Congenital renal hypoplasia and contralateral kidney failure in a giant otter (Pteronura brasiliensis) ex situ in Southeastern Brazil

Renal hypoplasia is incomplete development of the kidneys, in which fewer than normal numbers of nephrons are present at birth. This report is the first of these conditions in mustelids. A female adult giant otter (Pteronura brasiliensis), ex situ, presented clinically an unusual behavior with prostration, anorexia, hiding in the shelter, ataxia, paraparesis, and death in a clinical course of one day. At the postmortem exam, the left kidney was markedly enlarged and pale and the right kidney was severely reduced and had mild to moderate capsular thickening. Histologically, the left kidney had mineralization, proliferation of fibrous connective tissue and a mild neutrophilic infiltrate. The right kidney presented a reduced number of glomeruli, tubular atrophy and an increase in fibrous connective tissue, which were findings compatible with congenital kidney hypoplasia. Due the clinical condition of the animal, gross and microscopic findings, the cause of death was established as kidney failure induced by renal hypoplasia.(AU)

Hipoplasia renal bilateral em felino / Bilateral renal hypoplasia in feline

A hipoplasia renal ocorre quando há o desenvolvimento incompleto do rim, resultando em um menor número de néfrons, lóbulos e cálices ao nascimento do animal. A gravidade dessa anomalia depende do nível de acometimento. Quando unilateral, ocorre a hipertrofia compensatória do rim saudável e, em casos bilaterais, é frequente a ocorrência de insuficiência renal e infecções. Foi retratada como uma afecção hereditária em algumas raças puras ou mestiças de suínos, potros, caprinos, bovinos e cães, contudo, é incomum em felinos. O presente trabalho tem como objetivo relatar o caso de uma felina, sem raça definida, de dois meses de idade, com queixa de apatia, anorexia e êmes por três dias. No exame físico, foi observada desidratação estimada em 10%, tempo de preenchimento capilar de três segundos, hipotermia, hipoglicemia e letargia. Frente a essas alterações, foram solicitados exames complementares para melhor elucidação do quadro. Os exames bioquímicos revelaram azotemia e hiperfosfatemia grave, bem como hipercalcemia e hipercalemia leve. Já a urinálise, indicou redução da densidade urinária associada à presença de cilindros hialinos e céreos. A ultrassonografia abdominal evidenciou perda de diferenciação córtico-medular e diminuição de ambos os rins, alterações essas compatíveis com nefropatia. Instituiu-se tratamento paliativo visando minimizar complicações secundárias da injúria renal aguda, contudo, a paciente veio a óbito. Na necropsia, os rins apresentavam tamanho reduzido bilateralmente e o exame histopatológico revelou a presença de moderados glomérulos primitivos multifocais associados à distensão do espaço glomerular. A avaliação clínica e as lesões histopatológicas foram consistentes com o diagnóstico de hipoplasia renal congênita.

Renal hypoplasia occurs when there is incomplete development of the kidney, resulting in fewer nephrons, lobes and calyces at birth. The severity of this anomaly depends on the level of involvement. When unilateral, compensatory hypertrophy of the healthy kidney occurs and, in bilateral cases, renal failure and infections are frequent. It has been portrayed as an inherited condition in some pure or mixed breeds of pigs, foals, goats, cattle and dogs, however, it is uncommon in felines. This paper aims to report the case of a feline, mixed breed, two months old, with complaints of apathy, anorexia and emesis for three days. Physical examination showed an estimated dehydration of 10%, capillary refilling time of three seconds, hypothermia, hypoglycemia and lethargy. In view of these changes, complementary exams were requested to better clarify the condition. Biochemical examinations revealed severe azotemia and hyperphosphatemia, as well as hypercalcemia and mild hyperkalemia. Urinalysis, on the other hand, indicated a reduction in urinary density associated with the presence of hyaline and brain cylinders. Abdominal ultrasound showed a loss of corticomedullary differentiation and a decrease in both kidneys, changes compatible with nephropathy. Palliative treatment was instituted in order to minimize secondary complications of acute kidney injury, however, the patient died. At necropsy, the kidneys were bilaterally reduced in size and histopathological examination revealed the presence of moderate multifocal primitive glomeruli associated with distention of the glomerular space. Clinical evaluation and histopathological lesions were consistent with the diagnosis of congenital renal hypoplasia.

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of river / Alterações histopatológicas em brânquias, fígado, rim e músculos de Ictalurus punctatus coletados em áreas poluídas do rio

Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.(AU)

O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.(AU)

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

O uso da dimetilarginina simétrica (SDMA) no diagnóstico e estadiamento da doença renal crônica em felinos: revisão de literatura / Symmetrical dimethylarginine (SDMA) use in diagnostic and staging of chronic kidney disease in felines: a literature review

O objetivo desta revisão de literatura é descrever os testes labora-toriais utilizados rotineiramente na clínica de pequenos animais para a detecção da doença renal crônica (DRC) em felinos, enfatizando o diagnóstico precoce desta afecção pela utilização de uma nova ferramenta laboratorial, a dimetilarginina simétrica (SDMA). A DRC caracteriza-se pela perda progressiva e irreversível dos néfrons, sendo a filtração a função mais básica dos rins, correlacionada, as-sim, à taxa de filtração glomerular (TFG) e à massa renal funcional. Embora a mensuração da taxa de filtração glomerular F seja método de referência para a avaliação da função renal, seu uso infrequente permite o uso de marcadores alternativos, como a concentração de uréia e creatinina séricas. O SDMA é uma molécula estável, sendo amplamente excretado pelo rim, o que o torna um bom candidato à biomarcador renal, pois seu tamanho e carga permitem que seja livremente excretado por filtração glomerular. A dosagem do SDMA é extremamente precisa, sendo o diagnóstico precoce de DRC pos-sível atualmente, intervenções renoprotetoras que retardam seu progresso, ou visam estabilizar a doença, são possíveis.

