Gut dysbiosis, inflammation and type 2 diabetes in mice using synthetic gut microbiota from diabetic humans

Abstract The study was aimed to assess impact of high fat diet (HFD) and synthetic human gut microbiota (GM) combined with HFD and chow diet (CD) in inducing type-2 diabetes (T2D) using mice model. To our knowledge, this is the first study using selected human GM transplantation via culture based method coupled dietary modulation in mice for in vivo establishment of inflammation leading to T2D and gut dysbiosis. Twenty bacteria (T2D1-T2D20) from stool samples of confirmed T2D subjects were found to be morphologically different and subjected to purification on different media both aerobically and anerobically, which revealed seven bacteria more common among 20 isolates on the basis of biochemical characterization. On the basis of 16S rRNA gene sequencing, these seven isolates were identified as Bacteroides stercoris (MT152636), Lactobacillus acidophilus (MT152637), Lactobacillus salivarius (MT152638), Ruminococcus bromii (MT152639), Klebsiella aerogenes (MT152640), Bacteroides fragilis (MT152909), Clostridium botulinum (MT152910). The seven isolates were subsequently used as synthetic gut microbiome (GM) for their role in inducing T2D in mice. Inbred strains of albino mice were divided into four groups and were fed with CD, HFD, GM+HFD and GM+CD. Mice receiving HFD and GM+modified diet (CD/HFD) showed highly significant (P 0.05) increase in weight and blood glucose concentration as well as elevated level of inflammatory cytokines (TNF-, IL-6, and MCP-1) compared to mice receiving CD only. The 16S rRNA gene sequencing of 11 fecal bacteria obtained from three randomly selected animals from each group revealed gut dysbiosis in animals receiving GM. Bacterial strains including Bacteroides gallinarum (MT152630), Ruminococcus bromii (MT152631), Lactobacillus acidophilus (MT152632), Parabacteroides gordonii (MT152633), Prevotella copri (MT152634) and Lactobacillus gasseri (MT152635) were isolated from mice treated with GM+modified diet (HFD/CD) compared to strains Akkermansia muciniphila (MT152625), Bacteriodes sp. (MT152626), Bacteroides faecis (MT152627), Bacteroides vulgatus (MT152628), Lactobacillus plantarum (MT152629) which were isolated from mice receiving CD/HFD. In conclusion, these findings suggest that constitution of GM and diet plays significant role in inflammation leading to onset or/and possibly progression of T2D. .

Resumo O estudo teve como objetivo avaliar o impacto da dieta rica em gordura (HFD) e da microbiota intestinal humana sintética (GM) combinada com HFD e dieta alimentar (CD) na indução de diabetes tipo 2 (T2D) usando modelo de camundongos. Para nosso conhecimento, este é o primeiro estudo usando transplante de GM humano selecionado através do método baseado em cultura acoplada à modulação dietética em camundongos para o estabelecimento in vivo de inflamação que leva a T2D e disbiose intestinal. Vinte bactérias (T2D1-T2D20) de amostras de fezes de indivíduos T2D confirmados verificaram ser morfologicamente diferentes e foram submetidas à purificação em meios diferentes aerobicamente e anaerobicamente, o que revelou sete bactérias mais comuns entre 20 isolados com base na caracterização bioquímica. Com base no sequenciamento do gene 16S rRNA, esses sete isolados foram identificados como Bacteroides stercoris (MT152636), Lactobacillus acidophilus (MT152637), Lactobacillus salivarius (MT152638), Ruminococcus bromii (MT152639), Klebsiella aerogenides (MT152640), Bacteroides fragilis (MT152909), Clostridium botulinum (MT152910). Esses sete isolados foram, posteriormente, usados como microbioma intestinal sintético (GM) por seu papel na indução de T2D em camundongos. Linhagens consanguíneas de camundongos albinos foram divididas em quatro grupos e foram alimentadas com CD, HFD, GM + HFD e GM + CD. Camundongos que receberam a dieta modificada com HFD e GM + (CD / HFD) mostraram um aumento altamente significativo (P 0,05) no peso e na concentração de glicose no sangue, bem como um nível elevado de citocinas inflamatórias (TNF-, IL-6 e MCP-1) em comparação com os ratos que receberam apenas CD. O sequenciamento do gene 16S rRNA de 11 bactérias fecais obtidas de três animais selecionados aleatoriamente de cada grupo revelou disbiose intestinal em animais que receberam GM. Cepas bacterianas, incluindo Bacteroides gallinarum (MT152630), Ruminococcus bromii (MT152631), Lactobacillus acidophilus (MT152632), Parabacteroides gordonii (MT152633), Prevotella copri (MT152634) e Lactobacillus Gasseri (MT152635D), foram tratadas com dieta modificada / CD) em comparação com as linhagens Akkermansia muciniphila (MT152625), Bacteriodes sp. (MT152626), Bacteroides faecis (MT152627), Bacteroides vulgatus (MT152628), Lactobacillus plantarum (MT152629), que foram isoladas de camundongos recebendo CD / HFD. Em conclusão, esses resultados sugerem que a constituição de GM e dieta desempenham papel significativo na inflamação levando ao início ou/e possivelmente à progressão de T2D.

Gut dysbiosis, inflammation and type 2 diabetes in mice using synthetic gut microbiota from diabetic humans / Disbiose intestinal, inflamação e diabetes tipo 2 em camundongos usando microbiota intestinal sintética de humanos diabéticos

Abstract The study was aimed to assess impact of high fat diet (HFD) and synthetic human gut microbiota (GM) combined with HFD and chow diet (CD) in inducing type-2 diabetes (T2D) using mice model. To our knowledge, this is the first study using selected human GM transplantation via culture based method coupled dietary modulation in mice for in vivo establishment of inflammation leading to T2D and gut dysbiosis. Twenty bacteria (T2D1-T2D20) from stool samples of confirmed T2D subjects were found to be morphologically different and subjected to purification on different media both aerobically and anerobically, which revealed seven bacteria more common among 20 isolates on the basis of biochemical characterization. On the basis of 16S rRNA gene sequencing, these seven isolates were identified as Bacteroides stercoris (MT152636), Lactobacillus acidophilus (MT152637), Lactobacillus salivarius (MT152638), Ruminococcus bromii (MT152639), Klebsiella aerogenes (MT152640), Bacteroides fragilis (MT152909), Clostridium botulinum (MT152910). The seven isolates were subsequently used as synthetic gut microbiome (GM) for their role in inducing T2D in mice. Inbred strains of albino mice were divided into four groups and were fed with CD, HFD, GM+HFD and GM+CD. Mice receiving HFD and GM+modified diet (CD/HFD) showed highly significant (P<0.05) increase in weight and blood glucose concentration as well as elevated level of inflammatory cytokines (TNF-α, IL-6, and MCP-1) compared to mice receiving CD only. The 16S rRNA gene sequencing of 11 fecal bacteria obtained from three randomly selected animals from each group revealed gut dysbiosis in animals receiving GM. Bacterial strains including Bacteroides gallinarum (MT152630), Ruminococcus bromii (MT152631), Lactobacillus acidophilus (MT152632), Parabacteroides gordonii (MT152633), Prevotella copri (MT152634) and Lactobacillus gasseri (MT152635) were isolated from mice treated with GM+modified diet (HFD/CD) compared to strains Akkermansia muciniphila (MT152625), Bacteriodes sp. (MT152626), Bacteroides faecis (MT152627), Bacteroides vulgatus (MT152628), Lactobacillus plantarum (MT152629) which were isolated from mice receiving CD/HFD. In conclusion, these findings suggest that constitution of GM and diet plays significant role in inflammation leading to onset or/and possibly progression of T2D. .

