Effect of Pleurotus ostreatus (Jacq) and Trichoderma harzianum (Rifai) on Meloidogyne incognita (Kofoid & White) in tomato (Solanum lycopersicum Mill)

Two isolations of fungi from a bank of microorganisms in the Biological Sciences Laboratory at Escuela Superior Politécnica de Chimborazo were tested on the galling caused by Meloidogyne incognita in tomato seedlings grown in pots with substrate infested with a suspension of nematodes, with approximately 2000 juvenile stages (J2) from root galls of plants infested with M. incognita, taken from the Nematology laboratory of the Ecuadorian Agricultural Quality Assurance Agency (AGROCALIDAD). Pleurotus ostreatus was a fungus with nematicidal characteristics through production of toxins; while Trichoderma harzianum is a widely known fungus, although it is a plant growth promoter rather than a nematicide. The two fungi were formulated in wheat straw and rabbit manure. A complete randomized design (CRD) with three replications was used, with a chemical control (Fenamiphos) and an absolute control. Five grams of each formulation was applied per plant before the transplant. The number of galls in the roots, plant height, stem diameter, number of leaves and fresh and dry weight of the aerial part and roots of 180 tomato plants grown in greenhouse were evaluated at 60 days after transplant. The results showed that the two fungi reduced the number of galls and made it possible to obtain dry weights of the aerial and radicular part very close to the chemical control (10.09 and 3.39 g) with 8.68; 8.04; 2.96 and 3.25 g respectively. Besides Trichoderma harzianum proved to be a good promoter of root growth, therefore, the use of these bioformulates is a promising measure for the control of this phytonematode

Effect of Pleurotus ostreatus (Jacq) and Trichoderma harzianum (Rifai) on Meloidogyne incognita (Kofoid & White) in tomato (Solanum lycopersicum Mill)

Two isolations of fungi from a bank of microorganisms in the Biological Sciences Laboratory at Escuela Superior Politécnica de Chimborazo were tested on the galling caused by Meloidogyne incognita in tomato seedlings grown in pots with substrate infested with a suspension of nematodes, with approximately 2000 juvenile stages (J2) from root galls of plants infested with M. incognita, taken from the Nematology laboratory of the Ecuadorian Agricultural Quality Assurance Agency (AGROCALIDAD). Pleurotus ostreatus was a fungus with nematicidal characteristics through production of toxins; while Trichoderma harzianum is a widely known fungus, although it is a plant growth promoter rather than a nematicide. The two fungi were formulated in wheat straw and rabbit manure. A complete randomized design (CRD) with three replications was used, with a chemical control (Fenamiphos) and an absolute control. Five grams of each formulation was applied per plant before the transplant. The number of galls in the roots, plant height, stem diameter, number of leaves and fresh and dry weight of the aerial part and roots of 180 tomato plants grown in greenhouse were evaluated at 60 days after transplant. The results showed that the two fungi reduced the number of galls and made it possible to obtain dry weights of the aerial and radicular part very close to the chemical control (10.09 and 3.39 g) with 8.68; 8.04; 2.96 and 3.25 g respectively. Besides Trichoderma harzianum proved to be a good promoter of root growth, therefore, the use of these bioformulates is a promising measure for the control of this phytonematode(AU)

Purpureocillium lilacinum and Trichoderma virens for biological control of trichostrongylid parasites of sheep: an in vitro evaluation / Purpureocillium lilacinum e Trichoderma virens no controle biológico de tricostrongilídeos de ovinos: uma avaliação in vitro

The study evaluated the ovicidal activity of enzymatic extracts of Purpureocillium lilacinum and Trichoderma virens against trichostrongylid eggs from sheep. Filtered extract (FE) and macerated crude extract (MCE) were prepared from fungal cultures in minimal broth. In the experiment, 100 trichostrongylid eggs, obtained from the feces of naturally infected sheep, were exposed to fungal extracts for 24 and 48 hours/25°C. In the control group, eggs were incubated in minimal broth. The number of L1 larvae was ascertained. Each treatment consisted of four repetitions and the experiment was repeated five times. It was observed that the effect of FE and MCE of P. lilacinum and T. virens on egg hatchability differed from that of the control group. MCE of T. virens and P. lilacinum showed higher ovicidal activity than FE over both periods and at 48 hours of exposure, respectively. From the percentage reductions in hatchability of the eggs, MCE was shown to be superior to FE for both fungi. This study demonstrated the ovicidal potential of these fungi against trichostrongylid eggs. However, further studies are needed in order to identify the molecules responsible for the ovicidal effects, and to evaluate the behavior of fungal extracts in biotic and abiotic interactions.(AU)

O estudo avaliou a atividade ovicida de extratos enzimáticos de Purpureocillium lilacinum e Trichoderma virens sobre ovos de tricostrongilídeos de ovinos. Extrato filtrado (EF) e extrato macerado bruto (EMB) foram preparados a partir de culturas fúngicas em caldo mínimo. No ensaio experimental, 100 ovos de tricostrongilídeos, obtidos de fezes de ovinos naturalmente infectados, foram expostos durante 24 e 48 horas/25ºC aos extratos dos fungos. No grupo controle, os ovos foram incubados em caldo mínimo. O número de larvas L1 foi determinado. Cada tratamento consistiu em quatro repetições e o experimento foi repetido cinco vezes. Observou-se que o efeito ovicida do EF e EMB de P. lilacinum e T. virens diferiu do grupo controle. O EMB de T. virens e P. lilacinum evidenciou atividade ovicida superior ao EF em ambos os períodos avaliados e em 48 horas de exposição, respectivamente. O percentual de redução de eclodibilidade evidenciou que o EMB foi superior ao EF em ambos os fungos. Este estudo demonstra o potencial ovicida desses fungos sobre ovos de tricostrongilídeos. No entanto, estudos adicionais são necessários para identificar as moléculas responsáveis pelo efeito ovicida, bem como avaliar o comportamento dos extratos fúngicos em interações bióticas e abióticas.(AU)

