Diagnostic applicability of infrared thermography in the evaluation of canine mammary tumors / Aplicabilidade diagnóstica da termografia infravermelha na avaliação dos tumores mamários caninos

Mammary tumors have a high prevalence in bitches and women, and are related to high rates of morbidity and mortality. For the human species, thermography has stood out as a diagnostic tool for breast cancer. However, its clinical benefit in bitches remains unknown. Thus, the goal of the present study was to evaluate the diagnostic applicability of infrared thermography for canine mammary tumors, as well as to correlate tumor temperature with mitotic index and tumor volume. Thermographic and digital images of eight bitches with mammary neoplasms were captured. Thermograms were entered into the FLIR tools software and the temperature of 15 tumor and 15 healthy glands from the contralateral mammary chain was analyzed. There was no significant difference (p = 0.786) between the mean temperature of neoplastic (33.71°C ± 1.86) and healthy (33.54°C ± 1.59) glands. There was a negative and moderate correlation between tumor temperature and mitotic index (ρ = -0.52 p = 0.049). However, no correlation was detected between mammary temperature and tumor volume (p = 0.10). Although thermography allowed no distinction between neoplastic and healthy mammary glands in bitches, it may be promising to assess the proliferative rate of tumors. In addition, malignant neoplasms may be more often hypothermic than healthy tissue.(AU)

Os tumores mamários apresentam alta prevalência em cadelas e mulheres, sendo relacionados a elevadas taxas de morbidade e mortalidade. Para a espécie humana, a termografia tem se destacado como ferramenta diagnóstica do câncer de mama. Entretanto, o seu benefício clínico em cadelas permanece desconhecido. Assim, o objetivo do presente estudo foi ava-liar a aplicabilidade diagnóstica da termografia infravermelha para os tumores mamários caninos, bem como correlacionar a temperatura tumoral com o índice mitótico e volume tumoral. Foram capturadas imagens termográficas e digitais de oito cadelas com neoplasias mamárias. Os termogramas foram inseridos no software FLIR tools e analisou-se a temperatura de 15 mamas tumorais e 15 hígidas da cadeia mamária contralateral. Não houve diferença significativa (p = 0,786) entre a tempera-tura média das glândulas neoplásicas (33,71°C ± 1,86) e saudáveis (33,54°C ± 1,59). Houve correlação negativa e moderada entre a temperatura tumoral e índice mitótico (ρ = -0,52 p = 0,049). Entretanto, não foi observada correlação entre tempe-ratura e volume tumoral (p = 0,10). Apesar da termografia não ter permitido a diferenciação das mamas neoplásicas e saudá-veis de cadelas, ela pode ser uma forma promissora para avaliação da taxa proliferativa dos tumores. Além disso, as neoplasias malignas podem apresentar-se mais frequentemente hipotérmicas em relação ao tecido saudável.(AU)

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L. system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

Abstract For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados ​​contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L. system

Abstract For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-1 and 1.0 mg mL-1 MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-1). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-1, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Resumo Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-1 e 1,0 mg mL-1 foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-1 de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-1, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-¹ and 1.0 mg mL-¹ MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-¹). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-¹, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.

Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-¹ e 1,0 mg mL-¹ foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-¹ de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-¹, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.

Integrative analysis in toxicological assessment of the insecticide Malathion in Allium cepa L system / Análise integrativa na avaliação toxicológica do inseticida Malation no sistema Allium cepa L

For many centuries human populations have been suffering and trying to fight with disease-bearing mosquitoes. Emerging and reemerging diseases such as Dengue, Zika, and Chikungunya affect billions of people around the world and recently has been appealing to control with chemical pesticides. Malathion (MT) is one of the main pesticides used against mosquitoes, the vectors of these diseases. This study aimed to assess cytotoxicity and mutagenicity of the malathion for the bioindicator Allium cepa L. using a multivariate and integrative approach. Moreover, an appendix table was compiled with all available literature of insecticides assessed by the Allium cepa system to support our discussion. Exposures during 48h to 0.5 mg mL-¹ and 1.0 mg mL-¹ MT were compared to the negative control (distilled water) and positive control (MMS solution at 10 mg L-¹). The presence of chromosomal aberrations, micronuclei frequency, and mitotic index abnormalities was evaluated. Anaphase bridges were the alterations with higher incidence and presented a significantly elevated rate in the concentration of 0.5 mg mL-¹, including when compared to the positive control. The integrative discriminant analysis summarizes that MT in assessed concentrations presented effects like the positive control, corroborating its potential of toxicity to DNA. Therefore, it is concluded that MT in its pure composition and in realistic concentrations used, has genotoxic potential in the biological assessment of A. cepa cells. The multivariate integrative analysis was fundamental to show a whole response of all data, providing a global view of the effect of MT on DNA.(AU)

Por muitos séculos, as populações humanas sofrem e tentam combater os mosquitos transmissores de doenças. Doenças emergentes e reemergentes como Dengue, Zika e Chikungunya afetam bilhões de pessoas em todo o mundo e, recentemente, vem apelando ao controle com pesticidas químicos. O Malation (MT) é um dos principais pesticidas usados contra mosquitos, vetores dessas doenças. O objetivo deste estudo foi avaliar a citotoxicidade e a mutagenicidade do MT para o bioindicador Allium cepa L. usando uma abordagem multivariada e integrativa. Além disso, uma tabela suplementar foi compilada com toda a literatura disponível de inseticidas avaliada pelo sistema Allium cepa para apoiar nossa discussão. Exposições ao MT durante 48h a 0,5 mg mL-¹ e 1,0 mg mL-¹ foram comparadas a um controle negativo (água destilada) e um controle positivo (10 mg L-¹ de MMS). Foram avaliadas a presença de aberrações cromossômicas, frequência de micronúcleos e anormalidades no índice mitótico. As pontes anafásicas foram as alterações com maior incidência e apresentaram uma taxa significativamente elevada na concentração de 0,5 mg mL-¹, inclusive quando comparadas ao controle positivo. A análise discriminante integrativa resume que o MT nas concentrações avaliadas apresentou efeitos semelhantes ao controle positivo, corroborando seu potencial de toxicidade para o DNA. Portanto, conclui-se que o MT, em sua composição pura e nas concentrações realistas utilizadas, possui potencial genotóxico na avaliação biológica de células de A. cepa. A análise integrativa multivariada foi fundamental para mostrar uma resposta completa de todos os dados, fornecendo uma visão global do efeito da MT no DNA.(AU)