Resumo O estudo teve como objetivo avaliar o impacto da dieta rica em gordura (HFD) e da microbiota intestinal humana sintética (GM) combinada com HFD e dieta alimentar (CD) na indução de diabetes tipo 2 (T2D) usando modelo de camundongos. Para nosso conhecimento, este é o primeiro estudo usando transplante de GM humano selecionado através do método baseado em cultura acoplada à modulação dietética em camundongos para o estabelecimento in vivo de inflamação que leva a T2D e disbiose intestinal. Vinte bactérias (T2D1-T2D20) de amostras de fezes de indivíduos T2D confirmados verificaram ser morfologicamente diferentes e foram submetidas à purificação em meios diferentes aerobicamente e anaerobicamente, o que revelou sete bactérias mais comuns entre 20 isolados com base na caracterização bioquímica. Com base no sequenciamento do gene 16S rRNA, esses sete isolados foram identificados como Bacteroides stercoris (MT152636), Lactobacillus acidophilus (MT152637), Lactobacillus salivarius (MT152638), Ruminococcus bromii (MT152639), Klebsiella aerogenides (MT152640), Bacteroides fragilis (MT152909), Clostridium botulinum (MT152910). Esses sete isolados foram, posteriormente, usados ​​como microbioma intestinal sintético (GM) por seu papel na indução de T2D em camundongos. Linhagens consanguíneas de camundongos albinos foram divididas em quatro grupos e foram alimentadas com CD, HFD, GM + HFD e GM + CD. Camundongos que receberam a dieta modificada com HFD e GM + (CD / HFD) mostraram um aumento altamente significativo (P < 0,05) no peso e na concentração de glicose no sangue, bem como um nível elevado de citocinas inflamatórias (TNF-α, IL-6 e MCP-1) em comparação com os ratos que receberam apenas CD. O sequenciamento do gene 16S rRNA de 11 bactérias fecais obtidas de três animais selecionados aleatoriamente de cada grupo revelou disbiose intestinal em animais que receberam GM. Cepas bacterianas, incluindo Bacteroides gallinarum (MT152630), Ruminococcus bromii (MT152631), Lactobacillus acidophilus (MT152632), Parabacteroides gordonii (MT152633), Prevotella copri (MT152634) e Lactobacillus Gasseri (MT152635D), foram tratadas com dieta modificada / CD) em comparação com as linhagens Akkermansia muciniphila (MT152625), Bacteriodes sp. (MT152626), Bacteroides faecis (MT152627), Bacteroides vulgatus (MT152628), Lactobacillus plantarum (MT152629), que foram isoladas de camundongos recebendo CD / HFD. Em conclusão, esses resultados sugerem que a constituição de GM e dieta desempenham papel significativo na inflamação levando ao início ou/e possivelmente à progressão de T2D.

Hematological profile of Astyanax bimaculatus under different offer of Lactobacillus sp / Perfil hematológico de Astyanax bimaculatus sob diferentes ofertas do Lactobacillus sp

The objective of this study was to evaluate the hematological and immunological parameters of yellowtail lambaris (Astyanax bimaculatus), fed with different frequencies of the probiotic (Lactobacillus spp.). Fishes were distributed into 20 experimental units and divided in five treatments: control (0%), 25%, 50%, 75% and 100% of probiotic supply. A higher presence of total leukocytes (47.70 103cell µl-1), lymphocytes (36.11 103cell µl-1) and monocytes (11.58 103cell µl-1) was verified in fish fed 100% of probiotic, showing a directly proportional ratio among the frequencies of the probiotic supply on the availability of circulating cells in the circulatory system (R² 094-0.97). Hematocrit (27.30-34.63%), hemoglobin (7.00-10.90g dl-1), mean corpuscular volume (4.21-5.45 10-5.pg), mean corpuscular hemoglobin (3.45-5.40 10-6.pg), mean corpuscular hemoglobin concentration, (2.99-4.35g dl-1), total protein (44.32-50.26mg ml-1) and total plasma immunoglobulin (27.96-34.08mg ml-1) did not diverge among treatments. The frequency of the probiotic supply interferes with the hematological profile, although lactic acid bacteria were present in the same concentrations in the intestinal tract, regardless of the probiotic supply, there was an increase in circulating leukocytes, especially lymphocytes and monocytes, in lambari fed probiotic with more frequency.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar os parâmetros hematológicos e imunológicos do lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax bimaculatus) alimentado com diferentes frequências de probiótico (Lactobacillus spp.). Os peixes foram distribuídos em 20 unidades experimentais e divididos em cinco tratamentos: controle (0%), 25%, 50%, 75% e 100% de frequência na suplementação probiótica. Alta presença de leucócitos totais (47,70 10³ células µ-1), linfócitos (36,11 10³ células µ-1) e monócitos (11,58 10³ células µ-1) em peixes alimentados com 100% de probiótico apresenta uma taxa diretamente proporcional entre as frequências da suplementação probiótica na disponibilidade das células no sistema circulatório (R² 094-0,97). Hematócrito (27,30-34,63%), hemoglobina (7,00-10,90g dL-¹), volume corpuscular médio (4,21-5,45 10-5.pg), hemoglobina corpuscular média (3,45-5,40 10-6.pg), concentração de hemoglobina corpuscular média (2,99-4,35g dl-1), proteína total (44,32-50,26mg ml-1) e imunoglobulina plasmática total (27,96-34,08mg ml-1) não divergiram entre os tratamentos. A frequência da suplementação probiótica interferiu no perfil hematológico. Embora as bactérias ácido láticas estejam presentes na mesma concentração no trato intestinal, independentemente da oferta de probiótico, houve um aumento na circulação de leucócitos, especialmente linfócitos e monócitos, nos lambaris alimentados com maior frequência.(AU)

Hematological profile of Astyanax bimaculatus under different offer of Lactobacillus sp / Perfil hematológico de Astyanax bimaculatus sob diferentes ofertas do Lactobacillus sp

The objective of this study was to evaluate the hematological and immunological parameters of yellowtail lambaris (Astyanax bimaculatus), fed with different frequencies of the probiotic (Lactobacillus spp.). Fishes were distributed into 20 experimental units and divided in five treatments: control (0%), 25%, 50%, 75% and 100% of probiotic supply. A higher presence of total leukocytes (47.70 103cell µl-1), lymphocytes (36.11 103cell µl-1) and monocytes (11.58 103cell µl-1) was verified in fish fed 100% of probiotic, showing a directly proportional ratio among the frequencies of the probiotic supply on the availability of circulating cells in the circulatory system (R² 094-0.97). Hematocrit (27.30-34.63%), hemoglobin (7.00-10.90g dl-1), mean corpuscular volume (4.21-5.45 10-5.pg), mean corpuscular hemoglobin (3.45-5.40 10-6.pg), mean corpuscular hemoglobin concentration, (2.99-4.35g dl-1), total protein (44.32-50.26mg ml-1) and total plasma immunoglobulin (27.96-34.08mg ml-1) did not diverge among treatments. The frequency of the probiotic supply interferes with the hematological profile, although lactic acid bacteria were present in the same concentrations in the intestinal tract, regardless of the probiotic supply, there was an increase in circulating leukocytes, especially lymphocytes and monocytes, in lambari fed probiotic with more frequency.(AU)

O objetivo do presente trabalho foi avaliar os parâmetros hematológicos e imunológicos do lambari-do-rabo-amarelo (Astyanax bimaculatus) alimentado com diferentes frequências de probiótico (Lactobacillus spp.). Os peixes foram distribuídos em 20 unidades experimentais e divididos em cinco tratamentos: controle (0%), 25%, 50%, 75% e 100% de frequência na suplementação probiótica. Alta presença de leucócitos totais (47,70 10³ células µ-1), linfócitos (36,11 10³ células µ-1) e monócitos (11,58 10³ células µ-1) em peixes alimentados com 100% de probiótico apresenta uma taxa diretamente proporcional entre as frequências da suplementação probiótica na disponibilidade das células no sistema circulatório (R² 094-0,97). Hematócrito (27,30-34,63%), hemoglobina (7,00-10,90g dL-¹), volume corpuscular médio (4,21-5,45 10-5.pg), hemoglobina corpuscular média (3,45-5,40 10-6.pg), concentração de hemoglobina corpuscular média (2,99-4,35g dl-1), proteína total (44,32-50,26mg ml-1) e imunoglobulina plasmática total (27,96-34,08mg ml-1) não divergiram entre os tratamentos. A frequência da suplementação probiótica interferiu no perfil hematológico. Embora as bactérias ácido láticas estejam presentes na mesma concentração no trato intestinal, independentemente da oferta de probiótico, houve um aumento na circulação de leucócitos, especialmente linfócitos e monócitos, nos lambaris alimentados com maior frequência.(AU)

