Optimization of oxalic acid production by fungi for biotechnological solubilization of rock phosphate

This study describes a biotechnological strategy for producing and applying oxalic acid to solubilize phosphorus (P) from rock phosphate (RP). We evaluated six fungal species (Aspergillus niger FS1, Penicillium islandicum FS41, Pleurotus ostreatus PO1, Rhizoctonia solani Rhiz555, Sclerotium rolfsii Sr25, and Sclerotinia sclerotiorum Scl134) and three culture media (potato dextrose broth, Tsao and Strasser media) to maximize oxalic acid production. Among the fungal isolates tested and culture media, S. rolfsii Sr25 and Tsao medium showed efficient oxalic acid production. Tsao medium was optimized following a response surface methodology after initial screening of factors affecting RP solubilization. The optimized concentrations were 1 g L-1 NaNO3, 100 g L-1 glucose, 2 g L-1 KH2PO4, 4.5 g L-1 yeast extract, and 25 mg L-1 MgSO4·7H2O used for 20 days of incubation. Under these conditions, 71 mmol L-1 oxalic acid was obtained, representing a three-fold increase over production under non-optimized conditions (20 mmol L-1). Under optimized conditions, oxalic acid produced by S. rolfsii Sr25 reacted with low-solubility RP and solubilized 100 % of the P contained in ore. Thus, using S. rolfsii Sr25 to produce oxalic acid seems a promising biotechnological alternative for P solubilization from RP.(AU)

Solid-state fermentation with orange waste: optimization of Laccase production from Pleurotus pulmonarius CCB-20 and decolorization of synthetic dyes

Laccases are oxidoreductase enzymes that have the ability to oxidize phenolic substrates. Its biotechnological potential has been greatly explored in many areas as biotechnology industry, bioremediation of dyes, food industry and environmental microbiology. The aim of this study was maximize the laccase production by Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quélet in solid-state fermentation (SSF) using orange waste as substrate. After optimization the capability of the crude laccase to decolorize dyes was analyzed. The fermentation medium in the solid-state was optimized by applying a factorial design. After statistics optimization, laccase activity increased two times. The laccase activity appears to be correlated with the ability of crude extract to decolorize some industrial dyes. The optimized laccase was characterized with respect to optimum pH, influence of temperature and salts. Our results demonstrate that P. pulmonarius was an efficient producer of an important industrial enzyme, laccase, in a cheap solid-state system using orange waste as substrate.

Solid-state fermentation with orange waste: optimization of Laccase production from Pleurotus pulmonarius CCB-20 and decolorization of synthetic dyes

Laccases are oxidoreductase enzymes that have the ability to oxidize phenolic substrates. Its biotechnological potential has been greatly explored in many areas as biotechnology industry, bioremediation of dyes, food industry and environmental microbiology. The aim of this study was maximize the laccase production by Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quélet in solid-state fermentation (SSF) using orange waste as substrate. After optimization the capability of the crude laccase to decolorize dyes was analyzed. The fermentation medium in the solid-state was optimized by applying a factorial design. After statistics optimization, laccase activity increased two times. The laccase activity appears to be correlated with the ability of crude extract to decolorize some industrial dyes. The optimized laccase was characterized with respect to optimum pH, influence of temperature and salts. Our results demonstrate that P. pulmonarius was an efficient producer of an important industrial enzyme, laccase, in a cheap solid-state system using orange waste as substrate.(AU)

The influence of Tween 80 on laccase production by Pleurotus sajor-caju and the efficiency of crude enzyme broth in the removal of bisphenol-A / Influência do Tween 80 na produção de lacases de Pleurotus sajor-caju e eficiência do caldo enzimático bruto na remoção de bisfenol-A

Bisphenol-A is currently considered an environmental pollutant, capable of interfering in the endocrine system of organisms and causing alterations in its development and reproductive system. An alternative method to the chemical treatment of this pollutant has been the use of oxidative enzymes, especially laccases produced by fungi. In order to reduce production costs, agro-industrial waste can be used in the culture medium composition. Nonionic surfactants, which are only slightly toxic to biological membranes, can be applied, as well as Tween 80, to facilitate the excretion of these enzymes into the culture medium. The objectives of this work were: a) characterize the immersion water of banana straw used in the formulation of the culture medium; b) evaluate laccase production by Pleurotus sajor-caju in culture medium with and without addition of Tween 80, through shaken flasks; c) evaluate the efficiency of the crude enzyme broth in degrading bisphenol-A. The shaken flasks were incubated at 30°C for 12 days. The immersion water had a C:N ratio of 13.8, ash percentage of 28.6%, and pH close to neutrality. The addition of Tween 80 on the culture medium (7.5%, m/v) yielded laccase activity and productivity values equal to 3,016.47 U L-1 and 502.7 U L-1 day-1, respectively. These values were 50 and 33.5 times higher than those obtained in the culture medium without addition of Tween 80 for laccase activity and productivity, respectively. The crude enzyme broth degraded 100% of bisphenol-A after 48 hours, regardless of concentration (500, 750 and 1,000 mg L-1).(AU)

O bisfenol-A é considerado um poluente ambiental capaz de interferir no sistema endócrino dos organismos, ocasionando alterações em seu desenvolvimento e sistema de reprodução. Um método alternativo ao tratamento químico desse tipo de poluente tem sido a utilização de enzimas oxidativas, especialmente as lacases, produzidas por fungos. A fim de diminuir custos de produção, resíduos agroindustriais podem compor o meio de cultivo. Assim, surfactantes não iônicos e pouco tóxicos para as membranas biológicas, como o Tween 80, podem ser utilizados para facilitar a excreção dessas enzimas para o meio de cultivo. Os objetivos deste trabalho foram: caracterizar quimicamente o resíduo água de imersão de palha de bananeira, usado na formulação do meio de cultivo; avaliar a produção de lacase por Pleurotus sajor-caju em meio de cultivo líquido (frascos Erlenmeyer) com e sem adição de Tween 80; e avaliar a eficiência do caldo enzimático bruto em degradar bisfenol-A. Os frascos foram incubados a 30°C, por 12 dias. A água de imersão apresentou relação C:N 13,8, percentual de cinzas 28,6% e pH próximo da neutralidade. O cultivo adicionado de Tween 80 (7,5%, m/v) propiciou valores de atividade e produtividade em lacase iguais a 3.016,47 U L-1 e 502,7 U L-1 dia-1, respectivamente. Esses valores são 50 e 33,5 vezes maiores que os obtidos no cultivo sem adição de Tween 80, para atividade e produtividade em lacase, respectivamente. O caldo enzimático bruto degradou 100% do bisfenol-A após 48 horas, independentemente da concentração (500, 750 e 1.000 mg L-1).(AU)