Chemical composition and phytotoxicity of essential oils of Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae)

Abstract Essential oils from the stems and leaves of Croton doctoris were analyzed by gas chromatography and mass spectrometry, resulting in 22 identified compounds. The effects of these essential oils on the germination, root and shoot growth, total chlorophyll content, potential root respiration, peroxidase activity, catalase, superoxide dismutase, and mitotic index in lettuce and onion were determined. Antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic activity were also investigated. The results revealed that the stem oil consisted of 15 compounds, of which caryophyllene oxide (24.5%) and E-caryophyllene (13.3%) were the major constituents. The leaf oil contained E-caryophyllene (39.6%) and -humulene (13.2%) as major compounds. The oils inhibited the germination and growth of lettuce and onion seedlings and reduced chlorophyll content, root respiration, and cell division. They also caused oxidative stress, indicated by the increased activity of the evaluated antioxidant enzymes. These abnormal physiological processes contributed to the inhibition of plant growth. The most pronounced phytotoxic effects were observed in the stem oil. The cytotoxicity tests indicated that leaf oil was more active than stem oil, resulting from the presence of biologically active sesquiterpenes that inhibit the growth of cancer cells.

Resumo Os óleos essenciais do caule e da folha de Croton doctoris foram analisados por cromatografia gasosa (GC) e espectrometria de massa (GC-MS) resultando em 22 compostos identificados. Os efeitos dos óleos essenciais na germinação, crescimento de raízes e parte aérea, teor total de clorofila, respiração radicular, atividade de peroxidase, catalase e superóxido de dimetase e índice mitótico foram determinados em alface e cebola. Atividade antioxidante, antimicrobiana e citotóxica também foram investigadas. Os resultados revelaram que o óleo do caule é constituído por 15 compostos, dos quais os principais são o óxido de cariofileno (24,5%) e E-cariofileno (13,3%). O óleo foliar apresentou E-cariofileno (39,6%) seguido de -humuleno (13,2%) como compostos majoritários. Os óleos inibiram a germinação e o crescimento das plântulas de alface e cebola e reduziram o conteúdo de clorofila, a respiração radicular e a divisão celular. Eles também causaram estresse oxidativo, indicado pelo aumento da atividade das enzimas antioxidantes avaliadas. Esses processos fisiológicos anormais contribuem para a inibição do crescimento das plantas. Os efeitos fitotóxicos mais pronunciados foram observados no óleo do caule. Nos testes de citotoxicidade observou-se que o óleo das folhas foi mais ativo, resultante da presença de sesquiterpenos biologicamente ativos que atuam inibindo o crescimento das células cancerígenas.

Chemical composition and phytotoxicity of essential oils of Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae) / Composição química e fitotoxicidade dos óleos essenciais de Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae)

Essential oils from the stems and leaves of Croton doctoris were analyzed by gas chromatography and mass spectrometry, resulting in 22 identified compounds. The effects of these essential oils on the germination, root and shoot growth, total chlorophyll content, potential root respiration, peroxidase activity, catalase, superoxide dismutase, and mitotic index in lettuce and onion were determined. Antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic activity were also investigated. The results revealed that the stem oil consisted of 15 compounds, of which caryophyllene oxide (24.5%) and E-caryophyllene (13.3%) were the major constituents. The leaf oil contained E-caryophyllene (39.6%) and α-humulene (13.2%) as major compounds. The oils inhibited the germination and growth of lettuce and onion seedlings and reduced chlorophyll content, root respiration, and cell division. They also caused oxidative stress, indicated by the increased activity of the evaluated antioxidant enzymes. These abnormal physiological processes contributed to the inhibition of plant growth. The most pronounced phytotoxic effects were observed in the stem oil. The cytotoxicity tests indicated that leaf oil was more active than stem oil, resulting from the presence of biologically active sesquiterpenes that inhibit the growth of cancer cells.

Os óleos essenciais do caule e da folha de Croton doctoris foram analisados por cromatografia gasosa (GC) e espectrometria de massa (GC-MS) resultando em 22 compostos identificados. Os efeitos dos óleos essenciais na germinação, crescimento de raízes e parte aérea, teor total de clorofila, respiração radicular, atividade de peroxidase, catalase e superóxido de dimetase e índice mitótico foram determinados em alface e cebola. Atividade antioxidante, antimicrobiana e citotóxica também foram investigadas. Os resultados revelaram que o óleo do caule é constituído por 15 compostos, dos quais os principais são o óxido de cariofileno (24,5%) e E-cariofileno (13,3%). O óleo foliar apresentou E-cariofileno (39,6%) seguido de α-humuleno (13,2%) como compostos majoritários. Os óleos inibiram a germinação e o crescimento das plântulas de alface e cebola e reduziram o conteúdo de clorofila, a respiração radicular e a divisão celular. Eles também causaram estresse oxidativo, indicado pelo aumento da atividade das enzimas antioxidantes avaliadas. Esses processos fisiológicos anormais contribuem para a inibição do crescimento das plantas. Os efeitos fitotóxicos mais pronunciados foram observados no óleo do caule. Nos testes de citotoxicidade observou-se que o óleo das folhas foi mais ativo, resultante da presença de sesquiterpenos biologicamente ativos que atuam inibindo o crescimento das células cancerígenas.

