento dos serviços de saúde animal com informações sobre a prevalência de condenações por TBb nas mesorregiões Oeste de Minas, Sul/Sudoeste de Minas, Campo das Vertentes e Zona da Mata de Minas Gerais, Brasil.(AU)

Spatial and temporal analyses of culls due to bovine tuberculosis in slaughterhouses of Minas Gerais state, Brazil, 2008 to 2012 / Análise espacial e temporal das condenações por tuberculose bovina em frigoríficos do estado de Minas Gerais, Brasil, 2008 a 2012

The application of spatial and temporal analysis in epidemiology aims to understand the causes and consequences of spatial and temporal heterogeneity in studies of infectious diseases. Bovine tuberculosis (bTB) is a chronic and progressive infectious disease caused by Mycobacterium bovis and is an important zoonosis worldwide. The aim of this study was to conduct spatial and temporal analyses of a secondary database of bTB-positive cases registered by the Federal Inspection Service in two slaughterhouses from the West of Minas mesoregion of Minas Gerais state, Brazil, from 2008 to 2012 and to suggest its use in epidemiological surveillance. The culled cattle with bTB macroscopic lesions during post mortem inspection were considered positive in this study. The data used were the positive cases registered on the "Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal" (SIG/SIF - Management Information System of the Federal Inspection Service) of the "Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento" (MAPA - Ministry of Agriculture, Livestock and Supplies), the number of animals slaughtered monthly and their municipalities of origin, per slaughterhouse. The prevalence (%) of cases per cattle slaughtered was calculated, and the relationship between these cases of bTB and cases of human tuberculosis (hTB) and the GDP per capita of the mesoregions comprising the municipalities surveyed was evaluated. The prevalence was 1,030 cases of bTB (0.28%). The lowest case numbers and prevalence rates were obtained in 2010, while the highest rates were observed in 2011. Slaughterhouse 1 showed stationarity, while Slaughterhouse 2 showed an increasing annual trend for data since October 2009. A statistical correlation between the numbers of cases of bovine and human TB (p=0.006, r=0.148) was observed. The prevalence for Slaughterhouses 1 and 2 were not correlated (p>0.05). The municipalities of origin demonstrated randomness in their spatial distribution. SIG/SIF-MAPA may be used for the analysis of spatial and temporal distribution to contribute to the monitoring of animal health services with information on the prevalence of culling for bTB in the West of Minas, South/Southwest of Minas, Campo das Vertentes and Zona da Mata mesoregions of Minas Gerais, Brazil.(AU)

A aplicação de análises espacial e temporal em epidemiologia visa compreender as causas e consequências da heterogeneidade espacial e temporal nos estudos de doenças infecciosas. A tuberculose bovina (TBb) é uma doença infecciosa crônica e progressiva causada pelo Mycobacterium bovis e uma importante zoonose em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi realizar análises espaciais e temporais em um banco de dados secundário de casos positivos de TBb registrados pelo Serviço de Inspeção Federal em dois frigoríficos da mesorregião Oeste de Minas, estado de Minas Gerais, Brasil, de 2008 a 2012 e sugerir sua utilização na vigilância epidemiológica. Os bovinos abatidos com lesões macroscópicas de TBb durante a inspeção post mortem foram considerados positivos neste estudo. Os dados utilizados foram os casos positivos cadastrados no Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIGSIF/MAPA), o número de animais abatidos mensalmente e seus municípios de origem, por frigorífico. Foi calculada a prevalência (%) de casos por bovinos abatidos e avaliada a relação entre esses casos de TBb e os casos de tuberculose humana (TBh) e o PIB per capita das mesorregiões que compõem os municípios pesquisados. A prevalência foi de 1.030 casos de TBb (0,28%). Os menores números de casos e prevalências foram obtidos em 2010, enquanto as maiores prevalências foram observadas em 2011. O Frigorífico 1 apresentou estacionariedade, enquanto o Frigorífico 2 apresentou tendência anual crescente para os dados desde outubro de 2009. Correlação estatística entre o número de casos de TBb e TBh (p=0,006, r=0,148) foi observada. As prevalências nos Frigoríficos 1 e 2 não se correlacionaram (p>0,05). Os municípios de origem demonstraram aleatoriedade em sua distribuição espacial. O SIGSIF/MAPA pode ser utilizado para a análise da distribuição espacial e temporal a fim de contribuir com o monitoramento dos serviços de saúde animal com informações sobre a prevalência de condenações por TBb nas mesorregiões Oeste de Minas, Sul/Sudoeste de Minas, Campo das Vertentes e Zona da Mata de Minas Gerais, Brasil.(AU)

