Imunodetecção de Toxoplasma gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas / Immunodetection of Toxoplasma gondii in placenta tissue of naturally infected goats

A imuno-histoquímica (IHQ) é considerada uma ferramenta rápida e precisa para a identificação de protozoários, como Toxoplasma gondii, em tecidos fetais e placentários. Neste estudo foi avaliada a imunodetecção de Toxoplasma gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas. Foram coletadas e analisadas 80 amostras de placentas de cabras procedentes de único rebanho com sorologia positiva para T. gondii na técnica de ELISA. Na histopatologia, 27/80 amostras apresentaram lesões sugestivas de infecção por protozoários. Após a avaliação histopatológica, procedeu-se à realização da técnica de imuno-histoquímica, obtendo-se 85,2% (23/27) de amostras com marcação positiva. A imunodetecção ocorreu no epitélio de revestimento das vilosidades coriônicas e foi classificada de acordo com o grau de intensidade da imunomarcação. Também foi evidenciada imunomarcação no interior dos vasos sanguíneos fetais em 8,69% (2/23) das amostras. Este estudo demonstrou que a técnica de IHQ se comportou como uma ferramenta valiosa no diagnóstico da infeção por T. gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas e complementou, de forma decisiva, o diagnóstico, além de agregar maior valor aos resultados obtidos nas análises histopatológica e sorológica.(AU)

Immunohistochemistry (IHC) is considered to be a rapid and accurate tool for the identification of protozoa such as Toxoplasma gondii in fetal and placental tissues. In this study, we evaluated the immunodetection of Toxoplasma gondii in placental tissue from naturally infected goats. A total of 80 samples of goat placentas from a single herd with positive ELISA serology for T. gondii were collected and analyzed. In the histopathology, 27/80 samples presented lesions suggestive of protozoal infection. After the histopathological evaluation, the immunohistochemistry technique was performed, obtaining 85.2% (23/27) of samples with positive marking. Immunodetection occurred in the lining epithelium of the chorionic villi and was classified according to the degree of intensity of the immunostaining. Immunostaining within the fetal blood vessels was also evidenced in 8.69% (2/23) of the samples. This study demonstrated that the IHQ technique behaved as a valuable tool in the diagnosis of T. gondii infection in placental tissue of naturally infected goats completing the diagnosis in a decisive way and adding greater value to the results obtained in the histopathological and serological analysis.(AU)

Imunodetecção de Toxoplasma gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas / Immunodetection of Toxoplasma gondii in placenta tissue of naturally infected goats

A imuno-histoquímica (IHQ) é considerada uma ferramenta rápida e precisa para a identificação de protozoários, como Toxoplasma gondii, em tecidos fetais e placentários. Neste estudo foi avaliada a imunodetecção de Toxoplasma gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas. Foram coletadas e analisadas 80 amostras de placentas de cabras procedentes de único rebanho com sorologia positiva para T. gondii na técnica de ELISA. Na histopatologia, 27/80 amostras apresentaram lesões sugestivas de infecção por protozoários. Após a avaliação histopatológica, procedeu-se à realização da técnica de imuno-histoquímica, obtendo-se 85,2% (23/27) de amostras com marcação positiva. A imunodetecção ocorreu no epitélio de revestimento das vilosidades coriônicas e foi classificada de acordo com o grau de intensidade da imunomarcação. Também foi evidenciada imunomarcação no interior dos vasos sanguíneos fetais em 8,69% (2/23) das amostras. Este estudo demonstrou que a técnica de IHQ se comportou como uma ferramenta valiosa no diagnóstico da infeção por T. gondii em tecido placentário de cabras naturalmente infectadas e complementou, de forma decisiva, o diagnóstico, além de agregar maior valor aos resultados obtidos nas análises histopatológica e sorológica.(AU)

Immunohistochemistry (IHC) is considered to be a rapid and accurate tool for the identification of protozoa such as Toxoplasma gondii in fetal and placental tissues. In this study, we evaluated the immunodetection of Toxoplasma gondii in placental tissue from naturally infected goats. A total of 80 samples of goat placentas from a single herd with positive ELISA serology for T. gondii were collected and analyzed. In the histopathology, 27/80 samples presented lesions suggestive of protozoal infection. After the histopathological evaluation, the immunohistochemistry technique was performed, obtaining 85.2% (23/27) of samples with positive marking. Immunodetection occurred in the lining epithelium of the chorionic villi and was classified according to the degree of intensity of the immunostaining. Immunostaining within the fetal blood vessels was also evidenced in 8.69% (2/23) of the samples. This study demonstrated that the IHQ technique behaved as a valuable tool in the diagnosis of T. gondii infection in placental tissue of naturally infected goats completing the diagnosis in a decisive way and adding greater value to the results obtained in the histopathological and serological analysis.(AU)