The purpose of this literature review is to describe laboratory tests routinely used in the small animal clinic for the detection of chronic kidney disease in felines, emphasizing the early diagnosis of this condition using a new laboratory tool for symmetrical dimethylarginine (SDMA). Chronic Kidney Disease (CKD) is characterized by the progressive and irreversible loss of the nephrons, which is the most basic function of the kidneys, correlated with the glomerular filtration rate (GFR) and the functional renal mass, respectively. Although the measurement of TF glomerular filtration rate is a reference method for the evaluation of renal function, its infrequent use allows the use of alternative markers such as serum urea and creatinine concentration. SDMA is a stable molecule, being widely excreted by the kidney, which makes it a good candidate for renal biomarker because its size and load allow it to be freely excreted by glomerular filtration. The SDMA dosage is extremely accurate, with the early diagnosis of CKD being currently possible, thus allowing for renoprotective interventions that delay its progress or aim to stabilize the disease.

O uso da dimetilarginina simétrica (SDMA) no diagnóstico e estadiamento da doença renal crônica em felinos: revisão de literatura / Symmetrical dimethylarginine (SDMA) use in diagnostic and staging of chronic kidney disease in felines: a literature review

O objetivo desta revisão de literatura é descrever os testes labora-toriais utilizados rotineiramente na clínica de pequenos animais para a detecção da doença renal crônica (DRC) em felinos, enfatizando o diagnóstico precoce desta afecção pela utilização de uma nova ferramenta laboratorial, a dimetilarginina simétrica (SDMA). A DRC caracteriza-se pela perda progressiva e irreversível dos néfrons, sendo a filtração a função mais básica dos rins, correlacionada, as-sim, à taxa de filtração glomerular (TFG) e à massa renal funcional. Embora a mensuração da taxa de filtração glomerular F seja método de referência para a avaliação da função renal, seu uso infrequente permite o uso de marcadores alternativos, como a concentração de uréia e creatinina séricas. O SDMA é uma molécula estável, sendo amplamente excretado pelo rim, o que o torna um bom candidato à biomarcador renal, pois seu tamanho e carga permitem que seja livremente excretado por filtração glomerular. A dosagem do SDMA é extremamente precisa, sendo o diagnóstico precoce de DRC pos-sível atualmente, intervenções renoprotetoras que retardam seu progresso, ou visam estabilizar a doença, são possíveis.(AU)

The purpose of this literature review is to describe laboratory tests routinely used in the small animal clinic for the detection of chronic kidney disease in felines, emphasizing the early diagnosis of this condition using a new laboratory tool for symmetrical dimethylarginine (SDMA). Chronic Kidney Disease (CKD) is characterized by the progressive and irreversible loss of the nephrons, which is the most basic function of the kidneys, correlated with the glomerular filtration rate (GFR) and the functional renal mass, respectively. Although the measurement of TF glomerular filtration rate is a reference method for the evaluation of renal function, its infrequent use allows the use of alternative markers such as serum urea and creatinine concentration. SDMA is a stable molecule, being widely excreted by the kidney, which makes it a good candidate for renal biomarker because its size and load allow it to be freely excreted by glomerular filtration. The SDMA dosage is extremely accurate, with the early diagnosis of CKD being currently possible, thus allowing for renoprotective interventions that delay its progress or aim to stabilize the disease.(AU)

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

The relationship between renal warm ischemia time and glomerular loss. An experimental study in a pig model

Purpose: To investigate the glomerular number after different warm ischemia times. Methods: Thirty two pigs were assigned into four groups. Three groups (G10, G20, and G30) were treated with 10, 20, and 30 minutes of left renal warm ischemia. The sham group underwent the same surgery without renal ischemia. The animals were euthanized after 3 weeks, and the kidneys were collected. Right kidneys were used as controls. The kidney weight, volume, cortical-medullar ratio, glomerular volumetric density, volume-weighted mean glomerular volume, and the total number of glomeruli per kidney were obtained. Serum creatinine levels were assessed pre and postoperatively. Results: Serum creatinine levels did not differ among the groups. All parameters were similar for the sham, G10, and G20 groups upon comparison of the right and left organs. The G30 group pigs' left kidneys had lower weight, volume, and cortical-medullar ratio and 24.6% less glomeruli compared to the right kidney. A negative correlation was found between warm ischemia time and glomerular number. Conclusions: About one quarter of glomeruli was lost after 30 minutes of renal warm ischemia. No glomeruli loss was detected before 20 minutes of warm ischemia. However, progressive glomerular loss was associated with increasing warm ischemia time.(AU)

Low-energy shock wave preconditioning reduces renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion

Purpose: To evaluate whether low energy shock wave preconditioning could reduce renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion. Methods: The right kidneys of 64 male Sprague Dawley rats were removed to establish an isolated kidney model. The rats were then divided into four treatment groups: Group 1 was the sham treatment group; Group 2, received only low-energy (12 kv, 1 Hz, 200 times) shock wave preconditioning; Group 3 received the same low-energy shock wave preconditioning as Group 2, and then the left renal artery was occluded for 45 minutes; and Group 4 had the left renal artery occluded for 45 minutes. At 24 hours and one-week time points after reperfusion, serum inducible nitric oxide synthase (iNOS), neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL), kidney injury molecule-1 (KIM-1), creatinine (Cr), and cystatin C (Cys C) levels were measured, malondialdehyde (MDA) in kidney tissue was detected, and changes in nephric morphology were evaluated by light and electron microscopy. Results: Twenty-four hours after reperfusion, serum iNOS, NGAL, Cr, Cys C, and MDA levels in Group 3 were significantly lower than those in Group 4; light and electron microscopy showed that the renal tissue injury in Group 3 was significantly lighter than that in Group 4. One week after reperfusion, serum NGAL, KIM-1, and Cys C levels in Group 3 were significantly lower than those in Group 4. Conclusion: Low-energy shock wave preconditioning can reduce renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion in an isolated kidney rat model.(AU)

Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a biomarker of kidney damage: a review / Lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL) como um biomarcador de lesão renal: uma revisão

Neutrophil gelatinase- associated lipocalin (NGAL) is a protein molecule predominantly expressed in the distal nephron after the occurrence of renal injury. Unlike the serum creatinine and the glomerular filtration rate, which are the renal function markers, the increased levels of NGAL, both in serum and urine, are closely linked to the structural injury to the nephron. Clinical studies indicate that a few hours after the occurrence of acute renal injury, the serum and urinary levels of NGAL are already significantly elevated, while the serum creatinine levels and renal clearance only undergo significant changes between 24-48h after injury. Thus, the use of renal function markers, usually assessed in the clinical practice, they may have some limitations also hindering the implementation of early measures aimed at protecting the kidneys. This literature review aims at examining the biological aspects and the applications of NGAL measurement in some clinical conditions, including kidney failure, kidney diseases and renal ischemia.

Lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL) é uma molécula proteica predominantemente expressa na parte distal do néfron após a ocorrência de lesão renal. Diferentemente da creatinina sérica e da taxa de filtração glomerular, que são marcadores de função renal, os níveis aumentados de NGAL, tanto no soro quanto na urina, estão intimamente ligados a lesões estruturais do néfron. Os estudos clínicos indicam que poucas horas após a ocorrência da lesão renal aguda os níveis séricos e urinários de NGAL já se apresentam significativamente elevados, enquanto os níveis séricos de creatinina e a sua depuração renal apenas sofrem alterações significativas entre 24-48h após a lesão. Assim, a utilização de marcadores de função renal, usualmente avaliados na prática clínica, pode apresentar algumas limitações além de dificultar a aplicação de medidas precoces que visam a proteção renal. Esta revisão da literatura tem por objetivo analisar os aspectos biológicos e as aplicações da mensuração de NGAL em algumas condições clínicas, incluindo injúria renal, nefropatias e isquemia renal.

Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a biomarker of kidney damage: a review / Lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL) como um biomarcador de lesão renal: uma revisão

Neutrophil gelatinase- associated lipocalin (NGAL) is a protein molecule predominantly expressed in the distal nephron after the occurrence of renal injury. Unlike the serum creatinine and the glomerular filtration rate, which are the renal function markers, the increased levels of NGAL, both in serum and urine, are closely linked to the structural injury to the nephron. Clinical studies indicate that a few hours after the occurrence of acute renal injury, the serum and urinary levels of NGAL are already significantly elevated, while the serum creatinine levels and renal clearance only undergo significant changes between 24-48h after injury. Thus, the use of renal function markers, usually assessed in the clinical practice, they may have some limitations also hindering the implementation of early measures aimed at protecting the kidneys. This literature review aims at examining the biological aspects and the applications of NGAL measurement in some clinical conditions, including kidney failure, kidney diseases and renal ischemia.(AU)

Lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL) é uma molécula proteica predominantemente expressa na parte distal do néfron após a ocorrência de lesão renal. Diferentemente da creatinina sérica e da taxa de filtração glomerular, que são marcadores de função renal, os níveis aumentados de NGAL, tanto no soro quanto na urina, estão intimamente ligados a lesões estruturais do néfron. Os estudos clínicos indicam que poucas horas após a ocorrência da lesão renal aguda os níveis séricos e urinários de NGAL já se apresentam significativamente elevados, enquanto os níveis séricos de creatinina e a sua depuração renal apenas sofrem alterações significativas entre 24-48h após a lesão. Assim, a utilização de marcadores de função renal, usualmente avaliados na prática clínica, pode apresentar algumas limitações além de dificultar a aplicação de medidas precoces que visam a proteção renal. Esta revisão da literatura tem por objetivo analisar os aspectos biológicos e as aplicações da mensuração de NGAL em algumas condições clínicas, incluindo injúria renal, nefropatias e isquemia renal.(AU)

Mensuração de biomarcadores na identificação precoce de lesão renal em cadelas com piometra

A piometra é uma doença reprodutiva comum em cães fêmeas intactas e o consiste em infecção uterina, requentemente acometida por bactérias Escherichia coli (E. coli), com formação de secreção purulenta, que pode gerar disfunções glomerulares e/ou tubulares, ou ambas, mesmo após a realização da ovario histerectomia (OVH). A proteinúria é identificada em aproximadamente metade das cadelas. geralmente leve e frequentemente transitória. Entratanto, aproximadamente 8% dos cães com piometra por E. coli desenvolvem insuficiência renal pós histerectomia. Em estudos retrospectivos, foram relatadas injúrias renais em pacientes submetidos ao procedimento cirúrgico, em virtude do diagnóstico de piometra como enfermidade primária, porém não há consenso acerca dos níveis de comprometimentos glomerulares. Atualmente, os métodos de diagnóstico utilizados, a concentração de ureia e creatinina séricas, são tardios e as elevações significativas desses bioquímicos só são identificadas quando aproximadamente 75% dos néfrons já estão cometidos. Estudos têm demonstrado que novos marcadores, como a Dimetilarginina simétrica (SDMA) e o Gama Glutamil Transferase urinário (uGGT) podem ser mais precoces na identificação da injúria renal que a creatinina sérica (sCr), o parâmetro rotineiramente utilizado. Assim como, a relação proteina:creatinina urinária (uPC) que são marcadores importantes do dano estrutural dos néfrons. Estudos demonstraram o aumento do SDMA em 25% de redução da filtração glomerular; já o uGGT pode ser identificado na urina em lesões de células tubulares. A uPC, apesar de considerada precoce na identificação danosa, não determina a localização do insulto renal. A antecipação na detecção da lesão renal é essencial para uma rápida adaptação do tratamento, evitando consequências severas e/ou irreversíveis, como a insuficiência renal e, assim, possibilitando o aumento na taxa de sucesso do tratamento.

Pyometra is a common reproductive disease in intact female dogs and consists of uterine infection, frequently affected by Escherichia coli (E. coli) bacteria, with formation of purulent secretion, which can generate glomerular and/or tubular disfunction, even after performing the ovariohysterectomy (OH). Proteinuria is identified in approximately half of bitches with pyometra, which is generally mild and often transient. However, approximately 8% of the dogs with pyometra by E. coli develop renal failure after ovariohysterectomy. In retrospective studies, kidney injuries were reported in a patient undergoing the surgical procedure, due to the diagnosis of pyometra as a primary disease, but there is no consensus about the level of glomerular involvement. Currently, the diagnostic methods used, the concentration of serum urea and creatinin, are late and significant elevations of these biochemicals are only identified when approximately 75% of the nephros are already affected. Studies have shown that new markers, such as serum symmetric Dimethylarginine (SDMA)and the urinary Gama Glutamyl Transferase (uGGT) range, may be earlier in identifying renal injury than serum creatinine (sCr), the parameter routinely used. As well as the protein:urinary creatinin (uPC) ratio, which are important markers in the structural damage of the nephrons. Studies have shown an increase in SDMA by 25% reduction in glomerular filtration; uGGT can be identified in lesions of tubular cells since it is an enzyme present inside these cells. The UPC, although considered early in the harmful identification, does not determine the location of the renal insult. Anticipating the detection of kidney injury is essential for a quick adaptation of the treatment, avoiding severe and/or irreversible consequences, such as renal failure, nd thus, allowing nd increase in the treatment success rate.

