Viability of Toxoplasma gondii in cattle semen cryopreserved with different concentrations of cryoprotectant / Viabilidade do Toxoplasma gondii em sêmen de bovino criopreservado em diferentes concentrações de crioprotetores

ABSTRACT: Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.

RESUMO: Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.

Natural association between bovine leukemia virus and reproductive infectious diseases

Background: Enzootic bovine leukosis (EBL) is a widespread infectious disease caused by the bovine leukemia virus (BLV), which results in immune system dysfunction. The resulting immunosuppression may lead to an increased prevalence of other diseases. Dairy cows infected have altered immune function associated with decreased milk production and shortened lifespan and decreased immune response to immunization. BLV infection, however, is often asymptomatic, so any connection between subclinical infection and common reproductive diseases remains unknown. This study aimed to describe the relationship between naturally occurring subclinical BLV and infectious reproductive diseases seroconversion in the field. Materials, Methods & Results: The diseases investigated included Bovine viral diarrhoea (BVD), Bovine alfaherpesvirus 1 (BoHV-1), Bovine gammaherpesvirus 4 (BoHV-4), Chlamydiosis, Leptospirosis, Brucellosis and Neosporosis in dairy cattle. Six hundred fifty-five sera samples from the northern and south-central regions of Uruguay, from asymptomatic female Holstein and Holstein crosses without a history of vaccination against reproductive diseases were processed using reference diagnostic methods (Seronautalization, ELISA, MAT, Rose Bengal Plate test). The seroprevalence of BLV was 20.0%. Seroprevalence of reproductive diseases BVD, BoHV-1 and BoHV-4 were 99.3%, 41.2% and 27.3% of the populations, respectively, and the total seroprevalence of Leptospirosis, bovine Neospora caninum and Chlamydiosis were 19.8%, 29.8% and 33.0% respectively. The results revealed positive associations between naturally contracted BLV and the presence of antibodies against BoHV-1 (P = 0.002), as well as between naturally contracted BLV and presence of antibodies against Leptospira spp. (P = 0.028). Discussion: BLV infection can impact innate and adaptive immune system cells and alter the proper functioning of uninfected cells. BLV infection may also induce changes in the complex balance of cytokine expression, cell proliferation, and programmed cell death in T- and B-lymphocytes, which is critical for immune competence and effective response to infectious challenges. The progression of BLV infection has a substantial effect on host defense mechanisms. Indeed, lowmagnitude serologic responses to a commercial foot-and-mouth disease vaccine and a J5 Escherichia coli vaccine have been observed. These results are supported by recent trial studies showing a reduced immune response to vaccination against BoHV-1 and Leptospira spp. in asymptomatic animals infected with BLV. These are 2 of the most prevalent infectious reproductive diseases in cattle worldwide, and our results provide evidence that a link between BLV and susceptibility to these diseases may exist. Although there is evidence of the co-occurrence of these diseases, it remains unknown whether there is a direct or indirect effect of BLV on infertility, embryonic loss, or abortion. Another possibility is that natural infection with these reproductive pathogens (BoHV-1, Leptospira, or others) promotes BLV expression, negatively affecting the farms where these pathogens are endemic. Considering the high seroprevalence of BLV in dairy herds in North and South America where the infection is endemic, it was explored BLV's role as an immunosuppressant by quantifying its co-occurrence with diseases that affect reproductive performance in breeding herds. Future work should clarify the role of BLV and the co-occurring pathogens in causing infertility or abortions.

Non-specific reactions caused by vaccination in agar gel immunodiffusion for diagnosis of equine infectious anemia / Reações inespecíficas provocadas por vacinação na imunodifusão em gel de ágar para diagnósticodaanemia infecciosa equina

Equine infectious anemia (EIA) is one of the most important diseases from the health and economic point of view for equidae breeding, as it does not have treatment and vaccines. The Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) instituted mandatory sanitary measures that include the official diagnosis by the agar gel immunodiffusion (AGID) test and sacrifice of seropositive animals to control this disease. Seventy-two seronegative equines, challenged with different vaccines, were used to verify the occurrence of non-specific reactions in the AGID techniques. Five serological controls were performed one week after vaccination, at seven-day intervals. The results indicated that the use of vaccines in equines in a period that precedes the performance of laboratory tests for the diagnosis of EIA does not induce seroconversion. However, 11.11% of the equines vaccinated against influenza, encephalomyelitis, equine rhinopneumonitis, and tetanus, and 15.38% of those vaccinated against leptospirosis had non-specific negative reactions to AGID. In this study, there was a non-specific line in the AGID for EIA described by Ordinance No. 84/1992 by MAPA but already mentioned in the Normative Instruction 55 of 26 November 2018.

Anemia Infecciosa Equina é uma das enfermidades mais importantes sob o ponto de vista sanitário e econômico para a equideocultura, por não possuir tratamento e vacinas. Para controle desta doença, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) instituiu medidas sanitárias obrigatórias em todo território nacional que incluem o diagnóstico e sacrifício dos animais soropositivos. Para verificar a ocorrência de reações inespecíficas na técnica de IDGA utilizou-se 72 equinos soronegativos, desafiados com diferentes vacinas. Uma semana após a vacinação, realizou-se cinco controles sorológicos, em intervalos de sete dias. Os resultados indicaram que o uso de vacinas em equinos em período que antecede a realização de exames laboratoriais para diagnóstico de AIE, não induz a soroconversão. Entretanto, 11,11% dos equinos vacinados contra influenza, encefalomielite, rinopneumonite equina e tétano, e 15,38% dos que foram vacinados contra leptospirose apresentaram reações negativas inespecíficas ao IDGA. Neste estudo, verificou-se uma linha inespecífica no IDGA para AIE.

