Correlação estatística entre parâmetros microscópicos e microbiológicos em pimenta-do-reino moída (Piper nigrum L) comercializada em Minas Gerais / Statistical correlation between microscopic and microbiological parameters in ground black pepper (Pipper nigrum L) sold in Minas Gerais

A ausência de Boas Práticas de Fabricação durante a colheita, processamento e manuseio da pimenta-do-reino pode acarretar a contaminação do produto com sujidades microscópicas e microrganismos. Foram analisadas 227 amostras de pimenta-do-reino, comercializadas em Minas Gerais, coletadas entre 2008 e 2018, quanto à presença de fragmentos de pelo de roedor e de insetos, coliformes a 45°C ou Escherichia coli e Salmonella spp. Para verificar se havia correlação entre os contaminantes, foi empregado método estatístico de regressão linear múltipla. As análises microscópicas evidenciaram presença de fragmentos de pelo de roedor e de insetos em 26,0% e 30,5% das amostras, respectivamente, em valores superiores ao limite tolerado pela RDC 14/2014. Quanto às análises microbiológicas, 10% das amostras apresentaram coliformes a 45°C ou E. coli acima dos limites tolerados pela RDC 12/2001 e em 8,8% das amostras foi detectada presença de Salmonella spp. A avaliação estatística mostrou que houve correlação entre presença de fragmentos de insetos e de pelos de roedor e a contaminação por Salmonella spp. em pimenta-do-reino. Os resultados demonstraram a importância das análises microscópica e microbiológica simultaneamente para detecção dos contaminantes presentes bem como das possíveis relações existentes entre eles e a melhor compreensão dos fatores que favorecem as contaminações.

The absence of Good Manufacturing Practices during harvesting, processing and handling of black pepper can lead to contamination of the product with microscopic dirt and microrganisms. Two hundred and twenty seven black pepper samples, commercialized in Minas Gerais, collected between 2008 and 2018, were analyzed for the presence of rodent and insect fragments, coliforms at 45°C or Escherichia coli and Salmonella spp. To verify whether there was a correlation between the contaminants, a statistical method of multiple linear regression was used. Microscopic analysis showed the presence of rodent and insect fragments in 26.0% and 30.5% of the samples, respectively, in values above the limit tolerated by RDC14/2014. As for the microbiological analysis, 10% of the samples presented coliforms at 45°C or E.coli above the limits tolerated by the RDC 12/2001 and in 8.8% of the samples Salmonella spp. were detected. The statistical evaluation showed that there was a relationship between the presence of insect fragments and rodent hair and contamination by Salmonella spp. in black pepper. The results demonstrated the importance of simultaneous microscopic and microbiological analysis to detect the contaminants present, as well as the possible relationships between them and better understanding of the factors that favor contamination.

Correlação estatística entre parâmetros microscópicos e microbiológicos em pimenta-do-reino moída (Piper nigrum L) comercializada em Minas Gerais / Statistical correlation between microscopic and microbiological parameters in ground black pepper (Pipper nigrum L) sold in Minas Gerais

A ausência de Boas Práticas de Fabricação durante a colheita, processamento e manuseio da pimenta-do-reino pode acarretar a contaminação do produto com sujidades microscópicas e microrganismos. Foram analisadas 227 amostras de pimenta-do-reino, comercializadas em Minas Gerais, coletadas entre 2008 e 2018, quanto à presença de fragmentos de pelo de roedor e de insetos, coliformes a 45°C ou Escherichia coli e Salmonella spp. Para verificar se havia correlação entre os contaminantes, foi empregado método estatístico de regressão linear múltipla. As análises microscópicas evidenciaram presença de fragmentos de pelo de roedor e de insetos em 26,0% e 30,5% das amostras, respectivamente, em valores superiores ao limite tolerado pela RDC 14/2014. Quanto às análises microbiológicas, 10% das amostras apresentaram coliformes a 45°C ou E. coli acima dos limites tolerados pela RDC 12/2001 e em 8,8% das amostras foi detectada presença de Salmonella spp. A avaliação estatística mostrou que houve correlação entre presença de fragmentos de insetos e de pelos de roedor e a contaminação por Salmonella spp. em pimenta-do-reino. Os resultados demonstraram a importância das análises microscópica e microbiológica simultaneamente para detecção dos contaminantes presentes bem como das possíveis relações existentes entre eles e a melhor compreensão dos fatores que favorecem as contaminações.(AU)

The absence of Good Manufacturing Practices during harvesting, processing and handling of black pepper can lead to contamination of the product with microscopic dirt and microrganisms. Two hundred and twenty seven black pepper samples, commercialized in Minas Gerais, collected between 2008 and 2018, were analyzed for the presence of rodent and insect fragments, coliforms at 45°C or Escherichia coli and Salmonella spp. To verify whether there was a correlation between the contaminants, a statistical method of multiple linear regression was used. Microscopic analysis showed the presence of rodent and insect fragments in 26.0% and 30.5% of the samples, respectively, in values above the limit tolerated by RDC14/2014. As for the microbiological analysis, 10% of the samples presented coliforms at 45°C or E.coli above the limits tolerated by the RDC 12/2001 and in 8.8% of the samples Salmonella spp. were detected. The statistical evaluation showed that there was a relationship between the presence of insect fragments and rodent hair and contamination by Salmonella spp. in black pepper. The results demonstrated the importance of simultaneous microscopic and microbiological analysis to detect the contaminants present, as well as the possible relationships between them and better understanding of the factors that favor contamination.(AU)

Effect of the fertilization and growth promoting microrganisms on Schizolobium parahyba / Efeito da adubação e microrganismos promotores de crescimento sobre Schizolobium parahyba

The objective of this work was to evaluate the effect of the chemical and biological fertilizing on the development of two varieties of Schizolobium parahyba, paricá and guapuruvú. The chemical fertilizer NPK 20-05-20 and the plant growth promoting microorganisms, Rhizobium sp. (Rhi) and Rhizophagus clarus (Arbuscular Mycorrhizal Fungus - AMF). The experimental design was a randomized complete block with five replicates and eight treatments. Forty-six day old seedlings of each variety were planted in pits containing hydroretent gel. Then the treatments were added: 1. Control; 2. Rhi; 3. AMF; 4. NPK; 5. Rhi + NPK; 6. Rhi + AMF; 7. AMF + NPK; 8. Rhi + AMF + NPK. Plant length, stem diameter and survival in the environment were evaluated. The ANOVA followed by the Duncan test (α = 0,05) was used to compare the means of the treatments. In the four evaluated periods (37, 111, 250 and 360 days), both varieties had a positive effect on height, diameter and survival when applied to NPK treatments. The interaction AMF and Rhizobium sp. favored the growth in diameter of the guapuruvú. For paricá variety that same treatment provided higher growth in height, however, AMF impaired development in diameter of this variety. Thus, it was observed that under low fertility conditions, the interaction AMF + Rhi favored a greater resistance of guapuruvú to abiotic stress compared to treatment 3, and the presence of grasses in the experimental area may have contributed to the reduction on the development of S. parahyba.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adubação química e biológica no desenvolvimento de duas variedades de Schizolobium parahyba, paricá e guapuruvú. O adubo químico NPK 20-05-20 e os microrganismos promotores de crescimento de plantas, Rhizobium sp. (Rhi) e Rhizophagus clarus (fungo micorrízico arbuscular - FMA). O delineamento experimental utilizado foi de blocos casualizados, com cinco repetições e oito tratamentos. Plântulas com 46 dias de idade de cada variedade foram plantadas em covas contendo gel hidratante. Em seguida, os tratamentos foram adicionados: 1. Controle; 2. Rhi; 3. FMA; 4. NPK; 5. FMA + Rhi; 6. Rhi + NPK; 7. FMA + NPK; 8. FMA + Rhi + NPK. O comprimento das plantas, o diâmetro do caule e a sobrevivência no ambiente foram avaliados. A ANOVA seguida do teste de Duncan (α = 0,05) foi utilizada para comparar as médias dos tratamentos. Nos quatro períodos avaliados (37, 111, 250 e 360 dias), ambas as variedades tiveram efeito positivo na altura, diâmetro e sobrevivência quando aplicadas aos tratamentos com NPK. A interação FMA e Rhizobium sp. favoreceu o crescimento em diâmetro do guapuruvú. Para a variedade paricá, o mesmo tratamento proporcionou maior crescimento em altura, entretanto, o FMA prejudicou o desenvolvimento em diâmetro dessa variedade. Assim, observou-se que sob condições de baixa fertilidade, a interação FMA + Rhi favoreceu uma maior resistência do guapuruvú ao estresse abiótico comparado ao tratamento 3, e a presença de gramíneas na área experimental pode ter contribuído para a redução no desenvolvimento de S parahyba.(AU)