USO DA KIM-1 NA DETECÇÃO DE LESÃO RENAL PRECOCE EM CÃES COM LEPTOSPIROSE

DIAS, C. S. Uso da KIM-1 na detecção de lesão renal precoce em cães com leptospirose. Salvador, 2020. 81pg. Dissertação (Mestre em Ciência Animal nos Trópicos) Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade Federal da Bahia. Leptospirose é uma zoonose de ampla distribuição mundial e relevante impacto para a saúde pública. Clinicamente, a injúria renal é um aspecto importante na leptospirose canina, podendo desencadear nefrite intersticial tubular, glomerulonefrite, vasculite e reduzida perfusão renal. A azotemia tem caráter tardio para diagnóstico de injúria renal precoce, enquanto a identificação de lesão renal em estágios iniciais permite pronta intervenção terapêutica com o objetivo de desacelerar a progressão da injúria. A Kidney Injury Molecule-1 (KIM-1) é uma glicoproteína transmembrana não expressa na ausência de lesão tecidual ou endotelial, cuja concentração urinária encontra-se elevada em estágios iniciais de injúria tubular. Objetivou-se avaliar a utilização da KIM-1 urinária (uKIM-1) para detecção de injúria renal precoce (antes do surgimento de azotemia) na leptospirose canina, após caracterização da infecção em cães naturalmente infectados por Leptospira sp. O grupo de estudo envolveu 25 cães diagnosticados com leptospirose através de isolamento bacteriano e/ou Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e/ou Teste de Aglutinação Microscópica (MAT 800). O grupo controle foi formado por 5 animais clinicamente saudáveis. Os animais estudados foram caracterizados em fases agudas e subagudas de infecção com início de sintomas entre três e sete dias. Níveis de uKIM-1 encontraram-se significativamente diferentes (p < 0,01) entre os grupos estudados, principalmente entre cães não azotêmicos infectados e cães saudáveis (p= 0,0042). O biomarcador mostrou sensibilidade de 88% para diagnóstico de leptospirose com ponto de corte > 1,49 ng/ml. KIM-1 urinária encontrou-se negativamente correlacionada com a densidade urinária, porém acompanhou evidências histopatológicas de degeneração, necrose e regeneração renais. A aplicação deste biomarcador permitiu a detecção de lesão renal precoce em casos em que a injúria permaneceu não detectada através do uso de marcadores de função renal aplicados na rotina clínica.

DIAS, C. S. Use of KIM-1 to detect early kidney injury in canine leptospirosis. Salvador, 2020. 81pg. Dissertação (Mestre em Ciência Animal nos Trópicos) Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia Universidade Federal da Bahia. Leptospirosis is a widespread zoonosis of significance for public health. Clinically, renal injury is an important aspect in canine leptospirosis and involves different segments of nephrons, which can result in tubular interstitial nephritis, glomerulonephritis, vasculitis and reduced renal perfusion. Azotemia has low sensitivity in diagnosing early renal injury, whilst early detection of kidney injury enables prompt therapeutic intervention aiming at slowing injury progress. Kidney Injury Molecule-1 (KIM-1) is a transmembrane protein not expressed in the absence of tissue or endothelial injury; its urinary concentration is rapidly elevated in the early stages of tubular injury. This study aimed to evaluate the use of urinary KIM-1 to detect early kidney injury (before the onset of azotemia) in canine leptospirosis after infection characterizing the infection in naturally affected dogs. The study group involved 25 dogs diagnosed with leptospirosis by Microscopic Agglutination Test (MAT; 800), Polymerase Chain Reaction (PCR) and bacterial isolation. The control group enrolled 5 clinically healthy animals. Infection was characterized in acute and subacute phases with onset of clinical symptoms from three to seven days. uKIM-1 levels were statistically different (p < 0,01) between the studied groups, especially in non-azotemic dogs (p= 0,0042). The biomarker showed 88% sensibility to diagnosis of leptospirosis at >1,49 ng/ml cut-off. Urine KIM-1 was negatively correlated with urine specific gravity but accompanied histopathological evidence of renal degeneration, necrosis and regeneration processes. This biomarker allowed the detection of early kidney injury in cases where the damage remained undetected using renal function markers applied in the clinical routine.

Isolamento, expansão e caracterização de células progenitoras renais derivadas de mesonefro e metanefro de gato doméstico (Felis catus) São

A doença renal crônica (DRC) é amplamente encontrada em felinos. É caracterizada pela deficiência estrutural e funcional dos rins e pela perda gradual e definitiva do número de néfrons funcionais, com posterior redução da taxa de filtração glomerular. A DRC é uma enfermidade de difícil tratamento devido às limitações terapêuticas existentes, as quais apenas minimizam os danos causados aos pacientes. A inexistência de qualquer tratamento específico para a DRC fortalece a necessidade de investimento em pesquisas e em terapias inovadoras aplicadas, incluindo a terapia celular. Em gatos, muitos modelos já foram preconizando com o uso de diversos tipos de celulares, tais como, derivados da medula óssea, âmnio, e tecido adiposo. Porém até o presente momento, nenhum desses estudos obtiveram sucesso significativo no tratamento dessa enfermidade. Observando portanto, a carência de uma terapia celular especifica para a DRC, e sabendo que muito estudos estão sendo realizados com o uso células progenitoras, ou seja, células as quais já estão destinadas a serem um tecido ou órgão específico, este trabalho buscou mediante estudo das células derivadas de mesonefro e metanefro de gatos domésticos em diferentes estágios gestacionais, uma nova fonte para terapia celular, afim de testar qual destes diferentes tipos celulares seria o melhor para tratamento das doenças renais. Desta forma, embriões e fetos de gato foram coletados da campanha de castração eletiva realizada na cidade de Embu das Artes, São Paulo. Os mesonefros e metanefros foram dissecados e postos em cultivo celular. Na sequência foram realizados testes de viabilidade e metabolismo celular, análise de proteínas específicas mediante a técnica de citometria de fluxo, potencial tumorigênico, e diferenciação celular para células adipogênicas, condrogênicas e osteogênicas. Foi observado que estas células possuíam plasticidade e clonicidade celular, apresentavam expressões positivas para marcadores renais e expressão negativa para proteínas do complexo principal de histocompatibilidade, também não apresentaram formação tumorigênicas e possuíam a capacidade de se diferenciar em diversos tecidos, tais como adipócitos, osteócitos e condrócitos. Portanto podemos concluir que estas novas linhagens celulares apresentam todas as caraterísticas necessárias para tornarem-se um novo modelo em terapia celular para gatos com DRC. Dentre estas quatro linhagens, elegemos a as células provenientes de metanefro de final do período gestacional com as melhores características dentre as demais, pois apresentam maiores expressões de proteínas específicas renais, além apresentarem uma estrutura renal mais concisa e mais bem estabelecida.

