Resumo

Diseases in fish due to helminth parasites, especially Philometra species, are the primary worry in aquaculture. Philometra are responsible for health problem in fishes they directly affect fish growth and population parameters. A comprehensive survey was conducted involving the examination of the marine fish species Terapon jarbua, gathered from the coastal waters of Sindh, Pakistan In this research different Philometra species from marine fish Terapon jarbua during 2021 and 2022. Philometra nematodes, belonging to the family Philometridae, are common parasitic organisms inhabiting both marine and freshwater environments. Their prevalence, particularly when existing in high numbers within host organisms, can lead to severe and potentially lethal consequences. Employing light microscopy techniques, diverse species of Philometra were identified, including Philometra teraponi, P. jarbuai, P. arabiai, P. karachii, and P. awarii, localized primarily within the ovaries of the host fish. A total of 140 fish samples were examined and 76 were infected. The intensity of infected fish was 54.28%. The identification process encompassed meticulous analysis of crucial parameters, such as body size, esophagus length, positioning of the nerve ring, dimensions of the ventriculus, and ligament size. Intriguingly, the parasites were found in varying contexts; while some were free within the ovaries, others were embedded within tissues, inducing severe muscular dystrophy. This research presents novel findings of Philometra nematodes in the marine waters of Pakistan, extending their host and geographical distribution records. Future studies are needed to better evaluate and describe the dynamics and the epidemiology of Philometra infection in wild and cultured fish species.

Doenças em peixes causadas por parasitas helmintos, especialmente espécies de Philometra, são a principal preocupação na aquicultura. Philometra é responsável por problemas de saúde em peixes, pois afeta diretamente o crescimento destes e os parâmetros populacionais. Foi realizada uma pesquisa abrangente envolvendo o exame das espécies de peixes marinhos Terapon jarbua, coletadas nas águas costeiras de Sindh, Paquistão. Nesta pesquisa, foram identificadas diferentes espécies de Philometra em peixes marinhos Terapon jarbua durante 2021 e 2022. Nematoides Philometra, pertencentes à família Philometridae, são organismos parasitas comuns que habitam ambientes marinhos e de água doce. A sua prevalência, especialmente quando existe em grande número nos organismos hospedeiros, pode levar a consequências graves e potencialmente letais. Empregando técnicas de microscopia óptica, diversas espécies de Philometra foram identificadas, incluindo Philometra teraponi, P. jarbuai, P. arabiai, P. karachii e P. awarii, localizadas principalmente nos ovários do peixe hospedeiro. Um total de 140 amostras de peixes foram examinadas e 76 foram infectadas. A intensidade de peixes infectados foi de 54,28%. O processo de identificação envolveu análise meticulosa de parâmetros cruciais, como tamanho corporal, comprimento do esôfago, posicionamento do anel nervoso, dimensões do ventrículo e tamanho do ligamento. Curiosamente, os parasitas foram encontrados em contextos variados; enquanto alguns estavam livres nos ovários, outros estavam incorporados nos tecidos, induzindo distrofia muscular grave. Esta pesquisa apresenta novas descobertas de nematoides Philometra nas águas marinhas do Paquistão, ampliando seus registros de hospedeiros e distribuição geográfica. Estudos futuros são necessários para melhor avaliar e descrever a dinâmica e a epidemiologia da infecção por Philometra em espécies de peixes selvagens e cultivadas.

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Hypertrophic feline muscular dystrophy (HFMD), rarely reported in the literature, is a disease caused by a hereditary recessive dystrophin deficiency linked to the X chromosome, mainly affecting young male cats. Here, we presented the clinical aspects, food management, and clinical evolution of a seven-year-old mixed-breed cat diagnosed with HFMD, having a primary history of progressive tongue protrusion.

A distrofia muscular hipertrófica felina é uma doença causada por uma deficiência da distrofina com caráter hereditário recessivo ligado ao cromossomo X, com poucos registros de ocorrência na literatura, que acomete principalmente gatos machos jovens. Neste trabalho, são relatados os aspectos clínicos, manejo alimentar e evolução clínica de um gato, sem raça definida, de sete anos com histórico principal de protrusão progressiva da língua e diagnosticado com distrofia muscular hipertrófica felina.

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The Golden Retriever muscular dystrophy (GRMD) is one of the best models of Duchenne muscular dystrophy (DMD), with similar genotypic and phenotypic manifestations. Progressive proliferation of connective tissue in the endomysium of the muscle fibers occurs in parallel with the clinical course of the disease in GRMD animals. Previous studies suggest a relationship between mast cells and the deposition of fibrous tissue due to the release of mediators that recruit fibroblasts. The aim of this study was to evaluate the presence of mast cells and their relationship with muscle injury and fibrosis in GRMD dogs of different ages. Samples of muscle groups from six GRMD and four control dogs, aged 2 to 8 months, were collected and analyzed. The samples were processed and stained with HE, toluidine blue, and Azan trichrome. Our results showed that there was a significant increase in infiltration of mast cells in all muscle groups of GRMD dogs compared to the control group. The average number of mast cells, as well as the deposition of fibrous tissue, decreased with age in GRMD dogs. In the control group, all muscle types showed a significant increase in the amount of collagenous tissue. This suggests increased mast cell degranulation occurred in younger GRMD dogs, resulting in increased interstitial space and fibrous tissue in muscle, which then gradually decreased over time as the dogs aged. However, further studies are needed to clarify the role of mast cells in the pathogenesis of fibrosis.(AU)

O cão Golden Retriever distrófico (Golden Retriever muscular dystrophy - GRMD) é um dos melhores modelos da distrofia muscular de Duchenne (DMD), com manifestações genotípicas e fenotípicas similares. A proliferação progressiva de tecido conjuntivo no endomísio das fibras musculares ocorre paralelamente ao curso clínico da doença em animais GRMD. Estudos anteriores sugerem uma relação entre os mastócitos e a deposição de tecido fibroso devido à liberação de mediadores que recrutam fibroblastos. O objetivo deste estudo foi avaliar a presença de mastócitos e sua relação com a lesão muscular e fibrose em cães GRMD de diferentes idades. Amostras de grupos musculares de seis GRMD e quatro controles, com idade entre 2 a 8 meses, foram coletadas e analisadas. As amostras foram processadas e coradas com HE, azul de toluidina e tricrômico de Azan. Nossos resultados mostraram que houve um aumento significativo na infiltração de mastócitos em todos os grupos musculares de cães GRMD em comparação com o grupo controle. O número médio de mastócitos, assim como a deposição de tecido fibroso, diminuiu com a idade em cães GRMD. No grupo controle, todos os tipos musculares mostraram um aumento significativo na quantidade de tecido colágeno. Isto sugere o aumento da degranulação de mastócitos em cães GRMD mais jovens, resultando em aumento do espaço intersticial e tecido fibroso no músculo, que então gradualmente diminuiu com o tempo à medida que os cães envelheceram. No entanto, mais estudos são necessários para esclarecer o papel dos mastócitos na patogênese da fibrose.(AU)