Chemical composition and phytotoxicity of essential oils of Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae) / Composição química e fitotoxicidade dos óleos essenciais de Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae)

Essential oils from the stems and leaves of Croton doctoris were analyzed by gas chromatography and mass spectrometry, resulting in 22 identified compounds. The effects of these essential oils on the germination, root and shoot growth, total chlorophyll content, potential root respiration, peroxidase activity, catalase, superoxide dismutase, and mitotic index in lettuce and onion were determined. Antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic activity were also investigated. The results revealed that the stem oil consisted of 15 compounds, of which caryophyllene oxide (24.5%) and E-caryophyllene (13.3%) were the major constituents. The leaf oil contained E-caryophyllene (39.6%) and α-humulene (13.2%) as major compounds. The oils inhibited the germination and growth of lettuce and onion seedlings and reduced chlorophyll content, root respiration, and cell division. They also caused oxidative stress, indicated by the increased activity of the evaluated antioxidant enzymes. These abnormal physiological processes contributed to the inhibition of plant growth. The most pronounced phytotoxic effects were observed in the stem oil. The cytotoxicity tests indicated that leaf oil was more active than stem oil, resulting from the presence of biologically active sesquiterpenes that inhibit the growth of cancer cells.(AU)

Os óleos essenciais do caule e da folha de Croton doctoris foram analisados por cromatografia gasosa (GC) e espectrometria de massa (GC-MS) resultando em 22 compostos identificados. Os efeitos dos óleos essenciais na germinação, crescimento de raízes e parte aérea, teor total de clorofila, respiração radicular, atividade de peroxidase, catalase e superóxido de dimetase e índice mitótico foram determinados em alface e cebola. Atividade antioxidante, antimicrobiana e citotóxica também foram investigadas. Os resultados revelaram que o óleo do caule é constituído por 15 compostos, dos quais os principais são o óxido de cariofileno (24,5%) e E-cariofileno (13,3%). O óleo foliar apresentou E-cariofileno (39,6%) seguido de α-humuleno (13,2%) como compostos majoritários. Os óleos inibiram a germinação e o crescimento das plântulas de alface e cebola e reduziram o conteúdo de clorofila, a respiração radicular e a divisão celular. Eles também causaram estresse oxidativo, indicado pelo aumento da atividade das enzimas antioxidantes avaliadas. Esses processos fisiológicos anormais contribuem para a inibição do crescimento das plantas. Os efeitos fitotóxicos mais pronunciados foram observados no óleo do caule. Nos testes de citotoxicidade observou-se que o óleo das folhas foi mais ativo, resultante da presença de sesquiterpenos biologicamente ativos que atuam inibindo o crescimento das células cancerígenas.(AU)

Chemical composition and phytotoxicity of essential oils of Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae) / Composição química e fitotoxicidade dos óleos essenciais de Croton doctoris S. Moore (Euphorbiaceae)

Essential oils from the stems and leaves of Croton doctoris were analyzed by gas chromatography and mass spectrometry, resulting in 22 identified compounds. The effects of these essential oils on the germination, root and shoot growth, total chlorophyll content, potential root respiration, peroxidase activity, catalase, superoxide dismutase, and mitotic index in lettuce and onion were determined. Antioxidant, antimicrobial, and cytotoxic activity were also investigated. The results revealed that the stem oil consisted of 15 compounds, of which caryophyllene oxide (24.5%) and E-caryophyllene (13.3%) were the major constituents. The leaf oil contained E-caryophyllene (39.6%) and α-humulene (13.2%) as major compounds. The oils inhibited the germination and growth of lettuce and onion seedlings and reduced chlorophyll content, root respiration, and cell division. They also caused oxidative stress, indicated by the increased activity of the evaluated antioxidant enzymes. These abnormal physiological processes contributed to the inhibition of plant growth. The most pronounced phytotoxic effects were observed in the stem oil. The cytotoxicity tests indicated that leaf oil was more active than stem oil, resulting from the presence of biologically active sesquiterpenes that inhibit the growth of cancer cells.

Os óleos essenciais do caule e da folha de Croton doctoris foram analisados por cromatografia gasosa (GC) e espectrometria de massa (GC-MS) resultando em 22 compostos identificados. Os efeitos dos óleos essenciais na germinação, crescimento de raízes e parte aérea, teor total de clorofila, respiração radicular, atividade de peroxidase, catalase e superóxido de dimetase e índice mitótico foram determinados em alface e cebola. Atividade antioxidante, antimicrobiana e citotóxica também foram investigadas. Os resultados revelaram que o óleo do caule é constituído por 15 compostos, dos quais os principais são o óxido de cariofileno (24,5%) e E-cariofileno (13,3%). O óleo foliar apresentou E-cariofileno (39,6%) seguido de α-humuleno (13,2%) como compostos majoritários. Os óleos inibiram a germinação e o crescimento das plântulas de alface e cebola e reduziram o conteúdo de clorofila, a respiração radicular e a divisão celular. Eles também causaram estresse oxidativo, indicado pelo aumento da atividade das enzimas antioxidantes avaliadas. Esses processos fisiológicos anormais contribuem para a inibição do crescimento das plantas. Os efeitos fitotóxicos mais pronunciados foram observados no óleo do caule. Nos testes de citotoxicidade observou-se que o óleo das folhas foi mais ativo, resultante da presença de sesquiterpenos biologicamente ativos que atuam inibindo o crescimento das células cancerígenas.

Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).

Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).(AU)

Adenocarcinoma renal papilar em um cão - relato de caso / Papillar renal adenocarcinoma in a dog - case report

O trabalho teve como objetivo relatar um caso de adenocarcinoma renal papilar em um cão macho da raça labrador. O animal foi atendido em uma clínica veterinária de Campo Mourão – PR, com queixa principal de hematúria e perda de peso durante quatro meses. No exame físico o animal apresentou aumento de volume intra-abdominal localizado, de consistência firme e desconforto abdominal à palpação. No exame ultrassonográfico, evidenciou-se a presença de cristais, e pequenos cálculos vesicais urinários, inflamação da parede da vesícula urinária e visualizado uma massa localizada em quadrante abdominal caudal esquerdo em região mesogástrica de difícil delimitação e possivelmente envolvendo o rim esquerdo. Foi realizado o procedimento de laparotomia exploratória e na inspeção da cavidade observou-se significativo aumento de volume do rim esquerdo, realizando o procedimento de nefrectomia unilateral esquerda. Uma amostra deste rim foi enviada para análise histopatológica a um Laboratório de Patologia Animal. Nesta avaliação foram observadas células neoplásicas, características por serem poliédricas e exibirem núcleo grande oval, citoplasma pouco abundante eosinofílico, formam estruturas tubulares e projeções intraluminais papiliformes irregulares. O índice mitótico é de 1 – 2 fm./ 40x, observa-se também desmoplasia foco de necrose tumoral, sendo conclusivo de adenocarcinoma renal papilar. Conclui-se que o exame histopatológico é de suma importância para o diagnóstico desta neoplasia. E o adenocarcinoma renal papilar causa uma lesão grave no rim, podendo ocorrer metástase para outros órgãos e levar o animal a morte.

This study aimed to report a case of papillary renal adenocarcinoma in a male labrador dog. The animal was treated at a veterinary clinic in Campo Mourão - PR, with the main complaint of hematuria and weight loss for four months. On physical examination the animal showed localized intra-abdominal volume increase, firm consistency and abdominal discomfort on palpation. The ultrasound examination evinced the presence of crystals, and small urinary bladder stones, inflammation of the urinary bladder wall and it was visualized a mass located in the left caudal abdominal quadrant in the mesogastric region, hardly delimited and possibly involving the left kidney. Exploratory laparotomy and cavity inspection were performed, which significantly increased the volume of the left kidney, performing the left unilateral nephrectomy procedure. A sample of this kidney was sent for histopathological analysis at the Animal Pathology Laboratory. In this evaluation, neoplastic cells, polymer resources and large oval nucleus display, sparse eosinophilic cytoplasm, tubular forms and irregular papilliform intraluminal projections were observed. The mitotic index is 1 - 2 fm./40x, as well as focal desmoplasia of tumor necrosis. Being conclusive of renal papillary adenocarcinoma. To conclude that histopathological examination is extremely important for the diagnosis of this neoplasia. And renal papillary adenocarcinoma causes severe kidney damage, metastasis to other organs can lead to death.

Adenocarcinoma renal papilar em um cão - relato de caso / Papillar renal adenocarcinoma in a dog - case report

O trabalho teve como objetivo relatar um caso de adenocarcinoma renal papilar em um cão macho da raça labrador. O animal foi atendido em uma clínica veterinária de Campo Mourão PR, com queixa principal de hematúria e perda de peso durante quatro meses. No exame físico o animal apresentou aumento de volume intra-abdominal localizado, de consistência firme e desconforto abdominal à palpação. No exame ultrassonográfico, evidenciou-se a presença de cristais, e pequenos cálculos vesicais urinários, inflamação da parede da vesícula urinária e visualizado uma massa localizada em quadrante abdominal caudal esquerdo em região mesogástrica de difícil delimitação e possivelmente envolvendo o rim esquerdo. Foi realizado o procedimento de laparotomia exploratória e na inspeção da cavidade observou-se significativo aumento de volume do rim esquerdo, realizando o procedimento de nefrectomia unilateral esquerda. Uma amostra deste rim foi enviada para análise histopatológica a um Laboratório de Patologia Animal. Nesta avaliação foram observadas células neoplásicas, características por serem poliédricas e exibirem núcleo grande oval, citoplasma pouco abundante eosinofílico, formam estruturas tubulares e projeções intraluminais papiliformes irregulares. O índice mitótico é de 1 2 fm./ 40x, observa-se também desmoplasia foco de necrose tumoral, sendo conclusivo de adenocarcinoma renal papilar. Conclui-se que o exame histopatológico é de suma importância para o diagnóstico desta neoplasia. E o adenocarcinoma renal papilar causa uma lesão grave no rim, podendo ocorrer metástase para outros órgãos e levar o animal a morte.(AU)

This study aimed to report a case of papillary renal adenocarcinoma in a male labrador dog. The animal was treated at a veterinary clinic in Campo Mourão - PR, with the main complaint of hematuria and weight loss for four months. On physical examination the animal showed localized intra-abdominal volume increase, firm consistency and abdominal discomfort on palpation. The ultrasound examination evinced the presence of crystals, and small urinary bladder stones, inflammation of the urinary bladder wall and it was visualized a mass located in the left caudal abdominal quadrant in the mesogastric region, hardly delimited and possibly involving the left kidney. Exploratory laparotomy and cavity inspection were performed, which significantly increased the volume of the left kidney, performing the left unilateral nephrectomy procedure. A sample of this kidney was sent for histopathological analysis at the Animal Pathology Laboratory. In this evaluation, neoplastic cells, polymer resources and large oval nucleus display, sparse eosinophilic cytoplasm, tubular forms and irregular papilliform intraluminal projections were observed. The mitotic index is 1 - 2 fm./40x, as well as focal desmoplasia of tumor necrosis. Being conclusive of renal papillary adenocarcinoma. To conclude that histopathological examination is extremely important for the diagnosis of this neoplasia. And renal papillary adenocarcinoma causes severe kidney damage, metastasis to other organs can lead to death.(AU)

Lycopene and resveratrol pretreatment did not interfere with the liver of hepatectomized rats