Non-specific reactions caused by vaccination in agar gel immunodiffusion for diagnosis of equine infectious anemia / Reações inespecíficas provocadas por vacinação na imunodifusão em gel de ágar para diagnósticodaanemia infecciosa equina

Equine infectious anemia (EIA) is one of the most important diseases from the health and economic point of view for equidae breeding, as it does not have treatment and vaccines. The Brazilian Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) instituted mandatory sanitary measures that include the official diagnosis by the agar gel immunodiffusion (AGID) test and sacrifice of seropositive animals to control this disease. Seventy-two seronegative equines, challenged with different vaccines, were used to verify the occurrence of non-specific reactions in the AGID techniques. Five serological controls were performed one week after vaccination, at seven-day intervals. The results indicated that the use of vaccines in equines in a period that precedes the performance of laboratory tests for the diagnosis of EIA does not induce seroconversion. However, 11.11% of the equines vaccinated against influenza, encephalomyelitis, equine rhinopneumonitis, and tetanus, and 15.38% of those vaccinated against leptospirosis had non-specific negative reactions to AGID. In this study, there was a non-specific line in the AGID for EIA described by Ordinance No. 84/1992 by MAPA but already mentioned in the Normative Instruction 55 of 26 November 2018.(AU)

Anemia Infecciosa Equina é uma das enfermidades mais importantes sob o ponto de vista sanitário e econômico para a equideocultura, por não possuir tratamento e vacinas. Para controle desta doença, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) instituiu medidas sanitárias obrigatórias em todo território nacional que incluem o diagnóstico e sacrifício dos animais soropositivos. Para verificar a ocorrência de reações inespecíficas na técnica de IDGA utilizou-se 72 equinos soronegativos, desafiados com diferentes vacinas. Uma semana após a vacinação, realizou-se cinco controles sorológicos, em intervalos de sete dias. Os resultados indicaram que o uso de vacinas em equinos em período que antecede a realização de exames laboratoriais para diagnóstico de AIE, não induz a soroconversão. Entretanto, 11,11% dos equinos vacinados contra influenza, encefalomielite, rinopneumonite equina e tétano, e 15,38% dos que foram vacinados contra leptospirose apresentaram reações negativas inespecíficas ao IDGA. Neste estudo, verificou-se uma linha inespecífica no IDGA para AIE.(AU)

Study of metalloproteinases in the blood of goats experimentally infected with caprine encephalitis arthritis virus / Estudo de metaloproteinases no sangue de caprinos experimentalmente infectados pelo vírus da artrite encefalite caprina

Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].

A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].

Study of metalloproteinases in the blood of goats experimentally infected with caprine encephalitis arthritis virus / Estudo de metaloproteinases no sangue de caprinos experimentalmente infectados pelo vírus da artrite encefalite caprina

Caprine arthritis encephalitis is a lentiviral disease that leads to considerable losses in goat farming. In the acute phase of viral infection, though antiviral antibodies are produced by the host's immune system, they are not sufficient to be detected by serological tests. Acute infections begin with an incubation period, during which the viral genome replicates and host innate responses are initiated. Matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes that play an important role in the physiological and pathological processes of tissue remodeling. The present study aimed to evaluate the expression of MMPs and their activity in the blood serum of male goats experimentally infected with caprine arthritis encephalitis virus (CAEV). Five dairy male goats, aged 3-4 years, were intravenously inoculated with CAEV Cork strain (titer: 105-6 TCID50/mL) after being tested negative for CAEV thrice at consecutive intervals of 30 days using western blot analysis and nested-PCR. The study included three stages: S1 or pre-infection stage; S2 or seroconversion stage, corresponding to the occurrence of first seroconversion; and S3 or post-seroconversion stage, corresponding to 23 weeks after seroconversion. Zymography was performed for the samples using gelatin zymography gels (12.5%), which were subjected to electrophoresis at 170V, 1A, and 300W for 50-70 min. The density of MMP-2 was found to be lower at S1 (1456.20 pixels) than that at S2 and S3 (1943.80 and 2104.40 pixels, respectively) (P < 0.05); and the density of MMP-9 was found to be lower at S3 (133.60 pixels) than that at S1 and S2 (359.60 and 370.60 pixels, respectively). The density of proMMP-2 was low at S1 and S3 (130.45 and 145.20 pixels, respectively). On the other hand, the density of proMMP-9 was statistically different between S1 and S3 (89.22 vs. 415.60 pixels). Both proMMP-2 and proMMP-9 were absent at S2. Thus, MMP-2 and MMP9 exhibited opposite behaviors depending on the stage [...].(AU)

A encefalite por artrite caprina é uma doença lentiviral que leva a perdas consideráveis na criação de caprinos. Na fase aguda da infecção viral, embora os anticorpos antivirais sejam produzidos pelo sistema imunológico do hospedeiro, eles não são suficientes para serem detectados por testes sorológicos. As infecções agudas começam com um período de incubação, durante o qual o genoma viral se replica e as respostas inatas do hospedeiro são iniciadas. As metaloproteinases da matriz (MMPs) são enzimas que desempenham um papel importante nos processos fisiológicos e patológicos da remodelação tecidual. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão de MMPs e sua atividade no soro sanguíneo de reprodutores caprinos infectados experimentalmente pelo vírus da encefalite por artrite caprina(CAEV). Cinco machos caprinos, com idades entre 3-4 anos, foram inoculadas por via intravenosa com a cepa de CAEV Cork (título: 105-6 TCID50/mL) após serem testados negativamente para CAEV três vezes em intervalos consecutivos de 30 dias usando a análise de western blot e nested-PCR. O estudo incluiu três etapas: estágio S1 ou pré-infecção; S2 ou estágio de soroconversão, correspondente à ocorrência de primeira soroconversão; e S3 ou pós-soroconversão, correspondendo a 23 semanas após a soroconversão. A zimografia foi realizada para as amostras utilizando gel de gelatina (12,5%), que foram submetidos à eletroforese em 170V, 1A e 300W por 50-70 min. Verificou-se que a densidade de MMP-2era menor em S1 (1456,20 pixels) do que em S2 e S3 (1943,80 e 2104,40 pixels, respectivamente) (P <0,05); e a densidade de MMP-9 foi menor em S3 (133,60 pixels) do que em S1 e S2 (359,60 e 370,60 pixels, respectivamente). A densidade do proMMP-2 era baixa em S1 e S3 (130,45 e 145,20 pixels, respectivamente). Por outro lado, a densidade do proMMP-9 foi estatisticamente diferente entre S1 e S3(89,22 vs. 415,60 pixels). ProMMP-2 e proMMP-9 estavam ausentes no S2. Assim, MMP-2 e [...].(AU)

Vesicular stomatitis due to Indiana III (Alagoas/VSIV-3) is endemic in Brazilian state of Ceará / Estomatite vesicular causada pelo subtipo Indiana III (Alagoas/VVI-3) é endêmica no estado do Ceará, Brasil