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Muscular dystrophies are hereditary diseases that lead to progressive degeneration of the skeletal musculature. Golden Retriever dogs are used as animal models because they show a hereditary muscle disease similar to muscular dystrophy in humans. Aims: To evaluate the immunostaining of M1 (CD68) and M2 (CD163) macrophages, MHC I, MHC II and, utrophin in muscles of Golden Retriever dogs affected by muscular dystrophy (GRMD). Methods: Samples from 17 male dogs affected by GRMD were divided into GI - dystrophic dogs up to one year of age; and GII - dystrophic dogs over one-year-old. Results: Immunostaining of CD163 was higher than CD68 in both GI and GII. CD68 showed no variation between groups of dystrophic animals. MHC class I immunostaining was most evident in the biceps femoris and triceps brachialis. MHC class II was expressed mildly in four dystrophic muscle types in GI and GII. Utrophin immunostaining was higher in GII. Conclusion: M2 macrophages were one of the main mononuclear inflammatory cells found in dystrophic muscles. The number of M2 in muscles of dogs with GRMD increases with age, linking this cell subtype to permanent muscle damage.

As distrofias musculares são doenças hereditárias que levam à degeneração progressiva da musculatura esquelética. Cães Golden Retriever são usados como modelos animais, pois desenvolvem uma doença muscular hereditária semelhante à distrofia muscular em humanos. Objetivos: Avaliar a imunomarcação dos macrófagos M1 (CD68) e M2 (CD163), MHC I, MHC II e utrofina nos músculos de cães Golden Retriever afetados pela distrofia muscular (DMGR). Métodos: Amostras de 17 cães machos afetados por DMGR foram divididas em cães distróficos GI - até um ano de idade; e GII - cães distróficos com mais de um ano de idade. Resultados: a imunomarcação de CD163 foi maior que CD68 nos grupos GI e GII. CD68 não mostrou variação entre os grupos de animais distróficos. A imunomarcação de MHC classe I foi mais evidente no bíceps femoral e tríceps braquial. O MHC classe II foi expresso discretamente nos quatro tipos de músculo distrófico no GI e GII. A imunomarcação de utrofina foi maior no GII. Conclusão: Os macrófagos M2 foram uma das principais células inflamatórias mononucleares encontradas nos músculos distróficos. O número de M2 nos músculos de cães com DMGR aumentou com a idade, ligando esse subtipo de célula a danos musculares permanentes.

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Brazilian processing plants have identified the so-calledspaghetti breast myopathy characterized by muscular dystrophy of unknown etiology. This study aimed at estimating the incidence of spaghetti breast myopathyin broilers from three commercial genetic strains (Ross, Cobb, Hubbard) reared in two different housing systems (DH, Dark house, and TS, Tunnel system), presenting different controlled ventilation systems and light availability. Breast meat samples (n=5,580) were collected and macroscopically evaluated for spaghetti breast myopathy according to a 0-2 scale, as 0 = normal, 1 = intermediate or moderate, and 2 = severe. A higher number of broilers reared in DH presented normal breasts and moderate myopathy relative to TS-reared birds. Ross broilers presented a higher incidence of normal breasts compared with Cobb and Hubbard broilers. The risk of presenting spaghetti breast myopathy was higher in broilers reared in DH than those in reared in TS, indicating that the exposure to DH environmental conditions may increase the chance of myopathy incidence. Broilers reared in dark houses presented 26% higher chance and 13% higher risk of showing spaghetti-breast myopathy the than those reared in tunnel-ventilated systems.

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Pathological mineralization is the abnormal deposition of minerals in body tissues, previously injured or not. In these lesions, in addition to calcium, other minerals can be found at lower concentrations. Classically, mineralization is divided into two types: dystrophic and metastatic. However, currently, there is no consensus among researchers on the type of mineralization that occurs in uremic dogs. The objective of this study was to elucidate the type of pathological mineralization that occurs in dogs with uremic syndrome through the correlation of biochemical examinations with gross and histopathological changes, given the existence of controversial information on this theme in the specialized literature. The Shapiro-Wilk, D'Agostino and Pearson tests were used to evaluate data normality distribution, and analysis of variance (ANOVA) was applied to compare the data between more than two groups. Additionally, the Dunnett's multiple comparison test was used in the comparison between the Control Group (CG) and the Experimental Groups (G1, G2, and G3). Serum levels of urea, creatinine, total and ionized calcium, phosphorus, calcium-phosphorus product (CPP), parathyroid hormone (PTH), and albumin of 40 azotemic dogs with chronic kidney disease (CKD) were evaluated. Dogs were categorized by degree of azotemia (mild, moderate, and severe). Ionized hypocalcemia was observed in 97.5% (39/40) of the dogs, and no animals presented ionized hypercalcemia. Hyperphosphatemia was frequent (62.5%), especially in dogs with severe azotemia. PTH concentration increased with progression of azotemia, and high PTH levels were verified in 100% of the dogs with severe azotemia. CPP >60mg2/dl2 was observed in 75% (30/40) of the dogs. Of the 29 dogs that died during the study period, 16 were necropsied. Soft tissue mineralization was observed in 93.7% (15/16) of these dogs at gross and histopathological evaluation (HE and Von Kossa), regardless of the degree of azotemia, in nine organs/tissues: kidneys (75%), lungs (50%), stomach (31.2%), heart (25%), larynx (25%), intercostal muscles (25%), aorta (6.2%), intestines (6.2%), and tongue (6.2%). In one animal, the serosa of all segments of the small intestine showed whitish, rough, irregular, multifocal plaques of varying sizes, confirmed by histopathology as dystrophic mineralization of the longitudinal outer muscular layer, which presented necrosis of coagulation and of the intestinal serosa. This intestinal lesion has not been described in dogs with uremic syndrome to date. In conclusion, the laboratory and histopathologic data previously described, especially regarding tissue and vascular mineralization, which occur in association with previous degenerative/necrotic lesions in the absence of hypercalcemia in dogs with CKD, assist with clarifying inconsistencies found in the existing literature. Therefore, conceptually, mineralization that occurs in uremic dogs should be considered dystrophic.(AU)