The influence of Tween 80 on laccase production by Pleurotus sajor-caju and the efficiency of crude enzyme broth in the removal of bisphenol-A / Influência do Tween 80 na produção de lacases de Pleurotus sajor-caju e eficiência do caldo enzimático bruto na remoção de bisfenol-A

Bisphenol-A is currently considered an environmental pollutant, capable of interfering in the endocrine system of organisms and causing alterations in its development and reproductive system. An alternative method to the chemical treatment of this pollutant has been the use of oxidative enzymes, especially laccases produced by fungi. In order to reduce production costs, agro-industrial waste can be used in the culture medium composition. Nonionic surfactants, which are only slightly toxic to biological membranes, can be applied, as well as Tween 80, to facilitate the excretion of these enzymes into the culture medium. The objectives of this work were: a) characterize the immersion water of banana straw used in the formulation of the culture medium; b) evaluate laccase production by Pleurotus sajor-caju in culture medium with and without addition of Tween 80, through shaken flasks; c) evaluate the efficiency of the crude enzyme broth in degrading bisphenol-A. The shaken flasks were incubated at 30°C for 12 days. The immersion water had a C:N ratio of 13.8, ash percentage of 28.6%, and pH close to neutrality. The addition of Tween 80 on the culture medium (7.5%, m/v) yielded laccase activity and productivity values equal to 3,016.47 U L-1 and 502.7 U L-1 day-1, respectively. These values were 50 and 33.5 times higher than those obtained in the culture medium without addition of Tween 80 for laccase activity and productivity, respectively. The crude enzyme broth degraded 100% of bisphenol-A after 48 hours, regardless of concentration (500, 750 and 1,000 mg L-1).(AU)

O bisfenol-A é considerado um poluente ambiental capaz de interferir no sistema endócrino dos organismos, ocasionando alterações em seu desenvolvimento e sistema de reprodução. Um método alternativo ao tratamento químico desse tipo de poluente tem sido a utilização de enzimas oxidativas, especialmente as lacases, produzidas por fungos. A fim de diminuir custos de produção, resíduos agroindustriais podem compor o meio de cultivo. Assim, surfactantes não iônicos e pouco tóxicos para as membranas biológicas, como o Tween 80, podem ser utilizados para facilitar a excreção dessas enzimas para o meio de cultivo. Os objetivos deste trabalho foram: caracterizar quimicamente o resíduo água de imersão de palha de bananeira, usado na formulação do meio de cultivo; avaliar a produção de lacase por Pleurotus sajor-caju em meio de cultivo líquido (frascos Erlenmeyer) com e sem adição de Tween 80; e avaliar a eficiência do caldo enzimático bruto em degradar bisfenol-A. Os frascos foram incubados a 30°C, por 12 dias. A água de imersão apresentou relação C:N 13,8, percentual de cinzas 28,6% e pH próximo da neutralidade. O cultivo adicionado de Tween 80 (7,5%, m/v) propiciou valores de atividade e produtividade em lacase iguais a 3.016,47 U L-1 e 502,7 U L-1 dia-1, respectivamente. Esses valores são 50 e 33,5 vezes maiores que os obtidos no cultivo sem adição de Tween 80, para atividade e produtividade em lacase, respectivamente. O caldo enzimático bruto degradou 100% do bisfenol-A após 48 horas, independentemente da concentração (500, 750 e 1.000 mg L-1).(AU)

Effects of Lignocellulolytic enzymes produced by Pleurotus ostreatus on the nutritive value of whole-plant corn silage

aguardando

Three experiments were carried out to examine the effect of lignocellulolytic enzymes on the nutritive value of whole-plant corn silage (WPCS). In experiment 1, we examined the effect of spent substrate from Pleurotus ostreatus cultivation (SSPO) on the chemical composition, antioxidant capacity, lignin monomers, and in vitro 5 digestibility of WPCS. In experiment 2, we evaluated the performance of lactating goats fed WPCS treated with different levels of SSPO. In experiment 3, we verified the activity of an enzymatic complex at different pH and the effects of adding increasing levels of that enzymatic complex produced by Pleurotus ostreatus on the fermentative profile, chemical composition, and ruminal digestibility along of the days on the onset of fermentation of WPCS. In experiment 1, four levels of lignocellulolytic enzymes from spent substrate of Pleurotus ostreatus were tested in a completely randomized design: 0, 10, 20, and 30 mg of lignocellulosic enzymes/kg of fresh matter, and four replicates per treatment (vacuum-sealed bags). The bags were opened 60 d after ensiling. The NDF, ADF, lignin, and cellulose concentration decreased quadratically. At the nadir point, SSPO decreased NDF by 14.1%, ADF by 19.5%, lignin by 9.07%, and cellulose by 22.1% compared to the untreated silage. Therefore, SSPO led to a quadratic increase in IVDMD of WPCS (+10.3 % at vertex). In experiment 2, WPCS treated with three enzyme levels (0, 10, or 30 mg/kg fresh matter, chosen based on experiment 1) were fed to lactating goats as part of TMR. Nine lactating Saanen goats (62.68±7.62 kg BW; 44±8 days in milk; 2.91±0.81 kg of milk/day, mean±SD) were assigned to three 3 × 3 Latin squares. Intake and digestibility of dry matter and nutrients, microbial protein syntheses, and milk production and composition were examined. The SSPO increase the in vivo total-tract ADF digestibility quadratically. Additionally, the concentration of polyphenols in milk increased linearly with the addition of SSPO in WPCS; however, no other differences were detected among treatments. In experiment 3, the lignocellulolytic enzymatic complex was obtained through in vitro cultivation of Pleurotus ostreatus, and the activities of laccase, lignin peroxidase, manganese peroxidase, endo and exoglucanase, xylanase, and mannanase were determined at pH 3, 29 4, 5, and 6. Following, five different enzymatic complex levels were tested in a completely randomized block design: 0; 9; 18; 27, and 36 mg of lignocellulosic enzymes/kg of fresh matter (FM) of whole-plant corn, with four replicates per treatment (vacuum-sealed bags). The bags were opened after 1, 2, 3, and 7 d of ensiling to evaluate the onset of fermentation and after 30 d of storage to evaluate the fermentation, chemical composition, and in situ digestibility of WPCS. Laccase showed highest activity at pH 5 (P < 0.01), whereas manganese peroxidase and lignin peroxidase had a higher activity at pH 4 (P < 0.01;< 0.01, respectively). There was no interaction between the enzymatic complex and days of fermentation (P > 0.11). The concentration of WSC decreased quadratically at the onset of fermentation (P = 0.02) due to its consumption that led to a quadratic increase of lactic acid (P = 0.01) and a linear increase of acetic acid (P = 0.02). As a result of increasing those organic acid concentrations, pH decreased quadratically (P = 0.01). Lignin concentration decreased linearly (P = 0.04) with the enzymatic complex at 30 d of storage. The collective interpretation of these results leads to the conclusion that 10 mg of lignocellulolytic enzymes from SSPO per kg of FM of WPC presented the best effect in silage production due to more evident reduction in NDF, ADF, and lignin concentration and increased ADF digestibility of lactation goats

