Quantitative analysis of bone marrow in pancytopenic dogs / Análise quantitativa de medula óssea em cães pancitopênicos

The pancytopenia can be associated with intra and extra medullary disorders. When the etiology is not obvious, the examination of bone marrow is necessary. The study aims to report and discuss quantitative amendments in bone marrow and their causes in dogs with pancytopenia. Bone marrow aspirate was obtained from 65 dogs with pancytopenia over a period of 13 consecutive months for preparation of smears stained by Giemsa and observed in light microscopy. Five hundred cells differential count was held; and assessed myeloid:erythroid ratio, cellularity, megakaryocytes and direct parasitological examination. The data were evaluated by the Chi-square statistical test. Blood tests of 3120 canines with several clinical changes were analyzed to identify pancytopenia, which accounted for 167 (5.4%) dogs. Interpretation of quantitative characteristics was carried out from the bone marrow smear in 65 pancytopenic dogs and the etiology was established in 40 (61.5%) of these, which included infection by E. canis and L. chagasi, idiopathic aplastic anemia, chronic renal failure and co-infections. In 17 (26.2%) animals were not observed medullary changes. The most bone marrow change was observed myeloid and erythroid hypoplasia in 17 (26.2%) dogs, followed by myeloid and erythroid hyperplasia (24.6%). The myelogram association to the blood cell count allowed the identification of medullary findings and its participation on the occurrence of pancytopenia cases. The number of cases resulting from infectious diseases was 38 (58.5%) in canine assessed: significant number due to its endemic characteristic of the study region.

A pancitopenia pode estar associada a distúrbios intra e extra medulares. Quando a etiologia não é óbvia, o exame da medula óssea é necessário. Este estudo tem como objetivo relatar e discutir alterações quantitativas na medula óssea e suas causas em cães com pancitopenia. De 65 cães pancitopêncicos atendidos durante um período de 13 meses consecutivos, foram realizados aspirados de medula óssea, corados com Giemsa, e observados em microscopia de luz. Quinhentas células foram observadas para contagem diferencial, razão mieloide: eritróide, celularidade, megacariócitos e exame parasitológico direto. Os dados foram avaliados pelo teste estatístico Qui-quadrado. Hemograma de 3120 caninos com diversas alterações clínicas foram analisadas para identificar a pancitopenia, encontrada em 167 (5,4%) cães. A interpretação das características quantitativas foi realizada a partir do esfregaço de medula óssea em 65 cães pancitotopênicos e a etiologia foi estabelecida em 40 (61,5%), incluindo infecção por E. canis e L. chagasi, anemia aplástica idiopática, insuficiência renal crônica e co-infecções. Em 17 (26,2%) cães não foram observadas alterações medulares. A alteração de medula óssea mais observada foi a hipoplasia mielóide e eritróide em 17 (26.2%) cães, seguido pela hiperplasia mielóide e eritróide (24.6%). A associação do mielograma ao hemograma permitiu a identificação de achados medulares e sua participação na ocorrência de casos de pancitopenia. O número de casos resultantes de doenças infecciosas foi de 38 (58,5%) em caninos avaliados: número significativo devido à característica endêmica da região do estudo.

Quantitative analysis of bone marrow in pancytopenic dogs / Análise quantitativa de medula óssea em cães pancitopênicos

The pancytopenia can be associated with intra and extra medullary disorders. When the etiology is not obvious, the examination of bone marrow is necessary. The study aims to report and discuss quantitative amendments in bone marrow and their causes in dogs with pancytopenia. Bone marrow aspirate was obtained from 65 dogs with pancytopenia over a period of 13 consecutive months for preparation of smears stained by Giemsa and observed in light microscopy. Five hundred cells differential count was held; and assessed myeloid:erythroid ratio, cellularity, megakaryocytes and direct parasitological examination. The data were evaluated by the Chi-square statistical test. Blood tests of 3120 canines with several clinical changes were analyzed to identify pancytopenia, which accounted for 167 (5.4%) dogs. Interpretation of quantitative characteristics was carried out from the bone marrow smear in 65 pancytopenic dogs and the etiology was established in 40 (61.5%) of these, which included infection by E. canis and L. chagasi, idiopathic aplastic anemia, chronic renal failure and co-infections. In 17 (26.2%) animals were not observed medullary changes. The most bone marrow change was observed myeloid and erythroid hypoplasia in 17 (26.2%) dogs, followed by myeloid and erythroid hyperplasia (24.6%). The myelogram association to the blood cell count allowed the identification of medullary findings and its participation on the occurrence of pancytopenia cases. The number of cases resulting from infectious diseases was 38 (58.5%) in canine assessed: significant number due to its endemic characteristic of the study region.(AU)