Although Northeast Brazil is considered free of foot and mouth disease (FMD) with vaccination, several economic and health damages are still recorded due to the occurrence of vesicular syndromes that can be evaluated, such as Vesicular Stomatitis (VS). Therefore, this study aimed to confirm the occurrence of this disease and to determine the predominant viral serotype in suspected cases notified to the Official Veterinary Service of Ceará in 2013 performing official diagnostic protocols recommended by the World Organization for Animal Health. After clinical and epidemiological investigation in 46 farms, 32 probable cases of VS were considered with 78 sampled animals, 65 bovines and 13 equines. Serum (54) and epithelium (24) samples were collected. Six (14.6%) of 41 bovines and 8 (61.5%) of 13 equines described seroconversion to Indiana Vesiculovirus (IVV) by viral neutralization. The IVV was detected in 15 (62.5%) of 24 bovines epithelia using the indirect sandwich ELISA. Finally, positive epithelium underwent complement fixation test viral subtyping that identified the occurrence of Indiana III serotype (Alagoas/IVV-3) in 11 (73.3%) of 15 previous positives cattle. These were the first confirmed cases of VS in Ceará with an official diagnosis of IVV-3, confirming the endemic character attributed to the state through previous unofficial serological surveys. The presence of VS is a continuing diagnostic challenge, given the risk of possible incursions of FMD. Vesicular stomatitis is recurrent and is a worrying in this area free of foot and mouth disease with vaccination that bring damage to producers and a maximum alert to the Sanitary Defense Organs in the face of a probable case of vesicular syndrome.(AU)

Embora o Nordeste do Brasil seja considerado livre de Febre Aftosa (FA) com a vacinacao, ainda sao registrados varios prejuízos econômicos e sanitários devido a ocorrencia de sindromes vesiculares que precisam ser adequadamente avaliadas, como Estomatite Vesicular (EV). Portanto, este estudo teve como objetivo confirmar a ocorrencia desta doenca e determinar o sorotipo viral predominante em casos suspeitos notificados ao Servico Veterinario Oficial do Ceara no ano de 2013 realizando protocolos oficiais de diagnóstico recomendados pela Organizacao Mundial de Saude Animal. Após investigação clínica e epidemiológica em 46 propriedades rurais, foram considerados 32 casos prováveis de propriedade foco de EV com 78 animais amostrados, sendo 65 bovinos e 13 equídeos. Amostras de soro (54) e epitelio (24) foram coletadas. Analises sorologicas de 6 (14,6%) de 41 bovinos e 8 (61,5%) de 13 equídeos apresentaram soroconversao ao Vesiculovirus Indiana (VVI) por neutralizacao viral. O VVI foi detectado em 15 (62,5%) de 24 epitélios bovinos usando ELISA indireto sanduiche. Por fim, amostras de epitélio positivas foram submetidas a subtipagem viral por fixacao do complemento que identificou a ocorrência do sorotipo Indiana III (Alagoas/VVI-3) em 11 (73,3%) de bovinos. Estes foram os primeiros casos confirmados de EV no estado do Ceara com diagnostico oficial de VVI-3 confirmando o carater endemico atribuido ao Estado por meio de levantamentos sorologicos nao oficiais anteriores. A presença de EV é um desafio diagnóstico contínuo, dado o risco de possíveis incursões de FA. A Estomatite Vesicular é recorrente e preocupante nesta área livre de FA com vacinação pois, além de prejuízos aos produtores, traz um alerta máximo aos Órgãos de Defesa Sanitária diante de um caso provável de síndrome vesicular.(AU)

Seroconversion attributable to vaccination of heifers with the strain B-19 of Brucella abortus / Soroconversão atribuível à vacinação de bezerras com a cepa B-19 de Brucella abortus

Bovine brucellosis is transmitted by Brucella abortus and causes considerable economic losses to agribusiness. To determine the seroconversion rate attributable to vaccination of heifers with B. abortus strain B-19, 330 blood serum samples from 110 heifers aged three to eight months from five properties in the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil, were analyzed. On day zero (D-0), blood samples were collected, and 55 heifers from the intervention group were vaccinated. The remaining blood samples were collected on days seven (D-7), 14 (D-14), and 21 (D-21). The serum samples were analyzed using the buffered acidified plate antigen (BAPA) test. The rate of seroconversion attributable to vaccination was calculated by subtracting from the seroconversion incidence rate in the intervention group the incidence rate of the control group. On D-0, 100% (110/110) of the heifers were negative in the BAPA test (95% CI [96.70 - 100%], p < 0.05). On D-7, the seroconversion rate was 94.55% (52/55) (95% CI [84.88 - 98.84%], p < 0.05) in the intervention group and 0% (0/55) (95% CI [0.00 - 6.49%], p < 0.05) in the control group. On D-14, the rate was 98.18% (54/55) (95% CI [90.28 - 99.95%], p < 0.05) in the intervention group and 0% in the control group. Therefore, seroconversion attributable to vaccination varied from 78.39% (84.88 - 6.49%) to 92.35% (98.86 - 6.49%) on D-7 and from 83.79% (90.28 - 6.49%) to 93.46% (99.95 - 6.49%) on D-14, respectively. On D-21, the seroconversion rate in the 55 heifers from the control group vaccinated on D-14 was 100% (55/55) (95% CI [93.51 - 100%], p < 0.05) but was not significantly different (p > 0.05) from that of heifers from the intervention group vaccinated on D-7...(AU)

A brucelose bovina é causada por Brucella abortus gerando perdas econômicas para a cadeia do agronegócio. Objetivando determinar o coeficiente de soroconversão atribuível à vacinação de bezerras com a cepa B-19 de B. abortus, foram analisadas 330 amostras de soro sanguíneo de 110 bezerras com três a oito meses de idade, provenientes de cinco propriedades do município de Araguaína/TO. O dia zero (D-0) foi marcado pela coleta de sangue dos animais do experimento seguida da vacinação das 55 bezerras do grupo intervenção. As outras coletas de sangue foram realizadas nos dias 7 (D-7), 14 (D-14) e 21 (D-21). As amostras de soro foram submetidas ao teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). O coeficiente de soroconversão atribuível à vacinação foi calculado subtraindo-se da incidência de soroconversão no grupo intervenção àquela do grupo controle. No D-0, 100% (110/110) das bezerras amostradas não apresentaram reação ao teste do AAT (IC 95% [96,70% a 100%]; p < 0,05). No D-7 a soroconversão no grupo intervenção foi de 94,55% (52/55) (IC 95% [84,88% a 98,84%]; p < 0,05) e no grupo controle foi nula (0/55) (IC 95% [0,00% a 6,49%]; p < 0,05). No D-14 a soroconversão no grupo controle continuou sendo nula e a do grupo intervenção foi de 98,18% (54/55) (IC 95% [90,28% a 99,95%]; p<0,05). Assim, a soroconversão atribuível à vacinação pode variar entre 78,39% (84,88% - 6,49%) e 92,35% (98,86% - 6,49%), e entre 83,79% (90,28% - 6,49%) e 93,46% (99,95% - 6,49%) no D-7 e D-14, respectivamente. No D-21 a soroconversão nas 55 bezerras do grupo controle vacinadas no D-14 foi de 100% (55/55) (IC 95% [93,51% a 100%]; p < 0,05), mas sem diferença significativa (p>0,05) comparada à resposta no D-7 do grupo intervenção...(AU)