Chronic kidney disease (CKD) is widely found in felines. It is characterized by structural and functional deficiency of the kidneys and by the gradual and definitive loss of the number of functional nephrons, with subsequent reduction of the glomerular filtration rate. CKD has difficult treatment. This is because there are some therapeutic limitations, which only minimize the harm caused to patients. The lack of any specific treatment for CKD strengthens the need for investment in research and innovative applied therapies, including cell therapy. In cats, many models have been advocating the use of several types of cells, such as bone marrow, amnion, and adipose tissue. However, until now, none of these studies have been significantly successful in treating this disease. Therefore, the lack of a specific cellular therapy for CKD, and knowing that a lot of studies are being performed with the use of progenitor cells, that is, cells that are already destined to be a specific tissue or organ. The aim of this study was to study the mesonephrine and metanephric cells of domestic cats at different gestational stages, a new source for cellular therapies, in order to test which of these different cell types would be the best for renal diseases. In this way, embryos and cat fetuses were collected from the elective castration campaign held in the city of Embu das Artes, São Paulo. The mesonephros and metanephros were dissected and placed in cell culture. Cell viability tests, specific protein analysis using flow cytometry, tumorigenic potential, and cell differentiation for adipogenic, chondrogenic, osteogenic and endothelial cells were performed. It was observed that these cells had cellular plasticity and clonicity. They also had positive expressions for renal markers and negative expression for main histocompatibility complex proteins. But they did not present tumorigenic formation and had the capacity to differentiate in diverse tissues, such as adipocytes, osteocytes, chondrocytes and endothelial cells, precursors of renal vasculogenesis. Therefore, we can conclude that these new cell lines have all the necessary characteristics to become a new model in cell therapy for cats with CKD. Among these four strains, we chose cells from metanephros at the end of the gestational period with the best characteristics among the others, since they present higher specific renal protein expression, in addition to presenting a more concise and well-established renal structure.

Determinação do perfil arritmogênico em cães com doença renal crônica estádio IV submetidos à hemodiálise intermitente

A doença renal crônica (DRC) é uma alteração com elevada casuística na clínica de pequenos animais, caracterizada por lesão irreversível dos néfrons. Muitos avanços foram realizados na conduta terapêutica do paciente nefropata na clínica de cães e gatos, dentre estes, a instituição da hemodiálise intermitente (HDI), representando um tratamento suporte importante. Em medicina, muitos indicadores relacionados ao risco de mortalidade têm sido explorados, dentre eles a variabilidade da frequência cardíaca (VFC), a dispersão da onda P, bem como a dispersão do intervalo QT já muito estudados, inclusive em pacientes submetidos à hemodiálise. O objetivo do presente estudo consistiu em avaliar a VFC, bem como descrever o perfil arritmogênico de cães portadores de DRC IV submetidos à HDI e compará-los a cães portadores de DRC IV submetidos apenas ao tratamento clínico e a cães saudáveis. Foram utilizados 30 cães, de ambos os sexos, de variadas idades e raças, pesando entre 15 a 30 kg. Os animais foram divididos em três grupos, sendo o grupo I (controle) com 10 cães saudáveis, grupo II (tratamento clínico) com 10 cães com DRC em estádio IV, submetidos ao tratamento clínico, duas vezes por semana e grupo III (HDI) com 10 cães com DRC IV, submetidos, ao tratamento clínico e dialítico, duas vezes por semana. As análises clínicas, laboratoriais, índices de VFC e parâmetros eletrocardiográficos, bem como as dispersões do intervalo QT e onda P foram realizadas nos dois grupos de DRC IV, antes de cada sessão de tratamento clínico/ HDI, e após o término das mesmas, durante as três primeiras sessões. Os cães com DRC IV submetidos à HDI apresentaram desequilíbrios eletrolíticos, e achados eletrocardiográficos importantes, incluindo arritmias cardíacas, bem como dispersão de onda P e QT maiores quando comparadas a animais submetidos apenas ao tratamento convencional e à animais hígidos. No entanto, os índices de VFC obtidos ao final das sessões dialíticas foram melhores quando comparados aos cães submetidos apenas ao tratamento convencional.

Chronic kidney disease (CKD) is an alteration with high casuistry in the small animal clinic, characterized by irreversible damage of the nephrons. Many advances have been made in the therapeutic management of the nephropathic patient in the clinic of dogs and cats, among them, the institution of intermittent hemodialysis (IHD), representing an important support treatment. In medicine, many indicators related to mortality risk have been explored, including heart rate variability (HRV), P-wave dispersion, as well as the dispersion of the QT interval already widely studied, including in patients undergoing hemodialysis. The objective of the present study was to evaluate the HRV, as well as to characterize the arrhythmogenic profile of dogs with CKD stage IV undergoing IHD and to compare them to dogs with CKD stage IV submitted only to clinical treatment and to healthy dogs. Thirty dogs of both sexes, of varying ages and races, weighing between 15 and 30 kg were used. The animals were divided into three groups, group I (control) - 10 healthy dogs, group II (clinical treatment) - 10 dogs with CKD IV, submitted to clinical treatment twice a week and group III (IHD) - 10 dogs with CKD IV, submitted, in addition to clinical treatment, to dialysis treatment, with intermittent hemodialysis, twice a week. Clinical, laboratory, HRV indexes and electrocardiographic parameters as well as QT and P-wave dispersions were performed in both CKD groups, prior to and after the end of each clinical treatment/IHD session, during three first sessions. Dogs with CKD IV undergoing IHD had electrolyte imbalances, and important electrocardiographic findings, including cardiac arrhythmias, as well as higher P and QT wave dispersion when compared to conventionally treated and healthy animals. However, HRV indices obtained at the end of dialysis sessions were better when compared to dogs submitted only to conventional treatment