Isolation and genotyping of Mycobacterium bovis in suggestive lesions of tuberculosis in cattle slaughtered in the state of Ceará, Brazil / Isolamento e tipificação genética de Mycobacterium bovis em lesões sugestivas de tuberculose em bovinos abatidos no estado do Ceará

Bovine tuberculosis (BTB) is a zoonosis caused by the bacterium Mycobacterium bovis, which induces the development of nodular and granulomatous lesions in various animal tissues. The recognition of these suggestive gross lesions during postmortem sanitary inspection in slaughterhouses provides a presumptive diagnosis, which requires the use of complementary tests to confirm the disease. This study aimed to verify the occurrence of BTB in cattle slaughtered in slaughterhouses in the state of Ceará, Brazil, using bacteriological and molecular methods. To this end, suggestive lesions were analyzed on carcasses condemned by the "Serviço de Inspeção Estadual" (SIE). The samples were submitted to microbiological analysis using culture media and specific staining followed by spoligotyping molecular technique for identification and genotyping of the mycobacteria. Occurrence of lesions suggestive of BTB was verified in bovine carcasses (0.071%) from different municipalities of the state. These lesions were located mainly in the lung (95.12%), lymph nodes (58.53%), and liver (36.58%). Microbiological culture showed bacterial isolation (17.94%), with the growth of colonies showing morphological and tannic characteristics belonging to genus Mycobacterium spp. Genetic polymorphism analysis identified M. bovis in all isolates, which were discriminated into six spoligotypes (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870, and SB0852). These profiles have been described in Brazil and several areas of the world, except for profiles SB1064 and SB0852, which were described in the country for the first time. The results show that the association of the diagnostic methods used was the basis for the first study on identification of mycobacteria found in the state, which may provide a database for the epidemiological study of BTB in the state of Ceará.(AU)

A tuberculose bovina (TB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, o qual induz ao desenvolvimento de lesões nodulares e granulomatosas em vários tecidos do animal. O reconhecimento dessas lesões macroscópicas sugestivas durante a inspeção sanitária post mortem em matadouros fornece um diagnóstico presuntivo, sendo necessário a utilização de testes complementares para confirmação da doença. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência da TB em animais abatidos em matadouros-frigoríficos no estado do Ceará através da utilização de métodos bacteriológicos e moleculares. Para tanto, foram analisadas lesões sugestivas de TB em carcaças condenadas pelo Serviço de Inspeção Estadual (SIE). As amostras foram submetidas à análise microbiológica, utilizando meios de cultivo e de coloração específicos, seguida pela técnica molecular spoligotyping para identificação e tipificação genética da micobactéria. Verificou-se a ocorrência de lesões sugestivas de TB em carcaças bovinas (0,071%) oriundas de diferentes municípios do estado do Ceará. Essas lesões estavam localizadas principalmente no pulmão (95,12%), linfonodos (58,53%) e fígado (36,58%). O cultivo microbiológico obteve isolamento bacteriano (17,94%), com o crescimento de colônias apresentando características morfológicas e tintoriais pertencentes ao gênero Mycobacterium spp. A análise do polimorfismo genético identificou a presença de M. bovis em todos os isolados, que foram discriminados em seis espoligotipos (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870 e SB0852), descritos no Brasil e em diversas áreas do mundo, exceto os perfis SB1064 e SB0852 que foram descritos pela primeira vez no país. Os resultados obtidos demonstram que a associação dos métodos diagnósticos utilizados foram a base do primeiro estudo de identificação das micobactérias encontradas no estado do Ceará, o que pode contribuir para a criação de um banco de dados para o estudo epidemiológico da TB no estado.(AU)