A pancitopenia pode estar associada a distúrbios intra e extra medulares. Quando a etiologia não é óbvia, o exame da medula óssea é necessário. Este estudo tem como objetivo relatar e discutir alterações quantitativas na medula óssea e suas causas em cães com pancitopenia. De 65 cães pancitopêncicos atendidos durante um período de 13 meses consecutivos, foram realizados aspirados de medula óssea, corados com Giemsa, e observados em microscopia de luz. Quinhentas células foram observadas para contagem diferencial, razão mieloide: eritróide, celularidade, megacariócitos e exame parasitológico direto. Os dados foram avaliados pelo teste estatístico Qui-quadrado. Hemograma de 3120 caninos com diversas alterações clínicas foram analisadas para identificar a pancitopenia, encontrada em 167 (5,4%) cães. A interpretação das características quantitativas foi realizada a partir do esfregaço de medula óssea em 65 cães pancitotopênicos e a etiologia foi estabelecida em 40 (61,5%), incluindo infecção por E. canis e L. chagasi, anemia aplástica idiopática, insuficiência renal crônica e co-infecções. Em 17 (26,2%) cães não foram observadas alterações medulares. A alteração de medula óssea mais observada foi a hipoplasia mielóide e eritróide em 17 (26.2%) cães, seguido pela hiperplasia mielóide e eritróide (24.6%). A associação do mielograma ao hemograma permitiu a identificação de achados medulares e sua participação na ocorrência de casos de pancitopenia. O número de casos resultantes de doenças infecciosas foi de 38 (58,5%) em caninos avaliados: número significativo devido à característica endêmica da região do estudo.(AU)

Aplastic bone marrow in dogs / Aplasia Medular em Cães

Aplastic bone marrow (also known as aplastic anemia) is relatively rare in small animals. It is characterized by pancytopenia in the peripheral blood and a three linage bone marrow hypoplasia (erythroid, myeloid and megakaryocytic), resulting in hematopoietic cells replacement by fat tissue. Aplastic bone marrow can also be classified as acute or chronic, according to its presentation and evolution of the cytopenias in the peripheral blood. Among the causes for aplastic bone marrow that lead to stem cells or progenitor cells damage there are the infectious diseases, drugs, toxins and radiation. There are some cases where it is not possible to identify its origin. Then, the aplasia is defined as idiopathic by exclusion. For such diagnosis, it is necessary to rule out other causes of pancytopenia associated to myelophtisis, such as leukemias and myelofibrosis, myelodysplastic syndrome (MDS), myelonecrosis, pure red cell aplasia and hemophagocytic syndrome. Bone marrow aspirate biopsies are performed more frequently than core biopsies in veterinary medicine, and it is fundamental to evaluate alterations of bone marrow. Bone marrow core biopsy provides a more accurate way of evaluating marrow cellularity and examining for metastatic neoplasia. Besides the therapy directed to the primary causes, aplastic bone marrow treatment is limited and the prognosis is usually unfavourable.

A aplasia medular (também conhecida como anemia aplásica) é relativamente rara em cães e gatos e caracteriza-se por uma pancitopenia em sangue periférico e uma hipoplasia dos três tipos celulares (eritróide, mielóide e megacariocítica) na medula óssea, resultando na substituição do tecido hematopoiético por tecido adiposo. Existe ainda uma classificação de acordo com a apresentação e evolução das citopenias em sangue periférico e hipoplasia medular, caracterizando a aplasia como aguda ou crônica. Dentre as causas de aplasia medular, resultante da destruição das células tronco ou das células progenitoras, incluem-se as de origem infecciosa, induzidas por drogas, associadas a toxinas e radiação. Existem alguns casos nos quais a causa não é bem estabelecida, no entanto, a aplasia é definida como idiopática por exclusão. Para tal diagnóstico é necessária a exclusão de outras causas de pancitopenias, como as associadas à mielofitise como leucemias e mielofibrose, síndrome mielodisplásica (SMD), mielonecrose, aplasia pura da série vermelha e síndrome hemofagocítica. A punção aspirativa de medula óssea é realizada com maior freqüência do que a biópsia medular e é fundamental para avaliações de alterações medulares, sendo que a biópsia medular é uma forma mais acurada para avaliação de celularidade e metástase medulares. Além de terapias específicas relacionas a causa primária, o trata

Aplastic bone marrow in dogs / Aplasia Medular em Cães

Aplastic bone marrow (also known as aplastic anemia) is relatively rare in small animals. It is characterized by pancytopenia in the peripheral blood and a three linage bone marrow hypoplasia (erythroid, myeloid and megakaryocytic), resulting in hematopoietic cells replacement by fat tissue. Aplastic bone marrow can also be classified as acute or chronic, according to its presentation and evolution of the cytopenias in the peripheral blood. Among the causes for aplastic bone marrow that lead to stem cells or progenitor cells damage there are the infectious diseases, drugs, toxins and radiation. There are some cases where it is not possible to identify its origin. Then, the aplasia is defined as idiopathic by exclusion. For such diagnosis, it is necessary to rule out other causes of pancytopenia associated to myelophtisis, such as leukemias and myelofibrosis, myelodysplastic syndrome (MDS), myelonecrosis, pure red cell aplasia and hemophagocytic syndrome. Bone marrow aspirate biopsies are performed more frequently than core biopsies in veterinary medicine, and it is fundamental to evaluate alterations of bone marrow. Bone marrow core biopsy provides a more accurate way of evaluating marrow cellularity and examining for metastatic neoplasia. Besides the therapy directed to the primary causes, aplastic bone marrow treatment is limited and the prognosis is usually unfavourable.