Avaliação da albuminúria e da eletroforese de proteínas urinárias de cães com hiperadrenocorticismo e a relação com a pressão arterial sistêmica / Evaluation of albminuria and electrophoresis of urinary proteins from dogs with hyperadrenocorticism and relation with systemic arterial pressure

O hiperadrenocorticismo é uma das endocrinopatias mais comuns em cães, sendo caracterizado pela exposição excessiva de glicocorticóides secretados pelas adrenais. A hipercortisolemia crônica pode promover várias complicações, incluindo hipertensão sistêmica e glomerulonefrite. A glomerulonefrite pode desencadear variáveis graus de proteinúria e uma tendência de evolução para doença renal crônica. A perda de proteínas na urina, principalmente da albumina, é uma característica das doenças glomerulares e a determinação de variáveis laboratoriais, como a razão proteína:creatinina urinária (RPC), albuminúria (teste de ELISA) e eletroforese das proteínas urinárias, são recomendadas para a elucidação do diagnóstico. Assim, o objetivo do estudo é avaliar a relação entre proteinúria e hipertensão arterial sistêmica em cães com hiperadrenocorticismo e verificar, pela avaliação da albuminúria e do peso molecular das proteínas urinárias, o segmento do néfron que foi comprometido ou lesado. Foram avaliados 30 cães com diagnóstico de hiperadrenocorticismo, subdivididos em 13 cães com hipertensão arterial sistêmica (grupo I) e 17 cães normotensos (grupo II). Foram determinados a RPC; a albuminúria pela avaliação da albumina normalizada e razão albumina:creatinina urinária (RAC) e a eletroforese de proteínas pela técnica em gel de poliacrilamida, contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Os resultados foram comparados com os dados obtidos de 30 cães clinicamente saudáveis. Foi constatado que não houve influência da hipertensão arterial sistêmica nos cães com hiperadrenocorticismo em relação à quantificação da albuminúria, determinada pelo método ELISA, e nem na qualidade e quantidade das bandas de proteínas de baixo (<60 kDa) e de alto peso molecular (>60 kDa). No entanto foi determinado que cães com hiperadrenocorticismo podem desenvolver lesões glomerulares e tubulares, caracterizadas pela presença de albuminúria e de proteínas de alto e de baixo pesos moleculares, independentemente da presença de hipertensão arterial sistêmica. Conclui-se que a avaliação quantitativa (RPC e RAC) e qualitativa (SDS-PAGE) das proteínas urinárias traz informações adicionais que indicam os possíveis segmentos comprometidos dos néfrons que causaram as perdas de proteínas na urina. (AU)

Hyperadrenocorticism is one of the commonest endocrinopathies in dogs, and it is characterized by the excessive exposure of glucocorticoids excreted by adrenals. Chronic hypercortisolemia may promote several complications, including systemic hypertension and glomerulonephritis. Glomerulonephritis may initiate several variable degrees of proteinuria and leading to the development of chronic kidney disease. The loss of proteins through urine, mainly predominant albumin, is a characteristic of glomerular diseases and the determination of laboratorial variables, such as the urinary protein-to- creatinine ratio (UPC), urinary albumin-to-creatinine ratio (UAC; ELISA test) and electrophoresis of urinary proteins are recommended to elucidate the diagnosis. Therefore, the goal of this study is to evaluate the relationship between proteinuria and systemic arterial hypertension in dogs with hyperadrenocorticism and to determine through evaluation of albuminuria and molecular weight of urinary proteins, the segment of the nephron that could be damaged. Thirty dogs with hyperadrenocorticism were evaluated and subdivided into groups; 13 dogs with systemic arterial hypertension (group I) and 17 normotensive (group II). The UPC was determined, as well as UAC and the urine protein electrophoresis by polyacrylamide gel technique, containing dodecyl sodium sulphate (SDS-PAGE). The results were compared with data obtained from 30 clinically healthy dogs. No association between systemic arterial hypertension and albuminuria was detected in dogs with hyperadrenocorticism as well as no alterations of proteins patterns or molecular weights bands of low (<60 kDa) or high molecular weight (> 60 kDa) was found. However, dogs with hyperadrenocorticism may develop glomerular and tubular injuries that were characterized by the presence of albuminuria and proteins of low and high molecular weights, independently of systemic arterial hypertension. In conclusion, the quantitative (UPC and UAC) and qualitative (SDS-PAGE) evaluation of urinary proteins could add information to indicate the possible segments of the nephrons that caused the loss of those proteins. (AU)

Determinação urinária das proteínas albumina, ligadas à vitamina D e ao retinol, e de Tamm-Horsfall, em cães com doença renal crônica.