In vitro predatory activity of nematophagous fungi isolated from water buffalo feces and from soil in the Mexican southeastern / Atividade predatória in vitro de fungos nematófagos isolados de fezes de búfalos e do solo no sudeste mexicano

Nematophagous fungi from the feces of water buffalo and soil from southeastern Mexico were isolated, and their in vitro predatory activity against Haemonchus contortus infective larvae (L3) (HcL3) was assessed. The fungi were isolated by sprinkling soil or feces on water agar plates. Six series of 10 Petri dishes containing a 7-day-old culture of each fungus and a series without fungi as the control were prepared. Five hundred HcL3 were added to each plate. The plates were incubated at room temperature. The average of recovered HcL3 was considered to estimate the larval reduction rate. Four nematophagous fungi isolates corresponding to Arthrobotrys oligospora, var microspora (strains 4-276, 269 and 50-80) and one identified as A. oligospora,var. oligospora (isolates 48-80) were obtained from water buffalo feces. From the soil, five isolates were isolated; three corresponded to A. musiformis (Bajío, Yumca and Macuspana isolates), and two isolates were identified as A. oligospora (Comalcalco and Jalapa de Méndez isolates). The predatory activity of isolates from water buffalo feces ranged between 85.9 and 100%. Meanwhile, the fungi from the soil ranged between 55.5 and 100% (p0.05). The nematophagous fungi obtained could have important implications in the control of parasites of importance in the livestock industry.(AU)

Fungos nematófagos das fezes de búfalo de água e do solo no sudeste do México foram isolados, e a atividade predatória in vitro contra larvas infectantes de Haemonchus contortus (L3) (HcL3) foi avaliada.Os fungos foram isolados por aspersão de solo e de fezes em placas de agar água. Foram preparadas seis séries de 10 placas de Petri contendo uma cultura de 7 dias de idade de cada fungo e uma série sem fungos como controle. Quinhentos HcL3 foram adicionadas a cada placa. As placas foram incubadas à temperatura ambiente. O número médio de HcL3 recuperadas foi considerado para estimar a taxa de redução larval. Quatro isolados de fungos nematófagos corresponderam a Arthrobotrys oligospora, var microspora (estirpes 4-276, 269 e 50-80) e um isolado identificado como A. oligospora, var. oligospora (isolados 48-80 de fezes de búfalo de água. Do solo, dos cinco isolados três corresponderam a A. musiformis (Bajío, Yumca e Macuspana isolados), e dois isolados foram identificados como A. oligospora (isolados de Comalcalco e Jalapa de Méndez). A atividade predatória de isolados de fezes de búfalo de água variou entre 85,9 e 100%. Enquanto isso, os fungos do solo variaram entre 55,5 e 100% (p0,05). Os fungos nematófagos obtidos podem ter importantes implicações nesse controle de parasitos de importância na indústria pecuária.(AU)

Predatory viability of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans on the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep following storage and refrigeration / Viabilidade predatória do fungo nematófago Duddingtonia flagrans sobre larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos após armazenamento e refrigeração

The objective of this study was to evaluate the in vivo predatory viability of the nematophagous fungus, Duddingtonia flagrans, after storage (36 months) and refrigeration (2-8 °C). This viability was evaluated using the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep in the Northeastern semi-arid region of Brazil. Sixteen Santa Inês sheep with negative counting of eggs per gram of feces (EPG) were divided into four experimental groups, each group comprised of four animals. The pellets were administered at the dose of 3 g/10 kg of live weight (20% fungal micelyum), and a single administration was performed for each animal. Group I was administered pellets that had been stored for 36 months; Group II, freshly produced pellets; Group III, freshly produced pellets that did not contain fungi; and Group IV, pellets were not administered, and this was the control group. Feces were collected for 5 days, every 24 h for analysis. There was a significant decrease in the number of infective larvae of sheep nematodes that received D. flagrans pellets in a sodium alginate matrix, 82% was observed for Group I and 71% for Group II, compared to the control group. It is therefore concluded that the fungus, D. flagrans, pelleted in sodium alginate matrix after 36 months of storage at 2-8 °C, showed efficacy in reducing the number of infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep. (AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade predatória in vivo do fungo nematófago Duddingtonia flagrans, após armazenamento (36 meses) e refrigeração (2-8 °C). Esta viabilidade foi avaliada utilizando larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semi-árido nordestino do Brasil. 16 ovinos Santa Inês com contagem negativa de ovos por grama de fezes (GEP) foram divididos em quatro grupos experimentais, compostos por quatro animais. Os péletes foram administrados na dose de 3 g/10 kg de peso vivo (20% de micélio fúngico), e uma única administração foi realizada para cada animal. Grupo I foi administrado péletes que foram armazenados por 36 meses; Grupo II, péletes recém-produzidos; Grupo III, péletes recém-produzidos que não continham fungos; e o Grupo IV, péletes não foram administrados, e este foi o grupo controle. As fezes foram coletadas por cinco dias, a cada 24 horas, para análise. Houve uma diminuição significativa no número de larvas infectantes de nematóides ovinos que receberam pellets de D. flagrans, 82% foi observado para o Grupo I e 71% para o Grupo II, comparado ao grupo controle. Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans, peletizado em matriz de alginato de sódio após 36 meses de armazenamento a 2-8 °C, apresenta eficácia na redução do número de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos.(AU)

Predatory viability of the nematophagous fungus Duddingtonia flagrans on the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep following storage and refrigeration / Viabilidade predatória do fungo nematófago Duddingtonia flagrans sobre larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos após armazenamento e refrigeração