DESENVOLVIMENTO DE BEBIDA LÁCTEA FERMENTADA ADICIONADA DE CHIA E ACEROLA

O reaproveitamento de subprodutos lácteos no preparo de alimentos para consumo humano, reduz o impacto ambiental e favorece economicamente às indústrias. O objetivo desta pesquisa foi desenvolver e caracterizar uma bebida láctea fermentada, utilizando o soro de leite como componente base, acrescida de semente de chia (Salvia hispanica L.) e saborizada com xarope de acerola (Malpighia emarginata). As bebidas lácteas fermentadas foram formuladas no Laboratório do Setor de Laticínios, do Núcleo de Estudos, Pesquisa e Processamento de Alimentos (NUEPPA) no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Piauí. Foram realizadas análises microbiológicas de Salmonella sp e coliformes; de viabilidade probiótica de Lactobacillus acidophilus e Bifidobacterium; físico-químicas de pH, atividade de água, sólidos solúveis totais, acidez titular total e sinérese; análise sensorial; centesimais de proteínas, umidade, gordura, cinzas, cálculo de carboidratos e valor energético, análise de ácido ascórbico e -caroteno. Os resultados de acidez titular total variaram de 1% a 1,27%; os de pH variaram de 3,86 a 4,11; os sólidos solúveis totais variaram entre 15,67 a 21,6; os resultados de atividade de água variaram de 0,93 a 0,99; os resultados de sinérese variaram de 46,67 a 68,08. A presença de Salmonela sp não foi detectada, e análise para coliformes, mostrou-se negativa. A viabilidade celular do L. acidophilus na bebida mostrou-se eficiente, e não houve viabilidade celular do Bifidobacterium. Na análise sensorial, as avaliações dos parâmetros cor, sabor, textura e aceitação global, receberam nota mediana 7, e intenção de compra recebeu nota mediana 4. As formulações apresentaram valores de umidade de 74,21% e 74,34%; cinzas de 0,42% e 0,55%; proteínas de 2,93% e 2,99%, matéria gorda láctea de 0,93% e 1,47 %, carboidratos de 20,9% e 21,2% e valor energético de 108,8 e 105,0 Kcal. Os valores para ácido ascórbico variaram entre 222,23 e 418,10 (mg/100g). Os valores para -caroteno foram de 12,33 g/g e 8,19 g/g. As bebidas lácteas fermentadas preparada com base láctea de soro de leite enriquecida com semente de chia e saborizada com xarope de acerola, apresentaram estabilidade físico-química e qualidade higiênico-sanitária satisfatórias, viabilidade celular de L. Acidophilus e não apresentaram viabilidade de Bifidobacterium durante o período de 21 dias de estocagem; não são consideradas probióticas; apresentam boa aceitabilidade sensorial e intenção de compra; apresentaram composição centesimal satisfatórias e pode ser considerada fonte de ácido ascórbico e -caroteno.

O reaproveitamento de subprodutos lácteos no preparo de alimentos para consumo humano, reduz o impacto ambiental e favorece economicamente às indústrias. O objetivo desta pesquisa foi desenvolver e caracterizar uma bebida láctea fermentada, utilizando o soro de leite como componente base, acrescida de semente de chia (Salvia hispanica L.) e saborizada com xarope de acerola (Malpighia emarginata). As bebidas lácteas fermentadas foram formuladas no Laboratório do Setor de Laticínios, do Núcleo de Estudos, Pesquisa e Processamento de Alimentos (NUEPPA) no Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal do Piauí. Foram realizadas análises microbiológicas de Salmonella sp e coliformes; de viabilidade probiótica de Lactobacillus acidophilus e Bifidobacterium; físico-químicas de pH, atividade de água, sólidos solúveis totais, acidez titular total e sinérese; análise sensorial; centesimais de proteínas, umidade, gordura, cinzas, cálculo de carboidratos e valor energético, análise de ácido ascórbico e -caroteno. Os resultados de acidez titular total variaram de 1% a 1,27%; os de pH variaram de 3,86 a 4,11; os sólidos solúveis totais variaram entre 15,67 a 21,6; os resultados de atividade de água variaram de 0,93 a 0,99; os resultados de sinérese variaram de 46,67 a 68,08. A presença de Salmonela sp não foi detectada, e análise para coliformes, mostrou-se negativa. A viabilidade celular do L. acidophilus na bebida mostrou-se eficiente, e não houve viabilidade celular do Bifidobacterium. Na análise sensorial, as avaliações dos parâmetros cor, sabor, textura e aceitação global, receberam nota mediana 7, e intenção de compra recebeu nota mediana 4. As formulações apresentaram valores de umidade de 74,21% e 74,34%; cinzas de 0,42% e 0,55%; proteínas de 2,93% e 2,99%, matéria gorda láctea de 0,93% e 1,47 %, carboidratos de 20,9% e 21,2% e valor energético de 108,8 e 105,0 Kcal. Os valores para ácido ascórbico variaram entre 222,23 e 418,10 (mg/100g). Os valores para -caroteno foram de 12,33 g/g e 8,19 g/g. As bebidas lácteas fermentadas preparada com base láctea de soro de leite enriquecida com semente de chia e saborizada com xarope de acerola, apresentaram estabilidade físico-química e qualidade higiênico-sanitária satisfatórias, viabilidade celular de L. Acidophilus e não apresentaram viabilidade de Bifidobacterium durante o período de 21 dias de estocagem; não são consideradas probióticas; apresentam boa aceitabilidade sensorial e intenção de compra; apresentaram composição centesimal satisfatórias e pode ser considerada fonte de ácido ascórbico e -caroteno.

Perfil de ácidos graxos do queijo maturado produzido com Lactobacillus helveticus e utilização de cobertura comestível

O efeito sobre o perfil dos ácidos graxos com utilização dos microrganismos Streptococcus thermophilus e Lactobacillus helveticus foram analisados na fabricação do queijo maturado. Avaliaram-se os tempos de maturação (0, 10, 20 e 30 dias) e a qualidade do produto final, por meio de análises de ácidos graxos, químicas e físicas, de antioxidantes e microbiológicas. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso em esquema fatorial com os dados analisados por meio do ProcMixed do SAS 9.3. No primeiro experimento os queijos apresentaram qualidade microbiológica e físico-química dentro dos padrões estabelecidos pela legislação brasileira pertinente (Listeria monocytogenes e Staphylococcus aureus ausentes, coliformes 2,69 log). Houve redução nos valores de coliformes para ambos os tratamentos. Com relação às contagens de bactérias ácido láticas (BAL), estas mantiveram-se viáveis até o 30º dia de maturação e as bactérias proteolíticas diminuíram durante a maturação (5,51log e 5,23log respectivamente). Não houve diferença entre os tratamentos com relação a cor instrumental das amostras. Os valores de textura dos queijos não apresentaram diferença entre os parâmetros. Os ácidos graxos quantificados em maior proporção foram ácido esteárico, oleico, linoleico e linolênico. Aumentaram-se os níveis de ácidos graxos monoinsaturados e houve diminuição dos ácidos graxos saturados no queijo contendo L. helveticus, portanto a inclusão de tal bactéria mostrou-se efetiva por promover o desenvolvimento de produto com características desejáveis ao consumidor. No segundo experimento avaliou-se o uso do revestimento comestível de Açafrão-da-terra 1% e alginato de sódio aplicado ao queijo maturado com Lactobacillus helveticus por 30 dias, suas características físico-químicas e microbiológicas e assim como as características intrínsecas ao revestimento. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso com dois tratamentos, sendo um com aplicação de cobertura de alginato de sódio e Açafrão-da-terra 1% e o outro sem a cobertura comestível, com os dados analisados por meio do programa SAS 9.3. Houve redução nos valores de coliformes para ambos os tratamentos e os valores de bactérias ácido láticas, apresentaram- se até o 30º dia de maturação (BAL: 6,17 log e 6,06 log). Para cor, não houve diferença entre os tratamentos para os parâmetros L*, a* e b*, somente em relação ao tempo de armazenamento, tornando os queijos mais escuros (L*:64,38). Os valores obtidos para textura apresentaram diferenças significativas para tratamento, na dureza, gomosidade, mastigabilidade e para coesividade, para os tempos avaliados o parâmetro elasticidade não apresentou diferença significativa (p<0.05). As propriedades mecânicas obtidas das coberturas não apresentaram diferenças significativas para tensão na ruptura, elongação, Módulo de Young, Permeabilidade ao vapor de água (PVA) e espessura da cobertura de alginato de sódio (Controle) e alginato de sódio com 1% Açafrão-da-terra. A utilização de cobertura de alginato de sódio e Açafrão da terra 1% para queijos maturados não melhorou efetivamente a qualidade microbiológica, entretanto apresentou aumento no número de bactérias ácido lácticas, aumento na atividade de água e melhoria na textura dos queijos tornando-os mais macios, com diminuição da gomosidade, coesividade e mastigabilidade. No terceiro experimento avaliou-se a cobertura comestível como veículo para bactérias ácido lácticas, por meio da adição de revestimento de alginato e microrganismos (L. acidophilus e L. helveticus) em queijos maturados. As coberturas foram avaliadas com relação a características químicas, estabilidade microbiológica, viabilidade e resistência a passagem trato gastrointestinal e a microestrutura em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Avaliaram-se as propriedades intrínsecas do revestimento como características da cobertura comestível do queijo através das propriedades mecânicas, Permeabilidade ao vapor térmico (PVA) e isoterma de adsorção. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso com quatro tratamentos (queijo sem revestimento comestível (SEM), queijo com revestimento de alginato de sódio (AG), queijo com revestimento de alginato de sódio e L. acidophilus (AGLA) e queijo com revestimento de alginato de sódio e L. helveticus (AGLH) ) em quatro tempos de armazenamento (0,5, 10 e 15 dias) com os dados analisados por meio do programa SAS 9.3. Houve redução nos valores de coliformes para todos os tratamentos com o tempo de armazenamento aos 15 dias de armazenamento (5.82 log). Com relação às contagens de bactérias ácido lácticas, estas mantiveram-se viáveis até o 15º dia de maturação (SEM: 7.15 log10, AG: 6.39 log10, AGLA: 7.01 log 10 e AGLH: 7.09 log 10 respectivamente). Para a identificação dos microrganismos presentes no queijo pela técnica de RAPD- PCR foram isolados clones do L. helveticus comprovando a migração do revestimento para o interior do queijo. A análise de MEV mostrou que as BAL se apresentaram distribuídas por todas a superfície dos filmes (AGLA, AGLH), sendo uma alternativa para veicular estes microrganismos no queijo. Para caracterização das coberturas os parâmetros foram significativos (P<0,05) para a permeabilidade ao vapor de água, espessura e modulo de young e não para tensão na ruptura e elongação. Em relação a simulação gastrointestinal das amostras de queijo com cobertura, estas não apresentaram diferenças significativas para os tratamentos e para sua interação com o tempo de armazenamento, porém apresentaram diferenças para os tempos avaliados. A utilização de revestimentos comestíveis de alginato de sódio e microrganismos para queijos maturados não melhorou efetivamente a qualidade microbiológica do produto em relação a presença de coliformes totais. A migração de células de microrganismo (L. helveticus), acrescentado na cobertura, para o interior do queijo, mostrou que a cobertura pode ser um veículo para as BAL. As bactérias lácticas permaneceram viáveis durante os 10 dias de armazenamento e sobreviveram ao transitar pelo trato gastrointestinal.