A proteína ligada à vitamina D (VDBP) é a principal responsável pelo transporte dos metabólitos da vitamina D e a sua presença na urina pode indicar lesão tubulointersticial, conforme observado em ratos e humanos. A determinação urinária da proteína ligada ao retinol (RBP), responsável por carrear o retinol do fígado para os tecidos periféricos, por sua vez, está associada à fibrose intersticial dos rins. A albuminúria pode estar relacionada a lesões glomerulares e/ou tubulares (não reabsorção). A proteína de Tamm-Horsfall (THP) normalmente é observada na urina, sendo sintetizada exclusivamente pelas células epiteliais da alça de Henle e do túbulo contornado distal, entretanto quando não detectada, pode indicar lesão nestes segmentos do néfron e/ou diminuição do número de néfrons. Em cães, há poucos estudos sobre as referidas proteínas na urina, especialmente nos casos de doença renal crônica (DRC). A hipótese deste estudo seria de que a avaliação da razão proteína:creatinina urinária (RPC) em cães com DRC per si não forneceria informações suficientes, pois não identificaria os segmentos dos néfrons comprometidos, mas que a determinação de proteínas específicas, pela análise conjunta da eletroforese e do Western blotting, sinalizariam a presença de lesões glomerulares e/ou tubulares, e que a THP poderia estar ausente ou presente em menor intensidade nos estágios avançados da DRC, indicando lesão tubular distal e/ou perda importante do número de néfrons. O presente estudo objetivou avaliar a presença de albumina, VDBP, RBP e THP na urina de cães com DRC, nos estágios 1 ao 4 (IRIS), pela análise conjunta da eletroforese em gel de poliacrilamida (SDSPAGE) e Western blotting. O total de 49 cães compuseram os grupos: grupo C clinicamente normal (n= 9), grupo E1 (estágio 1; n=10), grupo E2 (estágio 2; n=10), grupo E3 (estágio 3; n=10) e grupo E4 (estágio 4; n=10). Houve o predomínio de bandas de proteínas de baixo peso molecular (PM < 60kDa) em todos os grupos de cães com DRC (E1, E2, E3 e E4), e especificamente para o grupo E4 que apresentava média da RPC de 4,37 e, portanto, esperar-se-ia o predomínio de proteínas de alto PM (PM>60 kDa). Neste grupo, além da imnodetecção da albumina, também foi idenficada, em grande intensidade, proteínas de baixo PM (VDBP e RBP). No grupo E3 também foram imunodetectadas a VDBP e RBP, com média da RPC de 1,51 e de 3 a 7 bandas de proteínas de baixo PM. Ainda, a imunodetecção da VDBP e RBP foi constatada nos estágios inicias (E1 e E2) da DRC frente a valores da RPC normais (não proteinúricos), sendo este achado considerado como marcador precoce de lesão renal. A VDBP e RBP não foram identificadas em cães clinicamente normais. A menor intensidade de imunodetecção da THP nos estágios mais avançados pode sugerir mau prognóstico. Conclui-se que o valor da RPC per si não foi capaz de indicar a origem da proteinúria, se glomerular e/ou tubular, sendo necessário, portanto, a análise conjunta da eletroforese (PM) e do Western blotting (albumina, VDBP, RBP e THP) e que, assim, permitiu identificar o segmento do néfron comprometido que acarretou na perda ou na diminuição urinária de proteínas.

Vitamin D-binding protein (VDBP) is the main carrier of the Vitamin D metabolities and its presence in urine is associated with the development of tubulointersticial injury, according to previous studies in rats and humans. Retinol-binding protein (RBP) carries retinol from liver to peripheral tissues, and its urinary detection is also associated with tubulointersticial injury. Albuminuria suggests glomerular lesion, but also may indicate tubular disfunction (impairment of reabsorption). The presence of Tamm-Horsfall protein (THP) is expected in the urine of clinically normal people and animals, because it is synthesized exclusively by the epithelial cells of the distal segment of nephron, and when it is not detected it may indicate distal tubular injury and/or massive nephrons loss. However in dogs, there are few studies about these urinary proteins especially in cases of chronic kidney disease (CKD). The hypotesis of the present study was to investigate that not only urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) measurements would be enough to localize properly the injury to a specific nephron site, but also the evaluation of specifics urinary proteins by electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blotting could provide information regarding to the the presence of glomerular and/or tubular injury; in addition, less excretion of THP, or its absence in urine, could be associated with advanced stages of CKD. The aim of the present study was to evaluate albumin, VDBP, RBP e THP in the urine of 40 CKD dogs, on stages 1 to 4 (IRIS), by using of electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blotting. Forty-nine dogs were subdivided into: C group healthy dogs (n= 9), E1 group (stage 1; n=10), E2 group (stage 2; n=10), E3 group (stage 3; n=10) e E4 group (stage 4; n=10). The predominance of low molecular weight proteins (MW < 60kDa) was detected in all CKD groups, mainly in E4 group that the mean of UPC was 4.37, and then it would be expected high MW proteins findings (MW >60 kDa). In fact, in E4 group, albumin was imunodetected, however low molecular weight proteins (VDBP and RBP) were also detected and in high intensity. VDBP and RBP were also observed in E3 group (mean UPC = 1.51) and 3 to 7 bands of low molecular weight were detected. In the early stages of CKD (E1 and E2 groups), VDBP and RBP were also identified but UPC values were normal (non-proteinuric), which may suggest the role of these proteins as an early marker of renal injury. VDBP and RBP were not detected in healthy dogs. THP was observed in less intensity in the advanced stages of CDK that may suggest bad prognosis. In conclusion, UPC measurement per se was not able to indicate adequately the injury to a specific nephron site (e.g. glomerular and/or tubular), and therefore the additional information of electrophoresis (MW) and Western blotting (VDBP, RBP and THP) testing could allow the identification of the nephron site injured that caused loss (proteinuria) or decrease in urinary proteins.

Morfologia e desenvolvimento ultraestrutural do sistema renal de embriões bovinos com idade gestacional entre 10 e 50 dias

The aim of this study was to describe the bovine renal system development, during the early embryonic period (10-50 days). Bovine embryos collected in abattoir were photographed and measured by Crow-Rump (CR) method to estimate the gestational age. The embryos destined to optical microscopy were fixed in Bouin solution for development evaluations of renal system, as well as its structures. Some embryos also were fixed in Glutaraldeheyde 2.5% and destined to transmission electron microscopy for ultrastructural study of renal system cells. In bovine embryos with gestational age of 14 to 15 days (E14-15) the presence of pronephro were not observed, however the mesonephro was found, as well as morphologic indications of it is functional activity. Mesonephro presented, in the interior of its tubular cells, innumerable mitochondrias and interdigitations, indicating high activity of ionic transportation. The metanephro, or definitive kidney, initiates its development in E23-24. The study demonstrated that the involution of mesonephro happened simultaneously with the metanephrogenic differentiation. In E45-46, the embryos already initiated the fetal phase, and the metanephro possess the filter units (nephrons), with its respective glomeruli, proximal and distal convoluted tubules, and the loop of Henle.