A aplasia medular (também conhecida como anemia aplásica) é relativamente rara em cães e gatos e caracteriza-se por uma pancitopenia em sangue periférico e uma hipoplasia dos três tipos celulares (eritróide, mielóide e megacariocítica) na medula óssea, resultando na substituição do tecido hematopoiético por tecido adiposo. Existe ainda uma classificação de acordo com a apresentação e evolução das citopenias em sangue periférico e hipoplasia medular, caracterizando a aplasia como aguda ou crônica. Dentre as causas de aplasia medular, resultante da destruição das células tronco ou das células progenitoras, incluem-se as de origem infecciosa, induzidas por drogas, associadas a toxinas e radiação. Existem alguns casos nos quais a causa não é bem estabelecida, no entanto, a aplasia é definida como idiopática por exclusão. Para tal diagnóstico é necessária a exclusão de outras causas de pancitopenias, como as associadas à mielofitise como leucemias e mielofibrose, síndrome mielodisplásica (SMD), mielonecrose, aplasia pura da série vermelha e síndrome hemofagocítica. A punção aspirativa de medula óssea é realizada com maior freqüência do que a biópsia medular e é fundamental para avaliações de alterações medulares, sendo que a biópsia medular é uma forma mais acurada para avaliação de celularidade e metástase medulares. Além de terapias específicas relacionas a causa primária, o trata

Otimização e validação de metodo analitico para a determinação de cloranfenicol em alimentos de origem animal utilizando a tecnica LC-ESI-MS-MS / Development and validation of analytical method for the determination of chloramphenicol in food of animal origin by LC-ESI-MS-MS

O principal efeito de toxicidade do cloranfenicol (CAP) para o homem é a diminuição da produção de células vermelhas do sangue da medula óssea, levando à anemia aplásica e leucemia, principalmente em crianças. Assim, em 1994, a União Européia baniu o uso de CAP em animais produtores de alimentos devido ao risco que a presença de seus resíduos em alimentos apresenta à saúde humana. O US-FDA (US-Food and Drug Administration), a Austrália e o Brasil também proíbem o uso do CAP em animais produtores de alimentos destinados ao consumo humano. No presente estudo, um método sensível e de alta detectabilidade foi desenvolvido e validado para determinação de resíduos de CAP em diversas matrizes alimentares (peixe, camarão, aves, ovos, bovinos e suínos) utilizando a técnica LC-ESI-MS-MS. As amostras foram extraídas em solução salina tamponada com fosfato seguido de extração liquido-liquido com acetato de etila. A separação cromatográfica foi realizada em uma coluna C18 a temperatura ambiente e para quantificação e confirmação do CAP utilizou-se a técnica de espectrometria de massa em tandem. Para todas as matrizes, as curvas analíticas mostraram valores de r e recuperação maiores do que 0,98 e 50%, respectivamente. Os valores de exatidão ficaram entre 85 e 120% e a precisão foi abaixo de 20%. O limite de quantificação foi de 0,1 ng g-1. A corrida analítica foi realizada em 6 min

The main toxic effect of chloramphenicol (CAP) in humans is depression of red blood cell production in bone marrow leading to aplastic anemia and leukemia mainly in children. Thus, in 1994, the use of CAP in animals intended to food production was banned in the European Union (EU) due to the potential risk to human health posed by its residues in food. In the US-FDA (US-Food and Drug Administration), Australia and Brazil also prohibited the use of CAP in food- producing animals destined to the human consumption. In this study, a selective and high detectability method was developed and validated for determining CAP residues in several food matrices (fish, shrimp, poultry, eggs, bovine and swine) by LC-ESI-MS-MS. The samples were extracted in a phosphate solution followed by liquid-liquid extraction with ethyl acetate. The chromatographic separation was performed in a C18 column at room temperature and for quantitation and confirmation of CAP it was used mass spectrometry in tandem. For all the matrices, the analytical curves showed r values and recovery higher than 0.98 and 50%, respectively. The accuracies values lay between 85 and 120% and the precision was lower than 20%. The limit of quantitation was 0.1 ng g-1. The analytical run was accomplished in 6 min