Transplacental transmission of Neospora caninum in naturally infected small ruminants from northeastern Brazil / Transmissão transplacentária de Neospora caninum em pequenos ruminantes infectados naturalmente do Nordeste do Brasil

Toxoplasma gondii and Neospora caninum are causative agents of abortion in sheep and goats. Thus, the present study aimed to describe the transplacental transmission of these protozoans in small ruminants of northeastern Brazil. Seventeen fetuses (6 goats and 11 sheep) from farms with history of abortion were necropsied and samples were collected from different tissues (brain, liver, lung, kidney and heart). The samples were analyzed by PCR, histopathology (HP) and immunohistochemistry (IHC) to evaluate whether T. gondii and/or N. caninum infection were the cause of abortion. None of the samples was positive for T. gondii according to PCR and IHC results. Some brain, liver, lung, kidney and heart samples of goat fetuses were positive for N. caninum by PCR. In the histopathology, mild mononuclear infiltration and necrosis with calcification were observed in the liver and brain of one goat fetus, respectively, that also was positive for N. caninum by PCR and IHC. The results confirmed vertical transmission of N. caninum in naturally infected goats of northeastern, Brazil.(AU)

Toxoplasma gondii e Neospora caninum são reconhecidos como protozoário causadores de aborto em ovinos e caprinos. Desta forma, objetivou-se descrever a transmissão transplacentária desses agentes em pequenos ruminantes na região Nordeste do Brasil. Foram examinados seis fetos caprinos e onze fetos ovinos, totalizando 78 amostras de diferentes tecidos (cérebro, fígado, pulmão, rim e coração) provenientes de propriedades rurais com histórico de aborto. As amostras foram analisadas por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Histopatologia (HP) e Imunohistoquímica (IHQ), com a finalidade de associar o abortamento a T. gondii e/ou N. caninum. Nenhuma amostra foi positiva na PCR e IHQ para T. gondii. Algumas amostras de cérebro, fígado, pulmão, rim e coração de fetos de caprinos e ovinos foram positivas na PCR para N. caninum. Na histopatologia foi observado leve infiltrado mononuclear no fígado e necrose com calcificação no SNC de um caprino, associada à imunomarcação positiva para N. caninum na IHQ e PCR positiva. Os resultados confirmam a transmissão vertical de N. caninum em caprinos naturalmente infectados na região nordeste do Brasil.(AU)

Transplacental transmission of Neospora caninum in naturally infected small ruminants from northeastern Brazil / Transmissão transplacentária de Neospora caninum em pequenos ruminantes infectados naturalmente do Nordeste do Brasil

Toxoplasma gondii and Neospora caninum are causative agents of abortion in sheep and goats. Thus, the present study aimed to describe the transplacental transmission of these protozoans in small ruminants of northeastern Brazil. Seventeen fetuses (6 goats and 11 sheep) from farms with history of abortion were necropsied and samples were collected from different tissues (brain, liver, lung, kidney and heart). The samples were analyzed by PCR, histopathology (HP) and immunohistochemistry (IHC) to evaluate whether T. gondii and/or N. caninum infection were the cause of abortion. None of the samples was positive for T. gondii according to PCR and IHC results. Some brain, liver, lung, kidney and heart samples of goat fetuses were positive for N. caninum by PCR. In the histopathology, mild mononuclear infiltration and necrosis with calcification were observed in the liver and brain of one goat fetus, respectively, that also was positive for N. caninum by PCR and IHC. The results confirmed vertical transmission of N. caninum in naturally infected goats of northeastern, Brazil.(AU)