Isolation and genotyping of Mycobacterium bovis in suggestive lesions of tuberculosis in cattle slaughtered in the state of Ceará, Brazil / Isolamento e tipificação genética de Mycobacterium bovis em lesões sugestivas de tuberculose em bovinos abatidos no estado do Ceará

Bovine tuberculosis (BTB) is a zoonosis caused by the bacterium Mycobacterium bovis, which induces the development of nodular and granulomatous lesions in various animal tissues. The recognition of these suggestive gross lesions during postmortem sanitary inspection in slaughterhouses provides a presumptive diagnosis, which requires the use of complementary tests to confirm the disease. This study aimed to verify the occurrence of BTB in cattle slaughtered in slaughterhouses in the state of Ceará, Brazil, using bacteriological and molecular methods. To this end, suggestive lesions were analyzed on carcasses condemned by the "Serviço de Inspeção Estadual" (SIE). The samples were submitted to microbiological analysis using culture media and specific staining followed by spoligotyping molecular technique for identification and genotyping of the mycobacteria. Occurrence of lesions suggestive of BTB was verified in bovine carcasses (0.071%) from different municipalities of the state. These lesions were located mainly in the lung (95.12%), lymph nodes (58.53%), and liver (36.58%). Microbiological culture showed bacterial isolation (17.94%), with the growth of colonies showing morphological and tannic characteristics belonging to genus Mycobacterium spp. Genetic polymorphism analysis identified M. bovis in all isolates, which were discriminated into six spoligotypes (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870, and SB0852). These profiles have been described in Brazil and several areas of the world, except for profiles SB1064 and SB0852, which were described in the country for the first time. The results show that the association of the diagnostic methods used was the basis for the first study on identification of mycobacteria found in the state, which may provide a database for the epidemiological study of BTB in the state of Ceará.(AU)

A tuberculose bovina (TB) é uma zoonose causada pelo Mycobacterium bovis, o qual induz ao desenvolvimento de lesões nodulares e granulomatosas em vários tecidos do animal. O reconhecimento dessas lesões macroscópicas sugestivas durante a inspeção sanitária post mortem em matadouros fornece um diagnóstico presuntivo, sendo necessário a utilização de testes complementares para confirmação da doença. O objetivo deste trabalho foi verificar a ocorrência da TB em animais abatidos em matadouros-frigoríficos no estado do Ceará através da utilização de métodos bacteriológicos e moleculares. Para tanto, foram analisadas lesões sugestivas de TB em carcaças condenadas pelo Serviço de Inspeção Estadual (SIE). As amostras foram submetidas à análise microbiológica, utilizando meios de cultivo e de coloração específicos, seguida pela técnica molecular spoligotyping para identificação e tipificação genética da micobactéria. Verificou-se a ocorrência de lesões sugestivas de TB em carcaças bovinas (0,071%) oriundas de diferentes municípios do estado do Ceará. Essas lesões estavam localizadas principalmente no pulmão (95,12%), linfonodos (58,53%) e fígado (36,58%). O cultivo microbiológico obteve isolamento bacteriano (17,94%), com o crescimento de colônias apresentando características morfológicas e tintoriais pertencentes ao gênero Mycobacterium spp. A análise do polimorfismo genético identificou a presença de M. bovis em todos os isolados, que foram discriminados em seis espoligotipos (SB0121, SB0295, SB1064, SB0120, SB0870 e SB0852), descritos no Brasil e em diversas áreas do mundo, exceto os perfis SB1064 e SB0852 que foram descritos pela primeira vez no país. Os resultados obtidos demonstram que a associação dos métodos diagnósticos utilizados foram a base do primeiro estudo de identificação das micobactérias encontradas no estado do Ceará, o que pode contribuir para a criação de um banco de dados para o estudo epidemiológico da TB no estado.(AU)