The effect on fatty acid profile using Streptococcus thermophilus and Lactobacillus helveticus microorganisms were analyzed in the maturated cheese production. The rippened times (0, 10, 20 and 30 days) and final product quality were evaluated by fatty acids profile, chemical and physical, antioxidants and microbiological analysis. The experimental design was completely randomized in a factorial scheme with data analyzed through ProcMixed of SAS 9.3. In the first experiment the cheeses presented microbiological and physic-chemical quality within the standards established by pertinent Brazilian legislation (Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus absent, coliforms 2.69 log). There was reduction in coliforms values for both treatments. In relation to lactic acid bacteria (LAB) counts, they remained viable until the 30th maturation day and proteolytic bacteria decreased during maturation (5.51log and 5.23log respectively). There was no difference between the treatments in relation to the samples instrumental colors. The cheeses texture values did not present differences between the parameters. The most quantified fatty acids were stearic, oleic, linoleic and linolenic acid. The monounsaturated fatty acids levels were increased and there was a decrease of saturated fatty acids in cheese containing L. helveticus, so such bacteria inclusion was effective for promoting a product with desirable characteristics to the consumer. The second experiment evaluated the use of turmeric 1% and sodium alginate edible coating applied to cheese matured with Lactobacillus helveticus for 30 days, its physicochemical and microbiological characteristics as well as the intrinsic coating characteristics. The experimental design was completely randomized with two treatments (with and without sodium alginate and 1% turmeric application) and data were analyzed through the SAS 9.3 program. There was reduction in coliform values for both treatments and the lactic acid bacteria counts remained viable until the 30th maturation day (LAB: 6.17 log and 6.06log). For color, there was no difference between the treatments for L *, a * and b * parameters, only in relation to the storage time, making the cheeses darker (L*:64.38). The values obtained for texture were significant for treatment, in the hardness, gum, chewability and for cohesiveness. For evaluated times the elasticity parameter did not present significant difference (p <0.05). The mechanical properties of coatings did not present significant differences in rupture tension, elongation, Young's modulus, Steam permeability (SP) and sodium alginate cover (control) and sodium alginate with 1% of turmeric thickness. The use of sodium alginate and turmeric 1% for ripened cheeses did not improve effectively the microbiological quality, however, it increased lactic acid bacteria, water activity and cheeses texture, making them softer, decreasing gum, cohesiveness and chewability. In the third experiment there was evaluated the edible coating as a transport for acid lactic bacteria, by adding sodium alginate coating and microorganisms (L. acidophilus and L. helveticus) in matured cheeses. The covers were evaluated regarding chemical characteristics, microbiological stability, viability and resistance to the gastrointestinal tract passage and microstructure in scanning electron microscope (SEM). It was evaluated the coating intrinsic properties as the edible coating characteristics of the cheese through mechanical properties, stream permeability (SP) and isotherm adsorption. The experimental design was completely randomized with four treatments (SEMC: cheese without edible coating, AG: cheese with sodium alginate coating, AGLA: cheese with sodium alginate + Lactobacillus acidophilus coating and AGLH: cheese with sodium alginate + Lactobacillus helveticus coating) in four storage times (0, 5, 10 and 15 days) with data analyzed through the SAS 9.3 program. There was reduction in coliform values for both treatments with storage time of 15 days (5.82 log). In relation to lactic acid bacteria counts, they remained viable until the 15th maturation day (SEMC: 7.15 log, AG: 6.39 log, AGLA: 7.01 e AGLH:7.09 log respectively). To identify the microorganisms in cheese by the RAPD-PCR technique, L. helveticus clones were isolated proving the coating migration inside the cheese. The SEM analysis showed that the LABs were distributed throughout all the edible coating surface (AGLA, AGLH), being an alternative to transport these microorganisms in the cheese. For coating characterization, the parameters were significant (P <0.05) for steam water permeability, thickness and Young's modulus, and not for rupture tension and elongation. Regarding the gastrointestinal simulation of the cheese samples with cover, these presented no differences for treatments and their interaction with storage time, however they presented differences for evaluated times. The use of sodium alginate edible coatings and microorganisms for matured cheeses did not improve effectively the product microbiological quality in relation to the total coliforms presence. The microorganism (L. helveticus) cells migration, added in the cover to inside the cheese, showed that the cover can be a transport for LAB. Lactic bacteria remained viable during the 10 storage days and survived to the gastrointestinal tract.