The objective of this study was to evaluate the in vivo predatory viability of the nematophagous fungus, Duddingtonia flagrans, after storage (36 months) and refrigeration (2-8 °C). This viability was evaluated using the infective larvae of gastrointestinal nematodes of sheep in the Northeastern semi-arid region of Brazil. Sixteen Santa Inês sheep with negative counting of eggs per gram of feces (EPG) were divided into four experimental groups, each group comprised of four animals. The pellets were administered at the dose of 3 g/10 kg of live weight (20% fungal micelyum), and a single administration was performed for each animal. Group I was administered pellets that had been stored for 36 months; Group II, freshly produced pellets; Group III, freshly produced pellets that did not contain fungi; and Group IV, pellets were not administered, and this was the control group. Feces were collected for 5 days, every 24 h for analysis. There was a significant decrease in the number of infective larvae of sheep nematodes that received D. flagrans pellets in a sodium alginate matrix, 82% was observed for Group I and 71% for Group II, compared to the control group. It is therefore concluded that the fungus, D. flagrans, pelleted in sodium alginate matrix after 36 months of storage at 2-8 °C, showed&

O objetivo deste trabalho foi avaliar a viabilidade predatória in vivo do fungo nematófago Duddingtonia flagrans, após armazenamento (36 meses) e refrigeração (2-8 °C). Esta viabilidade foi avaliada utilizando larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semi-árido nordestino do Brasil. 16 ovinos Santa Inês com contagem negativa de ovos por grama de fezes (GEP) foram divididos em quatro grupos experimentais, compostos por quatro animais. Os péletes foram administrados na dose de 3 g/10 kg de peso vivo (20% de micélio fúngico), e uma única administração foi realizada para cada animal. Grupo I foi administrado péletes que foram armazenados por 36 meses; Grupo II, péletes recém-produzidos; Grupo III, péletes recém-produzidos que não continham fungos; e o Grupo IV, péletes não foram administrados, e este foi o grupo controle. As fezes foram coletadas por cinco dias, a cada 24 horas, para análise. Houve uma diminuição significativa no número de larvas infectantes de nematóides ovinos que receberam pellets de D. flagrans, 82% foi observado para o Grupo I e 71% para o Grupo II, comparado ao grupo controle. Conclui-se, portanto, que o fungo D. flagrans, peletizado em matriz de alginato de sódio após 36 meses de armazenamento a 2-8 °C, apresenta eficácia na redução do núm

Exposure of Toxocara canis eggs to Purpureocillium lilacinum as a biocontrol strategy: an experimental model evaluation / Exposição de ovos de Toxocara canis a Purpureocillium lilacinum como estratégia de biocontrole: uma avaliação em modelo experimental

Purpureocillium lilacinum is a nematophagous fungus used in biological control against some parasites, including Toxocara canis. This study researched the infectivity of embryonated T. canis eggs after exposure to the fungus P. lilacinum. T. canis eggs were exposed to P. lilacinum for 15 or 30 days and subsequently administered to Swiss mice (n=20). Control group consisted of mice who received T. canis embryonated eggs without fungal exposure. Forty-eight hours after infection, heart, lung, and liver from animals of each group were collected to assess larval recovery. The organs of mice that received embryonated eggs exposed to the fungus showed a lower average larval recovery (P 0.05) suggesting that exposure of T. canis eggs to P. lilacinum was able to reduce experimental infection. Under the evaluated conditions, the interaction time between the fungus and the parasite eggs was not a significant factor in larvae recovery. P. lilacinum may be considered a promising T. canis biological control agent. However, further studies are needed to determine a protocol for the use of this fungus as a biological control agent.(AU)

Purpureocillium lilacinum é um fungo nematófago com potencial para uso no controle biológico de parasitos, incluindo Toxocara canis. Este estudo pesquisou a infectividade de ovos de T. canis embrionados após exposição ao fungo P. lilacinum . Ovos de T. canis foram expostos ao fungo por 15 ou 30 dias e subsequentemente administrados a camundongos Swiss (n=20). O grupo controle consistiu de camundongos que receberam ovos embrionados do parasita sem exposição ao fungo. Quarenta e oito horas após a infecção, coração, pulmão e fígado dos camundongos foram coletados para avaliar a recuperação larval. Os órgãos dos animais que receberam ovos embrionados expostos ao fungo apresentaram menor média de recuperação larval (P 0,05) do que os infectados com ovos sem exposição ao fungo, sugerindo que a exposição dos ovos de T. canis a P. lilacinum foi capaz de reduzir a infecção experimental. Nas condições avaliadas, o tempo de interação entre o fungo e os ovos do parasito não foi um fator significativo na recuperação das larvas. P. lilacinum pode ser considerado um promissor agente de controle biológico de T. canis, no entanto, mais estudos são necessários para avaliar o emprego deste fungo como um agente de controle biológico.(AU)

Rhabditis spp., in the Espírito Santo, State of Brazil and evaluation of biological control / Rhabditis spp., no Espírito Santo, estado do Brasil e avaliação do controle biológico

The objectives of this study were to describe occurrences of Rhabditis spp. causing parasitic otitis in dairy cattle of Gir breed in the state of Espírito Santo, southeastern Brazil, and to evaluate the biological control of this nematode using the nematophagous fungi Duddingtonia flagrans (AC001) and Monacrosporium thaumasium (NF34). After nematode detection and collection, three groups were formed: two groups that were treated, respectively, with the fungal isolates; and a control group, without fungus. The treatments were as follows: (a) Petri dishes containing the culture medium 2% water agar (WA) + 250 nematodes + AC001; (b) Petri dishes containing 2% WA + 250 nematodes + NF34; and (c) Petri dishes containing only 2% WA + 250 nematodes. After seven days at 27 °C the treatments with fungi were able to capture and destroy the nematodes, with percentages of 82.0% (AC001) and 39.0% (NF34) in relation to the control group. The results demonstrate the occurrence of Rhabditis spp. after animals physical examination and that there was efficacy of the in vitro predatory activity of both fungal isolates. Thus, these results are important because they can assist in future in vivo control of this nematode in cattle.(AU)