Effect of the fertilization and growth promoting microrganisms on Schizolobium parahyba / Efeito da adubação e microrganismos promotores de crescimento sobre Schizolobium parahyba

The objective of this work was to evaluate the effect of the chemical and biological fertilizing on the development of two varieties of Schizolobium parahyba, paricá and guapuruvú. The chemical fertilizer NPK 20-05-20 and the plant growth promoting microorganisms, Rhizobium sp. (Rhi) and Rhizophagus clarus (Arbuscular Mycorrhizal Fungus - AMF). The experimental design was a randomized complete block with five replicates and eight treatments. Forty-six day old seedlings of each variety were planted in pits containing hydroretent gel. Then the treatments were added: 1. Control; 2. Rhi; 3. AMF; 4. NPK; 5. Rhi + NPK; 6. Rhi + AMF; 7. AMF + NPK; 8. Rhi + AMF + NPK. Plant length, stem diameter and survival in the environment were evaluated. The ANOVA followed by the Duncan test (α = 0,05) was used to compare the means of the treatments. In the four evaluated periods (37, 111, 250 and 360 days), both varieties had a positive effect on height, diameter and survival when applied to NPK treatments. The interaction AMF and Rhizobium sp. favored the growth in diameter of the guapuruvú. For paricá variety that same treatment provided higher growth in height, however, AMF impaired development in diameter of this variety. Thus, it was observed that under low fertility conditions, the interaction AMF + Rhi favored a greater resistance of guapuruvú to abiotic stress compared to treatment 3, and the presence of grasses in the experimental area may have contributed to the reduction on the development of S. parahyba.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adubação química e biológica no desenvolvimento de duas variedades de Schizolobium parahyba, paricá e guapuruvú. O adubo químico NPK 20-05-20 e os microrganismos promotores de crescimento de plantas, Rhizobium sp. (Rhi) e Rhizophagus clarus (fungo micorrízico arbuscular - FMA). O delineamento experimental utilizado foi de blocos casualizados, com cinco repetições e oito tratamentos. Plântulas com 46 dias de idade de cada variedade foram plantadas em covas contendo gel hidratante. Em seguida, os tratamentos foram adicionados: 1. Controle; 2. Rhi; 3. FMA; 4. NPK; 5. FMA + Rhi; 6. Rhi + NPK; 7. FMA + NPK; 8. FMA + Rhi + NPK. O comprimento das plantas, o diâmetro do caule e a sobrevivência no ambiente foram avaliados. A ANOVA seguida do teste de Duncan (α = 0,05) foi utilizada para comparar as médias dos tratamentos. Nos quatro períodos avaliados (37, 111, 250 e 360 dias), ambas as variedades tiveram efeito positivo na altura, diâmetro e sobrevivência quando aplicadas aos tratamentos com NPK. A interação FMA e Rhizobium sp. favoreceu o crescimento em diâmetro do guapuruvú. Para a variedade paricá, o mesmo tratamento proporcionou maior crescimento em altura, entretanto, o FMA prejudicou o desenvolvimento em diâmetro dessa variedade. Assim, observou-se que sob condições de baixa fertilidade, a interação FMA + Rhi favoreceu uma maior resistência do guapuruvú ao estresse abiótico comparado ao tratamento 3, e a presença de gramíneas na área experimental pode ter contribuído para a redução no desenvolvimento de S parahyba.

Pesquisa de microrganismos patogênicos em produtos cárneos de estabelecimentos certificados pelo Serviço de Inspeção Municipal de Rio Verde GO / Research of pathogenic microrganisms in meat products from certified establishments by the Rio Verde Municipal Inspection Service - GO

A incidência e a quantidade dos microrganismos patogênicos, presentes na carne, varia de acordo com as condições de manejo durante a criação e com os cuidados higiênicos nas operações de abate dos animais e posterior manipulação das carcaças. Neste sentido, este trabalho promoveu uma análise microbiológica de microrganismos patogênicos presentes em quibe cru e cortes de frango temperado produzidos no município de Rio Verde, Goiás. No diagnóstico, foram encontradas prevalências de Salmonella spp., Bacillus cereus e Listeria spp, comprovando as falhas presentes na manipulação. Concluindo que há falhas e necessidades de adequações técnicas, como adequação na legislação vigente à realidade dos municípios.(AU)

Pesquisa de microrganismos patogênicos em produtos cárneos de estabelecimentos certificados pelo Serviço de Inspeção Municipal de Rio Verde – GO / Research of pathogenic microrganisms in meat products from certified establishments by the Rio Verde Municipal Inspection Service - GO

A incidência e a quantidade dos microrganismos patogênicos, presentes na carne, varia de acordo com as condições de manejo durante a criação e com os cuidados higiênicos nas operações de abate dos animais e posterior manipulação das carcaças. Neste sentido, este trabalho promoveu uma análise microbiológica de microrganismos patogênicos presentes em quibe cru e cortes de frango temperado produzidos no município de Rio Verde, Goiás. No diagnóstico, foram encontradas prevalências de Salmonella spp., Bacillus cereus e Listeria spp, comprovando as falhas presentes na manipulação. Concluindo que há falhas e necessidades de adequações técnicas, como adequação na legislação vigente à realidade dos municípios.

Identificação por espectrometria de massa MALDI-TOF de Salmonella spp. e Escherichia coli isolados de carcaças bovinas

ABSTRACT: The aim of this study was to introduce matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) time-of-flight (TOF) mass spectrometry to improve the traditional microbiological method for the detection of Salmonella spp. and Escherichia coli in beef carcasses. Two hundred seventy samples from 90 beef carcasses were evaluated. The methodologies described in ISO 6579:2002 and in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods were used for Salmonella spp. and E. coli isolation, respectively. MALDI-TOF analysis were performed on tryptone soya broth suspension isolates or directly from nutrient agar colonies, from the positive, inconclusive or negative biochemically tested samples for Salmonella and E. coli. Mass profiles were acquired on an Autoflex III SmartBeam MALDI-TOF mass spectrometer and the raw spectra were processed using the MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics). According to the preliminary identification based on colony morphology and the biochemical reactions, seven isolates were positive for Salmonella spp. Through MALDI Biotyper these seven isolates were also classified as belonging to the genus Salmonella and further identified as S. enterica. Four isolates showing unusual phenotypic characteristics and inconclusive results in biochemical tests for Salmonella were identified as belonging to Citrobacter and Proteus genera after MALDI analysis. Regarding Escherichia coli, 37 were positive for species biochemical testing which MALDI Biotyper confirmed. MALDI-TOF methodology allowed rapid Salmonella spp. and E. coli identity confirmation and may be used to detect these microrganisms within bacterial isolates from beef carcasses.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi introduzir a técnica de espectrometria de massa com fonte de ionização e dessorção a laser assistida por matriz e analisador de tempo-de-voo (MALDI-TOF) para incrementar o método tradicional microbiológico na detecção de Salmonella spp. e Escherichia coli em carcaças bovinas. Foram avaliadas 270 amostras de 90 carcaças de bovinos. Para isolamento de Salmonella spp. e E. coli, foram utilizadas, respectivamente, as metodologias descritas na ISO 6579:2002 e no Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. As análises por MALDI-TOF foram realizadas a partir de isolados cultivados em ágar nutriente ou em caldo triptona de soja, provenientes das amostras com características bioquímicas positivas (n=7), inconclusivas (n=4) e negativas (n=85) para Salmonella spp. e bioquímicas positivas (n=37) e negativas (n=85) para E. coli. Os perfis de massas foram adquiridos com o espectrômetro de massas MALDI-TOF Autoflex III SmartBeam e os espectros brutos foram processados usando o programa MALDI Biotyper (Bruker Daltonics). De acordo com a identificação preliminar, com base na morfologia das colônias e nas reações bioquímicas, sete isolados foram considerados positivos para Salmonella spp. Através do MALDI Biotyper, esses sete isolados foram classificados como pertencentes ao gênero Salmonella e, além disso, identificados como S. enterica. Quatro isolados que apresentaram características fenotípicas não usuais e resultados inconclusivos nos testes bioquímicos para Salmonella foram identificados como pertencentes aos gêneros Citrobacter e Proteus após análise por MALDI. Para E. coli, 37 amostras foram positivas pelos testes bioquímicos da espécie, o que foi confirmado por MALDI Biotyper. A metodologia MALDI-TOF permitiu a rápida confirmação da identidade de Salmonella spp. e E. coli, podendo ser utilizada para detecção desses microrganismos em isolados bacterianos de carcaças bovinas.