Inclusão do substrato de shimeji-preto na cinética de fermentação in vitro do feno de Brachiaria brizantha / Effect of inclusion of oyster mushroom substrate on the in vitro fermentation kinetics of Brachiaria brizantha hay

O objetivo desse trabalho foi estudar a inclusão do substrato exaurido de Pleurotus ostreatus na fermentação in vitro de dietas a base de feno de Brachiaria brizantha. O experimento foi realizado utilizando a técnica de produção de gases semi-automática, e o inóculo ruminal foi colhido de três bovinos fistulados mantidos em pasto de Brachiaria brizantha. Foi utilizado feno de Brachiaria brizantha e substrato exaurido da produção de Pleurotus para composição das dietas: SE (100% substrato exaurido), FB (100% feno de Brachiaria brizantha), SE5 (5% SE + 95% FB), SE20 (20% SE + 80%FB) e SE30 (30% SE + 70% FB). O experimento foi conduzido em fatorial 5x3 com cinco tratamentos e três inóculos ruminal. A cinética de degradação da matéria seca foi determinada após 96 horas de fermentação [D (96h)]. Não houve diferenças significativas para o volume acumulado de gases (A) para as dietas FB (262,6 mL/g MS), SE5 (284,3 mL/g MS), SE20 (256,6 mL/g MS) e SE30 (261,7 mL/g MS), indicando que a inclusão do substrato não afetou a fermentação do feno. A dieta SE apresentou menor volume de gás e menor degradabilidade com valores de 165,9 mL e 52%, respectivamente, indicando menor valor nutricional desse substrato em relação ao feno de Brachiaria brizantha, provavelmente pela ação de enzimas que degradam carboidratos estruturais presentes nos micélios do Pleurotus. A dieta SE apresentou menor tempo de colonização (L=2,6 h; P<0,05), o que pode ser atribuído a uma interação entre o micélio e o substrato, facilitando a sua colonização inicial. A inclusão do substrato exaurido não resultou em ganhos no crescimento e degradação microbiana em relação à dieta FB, entretanto parece ter favorecido a colonização inicial desse substrato. A utilização do SE não afeta negativamente a colonização, e a princípio pode ser utilizada como ingrediente em dietas de ruminantes...

The objective of this study was to evaluate the effect of inclusion of exhausted substrate of Pleurotus ostreatus on the in vitro fermentation of Brachiaria brizantha hay-based diets. The experiment was conducted using the semi-automated gas production technique. The ruminal inoculum was collected from three fistulated cattle kept on Brachiaria brizantha pasture. Brachiaria brizantha hay and exhausted substrate of Pleurotus production were used for composition of the diets: ES (100% exhausted substrate), BH (100% Brachiaria brizantha hay), ES5 (5% ES + 95% BH), ES20 (20% ES + 80% BH), and ES30 (30% ES + 70% BH). The experimental design was a 5x3 factorial scheme consisting of five treatments and three ruminal inocula. The degradation kinetics of dry matter (DM) was determined after 96 hours of fermentation [D (96h)]. No significant differences in the cumulative volume of gas (A) were observed between BH (262.6 mL/g DM), ES5 (284.3 mL/g MS), ES20 (256.6 mL/g MS) and ES30 (261.7 mL/g MS), indicating that inclusion of the substrate did not affect hay fermentation. A lower gas volume (165.9 mL) and lower degradability (52%) were observed for the ES diet, showing a lower nutritional value of this substrate compared to Brachiaria brizantha hay, probably due to the action of enzymes that degrade structural carbohydrates found in the mycelia of Pleurotus. The ES diet exhibited a shorter colonization time (L=2.6 h; P<0.05), a finding that may be attributed to the interaction between the mycelium and substrate, facilitating initial colonization. The inclusion of exhausted substrate did not increase microbial growth or degradation compared to the BH diet, but seems to have favored initial colonization of this substrate. The use of ES does not negatively affect colonization and may be used as an ingredient of ruminant diets...

Inclusão do substrato de shimeji-preto na cinética de fermentação in vitro do feno de Brachiaria brizantha / Effect of inclusion of oyster mushroom substrate on the in vitro fermentation kinetics of Brachiaria brizantha hay

O objetivo desse trabalho foi estudar a inclusão do substrato exaurido de Pleurotus ostreatus na fermentação in vitro de dietas a base de feno de Brachiaria brizantha. O experimento foi realizado utilizando a técnica de produção de gases semi-automática, e o inóculo ruminal foi colhido de três bovinos fistulados mantidos em pasto de Brachiaria brizantha. Foi utilizado feno de Brachiaria brizantha e substrato exaurido da produção de Pleurotus para composição das dietas: SE (100% substrato exaurido), FB (100% feno de Brachiaria brizantha), SE5 (5% SE + 95% FB), SE20 (20% SE + 80%FB) e SE30 (30% SE + 70% FB). O experimento foi conduzido em fatorial 5x3 com cinco tratamentos e três inóculos ruminal. A cinética de degradação da matéria seca foi determinada após 96 horas de fermentação [D (96h)]. Não houve diferenças significativas para o volume acumulado de gases (A) para as dietas FB (262,6 mL/g MS), SE5 (284,3 mL/g MS), SE20 (256,6 mL/g MS) e SE30 (261,7 mL/g MS), indicando que a inclusão do substrato não afetou a fermentação do feno. A dieta SE apresentou menor volume de gás e menor degradabilidade com valores de 165,9 mL e 52%, respectivamente, indicando menor valor nutricional desse substrato em relação ao feno de Brachiaria brizantha, provavelmente pela ação de enzimas que degradam carboidratos estruturais presentes nos micélios do Pleurotus. A dieta SE apresentou menor tempo de colonização (L=2,6 h; P<0,05), o que pode ser atribuído a uma interação entre o micélio e o substrato, facilitando a sua colonização inicial. A inclusão do substrato exaurido não resultou em ganhos no crescimento e degradação microbiana em relação à dieta FB, entretanto parece ter favorecido a colonização inicial desse substrato. A utilização do SE não afeta negativamente a colonização, e a princípio pode ser utilizada como ingrediente em dietas de ruminantes...(AU)