Os objetivos neste estudo foram descrever ocorrências do nematódeo Rhabditis spp., causando otite parasitária em bovinos leiteiros da raça Gir no estado do Espírito Santo, sudeste do Brasil, e avaliar o controle biológico desse nematódeo utilizando os fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001) e Monacrosporium thaumasium (NF34). Após a detecção e coleta dos nematódeos, três grupos foram formados: dois grupos que foram tratados com os isolados fúngicos, respectivamente; e um grupo controle, sem fungos. Os tratamentos foram os seguintes: (a) placas de Petri contendo o meio de cultura 2% ágar de água (WA) + 250 nematoides + AC001; (b) placas de Petri contendo 2% de WA + 250 nematoides + NF34; e (c) placas de contendo apenas 2% de nematódeos WA + 250. Após sete dias a 27 °C os tratamentos com fungos foram capazes de capturar e destruir os nematódeos, com porcentagens de 82,0% (AC001) e 39,0% (NF34) em relação ao grupo controle. Os resultados demonstram a ocorrência de Rhabditis spp., no Estado do Espírito Santo e a eficácia da atividade predatória in vitro dos isolados fúngicos utilizados. Assim, esses resultados são importantes, pois podem auxiliar no controle alternativo in vivo de Rhabditis spp. em bovinos com otite parasitária.(AU)

In vitro efficacy of Duddingtonia flagrans against nematodes of sheep based on in vivo calculations / Eficácia in vitro de Duddingtonia flagrans contra nematoides de ovinos com base em cálculo in vivo

Duddingtonia flagrans has been tested as an alternative parasite control, but data from in vitro experiments based on in vivo calculations describing nematophagous fungi predation in nematodes are restricted. The objective of this work was to determine the efficacy of D. flagrans against sheep nematode larvae in vitro using in vivo calculations. Fecal samples were introduced to fungi in different concentrations: 0.0/control; 0.05; 0.1; 0.2; 0.4; 0.8; 1.6; 3.2; and 6.4 g corresponding, respectively, to 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 and 74.624.000 chlamydospores/kg of body weight. The material was incubated for 14 days, before the larvae recovery (Assay 1). Assay 2 was carried out with the doses of 0.00625; 0.0125; and 0.025 g. The results showed a negative correlation between fungal concentrations and larval numbers for both assays. The fungus demonstrated an efficacy above 89% in both assays. Thus, we consider that the data from in vitro studies based on in vivo calculations may optimize the fungi quantities for field experiments.(AU)

Duddingtonia flagrans tem sido testado como uma alternativa no controle de parasitos, entretanto, trabalhos in vitro da predação de nematoides por fungos nematófagos correlacionados com cálculos baseados para testes in vivo são restritos. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia in vitro de D. flagrans contra larvas de nematoides de ovinos tendo como base cálculos in vivo. Amostras fecais receberam a adição do fungo em diferentes concentrações: 0.0/controle; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 e 6,4 gramas correspondendo, respectivamente, às seguintes dosagens: 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 e 74.624.000 clamidósporos/Kg de peso vivo animal. O material foi incubado por 14 dias, para recuperação das larvas (Ensaio 1). O Ensaio 2 foi realizado com concentrações de 0,00625; 0,0125 e 0,025 g. Foi observada correlação negativa entre a concentração fúngica e o número de larvas, nos dois ensaios. O fungo demonstrou eficácia acima de 89% em ambos os ensaios. A partir destes dados, acreditamos que ensaios in vitro baseados em cálculos in vivo podem aprimorar as dosagens para a realização de experimentos a campo.(AU)

In vitro efficacy of Duddingtonia flagrans against nematodes of sheep based on in vivo calculations

Duddingtonia flagrans has been tested as an alternative parasite control, but data from in vitro experiments based on in vivo calculations describing nematophagous fungi predation in nematodes are restricted. The objective of this work was to determine the efficacy of D. flagrans against sheep nematode larvae in vitro using in vivo calculations. Fecal samples were introduced to fungi in different concentrations: 0.0/control; 0.05; 0.1; 0.2; 0.4; 0.8; 1.6; 3.2; and 6.4 g corresponding, respectively, to 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 and 74.624.000 chlamydospores/kg of body weight. The material was incubated for 14 days, before the larvae recovery (Assay 1). Assay 2 was carried out with the doses of 0.00625; 0.0125; and 0.025 g. The results showed a negative correlation between fungal concentrations and larval numbers for both assays. The fungus demonstrated an efficacy above 89% in both assays. Thus, we consider that the data from in vitro studies based on in vivo calculations may optimize the fungi quantities for field experiments.(AU)

Duddingtonia flagrans tem sido testado como uma alternativa no controle de parasitos, entretanto, trabalhos in vitro da predação de nematoides por fungos nematófagos correlacionados com cálculos baseados para testes in vivo são restritos. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia in vitro de D. flagrans contra larvas de nematoides de ovinos tendo como base cálculos in vivo. Amostras fecais receberam a adição do fungo em diferentes concentrações: 0.0/controle; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 e 6,4 gramas correspondendo, respectivamente, às seguintes dosagens: 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 e 74.624.000 clamidósporos/Kg de peso vivo animal. O material foi incubado por 14 dias, para recuperação das larvas (Ensaio 1). O Ensaio 2 foi realizado com concentrações de 0,00625; 0,0125 e 0,025 g. Foi observada correlação negativa entre a concentração fúngica e o número de larvas, nos dois ensaios. O fungo demonstrou eficácia acima de 89% em ambos os ensaios. A partir destes dados, acreditamos que ensaios in vitro baseados em cálculos in vivo podem aprimorar as dosagens para a realização de experimentos a campo.(AU)