Degradabilidade ruminal de casca de vagem de feijão-fava (Phaseolus lunatus L. ) amonizada com ureia / Ruminal degradability of shell of pods of the lima bean (“Phaseolus lunatus” L. ) ammoniated with urea

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar a degradabilidade ruminal da matéria seca, proteína bruta e fibra em detergente neutro de casca de vagem de feijão-fava (Phaseolus lunatus L.) não amonizada (controle) ou amonizada com três níveis de ureia (2; 4 e 6%, com base na matéria seca). Foram utilizados três bovinos Girolandos providos de cânula ruminal, com peso vivo médio 400±5,3 kg, cada. A amonização das cascas de feijão-fava com 6% de ureia resultou em maiores teores de proteína bruta (15,7%) e degradabilidade potencial da proteína bruta (91,7%). A degradação potencial da matéria seca aumentou (P<0,05) com o tempo de incubação, atingindo 85,1% às 48 h de incubação, embora a amonização não tenha promovido alterações relevantes na cinética de degradação ruminal deste constituinte. Quanto à cinética de degradação ruminal da fibra em detergente neutro, a amonização com 6% de ureia reduziu em cerca de 1 h o tempo de latência (lag time), no entanto, este efeito não influenciou os demais parâmetros de degradação da fibra em detergente neutro, com taxa de degradação compatível com as características de alimentos fibrosos. A casca de feijão-fava apresenta elevada taxa de degradação, consistindo em um alimento volumoso de boa qualidade, apesar de consistir resíduo de cultura. A amonização de casca de feijão-fava com ureia não promove melhoria na degradabilidade da matéria seca, embora proporcione elevação do teor de nitrogênio total disponível aos microrganismos do rúmen e melhore a degradabilidade da fibra em detergente neutro, sendo o nível de 6 % mais indicado para o tratamento desse volumoso.(AU)

This study aimed to evaluate the dry matter, crude protein and neutral detergent fiber ruminal degradability of shell pods of lima bean (Phaseolus lunatus L.) ammoniated with four levels of urea (0; 2; 4 and 6% in dry matter basis). Three adult cattle Girolando breed, with 400±5,3kg of body weight fistulated with ruminal cannula were utilized. Ammoniation of shell of pods of the lima bean as 6% urea resulted in higher crude protein content (15.7%) of shell pods and degradability of crude protein (91.7%). Potential degradation of dry matter increased (P<0.05) with the incubation time, reaching 85.1% at 48 h of incubation, although the ammoniation not promoted significant changes in ruminal degradation kinetics of this constituent. Regarding the kinetics of ruminal degradation of neutral detergent fiber, ammoniation with 6% urea decreased by approximately 1 h in the lag time, although no influence has verified to other parameters of neutral detergent fiber degradation, with degradation rate compatible with the characteristics of fibrous feeds (about 3% h−1). The lima bean shell pods of presents high degradation rate, consisting in a bulky feed of good quality, although considered a waste of culture. Ammoniation of shell pods of lima bean with urea does not promote improvement in dry matter degradability, although result in improvement of total nitrogen available to microrganisms in the rumen, with improve the neutral detergent fiber degradability, and the level of 6% more suitable for treatment in this bulky.(AU)

Degradabilidade ruminal de casca de vagem de feijão-fava (Phaseolus lunatus L. ) amonizada com ureia / Ruminal degradability of shell of pods of the lima bean (“Phaseolus lunatus” L. ) ammoniated with urea

Objetivou-se com esta pesquisa avaliar a degradabilidade ruminal da matéria seca, proteína bruta e fibra em detergente neutro de casca de vagem de feijão-fava (Phaseolus lunatus L.) não amonizada (controle) ou amonizada com três níveis de ureia (2; 4 e 6%, com base na matéria seca). Foram utilizados três bovinos Girolandos providos de cânula ruminal, com peso vivo médio 400±5,3 kg, cada. A amonização das cascas de feijão-fava com 6% de ureia resultou em maiores teores de proteína bruta (15,7%) e degradabilidade potencial da proteína bruta (91,7%). A degradação potencial da matéria seca aumentou (P<0,05) com o tempo de incubação, atingindo 85,1% às 48 h de incubação, embora a amonização não tenha promovido alterações relevantes na cinética de degradação ruminal deste constituinte. Quanto à cinética de degradação ruminal da fibra em detergente neutro, a amonização com 6% de ureia reduziu em cerca de 1 h o tempo de latência (lag time), no entanto, este efeito não influenciou os demais parâmetros de degradação da fibra em detergente neutro, com taxa de degradação compatível com as características de alimentos fibrosos. A casca de feijão-fava apresenta elevada taxa de degradação, consistindo em um alimento volumoso de boa qualidade, apesar de consistir resíduo de cultura. A amonização de casca de feijão-fava com ureia não promove melhoria na degradabilidade da matéria seca, embora proporcione elevação do teor de nitrogênio total disponível aos microrganismos do rúmen e melhore a degradabilidade da fibra em detergente neutro, sendo o nível de 6 % mais indicado para o tratamento desse volumoso.

This study aimed to evaluate the dry matter, crude protein and neutral detergent fiber ruminal degradability of shell pods of lima bean (Phaseolus lunatus L.) ammoniated with four levels of urea (0; 2; 4 and 6% in dry matter basis). Three adult cattle Girolando breed, with 400±5,3kg of body weight fistulated with ruminal cannula were utilized. Ammoniation of shell of pods of the lima bean as 6% urea resulted in higher crude protein content (15.7%) of shell pods and degradability of crude protein (91.7%). Potential degradation of dry matter increased (P<0.05) with the incubation time, reaching 85.1% at 48 h of incubation, although the ammoniation not promoted significant changes in ruminal degradation kinetics of this constituent. Regarding the kinetics of ruminal degradation of neutral detergent fiber, ammoniation with 6% urea decreased by approximately 1 h in the lag time, although no influence has verified to other parameters of neutral detergent fiber degradation, with degradation rate compatible with the characteristics of fibrous feeds (about 3% h−1). The lima bean shell pods of presents high degradation rate, consisting in a bulky feed of good quality, although considered a waste of culture. Ammoniation of shell pods of lima bean with urea does not promote improvement in dry matter degradability, although result in improvement of total nitrogen available to microrganisms in the rumen, with improve the neutral detergent fiber degradability, and the level of 6% more suitable for treatment in this bulky.

Identificação por espectrometria de massa MALDI-TOF de Salmonella spp. e Escherichia coli isolados de carcaças bovinas / MALDI-TOF mass spectrometry identification of Salmonella spp. and Escherichia coli isolated from bovine carcasses

O objetivo deste trabalho foi introduzir a técnica de espectrometria de massa com fonte de ionização e dessorção a laser assistida por matriz e analisador de tempo-de-voo (MALDI-TOF) para incrementar o método tradicional microbiológico na detecção de Salmonella spp. e Escherichia coli em carcaças bovinas. Foram avaliadas 270 amostras de 90 carcaças de bovinos. Para isolamento de Salmonella spp. e E. coli, foram utilizadas, respectivamente, as metodologias descritas na ISO 6579:2002 e no Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. As análises por MALDI-TOF foram realizadas a partir de isolados cultivados em ágar nutriente ou em caldo triptona de soja, provenientes das amostras com características bioquímicas positivas (n=7), inconclusivas (n=4) e negativas (n=85) para Salmonella spp. e bioquímicas positivas (n=37) e negativas (n=85) para E. coli. Os perfis de massas foram adquiridos com o espectrômetro de massas MALDI-TOF Autoflex III SmartBeam e os espectros brutos foram processados usando o programa MALDI Biotyper (Bruker Daltonics). De acordo com a identificação preliminar, com base na morfologia das colônias e nas reações bioquímicas, sete isolados foram considerados positivos para Salmonella spp. Através do MALDI Biotyper, esses sete isolados foram classificados como pertencentes ao gênero Salmonella e, além disso, identificados como S. enterica. Quatro isolados que apresentaram características fenotípicas não usuais e resultados inconclusivos nos testes bioquímicos para Salmonella foram identificados como pertencentes aos gêneros Citrobacter e Proteus após análise por MALDI. Para E. coli, 37 amostras foram positivas pelos testes bioquímicos da espécie, o que foi confirmado por MALDI Biotyper. A metodologia MALDI-TOF permitiu a rápida confirmação da identidade de Salmonella spp. e E. coli, podendo ser utilizada para detecção desses microrganismos em isolados bacterianos de carcaças bovinas.(AU)