Intercurrence of paratuberculosis in intradermal tuberculin test reactive cattle

Background: Bovine tuberculosis control programs are based on a standard diagnostic method, the intradermal test with purified protein derivatives, which is used to identify and eliminate diseased animals. Currently none of the tests available allow complete differentiation between infected and uninfected animals. The main limitations of the tests available are related to diagnostic sensitivity and specificity, which results in false positive reactions due to the existence of cross infections, and also false negative, inherent to the state of energy of some animals. The aim of this work was to study the intercurrence of paratuberculosis in tuberculosis reactive cattle by the comparative cervical test. Materials, Methods & Results: Three hundred and thirty four cattle were evaluated using the comparative cervical test (CCT) and serology for tuberculosis (TB) and paratuberculosis (PTB) ELISA IDEXX®. All of the animals testing positive by CCT were euthanized and necropsied. Fragments of lymph node, lung and intestine were collected and analyzed using histopathological techniques, with staining by Hematoxylin-Eosin (HE). Samples of lung and lymph nodes (retropharyngeal, submandibular, cervical and mediastinal) of the animals testing positive by CCT were evaluated using qPRC for M. bovis, and intestinal and mesenteric lymph nodes using PCR for PTB. Of the 334 cattle evaluated using the comparative cervical test, 16 were considered positive. No lesions suggestive of tuberculosis were found in the macroscopic inspection of the carcasses. The most evident anatomical and pathological finding was a thickening of intestinal mucosa, found in 12 of the 16 cattle submitted to necropsy. No microscopic lesions suggestive of TB were identified nor was the presence of M. bovis detected by qPCR. The main histopathological findings were observed in the small intestine and mesenteric lymph nodes and identified as enteritis, lymphangitis...

Aspectos clínicos e terapêuticos de infecção por Mycobacterium bovis em gato doméstico - relato de caso / Clinical and therapeutic aspects of infection by Mycobacterium bovis in domestic cat - case report

Este artigo tem como objetivo relatar um caso de infecção por Mycobacterium bovis em um gato doméstico, com seis meses de idade, enfatizando seus aspectos clínicos e terapêuticos. O felino apresentava como histórico a ingestão de leite de vaca não fervido e posteriormente desenvolveu sinais de anorexia, tosse não produtiva e linfadenomegalia. Para elucidação do diagnóstico, foram realizados exames complementares de imagem, hematológicos, citológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR). Diante da confirmação de infecção por Mycobacterium, o tratamento foi instituído por meio da associação de três antimicrobianos (enrofloxacino 5mg/kg, claritromicina 10mg/kg e rifampicina 15mg/kg), por via oral, a cada 12 horas, aos quais o animal respondeu positivamente, apresentando significativa diminuição dos sinais clínicos; entretanto, após 60 dias de tratamento, foi a óbito devido a um atropelamento. Conclui-se que a realização do tratamento em gatos com tuberculose pode ocasionar melhora dos sinais clínicos e que, embora de ocorrência rara no Brasil, essa enfermidade deve ser incluída como diagnóstico diferencial das enfermidades infecciosas nessa espécie.(AU)