In vitro efficacy of Duddingtonia flagrans against nematodes of sheep based on in vivo calculations / Eficácia in vitro de Duddingtonia flagrans contra nematoides de ovinos com base em cálculo in vivo

Duddingtonia flagrans has been tested as an alternative parasite control, but data from in vitro experiments based on in vivo calculations describing nematophagous fungi predation in nematodes are restricted. The objective of this work was to determine the efficacy of D. flagrans against sheep nematode larvae in vitro using in vivo calculations. Fecal samples were introduced to fungi in different concentrations: 0.0/control; 0.05; 0.1; 0.2; 0.4; 0.8; 1.6; 3.2; and 6.4 g corresponding, respectively, to 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 and 74.624.000 chlamydospores/kg of body weight. The material was incubated for 14 days, before the larvae recovery (Assay 1). Assay 2 was carried out with the doses of 0.00625; 0.0125; and 0.025 g. The results showed a negative correlation between fungal concentrations and larval numbers for both assays. The fungus demonstrated an efficacy above 89% in both assays. Thus, we consider that the data from in vitro studies based on in vivo calculations may optimize the fungi quantities for field experiments.(AU)

Duddingtonia flagrans tem sido testado como uma alternativa no controle de parasitos, entretanto, trabalhos in vitro da predação de nematoides por fungos nematófagos correlacionados com cálculos baseados para testes in vivo são restritos. O objetivo deste trabalho foi determinar a eficácia in vitro de D. flagrans contra larvas de nematoides de ovinos tendo como base cálculos in vivo. Amostras fecais receberam a adição do fungo em diferentes concentrações: 0.0/controle; 0,05; 0,1; 0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 e 6,4 gramas correspondendo, respectivamente, às seguintes dosagens: 583.000; 1.166.000; 2.332.000; 4.664.000; 9.328.000; 18.656.000; 37.312.000 e 74.624.000 clamidósporos/Kg de peso vivo animal. O material foi incubado por 14 dias, para recuperação das larvas (Ensaio 1). O Ensaio 2 foi realizado com concentrações de 0,00625; 0,0125 e 0,025 g. Foi observada correlação negativa entre a concentração fúngica e o número de larvas, nos dois ensaios. O fungo demonstrou eficácia acima de 89% em ambos os ensaios. A partir destes dados, acreditamos que ensaios in vitro baseados em cálculos in vivo podem aprimorar as dosagens para a realização de experimentos a campo.(AU)

Control of sheep gastrointestinal nematodes using the combination of Duddingtonia flagrans and Levamisole Hydrochloride 5%

The objective was to evaluate the action of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% for controlling sheep gastrointestinal nematodes in the northeastern Brazil. Three groups of six sheep each were formed: group 1 received 3 g of the pellets (0.6 g of D. flagrans mycelium) for each 10 kg b.w., twice a week for six months, and deworming with Levamisole Hydrochloride 5% when EPG 1500; group 2 received a dosage of Levamisole Hydrochloride 5% when EPG 1500; and group 3 received 3 g of pellets without fungi for each 10 kg b.w., twice a week for six months. EPG counts, larval cultures, packed cell volume (PCV) and weighing were performed every 15 days; monthly, samples of grass from each paddock were collected. The mean EPG of the groups began to statistically differ from day 30 (p 0.05). Group 1 required less deworming with Levamisole Hydrochloride 5% and showed superiority of PCV values throughout the experiment (p 0.05). There was a significant reduction (p 0.05) in L3 recovery in the group 1 paddock from day 30 onwards. The use of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% was effective for controlling gastrointestinal nematodes.(AU)

Resumo O objetivo foi avaliar a ação de péletes de Duddingtonia flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos no Nordeste do Brasil. Foram formados três grupos de seis animais cada: grupo 1 recebeu 3 g de péletes (0,6 g de micélio de D. flagrans) para cada 10 kg p.v., duas vezes por semana durante seis meses, e vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG > 1500; grupo 2 recebeu uma dosagem de Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG 1500; e grupo 3 recebeu 3 g de péletes sem fungos para cada 10 kg de p.v., duas vezes por semana durante seis meses. Contagens de OPG, coproculturas, de volumes globulares (VG) e pesagens foram realizadas a cada 15 dias. Mensalmente, amostras de pasto de cada piquete eram coletadas. A média de OPG dos grupos começou a diferir estatisticamente a partir do dia 30 (p 0,05). O grupo 1 necessitou de menos vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% e demonstrou superioridade nos valores de VG durante todo o experimento (p 0,05). Houve redução significativa (p 0,05) nas L3 recuperadas no piquete do grupo 1 a partir do dia 30. Em conclusão, a utilização de péletes de D. flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% foi eficaz no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos.(AU)

Control of sheep gastrointestinal nematodes using the combination of Duddingtonia flagrans and Levamisole Hydrochloride 5% / Controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos utilizando a combinação de Duddingtonia flagrans e Cloridrato de Levamisole 5%

The objective was to evaluate the action of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% for controlling sheep gastrointestinal nematodes in the northeastern Brazil. Three groups of six sheep each were formed: group 1 received 3 g of the pellets (0.6 g of D. flagrans mycelium) for each 10 kg b.w., twice a week for six months, and deworming with Levamisole Hydrochloride 5% when EPG 1500; group 2 received a dosage of Levamisole Hydrochloride 5% when EPG 1500; and group 3 received 3 g of pellets without fungi for each 10 kg b.w., twice a week for six months. EPG counts, larval cultures, packed cell volume (PCV) and weighing were performed every 15 days; monthly, samples of grass from each paddock were collected. The mean EPG of the groups began to statistically differ from day 30 (p 0.05). Group 1 required less deworming with Levamisole Hydrochloride 5% and showed superiority of PCV values throughout the experiment (p 0.05). There was a significant reduction (p 0.05) in L3 recovery in the group 1 paddock from day 30 onwards. The use of D. flagrans pellets in association with Levamisole Hydrochloride 5% was effective for controlling gastrointestinal nematodes.(AU)