The objective of this study was to evaluate the effect of inclusion of exhausted substrate of Pleurotus ostreatus on the in vitro fermentation of Brachiaria brizantha hay-based diets. The experiment was conducted using the semi-automated gas production technique. The ruminal inoculum was collected from three fistulated cattle kept on Brachiaria brizantha pasture. Brachiaria brizantha hay and exhausted substrate of Pleurotus production were used for composition of the diets: ES (100% exhausted substrate), BH (100% Brachiaria brizantha hay), ES5 (5% ES + 95% BH), ES20 (20% ES + 80% BH), and ES30 (30% ES + 70% BH). The experimental design was a 5x3 factorial scheme consisting of five treatments and three ruminal inocula. The degradation kinetics of dry matter (DM) was determined after 96 hours of fermentation [D (96h)]. No significant differences in the cumulative volume of gas (A) were observed between BH (262.6 mL/g DM), ES5 (284.3 mL/g MS), ES20 (256.6 mL/g MS) and ES30 (261.7 mL/g MS), indicating that inclusion of the substrate did not affect hay fermentation. A lower gas volume (165.9 mL) and lower degradability (52%) were observed for the ES diet, showing a lower nutritional value of this substrate compared to Brachiaria brizantha hay, probably due to the action of enzymes that degrade structural carbohydrates found in the mycelia of Pleurotus. The ES diet exhibited a shorter colonization time (L=2.6 h; P<0.05), a finding that may be attributed to the interaction between the mycelium and substrate, facilitating initial colonization. The inclusion of exhausted substrate did not increase microbial growth or degradation compared to the BH diet, but seems to have favored initial colonization of this substrate. The use of ES does not negatively affect colonization and may be used as an ingredient of ruminant diets...(AU)

Produção de lacase de fungos basidiomicetos por fermentação submersa com cascas de café / Laccase production from basidiomycetes by submerged fermentation with coffee hurks / Producción de lacase de hongos basidiomicetos por fermentación sumergida con cascaras de café

Cascas de café são fonte de carboidratos e nutrientes que podem ser bioconvertidos em produtos de interesse como enzimas. Lacases são cobre polifenol oxidases que oxidam compostos fenólicos, enquanto reduzem oxigênio molecular à água e; sua baixa especificidade a substratos permite sua aplicação em várias áreas como indústria têxtil, de alimentos e biorremediação. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a capacidade de produção de lacase de três linhagens de fungos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 e Pleurotus florida U6/10) por fermentação submersa com cascas de café e avaliar o uso de cobre como indutor dessa enzima. A casca de café mostrou ser um bom substrato para produção de lacases e das três linhagens testadas Pleurotus ostreatus (U6/9) foi a mais produtiva (22,5 U mL-1). A melhor fonte de nitrogênio para produção de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) foi o extrato de levedura na concentração de 9 g/L (20 U mL-1). A adição de 150 μM de CuSO4 resultou na indução significativa na produção de lacases nessa linhagem (21 U mL-1) no 12° dia de cultivo.

Coffee husks are a source of carbohydrates and nutrients that may be bioconverted into products of interest, such as enzymes. Laccases are copper polyphenol oxidases that oxidize phenolic compounds while reducing molecular oxygen to water. Laccase’s low specificity to substrates allows its application in several areas such as textiles, food processing and bioremediation industries. The aims of this study were to evaluate the potential to produce laccase from three strains of basidiomycetous fungi (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9, and Pleurotus florida U6/10) by submerged fermentation with coffee husks, and to evaluate the use of copper as an inducer of the enzyme. Coffee husk proved to be a good substrate for laccase production, with Pleurotus ostreatus (U6/9) being the most productive strain (22.5 U mL-1). The best source of nitrogen for laccase production of Pleurotus ostreatus (U6/9) was yeast extract 9 g/L (20 U mL-1). The addition of CuSO4 (150 μM) resulted in significant induction of laccase (21 U mL-1) on the 12th day of cultivation.

Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, tales como enzimas. Lacases son cobre polifenol oxidasas que oxidan compuestos fenólicos, mientras reducen el oxígeno molecular a el agua y; su baja especificidad a sustratos permite su aplicación en diversas áreas, como la industria textil, de alimentos y de biorremediación. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la capacidad de producción de lacase de tres linajes de hongos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 y Pleurotus florida U6/10) por fermentación sumergida con cáscaras de café, y evaluar el uso del cobre como inductor de esta enzima. La cáscara de café resultó ser un buen sustrato para la producción de lacases y, de las tres linajes probadas, Pleurotus ostreatus (U6/9) fue la más productiva (22,5 U mL-1). La mejor fuente de nitrógeno para la producción de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) fue el extracto de levadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, evadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de la producción de lacases en esa linaje (21 U mL-1), en el 12º día de cultivo.

Produção de lacase de fungos basidiomicetos por fermentação submersa com cascas de café / Laccase production from basidiomycetes by submerged fermentation with coffee hurks / Producción de lacase de hongos basidiomicetos por fermentación sumergida con cascaras de café

Cascas de café são fonte de carboidratos e nutrientes que podem ser bioconvertidos em produtos de interesse como enzimas. Lacases são cobre polifenol oxidases que oxidam compostos fenólicos, enquanto reduzem oxigênio molecular à água e; sua baixa especificidade a substratos permite sua aplicação em várias áreas como indústria têxtil, de alimentos e biorremediação. Os objetivos desse trabalho foram avaliar a capacidade de produção de lacase de três linhagens de fungos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 e Pleurotus florida U6/10) por fermentação submersa com cascas de café e avaliar o uso de cobre como indutor dessa enzima. A casca de café mostrou ser um bom substrato para produção de lacases e das três linhagens testadas Pleurotus ostreatus (U6/9) foi a mais produtiva (22,5 U mL-1). A melhor fonte de nitrogênio para produção de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) foi o extrato de levedura na concentração de 9 g/L (20 U mL-1). A adição de 150 μM de CuSO4 resultou na indução significativa na produção de lacases nessa linhagem (21 U mL-1) no 12° dia de cultivo.(AU)