Seroconversion attributable to vaccination of heifers with the strain B-19 of Brucella abortus / Soroconversão atribuível à vacinação de bezerras com a cepa B-19 de Brucella abortus

Bovine brucellosis is transmitted by Brucella abortus and causes considerable economic losses to agribusiness. To determine the seroconversion rate attributable to vaccination of heifers with B. abortus strain B-19, 330 blood serum samples from 110 heifers aged three to eight months from five properties in the municipality of Araguaína, Tocantins, Brazil, were analyzed. On day zero (D-0), blood samples were collected, and 55 heifers from the intervention group were vaccinated. The remaining blood samples were collected on days seven (D-7), 14 (D-14), and 21 (D-21). The serum samples were analyzed using the buffered acidified plate antigen (BAPA) test. The rate of seroconversion attributable to vaccination was calculated by subtracting from the seroconversion incidence rate in the intervention group the incidence rate of the control group. On D-0, 100% (110/110) of the heifers were negative in the BAPA test (95% CI [96.70 - 100%], p 0.05) from that of heifers from the intervention group vaccinated on D-7...

A brucelose bovina é causada por Brucella abortus gerando perdas econômicas para a cadeia do agronegócio. Objetivando determinar o coeficiente de soroconversão atribuível à vacinação de bezerras com a cepa B-19 de B. abortus, foram analisadas 330 amostras de soro sanguíneo de 110 bezerras com três a oito meses de idade, provenientes de cinco propriedades do município de Araguaína/TO. O dia zero (D-0) foi marcado pela coleta de sangue dos animais do experimento seguida da vacinação das 55 bezerras do grupo intervenção. As outras coletas de sangue foram realizadas nos dias 7 (D-7), 14 (D-14) e 21 (D-21). As amostras de soro foram submetidas ao teste do antígeno acidificado tamponado (AAT). O coeficiente de soroconversão atribuível à vacinação foi calculado subtraindo-se da incidência de soroconversão no grupo intervenção àquela do grupo controle. No D-0, 100% (110/110) das bezerras amostradas não apresentaram reação ao teste do AAT (IC 95% [96,70% a 100%]; p 0,05) comparada à resposta no D-7 do grupo intervenção...

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers

ABSTRACT: Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%). For BVDV-1 Singer, it was also possible to detect Abs production in G1 (log2=5.8, 100% seroconversion rate) and G3 (log2=3.5, seroconversion rate = 60%), only after the booster dose (D42). Neutralizing Abs to BVDV-2 (SV253) were detected only in G3, observing 90% seroconversion associated with high titers of Abs (log2=6.7) after the 2nd dose of vaccine (D42). Heifers from G1 and G3 responded to BoHV-1 after the first dose (D21): G1 (log2=2.5, seroconversion rate = 67%) and G3 (log2=0.7, seroconversion rate = 80%). In D42, a higher magnitude response was observed in the heifers from G3 (log2=6.1, 100%) compared with G1 (log2=4.3, 100%) and G2 (log2=2.7, 60%). Based on the data obtained, it can be concluded that the commercial vaccine contained aluminum hydroxide (G1) was most effective in the induction of antibodies against BVDV-1. On the other hand, this vaccine did not induce the production of neutralizing Abs against BVDV-2. Only the heifers from G3 (Quil A, amphigen and cholesterol) generated neutralizing Abs against BVDV-2. The animals that received commercial vaccine containing oil emulsion as adjuvant (G2) had a weak/undetectable response against BVDV-1 and BVDV-2. The best protective response against BoHV-1 was observed in heifers vaccinated with the live modified thermosensitive virus.

RESUMO: A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%). Para o BVDV-1 Singer, somente após D42 foi observada a produção de Acs no G1 (log2=5,8; taxa de soroconversão de 100%) e G3 (log2=3,5; taxa de soroconversão = 60%). Os anticorpos contra BVDV-2 (SV253) foram detectados apenas nas novilhas do G3, observando-se taxa de soroconversão de 90% com altos títulos de anticorpos neutralizantes (log2=6,7) em D42. Novilhas G1 e G3 responderam ao BoHV-1 após a primeira dose (D21): G1 (log2=2,5; taxa de seroconversão = 67%) e G3 (log2=0,7; taxa de seroconversão = 80%). Em contrapartida, foi observada uma maior magnitude de resposta para as novilhas G3 (log2=6,1; 100%) em D42, em relação aos animais G1 (log2=4,3; 100%) e G2 (log2=2,7; 60%). Com base nos dados obtidos, foi possível concluir que a vacina composta por hidróxido de alumínio (G1) foi mais eficaz na produção de anticorpos contra o BVDV-1, em contrapartida esse produto não induziu anticorpos contra o BVDV-2. Apenas as novilhas do G3 (Quil A, amphigen e colesterol) geraram Acs neutralizantes contra o BVDV-2. Os animais que receberam a vacina em emulsão oleosa (G2) como adjuvante apresentaram uma resposta fraca/indetectável contra o BVDV-1 e BVDV-2. A melhor resposta protetiva contra o BoHV-1 foi observada nas novilhas vacinadas com a vacina viva modificada termosensível.