Mineralização patológica é a deposição anormal de minerais em tecidos previamente lesados ou não. Nessas lesões, além do cálcio, outros minerais podem ser encontrados em concentrações inferiores. Classicamente, as mineralizações são divididas em dois tipos: distrófica e metastática. Contudo, atualmente, ainda não há consenso entre os pesquisadores sobre o tipo de mineralização que ocorre em cães urêmicos. Objetivou-se com esse estudo elucidar o tipo de mineralização patológica que ocorre em cães com síndrome urêmica através da correlação de exames bioquímicos com alterações macroscópicas e histopatológicas, visto a existência de informações controversas na literatura especializada. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de Shapiro-Wilk e teste de D'Agostino e Pearson para avaliação da normalidade da distribuição e para comparação de dados em mais de dois grupos foi utilizado o teste ANOVA. Adicionalmente, o teste de comparações múltiplas de Dunnett permitiu a comparação entre o grupo controle (GC) com os demais grupos (G1, G2 e G3). Foram avaliados os níveis séricos de ureia, creatinina, cálcio total e ionizado, fósforo, produto cálcio-fósforo (PCF), PTH e albumina de 40 cães azotêmicos com doença renal crônica (DRC). Os cães foram classificados quanto ao grau de azotemia (leve, moderada e severa). Verificou-se hipocalcemia ionizada em 97,5% (39/40) dos cães e, em nenhum animal houve hipercalcemia ionizada. Hiperfosfatemia foi frequente (62,5%), principalmente em cães com azotemia severa. A concentração do PTH aumentou conforme a progressão da azotemia, encontrando-se elevada em 100% dos cães com azotemia severa. Em 75% (30/40) dos cães o PCF foi superior a 60mg2/dl2. Durante o estudo, 29 cães morreram, sendo 16 desses necropsiados. Em 93,7% (15/16) desses cães observou-se mineralização de tecidos moles, durante a avaliação macroscópica e histopatológica (HE e Von Kossa), independentemente do grau de azotemia, em nove órgãos/tecidos: rins (75%), pulmões (50%), estômago (31,2%), coração (25%), laringe (25%), músculos intercostais (25%), aorta (6,2%), intestino (6,2%) e língua (6,2%). Adicionalmente, em um animal verificou-se na serosa de todos os segmentos do intestino delgado placas multifocais brancacentas, rugosas, irregulares de tamanhos variados, cuja histopatologia confirmou tratar-se de mineralização distrófica da camada longitudinal muscular externa que apresentava necrose de coagulação e da serosa intestinal. Essa lesão intestinal nunca havia sido descrita em cães com síndrome urêmica. Em suma, os dados laboratoriais e histopatológicos aqui descritos, sobretudo, no que se refere à mineralização tecidual e vascular, que ocorrem relacionadas a lesões degenerativo-necróticas prévias, na ausência de hipercalcemia, em cães com DRC, ajudam a esclarecer as incongruências existentes na literatura. Por conseguinte, conceitualmente, as mineralizações que ocorrem em cães urêmicos devem ser consideradas distróficas.(AU)

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White muscle disease (WMD), nutritional myodegeneration or enzootic muscular dystrophy, is a nutritional condition associated with selenium and/or vitamin E deficiency in ruminants. These elements are constituents of the major body antioxidant systems. Depletion of selenium results in oxidative damage to cardiac and skeletal muscle cells, resulting in myodegeneration and myonecrosis, typical lesions of WMD. Selenium deficiency is common in South America, but WMD is underreported. This research describes clinical, biochemical and pathological findings in two episodes of WMD associated with selenium deficiency in beef and dairy calves in Argentina and Uruguay with concurrent copper deficiency in one of them, which resulted in spontaneous calf mortality. Further studies are necessary to estimate the true incidence and economic impact of clinical and subclinical mineral deficiencies in livestock production systems in the southern cone of South America.

Doença do músculo branco (DMB), miodegeneração nutricional ou distrofia muscular enzoótica é uma condição nutricional associada à deficiência de selênio e/ou vitamina E em ruminantes. Esses elementos são constituintes dos principais sistemas antioxidantes do corpo. O esgotamento de selênio resulta em dano oxidativo às células musculares cardíacas e esqueléticas, resultando em miodegeneração e mionecrose, lesões típicas da DMB. A deficiência de selênio é comum na América do Sul, mas a DMB está subnotificada. Este trabalho descreve os achados clínicos, bioquímicos e patológicos em dois surtos de DMB associados à deficiência de selênio em bezerros para carne e leite na Argentina e Uruguai com concomitante deficiência de cobre em um surto, que resultaram em mortalidade espontânea de bezerros. São necessários mais estudos para estimar a verdadeira incidência e impacto econômico das deficiências minerais clínicas e subclínicas nos sistemas de produção pecuária no sul da América do Sul.

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O trabalho teve o objetivo de fazer um levantamento bibliográfico das principais funções do selênio na alimentação de bovinos, visando sua ocorrência nas pastagens brasileira, os malefícios da sua deficiência ou até mesmo a intoxicação e as fontes e formas de suplementação para os bovinos. O Selênio consiste em um mineral de grande importância na manutenção da homeostase do organismo, pois possui propriedades e estreita relação com a proteção da integridade das membranas celulares, através de sua capacidade de atuar como parte do sistema antioxidante. As selenoproteínas, entre elas a glutationa peroxidase, atuam de tal forma que removem os radicais livres, o peróxido de hidrogêneo e os lipoperóxidos formados durante o metabolismo celular normal e os converte em água, oxigênio e hidróxidos de ácidos graxos não-tóxicos. Devido às suas propriedades o selênio é indicado como suplemento alimentar. Seus benefícios já foram estudados e relatados na prevenção e tratamento da distrofia muscular nutricional, como promotor de crescimento, agente imunoestimulante, na prevenção e controle da incidência de mastite, auxiliando também em melhores índices de produção de leite.

The objective of this work was to make a bibliographic survey of the main functions of selenium in cattle feeding, aiming at its occurrence in Brazilian pastures, the malfunctions of its deficiency or even intoxication and the sources and forms of supplementation for cattle. Selenium is a mineral of great importance in the maintenance of the body's homeostasis, because it has properties and a close relation with the protection of the integrity of the cellular membranes, through its capacity to act as part of the antioxidant system. Selenoproteins, among them glutathione peroxidase, act in a way that removes free radicals, hydrogen peroxide and lipoperoxides formed during normal cell metabolism and converts them into water, oxygen and hydroxides of non-toxic fatty acids. Due to its properties selenium is indicated as a food supplement. Its benefits have already been studied and reported in the prevention and treatment of nutritional muscular dystrophy, as a growth promoter, immunostimulating agent, in the prevention and control of the incidence of mastitis, also aiding in better rates of milk production.

El trabajo tuvo el objetivo de hacer un levantamiento bibliográfico de las principales funciones del selenio en la alimentación de bovinos, visando su ocurrencia en los pastos brasileños, los maleficios de su deficiencia o incluso la intoxicación y las fuentes y formas de suplementación para los bovinos. El selenio consiste en un mineral de gran importancia en el mantenimiento de la homeostasis del organismo, pues posee propiedades y estrecha relación con la protección de la integridad de las membranas celulares, a través de su capacidad de actuar como parte del sistema antioxidante. Las selenoproteínas, entre ellas la glutatión peroxidasa, actúan de tal forma que eliminan los radicales libres, el peróxido de hidrógeno y los lipoperóxidos formados durante el metabolismo celular normal y los convierte en agua, oxígeno e hidróxidos de ácidos grasos no tóxicos. Debido a sus propiedades el selenio se indica como suplemento alimenticio. Sus beneficios ya fueron estudiados y reportados en la prevención y tratamiento de la distrofia muscular nutricional, como promotor de crecimiento, agente inmunoestimulante, en la prevención y control de la incidencia de mastitis, auxiliando también en mejores índices de producción de leche.