O presente estudo teve como objetivo descrever o desenvolvimento dos sistemas renais de bovinos durante o período embrionário compreendido entre 10 e 50 dias. Embriões bovinos coletados em frigorífico foram fotografados e medidos utilizando-se o método Crow-Rump (CR) para estimar a idade gestacional. Os embriões destinados à miscroscopia óptica foram fixados em solução de Bouin para a avaliação do desenvolvimento do sistema renal, assim como suas estruturas. Alguns embriões também foram fixados em Glutaraldeído 2,5% e destinados à microscopia eletrônica de transmissão para o estudo ultraestrutural das células do sistema renal. Embriões entre o 14° e o 15° dia de desenvolvimento (E14-15) não apresentaram pronefro, mas apresentaram mesonefro, assim como indícios morfológicos que indicam sua atividade funcional. O mesonefro apresentou, no interior de suas células tubulares, inúmeras mitocôndrias e interdigitações, indicando uma alta atividade de transporte iônico. O metanefro, ou rim definitivo, iniciou seu desenvolvimento em E23-24. Os achados emonstram que a involução do mesonefro acontece simultaneamente com a diferenciação metanefrogênica. Em E45-46, já iniciando a fase fetal, o metanefro possuiu unidades filtradoras (néfrons), com seus respectivos glomérulos, túbulos contorcidos proximais e distais e alça de Henle. Nessa fase, o rim ainda não apresenta lobação externa.

Morfologia e desenvolvimento ultraestrutural do sistema renal de embriões bovinos com idade gestacional entre 10 e 50 dias

The aim of this study was to describe the bovine renal system development, during the early embryonic period (10-50 days). Bovine embryos collected in abattoir were photographed and measured by Crow-Rump (CR) method to estimate the gestational age. The embryos destined to optical microscopy were fixed in Bouin solution for development evaluations of renal system, as well as its structures. Some embryos also were fixed in Glutaraldeheyde 2.5% and destined to transmission electron microscopy for ultrastructural study of renal system cells. In bovine embryos with gestational age of 14 to 15 days (E14-15) the presence of pronephro were not observed, however the mesonephro was found, as well as morphologic indications of it is functional activity. Mesonephro presented, in the interior of its tubular cells, innumerable mitochondrias and interdigitations, indicating high activity of ionic transportation. The metanephro, or definitive kidney, initiates its development in E23-24. The study demonstrated that the involution of mesonephro happened simultaneously with the metanephrogenic differentiation. In E45-46, the embryos already initiated the fetal phase, and the metanephro possess the filter units (nephrons), with its respective glomeruli, proximal and distal convoluted tubules, and the loop of Henle.

O presente estudo teve como objetivo descrever o desenvolvimento dos sistemas renais de bovinos durante o período embrionário compreendido entre 10 e 50 dias. Embriões bovinos coletados em frigorífico foram fotografados e medidos utilizando-se o método Crow-Rump (CR) para estimar a idade gestacional. Os embriões destinados à miscroscopia óptica foram fixados em solução de Bouin para a avaliação do desenvolvimento do sistema renal, assim como suas estruturas. Alguns embriões também foram fixados em Glutaraldeído 2,5% e destinados à microscopia eletrônica de transmissão para o estudo ultraestrutural das células do sistema renal. Embriões entre o 14° e o 15° dia de desenvolvimento (E14-15) não apresentaram pronefro, mas apresentaram mesonefro, assim como indícios morfológicos que indicam sua atividade funcional. O mesonefro apresentou, no interior de suas células tubulares, inúmeras mitocôndrias e interdigitações, indicando uma alta atividade de transporte iônico. O metanefro, ou rim definitivo, iniciou seu desenvolvimento em E23-24. Os achados emonstram que a involução do mesonefro acontece simultaneamente com a diferenciação metanefrogênica. Em E45-46, já iniciando a fase fetal, o metanefro possuiu unidades filtradoras (néfrons), com seus respectivos glomérulos, túbulos contorcidos proximais e distais e alça de Henle. Nessa fase, o rim ainda não apresenta lobação externa.

Morfologia e desenvolvimento ultraestrutural do sistema renal de embriões bovinos com idade gestacional entre 10 e 50 dias

The aim of this study was to describe the bovine renal system development, during the early embryonic period (10-50 days). Bovine embryos collected in abattoir were photographed and measured by Crow-Rump (CR) method to estimate the gestational age. The embryos destined to optical microscopy were fixed in Bouin solution for development evaluations of renal system, as well as its structures. Some embryos also were fixed in Glutaraldeheyde 2.5% and destined to transmission electron microscopy for ultrastructural study of renal system cells. In bovine embryos with gestational age of 14 to 15 days (E14-15) the presence of pronephro were not observed, however the mesonephro was found, as well as morphologic indications of it is functional activity. Mesonephro presented, in the interior of its tubular cells, innumerable mitochondrias and interdigitations, indicating high activity of ionic transportation. The metanephro, or definitive kidney, initiates its development in E23-24. The study demonstrated that the involution of mesonephro happened simultaneously with the metanephrogenic differentiation. In E45-46, the embryos already initiated the fetal phase, and the metanephro possess the filter units (nephrons), with its respective glomeruli, proximal and distal convoluted tubules, and the loop of Henle.

O presente estudo teve como objetivo descrever o desenvolvimento dos sistemas renais de bovinos durante o período embrionário compreendido entre 10 e 50 dias. Embriões bovinos coletados em frigorífico foram fotografados e medidos utilizando-se o método Crow-Rump (CR) para estimar a idade gestacional. Os embriões destinados à miscroscopia óptica foram fixados em solução de Bouin para a avaliação do desenvolvimento do sistema renal, assim como suas estruturas. Alguns embriões também foram fixados em Glutaraldeído 2,5% e destinados à microscopia eletrônica de transmissão para o estudo ultraestrutural das células do sistema renal. Embriões entre o 14° e o 15° dia de desenvolvimento (E14-15) não apresentaram pronefro, mas apresentaram mesonefro, assim como indícios morfológicos que indicam sua atividade funcional. O mesonefro apresentou, no interior de suas células tubulares, inúmeras mitocôndrias e interdigitações, indicando uma alta atividade de transporte iônico. O metanefro, ou rim definitivo, iniciou seu desenvolvimento em E23-24. Os achados emonstram que a involução do mesonefro acontece simultaneamente com a diferenciação metanefrogênica. Em E45-46, já iniciando a fase fetal, o metanefro possuiu unidades filtradoras (néfrons), com seus respectivos glomérulos, túbulos contorcidos proximais e distais e alça de Henle. Nessa fase, o rim ainda não apresenta lobação externa.