O objetivo foi avaliar a ação de péletes de Duddingtonia flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos no Nordeste do Brasil. Foram formados três grupos de seis animais cada: grupo 1 recebeu 3 g de péletes (0,6 g de micélio de D. flagrans) para cada 10 kg p.v., duaz vezes por semana durante seis meses, e vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG > 1500; grupo 2 recebeu uma dosagem de Cloridrato de Levamisole 5% quando OPG 1500; e grupo 3 recebeu 3 g de péletes sem fungos para cada 10 kg de p.v., duas vezes por semana durante seis meses. Contagens de OPG, coproculturas, de volumes globulares (VG) e pesagens foram realizadas a cada 15 dias. Mensalmente, amostras de pasto de cada piquete eram coletadasa. A média de OPG dos grupos começou a diferir estatisticamente a partir do dia 30 (p 0,05). O grupo 1 necessitou de menos vermifugações com Cloridrato de Levamisole 5% e demonstrou superioridade nos valores de VG durante todo o experimento (p 0,05). Houve redução significativa (p 0,05) nas L3 recuperadas no piquete do grupo 1 a partir do dia 30. Em conclusão, a utilização de péletes de D. flagrans em associação ao Cloridrato de Levamisole 5% foi eficaz no controle de nematódeos gastrintestinais de ovinos.(AU)

Influence of storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes / Influência do tempo de armazenamento de peletes de Monacrosporuim thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos

The objective of this study was to evaluate the influence of the storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes in the semi-arid area of Paraíba, Northeast Brazil. 24 sheep with zero in the count of eggs per gram of faeces – EPG, were divided into four experimental groups: Group I, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium pellets - 36 months of storage, single dose; Group II, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium newly produced, single dose; Group III, 3 g/10 kg live weight pellets without fungi; and Group IV (control group) did not receive pellets. Every 24 h, up to 120 h, the faeces of the animals were collected and submitted to the laboratory for analysis. Fifteen grams of faeces were weighed from each animal and five grams of expanded vermiculite were added to produce the coprocultures. Subsequently, 1000 larvae (L3) sheep trichostrongilides were added, and larval recovery was performed after 7 days. Predation of larvae in Group I (M. thaumasium - 36 months) did not differ significantly (p > 0.01) from Group II (M. thaumasium - recent), with reductions of 75% and 79%. Both groups reached peak predation to larvae at 72 h. The helminth genus most recovered in the coprocultures was Haemonchus sp. The data indicate that the 36-month stocking period of M. thaumasium pellets in alginate matrix did not influence the efficacy of predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes, with fungal activity in the faeces up to 96 hours after administration to the animals.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do tempo de armazenamento de péletes de Monacrosporium thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. 24 ovelhas, com contagem de ovos por grama de fezes – OPG, negativo, foram divididas em quatro grupos experimentais: Grupo I, 3 g / 10 kg de peso vivo, péletes de M. thaumasium - 36 meses de armazenamento, dose única; Grupo II, 3 g / 10 kg de peso vivo M. thaumasium recém-produzido, dose única; Grupo III, 3 g / 10 kg de peso vivo sem fungos; e Grupo IV (grupo controle), não recebeu péletes. A cada 24 h, até 120 h, as fezes dos animais foram coletadas e submetidas ao laboratório para análise. Quinze gramas de fezes foram pesados de cada animal e cinco gramas de vermiculita expandida foram adicionados para produzir as coproculturas. Subsequentemente, 1000 larvas (L3) de tricostrongilídeos de ovinos foram adicionadas e a recuperação larval foi realizada após sete dias. A predação de larvas no Grupo I (M. thaumasium - 36 meses) não diferiu significativamente (p> 0,01) do Grupo II (M. thaumasium - recente), com reduções de 75% e 79%. Ambos os grupos atingiram o pico de predação para larvas em 72 h. O gênero helminto mais recuperado nas coproculturas foi Haemonchus sp. Os dados indicam que o período de estocagem de 36 meses de péletes de M. thaumasium na matriz de alginato não influenciou a eficácia da predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos, com atividade fúngica nas fezes até 96 horas após a administração aos animais.

Influence of storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes / Influência do tempo de armazenamento de peletes de Monacrosporuim thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos

The objective of this study was to evaluate the influence of the storage time of Monacrosporium thaumasium pellets on the predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes in the semi-arid area of Paraíba, Northeast Brazil. 24 sheep with zero in the count of eggs per gram of faeces EPG, were divided into four experimental groups: Group I, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium pellets - 36 months of storage, single dose; Group II, 3 g/10 kg live weight M. thaumasium newly produced, single dose; Group III, 3 g/10 kg live weight pellets without fungi; and Group IV (control group) did not receive pellets. Every 24 h, up to 120 h, the faeces of the animals were collected and submitted to the laboratory for analysis. Fifteen grams of faeces were weighed from each animal and five grams of expanded vermiculite were added to produce the coprocultures. Subsequently, 1000 larvae (L3) sheep trichostrongilides were added, and larval recovery was performed after 7 days. Predation of larvae in Group I (M. thaumasium - 36 months) did not differ significantly (p > 0.01) from Group II (M. thaumasium - recent), with reductions of 75% and 79%. Both groups reached peak predation to larvae at 72 h. The helminth genus most recovered in the coprocultures was Haemonchus sp. The data indicate that the 36-month stocking period of M. thaumasium pellets in alginate matrix did not influence the efficacy of predation of infective larvae of sheep gastrointestinal nematodes, with fungal activity in the faeces up to 96 hours after administration to the animals.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do tempo de armazenamento de péletes de Monacrosporium thaumasium na predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos no semiárido da Paraíba, Nordeste do Brasil. 24 ovelhas, com contagem de ovos por grama de fezes OPG, negativo, foram divididas em quatro grupos experimentais: Grupo I, 3 g / 10 kg de peso vivo, péletes de M. thaumasium - 36 meses de armazenamento, dose única; Grupo II, 3 g / 10 kg de peso vivo M. thaumasium recém-produzido, dose única; Grupo III, 3 g / 10 kg de peso vivo sem fungos; e Grupo IV (grupo controle), não recebeu péletes. A cada 24 h, até 120 h, as fezes dos animais foram coletadas e submetidas ao laboratório para análise. Quinze gramas de fezes foram pesados de cada animal e cinco gramas de vermiculita expandida foram adicionados para produzir as coproculturas. Subsequentemente, 1000 larvas (L3) de tricostrongilídeos de ovinos foram adicionadas e a recuperação larval foi realizada após sete dias. A predação de larvas no Grupo I (M. thaumasium - 36 meses) não diferiu significativamente (p> 0,01) do Grupo II (M. thaumasium - recente), com reduções de 75% e 79%. Ambos os grupos atingiram o pico de predação para larvas em 72 h. O gênero helminto mais recuperado nas coproculturas foi Haemonchus sp. Os dados indicam que o período de estocagem de 36 meses de péletes de M. thaumasium na matriz de alginato não influenciou a eficácia da predação de larvas infectantes de nematódeos gastrintestinais de ovinos, com atividade fúngica nas fezes até 96 horas após a administração aos animais.(AU)

In vitro susceptibility of nematophagous fungi to antiparasitic drugs: interactions and implications for biological control

Abstract The fast anthelmintic resistance development has shown a limited efficiency in the control of animals endoparasitosis and has promoted research using alternative control methods. The use of chemicals in animal anthelmintic treatment, in association with nematophagous fungi used for biological control, is a strategy that has proven to be effective in reducing the nematode population density in farm animals. This study aims to verify the in vitro susceptibility of the nematophagous fungi Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans and Paecilomyces lilacinus against the antiparasitic drugs albendazole, thiabendazole, ivermectin, levamisole and closantel by using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). MICs ranged between 4.0 and 0.031 µg/mL for albendazole, thiabendazole and ivermectin, between 0.937 and 0.117 µg/mL for levamisole, and between 0.625 and 0.034 µg/mL for closantel. The results showed that all antiparasitic drugs had an in vitro inhibitory effect on nematophagous fungi, which could compromise their action as agents of biological control. D. flagrans was the most susceptible species to all drugs.

Resumo O desenvolvimento rápido da resistência anti-helmíntica demonstrou a eficiência limitada no controle de endoparasitoses em animais, e promoveu a investigação em métodos de controles alternativos. O uso de produtos químicos no tratamento anti-helmíntico animal, em associação com fungos nematófagos utilizados para o controlo biológico, é uma estratégia que tem provado ser eficaz na redução da densidade da população de nematódeos em animais agrícolas. Este estudo teve como objetivo verificar a suscetibilidade in vitro dos fungos nematófagos Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans e Paecilomyces lilacinus frente aos antiparasitários albendazol, tiabendazol, ivermectina, levamisol e closantel, usando a concentração inibitória mínima (MIC). Os MICs variaram entre 4,0 e 0,031 g/mL para albendazol, tiabendazol e ivermectina, entre 0,937 e 0,117 g/mL para o levamisol, e entre 0,625 e 0,034 g/mL para closantel. Os resultados mostraram que todos os antiparasitários tiveram um efeito inibidor in vitro sobre os fungos nematófagos, o que poderia comprometer suas atividades como agentes de controle biológico. D. flagrans foi a espécie mais sensível a todas as drogas.

In vitro susceptibility of nematophagous fungi to antiparasitic drugs: interactions and implications for biological control

Abstract The fast anthelmintic resistance development has shown a limited efficiency in the control of animals endoparasitosis and has promoted research using alternative control methods. The use of chemicals in animal anthelmintic treatment, in association with nematophagous fungi used for biological control, is a strategy that has proven to be effective in reducing the nematode population density in farm animals. This study aims to verify the in vitro susceptibility of the nematophagous fungi Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans and Paecilomyces lilacinus against the antiparasitic drugs albendazole, thiabendazole, ivermectin, levamisole and closantel by using the Minimum Inhibitory Concentration (MIC). MICs ranged between 4.0 and 0.031 µg/mL for albendazole, thiabendazole and ivermectin, between 0.937 and 0.117 µg/mL for levamisole, and between 0.625 and 0.034 µg/mL for closantel. The results showed that all antiparasitic drugs had an in vitro inhibitory effect on nematophagous fungi, which could compromise their action as agents of biological control. D. flagrans was the most susceptible species to all drugs.

Resumo O desenvolvimento rápido da resistência anti-helmíntica demonstrou a eficiência limitada no controle de endoparasitoses em animais, e promoveu a investigação em métodos de controles alternativos. O uso de produtos químicos no tratamento anti-helmíntico animal, em associação com fungos nematófagos utilizados para o controlo biológico, é uma estratégia que tem provado ser eficaz na redução da densidade da população de nematódeos em animais agrícolas. Este estudo teve como objetivo verificar a suscetibilidade in vitro dos fungos nematófagos Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans e Paecilomyces lilacinus frente aos antiparasitários albendazol, tiabendazol, ivermectina, levamisol e closantel, usando a concentração inibitória mínima (MIC). Os MICs variaram entre 4,0 e 0,031 g/mL para albendazol, tiabendazol e ivermectina, entre 0,937 e 0,117 g/mL para o levamisol, e entre 0,625 e 0,034 g/mL para closantel. Os resultados mostraram que todos os antiparasitários tiveram um efeito inibidor in vitro sobre os fungos nematófagos, o que poderia comprometer suas atividades como agentes de controle biológico. D. flagrans foi a espécie mais sensível a todas as drogas.