Coffee husks are a source of carbohydrates and nutrients that may be bioconverted into products of interest, such as enzymes. Laccases are copper polyphenol oxidases that oxidize phenolic compounds while reducing molecular oxygen to water. Laccases low specificity to substrates allows its application in several areas such as textiles, food processing and bioremediation industries. The aims of this study were to evaluate the potential to produce laccase from three strains of basidiomycetous fungi (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9, and Pleurotus florida U6/10) by submerged fermentation with coffee husks, and to evaluate the use of copper as an inducer of the enzyme. Coffee husk proved to be a good substrate for laccase production, with Pleurotus ostreatus (U6/9) being the most productive strain (22.5 U mL-1). The best source of nitrogen for laccase production of Pleurotus ostreatus (U6/9) was yeast extract 9 g/L (20 U mL-1). The addition of CuSO4 (150 μM) resulted in significant induction of laccase (21 U mL-1) on the 12th day of cultivation.(AU)

Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, tales como enzimas. Lacases son cobre polifenol oxidasas que oxidan compuestos fenólicos, mientras reducen el oxígeno molecular a el agua y; su baja especificidad a sustratos permite su aplicación en diversas áreas, como la industria textil, de alimentos y de biorremediación. Los objetivos de este estudio fueron evaluar la capacidad de producción de lacase de tres linajes de hongos basidiomicetos (Lentinula edodes U6/1, Pleurotus ostreatus U6/9 y Pleurotus florida U6/10) por fermentación sumergida con cáscaras de café, y evaluar el uso del cobre como inductor de esta enzima. La cáscara de café resultó ser un buen sustrato para la producción de lacases y, de las tres linajes probadas, Pleurotus ostreatus (U6/9) fue la más productiva (22,5 U mL-1). La mejor fuente de nitrógeno para la producción de lacases de Pleurotus ostreatus (U6/9) fue el extracto de levadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de Cáscaras de café son fuente de carbohidratos y nutrientes que pueden ser bioconvertidos en productos de interés, evadura a una concentración de 9 g L-1 (20 U mL-1). La adición de 150 μM de CuSO4 resultó en la inducción significativa de la producción de lacases en esa linaje (21 U mL-1), en el 12º día de cultivo.(AU)

Lignocellulolytic enzyme production of Pleurotus ostreatus growth in agroindustrial wastes

The mushroom Pleurotus ostreatus has nutritional and medicinal characteristics that depend on the growth substrate. In nature, this fungus grows on dead wood, but it can be artificially cultivated on agricultural wastes (coffee husks, eucalyptus sawdust, corncobs and sugar cane bagasse). The degradation of agricultural wastes involves some enzyme complexes made up of oxidative (laccase, manganese peroxidase and lignin peroxidase) and hydrolytic enzymes (cellulases, xylanases and tanases). Understanding how these enzymes work will help to improve the productivity of mushroom cultures and decrease the potential pollution that can be caused by inadequate discharge of the agroindustrial residues. The objective of this work was to assess the activity of the lignocellulolytic enzymes produced by two P. ostreatus strains (PLO 2 and PLO 6). These strains were used to inoculate samples of coffee husks, eucalyptus sawdust or eucalyptus bark add with or without 20 % rice bran. Every five days after substrate inoculation, the enzyme activity and soluble protein concentration were evaluated. The maximum activity of oxidative enzymes was observed at day 10 after inoculation, and the activity of the hydrolytic enzymes increased during the entire period of the experiment. The results show that substrate composition and colonization time influenced the activity of the lignocellulolytic enzymes.(AU)

Desenvolvimento micelial in vitro de Pleurotus sp. em palha de arroz suplementada com serragem de couro / Mycelium growth of Pleurotus spp. in rice straw supplemented with leather sawdust

O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a produção de biomassa, crescimento micelial e a colonização do substrato palha de arroz por Pleurotus ostreatus e Pleurotus ostreatoroseus, sob o efeito da adição de serragem de couro curtida ao tanino vegetal. O experimento 1 constituiu-se na formulação de meios de cultura, à base de palha de arroz adicionada de serragem de couro, nas concentrações 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30%. Discos de micélio de P. ostreatus (BF24) e P. ostreatoroseus (POR01/06) foram transferidos para o centro de placas contendo meios previamente preparados. Eles foram incubados a 28º C. No segundo experimento, o substrato palha de arroz foi submetido as mesmas condições experimentais acima descritas. O substrato inoculado com as duas cepas foi acondicionado em tubos de ensaio e incubado a 28º C. A biomassa fúngica foi avaliada pela diferença de massa seca e massa úmida, enquanto que para o crescimento do micélio realizaram-se mensurações em períodos pré-determinados até a completa colonização do meio ou do substrato. Verificou-se que os tratamentos com adição de 5, 15 e 25% e 15% deste suplemento para P. ostreatus proporcionaram redução da biomassa e do crescimento micelial, respectivamente. Na fase de miceliação o acréscimo de 5% deste suplemento a palha de arroz apresentou efeito positivo para o desenvolvimento de P. ostreatus.

The objective of this study was to evaluate the biomass production, mycelial growth and colonization of rice-straw substrate by Pleurotus ostreatus and Pleurotus ostreatoroseus under the effect of adding vegetable-tanned leather sawdust. The first experiment consisted of the formulation of the culture media based on rice straw with the addition of leather sawdust at the concentrations of 0, 5, 10, 15, 20, 25 and 30%. Discs of mycelium of P. ostreatus (BF24) and P. ostreatoroseus (POR01/06) were transferred to the center of plates containing previously prepared media. They were incubated at 28° C. In the second experiment rice straw substrate underwent the same experimental conditions described above. The substrate inoculated with the two strains was placed in test tubes and incubated at 28° C. The fungal biomass was evaluated by the difference between wet weight and dry weight, while for the mycelial growth, measurements were performed at predetermined times until the complete colonization of the medium or substrate. For P. ostreatus, it was found that the treatments with the addition of 5, 15 and 25% and 15% of this supplement led to a lower biomass and mycelial growth, respectively. In the mycelial growth phase the addition of 5% of this supplement to the rice straw had a positive effect on the development of P. ostreatus.