The aim of this study was to introduce matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) time-of-flight (TOF) mass spectrometry to improve the traditional microbiological method for the detection of Salmonella spp. and Escherichia coli in beef carcasses. Two hundred seventy samples from 90 beef carcasses were evaluated. The methodologies described in ISO 6579:2002 and in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods were used for Salmonella spp. and E. coli isolation, respectively. MALDI-TOF analysis were performed on tryptone soya broth suspension isolates or directly from nutrient agar colonies, from the positive, inconclusive or negative biochemically tested samples for Salmonella and E. coli. Mass profiles were acquired on an Autoflex III SmartBeam MALDI-TOF mass spectrometer and the raw spectra were processed using the MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics). According to the preliminary identification based on colony morphology and the biochemical reactions, seven isolates were positive for Salmonella spp. Through MALDI Biotyper these seven isolates were also classified as belonging to the genus Salmonella and further identified as S. enterica. Four isolates showing unusual phenotypic characteristics and inconclusive results in biochemical tests for Salmonella were identified as belonging to Citrobacter and Proteus genera after MALDI analysis. Regarding Escherichia coli, 37 were positive for species biochemical testing which MALDI Biotyper confirmed. MALDI-TOF methodology allowed rapid Salmonella spp. and E. coli identity confirmation and may be used to detect these microrganisms within bacterial isolates from beef carcasses.(AU)

Identificação por espectrometria de massa MALDI-TOF de Salmonella spp. e Escherichia coli isolados de carcaças bovinas / MALDI-TOF mass spectrometry identification of Salmonella spp. and Escherichia coli isolated from bovine carcasses

O objetivo deste trabalho foi introduzir a técnica de espectrometria de massa com fonte de ionização e dessorção a laser assistida por matriz e analisador de tempo-de-voo (MALDI-TOF) para incrementar o método tradicional microbiológico na detecção de Salmonella spp. e Escherichia coli em carcaças bovinas. Foram avaliadas 270 amostras de 90 carcaças de bovinos. Para isolamento de Salmonella spp. e E. coli, foram utilizadas, respectivamente, as metodologias descritas na ISO 6579:2002 e no Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. As análises por MALDI-TOF foram realizadas a partir de isolados cultivados em ágar nutriente ou em caldo triptona de soja, provenientes das amostras com características bioquímicas positivas (n=7), inconclusivas (n=4) e negativas (n=85) para Salmonella spp. e bioquímicas positivas (n=37) e negativas (n=85) para E. coli. Os perfis de massas foram adquiridos com o espectrômetro de massas MALDI-TOF Autoflex III SmartBeam e os espectros brutos foram processados usando o programa MALDI Biotyper (Bruker Daltonics). De acordo com a identificação preliminar, com base na morfologia das colônias e nas reações bioquímicas, sete isolados foram considerados positivos para Salmonella spp. Através do MALDI Biotyper, esses sete isolados foram classificados como pertencentes ao gênero Salmonella e, além disso, identificados como S. enterica. Quatro isolados que apresentaram características fenotípicas não usuais e resultados inconclusivos nos testes bioquímicos para Salmonella foram identificados como pertencentes aos gêneros Citrobacter e Proteus após análise por MALDI. Para E. coli, 37 amostras foram positivas pelos testes bioquímicos da espécie, o que foi confirmado por MALDI Biotyper. A metodologia MALDI-TOF permitiu a rápida confirmação da identidade de Salmonella spp. e E. coli, podendo ser utilizada para detecção desses microrganismos em isolados bacterianos de carcaças bovinas.(AU)

The aim of this study was to introduce matrix-assisted laser desorption/ionization (MALDI) time-of-flight (TOF) mass spectrometry to improve the traditional microbiological method for the detection of Salmonella spp. and Escherichia coli in beef carcasses. Two hundred seventy samples from 90 beef carcasses were evaluated. The methodologies described in ISO 6579:2002 and in the Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods were used for Salmonella spp. and E. coli isolation, respectively. MALDI-TOF analysis were performed on tryptone soya broth suspension isolates or directly from nutrient agar colonies, from the positive, inconclusive or negative biochemically tested samples for Salmonella and E. coli. Mass profiles were acquired on an Autoflex III SmartBeam MALDI-TOF mass spectrometer and the raw spectra were processed using the MALDI Biotyper software (Bruker Daltonics). According to the preliminary identification based on colony morphology and the biochemical reactions, seven isolates were positive for Salmonella spp. Through MALDI Biotyper these seven isolates were also classified as belonging to the genus Salmonella and further identified as S. enterica. Four isolates showing unusual phenotypic characteristics and inconclusive results in biochemical tests for Salmonella were identified as belonging to Citrobacter and Proteus genera after MALDI analysis. Regarding Escherichia coli, 37 were positive for species biochemical testing which MALDI Biotyper confirmed. MALDI-TOF methodology allowed rapid Salmonella spp. and E. coli identity confirmation and may be used to detect these microrganisms within bacterial isolates from beef carcasses.(AU)

Antimicrobial and antioxidant activity of essential oil and different plant extracts of Psidium cattleianum Sabine

Abstract The goals of the study were to determinethe antimicrobial and antioxidant activities of essential oil and plant extracts aqueous and ethanolic of Psidium cattleianum Sabine; the chemical composition of the essential oil of P. cattleianum; and the phytochemical screening of aqueous and ethanolic extracts of the same plant. Regarding the antimicrobial activity, the ethanolic extract exhibited moderate antimicrobial activity with respect to bacteria K. pneumoniae and S. epidermidis, whereas, regarding other microorganisms, it showed activity considered weak. The aqueous extract and the essential oil showed activity considered weak, although they inhibited the growth of microorganisms. About the antioxidant potential, the ethanolic and aqueous extracts exhibited a scavenging index exceeding 90%, while the essential oil didn´t show significant antioxidant activity. Regarding the phytochemical composition, the largest class of volatile compounds identified in the essential oil of P. cattleianum included the following terpenic hydrocarbons: -copaene (22%); eucalyptol (15%), -cadinene (9.63%) and -selinene (6.5%). The phytochemical screening of extracts showed the presence of tannins, flavonoids, and triterpenoids for aqueous and ethanolic extracts. The extracts and essential oils inhibit the growth of microrganisms and plant extracts showed significant antioxidant activity. Also, the phytochemical characterization of the essential oil showed the presence of compounds interest commercial, as well as extracts showed the presence of important classes and compounds with biological activities.

Resumo Os objetivos do trabalho foram determinar as atividades antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial e dos extratos vegetais aquoso e etanólico de Psidium cattleianum Sabine; a composição química do óleo essencial P. cattleianum e a triagem fitoquímica dos extratos vegetais aquoso e etanólico da mesma planta. Quanto à atividade antimicrobiana, o extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana moderada frente as bactérias K. pneumonieae e S. epidermidis, enquanto frente aos demais micro-organismos apresentou atividade considerada fraca. O extrato aquoso e o óleo essencial apresentaram atividade considerada fraca, embora tenham inibido o crescimento dos micro-organismos. Em relação ao potencial antioxidante, os extratos etanólico e aquoso apresentaram índice de sequestro superior a 90%, enquanto o óleo essencial não apresentou atividade antioxidante significativa. Para a composição fitoquímica, a maior classe de compostos voláteis identificados no óleo essencial de P. cattleianum foram os hidrocarbonetos terpênicos, sendo eles: -copaeno (22%), eucaliptol (15%), -cadineno (9,63%) e -selineno (6,5%). Na triagem fitoquímica dos extratos verificou-se a presença de taninos, flavonóides e triterpenóides tanto para o extrato aquoso quanto etanólico. Os extratos e óleo essencial inibiram o crescimento dos micro-organismos e os extratos vegetais apresentaram atividade antioxidante significativa. Também, a caracterização fitoquímica do óleo essencial mostrou a presença de compostos de interesse comercial, assim como os extratos apresentaram a presença de classes e compostos com importantes atividades biológicas.