Avaliação da microbiota bacteriana respiratória de frangos de corte

As doenças respiratórias acometem as aves em qualquer idade, independente do tipo de produção comercial, sendo o trato respiratório a porta de entrada de micro-organismos patogênicos. Devido ao uso excessivo de antimicrobianos na avicultura como promotores de crescimento, e a consequente ocorrência de multirresistência antimicrobiana frente a esses fármacos comumente utilizados, existe uma busca crescente por soluções alternativas livres de antibiótico, sendo necessário para isso, conhecimento básico sobre os micro-organismos comensais do trato respiratório. Este trabalho teve como objetivo avaliar a microbiota respiratória de frangos de corte clinicamente saudáveis, realizando contagem, isolamento e identificação bacteriana, detecção de produção de bacteriocinas e avaliação da sensibilidade antimicrobiana destes isolados, além de pesquisa de genes de virulência nas amostras de Escherichia coli e análise histopatológica dos órgãos estudados. Foram avaliados 60 órgãos do trato respiratório (traqueia, sacos aéreos e pulmão) de 20 frangos de corte clinicamente saudáveis, aos 21 dias de idade, criados em condições experimentais. As amostras foram analisadas através de contagem de bactérias totais em Plate Count Agar e isolamento bacteriano em Ágar Sangue e mais 5 ágares seletivos. A identificação das bactérias foi realizada através das características morfológicas das colônias, coloração de Gram, testes de catalase e oxidase, prova de temperatura de crescimento a 10 e 45oC, provas bioquímicas e utilização de kits comerciais de diagnóstico. A avaliação da produção de bacteriocinas foi realizada através do método da dupla camada. Uma amostragem dos isolados foi avaliada para a presença de genes de virulência de E. coli (genes iutA, hlyF, iss, iroN e ompT) pela técnica de PCR multiplex, e avaliação da sensibilidade a antimicrobianos frente a 18 princípios ativos através do método de disco-difusão. A contagem de bactérias totais apresentou médias de 5,1x104 UFC/g na traqueia, 1,1x104 UFC/g nos sacos aéreos e 2,3x103 UFC/g nos pulmões; foi observado significância estatística entre a quantidade de bactérias na traqueia, comparado com as outras partes anatômicas. Um total de 334 isolados bacterianos foram recuperados dos animais estudados, sendo 56,6% bactérias Gram positivas do filo Firmicutes e 43,4% bactérias Gram negativas do filo Proteobacteria, não apresentando diferença estatística entre esses grupos. As espécies bacterianas apresentaram pouca variação na distribuição entre as porções anatômicas, e os isolados mais frequentes foram Escherichia coli (32,6%), Staphyloccocus coagulase negativo (17,1%), Streptococcus sp. (15,9%), Lactobacillus sp. (12,9%) e Staphylococcus aureus (10,7%). Os gêneros Staphylococcus e Streptococcus foram encontrados em 19/20 (95%) das aves estudadas, Escherichia em 17/20 (85%), Lactobacillus em 16/20 (80%). Os isolados não apresentaram produção de bacteriocinas e também não apresentaram genes de virulência de APEC (Avian Pathogenic Escherichia coli), iutA, hlyF, iss, iroN e ompT; a análise histopatológica dos órgãos demonstrou a ausência de infiltrado inflamatório. Foi observado IRMA (Índice de Resistência Múltipla a Antimicrobianos) máximo de 0,44 e 0,66, e PMR (Perfil de Múltipla Resistência) em 8 (19,5%) e 29 (72,5%) isolados de E. coli e Staphylococcus spp., respectivamente, caracterizados por apresentarem resistência a 3 ou mais classes de antimicrobianos. A maioria dos isolados apresentou baixa resistência, com 80,5% e 57,5% destes micro-organismos sensíveis a 12 ou mais antimicrobianos. Estes resultados auxiliarão no desenvolvimento de alternativas, e melhoria na prevenção de doenças respiratórias na avicultura comercial.

Respiratory diseases affect birds at any age, regardless of the type of commercial production, and the respiratory tract is the gateway of pathogenic micro-organisms. Due to the excessive use of antimicrobials in poultry farming as growth promoters, and the consequent occurrence of antimicrobial multidrug resistance to these commonly used drugs, there is a growing demand for antibiotic-free alternative solutions, being necessary to this, basic knowledge of respiratory tract commensal micro-organisms. This study aimed to evaluate the respiratory microbiota of clinically healthy broilers, performing count, isolation and bacterial identification, bacteriocin production detection and evaluation of antimicrobial susceptibility of isolates, as well as research virulence genes of Escherichia coli and histopathology analysis of the studied organs. Were evaluated 60 organs of the respiratory tract (trachea, air sacs and lung) of 20 healthy broilers at 21 days of age, created under experimental conditions. Samples were analyzed by total bacteria count in plate count agar and bacterial isolation on blood agar and 5 more selective agars. The bacterial identification was performed by the morphological characteristics of the colonies, Gram stain, catalase and oxidase test, growth temperature test at 10 and 45°C, biochemical tests and use of commercial diagnostic kits. The evaluation of bacteriocin production was performed using the "double layer method". A sample of the isolates was evaluated for the presence of virulence genes of E. coli (iutA, hlyF, iss, iroN and ompT genes) by multiplex PCR and evaluation of antimicrobial susceptibility against 18 antibiotics via the method of disk diffusion. The bacterial total count showed average of 5.1x104 CFU/g in the trachea, 1.1x104 CFU/g in air sacs and 2.3x103 CFU/g; statistical significance was observed between the amount of bacteria in the trachea compared with other anatomical parts. A total of 334 bacterial isolates were recovered from the studied animals, 56.6% Gram positive bacteria of the phylum Firmicutes and 43.4% Gram negative bacteria of the phylum Proteobacteria, with no significant difference between these groups. Bacterial species showed little variation in the distribution between anatomical parts, and the most frequently isolated strains were Escherichia coli (32.6%), coagulase negative Staphylococcus (17.1%), Streptococcus sp. (15.9%), Lactobacillus sp. (12.9%) and Staphylococcus aureus (10.7%). The genera Staphylococcus and Streptococcus were found in 19/20 (95%) from these birds, Escherichia in 17/20 (85%), Lactobacillus in 16/20 (80%). The strains showed no production of bacteriocin and also showed no virulence genes of APEC (Avian Pathogenic Escherichia coli), iutA, hlyF, iss, iroN and ompT; histopathological examination of organs showed the absence of inflammatory infiltrate. MAR (Multiple Antibiotic Resistance) Index was observed to maximum 0.44 and 0.66, and MRP (Multiple Resistance Profile) in 8 (19.5%) and 29 (72.5%) isolates of E. coli and Staphylococcus spp., respectively, characterized by showed resistance to three or more classes of antimicrobials. The majority of isolates had low resistance, with 80.5% and 57.5% of these micro-organisms susceptible to 12 or more antimicrobials. These results will help in the development of alternatives, and improvement in prevention of respiratory diseases in commercial poultry.

Bacteriocin production by Lactobacillus plantarum AMA-K isolated from Amasi, a Zimbabwean fermented milk product and study of the adsorption of bacteriocin AMA-K to Listeria sp.

Bacteriocin AMA-K produced by Lactobacillus plantarum AMA-K inhibits the growth of Enterococcus spp., Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae and Listeria spp. Growth of strain AMA-K in BHI, M17, soy milk and molasses was similar to growth in MRS. The effect of organic nitrogen sources, carbohydrates, glycerol, K2HPO4 and KH2PO4, MgSO4, MnSO4, tri-ammonium citrate, Tween 80, vitamins and initial pH on bacteriocin AMA-K was determined. The mode of action of bacteriocin AMA-K was studied. The effect of bacteriocin AMA-K to actively growing Listeria innocua LMG13568, L. ivanovii subsp. ivanovii ATCC19119 and L. monocytogenes ScottA was determined. Adsorption of bacteriocin AMA-K to target cells at different temperatures, pH and in presence of Tween 20, Tween 80, ascorbic acid, potassium sorbate, sodium nitrate and sodium chloride were studied. Bacteriocin AMA-K shares high homology to pediocin PA-1.

A bacteriocina AMA-K produzida por Lactobacillus plantarum AMA-K inibe a multiplicação de Enterococcus spp, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Listeria spp. A multiplicação da cepa AMA-K em BHI, leite de soja e melaço foi semelhante à multiplicação em MRS. O efeito de fontes de nitrogênio orgânico, carboidratos, glicerol, K2HPO4 e KH2PO4, MgSO4, MnSO4, citrato de triamônio, Tween 80, vitaminas e pH inicial sobre a bacteriocina AMA-K foi determinada. O modo de ação da bacteriocina AMA-K foi estudado. O efeito da bacteriocina AMA-K sobre Listeria innocua LMG13568, Listeria ivanovii subsp.ivanovii ATCC19119 e Listeria monocytogenes Scott A foi determinado. A adsorção da bacteriocina AMA-K às células-alvo em diferentes temperaturas, pH e na presença de Tween 20, Tween 80, ácido ascórbico, sorbato de potássio, nitrato de sódio a cloreto de sódio foi avaliada. A bacteriocina AMA-K apresenta grande homologia a pediocina PA-1.

Utilization of probiotic (Lactobacillus sp.) on diets with differents protein levels on small intestine length and morphometry of meat quails1 - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i3.804 / Utilização de probiótico em rações com diferentes níveis de proteína sobre o comprimento e a morfometria do intestino delgado de codornas de corte - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i3.804

The aim of this study was evaluate the effect of probiotic associated of different levels of crude protein (CP) on length and mucous morphometry of small intestine of meat quails. 2.304 meat quails were used, distributed in a completely randomized experimental design in 2 x 4 factorial scheme (with and without probiotic; four levels of CP 15, 20, 25 and 30%), with two replications by treatment, in two experimental periods. At seven, 14, 21 and 35 days of age, two quails of each replication were slaughtered to evaluate the length of small intestine (LSI) and duodenum and ileum mucous morphometry. LSI and small intestine mucous morphometry were not influenced by probiotic. Intestine length increased in a linear way with CP levels increase at 7, 14 and 21 days of age, and mucous morphometry increased in a linear way only to ileum villum height. It may be concluded that in the good sanitary conditions meat quails were raised the addition of probiotic did not affect on small intestine length and mucous morphometry.