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Golden Retriever muscular dystrophy (GRMD) is the most representative model for studying Duchenne muscular dystrophy (DMD) in humans, owing its phenotypic expression. DMD is a recessive disorder linked to the X chromosome in which the loss of dystrophin induces progressive weakness and degeneration of the skeletal and cardiac muscles, which lead to replacement by connective and adipose tissues. Onset of clinical signs occurs between 2 and 5 years of age, and many patients die from heart or respiratory failure. The main studies concerning dystrophic Golden Retrievers (DGR) sought to elucidate the pathophysiology of the disease and its clinical implications to develop therapies and alternative treatments to improve the quality of life and increase longevity of DMD patients. This review presents an overview of relevant contributions of the DGR model for elucidating DMD in humans.

A distrofia muscular do Golden Retriever (DMGR) é o modelo mais representativo para o estudo da distrofia muscular de Duchenne (DMD) em humanos devido a sua expressão fenotípica. A DMD é uma desordem genética recessiva ligada ao cromossomo X onde a perda da distrofina induz fraqueza progressiva e degeneração do músculo esquelético e cardíaco conduzindo a substituição do músculo por tecido conjuntivo e adiposo. O início da doença ocorre entre 2 e 5 anos de idade e muitos pacientes morrem por insuficiência cardíaca ou respiratória. Os principais estudos realizados no Golden Retriever distrófico (GRD) buscam elucidar a fisiopatogenia da doença e suas implicações clínicas na tentativa de testar terapias e tratamentos alternativos para melhoria da qualidade de vida do paciente distrófico e aumentar sua longevidade. Esta revisão apresenta uma visão geral sobre relevante contribuição do modelo GRD para elucidar a DMD em humanos.

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A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética, ainda sem cura, que leva a degeneração muscular progressiva e processo inflamatório crônico. A terapia celular (TC) tem sido realizada, no entanto a viabilidade das células tem sido limitada pela presença de fibrose muscular e processo inflamatório. O treinamento físico de baixa intensidade (LIT) tem demonstrado reduzir áreas inflamatórias e fibrose intramuscular no músculo distrófico de camundongos mdx. Assim, objetivou-se avaliar o efeito do LIT associado à TC com células tronco mesenquimais (CTM) no músculo distrófico de camundongos mdx. As CTM foram obtidas do saco vitelino canino, sendo cultivadas e caracterizadas por curva de crescimento, viabilidade celular, teste de unidade formadora de colônias e caracterização imunofenotípica por citometria de fluxo. Foram utilizados 32 camundongos mdx machos, divididos aleatoriamente em 4 grupos: Grupo mdxT+TC camundongos mdx treinados que receberam CTM; Grupo mdxT camundongos mdx treinados; Grupo mdxS+TC camundongos mdx sedentários que receberam CTM e Grupo mdxS camundongos mdx sedentários. Também foi realizado um grupo controle com camundongos wild-type (Grupo WT), sem nenhuma intervenção. O protocolo de treinamento foi realizado em esteira horizontal à 9m/min, 2x/sem, 30min/dia, por 8 semanas. A TC foi realizada após 4 semanas de treinamento, por via intramuscular no músculo quadríceps femoral (QD). Foram realizados testes funcionais in vivo. Foi realizada análise da porcentagem de fibras com núcleo central e porcentagem de área de fibrose intramuscular dos músculos QD, tibial cranial, gastrocnêmio e diafragma. Além disso, também foi realizada a análise da expressão das citocinas inflamatórios IL1, IL4, IL6 e TNF e marcadores relacionados a regeneração muscular IGF, TGF e MyoD por RT-qPCR. Não foi encontrada diferença estatística entre os grupos distróficos para os testes funcionais, sendo estatisticamente diferentes do grupo WT. Não houve diferença estatística entre os grupos distróficos quanto a porcentagem de fibras com núcleo central, sendo estatisticamente diferentes do grupo WT. Quanto a porcentagem de área de fibrose intramuscular, o grupo mdxT+TC apresentou menor área em relação ao grupo mdxS no músculo QD, e menor área que o grupo mdxT no músculo gastrocnêmio. No entanto, os grupos treinados apresentaram maior área em comparação com os grupos sedentários no músculo tibial cranial. Não houve diferença no percentual de área de fibrose dos grupos distróficos no diafragma. Com base nos resultados encontrados, a associação terapêutica proposta, foi capaz de reduzir o percentual de área de fibrose intramuscular no músculo QD em comparação ao grupo sedentário, que não recebeu as CTM, além de ter apresentado uma menor área de fibrose que o grupo treinado sem TC no músculo gastrocnêmio, mostrando um possível efeito parácrino das CTM no músculo próximo à aplicação. Além disso, os animais treinados que receberam a terapia celular, não apresentaram diferença estatística do grupo que recebeu terapia celular e se mantiveram sedentários, respaldando que a associação de treinamento físico de baixa intensidade não foi capaz de alterar negativamente o efeito da terapia celular.

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a genetic disorder, still incurable, that leads to progressive muscle degeneration and chronic inflammatory process. Cell therapy (CT) has been performed; however, cell viability has been limited by the presence of muscle fibrosis and inflammatory process. Low-intensity training (LIT) has been shown to reduce inflammatory areas and intramuscular fibrosis in the muscle of mdx mice. Thus, the objective was to evaluate the effect of LIT associated with CT with mesenchymal stem cells (MSC) in the dystrophic muscle of mdx mice. MSCs were obtained from the canine yolk sac, cultured, and characterized by growth curve, cell viability, colony-forming unit test, and immunophenotypic characterization by flow cytometry. Thirty-two male mdx mice were randomly divided into 4 groups: mdxT+CT group trained mdx mice that received MSC; mdxT group trained mdx mice; mdxS+CT group sedentary mdx mice that received MSC; and mdxS group sedentary mdx mice. A control group with wild-type mice (WT group) was also performed, without any intervention. The training protocol was performed on a horizontal treadmill at 9m/min, 2x/week, 30min/day, for 8 weeks. CT was performed after 4 weeks of training, intramuscularly in the quadriceps femoris muscle (QD). In vivo functional tests were performed. Morphometric analysis of the percentage of fibers with central core and percentage of the area of intramuscular fibrosis of the QD, cranial tibial, gastrocnemius, and diaphragm muscles were performed. In addition, we also analyzed the expression of inflammatory cytokines IL1, IL4, IL6 and TNF and markers related to muscle regeneration IGF, TGF and MyoD by real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR). No statistical difference was found between the dystrophic groups for the functional tests, being statistically different from the WT group. There was no statistical difference between the dystrophic groups regarding the percentage of fibers with central core, being statistically different from the WT group. As for the percentage of area of intramuscular fibrosis, the mdxT+CT group had a smaller area compared to the mdxS group in the QD muscle, and a smaller area than the mdxT group in the gastrocnemius muscle. However, the trained groups had a larger area compared to the sedentary groups in the cranial tibialis muscle. There was no difference in the percentage of fibrosis area of the dystrophic groups in the diaphragm. Based on the results found, the proposed therapeutic association was able to reduce the percentage of intramuscular fibrosis area in the QD muscle compared to the sedentary group, which did not receive MSCs, in addition to having a smaller area of fibrosis than the trained group. without CT in the gastrocnemius muscle, showing a possible paracrine effect of MSCs in the muscle close to the application. In addition, the trained animals that received cell therapy showed no statistical difference from the group that received cell therapy and remained sedentary, supporting that the association of low-intensity physical training was not able to negatively alter the effect of cell therapy.