Toxoplasma gondii e Neospora caninum são reconhecidos como protozoário causadores de aborto em ovinos e caprinos. Desta forma, objetivou-se descrever a transmissão transplacentária desses agentes em pequenos ruminantes na região Nordeste do Brasil. Foram examinados seis fetos caprinos e onze fetos ovinos, totalizando 78 amostras de diferentes tecidos (cérebro, fígado, pulmão, rim e coração) provenientes de propriedades rurais com histórico de aborto. As amostras foram analisadas por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Histopatologia (HP) e Imunohistoquímica (IHQ), com a finalidade de associar o abortamento a T. gondii e/ou N. caninum. Nenhuma amostra foi positiva na PCR e IHQ para T. gondii. Algumas amostras de cérebro, fígado, pulmão, rim e coração de fetos de caprinos e ovinos foram positivas na PCR para N. caninum. Na histopatologia foi observado leve infiltrado mononuclear no fígado e necrose com calcificação no SNC de um caprino, associada à imunomarcação positiva para N. caninum na IHQ e PCR positiva. Os resultados confirmam a transmissão vertical de N. caninum em caprinos naturalmente infectados na região nordeste do Brasil.(AU)

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.

Estudo longitudinal dos fatores de risco para anaplasmose e transmissão transplacentária em rebanhos bovinos / Longitudinal study of risk factors for anaplasmosis and transplacental transmission in herd cattle

Anaplasma marginale, bacteria that occurs in tropical and subtropical areas throughout the world, isresponsible for causing a disease that is one of the most constraint to cattle production in many countries.The present work aimed to investigate potential risk factors for anaplasmosis and the occurrence oftransplacental transmission by molecular and serological assays in cattle. A total of 22 calves wererandomly sampled and monitored during four years; the presence of infection/exposure to A. marginalewas assessed by a semi-nested PCR assay targeting msp-5 gene of A. marginale, indirect ELISA fordetection of IgG antibodies to A. marginale and blood smears. The A. marginale infection prevalencedata were analyzed in relation to risk factors, using chi-squared, odds ratio and multiple logisticregressions. DNA amplification results revealed a frequency of infection with A. marginale of 41%(9/22) in the newborn calves before colostrum suckling. However, only 14% (3/22) of newborn calveswere seropositive for A. marginale. All calves were positive to A. marginale by PCR and microscopicexamination of blood smears before the two and fourth month of age, respectively. The main risk factorsassociated with seroprevalence were breed (OR=36.2), tick infestation (OR=3.44) and stocking density(OR=3.28). The results indicated that exposure of cattle to A. marginale was common in dairy herdsand endemic instability situation probably is due to inadequate antibody production in cows or geneticvariability of pathogen. This study still demonstrated that in addition to transmission of A. marginaleby ticks and flies, the transplacental transmission is very important and should be the target of diseasecontrol programs in Brazil.(AU)

Anaplasma marginale, bactéria que ocorre em regiões tropicais e subtropicais do mundo, é responsávelpor causar uma das doenças que mais restringem a criação de bovinos em diversos países. O presentetrabalho teve como objetivo investigar potenciais fatores de risco para a anaplasmose e a ocorrênciade transmissão transplacentária por ensaios moleculares e sorológicos em bovinos. Um total de 22animais foram amostrados e acompanhados durante quatro anos; a presença de infecção / exposiçãoa A. marginale, foi avaliada pelo semi-nested PCR alvejando o gene MSP-5 de A. marginale, peloELISA indireto para a detecção de anticorpos IgG anti-A. marginale e esfregaço sanguíneo. Os dadosde prevalência de infecção por A. marginale foram analisados em relação aos fatores de risco, usando x², odds ratio e regressão logística múltipla. A amplificação de DNA revelou uma frequência de infecçãopor A. marginale de 41% (9/22) nos bezerros recém-nascidos antes de ingerirem colostro. No entanto,apenas 14% (3/22) dos bezerros recém-nascidos eram soropositivos para A. marginale. Todos osbezerros foram positivos para A. marginale por PCR e no exame microscópico de esfregaço sanguíneo,antes do segundo e quarto mês de idade, respectivamente. Os principais fatores de risco associadosa soroprevalência foram raça (OR = 36,2), infestação por carrapatos (OR = 3,44) e densidade (OR =3,28). Os resultados indicaram que a exposição de gado para A. marginale era comum nos rebanhosleiteiros e a situação de instabilidade endêmica provavelmente se faz devido à produção inadequada deanticorpos em vacas ou a variabilidade genética do patógeno. Este estudo demonstra ainda que, além datransmissão de A. marginale por carrapatos e moscas, a transmissão transplacentária é muito importantee deve ser alvo de programas de controle da doença no Brasil.(AU)