O trabalho objetivou avaliar o efeito do probiótico associado com diferentes níveis de proteína bruta (PB) sobre o comprimento e a morfometria da mucosa do intestino delgado de codornas de corte. Foram utilizadas 2.304 codornas de corte, distribuídas em um delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 4 (com e sem probiótico; quatro níveis de PB 15, 20, 25 e 30%), com duas repetições por tratamento, em dois períodos experimentais. Aos sete, 14, 21 e 35 dias de idade, foram abatidas duas aves de cada repetição para avaliação do comprimento do intestino delgado (CID) e a morfometria da mucosa do duodeno e íleo. O probiótico não influenciou o CID e a morfometria da mucosa do intestino delgado. O comprimento do intestino aumentou de maneira linear com o aumento dos níveis de PB aos sete, 14 e 21 dias de idade, e a morfometria da mucosa, aumentou de forma linear somente para altura vilo do íleo. Pode-se concluir que nas boas condições sanitárias em que as codornas de corte foram criadas a adição de probiótico não influenciou o comprimento e a morfometria da mucosa do intestino delgado.

Fiber fraction ruminal degradation of corn silage without spikes with sugar cane and manioc pulp - DOI: 10.4025/actascianimsci.v28i4.606 / Degradação ruminal da fração fibra de silagens de milho sem espigas com cana-de-açúcar e bagaço de mandioca - DOI: 10.4025/actascianimsci.v28i4.606

This study aimed to evaluate the ruminal degradation of corn silages without spikes (CSWS), with addit ion of sugar cane (SC) and dry manioc pulp (DMW), compared to corn silage (CS). The feeds were ensiled with (WI) and without (IF) inoculants - Lactobacillus plantarum and L. paracasei ssp. paracasei. The following fractions were studied: water soluble (A), potentially degradable (B), non degradable (C), fraction B degradable ratio (c); effective (ED) and potential (PD) degradability. The treatments evaluated were: T1 (CSWS + 20% SC -IF); T2 (CSWS + 20% SC-WI); T3 (CSWS + 35% SC-IF); T4 (CSWS + 35% SC -WI); T5 (CSWS + 20% DMW-IF); T6 (CSWS + 20% DMW-WI); T7 (CSWS + 35% DMW -IF); T8 (CSWS + 35% DMW-WI); T9 (CS-WI) and T10 (CS-IF). The average differences were compared on a completely randomized model. Higher (p0.05) were observed between ADF C fraction for T3 (C= 20.7%), T4 (C= 22.6%), T9 (C= 22.7%) and T10 (C= 24.0%). Results in dicate the possibility to include DMW on corn silage, instead of green spikes, to the level of 35%.

Avaliou-se a degradação ruminal da fibra em detergente neutro (FDN) e em detergente ácido (FDA) de silagens de milho sem espigas (SMSE) com cana -de-açúcar (CA) e bagaço seco de mandioca (BSM), comparadas com a silagem de milho com espigas (SMCE). Os alimentos foram ensilados com (CI) e sem inoculante (SI) - Lactobacillus plantarum e L. paracasei ssp. paracasei. Estudaram-se: as frações solúvel (A), potencialmente degradável (B) e não-degradável (C); a taxa de degradação da fração B (c); a degradabilidade efetiva (DE) e potencial (DP). Os tratamentos foram: T1 (SMSE + 20% CA-SI); T2 (SMSE + 20% CA-CI); T3 (SMSE + 35% CA-SI); T4 (SMSE + 35% CA-CI); T5 (SMSE + 20% BSM-SI); T6 (SMSE + 20% BSM-CI); T7 (SMSE + 35% BSM-SI); T8 (SMSE + 35% BSM-CI); T9 (SMCE-SI) e T10 (SMCE-CI). Médias foram comparadas em um delineamento inteiramente casualisado. As mai ores (p0,05) para a fração C da FDA dos tratamentos T3 (C = 20,7%), T4 (C = 22,6%), T9 (C = 22,7%) e T10 (C = 24,0%). Os resultados indicam que há possibilidade para a inclusão do BSM no lugar das espigas de milho verde para a produção de silagem até o nível de 35%.

Microbiota indígena do meato acústico externo de gatos hígidos

The study aimed to find out the frequency of microrganisms in the external ear canal in healthy cats. Fifty adult male (26) and female (24) short hair cats were utilized for the purpose, and they were divided according to living enviroment (Group l - indoor and Group 2 - outdoor). All animals were submitted to sedation prior to physical and otoscopic examinations in order to confirm to be healthy. Samples were obtained from ear canal by use of Buck curetes and sterile cotton sticks for microbiological investigation. In cats of Group 1, Otodects cynotis were observed in 4%. In 72% of the animals yeasts and molds were found (Cladosporium sp 66.6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33.3%, Rhodotorula sp 20%, Mycelia sp 13.3%, and 6.6% for Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp and Trichosporon sp), finally, m 64% of the samples, was detected Staphylococcus spp (81.2%), Pseudomonas sp (12.5%), Klebsiella sp (12.5%), and 6,2% for Acinetobacter sp. Bacilos difteroides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp. In Group 2, O. cynotis was isolated in 36% of cats, and in 96% of the animals wasfound Malassezia sp (54.1%), Aspergillus sp (33.3%), Penicillium (33.3%), Microsporum sp (29.1%), Cladosporium sp (16.6%), Trichoderma sp (12.5%) Alternaria sp (8.3%), Phoma sp (8.3%), Epicoccum sp (4.1%), Neurospora sp (4.1%), Mycelia sp (4.3%), Rhodotorula sp (4.1%). In 20 out of 25 (80%), at least one bacterial microrganism was isolated (Staphylococcus sp 75%, Klebsiela sp 20.8%, Bacilos difteroides 12.5%, Pseudomonas sp 8.3%, and 4.1% for Acynetobacter sp, Enterobacter and Escherichia sp).

Cinqüenta felinos hígidos, adultos - vinte e seis machos e vinte e quatro fêmeas - sem definição racial, com distintas idades, reunidos em dois grupos (GRUPO 1- animais domiciliados e GRUPO 2 - animais que rendados) de vinte e cinco animais cada. Após anamnese e prévia sedação, os gatos foram submetidos a exame físico e à otoscopia, comprovando-se a ausência de lesões meatais e timpânicas, com cureta de Buck e wragatoas estéreis, foi colhido material meatal, que foi então submetido a exames bacteriológico e micológico. No Grupo 1, foi evidenciado presença de Otodectes cynotis (4% das amostras), em 72% dos casos de bolores e leveduras (Cladosporium sp 66,6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33,3%, Rhodotorula sp 20,0%, Mycelia sp 13,3% e Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp, Trichosporon sp, todos com 6,6%) e, finalmente, em 64% da amostragem, bactérias dos gêneros Staphylococcus spp (81,2%), Pseudomonas sp (12,5%), Klebsiella sp (12,5%), Acinetobacter sp, Bacilos difteróides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp (todos com 6,2%). No Grupo 2, o Otodectes sp foi identificado em 36% das amostras, em 96% daquelas isolaram-se fungos dos gêneros: Malassezia sp - 54,1%, Aspergillus e Penicillium sp, ambos com 33,3%, Microsporum sp - 29,1%, Cladosporium sp - 16,6%, Trichoderma sp - 12,5%, Alternaria e Phoma sp, ambos com 8,3% e Epicoccum sp, Neurospora sp. Mycelia sp, Rhodotorula sp, todos com 4,1% e, por fim, em 20 das 25 amostras (80%) isolaram-se pelo menos uma cepa bacteriana (Staphylococcus spp 75%, Klebsiella sp 20,8%, Bacilos difteróides 12,5%, Pseudomonas sp, 8,3%) e Acinetobacter sp, Enterobacter sp e Escherichia sp, todos com 4,1% cada um em cultivo monoespecífico ou em associação.