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Since respiratory insufficiency is the main cause of death in patients affected by Duchenne Muscular Dystrophy (DMD), the present study aims at establishing a new non-invasive method to evaluate the clinical parameters of respiratory conditions of experimental models affected by DMD. With this purpose in mind, we evaluated the cardiorespiratory clinical conditions, the changes in the intercostal muscles, the diaphragmatic mobility, and the respiratory cycles in Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) employing ultrasonography (US). A control group consisting of dogs of the same race, but not affected by muscular dystrophy, were used in this study. The results showed that inspiration, expiration and plateau movements (diaphragm mobility) were lower in the affected group. Plateau phase in the affected group was practically non-existent and showed that the diaphragm remained in constant motion. Respiratory rate reached 15.5 per minute for affected group and 26.93 per minute for the control group. Expiration and inspiration movements of intercostal muscles reached 8.99mm and 8.79mm, respectively, for control group and 7.42mm and 7.40mm, respectively, for affected group. Methodology used in the present analysis proved to be viable for the follow-up and evaluation of the respiratory model in GRMD and may be adapted to other muscular dystrophy experimental models.

Uma vez que, a insuficiência respiratória é a principal causa de morte em pacientes afetados pela Distrofia Muscular de Duchenne (DMD), o presente estudo avaliou as condições clínicas cardiorrespiratórias, o movimento dos músculos intercostais, a mobilidade diafragmática, os ciclos respiratórios e a expansão da cavidade torácica em cães Golden Retriever com Distrofia Muscular (GRMD) por ultrassonografia (US) a fim de estabelecer um novo método não invasivo para avaliar os parâmetros de avaliação clínica de doenças respiratórias de modelos experimentais afetados por DMD. Um grupo controle constituído por cães da mesma raça e espécie, mas não afetados pela distrofia muscular também foram utilizados neste estudo. Os resultados mostraram que os movimentos de inspiração, expiração e platô (mobilidade do diafragma) foram menores no grupo afetado. A fase de platô no grupo afetado foi praticamente inexistente e mostrou que o diafragma destes animais permaneceu em constante movimento. A frequência respiratória atingiu 15,5 por minuto para o grupo afetado e 26,93 para o controle. Movimento de expiração e inspiração dos músculos intercostais atingiu 8,99 milímetros e 8,79 milímetros, respectivamente para o grupo controle e 7,42 milímetros e 7,40 milímetros, respectivamente para o grupo afetado. A metodologia utilizada nesta análise foi viável para o acompanhamento e avaliação do modelo respiratória em modelo GRMD e pode ser adaptado para outros modelos experimentais de distrofia muscular.

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Golden Retriever muscular dystrophy (GRMD) is a degenerative, progressive and lethal genetic disease, homologous to human Duchenne muscular dystrophy (DMD). For both there is no cure and clinical interventions are limited to treating clinical signs. As potential treatment, we did a pilot study in GRMD and administered a cocktail of frequently used drugs that might work synergistically. Biochemical blood values were investigated and histology and real-time PCR of muscle biopsies were performed. Significant improvements occurred in experimental Golden Retrievers dogs in regard to the levels of alanine aminotransferase, neutrophils, lymphocytes and CK, which began to show values closer to normal ones when compared to control animals, as well as moderate inflammatory infiltrates in the musculature, according to histology. The drug cocktail seemed to work systemically, but did not interfere with the gene defect, thus having potential value for maintaining the health status and preventing the progression of muscular dystrophy in GRMD model.

Resumo

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença hereditária de caráter progressivo causada por mutação no gene produtor da proteína distrofina, responsável por ligar o citoesqueleto da célula muscular a matriz extracelular (MEC). Além de humanos, outros animais podem apresentar distrofias musculares, podendo ser utilizados como modelos para o estudo de distrofias musculares em humanos. O modelo animal mais utilizado é o modelo de Distrofia Muscular do Golden Retriever (GRMD). Os estudos de distrofias musculares podem ser associados a diversas áreas, como a Bioengenharia de tecidos, área que visa a utilização de MEC descelularizadas (scaffolds) para reparação/substituição de órgãos e tecidos, porém estes scaffolds também podem servir como ferramenta para estudo de MEC em doenças. Portando, o objetivo deste trabalho foi a caracterização de alguns componentes da MEC distrófica, sugerir se uma MEC distrófica pode ser um possível biomaterial para medicina regenerativa e a recelularização de MEC distróficas para observação da relação célula- matriz. Para realização deste trabalho, músculos bíceps femorais distróficos e não distróficos foram descelularizados com protocolo de utilização de SDS a 1% e passaram por análises de quantificação de DNA e fluorescência por DAPI para validação da descelularização e análises histológicas (colorações), imunohistoquímica e de Microscopia Eletrônica de Varredura para avaliação da composição, ultraestrutura e preservação das MEC distróficas e não distróficas. Como resultados, obtivemos as quantificações de DNA que alcançaram quantidade inferior a 50ng de DNA por mg de tecido e na fluorescência por DAPI não foram visualizados núcleos celulares nos tecidos descelularizados. Pelas análises histológicas foi possível observar a ausência de células nos tecidos descelularizados e a preservação de fibras colágenas da MEC. Pela imunohistoquímica, não foram observadas grandes diferenças nos componentes da MEC de músculos distróficos quando comparados com músculos não distróficos. Quando observadas, as células utilizadas para recelularização dos scaffolds apresentaram maior taxa de proliferação quando em contato com o scaffold muscular e o protocolo de esterilização do scaffold foi eficiente, já que os testes para detecção de micoplasma foram negativos. Foi observado o aumento da quantidade de DNAg após a recelularização dos scaffolds e pela MEV são visíveis camadas de células sobre a matriz extracelular. Concluímos que a MEC de músculo distrófico não interfere na diferenciação e adesão celular quando comparadas às MEC de músculo não distrófico. Embora o aumento de distrofina tenha sido observado em alguns processos de recelularização, mais estudos precisam ser realizados para comprovação deste dado.