Análise das sequências de genes marcadores evolutivos dos gêneros Prevotella e Megasphaera na classificação de organismos ruminais

Com a busca constante pela melhoria da eficiência produtiva da bovinocultura, influenciada tanto pela necessidade do aumento da produção em menores áreas como pela pressão para a diminuição dos impactos ambientais, é imprescindível que tenhamos um melhor entendimento acerca dos processos que ocorrem no ambiente ruminal. A presente tese objetivou, por meio de análises filogenéticas de gêneros bacterianos ruminais, gerar conhecimento e permitir um melhor entendimento das comunidades microbianas presentes neste rico ambiente. Para tanto, foram realizados estudos com análises filogenéticas utilizando genes marcadores evolutivos de dois gêneros com crescente importância no estudo da microbiologia ruminal, os gêneros Prevotella e Megasphaera. O primeiro estudo mostrou a presença de sequências do gene 16S rRNA de Prevotellas ruminais não cultivadas com forte relação com espécies de Prevotellas não ruminais, indicando origem comum entre essas sequências e facilidade para o desenvolvimento de espécies de Prevotellas com diferentes preferências de substratos de fermentação no rúmen. Além disso, pôde-se verificar que as sequências não cultivadas de Prevotella sp. RML113, RML67, RML125, RML110 e NRCM B1 possuem grande probabilidade de representarem novas espécies dentro do gênero. No segundo estudo foi verificado que o gênero Megasphaera formou um clado profundamente enraizado com o gênero monoespecífico Anaeroglobus, com a formação de pelo menos três clusters internos bem definidos dentro do gênero. Os achados deste trabalho mostram que A. geminatus não é independente do gênero Megasphaera, formando com as outras espécies deste gênero um ramo monofilético suportando a proposição de que A. geminatus deva ser reclassificado como Megasphaera geminata comb. nov. Concluise assim que o uso de análises filogenéticas utilizando genes marcadores evolutivos de microrganismos ruminais se mostra uma ferramenta eficiente para a melhor compreensão das relações que ocorrem na comunidade microbiana do rúmen e os fatores que a afetam.

The search for improving the productive efficiency of the livestock activity, influenced both by the search to increase production in smaller areas and by the pressure to reduce environmental impacts, there is a growing need for us to have a better understanding of the processes that occur in the rumen environment. The present thesis aimed to carry out phylogenetic analyzes of ruminal bacterial genera in order to generate knowledge and allow a better understanding of the microbial communities present in this rich environment. For that, studies with phylogenetic analyzes were carried out using evolutionary marker genes of two genera with increasing importance in the study of ruminal microbiology, the Prevotella and Megasphaera genera. The first study showed that the presence of sequences of the 16S rRNA gene from non-cultured ruminal Prevotellas with a strong relationship with non-ruminal Prevotellas species indicated a common origin between these sequences and demonstrated that this environment facilitates the development of Prevotellas species with different substrate preferences fermentation. In addition, it was possible to verify that the uncultivated sequences of Prevotella sp. RML113, RML67, RML125, RML110 and NRCM B1 have a high probability of representing new species within the genus. In the second study it was found that the genus Megasphaera formed a clade deeply rooted with the monospecific genus Anaeroglobus, with the formation of at least three well-defined internal clusters within the genus. The findings of this work show that A. geminatus is not independent of the genus Megasphaera, forming with the other species of this genus a monophyletic branch supporting the proposition that A. geminatus should be reclassified as Megasphaera geminata comb. nov. It is concluded that the use of phylogenetic analyzes using evolutionary marker genes of ruminal microrganisms proves to be an efficient tool for a better understanding of the relationships that occur in the rumen microbial community and the factors that affect it.

Antimicrobial and antioxidant activity of essential oil and different plant extracts of Psidium cattleianum Sabine / Atividade antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial e diferentes extratos vegetais de Psidium cattleianum Sabine

Abstract The goals of the study were to determinethe antimicrobial and antioxidant activities of essential oil and plant extracts aqueous and ethanolic of Psidium cattleianum Sabine; the chemical composition of the essential oil of P. cattleianum; and the phytochemical screening of aqueous and ethanolic extracts of the same plant. Regarding the antimicrobial activity, the ethanolic extract exhibited moderate antimicrobial activity with respect to bacteria K. pneumoniae and S. epidermidis, whereas, regarding other microorganisms, it showed activity considered weak. The aqueous extract and the essential oil showed activity considered weak, although they inhibited the growth of microorganisms. About the antioxidant potential, the ethanolic and aqueous extracts exhibited a scavenging index exceeding 90%, while the essential oil didn´t show significant antioxidant activity. Regarding the phytochemical composition, the largest class of volatile compounds identified in the essential oil of P. cattleianum included the following terpenic hydrocarbons: -copaene (22%); eucalyptol (15%), -cadinene (9.63%) and -selinene (6.5%). The phytochemical screening of extracts showed the presence of tannins, flavonoids, and triterpenoids for aqueous and ethanolic extracts. The extracts and essential oils inhibit the growth of microrganisms and plant extracts showed significant antioxidant activity. Also, the phytochemical characterization of the essential oil showed the presence of compounds interest commercial, as well as extracts showed the presence of important classes and compounds with biological activities.(AU)

Resumo Os objetivos do trabalho foram determinar as atividades antimicrobiana e antioxidante do óleo essencial e dos extratos vegetais aquoso e etanólico de Psidium cattleianum Sabine; a composição química do óleo essencial P. cattleianum e a triagem fitoquímica dos extratos vegetais aquoso e etanólico da mesma planta. Quanto à atividade antimicrobiana, o extrato etanólico apresentou atividade antimicrobiana moderada frente as bactérias K. pneumonieae e S. epidermidis, enquanto frente aos demais micro-organismos apresentou atividade considerada fraca. O extrato aquoso e o óleo essencial apresentaram atividade considerada fraca, embora tenham inibido o crescimento dos micro-organismos. Em relação ao potencial antioxidante, os extratos etanólico e aquoso apresentaram índice de sequestro superior a 90%, enquanto o óleo essencial não apresentou atividade antioxidante significativa. Para a composição fitoquímica, a maior classe de compostos voláteis identificados no óleo essencial de P. cattleianum foram os hidrocarbonetos terpênicos, sendo eles: -copaeno (22%), eucaliptol (15%), -cadineno (9,63%) e -selineno (6,5%). Na triagem fitoquímica dos extratos verificou-se a presença de taninos, flavonóides e triterpenóides tanto para o extrato aquoso quanto etanólico. Os extratos e óleo essencial inibiram o crescimento dos micro-organismos e os extratos vegetais apresentaram atividade antioxidante significativa. Também, a caracterização fitoquímica do óleo essencial mostrou a presença de compostos de interesse comercial, assim como os extratos apresentaram a presença de classes e compostos com importantes atividades biológicas.(AU)

Isolamento microbiológico do canal auditivo de cães saudáveis e com otite externa na região metropolitana de Recife, Pernambuco / Microbiological isolation from the ear canal of healthy dogs and with otitis externa in the metropolitan region of Recife, Pernambuco

Otite externa (OE) é o termo utilizado para definir a inflamação do conduto auditivo externo; esta doença possui diversas etiologias, ocorre em várias espécies e é particularmente frequente em cães. Os microrganismos da microbiota residente comumente estão envolvidos na etiopatogenia da OE, sendo apontados como agentes perpetuadores da doença. O objetivo deste estudo foi investigar o perfil microbiológico de cães com conduto auditivo saudável e com otite na região metropolitana do Recife. Com o auxílio de suabes estéreis foram coletadas amostras das orelhas direita e esquerda de 41 cães, sendo 11 com OE e 30 sem OE. Foi realizado o isolamento bacteriano e fúngico das amostras cultivadas; observou-se positividade em 80% dos cães com orelhas saudáveis e presença de mais de um microrganismo em 38 amostras (63,3%); já nos cães com OE, a positividade foi 95,3%, com infecção polimicrobiana em 77,3% das amostras. No que se refere aos gêneros bacterianos, o perfil de isolamento microbiológico foi idêntico entre os cães otopatas e sadios. Os microrganismos isolados foram Staphylococcus sp., Micrococcus, Bacillus sp., Streptococcus sp. e Malassezia sp.(AU)