Purpose: To investigate the effects of lycopene and resveratrol pretreatment on hepatic hyperplasia in partially hepatectomized rats. Methods: The lycopene group and the resveratrol group received 40 mg/kg/day of lycopene or resveratrol, respectively (dissolved in olive oil or in saline solution, respectively) and administered via a gastric tube for 30 days. The partially hepatectomzed (PH) control groups received saline or olive oil via a gastric tube for 30 days, respectively, and the normal control group received no treatment. Liver tissue and intracardiac blood samples were obtained 24, 36 or 48 h after PH. Results: No areas of fibrosis were detected. No significant changes in mitotic index, in the number of apoptosis events or in aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase levels were observed. Conclusions: Lycopene and resveratrol pretreatment did not interfere on hepatic hyperplasia in partially hepatectomized rats.(AU)

Antiproliferative and genotoxic effects of nature identical and artificial synthetic food additives of aroma and flavor / Efeito antiproliferativo e genotóxico de aditivos alimentares de aroma e sabor sintéticos, dos tipos idêntico ao natural e artificial

This study aimed to analyze the antiproliferative and genotoxic potential of synthetic food flavorings, nature identical passion fruit and artificial vanilla. This assessment used root meristem cells of Allium cepa L., in exposure times of 24 and 48 hours and using doses of 0.2; 0.4 and 0.6 mL. Roots were fixed in Carnoys solution, hydrolyzed in hydrochloric acid, stained with acetic orcein and analyzed with optical microscope at 400× magnification, 5,000 cells for each treatment. For data analysis, it was used Chi-square test at 5%. Doses of 0.2 mL at ET 48 h; 0.4 and 0.6 mL at ET 24 and 48 h of passion fruit flavor, and the three doses of the vanilla flavor at ET 24 and 48 h significantly reduced the cell division rate in the meristems of roots, proving to be cytotoxic. Doses of 0.2; 0.4 and 0.6 mL of the passion fruit additive, and the three doses of vanilla tested, in the two exposure times, induced mitotic spindle changes and micronuclei formation in the cells of the test organism used, proving to be genotoxic. Therefore, under the studied conditions, flavoring solutions of vanilla and passion fruit, marketed nationally and internationally, significantly altered the functioning of the cell cycle in root meristem cells of A. cepa.(AU)

Neste trabalho teve-se por objetivo analisar o potencial antiproliferativo e genotóxico de aromatizantes alimentares sintéticos, idêntico ao natural de Maracujá, e artificial de Baunilha. Esta avaliação foi realizada por meio das células meristemáticas de raízes de Allium cepa L., nos tempos de exposição de 24 e 48 horas e nas doses de 0,2; 0,4 e 0,6 ml. As raízes foram fixadas em solução de Carnoy, hidrolisadas em ácido clorídrico e coradas com orceína acética. Analisou-se, em microscópio óptico em aumento de 400×, 5.000 células por grupo tratamento, e utilizou-se o teste estatístico Qui-quadrado a 5% para análise dos dados. Verificou-se que as doses de 0,2 ml, no TE 48 h; 0,4 e 0,6 ml, nos TE 24 e 48 h, do aromatizante de Maracujá, e as três doses analisadas, nos TE 24 e 48 h, do aditivo de Baunilha reduziram significativamente o índice de divisão celular dos meristemas de raízes, mostrando-se citotóxicas. As doses 0,2; 0,4 e 0,6 ml do aditivo de Maracujá, e a de 0,6 ml do aromatizante de Baunilha, nos dois tempos de exposição considerados, induziram alterações de fuso mitótico e micronúcleos as células do organismo de prova utilizado, mostrando-se genotóxicas. Portanto, nas condições analisadas, as soluções aromatizantes de Baunilha e Maracujá, comercializadas nacional e internacionalmente, alteraram significativamente o funcionamento do ciclo celular das células meristemáticas de raízes de A. cepa.(AU)

Cytotoxic and genotoxic effects of Solanum lycocarpum St.-Hil (Solanaceae) on the cell cycle of Lactuca sativa and Allium cepa / Efeito citotóxicos e genotóxicos de extratos Solanum lycocarpum St.-Hil (Solanaceae) nociclo celular de Lactuca sativa e Allium cepa

Solanum lycocarpum St.-Hil popularly known as fruta-de-lobo or lobeira is native to the Brazilian Cerrado, and used in folk medicine due to its phytotherapic properties. The action of S. lycocarpum on the cell cycle and chromosomes in order to demonstrate whether there are aneugenic and/or clastogenic effects is unknown. Thus, this study aimed at investigating the cytotoxic and genotoxic potential of methanol and hexane extracts of S. lycocarpum on growth and cell cycle of Lactuca sativa and Allium cepa. Roots from both species were exposed for 72 hours to methanol and hexane extracts with 50, 100, and 200 µg mL-1 of S. lycocarpum. Slides were prepared by the squash technique and then analyzed to determine the mitotic index and the total of chromosomal and nuclear abnormalities. The frequencies of chromosomal and nuclear abnormalities were high and significant with a dose-dependent effect, indicating that S. lycocarpum has a cytotoxic and genotoxic action depending on the dose used on meristem cells of A. cepa and L. sativa.(AU)

Solanum lycocarpum St.-Hil (Solanaceae) conhecida popularmente como fruta-de-lobo ou lobeira é uma planta nativa do Cerrado brasileiro, utilizada na medicina popular nos tratamentos de diabetes, obesidade e redução do colesterol. Ainda não é conhecida a ação de S. lycocarpum sobre o ciclo celular e os cromossomos, demonstrando se possuem efeitos aneugênicos e/ou clastogênicos. O objetivo desse estudo foi investigar o potencial citotóxico e genotóxico dos extratos metanólico e hexânico de S. lycocarpum sob o crescimento e ciclo celular de Lactuca sativa e Allium cepa. As raízes de ambas as espécies foram expostas por 72h aos extratos metanólico e hexânico com 50, 100 e 200 μg mL-1 de S. lycocarpum. As lâminas foram montadas pela técnica de esmagamento e em seguida foram analisadas, afim de determinar o índice mitótico e anormalidades cromossômicas e nucleares. As frequências de anormalidades cromossômicas e nucleares foram altas e significativas, com efeito dose-dependente e confirmando que S. lycocarpum tem ação citotóxica e genotóxica de acordo com a dose utilizada sobre as células meristemáticas de A. cepa e L. sativa.(AU)