DESENVOLVIMENTO MICELIAL IN VITRO DE PLEUROTUS SP. EM PALHA DE ARROZ SUPLEMENTADA COM SERRAGEM DE COURO

ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the biomass production, mycelial growth and colonization of rice-straw substrate by Pleurotus ostreatus and Pleurotus ostreatoroseus under the effect of adding vegetable-tanned leather sawdust. The first experiment consisted of the formulation of the culture media based on rice straw with the addition of leather sawdust at the concentrations of 0, 5, 10, 15, 20, 25 and 30%. Discs of mycelium of P. ostreatus (BF24) and P. ostreatoroseus (POR01/06) were transferred to the center of plates containing previously prepared media. They were incubated at 28° C. In the second experiment rice straw substrate underwent the same experimental conditions described above. The substrate inoculated with the two strains was placed in test tubes and incubated at 28° C. The fungal biomass was evaluated by the difference between wet weight and dry weight, while for the mycelial growth, measurements were performed at predetermined times until the complete colonization of the medium or substrate. For P. ostreatus, it was found that the treatments with the addition of 5, 15 and 25% and 15% of this supplement led to a lower biomass and mycelial growth, respectively. In the mycelial growth phase the addition of 5% of this supplement to the rice straw had a positive effect on the development of P. ostreatus.

RESUMO O presente trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a produção de biomassa, crescimento micelial e a colonização do substrato palha de arroz por Pleurotus ostreatus e Pleurotus ostreatoroseus, sob o efeito da adição de serragem de couro curtida ao tanino vegetal. O experimento 1 constituiu-se na formulação de meios de cultura, à base de palha de arroz adicionada de serragem de couro, nas concentrações 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30%. Discos de micélio de P. ostreatus (BF24) e P. ostreatoroseus (POR01/06) foram transferidos para o centro de placas contendo meios previamente preparados. Eles foram incubados a 28º C. No segundo experimento, o substrato palha de arroz foi submetido as mesmas condições experimentais acima descritas. O substrato inoculado com as duas cepas foi acondicionado em tubos de ensaio e incubado a 28º C. A biomassa fúngica foi avaliada pela diferença de massa seca e massa úmida, enquanto que para o crescimento do micélio realizaram-se mensurações em períodos pré-determinados até a completa colonização do meio ou do substrato. Verificou-se que os tratamentos com adição de 5, 15 e 25% e 15% deste suplemento para P. ostreatus proporcionaram redução da biomassa e do crescimento micelial, respectivamente. Na fase de miceliação o acréscimo de 5% deste suplemento a palha de arroz apresentou efeito positivo para o desenvolvimento de P. ostreatus.

Low carbon/nitrogen ratio increases laccase production from basidiomycetes in solid substrate cultivation

Basidiomycetes are laccase producers used for hydrolysis of lignocellulosic byproducts in fermentative processes and could be used on biofuel production or ruminant feeding. The objective of this study was to evaluate the effect of concentrations of non-protein nitrogen sources on laccase production and mycelial growth of Pleurotus ostreatus, Lentinula edodes and Agaricus blazei. The fungi were grown on soybean hulls to which urea (U), ammonium sulfate (AS) or mixture of AS:U (1:1) were added to achieve carbon/nitrogen (C/N) ratios of 5, 15, 20 or 30. The average longitudinal mycelial growth was measured and laccase activity was determined by the oxidation of 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid. Higher C/N ratios increased mycelial growth and decreased laccase production. The highest activities were obtained with a C/N ratio of 5. P. ostreatus, L. edodes and A. blazei produced more laccase when AS, AS:U and U, respectively, were added. In addition, C/N ratios lower than 30 induced laccase syntheses, inhibited mycelial growth and were a better condition for pre-hydrolysis of plant residues.

Basidiomicetos são produtores de lacases utilizadas na hidrólise de subprodutos lignocelulósicos em processos fermentativos e pode ser utilizado na produção de biocombustíveis ou na alimentação de ruminantes. Avaliou-se o efeito da adição de fontes e concentrações de nitrogênio não-protéico na produção de lacase e no crescimento micelial de Pleurotus ostreatus, Lentinula edodes e Agaricus blazei. Os fungos foram cultivados em cascas de soja com adição de uréia (U), sulfato de amônio (AS) ou AS:U (1:1) de forma a manter a relação carbono/ nitrogênio (C/N) de 5, 15, 20 ou 30. O crescimento micelial longitudinal médio foi medido, e a atividade da lacase foi determinada pela oxidação do ácido 2,2'-azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico. O crescimento micelial foi diretamente proporcional à relação C/N, enquanto a atividade de lacase foi inversamente proporcional. Os maiores valores de atividade foram obtidos para a relação C/N de 5. As melhores fontes de N para a produção de lacase por P. ostreatus, L. edodes e A. blazei foram, respectivamente, AS, AS:U e U. Relações C/N menores que 30 induziram a síntese de lacase e inibiram o crescimento micelial, proporcionando condições ideais para a pré-hidrólise de resíduos vegetais.

Low carbon/nitrogen ratio increases laccase production from basidiomycetes in solid substrate cultivation

Basidiomycetes are laccase producers used for hydrolysis of lignocellulosic byproducts in fermentative processes and could be used on biofuel production or ruminant feeding. The objective of this study was to evaluate the effect of concentrations of non-protein nitrogen sources on laccase production and mycelial growth of Pleurotus ostreatus, Lentinula edodes and Agaricus blazei. The fungi were grown on soybean hulls to which urea (U), ammonium sulfate (AS) or mixture of AS:U (1:1) were added to achieve carbon/nitrogen (C/N) ratios of 5, 15, 20 or 30. The average longitudinal mycelial growth was measured and laccase activity was determined by the oxidation of 2,2'-azino-bis-3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid. Higher C/N ratios increased mycelial growth and decreased laccase production. The highest activities were obtained with a C/N ratio of 5. P. ostreatus, L. edodes and A. blazei produced more laccase when AS, AS:U and U, respectively, were added. In addition, C/N ratios lower than 30 induced laccase syntheses, inhibited mycelial growth and were a better condition for pre-hydrolysis of plant residues.