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a progressive hereditary disease caused by a mutation in the gene producing the dystrophin protein, responsible for linking the cytoskeleton of the muscle cell to the extracellular matrix (ECM). In addition to humans, other animals may have muscular dystrophies and can be used as models for the study of muscular dystrophies in humans. The most used animal model is the Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) model. Muscular dystrophy studies can be associated with several areas, such as tissue bioengineering, an area that aims to use decellularized ECM (scaffolds) for repairing / replacing organs and tissues, but these scaffolds can also serve as a tool for studying the ECM in diseases. Therefore, the objective of this work was to characterize some components of the dystrophic ECM, to suggest whether a dystrophic ECM may be a possible biomaterial for regenerative medicine and the recellularization of dystrophic ECM to observe the cell-matrix relationship. To perform this work, dystrophic and non-dystrophic femoral biceps muscles were decellularized using a 1% SDS protocol and underwent DNA quantification and fluorescence analyzes by DAPI to validate decellularization and histological (staining), immunohistochemistry and Scanning Electron microscopy analyzes to evaluate the composition, ultrastructure and preservation of dystrophic and non-dystrophic ECM. As a result, we obtained the DNA quantifications that reached a quantity of less than 50ng of DNA per mg of tissue and in the fluorescence by DAPI, cell nuclei were not seen in the decellularized tissues. Through histological analyzes it was possible to observe the absence of cells in the decellularized tissues and the preservation of collagen fibers of the ECM. Due to immunohistochemistry, no major differences were observed in the ECM components of dystrophic muscles when compared with non-dystrophic muscles. When observed, the cells used to recellularize the scaffolds showed a higher proliferation rate when in contact with the muscle scaffold and the scaffold sterilization protocol was efficient, since the tests for mycoplasma detection were negative. An increase in the amount of DNAg was observed after the scaffolds were recellularized and by SEM, layers of cells are visible on the extracellular matrix. We conclude that the ECM of dystrophic muscle does not interfere with cell differentiation and adhesion when compared to the ECM of non-dystrophic muscle. Although the increase in dystrophin has been observed in some recellularization processes, more studies need to be carried out to prove this data.

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Abstract: The Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a recessive genetic disease characterized by progressive muscle weakness of the pelvic and scapular girdle and progressing to respiratory or heart failure. The mdx mouse is a model widely used for studies. Although they possess a milder phenotype, the morphology and biochemistry of the diaphragm are similar to human DMD. We performed a descriptive anatomical study of the pulmonary parenchyma of five mdx animal models and compared these with the lungs of 5 mice BALB/C57 (Mus musculus). The findings suggest that the mdx model has morphological features similar to BALB/C57 mice and it must be used with caution in clinical trials which involve the lung.

Resumo: A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética de caráter recessivo que caracterizada por fraqueza muscular progressiva de cintura pélvica e escapular evoluindo para insuficiência respiratória e, ou cardíaca. O camundongo mdx é um modelo amplamente utilizado para estudos da DMD. Apesar do fenótipo destes animais serem mais suave, estes apresentam o principal músculo respiratório, o diafragma com morfologia e bioquímica semelhante à DMD humana, fato este que pode comprometer a função respiratória e consequentemente os pulmões. Foi realizado um estudo anatômico descritivo do parênquima pulmonar dos pulmões de 5 animais modelo mdx comparando estes com os pulmões de 5 camundongos BALB/C57 (Mus musculus). Os pulmões foram analisados macroscopicamente e através de microscopia de luz e eletrônica de varredura. Os achados sugerem que o modelo mdx apresenta morfologia pulmonar semelhante aos camundongos BALB/C57 e que seu uso deve ser cauteloso e criterioso em ensaios clínicos que aborde este órgão.

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A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética de caráter recessivo que caracterizada por fraqueza muscular progressiva de cintura pélvica e escapular evoluindo para insuficiência respiratória e, ou cardíaca. O camundongo mdx é um modelo amplamente utilizado para estudos da DMD. Apesar do fenótipo destes animais serem mais suave, estes apresentam o principal músculo respiratório, o diafragma com morfologia e bioquímica semelhante à DMD humana, fato este que pode comprometer a função respiratória e consequentemente os pulmões. Foi realizado um estudo anatômico descritivo do parênquima pulmonar dos pulmões de 5 animais modelo mdx comparando estes com os pulmões de 5 camundongos BALB/C57 (Mus musculus). Os pulmões foram analisados macroscopicamente e através de microscopia de luz e eletrônica de varredura. Os achados sugerem que o modelo mdx apresenta morfologia pulmonar semelhante aos camundongos BALB/C57 e que seu uso deve ser cauteloso e criterioso em ensaios clínicos que aborde este órgão.(AU)

The Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a recessive genetic disease characterized by progressive muscle weakness of the pelvic and scapular girdle and progressing to respiratory or heart failure. The mdx mouse is a model widely used for studies. Although they possess a milder phenotype, the morphology and biochemistry of the diaphragm are similar to human DMD. We performed a descriptive anatomical study of the pulmonary parenchyma of five mdx animal models and compared these with the lungs of 5 mice BALB/C57 (Mus musculus). The findings suggest that the mdx model has morphological features similar to BALB/C57 mice and it must be used with caution in clinical trials which involve the lung.(AU)

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A distrofia muscular de Duchenne (DMD) é uma doença que causa degeneração progressiva dos músculos estriados esqueléticos e cardíacos, causada pela perda da função do gene da distrofina, devido a uma mutação genética. É caracterizada por uma perda progressiva da função muscular. Músculos com deficiência de distrofina são vulneráveis à danos induzidos pela contração, o que leva a ciclos repetidos de necrose e regeneração, resultando em falha de regeneração, aumento da fibrose e perda progressiva da função muscular. Dentro do músculo esquelético, a matriz extracelular é duplamente importante para fornecer um suporte celular e transmitir forças contráteis musculares. No entanto, o acúmulo patológico de certos componentes na matriz extracelular muscular, que ocorre na fibrose especificamente, prejudica a função celular normal e a transmissão de força, bem como inibe o reparo e a regeneração, compondo desse modo o defeito celular primário. A DMD vem recebendo atenção especial das comunidades médicas por ser uma doença comum em homens (devido à mutação que ocorre no cromossomo X), além de ser um distúrbio grave e atualmente uma doença sem cura. Devido à necessidade de se descobrir o real impacto da DMD na estrutura molecular dos músculos estriados esqueléticos e cardíacos a partir dos componentes proteicos da matriz extracelular dos músculos , avaliamos o grau de alterações de distrofia muscular de cães usados como modelo da DMD comparados com cães não distróficos. Assim, utilizando modelos caninos com distrofia muscular, devido à proximidade de sinais fenotípicos humanos, a saber, atrofia muscular, perda de massa corporal, fadiga muscular e comprometimento cardíaco, buscamos verificar a influência da distrofia muscular na estrutura proteica do músculo estriado esquelético. A partir de amostras de músculos descelularizados de cães distróficos e não distróficos, realizamos análises histológicas e imunohistoquímicas visando avaliar alteração nos componentes da matriz extracelular em cães com deficiência de distrofina. Obtivemos uma satisfatória descelularização, com ausência de núcleos celulares na matriz, e também constatamos que houve alterações na estrutura da matriz extracelular, a saber, preservação de colágeno e proteínas adesivas como fibronectina e laminina, bem como uma diminuição dos glicosaminoglicanos após o processo de descelularização.

Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a disease that causes progressive degeneration of the skeletal and cardiac striated muscles, caused by the loss of dystrophin gene function due to a genetic mutation. It is characterized by a progressive loss of muscle function. Muscles with dystrophin deficiency are vulnerable to contraction-induced damage, which leads to repeated cycles of necrosis and regeneration, resulting in failed regeneration, increased fibrosis, and progressive loss of muscle function. Within the skeletal muscle, the extracellular matrix is doubly important for providing cellular support and transmitting contractile muscle forces. However, the pathological accumulation of certain components in the extracellular muscle matrix, which occurs in fibrosis specifically, normal cell function and force transmission impairs, as well as inhibits repair and regeneration, thus composing the primary cell defect. DMD has been receiving special attention from medical communities because it is a common disease in men (due to the mutation that occurs in the X chromosome), as well as being a serious disorder and currently a disease without cure. Due to the need to discover the real impact of DMD on the molecular structure of the skeletal and cardiac striated muscles - from the protein components of the extracellular muscle matrix -, I evaluated the degree of muscular dystrophy changes in dogs used as a model of DMD compared with non-dystrophic dogs. Thus, using canine models with muscular dystrophy, due to the proximity of human phenotypic signs, namely, muscle atrophy, loss of body mass, muscle fatigue and cardiac involvement, I sought to verify the influence of muscular dystrophy on the protein structure of skeletal striated muscle. From samples of decellularized muscles of dystrophic and non-dystrophic dogs, we performed histological and immunohistochemical analyzes to evaluate changes in extracellular matrix components in dogs with dystrophin deficiency.We obtained satisfactory decellularization, with absence of cell nuclei in the matrix, and we also found that there were changes in the structure of the extracellular matrix, namely, preservation of collagen and adhesive proteins such as fibronectin and laminin, well as a decrease in glycosaminoglycans after the process of decellularization.

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O Transtorno do Espectro do Autismo (TEA) compreende um quadro complexo do neurodesenvolvimento acompanhado por prejuízos na interação social e na comunicação, com padrões restritos e estereotipados de comportamento, interesses ou atividades.A prevalência mundial é de cerca de 1-2%.A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença recessiva causada por uma mutação no gene da distrofina, responsável pela síntese da proteína que leva o mesmo nome e que fica localizado na região p21 do cromossomo X. Ao nascimento os pacientes portadores da DMD são aparentemente normais, com os primeiros sintomas aparecendo geralmente entre os 3 e 5 anos de idade, quando se observa fraqueza muscular e degeneração progressiva da musculatura esquelética. Há também relatos de que um terço dos pacientes apresenta algum déficit cognitivo. A prevalência é de 1em cada 3300 meninos, e por isso é considerada uma das doenças genéticas pediátricas de maior ocorrência.Nosso grupo tem modelado o TEA e a DMD in vitro, através da produção de células pluripotentes induzidas de pacientes diagnosticados com essas patologias, e a posterior diferenciação destas células em células do SNC. Assim como nos autistas, identificamos que os neurônios dos pacientes com DMD apresentavam conexões neurais alteradas. Além disso, existe na literatura descrição de que 3,1% dos pacientes com DMD também apresentam sinais clínicos de autismo. Neste trabalho buscamos investigar o perfil celular de pacientes comprometidos com as duas patologias, autismo e DMD. Para tanto, produzimos iPSC de meninos de uma mesma família, para modelar os fenótipos de células do SNC, comparando com um grupo neurotípico (controle). Foi possível observar que a reprogramação para produção das iPSC a partir da coleta de células-tronco de dente decíduo foi eficiente, vantajosa e pouco estressante aos pacientes, permitindo a diferenciação em NPC e neurônio. Não foi possível verificar diferenças morfológicas entre os portadores de TEA e DMD e os controles, entretanto, temos agora disponível materiais que nos permitirão realizar outras análises para verificar essas possíveis variações. Além disso, tivemos acesso a análises genéticas prévias realizadas pela família onde se observaram alterações em genes como SETD2 E AUTS2, porém não foi possível relacionar tais mutações genéticas ao quadro do TEA apresentado pelos trigêmeos, mas através do DNA coletado da família e essas análises genéticas prévias, poderemos realizar mais estudos acerca dessas mutações.

Autism Spectrum Disorder (ASD) comprises a complex neurodevelopmental disorder, with impairment in social interaction and communication, with restricted and stereotyped patterns of behavior, interests, or activities. The worldwide prevalence is about 1-2%. Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a recessive disease caused by a mutation in the dystrophin gene located in the Xp21, responsible for the synthesis of the protein that bears the same name. The prevalence of DMD is 1: 3300 boys, which is why it is considered one of the most common pediatric genetic diseases. At birth, patients with DMD are apparently healthy, with the first symptoms generally appearing between 3 and 5 years of age, when muscle weakness and progressive skeletal muscle degeneration are observed. There are also reports that one-third of patients have some cognitive impairment. Besides, there is a description in the literature that 3.1% of DMD patients also have clinical signs of autism. Our group has modeled TEA and DMD in vitro, through the production of induced pluripotent stem cells (iPSC) from patients diagnosed with these pathologies, and the subsequent differentiation of these cells into CNS cells. As with ASD, we found that the neurons of patients with DMD had altered neural connections. In this work, we seek to investigate the cell profile of patients compromised with both pathologies, ASD, and DMD, concomitantly. For this purpose, we produced iPSC from a family of triplet boys from stem cells from deciduous teeth, which were later efficiently differentiated into NPC and neuron. It was not possible to verify morphological differences in the cells of patients with ASD and DMD and the controls with the preliminary experiments presented in this thesis. However, the production of these cells allows other analyses to be carried out to verify these possible variations. Also, we had access to previous genetic analyzes carried out by the family, where changes in genes such as SETD2 and AUTS2, reported as related to ASD, were observed. However, using just these data, it was not possible to correlate these mutations with the ASD in the triplet. Still, through the collected DNA of the family and these previous genetic analyzes, we will be able to carry out more studies.

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A Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) é geneticamente homóloga à distrofia muscular de Duchenne (DMD) que acomete seres humanos. É uma doença genética que gera degeneração progressiva da musculatura esquelética. Considerando-se as intensas alterações musculares, é natural pensar em uma possível lesão renal decorrente da intensa lesão muscular. Foram avaliados seis cães machos da raça Golden Retriever afetados pela distrofia muscular (GRMD) e três cães machos clinicamente sadios. A concentração de creatinina foi determinada e as proteínas urinárias foram avaliadas por eletroforese em gel de poliacrilamida. Os resultados mostraram que a proteinúria patológica não está diretamente associada à Distrofia Muscular de Duchenne, porém diversos parâmetros apresentaram concentrações aumentadas para animais afetados, como a razão proteína/albumina, que foi maior em cães distróficos, podendo ser indício de microalbuminúria e conseqüente lesão renal precoce. Estes resultados visam embasar avaliações clínicas e futuros estudos considerando-se as patologias decorrentes ou associadas a esta doença genética.

The Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) is genetically homologous to Duchenne muscular dystrophy (DMD) that affects humans. It is a genetic disease that causes progressive degeneration of skeletal muscle. Considering the intense muscle changes, it is natural to think in possible kidney damage caused by intense muscle injury. We evaluated six male Golden Retriever dogs affected by Duchenne muscular dystrophy (GRMD) and three clinically healthy male dogs. The urinary proteins and creatinine concentration were determined. The proteins were analyzed by polyacrylamide gel electrophoresis. The results showed that pathological proteinuria is not directly associated with Duchenne muscular dystrophy, but several parameters showed increased concentrations for affected animals, as the ratio protein/albumin, which was higher in dystrophic dogs, probably a consequence of microalbuminuria a sign of early kidney damage. These results aim to base future studies and clinical evaluations considering the pathologies arising from or associated with this genetic disease.

Resumo

O comportamento social de cães pode ser definido como um conjunto de comportamentos realizados durante interações interespecíficas. Este comportamento pode ser dividido em quatro períodos: neonato, o período de transição; socialização e juvenil. O presente trabalho possui o objetivo de analisar a interação social dos cães afetados pela Distrofia Muscular com outros cães não afetados e verificar se há ou não diferença na interação social. O estudo foi dividido em dois experimentos. No primeiro foi analisado um cão macho de 9 anos afetado pela distrofia muscular, e quatro cadelas portadoras do gene da distrofia, porém não afetadas pela distrofia, de idades entre 6 e 7 anos. No segundo foram selecionados 8 filhotes, sendo eles 3 fêmeas não afetadas e 3 machos, onde 2 eram afetados pela distrofia muscular e 1 não, nascidos do cruzamento de uma fêmea portadora e um macho normal. O comportamento dos cães foi filmado e analisado, em três categorias: comportamento de matilha; interação social entre cães e ocupação de território. Os resultados do primeiro experimento foram descritos e comparados entre si. Os do segundo experimento foram analisados com o teste estatístico Mann-Whitney para fatores independentes. Os resultados obtidos, no primeiro experimento indicam que houve diferença entre o comportamento do macho afetado e das demais fêmeas não afetadas. Os resultados obtidos pelo experimento 2 indicam que o surgimento dessa diferença coincide com o aparecimento dos primeiros sintomas da doença e se agravam se os animais afetados ficarem separados dos animais não afetados. Baseados nestes resultados podemos concluir que existem diferenças entre cães afetados pela distrofia muscular e que essa diferença está relacionada com a própria distrofia muscular.

Dog social behavior can be defined as a set of behaviors performed during interspecific interactions. This behavior can be divided into four periods: neonatal, the transition period; socialization and juvenile. This work aims to analyze the social interaction between muscular dystrophy affected dogs with other unaffected dogs and to verify whether there is a difference in social interaction. The study was divided into two experiments. In the first one, a 9-year-old male dog affected by muscular dystrophy and four female dogs carrying the dystrophy gene, but not affected by dystrophy, aged between 6 and 7 years were analyzed. In the second were selected 8 puppies, being 3 unaffected females and 3 males, where 2 were affected by muscular dystrophy and 1 not, born from the crossing of a carrier female and a normal male. Dog behavior was filmed and analyzed in three categories: pack behavior; social interaction between dogs and occupation of territory. The results of the first experiment were described and compared with each other. Those in the second experiment were analyzed using the Mann-Whitney statistical test for independent factors. The results obtained in the first experiment indicate that there was a difference between the behavior of the affected male and the other unaffected females. The results obtained by experiment 2 indicate that the appearance of this difference coincides with the onset of the first symptoms of the disease and worsens if the affected animals are separated from the unaffected animals. Based on these results we can conclude that there are differences between dogs affected by muscular dystrophy and that this difference is related to the muscular dystrophy itself. Keywords: ; , Dog, GRMD, Ontogenesis, Social Behavior.

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A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética decorrente de uma mutação ou deleção da distrofina, uma proteína que se expressa através de um gene de caráter recessivo relacionado ao cromossomo X. Através do modelo animal canino Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD), pesquisas em busca de novas alternativas terapêuticas são objeto de estudo para uma melhor compreensão da doença, por apresentarem um fenótipo similar aos pacientes humanos com DMD. O estudo visa avaliar a morfologia macro e microscópica, quantificar a área de fibrose e identificar células perivasculares (pericitos) nos músculos gastrocnêmio, diafragma, miocárdio e língua de cães Golden Retriever afetados com Distrofia Muscular (n=4) comparados com cães normais (n=4). Foram realizadas análises da morfologia, pelas características anatômicas macroscópicas, microscopia eletrônica de varredura e histologia (colorações de Hematoxilina e Eosina e Picrossírius). Os principais achados macroscópicos foram contratura muscular e hipertrofia (diafragma); infiltrado de tecido adiposo (gastrocnêmio); e a macroglossia. Microscopicamente, as principais alterações foram necrose e degeneração, observada por áreas de hipertrofia e atrofia miofibrilar, acúmulo de gordura e presença de fibrose na musculatura estriada esquelética. Concluiu-se que a musculatura estriada esquelética dos cães GRMD sofreram significativa variação na morfologia, com maior deposição fibrose comparado ao músculo cardíaco. A identificação dos pericitos em animais GRMD, demonstrou uma imunomarcação menos intensa em relação aos cães controle.

Duchenne Muscular Dystrophy (DMD) is a genetic disease caused by a mutation or deletion of the dystrophin, protein which is expressed through a recessive gene associated to X chromosome. The Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD) canine model serves to new alternatives of therapies and to test better understand the disease pathogenesis, as they present a phenotype similar to the patients with DMD. The aim of this study was to evaluate the macro and microscopic morphology, to quantify the fibrotic area and to identify perivascular cells in the gastrocnemius, diaphragm, myocardium and tongue muscles of Golden Retriever dogs affected with Muscular Dystrophy (n = 4) compared to normal dogs (n = 4). Morphology macroscopic anatomical characteristics and scanning electron microscopy, histological (Hematoxylin and Eosin staining and Picrossírius staining). The main macroscopic findings were muscle contracture and hypertrophy (diaphragm); adipose tissue infiltrate (gastrocnemius); and a macroglossia. Microscopically, the main stages were necrosis and degeneration, observed by areas of hypertrophy and myofibrillar atrophy, fat accumulation and presence of fibrosis in skeletal muscles. After the extended muscles of the GRMD parenchyma were more morphologically varied, with greater deposition of fibrosis to the cardiac muscle. The identity of pericitos in animals GRMD, demonstrated an immunostaining in relation to the remote control.