In Vitro Nematophagous Activity Of Predatory Fungi On Infective Larvae Of Strongyloides Papillosus

An in vitro experiment was carried out to assess the effect of fungal isolates of the genus Arthrobotrys, Duddingtonia, Monacrosporium and Nematoctonus on infective Strongyloides papillosus larvae. A suspension of 1,000 infective S. papillosus larvae was dripped on to Petri dishes containing fungi grown in agar-water. There was a statistically significant difference (p<0.05) among all the isolates and the fungus-free control. Comparing the results between isolates, difference was observed in some isolates of the genus Arthrobotrys (CG 719, I40, A1, A2, C1, B1), D. flagrans (CG722), Monacrosporium (CGI, SF53, NF34A) and N. robustus (D1) that showed a better capture and destruction results and consequently a greater decrease in the average of the uncaptured larvae recovered. The results showed that there may be variations in the predatory capacity of different species and among fungal isolates of the same species on Strongyloides papillosus and indicated that nematophagous fungi may be used for the biological control of this helminth.

In Vitro Nematophagous Activity Of Predatory Fungi On Infective Larvae Of Strongyloides Papillosus

An in vitro experiment was carried out to assess the effect of fungal isolates of the genus Arthrobotrys, Duddingtonia, Monacrosporium and Nematoctonus on infective Strongyloides papillosus larvae. A suspension of 1,000 infective S. papillosus larvae was dripped on to Petri dishes containing fungi grown in agar-water. There was a statistically significant difference (p<0.05) among all the isolates and the fungus-free control. Comparing the results between isolates, difference was observed in some isolates of the genus Arthrobotrys (CG 719, I40, A1, A2, C1, B1), D. flagrans (CG722), Monacrosporium (CGI, SF53, NF34A) and N. robustus (D1) that showed a better capture and destruction results and consequently a greater decrease in the average of the uncaptured larvae recovered. The results showed that there may be variations in the predatory capacity of different species and among fungal isolates of the same species on Strongyloides papillosus and indicated that nematophagous fungi may be used for the biological control of this helminth.(AU)

Nematicide activity of microfungi (Orbiliales, Orbiliaceae) after transit through gastrointenstinal tract of Gallus gallus domesticus / Atividade nematiciada de microfungos (“Orbiliales, Orbiliaceae”) após trânsito gastrointestinal de Gallus gallus domesticus

Parasites are common in intensive or organics systems destined for chickens, which is more conducive to the emergence of gastrointestinal parasites, favored by direct contact with soil and other organisms. The growing demand for animal protein stimulates an expansion of production systems, increasing the stocking density. Outdoor poultry breeding systems (organic or not) that enable lower population density and higher animal welfare does not exclude these animals the presence of environmental pathogens. The control of gastrointestinal helminthosis in non-organic intensive and extensive systems is accomplished by administering anthelmintics with high cost and results unsatisfactory due to the misuse of drugs with consequent selection parasite strains resistant to chemical bases. This problem stimulate research into alternative control measures. Nematophagous fungi are used by its enzymatic action in controlled conditions and how environmental biocontrolers of larvae of gastrointestinal nematodes of livestock. This study evaluated the capacity of conidia/chlamydospores of nematophagous fungi as Duddingtonia flagrans(AC001 and CG722) and Monacrosporium thaumasium (NF34A) for cross the gastrointestinal tract of domestic chickens (Gallus gallus domesticus), and yours germination after traffic and predatory activity “in vitro” on larvae of Panagrellus spp. Fungi conidia/chlamydospores was identified in feces of chickens at times of 6, 12 and 24 hours after administration and spores viability was found after observing the germination, mycelial growth, followed by production of traps, capture and death of Panagrellus spp larvae in feces. Fungi Nematophagous are alternative control measures, efficient and innovative technology for the biological control of helminth parasites of chickens.(AU)

Parasitas são comuns em sistemas intensivos avícolas ou orgânicos, mais propício para o surgimento de parasitas gastrointestinais, favorecido pelo contato direto dos animais com o solo e outros organismos. O aumento da demanda por proteína animal estimula a expansão dos sistemas de produção com aumento da densidade animal. Sistemas de criação livres (orgânicos ou não) com baixa densidade e alto padrão tecnológico não excluem estes animais do contato com patógenos ambientais. O controle das helmintoses gastrointestinais em sistemas extensivos ou intensivos não orgânicos é realizado pela administração de anti helmínticos com elevado custo e resultados insatisfatórios devido ao mau uso dos produtos com consequente seleção de cepas parasitárias resistentes às bases químicas. Este problema estimula a pesquisa de medidas alternativas de controle. Fungos nematófagos são utilizados por sua atividade enzimática em condições controladas e como biocontroladores de larvas de namatóides gastrointestinais em animais. Este estudo avaliou a capacidade de conídios/clamidósporos dos fungos nematófagos Duddingtonia flagrans (AC001 e CG722) e Monacrosporium thaumasium (NF34A) passar pelo trato gastrointestinal de galinhas domésticas (Gallus gallus domesticus), a germinação após passagem e atividade predatória “in vitro” sobre larvas de Panagrellus spp. Conídios/clamidósporos fúngicos foram identificados nas fezes das aves nos tempos 6, 12 e 24 horas após administração e a viabilidade dos esporos foi contatada após germinação, crescimento micelial, seguido pela produção de armadilhas, captura e destruição de larvas de Panagrellus spp. nas fezes. Fungos nematófagos são medidas alternativas de controle, uma eficiente tecnologia e inovadora para o controle biológico de helmintos parasitas de aves.(AU)