Neospora caninum: seroepidemiology of cows and dogs from milk farms of Cunha, São Paulo, Brazil / Neospora caninum: soroepidemiologia de vacas e cães de propriedades leiteiras de Cunha, São Paulo, Brasil

Neosporosis, a parasitic disease prevalent worldwide, is caused by the protozoan Neospora caninum, an obligatory intracellular parasite that can cause abortions and infertility in females, resulting in high economic losses. The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against N. caninum in dairy cattle, and the occurrence of antibodies in dogs from farms in the municipality of Cunha, São Paulo, Brazil. Additionally, eighteen months after the primary study, an analysis to determine the incidence, seroconversion, and occurrence of anti-N. caninum antibodies was conducted in cows. Sampling was carried out in two phases: during the first one, 400 dairy cattle and 50 dog blood samples from 40 farms were collected. During the second phase, blood samples were collected from 119 cows belonging to 16 farms visited 18 months before. Serum samples were analyzed by indirect immunofluorescence (IFI) with titers ≥ 100 for cattle and ≥ 50 for dogs considered as positives. The occurrence of antibodies against N. caninum was 15.0% (60/400) and 14.0% (7/50) for cattle and dogs, respectively. After 18 months, the observed incidence of antibodies was 7.4% (4/54), the conversion detected was 71.4% (seropositive to seronegative) and 7.4% (seronegative to seropositive animals), and the observed occurrence was 7.56% (9/119). The calculated odds ratio (OR) was significant (p < 0.05) for abortions, presence of dogs, and parturition stalls. However, protection factors were identified in 2- to 4-year-old dairy cattle and in the number of lactating cows ≤ 10 animals. Thus, the presence of antibodies against N. caninum in the studied suggested both vertical and horizontal transmission are occurring in cattle.

A neosporose é uma doença parasitária de distribuição mundial, cujo agente etiológico é o protozoário intracelular obrigatório Neospora caninum, o qual pode causar abortamentos e infertilidade em fêmeas, promovendo elevados prejuízos econômicos. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos contra N. caninum em bovinos de leite e a ocorrência de anticorpos em cães destas propriedades do município de Cunha, São Paulo, Brasil. Como segunda etapa, 18 meses após o primeiro estudo, foi conduzido outro estudo em vacas para determinar da incidência, soroconversão e ocorrência de anti-N. caninum. As colheitas foram realizadas em duas fases. Na primeira, participaram do estudo 400 bovinos de leite e 50 cães pertencentes a 40 propriedades rurais. Na segunda fase, foram efetuadas novas colheitas em 119 vacas de 16 propriedades já anteriormente visitadas na fase 1. Amostras de soro foram analisadas por imunofluorescência indireta (IFI) com títulos ≥100 para bovinos e ≥50 para cães foram considerados positivos. A ocorrência de anticorpos contra N. caninum foi de 15,0% (60/400) e 14,0% (7/50) para bovinos e cães respectivamente. Após 18 meses a incidência de anticorpos observada foi de 7,4% (4/54), a conversão detectada foi de 71,4% (animais soropositivos para soronegativos) e 7,4% (animais soronegativos para soropositivos) e a ocorrência observada foi de 7,56% (9/119). O “odds ratio” (OR) calculado revelou significância estatística (p < 0,05) para os seguintes fatores; abortamentos, propriedades com cães, e piquetes de parição. No entanto, fatores associados a proteção da positividade foram identificados entre; vacas entre 2 a 4 anos de idade, e o número de vacas em lactação ≤10 animais. Neste trabalho foi revelada a presença do N. caninum circulando na região estudada, sugerindo o papel de fêmeas bovinas e cães como transmissores do agente etiológico...

Neospora caninum: seroepidemiology of cows and dogs from milk farms of Cunha, São Paulo, Brazil / Neospora caninum: soroepidemiologia de vacas e cães de propriedades leiteiras de Cunha, São Paulo, Brasil

Neosporosis, a parasitic disease prevalent worldwide, is caused by the protozoan Neospora caninum, an obligatory intracellular parasite that can cause abortions and infertility in females, resulting in high economic losses. The aim of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against N. caninum in dairy cattle, and the occurrence of antibodies in dogs from farms in the municipality of Cunha, São Paulo, Brazil. Additionally, eighteen months after the primary study, an analysis to determine the incidence, seroconversion, and occurrence of anti-N. caninum antibodies was conducted in cows. Sampling was carried out in two phases: during the first one, 400 dairy cattle and 50 dog blood samples from 40 farms were collected. During the second phase, blood samples were collected from 119 cows belonging to 16 farms visited 18 months before. Serum samples were analyzed by indirect immunofluorescence (IFI) with titers ≥ 100 for cattle and ≥ 50 for dogs considered as positives. The occurrence of antibodies against N. caninum was 15.0% (60/400) and 14.0% (7/50) for cattle and dogs, respectively. After 18 months, the observed incidence of antibodies was 7.4% (4/54), the conversion detected was 71.4% (seropositive to seronegative) and 7.4% (seronegative to seropositive animals), and the observed occurrence was 7.56% (9/119). The calculated odds ratio (OR) was significant (p < 0.05) for abortions, presence of dogs, and parturition stalls. However, protection factors were identified in 2- to 4-year-old dairy cattle and in the number of lactating cows ≤ 10 animals. Thus, the presence of antibodies against N. caninum in the studied suggested both vertical and horizontal transmission are occurring in cattle.(AU)

A neosporose é uma doença parasitária de distribuição mundial, cujo agente etiológico é o protozoário intracelular obrigatório Neospora caninum, o qual pode causar abortamentos e infertilidade em fêmeas, promovendo elevados prejuízos econômicos. O objetivo deste estudo foi determinar a soroprevalência de anticorpos contra N. caninum em bovinos de leite e a ocorrência de anticorpos em cães destas propriedades do município de Cunha, São Paulo, Brasil. Como segunda etapa, 18 meses após o primeiro estudo, foi conduzido outro estudo em vacas para determinar da incidência, soroconversão e ocorrência de anti-N. caninum. As colheitas foram realizadas em duas fases. Na primeira, participaram do estudo 400 bovinos de leite e 50 cães pertencentes a 40 propriedades rurais. Na segunda fase, foram efetuadas novas colheitas em 119 vacas de 16 propriedades já anteriormente visitadas na fase 1. Amostras de soro foram analisadas por imunofluorescência indireta (IFI) com títulos ≥100 para bovinos e ≥50 para cães foram considerados positivos. A ocorrência de anticorpos contra N. caninum foi de 15,0% (60/400) e 14,0% (7/50) para bovinos e cães respectivamente. Após 18 meses a incidência de anticorpos observada foi de 7,4% (4/54), a conversão detectada foi de 71,4% (animais soropositivos para soronegativos) e 7,4% (animais soronegativos para soropositivos) e a ocorrência observada foi de 7,56% (9/119). O “odds ratio” (OR) calculado revelou significância estatística (p < 0,05) para os seguintes fatores; abortamentos, propriedades com cães, e piquetes de parição. No entanto, fatores associados a proteção da positividade foram identificados entre; vacas entre 2 a 4 anos de idade, e o número de vacas em lactação ≤10 animais. Neste trabalho foi revelada a presença do N. caninum circulando na região estudada, sugerindo o papel de fêmeas bovinas e cães como transmissores do agente etiológico...(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%). For BVDV-1 Singer, it was also possible to detect Abs production in G1 (log2=5.8, 100% seroconversion rate) and G3 (log2=3.5, seroconversion rate = 60%), only after the booster dose (D42). Neutralizing Abs to BVDV-2 (SV253) were detected only in G3, observing 90% seroconversion associated with high titers of Abs (log2=6.7) after the 2nd dose of vaccine (D42). Heifers from G1 and G3 responded to BoHV-1 after the first dose (D21): G1 (log2=2.5, seroconversion rate = 67%) and G3 (log2=0.7, seroconversion rate = 80%). In D42, a higher magnitude response was observed in the heifers from G3 (log2=6.1, 100%) compared with G1 (log2=4.3, 100%) and G2 (log2=2.7, 60%). Based on the data obtained, it can be concluded that the commercial vaccine contained aluminum hydroxide (G1) was most effective in the induction of antibodies against BVDV-1. On the other hand, this vaccine did not induce the production of neutralizing Abs against BVDV-2. Only the heifers from G3 (Quil A, amphigen and cholesterol) generated neutralizing Abs against BVDV-2. The animals that received commercial vaccine containing oil emulsion as adjuvant (G2) had a weak/undetectable response against BVDV-1 and BVDV-2. The best protective response against BoHV-1 was observed in heifers vaccinated with the live modified thermosensitive virus.(AU)