Microbiota indígena do meato acústico externo de gatos hígidos

The study aimed to find out the frequency of microrganisms in the external ear canal in healthy cats. Fifty adult male (26) and female (24) short hair cats were utilized for the purpose, and they were divided according to living enviroment (Group l - indoor and Group 2 - outdoor). All animals were submitted to sedation prior to physical and otoscopic examinations in order to confirm to be healthy. Samples were obtained from ear canal by use of Buck curetes and sterile cotton sticks for microbiological investigation. In cats of Group 1, Otodects cynotis were observed in 4%. In 72% of the animals yeasts and molds were found (Cladosporium sp 66.6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33.3%, Rhodotorula sp 20%, Mycelia sp 13.3%, and 6.6% for Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp and Trichosporon sp), finally, m 64% of the samples, was detected Staphylococcus spp (81.2%), Pseudomonas sp (12.5%), Klebsiella sp (12.5%), and 6,2% for Acinetobacter sp. Bacilos difteroides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp. In Group 2, O. cynotis was isolated in 36% of cats, and in 96% of the animals wasfound Malassezia sp (54.1%), Aspergillus sp (33.3%), Penicillium (33.3%), Microsporum sp (29.1%), Cladosporium sp (16.6%), Trichoderma sp (12.5%) Alternaria sp (8.3%), Phoma sp (8.3%), Epicoccum sp (4.1%), Neurospora sp (4.1%), Mycelia sp (4.3%), Rhodotorula sp (4.1%). In 20 out of 25 (80%), at least one bacterial microrganism was isolated (Staphylococcus sp 75%, Klebsiela sp 20.8%, Bacilos difteroides 12.5%, Pseudomonas sp 8.3%, and 4.1% for Acynetobacter sp, Enterobacter and Escherichia sp).

Cinqüenta felinos hígidos, adultos - vinte e seis machos e vinte e quatro fêmeas - sem definição racial, com distintas idades, reunidos em dois grupos (GRUPO 1- animais domiciliados e GRUPO 2 - animais que rendados) de vinte e cinco animais cada. Após anamnese e prévia sedação, os gatos foram submetidos a exame físico e à otoscopia, comprovando-se a ausência de lesões meatais e timpânicas, com cureta de Buck e wragatoas estéreis, foi colhido material meatal, que foi então submetido a exames bacteriológico e micológico. No Grupo 1, foi evidenciado presença de Otodectes cynotis (4% das amostras), em 72% dos casos de bolores e leveduras (Cladosporium sp 66,6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33,3%, Rhodotorula sp 20,0%, Mycelia sp 13,3% e Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp, Trichosporon sp, todos com 6,6%) e, finalmente, em 64% da amostragem, bactérias dos gêneros Staphylococcus spp (81,2%), Pseudomonas sp (12,5%), Klebsiella sp (12,5%), Acinetobacter sp, Bacilos difteróides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp (todos com 6,2%). No Grupo 2, o Otodectes sp foi identificado em 36% das amostras, em 96% daquelas isolaram-se fungos dos gêneros: Malassezia sp - 54,1%, Aspergillus e Penicillium sp, ambos com 33,3%, Microsporum sp - 29,1%, Cladosporium sp - 16,6%, Trichoderma sp - 12,5%, Alternaria e Phoma sp, ambos com 8,3% e Epicoccum sp, Neurospora sp. Mycelia sp, Rhodotorula sp, todos com 4,1% e, por fim, em 20 das 25 amostras (80%) isolaram-se pelo menos uma cepa bacteriana (Staphylococcus spp 75%, Klebsiella sp 20,8%, Bacilos difteróides 12,5%, Pseudomonas sp, 8,3%) e Acinetobacter sp, Enterobacter sp e Escherichia sp, todos com 4,1% cada um em cultivo monoespecífico ou em associação.

Elephantgrass (Pennisetum purpurem, Schum) silage under effect of bacterial inoculants / Inoculantes bacterianos na ensilagem do capim-elefante (Pennisetum purpurem, Schum)

This study was carried out to evaluate the effects of bacterial inoculated king grass for silage production with laboratory silos ( 5 liters plastics buclets with valve for gas scape). The elephantgrass was cutted for uniformization and adubation and after 60 days (14,% DM and 9,7% PB) was cutted and sliced at 2cm lenght particle and the treatments were: control (C), Sil-All (SA) inoculant (Streptococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus plantarum, amylase, cellulase e hemicellulase).; Pioneer 1174 (P) inoculant (Streptococcus faecium e Lactobacillus plantarum) SiloBac (SB) inoculant (Lactobacillus plantarum, Streptococcus faecium e Lactobacillus sp. ). After 123 of fermentation, the silos were opened and was the fermentation was characterized and determined dry matter losses and in vitro dry matter digestibility. Amoniacal nitrogen, lactic acid, acetic acid, butiric acid, dry matter losses and in vitro dry matter digestibility did not suffer influence of treatments. C and SA treatments produced silagens with higher pH.

Estudou-se os efeitos de 3 inoculantes biológicos na ensilagem do capim-elefante, cultivar Napier, em silos de laboratório (baldes plásticos de 5 litros, portando válvula para escape dos gases). O capim sofreu corte de uniformização e adubação, sendo cortado 60 dias após, quando apresentou 14,5% de matéria seca e 9,7% de proteína bruta, tendo sido picado em partículas de 2,0 cm e submetido a quatro tratamentos: controle (C); inoculante Sil-All (SA), produto a base de Streptococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus plantarum, amilase, celulase e hemicelulase; inoculante Pioneer 1174 (P), produto a base de Streptococcus faecium e Lactobacillus plantarum; e inoculante SiloBac (SB), produto a base de e Lactobacillus plantarum, Streptococcus faecium e Lactobacillus sp. Os silos foram abertos após 123 dias para determinar o perfil de fermentação, perdas e digestibilidade "in vitro" da matéria seca. Não foram observadas diferenças quanto ao teor de nitrogênio amoniacal, ácido lático, ácido acético, ácido butírico, perdas e digestibilidade in vitro da matéria seca. No entanto, o pH de SB foi menor do que SA e C. O maior pH observado foi o da silagem C.

Inoculantes bacterianos na ensilagem do capim-elefante (Pennisetum purpurem, Schum) / Elephantgrass (Pennisetum purpurem, Schum) silage under effect of bacterial inoculants

Estudou-se os efeitos de 3 inoculantes biológicos na ensilagem do capim-elefante, cultivar Napier, em silos de laboratório (baldes plásticos de 5 litros, portando válvula para escape dos gases). O capim sofreu corte de uniformização e adubação, sendo cortado 60 dias após, quando apresentou 14,5 por cento de matéria seca e 9,7 por cento de proteína bruta, tendo sido picado em partículas de 2,0 cm e submetido a quatro tratamentos: controle (C); inoculante Sil-All (SA), produto a base de Streptococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus plantarum, amilase, celulase e hemicelulase; inoculante Pioneer 1174 (P), produto a base de Streptococcus faecium e Lactobacillus plantarum; e inoculante SiloBac (SB), produto a base de e Lactobacillus plantarum, Streptococcus faecium e Lactobacillus sp. Os silos foram abertos após 123 dias para determinar o perfil de fermentação, perdas e digestibilidade 'in vitro' da matéria seca. Não foram observadas diferenças quanto ao teor de nitrogênio amoniacal, ácido lático, ácido acético, ácido butírico, perdas e digestibilidade in vitro da matéria seca. No entanto, o pH de SB foi menor do que SA e C. O maior pH observado foi o da silagem C.(AU)

This study was carried out to evaluate the effects of bacterial inoculated king grass for silage production with laboratory silos ( 5 liters plastics buclets with valve for gas scape). The elephantgrass was cutted for uniformization and adubation and after 60 days (14, percent DM and 9,7 percent PB) was cutted and sliced at 2cm lenght particle and the treatments were: control (C), Sil-All (SA) inoculant (Streptococcus faecium, Pediococcus acidilactici, Lactobacillus plantarum, amylase, cellulase e hemicellulase).; Pioneer 1174 (P) inoculant (Streptococcus faecium e Lactobacillus plantarum) SiloBac (SB) inoculant (Lactobacillus plantarum, Streptococcus faecium e Lactobacillus sp. ). After 123 of fermentation, the silos were opened and was the fermentation was characterized and determined dry matter losses and in vitro dry matter digestibility. Amoniacal nitrogen, lactic acid, acetic acid, butiric acid, dry matter losses and in vitro dry matter digestibility did not suffer influence of treatments. C and SA treatments produced silagens with higher pH.(AU)

Fiber fraction ruminal degradation of corn silage without spikes with sugar cane and manioc pulp - DOI: 10.4025/actascianimsci.v28i4.606 / Degradação ruminal da fração fibra de silagens de milho sem espigas com cana-de-açúcar e bagaço de mandioca - DOI: 10.4025/actascianimsci.v28i4.606