Otitis externa (OE) is the term used to describe inflammation of the external ear canal. This disease has many etiologies, occurs in several species and is particularly common in dogs. The resident microbiota microorganisms are commonly involved in the OE etiopathogenesis, being frequently appointed as perpetuator agents. The aim of this study was to investigate the microbiological profile of dogs with healthy ears and of others with otitis in the metropolitan region of Recife, Pernambuco, Brazil. With the aid of sterile swabs, samples of right and left ear of 41 dogs, 11 with and 30 without OE, were collected. Bacterial and fungal isolation was performed with cultured samples; positivity was observed in 80% of animals with healthy ears, with the presence of more than one microrganism in 38 samples (63.3%), whereas in dogs with OE, the positivity was 95.3% with polymicrobial infection in 77.3% samples. With regard to the genus, the microbiological profile was identical between healthy and diseased dogs. The microrganisms isolated were Staphylococcus sp., Micrococcus, Bacillus sp., Streptococcus sp. and Malassezia sp.(AU)

Diagnóstico de defeitos em queijos artesanais produzidos na região Serro MG

Esta pesquisa teve o objetivo de diagnosticar defeitos em queijos artesanais da região Serro. A investigação foi realizada nas épocas de inverno (2019) e verão (2020). Amostras de queijos (n=59) foram obtidas em queijarias artesanais e comércio dos municípios de Alvorada de Minas, Conceição do Mato Dentro, Dom Joaquim e Serro. Foram coletadas amostras de queijos oficialmente cadastrados como Queijo Minas Artesanal e também de queijos sem identificação. As amostras foram acondicionadas em caixas térmicas com gelo e encaminhadas ao Setor de Ciência e Tecnologia dos Produtos de Origem Animal (DZO/UFVJM), onde foram analisados: presença de odores desagradáveis; condições da embalagem e do rótulo; presença de soro de leite na embalagem; peso; altura; diâmetro; formato; anormalidades na casca do queijo; presença de olhaduras; firmeza; aspecto da massa (ressecada); pH; umidade; gordura no extrato seco; contagem total de bactérias láticas; contagem total de microrganismos psicrotróficos. Após avaliação das embalagens e rótulos constatou-se que, do total de amostras, dezesseis apresentavam rótulo que as identificava como Queijo Minas Artesanal Serro produzidos por produtores cadastrados no Instituto Mineiro de Agropecuária. As quarenta e três amostras restantes, por não possuírem rótulo, foram classificadas como queijos artesanais sem identificação e os resultados de suas análises foram comparados à legislação em vigor. De Queijos Minas Artesanais analisados foram obtidas as seguintes amplitudes: altura (3,5 a 7 cm), diâmetro (11,9 a 14 cm), peso (514,8 a 1102,9 g), pH (4,79 a 6,04), firmeza (0,21 a 1,38 g), gordura no extrato seco (45,52 a 81,63 g.100g-1), umidade (30,14 a 56,45 g.100g-1), contagem total de microrganismos psicrotróficos (5,26 a 6,4 Log UFCg¹) e contagem total de bactérias láticas (3,46 a 5,32 Log UFCg¹). Em queijos artesanais sem identificação observou-se as seguintes amplitudes: altura (4 a 6,8 cm), diâmetro (11 a 14,1 cm), peso (327,7 a 1075,5 g), firmeza (0,1 a 1,9 g), pH (4,65 a 6,13), gordura no extrato seco (29,19 a 88,99 g.100g-1), umidade (19,90 a 56,39 g.100g-1), contagem total de microrganismos psicrotróficos (3,48 a 6,89 Log UFC g¹) e contagem total de bactérias láticas (3,15 a 6,30 Log UFC g¹). Considerando-se as especificações técnicas para o Queijo Minas Artesanal da região Serro, foram observadas as irregularidades com as respectivas frequências: altura (68,75%), diâmetro (6,25%), peso (62,5%), umidade (43,75%), soro na embalagem (25%), estufamento precoce (18,75%), presença de fungos filamentosos (18,75%), odores indesejáveis (12,5%) e textura ressecada (37,5%). Os defeitos ausência de rótulo (100%) e queijos desformes (20,33%) foram observados apenas em queijos artesanais sem identificação. Concluiu-se que defeitos observados em queijos artesanais analisados foram: diâmetro, altura e peso irregulares; umidade superior ao limite legal; pH inferior ou superior aos valores recomendados; estufamento precoce; presença de fungos filamentosos; odores indesejáveis; textura ressecada; presença de soro no queijo embalado; queijo desforme e ausência de rótulo.

This work aimed to diagnose defects in artisanal cheeses from the Serro region, Minas Gerais state. The investigation was carried out in the winter (2019) and summer (2020) seasons. Cheese samples (n = 59) were obtained in artisanal cheese makers and stores in the cities of Alvorada de Minas, Conceição do Mato Dentro, Dom Joaquim and Serro. There were colleted samples officialiy registered of Minas Artisanal cheeses and also products without certification of inspection. The samples were placed in thermal boxes with ice and sent to the Setor de Ciência e Tecnologia dos Produtos de Origem Animal (DZO/UFVJM), where they were submited to the following analyzes: presence of off flavors; packaging and label conditions; presence of whey; weight; height; diameter; shape; abnormalities in the rind; presence of blowing; firmness and appearance of the dough (dryness); determinations of pH; moisture; fat percent in the dry matter; counts of lactic acid bacteria and psychrotrophic microrganisms. After evaluating the packaging, it was found that, from the total samples, sixteen had a label that identified them as Minas Artisanal Serro cheese produced by registered producers certified by the State (Instituto Mineiro de Agropecuária). The remaining forty-three samples, as they did not have a label, were classified as artisanal cheese without identification and their results were compared to the standards stablished by the current legislation. For the Minas Artisanal Serro cheese, the results were also compared with technical specifications applicable to this variety. The following variation of results were obtained in Minas Artisanal cheeses: height (3.5 to 7 cm), diameter (11.9 to 14 cm), weight (514.8 to 1102.9 g), pH (4.79 to 6, 04), firmness (0.21 to 1.38 g), fat percent in the dry mass (45.52 to 81.63 g.100g1), moisture (30.14 to 56.45 g.100g¹), psychrotrophic microrganisms (5.26 to 6.4 Log UFCg¹) and lactic acid bacteria (3.46 to 5.32 Log UFCg¹). In artisanal cheeses without identification, the following amplitudes were observed: height (4 to 6.8 cm), diameter (11 to 14.1 cm), weight (327.7 to 107.5 g), pH (4.65 to 6.13), firmness (0.1 to 1.9 g), fat percent in the dry mass (29.19 to 88.99 g .100g¹), moisture (19.90 to 56.39 g.100g¹), psychrotrophic microrganisms (3.48 to 6.89 Log UFCg¹) and lactic acid bacteria (3.15 to 6.30 Log UFCg¹). Considering the technical specifications for the Minas Artisanal Serro cheese, the irregularities observed in inspected cheeses, with respective frequencies, were: height (68.75%), diameter (6.25%), weight (62.5%), moisture higher than the legal limit (43.75%), whey in the packaging (25%), early blowing (18.75%), presence of filamentous fungi (18.75%), off flavors (12.5%) and dry texture (37.5%). The defects lack of label (100%) and deformed cheeses (20.33%) were only observed in artisanal cheeses without identification. It was concluded that the defects observed in artisanal cheeses analyzed were: irregular diameter, height and weight; moisture higher than the legal limit; pH lower or higher than the recommended values; early blowing; presence of filamentous fungi; off flavors; dry texture, deformed cheese and absence of label.