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%). Para o BVDV-1 Singer, somente após D42 foi observada a produção de Acs no G1 (log2=5,8; taxa de soroconversão de 100%) e G3 (log2=3,5; taxa de soroconversão = 60%). Os anticorpos contra BVDV-2 (SV253) foram detectados apenas nas novilhas do G3, observando-se taxa de soroconversão de 90% com altos títulos de anticorpos neutralizantes (log2=6,7) em D42. Novilhas G1 e G3 responderam ao BoHV-1 após a primeira dose (D21): G1 (log2=2,5; taxa de seroconversão = 67%) e G3 (log2=0,7; taxa de seroconversão = 80%). Em contrapartida, foi observada uma maior magnitude de resposta para as novilhas G3 (log2=6,1; 100%) em D42, em relação aos animais G1 (log2=4,3; 100%) e G2 (log2=2,7; 60%). Com base nos dados obtidos, foi possível concluir que a vacina composta por hidróxido de alumínio (G1) foi mais eficaz na produção de anticorpos contra o BVDV-1, em contrapartida esse produto não induziu anticorpos contra o BVDV-2. Apenas as novilhas do G3 (Quil A, amphigen e colesterol) geraram Acs neutralizantes contra o BVDV-2. Os animais que receberam a vacina em emulsão oleosa (G2) como adjuvante apresentaram uma resposta fraca/indetectável contra o BVDV-1 e BVDV-2. A melhor resposta protetiva contra o BoHV-1 foi observada nas novilhas vacinadas com a vacina viva modificada termosensível.(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%)...

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%)...(AU)

Severe outbreak of avian encephalomyelitis in laying hens in Northeastern Brazil

This paper describes the epidemiological, clinical and pathological aspects of an avian encephalomyelitis (AE) outbreak in commercial laying hens in Northeastern Brazil. The disease affected 23,409 layers (from day one until 100 weeks) leading to mortality of 16.5% (5,049/30,600) of the flock. Twenty laying hens were clinically examined, and blood samples were collected and tested by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Five laying hens with neurological signs were necropsied and samples of the brain, cerebellum, spinal cord, sciatic nerve, heart, ceca tonsils, proventriculus and liver were collected, fixed in formalin buffered solution and processed according to routine methods for histological examination. Clinical signs were observed in approximately 60% of the chicken flock and included depression, ataxia, head and neck tremors, head tilt, motor incoordination and corneal opacity and of lens. All laying hens presented seroconversion for AE, with a geometric mean titer (GMT) of 6,854 and CV of 9.6%. At necropsy, there were bilateral opacity of the cornea and lens and the blood vessels of the cerebral cortex were hyperemic. The main microscopic lesions in the central nervous system consisted of red and shrunken neurons in the cerebral cortex, cerebellum and spinal cord. Significant areas of gliosis were observed in the cerebral cortex and in the molecular layer of the cerebellum. Hyperplasia of the proventricular lymphoid tissue and the ceca tonsils were observed with different degrees of intensity. In Northeastern Brazil, there havent been previous reports of AE in commercial laying hens and this outbreak possibly occurred by inefficient immunization of laying breeders at the genetic supply company.(AU)

Severe outbreak of avian encephalomyelitis in laying hens in Northeastern Brazil

This paper describes the epidemiological, clinical and pathological aspects of an avian encephalomyelitis (AE) outbreak in commercial laying hens in Northeastern Brazil. The disease affected 23,409 layers (from day one until 100 weeks) leading to mortality of 16.5% (5,049/30,600) of the flock. Twenty laying hens were clinically examined, and blood samples were collected and tested by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Five laying hens with neurological signs were necropsied and samples of the brain, cerebellum, spinal cord, sciatic nerve, heart, ceca tonsils, proventriculus and liver were collected, fixed in formalin buffered solution and processed according to routine methods for histological examination. Clinical signs were observed in approximately 60% of the chicken flock and included depression, ataxia, head and neck tremors, head tilt, motor incoordination and corneal opacity and of lens. All laying hens presented seroconversion for AE, with a geometric mean titer (GMT) of 6,854 and CV of 9.6%. At necropsy, there were bilateral opacity of the cornea and lens and the blood vessels of the cerebral cortex were hyperemic. The main microscopic lesions in the central nervous system consisted of red and shrunken neurons in the cerebral cortex, cerebellum and spinal cord. Significant areas of gliosis were observed in the cerebral cortex and in the molecular layer of the cerebellum. Hyperplasia of the proventricular lymphoid tissue and the ceca tonsils were observed with different degrees of intensity. In Northeastern Brazil, there haven’t been previous reports of AE in commercial laying hens and this outbreak possibly occurred by inefficient immunization of laying breeders at the genetic supply company.