Evaluation of cytotoxicity and genotoxicity of Hancornia speciosa latex in Allium cepa root model

Abstract The latex obtained from Hancornia speciosa Gomes (Mangabeira tree) is widely used in traditional medicine to treat a variety of diseases, including diarrhea, ulcer, gastritis, tuberculosis, acne and warts. In this study, the cytotoxicity and genotoxicity effects of H. speciosa latex on the root meristem cells of Allium cepa were examined. Onion bulbs were exposed to different concentrations of latex and then submitted to microscopic analysis using Giemsa stain. Water was used as a negative control and sodium azide as a positive control. The results showed that, under the testing conditions, the mitotic index (MI) of the onion roots submitted to latex treatment did not differ significantly from the negative control, which suggests that the latex is not cytotoxic. Low incidence of chromosome aberrations in the cells treated with H. speciosa latex was also observed, indicating that the latex does not have genotoxic effect either. The MI and the chromosome aberration frequency responded to the latex concentration, requiring more studies to evaluate the dosage effect on genotoxicity. The results indicate that in tested concentrations H. speciosa latex is probably not harmful to human health and may be potentially used in medicine.

Resumo O látex obtido de Hancornia speciosa é amplamente utilizado na medicina popular para tratar uma variedade de doenças, tais como: diarreia, úlcera, gastrite, tuberculose, acne e verrugas. Nesse estudo, foram avaliados os efeitos citotóxicos e genotóxicos do látex de H. speciosa sobre as células meristemáticas das raízes de Allium cepa. Os bulbos das cebolas foram expostos a diferentes concentrações de látex e depois submetidos à analise microscópica usando o corante Giemsa. A água foi usada como controle negativo e a ázida sódica como controle positivo. Os resultados mostraram que o índice mitótico (IM) das raízes de cebola submetidas ao tratamento com látex, nas condições testadas, não diferiram significativamente do controle negativo, e sugerem que o látex não é citotóxico. Também foi observada uma baixa incidência de aberrações cromossômicas nas células tratadas com látex de H. speciosa, o que sugere que o látex também não possui efeito genotóxico. O IM e a frequência de aberrações cromossômicas foram dependentes da concentração de látex. Outros estudos devem ser realizados para avaliar o efeito da dose na genotoxidade. Os resultados indicam que o látex de mangabeira, nas concentrações testadas, provavelmente não é danoso para saúde humana e pode ter potencial para ser usado na medicina.

ASPECTOS ANÁTOMO-PATOLÓGICOS E AVALIAÇÃO DA FRAÇÃO DE CRESCIMENTO (KI-67) DAS NEOPLASIAS MELANOCÍTICAS DIAGNOSTICADAS EM CÃES NO SETOR DE ANATOMIA PATOLÓGICA DA UFRRJ (1999-2020).

As neoplasias melanocíticas originam-se da proliferação de melanoblastos e melanócitos e são nomeadas melanomas, quando malignas e melanocitomas, quando benignas. Os melanomas correspondem a 7% das neoplasias malignas em cães, o que torna essencial estudo acerca destes tumores. Uma vez que expressam comportamento agressivo e histologia variável, exames complementares são necessários para o estabelecimento do diagnóstico e prognóstico. A atividade mitótica pode ser um importante critério de valor prognóstico para os melanomas, pois estima a taxa de proliferação celular. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram realizar um estudo dos tumores melanocíticos diagnosticados em cães no Setor de Anatomia Patológica (SAP) entre janeiro de 1999 a agosto de 2020, avaliar a fração de crescimento dessas neoplasias determinado pelo Ki-67 (MIB-1) e correlacioná-lo com a localização e critérios histológicos associados à gravidade. Além disso, objetivou-se estabelecer um método de contagem único e amplo para todos os tipos da neoplasia e suas localizações mais comuns. Foram avaliados os históricos, laudos de necropsias e biópsias e reavaliadas as lâminas coradas com hematoxilina e eosina (HE). Todos os dados, incluindo os epidemiológicos, foram compilados. Os melanomas amelanóticos foram submetidos ao exame imunohistoquímico com anticorpo Melan-A. Em seguida, realizou-se imuno-histoquímica com Ki- 67 e as lâminas foram contracoradas com Giemsa. Calculou-se a fração de crescimento do Ki- 67 ao contar as células em 10 campos aleatórios de cada lâmina em objetivas de 40x. Do total de 78 casos de neoplasias melanocíticas do SAP, 32 localizavam-se em cavidade oral, 29 em pele, nove em leito ungueal e as demais em locais variados, totalizando 41 fêmeas e 37 machos. Os cães SRD (29) foram os mais acometidos. A idade foi informada em 70 fichas e variou de três a 19 anos. Em 48 casos foi possível analisar as características histopatológicas. Com relação ao aspecto morfológico, os tumores foram classificados em fusiforme (um caso), epitelióide (11 casos) ou misto (35 casos). O pleomorfismo foi acentuado em 36,9% das neoplasias e a média das mitoses, de todos os campos, foi de 10,5. Em 36/78 casos (33 melanomas e três melanocitomas) foi realizada a técnica imuno-histoquímica para Ki-67. Destes, 12 apresentaram resultado positivo: três melanomas amelanóticos, oito melanomas melanóticos e um melanocitoma. Após análise estatística, verificou-se que o resultado corroborou com a literatura, visto que a variante maligna apresentou maior fração de crescimento celular, maior índice mitótico que a variante benigna, além das demais alterações histológicas observadas. Sabe-se que, quando o valor da fração de crescimento do tumor encontra-se 15%, indica prognóstico desfavorável e está relacionado com índice mitótico 3 em 10 campos na objetiva de 40x. Em quatro casos de melanomas, a fração de crescimento corresponderam a 15,28%, 15,87%, 19,13%, e 51,3% e os índices mitóticos resultaram 5, 30, 60 e 70. Conclui-se que neoplasias melanocíticas são distribuídas igualmente em ambos os gêneros, acometem predominantemente cães a partir de três anos de idade e o local mais frequente da lesão é a cavidade oral, seguido por pele e leito ungueal. No que diz respeito às neoplasias melanocíticas diagnosticadas nos últimos 22 anos no Setor de Anatomia Patológica da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, pôde-se observar que os aspectos epidemiológicos relacionados ao sexo, idade, raça e localização corroboram com aqueles descritos na literatura, assim como os sítios de metástase. O melanoma melanótico foiiii observado com mais frequência, semelhante ao relatada na literatura mundial. A morfologia celular mais observada no presente estudo foi do tipo misto, diferentemente da maioria dos relatos, onde a mais frequente é a forma epitelióide. A fração de crescimento determinada pela contagem de mitoses e imunorreatividade ao Ki-67 variou significativamente entre tumores melanocíticos localizados na cavidade oral e pele. Na variante benigna, o índice proliferativo foi menor quando comparado com as neoplasias malignas e o método de contagem utilizado neste trabalho mostrou-se efetivo para todos os tipos de neoplasias melanocíticas estudadas independente da localização.