This article aims to report a case of Mycobacterium bovis infection in a six-month-old domestic cat, emphasizing its clinical and therapeutic aspects. The feline presented as history the intake of unboiled cow's milk and later developed signs of anorexia, non-productive cough and lymphadenomegaly. Additional imaging, hematological, cytological and polymerase chain reaction (PCR) tests were performed to elucidate the diagnosis. In the presence of Mycobacterium infection, treatment was instituted by the combination of three antimicrobials (Enrofloxacin 5mg/kg, Clarithromycin 10mg/kg, and Rifampicin 15mg/kg) orally every 12 hours, to which the animal responded positively, presenting significant decrease of the clinical signs, however after 60 days of treatment the cat died accidentally, hit by a car on the street. It is concluded that the treatment in cats affected by tuberculosis can cause improvement of clinical signs and that although rare in Brazil, this disease should be included as a differential diagnosis of infectious diseases in this species.(AU)

Aspectos clínicos e terapêuticos de infecção por Mycobacterium bovis em gato doméstico - relato de caso / Clinical and therapeutic aspects of infection by Mycobacterium bovis in domestic cat - case report

Este artigo tem como objetivo relatar um caso de infecção por Mycobacterium bovis em um gato doméstico, com seis meses de idade, enfatizando seus aspectos clínicos e terapêuticos. O felino apresentava como histórico a ingestão de leite de vaca não fervido e posteriormente desenvolveu sinais de anorexia, tosse não produtiva e linfadenomegalia. Para elucidação do diagnóstico, foram realizados exames complementares de imagem, hematológicos, citológicos e reação em cadeia da polimerase (PCR). Diante da confirmação de infecção por Mycobacterium, o tratamento foi instituído por meio da associação de três antimicrobianos (enrofloxacino 5mg/kg, claritromicina 10mg/kg e rifampicina 15mg/kg), por via oral, a cada 12 horas, aos quais o animal respondeu positivamente, apresentando significativa diminuição dos sinais clínicos; entretanto, após 60 dias de tratamento, foi a óbito devido a um atropelamento. Conclui-se que a realização do tratamento em gatos com tuberculose pode ocasionar melhora dos sinais clínicos e que, embora de ocorrência rara no Brasil, essa enfermidade deve ser incluída como diagnóstico diferencial das enfermidades infecciosas nessa espécie.(AU)

This article aims to report a case of Mycobacterium bovis infection in a six-month-old domestic cat, emphasizing its clinical and therapeutic aspects. The feline presented as history the intake of unboiled cow's milk and later developed signs of anorexia, non-productive cough and lymphadenomegaly. Additional imaging, hematological, cytological and polymerase chain reaction (PCR) tests were performed to elucidate the diagnosis. In the presence of Mycobacterium infection, treatment was instituted by the combination of three antimicrobials (Enrofloxacin 5mg/kg, Clarithromycin 10mg/kg, and Rifampicin 15mg/kg) orally every 12 hours, to which the animal responded positively, presenting significant decrease of the clinical signs, however after 60 days of treatment the cat died accidentally, hit by a car on the street. It is concluded that the treatment in cats affected by tuberculosis can cause improvement of clinical signs and that although rare in Brazil, this disease should be included as a differential diagnosis of infectious diseases in this species.(AU)

Tuberculose bovina: diagnóstico ante mortem e post mortem em bovinos leiteiros através da associação de análises / Bovine tuberculosis: diagnosis ante mortem and post mortem in dairy cattle through analysis association

Este estudo descreve o emprego de quatro métodos diagnósticos para a confirmação de casos de tuberculose em bovinos. Para tanto foram avaliados 211 bovinos leiteiros, dos quais 35,1% apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais foram encaminhados para abate sanitário. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária verificou-se que 51,8% dos bovinos apresentavam lesões visíveis compatíveis com tuberculose. Também foram coletados fragmentos teciduais de bovinos com e sem lesões macroscópicas, os quais na análise histológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa e áreas de calcificação, e na coloração de Ziehl-Neelsen apresentaram bacilos álcool-ácido resistentes. Assim, as análises empregadas no estudo se mostraram importantes para o diagnóstico acurado de tuberculose bovina, além de alertar para o risco de saúde pública que pessoas que trabalham nos abatedouros e/ou em contato direto com bovinos doentes estão submetidas.(AU)