Diagnosis of canine leptospirosis: evaluation of two PCR assays in comparison with the microagglutination test / Diagnóstico de leptospirose canina: avaliação de dois ensaios de PCR em comparação com o teste de microaglutinação

Canine leptospirosis is definitely diagnosed by demonstrating seroconversion in paired serum samples from the acute and convalescent period by the microagglutination test (MAT). However, the application of a polymerase chain reaction (PCR) assay can provide earlier confirmation of suspected cases. The objective of this study was to evaluate two PCR assays used in diagnosis of human leptospirosis (lipL32 real-time PCR and rrs conventional PCR) in cultured microorganisms and experimentally contaminated samples (whole blood, serum, urine), and investigate their applicability in clinical samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis by using the MAT as a reference. The analytical sensitivity of the lipL32 real-time PCR was 1 genome equivalent per reaction, whereas that for the rrs conventional PCR was 10 genome equivalents per reaction. Both assays amplified the pathogenic strains but were negative when evaluating the DNA of other microorganisms that may be present in clinical samples. The lipL32 real-time PCR detected 100 bacteria/mL in whole blood samples, 1000 bacteria/mL in serum samples and 10 bacteria/mL in urine samples, whereas the rrs conventional PCR detected 1000 bacteria/mL in whole blood and serum samples and 100 bacteria/mL in urine samples. Seven out of the 51 samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis were considered as confirmed cases. ThelipL32 real-time PCR detected positive results in six of the seven confirmed cases, whereas the rrs conventional PCR detected four. The PCR assays evaluated proved to be useful diagnostic tools in the confirmation of canine leptospirosis when used together with the MAT.(AU)

O diagnóstico definitivo da leptospirose canina é geralmente realizado demonstrando a seroconversão em amostras do paciente no período agudo e de convalescença por serologia. No entanto, a aplicação de técnicas de PCR pode contribuir para a confirmação de casos suspeitos num período de tempo mais curto. O objetivo deste estudo foi avaliar dois ensaios de PCR publicados em humanos (PCR-lipL32 em tempo real e PCR-rrs convencional) em culturas puras e em amostras de sangue com anticoagulante, soro e urina experimentalmente contaminados. Posteriormente, investigamos a utilidade de ambos os ensaios de PCR em amostras clínicas de cães com suspeita de leptospirose tomando a técnica de microaglutinação (MAT) como referência. A sensibilidade analítica foi de 1 e 10 genoma equivalente por reação para PCR-lipL32 em tempo real e para PCR-rrs convencional, respectivamente. Ambos os ensaios amplificaram corretamente as 14 estirpes patogênicas, mas foram negativos para avaliar o ADN de outros microrganismos que poderiam estar presentes em amostras clinicas. Em nas amostras experimentalmente contaminadas PCR-LipL32 em tempo real detectou 100 bactérias/mL em sangue total, 1000 bactérias/mL em soro e 10 bactérias/mL em urina. Enquanto o PCR-rrs convencional detectou 1000 bactérias/mL em sangue total e soro e 100 bactérias/mL na urina. Dos 51 cães suspeitos, sete foram considerados casos confirmados pela MAT. O PCR-lipL 32 em tempo real detectou seis dos sete casos confirmados, enquanto o PCR-rrs convencional foi positivo em quatro deles. As técnicas de PCR avaliadas provaram ser uma ferramenta de diagnóstico útil na confirmação de casos clínicos caninos quando utilizados em conjunto com a técnica MAT.(AU)

Diagnosis of canine leptospirosis: evaluation of two PCR assays in comparison with the microagglutination test / Diagnóstico de leptospirose canina: avaliação de dois ensaios de PCR em comparação com o teste de microaglutinação

Canine leptospirosis is definitely diagnosed by demonstrating seroconversion in paired serum samples from the acute and convalescent period by the microagglutination test (MAT). However, the application of a polymerase chain reaction (PCR) assay can provide earlier confirmation of suspected cases. The objective of this study was to evaluate two PCR assays used in diagnosis of human leptospirosis (lipL32 real-time PCR and rrs conventional PCR) in cultured microorganisms and experimentally contaminated samples (whole blood, serum, urine), and investigate their applicability in clinical samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis by using the MAT as a reference. The analytical sensitivity of the lipL32 real-time PCR was 1 genome equivalent per reaction, whereas that for the rrs conventional PCR was 10 genome equivalents per reaction. Both assays amplified the pathogenic strains but were negative when evaluating the DNA of other microorganisms that may be present in clinical samples. The lipL32 real-time PCR detected 100 bacteria/mL in whole blood samples, 1000 bacteria/mL in serum samples and 10 bacteria/mL in urine samples, whereas the rrs conventional PCR detected 1000 bacteria/mL in whole blood and serum samples and 100 bacteria/mL in urine samples. Seven out of the 51 samples from dogs with presumptive diagnosis of leptospirosis were considered as confirmed cases. ThelipL32 real-time PCR detected positive results in six of the seven confirmed cases, whereas the rrs conventional PCR detected four. The PCR assays evaluated proved to be useful diagnostic tools in the confirmation of canine leptospirosis when used together with the MAT.(AU)

O diagnóstico definitivo da leptospirose canina é geralmente realizado demonstrando a seroconversão em amostras do paciente no período agudo e de convalescença por serologia. No entanto, a aplicação de técnicas de PCR pode contribuir para a confirmação de casos suspeitos num período de tempo mais curto. O objetivo deste estudo foi avaliar dois ensaios de PCR publicados em humanos (PCR-lipL32 em tempo real e PCR-rrs convencional) em culturas puras e em amostras de sangue com anticoagulante, soro e urina experimentalmente contaminados. Posteriormente, investigamos a utilidade de ambos os ensaios de PCR em amostras clínicas de cães com suspeita de leptospirose tomando a técnica de microaglutinação (MAT) como referência. A sensibilidade analítica foi de 1 e 10 genoma equivalente por reação para PCR-lipL32 em tempo real e para PCR-rrs convencional, respectivamente. Ambos os ensaios amplificaram corretamente as 14 estirpes patogênicas, mas foram negativos para avaliar o ADN de outros microrganismos que poderiam estar presentes em amostras clinicas. Em nas amostras experimentalmente contaminadas PCR-LipL32 em tempo real detectou 100 bactérias/mL em sangue total, 1000 bactérias/mL em soro e 10 bactérias/mL em urina. Enquanto o PCR-rrs convencional detectou 1000 bactérias/mL em sangue total e soro e 100 bactérias/mL na urina. Dos 51 cães suspeitos, sete foram considerados casos confirmados pela MAT. O PCR-lipL 32 em tempo real detectou seis dos sete casos confirmados, enquanto o PCR-rrs convencional foi positivo em quatro deles. As técnicas de PCR avaliadas provaram ser uma ferramenta de diagnóstico útil na confirmação de casos clínicos caninos quando utilizados em conjunto com a técnica MAT.(AU)