This study aimed to evaluate the ruminal degradation of corn silages without spikes (CSWS), with addit ion of sugar cane (SC) and dry manioc pulp (DMW), compared to corn silage (CS). The feeds were ensiled with (WI) and without (IF) inoculants - Lactobacillus plantarum and L. paracasei ssp. paracasei. The following fractions were studied: water soluble (A), potentially degradable (B), non degradable (C), fraction B degradable ratio (c); effective (ED) and potential (PD) degradability. The treatments evaluated were: T1 (CSWS + 20% SC -IF); T2 (CSWS + 20% SC-WI); T3 (CSWS + 35% SC-IF); T4 (CSWS + 35% SC -WI); T5 (CSWS + 20% DMW-IF); T6 (CSWS + 20% DMW-WI); T7 (CSWS + 35% DMW -IF); T8 (CSWS + 35% DMW-WI); T9 (CS-WI) and T10 (CS-IF). The average differences were compared on a completely randomized model. Higher (p0.05) were observed between ADF C fraction for T3 (C= 20.7%), T4 (C= 22.6%), T9 (C= 22.7%) and T10 (C= 24.0%). Results in dicate the possibility to include DMW on corn silage, instead of green spikes, to the level of 35%.

Avaliou-se a degradação ruminal da fibra em detergente neutro (FDN) e em detergente ácido (FDA) de silagens de milho sem espigas (SMSE) com cana -de-açúcar (CA) e bagaço seco de mandioca (BSM), comparadas com a silagem de milho com espigas (SMCE). Os alimentos foram ensilados com (CI) e sem inoculante (SI) - Lactobacillus plantarum e L. paracasei ssp. paracasei. Estudaram-se: as frações solúvel (A), potencialmente degradável (B) e não-degradável (C); a taxa de degradação da fração B (c); a degradabilidade efetiva (DE) e potencial (DP). Os tratamentos foram: T1 (SMSE + 20% CA-SI); T2 (SMSE + 20% CA-CI); T3 (SMSE + 35% CA-SI); T4 (SMSE + 35% CA-CI); T5 (SMSE + 20% BSM-SI); T6 (SMSE + 20% BSM-CI); T7 (SMSE + 35% BSM-SI); T8 (SMSE + 35% BSM-CI); T9 (SMCE-SI) e T10 (SMCE-CI). Médias foram comparadas em um delineamento inteiramente casualisado. As mai ores (p0,05) para a fração C da FDA dos tratamentos T3 (C = 20,7%), T4 (C = 22,6%), T9 (C = 22,7%) e T10 (C = 24,0%). Os resultados indicam que há possibilidade para a inclusão do BSM no lugar das espigas de milho verde para a produção de silagem até o nível de 35%.

Utilization of probiotic (Lactobacillus sp.) on diets with differents protein levels on small intestine length and morphometry of meat quails1 - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i3.804 / Utilização de probiótico em rações com diferentes níveis de proteína sobre o comprimento e a morfometria do intestino delgado de codornas de corte - DOI: 10.4025/actascianimsci.v30i3.804

The aim of this study was evaluate the effect of probiotic associated of different levels of crude protein (CP) on length and mucous morphometry of small intestine of meat quails. 2.304 meat quails were used, distributed in a completely randomized experimental design in 2 x 4 factorial scheme (with and without probiotic; four levels of CP 15, 20, 25 and 30%), with two replications by treatment, in two experimental periods. At seven, 14, 21 and 35 days of age, two quails of each replication were slaughtered to evaluate the length of small intestine (LSI) and duodenum and ileum mucous morphometry. LSI and small intestine mucous morphometry were not influenced by probiotic. Intestine length increased in a linear way with CP levels increase at 7, 14 and 21 days of age, and mucous morphometry increased in a linear way only to ileum villum height. It may be concluded that in the good sanitary conditions meat quails were raised the addition of probiotic did not affect on small intestine length and mucous morphometry.

O trabalho objetivou avaliar o efeito do probiótico associado com diferentes níveis de proteína bruta (PB) sobre o comprimento e a morfometria da mucosa do intestino delgado de codornas de corte. Foram utilizadas 2.304 codornas de corte, distribuídas em um delineamento experimental inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 4 (com e sem probiótico; quatro níveis de PB 15, 20, 25 e 30%), com duas repetições por tratamento, em dois períodos experimentais. Aos sete, 14, 21 e 35 dias de idade, foram abatidas duas aves de cada repetição para avaliação do comprimento do intestino delgado (CID) e a morfometria da mucosa do duodeno e íleo. O probiótico não influenciou o CID e a morfometria da mucosa do intestino delgado. O comprimento do intestino aumentou de maneira linear com o aumento dos níveis de PB aos sete, 14 e 21 dias de idade, e a morfometria da mucosa, aumentou de forma linear somente para altura vilo do íleo. Pode-se concluir que nas boas condições sanitárias em que as codornas de corte foram criadas a adição de probiótico não influenciou o comprimento e a morfometria da mucosa do intestino delgado.

Uso de probiótico para codornas de corte (Coturnix coturnix sp)

Foram conduzidos dois experimentos para avaliar o efeito do probiótico sobre o desempenho, rendimento de carcaça, exigências nutricionais de proteína bruta (PB), população microbiana e morfometria do intestino delgado de codornas de corte. No primeiro experimento, foram utilizadas duas diferentes vias de administração de probiótico (água de bebida e ração), ou seja, avaliado o desempenho no período de um a 35 dias de idade, o rendimento de carcaça e de cortes aos 35 dias e a população microbiana do intestino delgado aos sete e aos 14 dias de idade de codornas de corte. Para isso, foram utilizadas 1.050 codornas distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com três tratamentos e cinco repetições de 70 aves cada. Para o rendimento de carcaça e de cortes e população microbiana do intestino delgado, foram abatidas, respectivamente, quatro e uma ave de cada unidade experimental. As codornas do tratamento em que se adicionou probiótico, via ração, apresentaram menor consumo de ração (CR), em relação àquelas que receberam, via água, no período de sete a 14 dias de idade, porém, isso não afetou o ganho de peso (GP), o que levou à melhora na conversão alimentar (CA). Menor CR foi verificado nos períodos de 21 a 28, 28 a 35 e um a 35 dias de idade, para as codornas dos tratamentos com adição probiótico. O rendimento de carcaça e de cortes, a contagem total de Lactobacillus sp., enterobactérias e Escherichia coli não foram influenciados pela adição do probiótico. No segundo experimento, foram utilizadas 2.304 (1.440 no período um e 864 no período dois) codornas de corte para avaliar o desempenho e as exigências nutricionais de PB no período de um a 35 dias de idade, o rendimento de carcaça e de cortes aos 35 dias e a morfometria da mucosa do intestino delgado aos sete, 14, 21 e 35 dias de idade. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 4 (com e sem probiótico e quatro níveis de PB 15, 20, 25 e 30%), com duas repetições por tratamento, em dois períodos experimentais, totalizando 32 repetições. Para análise morfométrica, foram abatidas duas aves de cada unidade experimental (oito aves por tratamento). A adição do probiótico reduziu o CR e melhorou a CA na faixa etária de 1 a sete dias. De acordo com os pesos vivos médios do modelo LRP (Linear Response Plateau), até os 14 dias, a estimativa de exigência é de 27% de PB, a partir desta idade entre 22 e 24% de PB. A adição do probiótico não influenciou o rendimento de carcaça e de cortes. Para o rendimento de carcaça, a exigência de PB de acordo com o modelo quadrático, ficou estimada em 23,53%, em relação ao LRP, a estimativa reduz para 17,13% de PB. Foram estabelecidos primeiros componentes principais envolvendo as variáveis sob estudo com a finalidade de se determinar a exigência envolvendo simultaneamente mais de uma variável. Dentre os componentes principais estimados, aquele envolvendo as variáveis: peso médio aos 35 dias, GP de 1 a 35 dias e CA de 1 a 28 dias foi escolhido para determinar a exigência nutricional de PB por responder por 94,61% da variação, o que resultou estimativa de exigência de 27,37% de acordo com o modelo quadrático e 21,91% de acordo com o LRP. O probiótico não influenciou o comprimento e a morfometria da mucosa do intestino delgado. O nível de PB da dieta influenciou de maneira linear o comprimento do intestino delgado aos sete, 14 e 21 dias de idade e de maneira quadrática aos 35 dias de idade. No íleo, a altura de vilo