EFEITO BACTERICIDA DE DIFERENTES SOLUÇÕES PARA Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis EM ESTADO SÉSSIL E PLANCTÔNICO UM ESTUDO IN VITRO

Infecções dos sítios cirúrgicos são comuns, mesmo em pacientes utilizando antibioticoterapia profilática. As infecções do sítio cirúrgico são um dos principais contribuintes para a morbidade e mortalidade nos cuidados pós-operatórios. Os biofilmes são um grupo complexo de células microbianas que aderem a matriz de exopolissacarídeos presente na superfície de dispositivos médicos. As infecções associadas ao biofilme nos dispositivos médicos representam um grave problema para a saúde pública e afetam a função do dispositivo. A infecção no implante mamário de silicone ocorre em 7 a 24% das reconstruções mamárias. Estas infecções ocasionam morbidade e possível diminuição de qualidade de vida para os pacientes, além de altos custos com seu tratamento. Os anestésicos locais são utilizados comumente como agente para analgesia pós-operatória e tem um baixo custo, porém sua ação como agente microbicida ainda é controversa. Objetivo: Avaliar o efeito bactericida de diferentes soluções para Staphylococcus aureus e Staphylococcus epidermidis associadas infecção de feridas cirúrgicas e próteses de silicone in vitro. Material e métodos: Para este estudo, foram avaliados os seguintes microrganismos: S. aureus e S. epidermidis. Foi realizada análise com suspensões em solução salina estéril com os microrganismos. O estudo foi realizado em duas etapas: primeiro o teste de difusão em ágar e posterirormente a análise das próteses de silicone. Na primeira etapa, para o teste de difusão em ágar (avaliação das bactérias em estado planctônico), as suspensões com os microrganismos foram inoculadas com auxílio de swab estéril na superfície do ágar sangue. Na sequência, foram confeccionados orifícios equidistantes medindo 3mm de diâmetro e 3mm de profundidade no ágar sangue. Um orifício foi preenchido apenas com 1 gota da solução salina, outro com 1 gota da solução de com antisséptico, outro com 1 gota de Lidocaína pura, outro com 1 gota de solução de Lidocaína e outro com 1 gota da solução com antibiótico. Na segunda etapa, foram utilizadas 36 próteses de silicones (avaliação das bactérias em estado séssil), as quais foram divididos em 3 grupos: próteses contaminadas pelas bactérias e que não receberam tratamento; próteses contaminadas pelas bactérias que receberam tratamento antes da contaminação; e próteses contaminadas pelas bactérias que receberam tratamento após a contaminação. Os tratamentos foram realizados com clorexidina, solução de lidocaína, lidocaína pura e com solução de antibióticos (cefazolina e gentamicina). A incubação foi de 1 semana. As próteses foram semeadas por rolamento em meio de cultura ágar sangue, o qual foi incubado por 48 horas e avaliada a área com formação de colônias através de programa de análise de imagem. Resultados: As placas testadas com solução de lidocaína e a lidocaína pura não apresentaram halo de inibição. A solução de antibióticos apresentou os maiores halos de inibição em todas as bactérias testadas. Na pré-lavagem, não houve crescimento de S. epidermidis com solução de antibióticos. Na lavagem pós-contaminação, não houve crescimento de nenhuma das bactérias com a solução de antibióticos. Na lavagem pós-contaminação, houve diminuição da densidade de colonização com a clorexidina e ausência de crescimento de S. aureus com lidocaína pura e solução de lidocaína. Conclusão: A solução de antibióticos se mostrou uma boa alternativa para o controle, principalmente S. epidermidis, na lavagem pré e pós-contaminação nas próteses de silicone. A lidocaína (pura ou em solução) embora não tenham inibido o crescimento bacteriano nas placas com meio de cultura, foi capaz de diminuir a colonização por S. aureus na lavagem pós-contaminação, mostrando que pode ser utilizada como tratamento adjuvante nestes casos.

Surgical site infections are common, even in patients using prophylactic antibiotic therapy. Surgical site infections are a major contributor to morbidity and mortality in postoperative care. Biofilms are a complex group of microbial cells that adhere to the exopolysaccharide matrix present on the surface of medical devices. Infections associated with biofilm in medical devices pose a serious public health problem and affect the function of the device. Infection in the silicone breast implant occurs in 7 to 24% of breast reconstructions. These infections cause morbidity and possible decrease in quality of life for patients, in addition to high costs with their treatment. Local anesthetics are commonly used as an agent for postoperative analgesia and have a low cost, but their action as a microbicidal agent is still controversial. Objective: To evaluate the bactericidal effect of different solutions for Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis associated with surgical wound infection and silicone prostheses in vitro. Material and methods: For this study, the following microrganisms were evaluated: S. aureus and S. epidermidis. Analysis was carried out with suspensions in sterile saline solution with the microrganisms. The study was carried out in two stages: first the agar diffusion test and then the analysis of silicone prostheses. In the first stage, for the agar diffusion test (evaluation of bacteria in planktonic state), the suspensions with the microrganisms were inoculated with the aid of a sterile swab on the surface of the blood agar. Then, equidistant holes were made measuring 3mm in diameter and 3 mm deep in the blood agar. One orifice was filled with 1 drop of saline only, another with 1 drop of antiseptic solution, another with 1 drop of pure Lidocaine, another with 1 drop of Lidocaine solution and another with 1 drop of the antibiotic solution. In the second stage, 36 silicone prostheses (assessment of bacteria in sessile state) were used, which were divided into 3 groups: prostheses contaminated by the bacteria and which did not receive treatment; prostheses contaminated by bacteria and which received treatment before contamination; and prostheses contaminated by bacteria and which received treatment after contamination. Treatments were performed with chlorhexidine, lidocaine solution, pure lidocaine and antibiotics solution (cefazolin and gentamicin). The incubation was 1 week. The prostheses were sown by rolling in a blood agar culture medium, which was incubated for 48 hours and the area with colony formation was evaluated using an image analysis program. Results: The plates tested with lidocaine solution and pure lidocaine did not present an inhibition halo. The antibiotic solution showed the greatest inhibition halos in all the tested bacteria. In the prewash, there was no growth of S. epidermidis with antibiotic solution. In the post-contamination wash, none of the bacteria grew with the antibiotic solution. In post-contamination washing, there was a decrease in the density of colonization with chlorhexidine and absence of growth of S. aureus with pure lidocaine and lidocaine solution. Conclusion: The antibiotic solution proved to be a good alternative for the control, mainly S. epidermidis, in the pre and post-contamination washing in silicone prostheses. Lidocaine (pure or in solution) although it did not inhibit bacterial growth on plates with culture medium, was able to decrease colonization by S. aureus in post-contamination washing, showing that it can be used as an adjuvant treatment in these cases.

Microrganisms of sanitary interest in sushi / Microrganismos de interesse sanitário em sushis

Considering the growing consumption of typical foods of Japanese cuisine, it has been of constant concern for public health. In this study, the sanitary quality of sushi served in the city of João Pessoa/PB was investigated following the recommendations for the microbiological analyses of total and fecal coliforms, coagulase-positive staphylococci, Salmonella, Bacillus cereus, mesophilic and filamentous and non-filamentous fungi. The samples were collected from five restaurants (A, B, C, D and E) serving Japanese food in the city of João Pessoa/PB; and they were analyzed in the Food Microbiology Laboratory of Federal University of Paraíba. Among the analyzed samples, 80 % showed fecal coliform counts above the limits established by Brazilian legislation, 6.6 % had coagulase positive staphylococci counts above the limit, and in 13.3 % potentially pathogenic species of Salmonella sp were isolated. B. cereus was not isolated from any analyzed sample. In spite of the unavailability of a pattern for sushi in the current legislation for mesophilic aerobic bacteria and filamentous and non-filamentous fungi counting, the present study was carried out in order to assess the sanitary conditions of this food. Considering the achieved results, the analyzed food showed a potential risk to the consumers health.(AU)

Com o crescente consumo de comidas típicas da culinária japonesa, a preocupação com a saúde pública tem sido constante. Neste estudo a qualidade sanitária de sushis servidos na cidade de João Pessoa/PB foi investigada seguindo-se as recomendações microbiológicas para pesquisas de coliformes totais e termotolerantes, estafilococos coagulase positiva, Salmonella, Bacillus cereus, mesófilos e fungos filamentosos e não filamentosos. As amostras foram coletadas de cinco restaurantes (A, B, C, D e E) que servem comida japonesa na cidade de João Pessoa/PB, e analisadas no Laboratório de Microbiologia de Alimentos da Universidade Federal da Paraíba. Das amostras estudadas, 80 % apresentaram contagem de coliformes termotolerantes acima dos limites estabelecidos pela legislação brasileira, 6,6 % tinham contagem de estafilococos coagulase positiva acima do limite, e em 13,3 % foram detectadas espécies potencialmente patogênicas de Salmonella. Em nenhuma amostra houve isolamento de B. cereus. Apesar da inexistência de padrão estabelecido para sushi na legislação vigente, quanto à contagem de bactérias aeróbias mesófilas e fungos filamentosos e não filamentosos, a pesquisa foi realizada com o intuito de avaliar as condições higiênico-sanitárias do produto. Considerando-se os resultados obtidos, os alimentos analisados apresentam risco potencial para a saúde dos consumidores.(AU)