Melanocytic neoplasms originate from the proliferation of melanoblasts and melanocytes and are named melanomas when malignant and melanocytomas when benign. Melanomas account for 7% of malignant neoplasms in dogs, which makes it essential to study these tumors. Since they express aggressive behavior and variable histology, complementary tests are necessary for the establishment of diagnosis and prognosis. Mitotic activity may be an important criterion of prognostic value for melanomas, since it estimates the cell proliferation rate. Thus, the objectives of this work were to perform a study of melanocytic tumors diagnosed in dogs in the Sector of Pathological Anatomy (SAP) between January 1999 and August 2020, evaluate the growth fraction of these neoplasms determined by Ki-67 (MIB-1) and correlate it with the location and histological criteria associated with severity. In addition, we aimed to establish a single, comprehensive counting method for all types of the neoplasm and its most common locations. Histories, necropsy and biopsy reports were evaluated, and slides stained with hematoxylin and eosin (HE) were reevaluated. All data, including epidemiological data, were compiled. Amelanotic melanomas were subjected to immunohistochemical examination with Melan-A antibody. Then immunohistochemistry with Ki-67 was performed and the slides were counterstained with Giemsa. The growth fraction Ki-67 was calculated by counting the cells in 10 random fields of each slide under 40x objectives. Of the total 78 cases of SAP melanocytic neoplasms, 32 were located in the oral cavity, 29 in the skin, nine in the nail bed, and the rest in varied sites, totaling 41 females and 37 males. SRD dogs (29) were the most affected. The age was reported in 70 files and ranged from three to 19 years. In 48 cases it was possible to analyze the histopathological characteristics. Regarding the morphological aspect, the tumors were classified as fusiform (one case), epithelioid (11 cases) or mixed (35 cases). Pleomorphism was marked in 36.9% of the neoplasms and the mean number of mitoses, of all fields, was 10.5. In 36/78 cases (33 melanomas and three melanocytomas) the immunohistochemical technique for Ki-67 was performed. Of these, 12 were positive: three amelanotic melanomas, eight melanotic melanomas and one melanocytoma. When considering the Ki-67 growth fraction obtained and correlating the mitoses with the histological diagnosis, the result corroborated the literature, since the malignant variant presented more pronounced parameters than the benign variant. It is known that when the cell growth fraction value is 15%, it indicates unfavorable prognosis and is related to mitotic index 3 in 10 fields at 40x objective. In four melanoma cases, the proliferation indices corresponded to 15.28%, 15.87%, 19.13%, and 51.3% and the mitotic indices resulted 5, 30, 60, and 70. We conclude that melanocytic neoplasms are equally distributed in both genders, predominantly affect dogs over three years of age, and the most frequent site of the lesion is the oral cavity, followed by the skin and the nail bed. Regarding melanocytic neoplasms diagnosed in the last 22 years in the Pathology Sector of the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro, it could be observed that the epidemiological aspects related to sex, age, breed and location corroborate those described in the literature, as well as the metastasis sites. Melanotic melanoma was observed more frequently, similar to that reported in the world literature. The cell morphology most commonly observed in the present study was the mixed type, unlike most reports, where the epithelioid form is most frequent. The growth fraction determined by mitosis count and Ki-67 immunoreactivityv varied significantly between melanocytic tumors located in the oral cavity and skin. In the benign variant, the proliferative index was lower when compared to malignant neoplasms and the counting method used in this study proved to be effective for all types of melanocytic neoplasms studied regardless of location.

AVALIAÇÃO DA ACETILAÇÃO DAS HISTONAS H3 E H4 E EXPRESSÃO DAS ENZIMAS HISTONAS DESACETILASES HDAC1, HDAC2 E HDAC6 NO LINFOMA MULTICIÊNTRICO CANINO