Basidiomicetos são produtores de lacases utilizadas na hidrólise de subprodutos lignocelulósicos em processos fermentativos e pode ser utilizado na produção de biocombustíveis ou na alimentação de ruminantes. Avaliou-se o efeito da adição de fontes e concentrações de nitrogênio não-protéico na produção de lacase e no crescimento micelial de Pleurotus ostreatus, Lentinula edodes e Agaricus blazei. Os fungos foram cultivados em cascas de soja com adição de uréia (U), sulfato de amônio (AS) ou AS:U (1:1) de forma a manter a relação carbono/ nitrogênio (C/N) de 5, 15, 20 ou 30. O crescimento micelial longitudinal médio foi medido, e a atividade da lacase foi determinada pela oxidação do ácido 2,2'-azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6-sulfônico. O crescimento micelial foi diretamente proporcional à relação C/N, enquanto a atividade de lacase foi inversamente proporcional. Os maiores valores de atividade foram obtidos para a relação C/N de 5. As melhores fontes de N para a produção de lacase por P. ostreatus, L. edodes e A. blazei foram, respectivamente, AS, AS:U e U. Relações C/N menores que 30 induziram a síntese de lacase e inibiram o crescimento micelial, proporcionando condições ideais para a pré-hidrólise de resíduos vegetais.

Análise química e sensorial de pleurotus ostreatus cultivado em casca de coco suplementada com farelo de trigo e/ou de arroz

ABSTRACT An assay on cultivatedmushrooms (Pleurotus ostreatus) was carried out on coconut bark ground with 0, 20 and 40% supplementation of rice and/or wheat bran. The samples obtained from the crops were frozen and dehydrated, and submitted to chemical and sensorial analysis. Protein levels ranged from 8.33 to 19.98%. Ashes ranged from 5.5 to 9.7% and lipid content was 0.23 to 4.4%. The average iron content was 15.53mg/100 g, and ascorbic acid ranged from 24.28 to 27.61 mg/ 100 g. The chemical composition was influenced by the supplementation and by the isolates tested. The acceptance of the mushrooms in regard to flavor and appearance was influenced by the type of substratum and the isolates tested.

RESUMO Foi realizado um ensaio com o cogumelo comestível (Pleurotus ostreatus) cultivado em casca de coco moída com suplementação de 0, 20 e 40% de farelo de arroz e/ou de trigo. As amostras provenientes do cultivo foram congeladas, desidratadas e analisadas quanto à composição química e sensorial. O teor de proteína variou entre 8,33 e 19,98%. O teor de cinzas ficou entre 5,5 e 9,7% e de lipídeos entre 0,23 e 4,4%. O teor médio de ferro foi de 15,53 mg/100 g e de ácido ascórbico variou entre 24,28 e 27,61 mg/100 g. A composição química foi influenciada pela suplementação e pelos isolados testados. A aceitação dos cogumelos quanto ao sabor e aparência foi influenciada pelo tipo de substrato e pelos isolados testados.

Utilização do composto exaurido de Pleurotus sajor caju em rações de frangos de corte e seus efeitos no desempenho dessas aves / Utilization of the spent substrate of Pleurotus sajor caju mushroom in broiler chicks ration and the effect on broiler chicken performance

Avaliou-se a adição dietética de um composto exaurido da produção do cogumelo Pleurotus sajor caju sobre o desempenho de frangos de corte nos períodos de um a 21, 22 a 38 e um a 38 dias de idade. Foram utilizados 500 pintos de um dia Ross-308, machos, em delineamento inteiramente casualizado, com cinco tratamentos, obtidos pelos níveis do composto na ração (0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%) com quatro repetições de 20 aves cada. Foram avaliados ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, rendimento de carcaça, gordura abdominal e altura das microvilosidades do intestino. A adição do composto não influenciou no consumo da ração e na conversão alimentar. Para o ganho de peso houve efeito positivo somente na fase inicial (um a 21 dias), sendo o valor máximo obtido com a adição de 0,67% do composto. A adição do composto não alterou o rendimento de carcaça e gordura abdominal, porém, alterou a altura das microvilosidades do intestino. A adição de composto exaurido da produção do fungo Pleurotus sajor caju, na concentração de 0,67%, melhora o ganho de peso dos frangos nos primeiros 21 dias de idade.(AU)

This research evaluated the effect of the addition of a spent mushroom substrate (SMS) Pleurotus sajor caju at different levels on the performance of broiler chicks from 1 to 21, 22 to 38 and 1 to 38 days of age. Five hundred one-day-old Ross-308 chicks were utilized, allocated in a completely randomized design, with five treatments obtained by increased levels of compost on ration (0; 0.5; 1.0; 1.5 and 2.0%), with four replicates of 20 birds per experimental unit. The intake, weight gain, feed conversion, carcass yield, abdominal fat and villus height were evaluated. No effect was observed on intake and feed conversion when the compost was included in the feeding. A positive effect was observed for weight gain from 1 to 21 days of age, with maximum value of 0.67% of SMS, but its addition did not modify the carcass yield and abdominal fat, but modified the villus height. The inclusion of the spent substrate of Pleurotus sajor caju mushroom up to 0.67% improves the weight gain of broiler chicks in the first 21 days of age.(AU)

Utilização do composto exaurido de Pleurotus sajor caju em rações de frangos de corte e seus efeitos no desempenho dessas aves / Utilization of the spent substrate of Pleurotus sajor caju mushroom in broiler chicks ration and the effect on broiler chicken performance

Avaliou-se a adição dietética de um composto exaurido da produção do cogumelo Pleurotus sajor caju sobre o desempenho de frangos de corte nos períodos de um a 21, 22 a 38 e um a 38 dias de idade. Foram utilizados 500 pintos de um dia Ross-308, machos, em delineamento inteiramente casualizado, com cinco tratamentos, obtidos pelos níveis do composto na ração (0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%) com quatro repetições de 20 aves cada. Foram avaliados ganho de peso, consumo de ração, conversão alimentar, rendimento de carcaça, gordura abdominal e altura das microvilosidades do intestino. A adição do composto não influenciou no consumo da ração e na conversão alimentar. Para o ganho de peso houve efeito positivo somente na fase inicial (um a 21 dias), sendo o valor máximo obtido com a adição de 0,67% do composto. A adição do composto não alterou o rendimento de carcaça e gordura abdominal, porém, alterou a altura das microvilosidades do intestino. A adição de composto exaurido da produção do fungo Pleurotus sajor caju, na concentração de 0,67%, melhora o ganho de peso dos frangos nos primeiros 21 dias de idade.