Toxoplasma gondii: infection among shelter and stray cats in Rio de Janeiro, Brazil / Toxoplasma gondii: infecção entre os gatos de abrigo e de rua no Rio de Janeiro, Brasil

The aim of this study was to identify possible infection of Toxoplasma gondii among cats in a shelter and a set of condominiums in the city of Rio de Janeiro, through changes to the cats serological status between two different times in 2014 and 2015. One group was made up of captive cats at the municipal shelter and the other comprised stray cats that circulated in condominiums in the city. On the first occasion, cats were caught and tagged through application of microchips; in this manner, blood samples were obtained from 261 captive cats and 172 stray cats. On the second occasion, blood samples were obtained from 94 captive cats and 56 recaptured stray cats. The serological diagnosis was made by means of the indirect hemagglutination assay (IHA) and indirect immunofluorescence reaction (IFAT) (cutoff ≥ 64). The frequency of T. gondii infection among the captive cats was 24.5% and among the stray cats, 18%. With the second analysis, it was possible to verify modifications to the serological status of anti-T. gondii antibodies, in 18% of both populations of animals. The presence of seroconversion shows that infection was possibly occurring in the region at the time of the study.(AU)

O objetivo deste estudo foi identificar uma possível infecção por Toxoplasma gondii entre gatos de abrigo e de um conjunto de condomínios na cidade do Rio de Janeiro, por meio de mudanças no status sorológico dos gatos em dois momentos diferentes em 2014 e 2015. O grupo foi formado por gatos, denominados cativos, de um abrigo municipal, e o outro por gatos de rua que circulavam em condomínios da cidade. Na primeira ocasião, os gatos foram capturados, microchipados e coletadas amostras de sangue de 261 gatos cativos e de 172 gatos de rua. Na segunda ocasião, as amostras de sangue foram obtidas de 94 gatos cativos e 56 de gatos de rua recapturados. O diagnóstico sorológico foi realizado por meio do ensaio de hemaglutinação indireta (HAI) e pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) (ponto de corte ≥ 64). A frequência de infecção por T. gondii entre os gatos cativos foi de 24,5% e entre os gatos de rua 18%. Com a segunda análise, foi possível verificar modificações no status sorológico de anticorpos anti-T. gondii, em 18% em ambas populações de animais. A presença de soroconversão mostra que a infecção possivelmente ocorreu na região no momento do estudo.(AU)

Low level of the immune response against rabies virus in dogs and cats, a cross-sectional study in sheltered animals, Santander, Colombia / Baixo nível de resposta imune contra o vírus da raiva em cães e gatos, um estudo transversal em animais abrigados, Santander, Colombia

Rabies is an incurable and fatal progressive viral encephalomyelitis that causes approximately 61,000 deaths a year globally mainly by dog bites, which show the importance of anti-rabies vaccination in dogs to achieve elimination of the disease. In Colombia, multiple cases of human rabies transmitted by dogs and cats have been reported since 1999, showing an increased significance of cats in the transmission of rabies, mainly in rabies of wild origin. Therefore, the aim of the present study was to evaluate the development of neutralizing antibodies in dogs and cats during the mass vaccination campaign of the second half of 2015 in the city of Bucaramanga. For this purpose, a descriptive cross-sectional study with convenience sampling was conducted in 382 dogs and cats (295 dogs, 87 cats), and an evaluation of the humoral immune response of the animals was performed by quantitative ELISA. The prevalence of optimal neutralizing antibodies (>0.5 IU/ml) was only 32.76% (95% CI=28.05-37.46%) in the entire population studied and most of the animals did not have an adequate response to the vaccination, or seroconversion was not detected on them (65.45-95% confidence interval, CI=60.68-70.21%). Significant difference was found between the neutralizing antibody titers in cats and dogs, with a higher neutralizing response in cats. In conclusion, although mass vaccination campaigns for dogs and cats are the most important measure to interrupt virus circulation among the animals, achievement of a good neutralizing immune response in the animals is useful to demonstrate that vaccination has been successful, allowing the maintenance of the required minimum levels of population immunity. These results will allow the implementation of corrective measures in Bucaramanga to achieve better seroconversion rates. Other cities are expected to implement similar seroconversion assessments to verify the quality of effective anti-rabies vaccination in animal populations.(AU)

A raiva é uma encefalomielite viral progressiva incurável e fatal que causa aproximadamente 61.000 mortes por ano no mundo, principalmente por mordidas de cães, que mostram a importância da vacinação anti-rábica em cães para conseguir a eliminação da doença. Na Colômbia, vários casos de raiva humana transmitida por cães e gatos foram relatados desde 1999, mostrando um aumento na importância de gatos na transmissão da raiva, principalmente em raiva de origem selvagem. Portanto, o objetivo do presente estudo foi avaliar o desenvolvimento de anticorpos neutralizantes em cães e gatos durante a campanha de vacinação em massa do segundo semestre de 2015 na cidade de Bucaramanga. Para este propósito, um estudo descritivo transversal com amostragem de conveniência foi realizado em 382 cães e gatos (295 cães, 87 gatos), e uma avaliação da resposta imune humoral dos animais foi realizada por ELISA quantitativo. A prevalência de anticorpos neutralizantes ótimos (>0,5 UI/ml) foi de apenas 32,76% (IC 95% = 28,05-37,46%) em toda a população estudada e a maioria dos animais não teve resposta adequada à vacinação, ou a soroconversão foi não detectado neles (65,45-95% intervalo de confiança IC = 60,68-70,21%). Diferença significativa foi encontrada entre os títulos de anticorpos neutralizantes em gatos e cães, com uma maior resposta neutralizante em gatos. Em conclusão, embora as campanhas de vacinação em massa para cães e gatos sejam a medida mais importante para interromper a circulação do vírus entre os animais, a obtenção de uma boa resposta imunológica neutralizante nos animais é útil para demonstrar que a vacinação foi bem sucedida, permitindo a manutenção necessária dos níveis mínimos de imunidade da população. Esses resultados permitirão que a implementação de medidas corretivas em Bucaramanga alcance melhores taxas de soroconversão. Outras cidades devem implementar avaliações similares de soroconversão para verificar a qualidade da vacinação anti-rábica efetiva em populações animais.(AU)