Alterações epigenéticas são associadas aos processos de carcinogênese e a acetilação das histonas é um dos mecanismos mais estudados, ocorrendo de acordo com a atividade das enzimas histonas acetilases (HAT) e histonas desacetilases (HDAC). O aumento na expressão e/ou atuação aberrante das HDAC interferem diretamente na regulação transcricional, podem fornecer condições para o desenvolvimento tumoral e tornaram-se alvos de estudos para intervenção terapêutica. No linfoma difuso de grandes células B (LDGCB), em humanos, alterações nos mecanismos epigenéticos de acetilação das histonas já foram identificadas e associadas ao pior prognóstico dos pacientes. Porém, em cães ainda são escassos os estudos que avaliaram essas modificações na forma multicêntrica do LDGCB. No primeiro capítulo, são descritos os mecanismos epigenéticos relacionados aos seus aspectos fisiológicos e as modificações registradas em neoplasias, nas medicinas humana e veterinária. No segundo capítulo, foram avaliadas as expressões das histonas acetiladas H3 e H4, e das enzimas HDAC1, HDAC2 e HDAC6 em amostras de LDGCB (n=20), comparativamente à expressão em tecido linfóide de cães saudáveis (n=5), por meio da marcação imuno-histoquímica e validação da expressão proteica por Western blot. As expressões das histonas e enzimas e os aspectos clínico-patológicos foram correlacionados entre si e com o prognóstico dos animais doentes. Os resultados mostraram que HDAC2 está mais expressa no LDGCB (p < 0,05), enquanto H3, H4, HDAC1 e HDAC6 não diferiram entre os grupos. As histonas acetiladas e enzimas histonas desacetilases não apresentaram correlação com o tempo livre de doença (TLD) e tempo de sobrevida (TS), porém o alto índice mitótico foi relacionado ao menor tempo de sobrevida dos cães e menor expressão de HDAC6; e a presença de sinais clínicos no estadiamento da doença (subestágio b) indicou menores TLD e TS. Esse estudo deve estimular o desenvolvimento de novas investigações, a fim de melhor elucidar as alterações epigenéticas na patogênese do LDGCB, uma das neoplasias mais comuns em cães, podendo auxiliar na descoberta de novas abordagens terapêuticas alvo-específicas e melhorando o prognóstico dos pacientes.

Epigenetic alterations are associated with carcinogenesis processes and histone acetylation is one of the most studied mechanisms, occurring according to the activity of histone acetylase (HAT) and histone deacetylase (HDAC) enzymes. The increased expression and/or aberrant action of HDACs directly interfere with transcriptional regulation, may provide conditions for tumor development and become targets of studies for therapeutic intervention. In diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) in humans, alterations in the epigenetic mechanisms of histone acetylation have been identified and associated with a worse prognosis in patients. However, in dogs, there are few studies that evaluated these changes in the multicentric form of the DLBCL. The first chapter describes the epigenetic mechanisms related to their physiological aspects and the changes recorded in neoplasms, in human and veterinary medicine. In the second chapter, the expression of acetylated histones H3 and H4, and of the enzymes HDAC1, HDAC2 and HDAC6 in DLBCL samples (n=20) were evaluated and compared to the expression in lymphoid tissue of healthy dogs (n=5), through of immunohistochemical labeling and validation of protein expression by Western blot. Histone and enzyme expressions and clinicopathological aspects were correlated with each other and with the prognosis of the sick animals. The results showed that HDAC2 is more expressed in DLBCL (p < 0.05), while H3, H4, HDAC1 and HDAC6 did not differ between groups. The acetylated histones and histone deacetylase enzymes did not correlate with disease-free time (DFT) and survival time (ST), but the high mitotic index was related to the shorter survival time of dogs and lower expression of HDAC6; and the presence of clinical signs in the stage of the disease (substage b) indicated lower DFT and ST. This study should stimulate the development of new investigations, in order to better elucidate the epigenetic alterations in the pathogenesis of DLBCL, one of the most common neoplasms in dogs, which may help in the discovery of new target-specific therapeutic approaches and improve the prognosis of the patients.

Evaluation of cytotoxicity and genotoxicity of Hancornia speciosa latex in Allium cepa root model

Abstract The latex obtained from Hancornia speciosa Gomes (Mangabeira tree) is widely used in traditional medicine to treat a variety of diseases, including diarrhea, ulcer, gastritis, tuberculosis, acne and warts. In this study, the cytotoxicity and genotoxicity effects of H. speciosa latex on the root meristem cells of Allium cepa were examined. Onion bulbs were exposed to different concentrations of latex and then submitted to microscopic analysis using Giemsa stain. Water was used as a negative control and sodium azide as a positive control. The results showed that, under the testing conditions, the mitotic index (MI) of the onion roots submitted to latex treatment did not differ significantly from the negative control, which suggests that the latex is not cytotoxic. Low incidence of chromosome aberrations in the cells treated with H. speciosa latex was also observed, indicating that the latex does not have genotoxic effect either. The MI and the chromosome aberration frequency responded to the latex concentration, requiring more studies to evaluate the dosage effect on genotoxicity. The results indicate that in tested concentrations H. speciosa latex is probably not harmful to human health and may be potentially used in medicine.(AU)

Resumo O látex obtido de Hancornia speciosa é amplamente utilizado na medicina popular para tratar uma variedade de doenças, tais como: diarreia, úlcera, gastrite, tuberculose, acne e verrugas. Nesse estudo, foram avaliados os efeitos citotóxicos e genotóxicos do látex de H. speciosa sobre as células meristemáticas das raízes de Allium cepa. Os bulbos das cebolas foram expostos a diferentes concentrações de látex e depois submetidos à analise microscópica usando o corante Giemsa. A água foi usada como controle negativo e a ázida sódica como controle positivo. Os resultados mostraram que o índice mitótico (IM) das raízes de cebola submetidas ao tratamento com látex, nas condições testadas, não diferiram significativamente do controle negativo, e sugerem que o látex não é citotóxico. Também foi observada uma baixa incidência de aberrações cromossômicas nas células tratadas com látex de H. speciosa, o que sugere que o látex também não possui efeito genotóxico. O IM e a frequência de aberrações cromossômicas foram dependentes da concentração de látex. Outros estudos devem ser realizados para avaliar o efeito da dose na genotoxidade. Os resultados indicam que o látex de mangabeira, nas concentrações testadas, provavelmente não é danoso para saúde humana e pode ter potencial para ser usado na medicina.(AU)