This research evaluated the effect of the addition of a spent mushroom substrate (SMS) Pleurotus sajor caju at different levels on the performance of broiler chicks from 1 to 21, 22 to 38 and 1 to 38 days of age. Five hundred one-day-old Ross-308 chicks were utilized, allocated in a completely randomized design, with five treatments obtained by increased levels of compost on ration (0; 0.5; 1.0; 1.5 and 2.0%), with four replicates of 20 birds per experimental unit. The intake, weight gain, feed conversion, carcass yield, abdominal fat and villus height were evaluated. No effect was observed on intake and feed conversion when the compost was included in the feeding. A positive effect was observed for weight gain from 1 to 21 days of age, with maximum value of 0.67% of SMS, but its addition did not modify the carcass yield and abdominal fat, but modified the villus height. The inclusion of the spent substrate of Pleurotus sajor caju mushroom up to 0.67% improves the weight gain of broiler chicks in the first 21 days of age.

Crescimento e cultivo de diferentes isolados de pleurotus ostreatus (jacq.: fr.) kummer em serragem da casca de coco

ABSTRACT This study evaluated precocity in primordia induction and harvest initiation periods as well as the biological efficiency of heat-resistant hybrid strains of Pleurotus ostreatus using coconut-husk sawdust supplemented with wheat and/or rice bran as an alternative substrate for axenic production of edible mushrooms. The growth rate, vigor, period of primordia formation, harvest initiation period and biological efficiency of three P. ostreatus strains were evaluated in response to the supplementation of the coconut-husk sawdust based substrate with 0, 5, 20, 30 and 40% of wheat and/or rice bran. The supplementation the coconut-husk sawdust with wheat and/or rice bran reduced the C:N rate in comparison with the control group, and increased growth rate, mycelial vigor, precocity of primordia formation and the harvest period, as well as biological efficiency in all strains tested. Among the tested strains, EF60 and POSB were the most precocious in their primordia induction and harvest periods, and were also more biologically efficient than strain DF39.

RESUMO O objetivo deste trabalho foi avaliar a precocidade na indução de primórdios e no período iniciação da colheita, como também a eficiência biológica de isolados híbridos de Pleurotus ostreatus resistentes ao calor, em serragem da casca de coco suplementada com farelo de arroz e/ou de trigo, como um substrato alternativo na produção de cogumelos comestíveis, em condições axênicas. A velocidade de crescimento, o vigor, o período de formação de primórdios e da colheita e a eficiência biológica de três isolados de P. ostreatus foram avaliados em resposta à suplementação do substrato à base de serragem da casca de coco com 0, 5, 20, 30 e 40% de farelo de trigo e/ou de arroz. É importante ressaltar que a suplementação do substrato à base de serragem da casca de coco com farelos reduziu a relação C:N em relação à testemunha e favoreceu a velocidade de crescimento e o vigor micelial, a precocidade na formação de primórdios, a colheita e a eficiência biológica em todos os isolados testados. Dentre os isolados testados, EF60 e POSB destacaram-se como os mais precoces na indução de primórdios e na colheita, como também apresentaram maior eficiência biológica em comparação com o isolado DF39.

Criopreservação do gênero Pleurotus a -20 °c e a -70 °c / Criopreservación del género Pleurotus a -20 ºc y -70 ºc / Criopreservation of genus Pleurotus at -20 °c and -70 °c

O desenvolvimento de técnicas de criopreservação utilizando temperaturas comerciais (-20 °C) na conservação de Basidiomicetos é uma vantagem técnica e econômica para a produção de biomassa e/ou biocompostos, porém geralmente associada a problemas de danos celulares. O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso de substratos para o crescimento do fungo associado a agentes crioprotetores na criopreservação a -20 ºC e a -70 ºC do gênero Pleurotus. O fungo, crescido em ágar-batata-dextrose ou em grãos de aveia, foi criopreservado a -20 °C e a -70 °C na presença dos crioprotetores glicerol, dimetilsulfóxido, glicose, sacarose, extrato de malte e polietilenoglicol. Foram discutidas as vantagens do substrato em associação com o crioprotetor, nas diversas temperaturas de crioproteção. Concluiu-se que o substrato utilizado para o crescimento do micélio influencia na viabilidade de recuperação do fungo criopreservado, em ambas as temperaturas, sendo que grãos de aveia promovem melhor recuperação do fungo e melhor vigor micelial. Os resultados sugerem uma simplificação técnica e redução de custos de manutenção de linhagens de Basidiomicetos.(AU)

The development of cryopreservation techniques using commercial temperatures (-20 °C) to preserve Basidiomycetes is an economical advantage for biomass and/or biocompound production; however, it is usually associated to cellular damages. The objective of this work was to evaluate the use of substrates for the fungus growth associated to cryoprotectants for the cryopreservation of Genus Pleurotus at -20ºC and -70ºC. The fungus, grown in either potato dextrose agar or oat grains, was cryopreserved at -20 °C or -70 °C with glycerol, dimethyl sulfoxide, glucose, sucrose, malt extract and polyethyleneglycol. The advantages of the substrate associated with the cryoprotectant at different cryopreservation temperatures were discussed. It was concluded that the substrate used for the mycelial growth positively influences the viability of the recovery of the cryopreserved fungus on both temperatures oat grains promote better recovery and mycelial vigor. Those results suggest technical simplification and reduction of maintenance costs of culture collections of Basidiomycetes.(AU)

El desarrollo de técnicas de criopreservación utilizando temperaturas comerciales (-20ºC) en la conservación de Basidiomicetos es una ventaja técnica y económica para la producción de biomasa y/o biocompuestos, pero generalmente está asociada a problemas de daños celulares. El objetivo de esta investigación fue evaluar el uso de substratos para el crecimiento del hongo, asociado a agentes crioprotectores en la criopreservación a -20ºC y a -70ºC del género PleurotUs. Elhongo, crecido en agar-patata-dextrosa o en granos de avena, fue criopreservado a -20ºC y a -70ºC en la presencia de los crioprotectores glicerol, dimetilsulfóxido, glucosa, sacarosa, extracto de malte y polietilenoglicol. Fueron discutidas las ventajas del substrato en asociación con el crioprotector, en las diversas temperaturas de crioprotección. Se concluyó que el substrato utilizado para el crecimiento del micelio influencia en la viabilidad de recuperación del hongo criopreservado, en ambas las temperaturas, siendo que granos de avena promueven mejor recuperación del hongo y mejor vigor del micelio. Los resultados sugieren una simplificación técnica y reducción de costos de manutención de liñajes de Basidiomicetos.(AU)