ANÁLISE DA POPULAÇÃO DE BACTÉRIAS ÁCIDO-LÁTICAS (BAL) VAGINAIS EM RESPOSTA À PROGESTERONA E AO ESTRÓGENO EM OVELHAS PRÉ- PÚBERES

A microbiota compreende os microrganismos que habitam um determinado compartimento de um organismo vivo e pode estar relacionada ao estado de saúde do hospedeiro. O ambiente vaginal, incluindo a microbiota local e o equilíbrio redox, parece estar sob a regulação das flutuações hormonais, em especial a dos esteroides ovarianos. Este trabalho teve por objetivo investigar o efeito da suplementação exógena com progesterona apenas ou progesterona seguida de benzoato de estradiol na população de bactérias acido lácticas, espécies reativas ao oxigênio e potencial antioxidante no ambiente vaginal de ovelhas pré-púberes. Dez ovelhas pré-puberes foram aleatoriamente divididas para receber ou não progesterona (P4) de longa ação via injeção intramuscular no dia zero (D0), seguido de suplementação com benzoato de estradiol (BE) no D5 para todas as fêmeas. O grupo de fêmeas que receberam ambos, P4 e BE, foi denominado Grupo PE, enquanto o grupo de fêmeas que receberam apenas estradiol foi chamado de Grupo E. No D0, D2 e D7, amostras vaginais de todos os animais foram coletadas via suabe, colocadas em solução salina, diluídas 1:10, 10-3 e 10-5 e semeadas em ágar sangue, em triplicatas. Alternativamente, amostras em solução salina estéril foram diluídas 1:10 e 10-4 e semeadas em ágar MRS (De Man e Rogosa e Sharpe) pelo método pour plate, em triplicatas. Três meses depois, o mesmo experimento foi repetido nos mesmos animais para a coleta de lavado vaginal. No D0, D2 e D7 todos os animais foram coletados via lavado vaginal, por meio de infusão de 5 ml de solução salina estéril no fórnix vaginal, seguida de recuperação em tubo estéril, e armazenamento a -20ºC. O lavado vaginal foi avaliado para a produção de ROS e potencial antioxidante. Os dados foram analisados por análise de variância de amostras repetidas no tempo, considerando os efeitos de tratamento (Grupos E e PE), dia (D0, D2, D7) e sua interação. Não foi detectado efeito de tratamento para nenhuma das variáveis analisadas. O dia, altamente influenciado pelo efeito do tratamento com BE no D5, induziu um aumento das UFCs de BAL e potencial antioxidante das células vaginais e a uma redução na produção de ROS pelas células e lavado vaginal. Observou-se também um enriquecimento de colônias de lactobacillus ao longo do tempo. Conclui-se que o estrógeno favorece o crescimento da população vaginal das bactérias acido lácticas e o estabelecimento de um ambiente vaginal mais antioxidante que parece estar correlacionado a uma mudança qualitativa da microbiota vaginal favorecendo o estabelecimento de lactobacillus.

The microbiota comprehends the microrganisms that inhabit a given body compartment of a live organismo and may be related to the state of health of the host. The vaginal environment, including the local microbiota and the redox equilibrium, seems to be under the regulation of hormonal fluctuations, particularly that of ovarian steroids. This study aimed to investigate the effect of progesterone alone or progesterone followed by estradiol benzoate exogenous supplementation on the lactic acid population, reactive oxygen species production and antioxidant potential in the vaginal environment of prepubertal ewe lambs. Ten prepubertal ewe lambs were randomly divided to receive or not an intramuscular injection of a longacting progesterone on day zero (D0), followed by an injection of estradiol benzoate (EB) on D5 to all ten females. The female group receiving both P4 and EB was called PE group, whereas the female group receiving only EB was called E group. On D0, D2 and D7 vaginal samples from all animals were collected by swab into a sterile saline solution, diluted 1:10, 10-3 e 10-5 and seeded on blood agar, in triplicates; alternatively, samples in saline were diluted 1:10 and 10-4 and seeded on MRS agar (De Man, Rogosa and Sharpe) by the pour plate method, in triplicates. Three months later, the experiment was repeated with the same animals aiming to collect vaginal washings. ON D0, D2 and D7 all the animals were sampled by infusing 5 ml of sterile saline in to the vagina fornix, followed by solution recovery into a sterile tube and storage at -20ºC. Vaginal washings were assessed for ROS production and antioxidant potential. The data were analyzed by repeated measures analysis of variance, considering the effects of treatment (E and PE), day (D0, D2, D7) and their interaction. No effect of treatment was detected for the assessed variables. The effect of day, highly influenced by the EB treatment effect on D5, induced an increase on the CFU of vaginal BALs and antioxidant potential of vaginal cells, and a reduction of ROS production in vaginal cells and vaginal washings. An enrichment of lactobacillus colonies over time was also observed. In conclusion, estrogen favors the growth of vaginal lactic acid bacteria and the establishment of a more antioxidant vaginal environment, which seems to be related to the observed shift of the microbiota favoring the establishment of lactobacillus.

Videocâmeras em biotérios de experimentação: importante ferramenta no controle da contaminação ambiental na microbiota de camundongos / Interference of environmental contamination in microbiota of mice in experimental facilities

O objetivo do presente estudo foi verificar a influência da contaminação ambiental na microbiota dos animais utilizados em experimentação, usando-se videocâmera como ferramenta de controle, a partir da comparação de dois biotérios de experimentação, sendo um protegido com presença de videocâmeras (A) e o outro não (B), quanto ao padrão microbiológico dos camundongos. Para os testes bacteriológicos, foram utilizadas amostras de 222 animais do biotério A e 236 do biotério B; para os testes virológicos, 119 do biotério A e 236 do biotério B; já para os exames parasitológicos, 158 do biotério A e 316 do biotério B. Os dados foram submetidos à análise descritiva e ao teste do Qui-quadrado. Verificou-se uma maior ocorrência de microrganismos e de parasitas no biotério não protegido pelas videocâmeras. Klebsiella pneumoniae, Pasteurella sp. e Pseudomonas sp. foram encontradas nos animais de ambos os biotérios, ao passo que vírus e parasitos só foram detectados nos animais no biotério não protegido. Dentre os vírus, nos animais infectados, o de maior ocorrência foi o Vírus da Hepatite de Camundongos (MHV) e, dentre os parasitos, o de maior ocorrência foi Syphacia sp. Concluiu-se que o biotério protegido foi capaz de garantir padrões microbiológicos mais adequados para a experimentação animal, que as videocâmeras são importantes ferramentas de controle e que a prática da biossegurança deve ser constante nas instituições de pesquisa(AU)

The aim of this study was to investigate the influence of environmental contamination in the microbiota of animals used in experimentation, from the comparison of two experimental animal facilities, one protected with video cameras (A) and one not protected with video cameras (B). Bacteria, viruses and endoparasites have been investigated in both facilities, according to the methodology proposed for each agent. For the bacteriological tests, a sample of 222 animals in facility A and 236 from facility B was used; for the virological tests, 119 from facility A and 236 from facility B; and for parasitological examination, 158 from facility A and 316 from facility B. The data were submitted to descriptive analysis and to the Chi-square test. The results indicated a higher occurrence of microrganisms and parasites in animals from the unprotected facility. Klebsiella pneumoniae, Pasteurella sp. and Pseudomonas sp. could be detected in the animals from both facilities, whereas viruses and parasites were found only in the unprotected housed mice. Among the viruses in infected animals the most common was the occurrence of Mice Hepatitis Virus (MHV) and among the parasites, the predominant was Syphacia sp. It was concluded that the protected facility was able to ensure microbiological standards more suitable for animal testing, video cameras are important control tools, and the practice of biosecurity must be constant in research institutions(AU)